variasi lama microwave assisted extraction kacang …
TRANSCRIPT
VARIASI LAMA MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION KACANG METE
(Anacardium occidentale L.) TERHADAP TOTAL FENOLIK, FLAVANOID,
TANIN DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
SKRIPSI
Diajukan sebagai persyaratan dalam mencapai
Gelar Sarjana S-1 Program Studi Teknologi Hasil Pertanian
Disusun Oleh:
MAULINA RAHMANA WASKITO
D.141.15.0013
PROGAM STUDI TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
UNIVERSITAS SEMARANG
2019
v
ABSTRAK
MAULINA RAHMANA WASKITO. D.141.15.0013. 2019. “Variasi Lama
Microwave Assisted Extraction Kacang Mete (Anacardium occidentale L.)
Terhadap Total Fenolik, Flavanoid, Tanin dan Aktivitas Antioksidan”. Skripsi
S-1 Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas
Semarang. ( Pembimbing: Ir. Bambang Kunarto, M.P dan Ir. Elly Yuniarti
Sani, M.Si). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh waktu ekstraksi Kacang Mete
(Anacardium occidentale L.) dengan menggunakan metode Microwave Assisted
Extraction terhadap total fenolik, flavonoid, tanin, dan aktivitas antioksidan kacang
mete (Anacardium occidentale L.). Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan
informasi ilmiah kepada masyarakat terutama pada industri pala mengenai
pemanfaatan ekstraksi kacang mete menggunakan microwave.
Rancangan percobaan yang dilakukan adalah menggunakan Rancangan Acak
Lengkap (RAL) satu faktor 6 perlakuan dan tiga kali ulangan, yaitu P0 tanpa
perlakuan, perlakuan (P1) perlakuan ekstraksi selama 2 menit, (P2) perlakuan
ekstraksi selama 4 menit, (P3) perlakuan ekstraksi selama 6 menit, (P4) perlakuan
ekstraksi selama 8 menit, (P5) perlakuan ekstraksi selama 10 menit dan P0 sebagai
kontrol. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan analisis sidik ragam, lalu
apabila terdapat perbedaan akibat perlakuan dilanjutkan dengan menggunakan uji
jarak berganda atau biasa disebut Duncan’s Multiple Range Test
(DMRT) taraf 5%.
Hasil penelitian menunjukkan ekstraksi Kacang Mete (Anacardium occidentale L.)
berpengaruh terhadap total fenolik, flavonoid, tanin dan aktiviitas antioksidan. Dapat
mengetahui perlakuan terbaik terhadap Rendemen, Total Fenolik, Tanin, dan
Flavonoid yaitu pada P4 perlakuan dengan ekstraksi 8 menit yang menghasilkan
rendemen 4,46 %, total fenolik 0,84490 mgGAE/g, Tanin 0,9332 mgKE/g dan
Flavonoid 0,0862 mgQE/g. Perlakuan terbaik untuk mendapatkan Aktivitas
Antioksidan adalah P4 perlakuan dengan ekstraksi 10 menit yang menghasilkan
aktivitas antioksidan 42,5720%.
Kata Kunci: kacang mete, total fenolik, flavonoid, tanin, dan aktivitas
antioksidan.
vi
ABSTRACT
MAULINA RAHMANA WASKITO. D.141.15.0013. 2019. “Variations of
Microwave Assisted Extraction Time of Cashew Nuts (Anacardium occidentale L.)
Against Total Phenolic, Flavanoid, Tannins and Antioxidant Activity”. Thesis S-
1 Agricultural Technology Technology, Faculty of Agricultural Technology,
University of Semarang. (Advisor: : Ir. Bambang Kunarto, M.P dan Ir. Elly
Yuniarti Sani, M.Si).
This study aims to determine the effect of extracting time of cashew nuts
(Anacardium occidentale L.) using Microwave Assisted Extraction method to total
phenol, flavonoid, tannins, and antioxidant activity of cashew nuts (Anacardium
occidentale L.). The results of this study is expected to provide scientific information
to the community, especially in the nutmeg industry regarding the utilization of mace
extraction of cashew nut using microwave.
The experimental design was performed using a Completely Randomized Design
(RAL) of one factor of 6 treatments and three replications, are P0 without treatment,
treatment (P1) treatment of extraction for 2 minutes, (P2) treatment of extraction for 4
min, (P3) treatment of extraction for 6 minutes, (P4) extraction treatment for 8 min,
(P5) treatment of extraction for 10 min and and P0 as control. The data obtained were
analyzed using variance analysis, then if there were differences due to the treatment
continued by using multiple distance test or so-called Duncan's Multiple Range Test
(DMRT) at level 5%.
The results showed the extract of cashew nuts (Anacardium occidentale L.) effect on
total phenolic, flavonoid, tannin, and antioxidant activity. Can find out the best
treatment of Yield, Total Phenolics, Tannins, and Flavonoids in P4 treatment with 8
minutes extraction which resulted in yield of 4,46%, total phenolics of 0,84490
mgGAE / g, Tannins 0,9332 mgKE / g and Flavonoid 0.0862 mgQE / g. The best
treatment to get Antioxidant Activity is P4 treatment with 8 minutes extraction which
produces antioxidant activity of 42,5720%.
Keyword: cashew nuts, total phenolics, flavonoids, tannins, and antioxidant
activity.
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT yang telah memberikan
rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“Variasi Lama Microwave Assisted Extraction Kacang Mete (Anacardium
occidentale L.) Terhadap Total Fenolik, Flavanoid, Tanin dan Aktivitas
Antioksidan (Pembimbing: Ir Bambang Kunarto M.P dan Ir. Elly Yuniarti Sani,
M.Si).” Penulisan skripsi ini merupakan salah satu syarat yang harus dipenuhi untuk
mencapai gelar Sarjana (S-1) pada Program Studi Teknologi Hasil Pertanian,
Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Semarang.
Dalam melaksanakan maupun menyusun skripsi ini tidak terlepas dari
bantuan berbagai pihak, untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ir. Bambang Kunanto, M.P Pembimbing Utama Skripsi dan Dosen Wali yang
memberi masukan sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
2. Ir. Elly Yuniarti Sani, M.Si, selaku Pembimbing II.
3. Ir. Iswoyo S.Pt., M.P, selaku Dosen Penguji Skripsi.
4. Dr. Ir. Haslina, M.Si, selaku Dekan Fakultas Teknologi Pertanian Universitas
Semarang.
5. Ir. Sri Haryati, M.Si, Ketua jurusan FTP Universitas Semarang.
6. Bapak dan Ibu Dosen serta seluruh staff Fakultas Teknologi Pertanian
Universitas Semarang atas segala bantuan selama masa perkulihan penulis.
viii
7. Bapak dan Ibu serta adik tercinta yang telah memberikan dukungan baik moril
maupun materil kepada penulis sehingga skripsi ini dapat terselesaikan.
8. Rizki Wahyu Nugroho yang sudah memberi semangat, serta do’a yang tiada
henti sampai skripsi ini dapat terselesaikan.Teman-teman Group Secang dan
Mete.
9. Teman-teman FTP dan teman seperjuangan ekstensi angkatan 2015.
10. Teman-teman penelitian kacang mete yang selalu membantu dan memberi
semangat.
11. Semua pihak yang telah membantu penulis dalam penyusunan skripsi sehingga
dapat terselesaikan secara tepat waktu.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna. Semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi penulis secara pribadi, para pembaca, dan
masyarakat sekitar. Penulis saran dan kritik yang dapat membangun.
Semarang, 2 Januari 2019
Maulina Rahmana Waskito
ix
DAFTAR ISI
Halaman HALAMAN JUDUL ..................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN I ................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN II .................................................................. iii
SURAT PERNYATAAN ............................................................................. iv
ABSTRAK ................................................................................................... v
ABSTRACT ................................................................................................. vi
KATA PENGANTAR ................................................................................. vii
DAFTAR ISI ................................................................................................ ix
DAFTAR TABEL ......................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xiii
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ....................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .................................................................... 4
C. Tujuan Penelitian .................................................................. 4
D. Manfaat Penelitian .................................................................. 4
E. Hipotesis ................................................................................. 5
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Kacang mete (Anacardium occidentale L) ............................... 6
B. Total Fenolik ............................................................................. 10
C. Flavonoid ................................................................................... 12
D. Tanin ......................................................................................... 13
E. Antioksidan .............................................................................. 14
F. Aktivitas Antioksidan ................................................................ 16
G. Ekstraksi .................................................................................... 18
H. Microwave Assited Extraction (MAE) ...................................... 19
x
BAB III. METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat ................................................................... 24
B. Bahan dan Peralatan ................................................................. 24
C. Rancangan Percobaan ............................................................... 24
D. Prosedur Penelitian.................................................................... 25
E. Tahap Pengujian ....................................................................... 28
1. Kadar Air .............................................................................. 28
2. Rendemen ............................................................................. 28
3. Total Fenolik ........................................................................ 28
4. Uji Kadar Flavonoid .............................................................. 30
5. Uji Kadar Tanin dengan Senyawa Katekin (C)..................... 31
6. Uji Akivitas Antioksidan dengan Metode DPPH.................. 32
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Rendemen .................................................................................. 35
B. Total Fenolik .............................................................................. 37
C. Flavonoid ..................................................................................... 40
D. Tanin............................................................................................ 43
E. Aktivitas Antioksidan .................................................................. 45
F. Korelasi Total Fenolik, Flavonoid, Tanin dan Aktivitas Antioksidan
Kacang Mete Segar ..................................................................... 47
BAB V. PENUTUP
A. Kesimpulan................................................................................. 51
B. Saran ............................................................................................ 52
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 53
LAMPIRAN ................................................................................................... 59
xi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Komposisi Asam Amino dari Kacang Mete ............................................. 9
2. Kandungan Gizi Kacang Mete Mentah ..................................................... 10
4. Rendemen Kacang Mete Segar (%) ......................................................... 35
3. Kandungan Total Fenolik Kacang Mete Segar (mgGAE/g) .................... 38
4. Kandungan Total Flavonoid Kacang Mete Segar (mgQE/g) .................... 40
5. Kandungan Tanin Kacang Mete Segar (mgKE/g) .................................... 43
6. Kandungan Aktivitas Antioksidan Kacang Mete Segar (%)..................... 45
7. Hasil Analisa Korelasi Person Antar Total Fenolik, Tanin, Aktivitas
Antioksidan Kacang Mete Segar .............................................................. 48
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Struktur Kimia Senyawa Fenol .............................................................. 10
2. Perbedaan Struktur Kimia Flavanoid ..................................................... 12
3. Struktur Kimia Senyawa Tanin .............................................................. 13
4. Diagram Alir Pembuatan Tepung Kacang Mete ..................................... 26
5. Diagram Alir Microwave Assisted Extraction (MAE) ........................... 27
6. Diagram Garis Rerata Rendemen Kacang Mete .................................... 36
7. Diagram Garis Rerata Kandungan Total Fenolik Kacang Mete ............ 39
8. Diagram Garis Rerata Kandungan Flavonoid Kacang Mete ................. 41
9. Diagram Garis Rerata Kandungan Total Tanin Kacang Mete ............... 44
10. Diagram Garis Rerata Aktivitas Antioksidan Kacang Mete .................. 46
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Hasil Analisa Statistik Rendemen ...........................................................
2. Hasil Analisa Statistik Uji Total Fenolik ................................................. 51
3. Hasil Analisa Statistik Uji Total Flavonoid ............................................. 53
4. Hasil Analisa Statistik Uji Total Tanin .................................................... 55
5. Hasil Analisa Statistik Uji Aktivitas Antioksidan .................................... 56
6. Pembuatan Etanol .................................................................................... 65
7. Pengukuran Suhu Pada Microwave ......................................................... 66
8. Dokumentasi Hasil Penelitian .................................................................. 67
9. Dokumentasi Analisa Uji Total Fenolik, Tanin, Aktivitas Antioksidan
Kacang Mete ............................................................................................. 69
1
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Indonesia memiliki areal perkebunan jambu mete (Anacardium
occidentale L.) yang cukup luas. Salah satunya di daerah Jatisrono, Wonogiri,
Jawa Tengah. Pemanfaatan buah semu jambu mete di Jatisrono, Wonogiri
masih dalam jumlah terbatas. Hanya sekitar 20% yang dimanfaatkan,
sedangkan sisanya hanya menjadi limbah. Buah ini memiliki kandungan
karbohidrat yang cukup tinggi sekitar 15,3 g/100 g buah. Kandungan vitamin
C juga sangat tinggi yaitu 197 mg/100 g buah (Sutanto, 2012). Jambu mete
merupakan salah satu tanaman yang banyak digunakan sebagai obat
tradisional. Semua bagian tanaman ini mempunyai manfaat dan khasiat yang
berbeda (Kusrini dan Ismardiyanto, 2003). Jambu mete terdiri atas dua bagian,
yaitu buah semu dan buah sejati. Buah yang selama ini dikenal sebagai buah
jambu mete sebenarnya adalah buah semu, terbentuk dari tangkai buah
(pedunculus) yang membengkak atau mengembung dan berdaging. Buah
sejati jambu mete adalah yang dikenal sebagai biji mete atau kacang mete.
