validacion cualitativos
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validacion de metodo cualitativosTRANSCRIPT
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17/04/2015
1
VALIDACIN DE
MTODOS
CUALITATIVOS
EN EL LABORATORIO EXISTEN
MTODOS
CUANTITATIVOS
CUALITATIVOS
LOS MTODOS CUALITATIVOS
Mtodos de anlisis cuya
respuesta es la presencia o
ausencia de un analito.
FORMAS DE DETECCIN
SENSORIAL INSTRUMENTAL
COLOR
OLOR
ELISA
POTENCIOMETRA
MTODOS CUALITATIVOS
POSITIVO
O
REACTIVO
NEGATIVO
O
NO REACTIVO
RESULTADOS
PRESENTE
AUSENTE
Los mtodos
cualitativos
Mtodos Screening
USAN
Separan o discriminan muestras de un
grupo ms grande.
OBJETIVO
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POSITIVO NEGATIVO
ANLISIS
CUANTITATIVO
NO SE REALIZA
LA
CUANTIFICACIN
MUESTRAS PRUEBAS DE
SCREENING
RESULTADO
DEFINICIONES
FALSO
POSITIVO
FALSO
NEGATIVO
VERDADERO
POSITIVO
VERDADERO
NEGATIVO
RESULTADOS DE
MTODOS CUALITATIVOS
A
B
TASA DE FALSO NEGATIVO
ERROR BETA < 5%
TASA DE FALSO POSITIVO
ERROR ALFA
-
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MUESTRA CUALITATIVO CUANTITATIVO
1 POSITIVO NEGATIVO
2 POSITIVO POSITIVO
3 POSITIVO POSITIVO
4 POSITIVO POSITIVO
5 POSITIVO NEGATIVO
6 POSITIVO POSITIVO
7 POSITIVO POSITIVO
8 POSITIVO NEGATIVO
9 POSITIVO NEGATIVO
10 NEGATIVO NEGATIVO
11 NEGATIVO NEGATIVO
12 POSITIVO POSITIVO
13 POSITIVO POSITIVO
14 POSITIVO NEGATIVO
15 POSITIVO POSITIVO
16 POSITIVO POSITIVO
17 POSITIVO POSITIVO
18 POSITIVO NEGATIVO
19 POSITIVO POSITIVO
20 POSITIVO POSITIVO
OBTENER LA TASA DE
FALSOS POSITIVOS Tasa de Falsos Negativos
Probabilidad de que resultado verdadero positivo de un valor negativo por el test de screening
TASA DE FALSO NEGAITIVO (FN)
FN
FN + VP
=
MUESTRA CUALITATIVO CUANTITATIVO
1 NEGATIVO POSITIVO
2 NEGATIVO POSITIVO
3 NEGATIVO POSITIVO
4 NEGATIVO NEGATIVO
5 NEGATIVO POSITIVO
6 NEGATIVO NEGATIVO
7 POSITIVO POSITIVO
8 NEGATIVO NEGATIVO
9 NEGATIVO NEGATIVO
10 POSITIVO POSITIVO
FN 4
VN 2
TFP= 4/4+2=0,67
FABRICANTE: BIORAD
FECHA. CAD.: 22/03/2018
MESURANDO:
SANGRE OCULTA EN
HECES
MUESTRA CUALITATIVO CUANTITATIVO
1 NEGATIVO NEGATIVO
2 POSITIVO POSITIVO
3 NEGATIVO POSITIVO
4 NEGATIVO NEGATIVO
5 NEGATIVO NEGATIVO
6 NEGATIVO NEGATIVO
7 NEGATIVO NEGATIVO
8 NEGATIVO NEGATIVO
9 NEGATIVO NEGATIVO
10 POSITIVO POSITIVO
11 NEGATIVO NEGATIVO
12 NEGATIVO POSITIVO
13 POSITIVO POSITIVO
14 NEGATIVO NEGATIVO
15 NEGATIVO NEGATIVO
16 NEGATIVO NEGATIVO
17 NEGATIVO POSITIVO
18 NEGATIVO NEGATIVO
19 NEGATIVO POSITIVO
20 NEGATIVO NEGATIVO
OBTENER TASA DE FALSOS
NEGATIVOS
Sensibilidad
Capacidad o habilidad de un mtodo de detectar
muestras positivas
cuando realmente son positivas
SENSIBILIDAD
10 MUESTRAS POSITIVAS
10 MUESTRAS NEGATIVAS
SENSIBILIDAD
VP
VP + FN
=
SE OBTIENE:
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La sensibilidad es del 95 % y el error de tipo Beta 5 %
La sensibilidad se calcula como:
SENSIBILIDAD= 100 x TP / (FN + TP).
