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USO DE MICROORGANISMOS BENEFICIOSOS USO DE MICROORGANISMOS BENEFICIOSOS PAR A EL MANEJO INTEGRAL DEL CULTIVO DE ARROZ Y JUDPAR A EL MANEJO INTEGRAL DEL CULTIVO DE ARROZ Y JUDÍÍA: A:

APLICACIAPLICACIÓÓN DE INOCULANTES MIXTOSN DE INOCULANTES MIXTOS

Programa Nacional de Recursos y Tecnologías Agroalimentarias

Reducción de la erosión y la degradación de los suelos mediante sistemas de laboreo de conservación, aplicación de enmiendas y

uso racional de fertilizantes. Biofertilización y biocontrol, así como el uso de fijadores del nitrógeno, movilizadores de nutrientes y

reguladores del crecimiento vegetal.

Coordinador: M. MEGIAS GUIJOSubproyectos: Facultad de Biología, US: FJ Ollero

Facultad de Químicas, US: A. GilFacultad de Farmacia, U San Pablo-CEU: FJ Gtrrez.-MañeroIFAPA, Centro Las Torres-Tomejil: Dulce Rodríguez y C Barrau y FAS

OBJETIVOS:

1. Determinación de los consorcios de bacterias como inoculantes. Estudio de su compatibilidad y relaciones con las plantas.

2. Estudiar los mecanismos por los que las bacterias PGPRsseleccionadas para constituir los consorcios solubilizan fosfatos, estudiando su implicación en el incremento de la FBN en arroz y judía.

3. Estudiar la protección de las plantas frente a estrés biótico (patógenos) o abiótico (salinidad) mediante el empleo de consorcios.

4. Elaboración de inoculantes. Estudio de la respuesta agronómica de cultivos de arroz y judía a la inoculación de los consorcios específicos.

Subproyecto 05: Objetivo 3, Phaseolus vulgaris

Objetivo 4, Oriza sativa y Phaseolus vulgaris

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ISP42 +Pi

ISP42+

AMG443

ISP42+ Ps

Ensayo con PSBs + R. etli en arena de cuarzo + 25 ppm Ca3(PO4)2

PSPA (g) =1.44

NNOD =105

PSNOD (mg)=50

PSPA (g) =1.55

NNOD = 97

PSNOD (mg)=60

PSPA (g) =1.50

NNOD = 206

PSNOD (mg)=114

•Controles: R. etli con P soluble en riegoR. etli con P insoluble en el sustrato

•Combinaciones binarias: Rhizobium + PSB (5) •Consorcios (4/5) bacterias: 2Duración: 2 meses, n =4

Los tratamientos bacterianos, dobles o consorcios < Control con Los tratamientos bacterianos, dobles o consorcios < Control con P solubleP soluble

En SUELO de Las Torres (12 ppm P)n = 6. Se obtuvieron los mismos resultados que en ArenaEl PST en algunas combinaciones duales = [Control + P soluble]Los parámetros de nodulación < [Control + P soluble]. Consorcios

25 abc991.60 aAMG272

15 c811.40 abBB1

19 abc1091.41 abL81

(0.15)n.s. (0.10)(0.10)(p)

35 abc1101.20 bAur 9

39 ab911.50 abConsortiumConsortium

18 bc951.34 abISP42+sal

43 a126 1.69 aISP42

PSNOD (mg)

NNODPST(g)

Inocula

Sustrato: suelo/arena. (1:1, v/v)Control Positivo: R. etli (ISP42) riego sin salTratamientos: Riegos con 25 mM ClNa.Duración: 2 meses. N= 4

CONSORCIO SAL

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3. Estudiar la protección de plantas de judía frente a estrés biótico (patógenos): Pythium spp.

• Inóculos procedentes del IFAPA, Almería.• Diferentes estrategias: No infestan suelo sin planta.• Plantas co-inoculadas –hongo + bacterias-, no síntomas.

• Pythium actúa en los primeros momentos de desarrollo de la planta,las bacterias del consorcio podrían actuar como PGPRs o ISR?.

• Consorcio bacteriano: in vitro inhibición errática de Pythium

Inoculantes sólidos/ judía:6 bacterias / 3 sustratos / 4 meses. RV: 107-108/ g, excepto Perlita

Inoculantes líquidos /Arroz:Selección previa del medio de cultivo. 8 bacterias / 3 aditivos / 60 días. En general, los aditivos NO mejoran la viabilidad de ningún cultivo

Objetiv o 4: ELABORACIÓN DE INOCULANTES

Turba, Corcho y Perlita

PVP, PEG y Alginato-Na

COLABORACIONES:

• 29 AÑOS, Dr. Ruíz-Sainz/Francisco Temprano• Universidad de Sevilla: Microbiología de Farmacia

Química Orgánica• Universidad San Pablo-CEU• Universidad de Salamanca (Dra. Encarnación Velázquez +…), IOP• SIA, Badajoz: Grupo de Pastos y Forrajes• CSIC (EEZ): Proyecto de Excelencia

Proyecto CYTED, asesores • Empresas y/o particulares: Inoculantes-Rhizobium

A futuro: JL Ramos, CSIC (EEZ), Pseudomonas-BiorremediaciónIOPs

Resultados EsperablesResultados Esperables:• Ev aluación biológica de consorcios bacterianos, 2 situaciones

limitantes: déficit de nutrientes y salinidad moderada• Formulaciones de inoculantes sólidas y líquidas (Rhizobium y

PGPRs)

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Aur6* (CECT 5398): Pseudomonas fluorescens

AMG 443: Enterobacter hormaechei

AMG 272: Aeromonas punctata

L81* : Bacillus sp.

BB1*: Bacillus subtilis

Aur 9* (CECT 5399): Chryseobacterium balustinum

Cd: Azospirillum brasilense

B12* (CECT 5106): Bacillus licheniformis

ISP42: Rhizobium etli

Aur6

P. aphanidermatum

P. myriotylum

5

PSBs: Phosphate solubilizing bacteria

AMG 121: Klebsiella pneumoniae (synthesizes auxines)

AMG 429: Enterobacter (ACC desaminasa activity)

AMG 443: Pantoea agglomerans (ACC desaminasa activity)

AMG 521: Pantoea agglomerans (synthesizes auxines; ACC desaminasa activity)

Aur6* (CECT 5398): Pseudomonas fluorescens (synthesizes auxines; ACC

desaminasa activity)

Consortium a: Aur6+AMG443+B12* (CECT 5106. Bacillus licheniformis.Synthesizes auxines and gibberellines)

Consortium b: AMG121+AMG429+AMG443+AMG521

AMG: Bacterial collection from Arroz Marismas del Guadalquivir

Strains*: from University of San Pablo-CEU bacteria collection

All the treatments were co-inoculated with Rhizobium etli (ISP42)

Bacterial strains used for salt tolerance assays

BB1*: Bacillus subtilis (production of siderophores; synthesizes chitinase; Induced

Systemic Resistance)

L81*: Bacillus sp. (production of siderophores; Induced Systemic Resistance)

Aur 9* (CECT 5399): Chryseobacterium balustinum. (synthesizes auxines;

Induced Systemic Resistance)

AMG 272: Aeromonas punctata (ACC desaminasa activity; synthesizes auxines;

synthesizes chitinase)

Consortium: BB1+L81+Aur9+AMG 272

AMG: Bacterial collection from Arroz Marismas del Guadalquivir

Strains*: from University of San Pablo-CEU bacteria collection

All the treatments were co-inoculated with Rhizobium etli (ISP42)