Kacang mete (mente atau mede) adalah hidangan populer di saat
Lebaran. Camilan ini mengandung lemak, protein, karbohidrat, dan macam-
macam mineral. Meski berlemak tinggi, 82 % lemak tersebut tergolong lemak
tidak jahat atau lemak tidak jenuh. Seperti halnya kacang-kacangan pada
umumnya, kacang mete juga merupakan sumber protein yang baik. Kadar
2
protein pada 100 g kacang mete mentah, panggang, dan goreng, masing-
masing 18, 16, dan 20 g. Karena itu, penambahan kacang mete ke dalam
berbagai produk, seperti es krim, cokelat batangan, dan aneka kue, akan
berdampak sangat baik bagi peningkatan kadar protein produk tersebut
(Astawan, 2009).
Meskipun menjadi kacang yang paling banyak diproduksi di dunia,
sampai saat ini, penelitian yang sangat sedikit telah dilakukan pada kacang
mete. Sedangkan komposisi nutrisinya, lipida fenolik, FA, tocopherol,
squalenes, dan phytosterols, senyawa bioaktif seperti β-karoten, lutein,
zeaxanthin, α-tocopherol , γ-tocopherol, thiamin, asam stearat, asam oleat, dan
asam linoleat, telah diidentifikasi dan ditentukan pada kacang mete (Trox,
2010). Kacang mete juga kaya akan zat besi, fosfor, selenium, magnesium,
dan seng, selain itu mete merupakan sumber fitokimia, antioksidan, dan
protein (Reza, 2013). Menurut Yahaya dkk (2012), kacang mete banyak
mengandung vitamin penting, misalnya pyridoxine (vitamin B-6), vitamin E
dan squalene. Vitamin E dan squalene adaah antioksida potensial mendukung
efek pada kesehatan kardiovaskuler. Squalene juga merupakan prekusor
steroid penting yang berperan sebagai antikanker.
Kandungan fenol yang bertanggung jawab untuk aktivitas antioksidan.
fenol dan senyawa polifenol seperti flavonoid, yang banyak ditemukan dalam
produk makanan yang berasal dari sumber tanaman, dan mereka telah terbukti
memiliki aktivitas antioksidan yang signifikan (Sahgal et al., 2009).
3
Antioksidan adalah senyawa yang berfungsi untuk menetralisir
peningkatan radikal bebas, melindungi sel dari efek toksik yang dihasilkan
serta berkontribusi dalam pencegahan penyakit. Antioksidan yang dibutuhkan
oleh tubuh didapatkan dari makanan. Salah satu sumber antioksidan yang
berasal dari luar tubuh dapat diperoleh dari tanaman yang banyak
mengandung senyawa metabolit sekunder seperti asam fenolik, flavonoid,
tokoferol dan tannin. Senyawa tersebut dimanfaatkan untuk menjaga
kesehatan dan mengobati penyakit (Mahanom dkk, 1999).
Komponen bioaktif seperti fenolik, flavonoid dan tanninrusak pada
suhu diatas 50oC karena dapat mengalami perubahan stuktur serta
menghasilkan ekstrak yang rendah. Pemilihan metode ekstraksi sangat penting
dilakukan karena hasil ekstraksi akan mencerminkan tingkat keberhasilan
metode tersebut (Handayani dan Sriherfyna, 2016).
Waktu ekstraksi juga sangat berpengaruh terhadap senyawa yang
dihasilkan. Menurut Budiyanto dkk (2008) waktu ekstraksi yang tepat akan
menghasilkan senyawa yang optimal. Waktu ekstraksi yang terlalu lama akan
menyebabkan ekstrak terhidrolisis, sedangkan waktu ekstraksi yang terlalu
singkat menyebabkan tidak semua senyawa aktif terekstrak dari bahan.
Ada beberapa metode ekstrasi, salah satunya secara konvensional yaitu
teknik maserasi. Metode ekstraksi lain selain menggunakan metode maserasi
salah satunya adalah metode ekstraksi Microwave Assisted Extraction (MAE).
Metode ekstraksi MAE merupakan teknik ekstraksi yang memanfaatkan
radiasi gelombang mikro untuk memanaskan pelarut secara cepat dan efisien.
4
Perbedaan antara ekstraksi konvensional dengan ekstraksi menggunakan MAE
adalah lama waktu yang digunakan. Selain itu metode MAE juga dapat
membantu meningkatkan jumlah rendemen ekstrak kasar dalam waktu
ekstraksi dan jumlah pelarut yang lebih rendah dibandingkan dengan metode
ekstraksi konvensional (Langat, 2011). Beberapa faktor yang mempengaruhi
ekstraksi MAE yaitu volume pelarut, waktu radiasi, power microwave, ukuran
partikel dan suhu (Mandal dkk., 2007). Kacang mete mempunyai banyak
kandungan bioaktif dan belum ada yang meneliti tentang pengaruh ekstraksi
terhadap kandungan kacang mete. Oleh karena itu, dilakukan penelitian
ekstraksi kacang mete menggunakan MAE terhadap total fenolik, kandungan
flavonoid dan aktifitas antioksidan.
B. Rumusan Masalah
Berapa lama ekstraksi kacang mete dengan metode MAE yang dapat
memiliki kandungan total fenolik, flavonoid, tanin dan aktivitas antioksidan
yang optimal?
C. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh lama ekstraksi
dengan metode MAE terhadap total fenolik, flavonoid, tanin dan aktivitas
antioksidan pada kacang mete.
D. Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah dapat memberikan informasi kepada
masyarakat mengenai pengaruh metode MAE terhadap total fenolik,
5
flavonoid, tanin dan aktivitas antioksidan pada kacang mete sehingga dapat
dijadikan acuan untuk pengembangan penelitian selanjutnya.
E. Hipotesis
Hipotesa yang dapat dikemukakan dari penelitian ini adalah diduga ada
pengaruh metode MAE terhadap total fenolik, flavonoid, tanin dan aktivitas
antioksidan pada kacang mete.
6
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Deskripsi dan Kandungan Gizi Kacang Mete (Anacardium occidentale
Linn).
Jambu monyet atau sering dikenal dengan nama latin Anacardium
occidentale, yaitu sejenis tumbuhan dari suku anacardiaceae yang juga termasuk
mangga, pistachio, dan beberapa tanaman beracun. Annacardiaceae terdiri atas 73
genus dan 600 spesies. Jambu monyet memiliki buah sejati berukuran kecil dan
keras yang biasa disebut kacang mete (Duke, 2001).
Menurut Bambang Cahyono (2005), taksonomi tanaman jambu monyet
secara lengkap adalah sebagai berikut :
Divisi : Spermatophyta
Subdivisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Sapindales
Famili : Ancardiaceae
Genus : Anacardium
Spechies : Annacardium occidentale L
Buah mete terdiri atas dua bagian, yaitu buah semu dan buah sejati. Buah
yang selama ini dikenal sebagai buah jambu mete sebenarnya adalah buah semu,
terbentuk dari tangkai buah (pedunculus) yang membengkak atau mengembung
dan berdaging. Buah sejati jambu mete adalah yang dikenal sebagai biji mete.
Buah jambu mete termasuk kelompok buah batu, berbentuk seperti ginjal,
7
tertanam pada bagian ujung buah semu, dan berwarna hijau hingga cokelat keabu-
abuan. Buah jambu mete terdiri atas tiga lapisan, yaitu lapisan kulit keras, lapisan
kulit ari, dan lapisan kernel (Suprapti, 2004)
Kacang mete merupakan buah dari tanaman jambu monyet yang menjadi
produk yang paling penting dari pohon jambu monyet itu sendiri. Kacang mete
biasanya dikonsumsi utuh, dipanggang, dikupas, dan diberi garam (Alasavar dan
Shahidi, 2009). Kacang mete biasanya diolah dengan cara digoreng secara deep
frying. Selain itu, kacang mete juga dapat digunakan sebagai penyedap rasa pada
berbagai makanan seperti es krim, cokelat batangan, serta aneka kue (Astawan,
2009).
Sentra kacang mete dalam ukuran besar terdapat di 10 provinsi Indonesia
yakni, Jawa Tengah, Yogyakarta, Jawa Timur, Bali, Nusa Tenggara Barat, Nusa
Tenggara Timur, Sulawesi Tengah, Sulawesi Tenggara, dan Maluku dengan
sentra utama adalah provinsi Jawa Tengah. Provinsi Jawa Tengah memiliki luas
27.881 hektar tanaman kacang mete dan menghasilkan 8.706 ton kacang mete per
tahunnya. Biji mete kupas yang siap dikonsumsi dari Indonesia saat ini memiliki
harga tertinggi dari 25 negara penghasil mete lainnya (Rukmana, 2009).
Kacang mete tidak hanya enak dimakan sebagai camilan tetapi juga aman
dikonsumsi karena mengandung lemak tak jenuh tunggal. Konsumsi lemak tak
jenuh tunggal di dalam tubuh diolah menggantikan lemak jenuh yang membantu
menurunkan kadar kolesterol total dan kolesterol jahat. Kacang mete juga kaya
akan zat besi, fosfor, selenium, magnesium, dan seng, selain itu mete merupakan
sumber fitokimia, antioksidan, dan protein (Reza, 2013).
8
Meskipun menjadi kacang ketiga yang paling banyak diproduksi di dunia,
sampai saat ini, penelitian yang sangat sedikit telah dilakukan pada kacang mete.
Sedangkan komposisi nutrisinya, lipida fenolik, FA, tocopherol, squalenes, dan
phytosterols, senyawa bioaktif seperti β-karoten, lutein, zeaxanthin, α-tocopherol ,
γ-tocopherol, thiamin, asam stearat, asam oleat, dan asam linoleat, telah
diidentifikasi dan ditemukan pada kacang mete (Trox, 2010 dkk., 2010).
Kadar lemak total pada 100 gram kacang mete mentah adalah 47 gram.
Tingginya kadar lemak pada biji mete sangat berperan penting dalam peningkatan
kadar energi dan cita rasa. Lemak pada kacang mete 78-80% merupakan asam
lemak tak jenuh dilihat dari minyak kacang mete. Senyawa bioaktif seperti asam
lemak tak jenuh MUFA (Mono Unsaturated Fatty Acid) dan PUFA
(Polyunsaturated Fatty Acid), fenol, dan tokoferol yang terkandung di dalam
kacang mete cukup tinggi dan sangat bermanfaat bagi kesehatan manusia
(Alasavar dan Shahidi, 2009).
Menurut Yahaya dkk (2012), kacang mete mengandung sejumlah minyak
berkualitas baik (47,0%), protein (21 %), karbohidrat (22,0 %), vitamin dan
mineral. Selain itu, kacang mete juga banyak mengandung vitamin penting,
misalnya pyridoxine (vitamin B-6), vitamin E dan squalene. Vitamin E dan
squalene adaah antioksida potensial mendukung efek pada kesehatan
kardiovaskuler. Squalene juga merupakan prekusor steroid penting yang berperan
sebagai antikanker.
Kandungan energi per 100 gram kacang mete mentah adalah 566 kkal.
Kadar protein pada 100 gram kacang mete mentah sebesar 18 gram. Asam amino
9
yang potensial pada kacang mete adalah leusin, valin, arginin, asam aspartat, asam
glutamat, dan serin (Astawan, 2009). Asam glutamat dan asam aspartat sangat
berkontribusi penting akan timbulnya rasa gurih pada kacang mete (Astawan,
2009). Asam glutamat merupakan asam amino yang dapat memberikan rasa gurih.
Gugus hidrogennya dapat disubsitusi dengan sodium membentuk monosodium
glutamat yang banyak digunakan sebagai flavor enchancer (Kusnandar, 2010).
Kandungan asam amino dari kacang mete dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Komposisi Asam Amino dari Kacang Mete
Asam Amino Komposisi (%)
Asam Glutamat 28,0
Asam Aspartat 10,78
Isoleusia 3,86
Alanin 3,18
Fenilalanin 4,35
Tirosin 3,20
Arginin 10,30
Glisin 5,33
Histidin 1,81
Lisin 3,32
Valin 4,53
Prolin 3,72
Serin 5,76
Leusin 11,93
(Sumber : Nandi, 2011)
Asam lemak yang terdapat pada kacang mete antara lain myristic acid
sebanyak 0,1%, Palmitic acid sebanyak 13,77%, Palmitoleic acid sebanyak
0,68%, Stearic acid sebanyak 1,34%, Oleic acid sebanyak 47,79%, Linoleic acid
sebanyak 29,67%, Linolenic acid sebanyak 0,01%, Arachidic acid sebanyak
4,07%, Behenic acid sebanyak 2,08%, dan Lingnoceric acid sebanyak 0,31%
(Abitogu, 2009). Berikut kandungan gizi kacang mete mentah dapat dilihat pada
Tabel 2.
10
Tabel 2. Kandungan Gizi Kacang Mete Mentah
Zat Gizi Kandungan/100 g
Energi (kkal) 566
Protein (g) 18
Karbohidrat (g) 27
Lemak total (g) 47
Lemak Jenuh (g) 8
Lemak tidak jenuh tunggal (g) 25
Lemak tidak jenuh ganda (g) 8
Natrium (mg) 12
Kalium (mg) 650
(Sumber : Astawan, 2009)
Selain itu, kacang mete juga mengandung senyawa fenolik. Senyawa
fenolik merupakan sumber peting senyawa bioaktif dalam makanan. Fenolik
utama yang ditemukan pada kacang mete adalah asam anacardik, karnadol,
kardol, tocopherol dan senyawa fenol minor lainnya (Alasalvar dan Sahidi, 2009).