MUESTRA CUALITATIVO CUANTITATIVO
1 NEGATIVO NEGATIVO
2 NEGATIVO POSITIVO
3 NEGATIVO POSITIVO
4 NEGATIVO NEGATIVO
5 NEGATIVO NEGATIVO
6 NEGATIVO NEGATIVO
7 NEGATIVO NEGATIVO
8 NEGATIVO NEGATIVO
9 NEGATIVO NEGATIVO
10 NEGATIVO POSITIVO
11 POSITIVO POSITIVO
12 POSITIVO POSITIVO
13 POSITIVO POSITIVO
14 POSITIVO POSITIVO
15 POSITIVO POSITIVO
16 POSITIVO POSITIVO
17 POSITIVO POSITIVO
18 POSITIVO POSITIVO
19 POSITIVO POSITIVO
20 POSITIVO POSITIVO
SENSIBILIDAD= VP/VP+ FN
VP
FN SENSIBILIDAD=
ERROR BETA
Especificidad
Capacidad o habilidad de un mtodo de detectar
muestras negativas cuando
realmente son negativas
20 MUESTRAS
10 POSITIVAS
10 NEGATIVAS
ESPECIFICIDAD
SE OBTIENE:
ESPECIFICIDAD
VN
VN + FP
=
MUESTRA CUALITATIVO CUANTITATIVO
1 NEGATIVO NEGATIVO
2 NEGATIVO NEGATIVO
3 NEGATIVO NEGATIVO
4 NEGATIVO NEGATIVO
5 NEGATIVO NEGATIVO
6 NEGATIVO NEGATIVO
7 NEGATIVO NEGATIVO
8 NEGATIVO NEGATIVO
9 NEGATIVO NEGATIVO
10 NEGATIVO POSITIVO
11 POSITIVO POSITIVO
12 POSITIVO POSITIVO
13 POSITIVO POSITIVO
14 POSITIVO POSITIVO
15 POSITIVO POSITIVO
16 POSITIVO NEGATIVO
17 POSITIVO POSITIVO
18 POSITIVO NEGATIVO
19 POSITIVO POSITIVO
20 POSITIVO POSITIVO
VN
FP ESPECIFICIDAD=
ERROR ALFA
TABLA DE CONTINGENCIA
Permiten analizar 4 parmetros de desempeo
- Falsos Positivos
- Falsos Negativos
- Sensibilidad
- Especificidad
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Permiten calcular 4 parmetros de
desempeo
- Falsos Positivos
-Falsos Negativos
- Sensibilidad
- Especificidad
TABLA DE CONTINGENCIA
ANALITO
PRESENTE
ANALITO
AUSENTE
POSITIVO
NEGATIVO
PROPORCIN DE RESULTADOS CORRECTOS: VP+VN/ VP+VN+FP+FP
LMITE DE CORTE Y SU INCERTIDUMBRE
Nivel de concentracin en el cual el test de screening presenta una
probabilidad detectar el analito.