B. Total Fenolik
Fenol adalah senyawa yang mempunyai sebuah cincin aromatik dengan
satu atau lebih gugus hidroksil. Senyawa ini fenol kebanyakan memiliki gugus
hidroksi lebih dari satu sehingga disebut sebagai polifenol (Putra dkk, 2009).
Fenol (C6H6OH) merupakan senyawa organik yang mempunyai gugus hidroksil yang
terikat pada cincin benzena. Senyawa fenol memiliki beberapa nama lain seperti asam
karbolik, fenat monohidroksibenzena, asam fenat, asam fenilat, fenil hidroksida,
oksibenzena, benzenol, monofenol, fenil hidrat, fenilat alkohol, dan fenol alkohol
(Nair dkk, 2008). Fenol memiliki rumus struktur sebagai berikut (Poerwono, 2012).
Gambar 1. Struktur Kimia Senyawa Fenol
11
Senyawa fenol pada bahan makanan dapat dikelompokkan menjadi fenol
sederhana dan asam folat (P-kresol, 3-etil fenol, 3,4-dietil fenol, hidroksiquinon,
vanilin dan asam galat), turunan asam hidroksi sinamat (kumarat, kafeat, asam
fenolik dan asam kloregenat) dan flavonoid (katekin, proantosianin, antisianidin,
flavon, flavonol dan glikosidanya). Fenol juga dapat menghambat okidasi lipid
dengan menyumbangkan atom hidrogen kepada radikal bebas. Senyawa fenol
(AH) jika berdiri sendiri tidak aktif sebagai antioksidan, substitusi grup alkil pada
posisi 2, 4 dan 6 dapat meningkatkan densitas elektron gugus hidroksil, sehingga
meningkatkan keaktifannya terhadap radikal lipid.
Senyawa fenolik biasanya terdapat dalam berbagai jenis sayuran, buah-
buahan dan tanaman. Senyawa fenolik diproduksi oleh tanaman melalui jalur
sikimat dan metabolisme fenil propanoid (Apak dkk, 2007). Standar yang
digunakan pada analisis kandungan fenolik adalah asam galat, hal ini karena asam
galat bersifat stabil, memiliki sensitivitas yang tinggi, dan harganya cukup
terjangkau. Kandungan fenolik dari standar asam galat ditentukan dengan
menggunakan metode Folin-Ciocalteau (Chang, 2007). Penentuan kandungan
fenolik total dilakukan pada panjang gelombang 760 nm.
Senyawa fenolik tersubstitusi telah banyak digunakan sebagai antioksidan.
Kerja antioksidan dalam reaksi oksidasi adalah menghambat terbentuknya radikal
bebas pada tahap inisiasi atau menghambat kelanjutan reaksi berantai pada tahap
propagasidari reaksi autooksidasi. Antioksidan yang baik adalah senyawa yang
mampu membuat radikal fenolik dari antioksidan menjadi lebih stabil. Senyawa
turunan fenolik tersubtitusi ini banyak terdapat pada berbagai tumbuhan tropis
12
berupa senyawa turunan polifenol. Fenolik mempunyai efek kardiopektif, yakni
antioksidan yang sangat kuat. Senyawa fenolik mampu mencegah oksidasi LDL
20 kali lebih kuat dibandingkan dengan vitamin E.
Pada umumnya antioksidan melindungi sel dengan cara mengorbankan
dirinya untuk teroksidasi oleh radikal bebas. Fenolik merupakan senyawa yang
mudah teroksidasi, oleh karena itu sering digunakan sebagai antioksidan.
Penggunaannya sebagai antioksidan dapat melindungi sel agar tidak teroksidasi
oleh radikal bebas dengan cara mengikat radikal bebas tersebut secara tidak
langsung yang teroksidasi adalah fenolik tersebut.
C. Flavonoid
Flavonoid merupakan golongan fenolik terbesar yang senyawa yang terdiri
dari C6-C3-C6 dan sering ditemukan diberbagai macam tumbuhan dalam bentuk
glikosida atau gugusan gula bersenyawa pada satu atau lebih grup hidroksil
fenolik (Sirait, 2007; Bhat dkk., 2009). Perbedaan struktur kimia dapat dilihat
pada Gambar 2.
Gambar 2. Perbedaan Struktur Kimia Flavanoid
Penamaan flavonoid berasal dari bahasa latin yang mengacu pada warna
kuning dan sebagian besar flavonoid adalah berwarna kuning. Flavonoid sering
ditemukan dalam bentuk pigmen dan co-pigmen. Flavonoid adalah golongan
13
pigmen organik yang tidak mengandung molekul nitrogen. Kombinasi dari
berbagai macam pigmen ini membentuk pigmentasi pada daun, bunga, buah dan
biji tanaman. Pigmen ini merupakan antraktan bagi serangga dan merupakan agen
polinasi. Pigmen juga bermanfaat bagi manusia dan salah satu manfaat yang
penting adalah sebagai antioksidan (Bhat dkk., 2009). Bagi manusia, flavon dalam
dosis kecil bekerja sebagai stimulan pada jantung dan pembuluh darah kapiler,
sebagai diuretic dan antioksidan pada lemak (Sirait, 2007).
D. Tanin
Tanin mempunyai beberapa khasiat yaitu sebagai astrigen, antidiare,
antibakteri dan antioksidan. Tanin merupakan komponen zat organik yang sangat
kompleks terdiri dari senyawa fenolik yang sukar dipisahkan dan sukar
mengkristal, mengendapkan protein dari larutannya dan bersenyawa dengan
protein tersebut (Desmiaty, dkk. 2008). Tanin dibentuk dengan kondensasi
turunan flavan yang ditransportasikan ke jaringan kayu dari tanaman, tanin juga
dibentuk dengan polimerisasi unit kuinon (Anonymous, 2005). Struktur inti tanin
disajikan pada Gambar 3.
Gambar 3. Struktur Kimia Senyawa Tanin
Tanin merupakan senyawa kimia yang tergolong dalam senyawa polifenol
(Deaville, dkk. 2010). Tanin mempunyai kemampuan mengendapkan protein,
14
karena tanin mengandung sejumlah kelompok ikatan fungsional yang kuat dengan
molekul protein yang selanjutnya akan menghasilkan ikatan silang yang besar dan
komplek yaitu protein tanin.
Tanin mempunyai berat molekul 0,5-3 KD (Kilo Dalton). Tanin alami
larut dalam air dan memberikan warna pada air, warna larutan tanin bervariasi
dari warna terang sampai warna merah gelap atau coklat, karena setiap tanin
memiliki warna yang khas tergantung sumbernya (Ahadi, 2003).
Tanin merupakan senyawa aktif metabolit sekunder yang diketahui
mempunyai beberapa khasiat yaitu sebagai astringen, anti diare, anti bakteri dan
antioksidan. Tanin merupakan komponen zat organik yang sangat kompleks,
terdiri dari senyawa fenolik yang sukar dipisahkan dan sukar mengkristal,
mengendapkan protein dari larutannya dan bersenyawa dengan protein tersebut
(Desmiaty, dkk. 2008).
Tanin dibagi menjadi dua kelompok yaitu tannin terhidrolisis dan tanin
terkondensasi. Tanin memiliki peranan biologis yang kompleks mulai dari
pengendap protein sampai pengkilat logam. Tanin juga dapat berfungsi sebagai
antioksidan biologis.
E. Antioksidan
Antioksidan adalah substansi yang dalam konsentrasi rendah jika
dibandingkan dengan substrat yang akan teroksidasi dapat memperlambat atau
menghambat oksidasi substrat (Sen dkk, 2010), berperan penting dalam
melindungi sel dari kerusakan dengan kemampuan memblok proses kerusakan
oksidatif yang disebabkan oleh radikal bebas (Hartanto, 2012). Beberapa senyawa
15
metabolit sekunder pada tanaman memiliki aktivitas antioksidan yang berfungsi
menangkap radikal bebas sehingga mampu menghambat arteroskeloris, hipertensi,
proses oksidasi pada LDL, dan beberapa penyakit kanker tertentu (Akagawa,
2001).
Dalam kehidupan sehari-hari, manusia tidak dapat terbebas dari senyawa
radikal bebas, asap rokok, makanan yang digoreng, dibakar, paparan sinar
matahari yang berlebih, asap kendaraan bermotor, obat-obat tertentu, racun dan
polusi udara yang merupakan sumber pembentuk senyawa radikal bebas. Radikal
bebas merupakan atom tunggal atau berkelompok yang sedikitnya mempunyai
satu orbit terluar yang mempunyai satu elektron tunggal (tidak berpesangan) di
mana seharusnya mempunyai elektron berpasangan (Iorio, 2007).
Karakter utama senyawa antioksidan adalah kemampuannya untuk
menangkap radikal bebas (Prakash, 2001). Menurut Halliwell (2006), senyawa
radikal yang terdapat dalam tubuh berasal dari luar tubuh (eksogen) maupun dari
dalam tubuh (endogen) yang terbentuk dari hasil metabolisme zat gizi secara
normal. Dalam proses fisiologis timbulnya senyawa radikal bebas (pro-oksidan)
akan diimbangi oleh mekanisme pertahanan endogen dengan menggunakan zat
(senyawa) yang mempunyai kemampuan sebagai anti radikal bebas, yang juga
disebut antioksidan. Senyawa ROS (Reactive Oxygen Species) memberikan efek
merusak bila keseimbangan antara oksidan dan antioksidan terganggu.
Keseimbangan ini tergantung pada konsumsi pangan yang membawa asam-asam
amino esensial dalam jumlah yang diperlukan untuk mensintesis protein serta zat
gizi lain yang diperlukan. Walaupun secara teoritis senyawa radikal di dalam
16
tubuh dapat dihilangkan apabila terdapat antioksidan, tetapi efisiensi
penghilangan senyawa radikal ini tidak pernah mencapai 100%.
Menurut Halliwell (2006), reaksi-reaksi yang melibatkan senyawa radikal
merupakan asal dari berbagai macam penyakit, antara lain ginjal, diabetes, kanker,
dan penyakit kardiovaskular. Pada individu yang sehat, keberadaan prooksidan
dapat diimbangi dengan adanya antioksidan. Akan tetapi pada keadaan tertentu
keseimbangan tersebut dapat terganggu, karena jumlah pro-oksidan lebih banyak
dibandingkan dengan antioksidan. Oleh karena itu, penting sekali untuk
meningkatkan kadar antioksidan di dalam tubuh, dan hal ini dapat dilakukan
dengan meningkatkan konsumsi antioksidan alami. Antioksidan terdiri dari dua
macam, yaitu antioksidan sintetis dan antioksidan alami. Contoh antioksidan
sintetis adalah Butil Hidroksi Anisol (BHA), Butil Hidroksi Toluen (BHT), propil
galat, Tert-Butil Hidoksi Quinon (TBHQ), dan tokoferol. (Win dkk., 2011)
F. Aktivitas Antioksidan
Metode DPPH atau Diphenylpicrylhydrazyl digunakan secara luas untuk
menguji kemampuan senyawa yang berperan sebagai pendonor electron atau
hydrogen. Meteode DDPH dapat mengukur aktivitas total antioksidan baik dalam
pelarut polar maupun nonpolar. Beberapa metode lain terbatas mengukur
komponen yang larut dalam pelarut yang digunakan dalam analisa.
Metode DPPH dipilih karena sederhana, mudah, cepat dan peka serta
hanya memerlukan sedikit sampel. Senyawa antioksidan akan bereaksi dengan
radikal DPPH melalui mekanisme donasi atom hydrogen dan menyebabkan
terjadinya peluruhan warna DPPH dari ungu ke kuning yang diukur dengan
17
panjang gelombang 517 nm. Pengurangan intensitas warna yang terjadi
berhubungan dengan jumlah electron DPPH yang menangkap atom hydrogen.
Pengurangan intensitas warna mengidentifikasi peningkatan kemampuan
antioksidan untuk menangkap radikal bebas. Aktivitas antioksidan diperoleh
dengan menghitung jumlah pengurangan intensitas warna ungu DPPH yang
sebanding dengan pengurangan kosentrasi larutan DPPH melalui pengukuran
absorbansi larutan uji DPPH yang bereaksi dengan antioksidan akan
menghasilkan bentuk tereduksi 1,1-difenil-2-pikrilhidrazin dan radikal
antioksidan.
Aktivitas penangkapan radikal bebas dapat dinyatakan dengan satuan
persen (%) aktivitas antioksidan. Nilai ini diperoleh dengan persamaan berikut
(Molyneux, 2004):
% Inhibisi =
x 100%
Berdasarkan rumus tersebut semakin tinggi diskolorisasi (absorbansi
semakin kecil) maka semakin tinggi nilai aktivitas penangkapan radikal bebas.
Nilai 0% berarti sampel tidak mempunyai aktivitas antioksidan sedangkan nilai
100% berarti pengujian aktivitas antioksidan perlu dilanjutkan dengan
pengenceran sampel untuk mengetahui batas kosentrasi aktivitas antioksidan.
Suatu bahan dapat dikatakan aktif sebagai antioksidan bila presentase aktivitas
antioksidan lebih atau sama dengan 50% (Parwata, dkk. 2009).
Absorbansi kontrol yang digunakan dalam proses DPPH ini adalah
absorbansi DPPH sebelum ditambah sampel. Kontrol yang digunakan untuk
mengkonfirmasi kestabilan system pengukuran. Nilai absorbansi kontrol dapat
18
berkurang dari hari ke hari dikarenakan kehilangan aktivitasnya saat dalam stok
larutan DPPH, tetapi nilai absorbansi kontrol tetap dapat memberikan batasan
untuk pengukuran saat ini. kontrol juga berfungsi menjaga kekonstanan total
konsentrasi DPPH dalam serangkaian pengukuran (Molyneux, 2004).
G. Ekstraksi
Ekstraksi merupakan suatu proses penarikan komponen senyawa yang
diinginkan dari suatu bahan dengan cara pemisahan satu atau lebih komponen dari
suatu bahan yang merupakan sumber komponennya. Pada umumnya ekstraksi
akan semakin baik bila permukaan serbuk simplisia yang bersentuhan dengan
pelarut semakin luas. Dengan demikian, semakin halus serbuk simplisia maka
akan semakin baik ekstraksinya. Selain luas bidang, ekstraksi juga dipengaruhi
oleh sifat fisik dan kimia simplisia yang bersangkutan (Ahmad, 2006).
Mekanisme yang berlangsung selama proses ekstraksi padat-cair
dapatdiuraikan sebagai berikut:
1. Pelarut bercampur dengan padatan sehingga permukaan padatan dilapisi
oleh pelarut.
2. Terjadi difusi massa pelarut pada permukaan padatan ke dalam pori
padatan inert tersebut. Laju difusi ini tergolong lambat karena pelarut
harus menembus dinding sel padatan.
3. Solut yang terdapat dalam padatan larut dalam pelarut.
4. Campuran solut dalam pelarut berdifusi keluar dari permukaan padatan
dan bercampur dengan pelarut.
19
H. Microwave Assited Extraction (MAE)
Ekstraksi padat cair dapat dilakukan dengan berbagai metode, salah
satunya dengan Microwave Assisted Extraction (MAE). Ekstraksi dengan MAE
merupakan teknik ekstraksi yang relatif baru, di mana microwave bekerja dengan
memancarkan radiasi gelombang elektromagnetik non ionik yang berada di antara
frekuensi 300 MHz hingga 300 GHz. (Tatke dkk, 2011) Microwave memanaskan
molekul melalui dua fenomena yaitu konduksi ionik dan rotasi dipol. Ketika
microwave berinteraksi dengan pelarut polar, pemanasan substansi disebabkan
oleh salah satu dari dua fenomena di atas. Pergerakan ion yang elektroforetik di
bawah pengaruh perubahan medan listrik disebut konduksi ionik. Jika larutan
melakukan sebuah tahanan terhadap pergerakan ion dan friksi pun terjadi maka
larutan menjadi panas. Penyusunan kembali dipol dari molekul karena perubahan
medan listrik yang sangat cepat disebut rotasi dipole. (Tatke dkk, 2011)
Pada frekuensi 2.450 MHz proses pemanasan terjadi. Microwave merubah
komponen elektrik pada kecepatan 4,9 x 104 kali/detik.Terjadi pembentukan
panas akibat gaya friksi ketika molekulmolekul pelarut mencoba untuk menyusun
kembali diri mereka untuk menyesuaikan perubahan medan listrik, namun mereka
gagal menyusunnya kembali. Panas tidak terjadi ketika frekuensi lebih dari 2.450
MHz dan komponen elektrik berubah pada kecepatan yang lebih besar. Panas juga
tidak terjadi ketika frekuensi kurang dari 2.450 MHz dan perubahan komponen
elektrik yang terjadi lebih lambat. Jadi dapat disimpulkan bahwa, hanya material
atau pelarut dielektrik yang memiliki dipol permanen (memiliki sebuah muatan
positif pada satu sisi dan sebuah muatan negatif di sisi lainnya) yang dapat
20
mengalami pemanasan oleh microwave (Tatke dkk, 2011). Suhu yang lebih tinggi
yang dicapai oleh radiasi microwave dapat menghidrolisis ikatan eter dari
selulosa, yang merupakan konstituen utama dari dinding sel tanaman, dan dapat
dikonversi menjadi fraksi larut dalam 1 sampai 2 menit. Temperatur yang lebih
tinggi dicapai oleh dinding sel selama MAE, meningkatkan dehidrasi selulosa dan
mengurangi kekuatan mekanik dan membantu pelarut untuk mudah masuk
mengekstraksi senyawa di dalam sel. (Mandal dkk, 2007).
Metode Microwave Assisted Extraction merupakan metode yang efisien
dibandingkan dengan metode maserasi karena menghasilkan rendemen yang lebih
tinggi, suhu yang rendah, dan waktu ekstraksi yang lebih singkat pada ekstraksi
senyawa fenolik (Quan dkk., 2006). Metode Microwave Assisted Extraction dapat
dengan mudah diaplikasikan oleh beberapa industri kecil karena menggunakan
microwave dan pelarut yang mudah didapatkan di toko kimia untuk proses
ekstraksinya.
Ekstraksi konvensional memerlukan waktu yang cukup lama
dibandingkan dengan Metode Microwave Assisted Extraction. Metode Microwave
Assisted Extraction memberikan laju ekstraksi yang lebih cepat, dimana energi
gelombang mikro ditransfer secara efisien ke dalam bahan melalui mekanisme
interaksi molekuler di dalam medan elektromagnetik sehingga terjadi transfer
energi yang cepat dan efisien ke dalam pelarut matriks bahan. Pemanasan
menggunakan microwave melibatkan tiga kali konversi energi, yaitu konversi
energi listrik menjadi energi elektromagnetik, koversi energi elektromagnetik
menjadi energi kinetik dan konversi energi kinetik menjadi energi panas.
21
Perlakuan dengan microwave mempengaruhi struktur sel akibat kenaikan
suhu yang tiba-tiba dan meningkatkan tekanan internal. Selama proses dinding sel
pecah, analit yang akan diekstrak keluar dari sel dan dapat berdifusi cepat ke
dalam pelarut. Ekstraksi dengan MAE ini dapat meningkatkan kecepatan transfer
massa zat terlarut dari matriks sampel ke dalam pelarut. (Mandal dkk., 2007)
Mekanisme berdasarkan MAE mengekspos analit dengan pelarut melalui
pecahnya sel. Hal ini berbeda dari ekstraksi refluks yang bergantung pada
serangkaian proses permeasi dan solubilisasi untuk membawa analit keluar dari
matriks. (Mandal dkk., 2007). MAE dibandingkan metode ekstraksi yang lain
memiliki beberapa kelebihan antara lain:
1) MAE dapat menyelesaikan ekstraksi dalam beberapa menit, lebih cepat
dibandingkan metode ekstraksi yang lain.
2) Penggunaan solvent yang sedikit sehingga mengurangi biaya pembelian
pelarut dan pembuangan sisa pelarut.
3) MAE menghasilkan ekstrak dengan yield lebih besar daripada metode
ekstraksi yang lain.
4) MAE menggunakan energi listrik lebih kecil dibandingkan metode
ekstraksi yang lain.
1. Faktor-faktor yang Berpengaruh Terhadap Metode Ekstraksi Microwave
Assisted Extraction (MAE) (Mandal dkk., 2007)
a. Volume pelarut
Volume pelarut harus cukup untuk memastikan bahwa solid selalu
terendam dalam seluruh pelarut selama iradiasi berlangsung. Semakin
22
tinggi volume pelarut maka semakin besar yield yang dihasilkan dalam
metode ekstraksi konvensional. Namun, dalam MAE semakin tinggi
volume pelarut maka semakin kecil yield yang dihasilkan. Hal ini
disebabkan karena dengan jumlah pelarut yang jauh lebih banyak
dibandingkan jumlah solid yang sedikit, pelarut akan lebih banyak
menyerap energi microwave yang besar untuk menaikkan suhunya,
sedangkan solid hanya menyerap sisa energi microwave yang ada. Hal ini
menyebabkan tidak semua senyawa fenolik dapat keluar dari sel sehingga
senyawa fenolik tidak dapat terekstrak dengan sempurna.
b. Waktu radiasi
Semakin lama waktu ekstraksi menyebabkan waktu radiasi dalam
microwave semakin lama sehingga pelarut akan menyerap energi
microwave yang lebih banyak. Namun dengan waktu radiasi yang terlalu
lama maka analit akan terdegradasi oleh panas yang dihasilkan oleh energi
microwave. Oleh karena itu, ekstraksi MAE harus dilakukan dengan waktu
radiasi yang optimum.
c. Power microwave
Semakin besar power microwave yang digunakan dalam ekstraksi
MAE, maka semakin cepat pecahnya dinding sel karena jika digunakan
power yang lebih tinggi maka suhu akan naik dengan cepat, sehingga
analit yang diinginkan lebih cepat keluar dari dalam sel dan berdifusi ke
dalam pelarut. Besar power microwave harus dipilih dengan benar untuk
23
menghindari kenaikan suhu yang sangat tinggi, yang dapat menyebabkan
analit terdegradasi.
d. Ukuran partikel
Semakin kecil ukuran partikel berarti semakin besar luas
permukaan kontak antara partikel dan pelarut selama iradiasi dalam
ekstraksi MAE.
e. Suhu
Semakin tinggi suhu ekstraksi berarti semakin besar tekanan
internal pada sel partikel sehingga dinding sel cepat pecah dan analit dari
dalam sel akan keluar larut dalam pelarut. Pada ekstraksi MAE diperlukan
suhu yang optimum untuk menjaga agar analit tidak terdegradasi oleh
panas yang dihasilkan energi microwave.
24
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat
Penelitian dilaksanakan pada bulan Maret - April di Laboratorium
Rekayasa Pangan Hasil Pertanian dan Laboratorium Kimia Universitas
Semarang, Jalan Soekarno-Hatta Tlogosari, Semarang dan Laboratorium
Chem-mix Pratama Yogyakarta.
B. Alat dan Bahan
Bahan baku untuk penelitian ini adalah mete dari daerah Ngadirojo
Wonogiri Jawa Tengah. Bahan kimia yang digunakan antara lain: etanol 70%,
DPPH (2,2-diphenyl-1 picrylyhdrazil), Folin-ciocaleu 250 µl, NaCO3 20%,
Asam Galat, AlCl3 5%, Quersentin, HCl pekat, Metanol, Catecin, Etanol,
Aquadest dan beberapa bahan kimia untuk analisis.
Peralatan yang dipergunakan adalah blender, kuvet, cabinet drayer,
waterbath, spektrofotometer UV-Vis, oven, microwave merk Signora SG-
1304MB, Erlenmeyer, Beaker Glass, Corong kaca, Gelas Ukur, Labu Takar,
Timbangan Analitik dan beberapa peralatan gelas untuk analisis.
C. Rancangan Percobaan
Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak
Lengkap (RAL) satu faktor 6 perlakuan dan 3 kali ulangan dengan
perlakuannya adalah sebagai berikut:
P0: Tanpa perlakuan pemanasan (maserasi 24 jam)
P1: Lama ekstraksi selama 2 menit
25
P2: Lama ekstraksi selama 4 menit
P3: Lama ekstraksi selama 6 menit
P4: Lama ekstraksi selama 8 menit
P5: Lama ekstraksi selama 10 menit
Analisa data statistik dilakukan dengan ANOVA, untuk mengetahui
terjadi perbedaan antara perlakuan akan dilakukan dengan uji DUNCAN
(DMRT) pada taraf 5%. Bila terjadi perbedaan dilakukan Uji Lanjut untuk
mengetahui perbedaan antar perlakuan.
D. Prosedur Penelitian
Penelitian ini diawali dengan pembuatan tepung mete yang dimulai dari
pemilihan kacang mete yang akan digunakan. Kacang mete yang digunakan
adalah yang keadaannya masih mentah. Kacang mete yang telah disortasi
kemudian dikeringkan dalam kabinet dryer dengan suhu 70oC selama 8 jam
dan kadar air kurang dari 10%. Kacang mete yang telah kering digiling
dengan menggunakan blender. Kemudian tepung kacang mete di ayak 40
mesh. Tepung kacang mete yang akan ditreatment ditimbang dan sebagai
dasar penambahan pelarut etanol 70%. Ratio pelarut dengan bahan 1 banding
5. Kemudian diekstrak menggunakan microwave pada suhu 40oC selama 2
menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit dan 10 menit. Larutan kacang mete disaring
dengan kertas saring, kemudian endapan dan filtrat dipisahkan. Filtrat kacang
mete kemudian di evaporasi menggunakan waterbath pada suhu 70oC selama
3 jam. Selanjutnya diuji kandungan senyawa total fenolik, flavonoid, aktivitas
26
antioksidan dan kadar air. Gambaran singkat pembutan tepung kacang mete
dituangkan pada Gambar 4 dan ekstraksi tepung kacang mete di Gambar 5.