Zona de Incertidumbre
Corresponde a la regin en la cual se obtienen respuestas falsas (falso negativo o falso positivo)
Muestra de concentracin conocida y
elevada
+
diluyente
Realizar 10 diluciones
Analizar 10 veces cada dilucin
Examinar
resultados
positivos y
negativos
Dilucin Diluyente Muestra
Referencia Replicados
Resultados
POSITIVO/NEGATIVO
ZONA NO
FIABLE
ZONA
GRISCONC
. DILUCIN
1 1 0
2 0,9 0,1
3 0,8 0,2
4 0,7 0,3
5 0,6 0,4
6 0,5 0,5
7 0,4 0,6
8 0,3 0,7
9 0,2 0,8
10 0,1 0,9
Ejemplo . Deteccin de sangre oculta en heces
El punto de corte informado es de 10 mg/L. Utilizamos un material de referencia con una
concentracin de 30 mg/L.
Se preparan las siguientes diluciones, cada una de las cuales se analiza diez veces.
1, Verificar la informacin proporcionada por el fabricante.
MUESTRA VOL.
DILUYENTE
VOL.
MUESTRA
CONCENTRACIN
TERICA (mg/L)
RESULTADO
POSITIVO/NEGATIVO ZONA GRIS
1 0.9 0.1 0/10
2 0.8 0.2 0/10
3 0.7 0.3 2/8
4 0.6 0.4 10/0
5 0.5 0.5 10/0
6 0.4 0.6 10/0
7 0.3 0.7 10/0
8 0.2 0.8 10/0
9 0.1 0.9 10/0
10 0 1 10/0
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EJERCICIO Deteccin de drogas de abuso (benzodiacepinas) en una
muestra de orina
El punto de corte de un determinado mtodo para
benzodiacepinas en orina es de 0,20 mg/L y el intervalo no fiable
zona gris de 0,15 a 25 mg/L (valores informados por el
fabricante).
Para la verificacin del punto de corte y la estimacin del
intervalo no fiable se utiliza un material de referencia con una
concentracin de 0,40 mg/L y obtenemos, tras las diluciones
correspondientes, 10 muestras de concentracin decreciente.
Se analizan diez veces cada una de las muestras.
El punto de corte es de 0,20 mg/L y el intervalo no fiable zona
gris de 0,15 a 0,25 mg/L
MUESTR
A
VOL.
DILUYENTE
VOL.
MUESTRA
CONCNETRACI
N TERICA
(mg/L)
RESULATDO
POSITIVO/NEG
ATIVO
ZONA GRIS
1 1 0
2 0.9 0.1
3 0.8 0.2
4 0.7 0.3
5 0.6 0.4
6 0.5 0.5
7 0.4 0.6
8 0.3 0.7
9 0.2 0.8
10 0.1 0.9
0/10
0/10
0/10
1/9
8/2
10/0
10/0
10/0
10/0
10/0
INFORME DE VALIDACIN DE MTODOS
CUALITATIVOS
TASA DE FALSOS POSITIVOS
TASA DE FALSOS
POSITIVOS
0,87 CRITERIO DE
ACEPTACI
N > 0,95
SE ACEPTA
O SE RECHAZA
OBSERVACIONES:
TASA DE FALSOS NEGATIVO
TASA DE FALSOS
POSITIVOS
0,87 CRITERIO DE
ACEPTACI
N > 0,95
SE ACEPTA
O SE RECHAZA
OBSERVACIONES:
SENSIBILIDAD
TASA DE FALSOS
POSITIVOS
0,87 CRITERIO DE
ACEPTACI
N > 0,95
SE ACEPTA
O SE RECHAZA
OBSERVACIONES:
ESPECIFICIDAD
TASA DE FALSOS
POSITIVOS
0,87 CRITERIO DE
ACEPTACI
N > 0,95
SE ACEPTA
O SE RECHAZA
OBSERVACIONES:
LIMITE DE DETECCIN Y SU INCERTIDUMBRE
TASA DE FALSOS
POSITIVOS
0,87 CRITERIO DE
ACEPTACI
N > 0,95
SE ACEPTA
O SE RECHAZA
OBSERVACIONES:
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