Gambar 4. Diagram Alir Pembuatan Tepung Kacang Mete
Sortasi dan Pencucian
Pengeringan (70 °C, 8jam)
Pengirisan
Kacang mete kering
Penepungan Kacang mete kering
(blender)
Pengayakan (40 mesh)
Air cucian Air Bersih
Kacang Mete
Tepung Kacang Mete
27
Gambar 5. Diagram Alir Microwave Assisted Extraction (MAE)
Ekstraksi (400C) menggunakan MAE
(2 menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit, 10 menit)
Penyaringan dengan kertas saring
Filtrat
Penguapan dengan
Waterbath 70oC 3 jam
Ekstrak kental
Tepung Kacang Mete
(1:5)
Ampas Tepung
Kacang Mete
Etanol 70%
Etanol 70%
Uji Total Fenolat Uji Flavonoid Uji Aktivitas
Antioksidan
Uji Tanin
Tepung Kacang Mete
28
E. Tahap Pengujian (Total Fenolik, Kandungan Flavonoid, Kadar
Tanin, Uji Aktivitas Antioksidan)
1. Kadar Air
Prosedur praktikum penetapan kadar air dilakukan dengan metode
AOAC 2005. Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air
adalah mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 105oC selama 1
jam. Cawan yang telah dioven didinginkan dengan cara diletakkan ke dalam
desikator selama 15 menit dan kemudian cawan tersebut ditimbang.
Kemudian, dimasukkan sampel 1.5-2 gram, kemudian dimasukkan ke dalam
tanur yang suhunya 600°C selama 3 jam. Didinginkan di luar tanur sampai
suhu ±120°C, dimasukkan dalam desikator. Cawan ditimbang sehingga
didapat berat konstan dan kemudian di lakukan perhitungan kadar air.
2. Rendemen
Rendemen yang dihasilkan dalam penelitian ini diperoleh dengan
membandingkan berat oleoresin yang diperoleh dengan berat ampas hasil
penyaringan. Hasil penyaringan dinyatakan dalam %. Rumus penghitungan
rendemen adalah sebagai berikut:
3. Uji Kandungan Total Fenolik
Menurut Roy, dkk (2009) prosedur kerja untuk uji total fenolik dengan
metode Folin-ciocalteu adalah sebagai berikut dengan menggunakan asam
galat sebagai standar, sampel 50 μl, ditambah larutan Folin-ciocalteu 250 μl,
kemudian didiamkan 1 menit dan ditambah 750 μl NaCO3 20 %, selanjutnya
29
divortek, dan ditambah akuades sampai volume 5 ml. Setelah diinkubasi 5
menit pada suhu kamar, absorbansi ditera pada λ 760 nm. Asam galat
digunakan sebagai standar dan kurva kalibrasi dibuat dengan asam galat
31,875 sampai 510 mg/L dengan r = 0,99. Hasil perhitungan fenolik total
adalah mg Ekivalen Asam Galat (EAG) per gram ekstrak kering. Analisa
dilakukan dalam 3 batch masing-masing 3 kali ulangan.
Metode yang digunakan mengacu pada Yangthong dkk (2009), Sharma
dkk (2011) dan Santoso dkk (2012) dengan menggunakan reagen Folin-
Ciocalteau. Ekstrak kacang mete berat 5 mg dilarutkan dalam 2 ml etanol
96%. Kemudian larutan ditambahkan 5 ml aquades, kemudian ditambahkan 1
ml Na2CO3 5%. larutan dihomogenkan lalu diinkubasi dalam kondisi gelap
selama satu jam. Serapan yang dihasilkan diukur dengan spektrofotometer
UV-Vis pada panjang gelombang 725 nm. Pengukuran absorbansi dilakukan 3
kali ulangan.
Asam galat digunakan sebagai standar dengan seri konsentrasi 0 ppm, 5
ppm, 15 ppm dan 20 ppm. Kurva kalibrasi asam galat digunakan untuk
menentukan kadar senyawa fenolik yang terkandung dalam sampel melalui
persamaan regresi dan dinyatakan dalam satuan mg ekuivalen asam galat/g
ekstrak (mg GAE/g ekstrak) dengan rumus perhitungan:
C = C1 x V
M
Keterangan:
C: Total fenolik (mg GAE/g ekstrak) M: Berat ekstrak (g)
C1: Konsentrasi asam galat (mg/l) V: Volume ekstrak (l)
30
4. Uji Kandungan Flavonoid
Prosedur Analisa Flavonoid Metode Spectrofotometry,Worotikan
dalam Suryanto (2007), dengan menggunakan pereaksi AlCl3. Ditimbang
sampel 5 gr,larutkan dalam 100 ml ethanol. Disaring atau centrifuge larutan.
Diambil 1 ml larutan jernih,tambahkan 3 ml larutan AlCl3 5 %. Ditambahkan
aquadest hingga volume 10 ml. Dibaca absorbansinya menggunakan
spektrofotometer dengan panjang gelombang 420 nm. Dibuat kurva
standarnya menggunakan Quercetein. Pengukuran absorbansi dilakukan 3 kali
ulangan.
Kuersetin digunakan sebagai standar dengan seri konsentrasi 50
ppm, 100 ppm, 150 ppm dan 200 ppm. Kurva kalibrasi kuersetin digunakan
untuk menentukan kadar senyawa total flavonoid yang terkandung dalam
sampel melalui persamaan regresi dan dinyatakan dalam satuan mg ekuivalen
kuersetin/g ekstrak (mg QE/g ekstrak) dengan rumus perhitungan:
C= C1 X V x FP
M
Keterangan:
C: Flavonoid (mg QE/g ekstrak) M: Berat ekstrak (g)
C1: Konsentrasi kuersetin (mg/l) FP: Faktor pengenceran
V: Volume ekstrak (l)
Kuersetin digunakan sebagai pembanding karena merupakan golongan
flavonoid yang banyak ditemukan dalam tumbuhan serta memiliki aktivitas
biologis (Sofyan dkk., 2008).Senyawa kuersetin dan flavonoid lain dapat
31
membentuk kompleks dengan AlCl3 yang berwana orange dan menyerap pada
panjang gelombang maksimum 510 nm. Kurva kalibrasi kuersetin yang dibuat
memiliki persamaan y= 0,00003x-0,0005, dengan harga koefisien korelasi (r)
0,9972.
5. Uji Kadar Tanin dengan senyawa katekin (C)
Menurut Chang (2007) prosedur kerja untuk uji kadar tanin dengan
senyawa katekin (C) adalah sebagai berikut sampel 50 μl ditambah 3 ml
metanol vanilin 4% dan 1,5 ml HCl pekat kemudian divorteks 2 menit, ditera
pada λ 500 nm dan digunakan metanol sebagai blanko. Kadar tanin
terkondensasi dihitung sebagai mg ekivalen catechin (EC)/ g ekstrak kering
dengan kurva kalibrasi (8,9-44,4 mg/L) dengan r = 0,99. Analisis dilakukan 3
batch masing-masing 3 kali ulangan.
Katekin digunakan sebagai standar dengan seri konsentrasi 0 ppm, 5
ppm, 15 ppm dan 20 ppm. Kurva kalibrasi asam galat digunakan untuk
menentukan kadar senyawa tanin yang terkandung dalam sampel melalui
persamaan regresi dan dinyatakan dalam satuan mg ekuivalen asam galat/g
ekstrak (mg GAE/g ekstrak) dengan rumus perhitungan.
C
Keterangan:
C: Total tanin (mg GAE/g ekstrak) M: Berat ekstrak (g)
C1: Konsentrasi asam galat (mg/l) V: Volume ekstrak (l)
32
6. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Menurut Chang (2007) prosedur kerja untuk uji aktivitas antioksidan
kacang mete segar dengan metode DPPH adalah sebagai berikut sampel 0,2
ml ditambah 3,8 ml larutan DPPH 0,1 mM, divortek 1 menit, dan diinkubasi
pada suhu kamar dan ruang gelap selama 30 menit. Absorbansi ditera pada λ
517 nm. Blanko (kontrol) dengan menggunakan etanol sebagai pengganti
sampel. Daya tangkap radikal bebas dinyatakan dalam persen (%) RSA = %
Radical Scavenging Activity merupakan % pemucatan DPPH.
A
% RSA = 1 ————— x 100%
B
Keterangan:
A = nilai absorbansi sampel
B = nilai absorbansi DP
33
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi menggunakan bahan baku kacang mete segar untuk
menghasilkan ekstrak kacang mete dan kemudian untuk dianalisa meliputi
rendemen, total fenolik, total flavonoid, kadar tanin dan aktivitas antioksidan.
Pada perlakuan P0 dilakukan proses maserasi selama 24 jam, sedangkan pada
pelakuan P1 sampai dengan P5 dilakukan dengan menggunakan metode
Microwave Assisted Extraction (MAE) dengan berbagai macam waktu
ekstraksi, mulai dari 2 menit hingga 10 menit. P0 pada penelitian ini
digunakan sebagai kontrol atau sebagai pembanding. Pada setiap perbedaan
waktu ekstraksi terjadi kenaikan suhu pada microwave, sehingga semakin
lama waktu ekstraksi akan meningkatkan suhu ekstraksi.
Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi kacang mete pada penelitian ini
menggunakan pelarut etanol 70%. Pelarut etanol 70% dikarenakan etanol
dengan konsentrasi 70% sangat efektif dalam menghasilkan jumlah bahan
aktif yang optimal, dimana bahan penganggu hanya skala kecil yang turut ke
dalam cairan pengekstraksi. Selain daripada itu, etanol 70 % mudah
ditemukan dan memiliki harga yang lebih ekonomis dibandingkan dengan
etanol 90 % (Azis dkk, 2014). Penggunaan pelarut etanol 70% terbukti dapat
menghasilkan aktivitas antioksidan yang cukup tinggi jati belanda (Guazuma
ulmifolia Lamk), jambu biji (Psidium guajava Linn) dan salam (Eugenia
polyantha Wight) dengan metode maserasi menghasilkan. Aktivitas
antioksidasi yang tinggi yaitu berturut-turut sebesar 77,44%; 79,14% dan
34
75,99%. Selain itu, pemilihan pelarut etanol 70% juga dapat dilihat dari sisi
konstanta dielektriknya, konstanta dielektrik berbanding lurus dengan
polaritas pelarut. Pelarut etanol 96% memiliki konstanta dielektrik sebesar 30
sedangkan pelarut etanol 70% mempunyai konstanta dielektrik sebesar 45
(Winata, 2011). Lebih lanjut (Winata, 2011) mengemukakan bahwa semakin
kecil konsentrasi pelarut semakin sedikit biaya yang dikeluarkan, namun
memperbesar konsentrasi pelarut belum tentu dapat meningkatkan jumlah
senyawa bioaktif yang terekstrak hal ini membuat perlunya pertimbangan
dalam pemilihan konsentrasi pelarut.
Waktu ekstraksi yang digunakan adalah 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8
menit dan 10 menit. Kontrol yang digunakan dalam penelitian ini adalah
metode maserasi (tanpa pemanasan) selama 24 jam. Waktu ekstraksi juga
sangat berpengaruh terhadap senyawa yang dihasilkan. Menurut Budiyanto
dkk (2008) waktu ekstraksi yang tepat akan menghasilkan senyawa yang
optimal. Waktu ekstraksi yang terlalu lama akan menyebabkan ekstrak
terhidrolisis, sedangkan waktu ekstraksi yang terlalu singkat menyebabkan
tidak semua senyawa aktif terekstrak dari bahan. Semakin lama waktu
ekstraks, kuantitas bahan yang terekstrak juga semakin meningkat
dikarenakan kesempatan untuk bersentuhan antara bahan dengan pelarut
semakin besar sehingga hasilnya akan bertambah sampai titik jenuh larutan
(Winata dan Yunianta, 2015). Hasil penelitian Sari (2012) tentang pengujian
kandungan total fenol Kappahycus alvarezzi variasi suhu dan waktu
35
menyatakan semakin lama waktu ekstraksi menunjukan semakin naiknya
kandungan fenolik. Akan tetapi pada suhu 60oC
Hasil penelitian mengungkapkan bahwa lama waktu ekstraksi
menggunakan metode Microwave Assisted Extraction (MAE) berpengaruh
nyata (p<0,05) terhadap seluruh variabel yang diamati yaitu rendemen, kadar
total fenolik, kadar flavonoid, kadar tanin, serta aktivitas antioksidan ekstrak
kacang mete. Hasil analisis sidik ragam dari masing-masing variabel
pengamatan dan pembahasannya akan diuraikan sebagai berikut :
A. Rendemen
Hasil analisis rendemen menunjukkan perbedaan yang nyata pada
pengujian (P<0,05) karena perbedaan waktu ekstraksi pada kacang mete.
Hasil tersebut disajikkan dalam Tabel 3 berikut.
Tabel 3. Hasil Rendemen Kacang Mete (%).
Perlakuan Rerata (%)*
P0 (maserasi 24 jam)
P1 (ekstraksi 2 menit)
0,35a
1,33b
P2 (ekstraksi 4 menit) 1,68c
P3 (ekstraksi 6 menit) 3,93e
P4 (ekstraksi 8 menit) 4,46f
P5 (ekstraksi 10 menit) 3,05d
Keterangan: *) Angka yang ditandai superskrip yang tidak sama pada kolom
menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05)
36
Tabel 3. menunjukkan rata-rata kandungan rendemen pada kacang mete
yang diekstrak menggunakan metode MAE. Pada tabel dapat dilihat bahwa
jumlah fenolik pada kacang mete sebesar 0,35 – 4,46 %. Rendemen kacang
mete perlakuan P4 dengan lama ekstraksi 8 menit memiliki total fenolik
paling tinggi yaitu 4,46 % dibandingkan kacang mete perlakuan P1 dengan
lama ekstraksi 2 menit memiliki total fenolik paling rendah yaitu 1,33 %.
Grafik kandungan total fenolik kacang mete dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 6. Diagram Garis Rerata Kandungan Total Fenolik Kacang Mete
Pada Gambar 6 menunjukkan bahwa waktu optimum ekstraksi kacang
mete dengan waktu 8 menit, semakin lama dan semakin tinggi suhu ekstraksi
maka rendemen akan menurun. Menurut Winata dan Yunianta (2015)
semakin lama waktu ekstraksi, kuantitas bahan yang terekstrak juga
semakinmeningkat dikarenakan kesempatan untuk bersentuhan antara bahan
dengan pelarut semakin besar sehingga hasilnya akan bertambah sampai titik
0.35
1.33
1.68
3.93
4.46
3.05
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5
P0 P1 P2 P3 P4 P5
Re
rata
a (%
)
Rendemen
37
jenuh larutan. Suhu ekstraksi yang terlalu rendah dan waktu ekstraksi yang
terlalu singkat akan menghasilkan rendemen yang rendah (Handayani dan
Sriherfyna, 2015). Perbedaan rendemen pada penelitian dikarenakan
pemanasan gelombang mikro meningkat untuk cairan ataupun padatan yang
dapat mengubah energi elektromagnetik menjadi panas. Semakin lama waktu
ekstraksi, maka semakin banyak energi elektromagnetik yang dirubah
menjadi energi panas sehingga suhu semakin meningkat (Elwin, 2014).
Banyaknya pelarut mempengaruhi luas kontak padatan dengan pelarut,
semakin banyak pelarut luas kontak akan semakin besar, sehingga distribusi
pelarut ke padatan akan semakin besar. Meratanya distribusi pelarut ke
padatan akan memperbesar rendemen yang dihasilkan, banyaknya pelarut
akan mengurangi tingkat kejenuhan pelarut, sehingga komponen alginat
dalam rumput laut akan terekstrak secara sempurna.
Tingginya rendemen pada perlakuan P4 terjadi karena tingginya
senyawa bioaktif yang dapat terekstrak pada lama esktraksi 8 menit. Hal ini
dibuktikan dengan tingginya total fenolik, total flavonoid, tanin, dan aktivitas
antiokidan terekstrak yang tinggi pada P4.
B. Total Fenolik
Hasil analisis kandungan total fenolik menunjukkan perbedaan yang
nyata pada pengujian (P<0,05) karena perbedaan waktu ekstraksi pada kacang
mete. Hasil tersebut disajikkan dalam Tabel 4 berikut.
38
Tabel 4. Kandungan Total Fenolik Kacang Mete (mgGAE/g).
Perlakuan Rerata (mgGAE/g)*
P0 (maserasi 24 jam)
P1 (ekstraksi 2 menit)
0,3299a
0,39367b
P2 (ekstraksi 4 menit) 0,49223c
P3 (ekstraksi 6 menit) 0,50163d
P4 (ekstraksi 8 menit) 0,84490f
P5 (ekstraksi 10 menit) 0,52913e
Keterangan: *) Angka yang ditandai superskrip yang tidak sama pada kolom
menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05)
Tabel 3. menunjukkan rata-rata kandungan total fenolik pada kacang
mete yang diekstrak menggunakan metode MAE. Pada tabel dapat dilihat
bahwa jumlah fenolik pada kacang mete sebesar 0,39 – 0,84 mgGAE/g
sampel. Total fenolik kacang mete perlakuan P4 dengan lama ekstraksi 8
menit memiliki total fenolik paling tinggi yaitu 0,84490 mgGAE/g
dibandingkan kacang mete perlakuan P1 dengan lama ekstraksi 2 menit
memiliki total fenolik paling rendah yaitu 0,39367 mgGAE/g. Grafik
kandungan total fenolik kacang mete dapat dilihat pada Gambar 7.
39
Gambar 7. Diagram Garis Rerata Kandungan Total Fenolik Kacang Mete
Total fenolik kacang mete tertinggi terjadi pada perlakuan ekstraksi P4
(0,8449 mgGAE/g), dengan waktu 8 menit. Pada Gambar 6 menunjukkan
bahwa waktu optimum ekstraksi kacang mete dengan waktu 8 menit, semakin
lama dan semakin tinggi suhu ekstraksi maka kandungan total fenolik akan
rusak. Kenaikan senyawa fenolik pada penelitian ini selain dipengaruhi oleh suhu
juga oleh lama waktu ekstraksi, lama waktu ekstraksi menaikan jumlah analit yang
terekstrak. Menurut Ghafoor, dkk (2009), Semakin lama proses ekstraksi, maka
kontak antara pelarut dengan zat terlarut akan semakin lama sehingga proses
pelarutan senyawa fenolik akan terus berlangsung dan berhenti sampai pelarut jenuh
terhadap solute.
Menurut Dewi (2006), peningkatan suhu pemanasan pada jus keruh Aloe
chinensis menghasilkan penurunan kandungan total fenol sehingga senyawa fenol
yang terdapat dalam Aloe chinensis mengalami kerusakan. Miryanti dkk, 2011
yang menyatakan dengan meningkatkan suhu, difusi yang terjadi juga
semakin besar, sehingga proses ekstraksi juga akan berjalan lebih cepat. Akan
0.3299
0.39367
0.49223 0.50163
0.8449
0.52913
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
P0 P1 P2 P3 P4 P5
Re
rata
a (m
g.G
AE/
gr)
Total Fenolat
40
tetapi dalam meningkatkan suhu operasi juga perlu diperhatikan, karena
suhu yang terlalu tinggi dapat menyebabkan kerusakan pada bahan yang
sedang diproses.
Liyana dan Shahidi (2005), menyatakan bahwa ada hubungan antara lama
ekstraksi, suhu dan kandungan fenolik. Meningkatnya suhu menyebabkan
peningkatan kadar fenolik sampai pada suhu tertentu kemudian menurun seiring
dengan peningkatan suhu yang lebih tinggi (Riadini, dkk., 2015). Dapat
disimpulkan dari hal tersebut bahwa semakin lama kacang mete diekstrak,
memiliki pengaruh terhadap kandungan total fenolik yang ada di dalamnya.
Dengan semakin lama perlakuan ekstraksi maka kadar total fenolik akan
mengalami penurunan.
C. Flavonoid
Hasil analisis kandungan total flavonoid menunjukkan perbedaan yang
nyata pada pengujian (P<0,05) karena perbedaan waktu ekstraksi pada kacang
mete segar. Hasil tersebut disajikkan dalam Tabel 5 berikut.
Tabel 5. Kandungan Total Flavonoid Kacang Mete (mgQE/g).
Perlakuan Rerata (mgQE/g)*
P0 (maserasi 24 jam)
P1 (ekstraksi 2 menit)
0,0572a
0,0668ab
P2 (ekstraksi 4 menit) 0,0721bc
P3 (ekstraksi 6 menit) 0,0731bc
P4 (ekstraksi 8 menit) 0,0862d
P5 (ekstraksi 10 menit) 0,0816cd
41
Keterangan: *) Angka yang ditandai superskrip yang tidak sama pada kolom
menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05)
Tabel 5 menunjukkan rata-rata kandungan total flavonoid pada kacang
mete segar yang diekstrak menggunakan metode MAE. Dapat dilihat bahwa
kacang mete segar memiliki jumlah total flavonoid sebesar 0,0668 – 0,0862
mgQE/g sampel. Total flavonoid kacang mete segar perlakuan P4 dengan
lama ekstraksi 8 menit memiliki total flavonoid paling tinggi yaitu 0,0862
mgQE/g dibandingkan kacang mete segar perlakuan P1 dengan lama
ekstraksi 2 menit memiliki total flavonoid paling rendah yaitu 0,0668
mgQE/g. Grafik kandungan total flavonoid kacang mete dapat dilihat pada
Gambar 8.
Gambar 8. Diagram Garis Rerata Kandungan Total Flavonoid Kacang Mete
Gambar 8. grafik rerata kandungan total flavonoid tersebut menunjukan
bahwa kandungan total flavonoid mengalami penurunan pada perlakuan P5
yaitu sebesar 0,0816 mg.QE/gram. Flavonoid merupakan senyawa fenol yang
0.0572
0.0668 0.0721 0.0731
0.0862 0.0816
0
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.07
0.08
0.09
0.1
P0 P1 P2 P3 P4 P5
Re
rata
a (m
g.Q
E/gr
)
Flavonoid
42
memiliki sistem aromatik yang terkonjugasi. Sistem aromatik terkonjugasi
mudah rusak pada suhu tinggi. Beberapa golongan flavonoid memiliki ikatan
glikosida dengan molekul gula. Ikatan glikosida akan mudah rusak atau putus
pada suhu tinggi (Oktavia, 2011).
Berdasarkan Soehendro (2015), kelarutan fenol dalam air berkisar
antara suhu 0-65ºC. Sehingga pada penelitian ini senyawa flavonoid dan fenol
diekstrak dengan menggunakan pemanasan water bath suhu 40ºC dan 60ºC.
Pemanasan ekstrak daun sirsak pada suhu 40ºC dan 60ºC memberikan
pengaruh yang nyata terhadap kandungan flavonoid dan total fenol.
Kandungan flavonoid dan total fenol daun sirsak yang dipanaskan pada suhu
60ºC lebih tinggi dibandingkan kandungan flavonoid dan total fenol pada
daun sirsak yang dipanaskan pada suhu 40ºC. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Wazir dkk. (2011), bahwa suhu tinggi mampu melepaskan
senyawa fenol sel dinding atau senyawa fenolik yang terikat disebabkan oleh
rusaknya unsur-unsur sel, menyebabkan semakin banyak senyawa fenol yang
terekstrak.
Menurut Budiyanto dan Yulianingsih (2008), waktu ekstraksi yang tepat
akan menghasilkan senyawa yang optimal. Waktu ekstraksi yang melebihi
waktu ekstraksi optimal akan menyebabkan ekstrak terhidrolisis, sehingga
akan semakin menurunkan kadar senyawa yang diekstrak. Hidrolisis disini
bukan disebabkan oleh ketidakcocokan nilai polaritas, tetapi lebih disebabkan
oleh pecahnya dinding sel pada molekul jahe karena terjadi inisiasi dan difusi
antara bahan dan pelarut secara terus menerus, sehingga pada MAE 10 menit
43
flavonoid yang terekstrak menjadi sedikit. Waktu ekstraksi yang terlalu
singkat menyebabkan tidak semua senyawa aktif terekstrak dari bahan. Dapat
disimpulkan dari hal tersebut bahwa semakin lama kacang mete diekstrak,
memiliki pengaruh terhadap kandungan total flavonoid yang ada di dalamnya.
Dengan semakin lama perlakuan ekstraksi maka kadar total flavonoid akan
mengalami penurunan.
D. Tanin
Hasil analisis kandungan tanin menunjukkan perbedaan yang nyata
pada pengujian (P<0,05) karena ekstrak pada kacang mete. Hasil tersebut
disajikkan dalam Tabel 6 berikut.
Tabel 6. Kandungan Tanin Kacang Mete (mgKE/g)
Perlakuan Rerata (mgKE/g)*
P0 (maserasi 24 jam)
P1 (ekstraksi 2 menit)
0,3550a
0,4218b
P2 (ekstraksi 4 menit) 0,5250c
P3 (ekstraksi 6 menit) 0,5342d
P4 (ekstraksi 8 menit) 0,9332f
P5 (ekstraksi 10 menit) 0,5633e
Keterangan:*)Angka yang ditandai superskrip yang tidak sama pada kolom
menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05)
Tabel 6 menunjukkan rata-rata kandungan tanin pada kacang mete yang
di ekstrak menggunakan MAE. Dapat dilihat bahwa dalam kacang mete
memiliki jumlah tanin sebesar 0,4218 – 0,9332 mgKE/g. Pada tabel diatas
menunjukan bahwa semakin lama kacang mete diesktrak maka kadar tanin
akan mengalami penurunan pada perlakuan P5 yaitu di ekstrak dengan MAE
44
selama 10 menit sebesar 0,5633 mgKE/g. Grafik kandungan tanin kacang
mete dapat dilihat pada Gambar 9.
Gambar 8. Diagram Garis Rerata Kandungan Tanin Kacang Mete
Pada Gambar 8 menunjukkan adanya perbedaan tanin kacang mete
pada setiap perlakuan. Tanin kacang mete tertinggi terjadi pada perlakuan
ekstraksi P4 sebesar 0,9332 mgKE/g, dengan waktu 8 menit dan mengalami
penurunan pada perlakuan ekstraksi P5 sebesar 0,5633 mgKE/g. Pada grafik
di atas menunjukan bahwa semakin lama kacang mete diekstrak maka
kandungan tanin akan mengalami penurunan. Kadar Tanin terbesar pada
ekstrak daun jambu mte didapatkan pada suhu 80oC selama 20 menit. Hal ini
dikarenakan semakin tinggi suhu semakin banyak pula tanin yang terekstrak
keluar. Menurut Dewi (2011), Tidak digunakan suhu lebih dari 80oC karena
tanin tidak tahan dengan pemansan yang terlalu tinggi.
Pada awal proses ekstrasi seluruh senyawa dalam daun jambu biji
terutama tanin akan terekstrak keluar dan bercampur dengan pelarut (air), dan
0.3550 0.4218
0.5250 0.5342
0.9332
0.5633
0.00
0.10
0.20
0.30
0.40
0.50
0.60
0.70
0.80
0.90
1.00
P0 P1 P2 P3 P4 P5
Re
rata
a (m
g.K
E/gr
)
Tanin
45
setelah mencapai titik optimal beberapa senyawa yang terdapat dalam bahan
akan mengalami penurunan. Disamping itu penurunan tanin diduga
disebabkan kerusakan tanin akibat proses hidrolisis selama proses ekstraksi
dan pemanasan yang berlangsung terus menerus. Tanin dapat terhidrolisis
menjadi glukosa dan asam tanat (Sukardi dkk, 2007). Dapat disimpulkan
bahwa proses pemasanan yang berlangsung terus menerus akan menyebabkan
kerusakan senyawa tanin dalam kacang mete, sehingga kadar tanin akan
mengalami penurunan.
E. Aktivitas Antioksidan
Hasil analisis kandungan antioksidan menunjukkan perbedaan yang
nyata pada pengujian (P<0,05) karena ekstrak pada kacang mete. Hasil
tersebut disajikkan dalam Tabel 7 berikut.
Tabel 7. Kandungan Aktivitas Antioksidan Kacang Mete (%).
Perlakuan Rerata (%)
P0 (maserasi 24 jam)
P1 (esktrsksi 2 menit)
30,3030a
32,9638b
P2 (ekstraksi 4 menit) 34,7376c
P3 (ekstraksi 6 menit) 37,1766d
P4 (ekstraksi 8 menit) 42,5720f
P5 (ekstraksi 10 menit) 41,4634e
Keterangan: *)Angka yang ditandai superskrip yang tidak sama pada kolom menunjukkan
perbedaan yang nyata (P<0,05)
46
Tabel 7 menunjukkan rata-rata kandungan antioksidan pada kacang
mete yang di ekstraksi dengan MAE. Dapat dilihat bahwa dalam kacang mete
memiliki jumlah antioksidan sebesar 32,9638 – 42,5720 %. Dapat dilihat
bahwa antioksidan Kacang mete paling tinggi yaitu 42,5720 % pada
perlakuan P4 dengan lama ekstraksi 8 menit. Sedangkan kacang mete yang
memiliki kandungan antioksidan paling rendah pada perlakuan P1 dengan
lama ekstraksi 2 menit yaitu 32,9638 %. Grafik kandungan antioksidan
kacang mete dapat dilihat pada Gambar 7.
Gambar 9. Diagram Garis Rerata Kandungan Antioksidan Kacang Mete
Pada Gambar 9 menunjukkan adanya perbedaan antioksidan kacang
mete pada setiap perlakuan. Antioksidan kacang mete tertinggi terjadi pada
perlakuan ekstraksi P4 sebesar 42,5720 %, dengan waktu 8 menit dan
mengalami penurunan pada perlakuan ekstraksi P5 sebesar 41,4634 %.
Aktivitas antioksidan kacang mete semakin meningkat hal ini karena antioksidan
pada jahe dikontribusi oleh adanya kandungan senyawa fenolik.
30.3030 32.9638
34.7376 37.1766
42.5720 41.4634
10.00
15.00
20.00
25.00
30.00
35.00
40.00
45.00
50.00
P0 P1 P2 P3 P4 P5
Re
rata
a (m
g.G
AE/
gr)
Aktivitas Antioksidan
47
Petel dkk (2015) berpendapat bahwa efek bioaktif senyawa antioksidan
terutama disebabkan karena adanya senyawa fenolik seperti asam fenolik.
Biasanya senyawa- senyawa yang memiliki efek bioaktif adalah senyawa fenolik
yang mempunyai gugus hidroks yang tersubtitui pada posisi ortho dan para
terhadap gugus -OH dan –OR. Menurut Husni, dkk (2014), bahwa kadar
antioksidan menurun seiring meningkatnya suhu dan lama waktu pemanasan.
Menurunnya aktivitas antioksidan pada perlakuan P5 diduga disebabkan karena
sihu pada proses MAE menjadi terlalu tinggi sehingga merusak zat bioaktif
dalam kacang mete.
F. Korelasi Total Fenolik, Kadar Flavonoid, dan Total Antosianin
Terhadap Aktivitas Antioksidan
Dalam teori probabilitas dan statistika, korelasi, juga disebut koefisien
korelasi, adalah nilai yang menunjukkan kekuatan dan arah hubungan linier
antara dua peubah acak (random variable). Salah satu jenis korelasi yang
paling populer adalah koefisien korelasi momen-produk Pearson (Santoso,
2017).
Dua variabel dikatakan berkolerasi apabila perubahan pada variabel
yang satu akan diikuti perubahan pada variabel yang lain secara teratur
dengan arah yang sama (korelasi positif) atau berlawanan (korelasi negatif).
(Santoso, 2017). Korelasi masing-masing variabel pengamatan (total fenolik,
total flavonoid, total antosianin) terhadap aktivitas antioksidan disajikan pada
Tabel 8.
48
Tabel 8. Korelasi Pearson Variabel Pengamatan Ekstrak Kacang Mete
Correlations
Fenol Flavonoid Tanin Antioksidan
Fenol Pearson Correlation 1 ,793**
,999**
,856**
Sig. (2-tailed) ,000 ,000 ,000
N 18 18 18 18
Flavonoid Pearson Correlation ,793**
1 ,780**
,874**
Sig. (2-tailed) ,000 ,000 ,000
N 18 18 18 18
Tanin Pearson Correlation ,999**
,780**
1 ,842**
Sig. (2-tailed) ,000 ,000 ,000
N 18 18 18 18
Antioksidan Pearson Correlation ,856**
,874**
,842**
1
Sig. (2-tailed) ,000 ,000 ,000
N 18 18 18 18
**. Correlation is significant at the 0.01 level (2-tailed).
1. Korelasi Antara Fenolik dengan Aktivitas Antioksidan
Kapasitas antioksidan suatu bahan dipengaruhi oleh komponen-
komponen di dalam bahan tersebut yang mampu beraktivitas untuk
menghambat terjadinya oksidasi. Komponen antioksidan tersebut antara lain
senyawa fenolik. Aktivitas antioksidan senyawa fenolik berasal dari
kemampuannya mendonasikan hidrogen kepada radikal sehingga
menghentikan oksidasi lipid pada tahap inisiasi (Prakash, 2007).
Pada baris Pearson Correlation antara Fenolik dengan aktivitas
antioksidan menghasilkan korelasi sama dengan 0,856 (r = 0.856) pada taraf
0.01, pada baris Sig. (2-tailed) menunjukkan angka 0.000 yang merupakan
signifikan korelasi antara total antosianin dengan aktivitas antioksidan.
Koefisien determinasi perlu dihitung untuk menafsirkan Pearson Correlation (r)
49
dengan cara mengkuadratkan nilai r tersebut dan dikalikan 100%, sehingga
diketahui koefisien determinasi dari korelasi adalah 73,27%
Berdasarkan pembacaan hasil korelasi dari Tabel 8. dapat disimpulkan
bahwa kadar fenol berkorelasi positif dengan total aktivitas antioksidan yang
dihasilkan. Nilai korelasi Nilai korelasi (r) yang mendekati 1 (nilai pearson
correlation aktivitas antioksidan sebagai patokan) dan nilai pearson correlation
mengindikasikan bahwa ada korelasi yang erat antara kadar fenol dengan
aktivitas antioksidan.
2. Korelasi Antara Flavonoid Dengan Aktivitas Antioksidan
Pada baris Pearson Correlation antara Flavonoid dengan aktivitas
antioksidan menghasilkan korelasi sama dengan 0.874 (r = 0,874) pada taraf
0.01, pada baris Sig. (2-tailed) menunjukkan angka 0.000 yang merupakan
signifikan korelasi antara total antosianin dengan aktivitas antioksidan.
Koefisien determinasi perlu dihitung untuk menafsirkan Pearson
Correlation (r) dengan cara mengkuadratkan nilai r tersebut dan dikalikan
100%, sehingga diketahui koefisien determinasi dari korelasi adalah 76,39%.
Berdasarkan pembacaan hasil korelasi dari Tabel 8. dapat disimpulkan
bahwa kadar flavonoid berkorelasi positif dengan total aktivitas antioksidan
yang dihasilkan. Berdasarkan pembacaan hasil korelasi dari Tabel 8. dapat
disimpulkan bahwa kadar flavonoid berkorelasi positif (berbanding lurus)
dengan total aktivitas antioksidan yang dihasilkan. Nilai korelasi (r) yang
mendekati 1 (nilai pearson correlation aktivitas antioksidan sebagai patokan)
50
dan nilai pearson correlation yang mendekati 100% mengindikasikan bahwa
ada korelasi yang erat antara kadar flavonoid dengan aktivitas antioksidan.
3. Korelasi Antara Tanin dengan Aktivitas Antioksidan
Pada baris Pearson Correlation antara tannin dengan aktivitas antioksidan
menghasilkan korelasi sama dengan 0.842 (r = 0,842) pada taraf 0.01, pada
baris Sig. (2-tailed) menunjukkan angka 0.000 yang merupakan signifikan
korelasi antara total antosianin dengan aktivitas antioksidan.
Koefisien determinasi perlu dihitung untuk menafsirkan Pearson
Correlation (r) dengan cara mengkuadratkan nilai r tersebut dan dikalikan
100%, sehingga diketahui koefisien determinasi dari korelasi adalah 71,00%.
Berdasarkan pembacaan hasil korelasi dari Tabel 8. dapat disimpulkan
bahwa kadar tanin berkorelasi positif dengan total aktivitas antioksidan yang
dihasilkan. Berdasarkan pembacaan hasil korelasi dari Tabel 6. dapat
disimpulkan bahwa kadar tanin berkorelasi positif (berbanding lurus) dengan
total aktivitas antioksidan yang dihasilkan. Nilai korelasi (r) yang mendekati 1
(nilai pearson correlation aktivitas antioksidan sebagai patokan) dan nilai
pearson correlation yang mendekati 100% mengindikasikan bahwa ada korelasi
yang erat antara kadar total flavonoid dengan aktivitas
51
BAB V
PENUTUP
Berdasarkan hasil penelitian Variasi Lama Microwave Assisted
Extraction Kacang Mete (Anacardium occidentale L.) Terhadap Total
Fenolik, Flavonoid, Tanin, dan Aktivitas Antioksidan.
A. Kesimpulan
Kesimpulan dari penelitian ini adalah
1. Perlakuan lama MAE berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap variabel yang
diamati yaitu redemen, kadar total fenolik, kadar flavonoid, kadar tanin
dan aktivitas antioksidan.
2. Semakin lama waktu MAE, cenderung meningkatkan kadar dari
variabel yang diamati, tetapi perlakuan tersebut mendapatkan hasil yang
maksimal pada lama 8 menit dan selanjutnya mengalami penurunan
terhadap seluruh variabel yang diamati yaitu rendemen, total fenolik,
kadar flavonoid, kadar tanin, dan aktivitas antioksidan.
3. Karakteristik P4 (MAE 8 menit) sebagai perlakuan terbaik, untuk
mendapatkan Rendemen, Total Fenolik, Tanin, terbaik yaitu yang
menghasilkan rendemen 4,46 %, total fenolik 1,5309 mgGAE/g, Tanin
1,6965 mgKE/g. Diperoleh Aktivitas Antioksidan dan Flavonoid yaitu
menghasilkan aktivitas antioksidan 41,3128% dan Flavonoid 0,8908
mgQE/g.
52
B. Saran
Berdasarkan hasil penelitian ini disarankan untuk peneliti selanjutnya
dapat dilakukan kajian variabel bebas selain lama waktu ekstraksi dan
penambahan kandungan lain untuk meningkatkan aktivitas antioksidan.
53
DAFTAR PUSTAKA
Abitogu, A. 2009. Physicochemical parameters and fatty acid composition of
cashew nut (Annacardium occidentale) oil. Nigerian journal of Chemical
Research.
Ahadi, M. R. 2003. Kandungan Tanin Terkondensasi dan Laju Dekomposisi pada
Serasah Daun Rhizospora mucronata Lamk pada Ekosistem Tambak
Tumpangsari, Purwakarta, Jawa Barat. Skripsi. Institut Pertanian Bogor,
Bogor.
Ahmad, M.M., 2006, Anti Inflammatory Activities of Nigella sativa Linn (Kalongi,
black seed), http://lailanurhayati.multiply.com/journal, diakses tanggal 21
Februari 2018.
Akagawa, M., 2001,‖Amine Oxidas Lie Activity of Flavonoid‖. Journal
Biochemryist.
Alasavar, C. dan Shahidi, F. 2009. Tree Nuts: Composition, Phytochemicals, and
Health Effects. CRC Press, Boca Raton.
Apak. 2007. Comparative Evaluation of Various Total Antioxidant Capacity
Assay Applied to Phenolic Compounds With the CUPRAC Assay.
Molecules. 12:1496-1547.
Association of Official Analytical Chemist (AOAC). 1995-2005. Official Methods
of Analysis : AOAC Arlington
Astawan, Made. 2009. Sehat dengan Hidangan Kacang dan Biji-bijian. Jakarta:
Penebar Swadaya.
Azis, T., S. Febrizky, dan A.D. Mario. 2014. Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap
Persen Yield alkaloid dari Daun Salam India (Murraya Koenigii). Jurnal
Teknik Kimia. Universiyas Sriwijaya, Palembang, 20(2):1-6.
Bahri-Sahloul R, Ben Fredj R, Boughalleb N, Shriaa J, Saguem S, Hilbert JL,
Trotin F, Ammar S, Bouzid S, dan Harzallah-Skhiri F. 2014. Phenolic
Composition and Antioxidant and Antimicrobial Activities of Extracts
Obtained from Crataegus azarolus L. var. Aronia (Willd.) Batt. Ovaries
Calli. Journal of Botany. Article ID 623651. Hindawi Publishing.
Bhat SV, Nagasampagi BA, dan Meenakshi S. 2009. Natural Products :
Chemistryand Application. Narosa Publishing House, New Delhi. India.
Budiyanto, A. dan Yulianingsih. 2008. Pengaruh Suhu dan Waktu Ekstraksi
Terhadap Karakter Pektin dari Ampas Jeruk Siam (Citrus nobilis L.).
Jurnal Pascapanen. 5 (2): 37-44.
54
Cahyono, B. 2005. Manfaat Jambu Mente. Tarat, Baandung. Nunung. 2000.
Budidaya Jambu Mente. Bina Aksarah, Jakarta.
Chang, C.C., Yang., M.H., Wem, H.M., and Chern, J.C. 2002. Estimation of Total
Flavonoid Content in Propolis by Two Comlpementary Colorimetric
Methods. Journal of Food and Drug Analysis, 10(3): 178-182.
Chew KK, Ng SY, Thoo YY, Khoo MZ, Wan Aida WM, and Ho CW. 2011.
Effect of Ethanol Concentration, Extraction Time and Extraction
Temperature on the Recovery of Phenolic Compounds and Antioxidant
Capacity of Centella asiatica Extracts. International Food Research
Journal, 18: 571-578.
Deaville ER, Givens DI, and Mueller-Harvey I. 2010. Chestnut and mimosa
tannin silages: Effects in sheep differ for apparent digestibility, nitrogen
utilisation and losses. Anim Feed Sci Technol. 157:129–138.
Desmiaty. Y., Ratih. H., dan Dewi. H. 2008. Penentuan Jumlah Tanin Total pada
Daun Jati Belanda (Guazuma ulmifiola) dan Daun Sambang Darah
(Excoecaria bicolor) secara Kolorimetri dengan Pereaksi Biru Prusia.
Ortocarpus, 8: 106-209.
Dewi K. 2006. Identifikasi dan Karakterisasi Antioksidan dari Jus Aloe chinensis
dan Evaluasi Potensi Aloe-Emodin sebagai Antifotooksidan dalam Sistem
Asam Linoleat. [Disertasi]. Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Dewi R, 2011, Uji Kualitatif dan Kuantitatif Tanin pada Kulit Batang dan Daun
Belimbing Wuluh (Averrhoa blimbi L) Secara Spektrofotometri
Menggunakan Pereaksi Biru Prusia, Surabaya, Fakultas Farmasi,
Universitas Surabaya.
Duke, J.A. 2001. Handbook of Nuts. CRC Press, Boca Raton.
Elwin. 2014. Analisa Pengaruh Waktu Pretreatment Dan Konsentrasi Naoh
Terhadap Kandungan Selulosa, Lignin Dan Hemiselulosa Eceng Gondok
Pada Proses Pretreatment Pembuatan Bioetanol. Universitas Brawijaya.
Malang
Ghafoor, K dan Y. H. Choi. 2009. Optimization of Ultrasound Assisted Extraction
of Phenolic Compounds and Antioxidant from Grape peel through
Response Surface Methodology. J. Korean Soc. Appl. Biol. Chem.
Department of Food Science and Technology, Kyungpook National
University, Daegu, Republic of Korea.
Halliwel, B and Gutteridge, J.M.C., 2000, Free Radikal in Biology and Medicine,
Oxford University Press, New York, cit: Rohman, A dan Riyanto, S.,
2004, Aktivitas Antioksidan dan Antiradikal Buah Mengkudu (Morinda
citrifolia L.), Laporan Penelitian, Fakultas Farmasi, UGM, Yogyakarta.
46 46
55
Halliwell B. 2006. Reactive spesies and antioxidants: Redox biology is a
fudamental theme of aerobic life. Plant Physiol. 141:312-322.
Handayani, H., dan F.H. Sriherfyna. 2016. Eksatraksi Antioksidan Daun Sirsak
Metode Ultrasonik Bath (Kajian Rasio Bahan : Pelarut dan Lama
Ekstraksi). Jurnal Pangan dan Agroindustri 4(1):262-272.
Hartanto, dan Hondi. 2012. Identifikasi Potensi Antioksidan Minuman Cokelat
dari Kakao Lindak (Theobroma Cacao L.) dengan Berbagai Cara
Preparasi: Metode Radikal Bebas 1,1 Diphenyl-2-Picrylhydrazil (Dpph).
Skripsi S-1 Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya, Surabaya.
Husni, A., D.R. Putra, dan I. Y. B. Lelana. 2014. Aktivitas Antioksidan Padina sp.
pada Berbagai Suhu dan Lama Pengeringan. Jurnal Pengolahan dan
Bioteknologi Perikanan Vol 9 No 2: 165 – 173.
Iorio, E. L. 2007. The Measurement of Oxidative Stress. International
Observatory of Oxidative Stress, Free Radicals and Antioxidant Systems.
Special supplement to Bulletin Vol. 4. No 1.
Trox. 2010. Bioactive compounds in cashew nut (Anacardium occidentale L.)
kernels: effect of different shelling methods. J Agric Food Chem.
12;58(9):5341-6.
Kusnandar, F. 2010. Kimia Pangan : Komponen Makro. Dian Rakyat, Jakarta
Kusrini, D. dan Ismardiyanto, M. (2003). Asam Anakardat dari Kulit Jambu Mete
(Anacardium occidentale L) yang Mempunyai Aktivitas Sitotoksik.
JSKA. VI. (1): 1-4
Langat, M. K. 2011. Chemical Constituents of East European Forest Species. In.
A.F. Standart, Book of Extended Extracts. Kenya. pp 77-78.
Leong L.P., Shui, G., 2002. An Investigation of Antioxidant Capacity of Fruits in
Singapore Markets, Food Chemistry.
Liyana, P. C. dan Shahidi, F. 2005. Optimization of Extraction of Phenolic
Compounds from Wheat using Response Surface Methodology. Food
Chemistry 93: 47–56.
Mahanom, H., A.H. Azizah and M.H. Dzulkifly. 1999. Effect of Different Drying
Methods on Concentrations of Several Phytochemicals in Herbal
Preparation of 8 Medical Plants Leaves. Mal. J. Nurt 5:47-54.
Mandal, V., Y. Mohan, dan S. Hemalatha. 2007. Microwave Assisted Extraction
An Innovative and Promising Extraction Tool For Medicinal Plant
Research. Pharmacognosy Review.1(1).
56
Miryanti, dan Arry. 2011. Ekstraksi Antioksidan dari Kulit Buah Manggis
(Garciana mangostana L). Laporan Penelitian Lembaga Penelitian dan
Pengabdian Masyarakat. Bandung: Universitas Katolik Parahyangan.
Molyneux. 2004. The Use of Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)
for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin Journal Science
Technology, 26(2): 211-219.
Nair Cl, Jayachandran K, dan Shashidar S. 2008. Biodegradation of Phenol.
African Journal of Biotechnology. 7. 4951-4958
Nandi, B. K. 2011. Cashew Nut Nutritional Aspects. http://www.fao.org/
docrep/005/ac451e/ac451e0b.htm. diakses tanggal 21 Februari 2018
Nugroho, A. E., Suhardjono, D., Mulyono, S.A, dan Malik, A. 2013. Total
Flavanoid and Fenolik Contents and in Vitro Antyhipertention Activity of
Indonesia Cashew Leaves Anacardiumoccidentale L. Fakultas Farmasi.
UGM. Yogyakarta.
Oktavia, J.D. 2011. ―Pengoptimuman Ekstraksi Flavonoid Daun Salam
(Syzygium polyanthum) dan Analisis Sidik Jari Dengan Kromatografi
Lapis Tipis‖. Skripsi. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam Institut Pertanian Bogor. Hal: 4;11
Parwata, I.M.O.A., Wiwik, S.R, dan Raditya, Y. 2009. Isolasi dan Uji Antiradikal
Bebas Munyak Atsiri pada Daun Sirih (Piper betle) secara Spektroskopi
Ultra Violet-Tampak. Jurnal Kimia, 3(1): 7-13.
Prakash, A., 2001, Antioxidant Activity, Medallion Laboratories Analytical
Progress, vol. 19, No.2.
Putra, G, P, G, Wartini, N, M, dan Anggreni, A, A, M, D. 2009. Karakterisasi
enzim polifenol oksidase biji kakao (Theobroma cacao Linn.). Agritech.
30(3)
Reza, M. 2013. Kandungan Gizi dan Manfaat Kacang Mete.
http://kesehatan.kompasiana.com/makanan/2013/10/16/kandungan-gizi-
dan-manfaat-kacang-mete-601867.html. 20 Februari 2018.
Riadini, R.K., B.Boy, R.S., dan F.Sinung, P., 2015. ―Uji Aktivitas Antioksidan
Ekstrak Daun Sambung Nyawa (Gynurapro cumbens (Lour.) Merr)
Berdasarkan Perbedaan Metode Ekstraksi dan Umur Panen‖. e-journal.
Hal:11
Roy, M.K., Juneja, L.R., Isobe, S. and Tsushida, T. 2009. Steam processed
broccoli (Brassica oleracea) has higher antioxidant activity in chemical
and cellular assay systems. Food Chem. 114: 263-269.
57
Rukmana, N. 2009. Indonesia Pengekspor Mete Terbesar. http://bisnisukm.
com/indonesia-pengekspor-mete-terbesar.html. 20 Februari 2018.
Sahgal, G.,Ramanathan,S., Sasidharan,S.,Mordi, M.N., Ismail, S.,and Mansor,
S.M. 2009. In Vitro Antioxidant and Xanthine Oxidase Inhibitory
Activities of Methanolic Swietenia mahagoni Seed Extracts. Molecules,
14: 4476-4485. Turkmen
Santoso, J and Siti Anwariyah. 2012. Phenol Content, Antioxidant Activity And
Fibers Profile Of Four Tropical Seagrasses From Indonesia. Journal of
Coastal Develpopment, 15(2) :189-196.
Santoso dan Singgih. 2017. Menguasai statistik dengan SPSS 24. Jakarta: PT.
Elexmedia Komputindo.
Sari, D. K., D.D.H. Wardhani., dan A. Prasetyaningrum. 2012. Pengujian
Kandungan Total Kappahycus alvarezzi dengan Metode Ekstraksi
Ultrasonik dengan Variasi Suhu dan Waktu 19(1):209-215.
Sen S, Chakraborty R, Sridahar C, and Reddy YSR, De B. 2010. Free radical,
antioxidant, disease and phytomedicines: current status and future
prospect. International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and
Research 3(1): 91-100.
Sharma, G. N., S. K. Dubey, N. Santi and J. Sanadaya. 2011. Phytochemical
Screening and Estimation of Total Phenolic Contant in Aegle marmelos
Seeds. International journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 3
(2): 27-29.
Sirait, M. 2007. Penurunan Fitokimia Dalam Farmasi. Institut Teknologi
Bandung, Bandung.
Soehendro AW, Manuhara GJ dan Nurhartadi E. 2015. Pengaruh suhu terhadap
aktivitas antioksidan dan antimikroba ekstrak biji melinjo (Gnetum
gnemon L.) dengan pelarut etanol dan air. Jurnal Teknosains Pangan.
4(4): 15-24.
Sukardi, Mulyarto A.R dan Safera W., 2007, Optimasi Waktu Ekstraksi Terhadap
Kandungan Tanin Pada Bubuk Ekstrak Daun Jambu Biji (Psidii Folium)
Serta Biaya Produksinya, Malang, Jurusan Teknologi Industri Pertanian,
Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya.
Suprapti, M. L. 2004. Jelly Jambu Mete. Kanisius, Yogyakarta
Sutanto dan Ratuca S. 2012. Pengaruh pH Substrat terhadap Kadar Serat, Vitamin
C dan Tingkat Penerimaan Nata de Cashew (Anacardium occidentale L).
Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Bogor
58
Tatke, P, dan Y. Jaiswal. 2011. An Overview of Microwave Assisted Extraction
and its Applications in Herbal Drug Research. Research Journal of
Medicinal Plant, 5 (1): 21-31.
Wazir Dayana, Syahida Ahmad, Radzali Muse, Maziah Mahmood dan MY
Shukor. 2011. Antioxidant Activities of Different Parts of Gnetum
gnemon L. Journal Plant Biochemistry and Biotechnology.
Win, M. M., A. A. Abdul., B. S. Baharin., F. Anwar., Sabu, dan M. S. Pak-Dek.
2011. Phenolic Compounds And Antioxidant Activity Of Peanut’s Skin,
Hull, Raw Kernel and Roasted Kernel Flour. Pak. J. Bot. 43(3): 1635-
1642.
Winarsih, H,. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Kanisius. Yogyakarta.
Winata, H. 2011. Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Kimiawi Ekstrak Daun
Wungu (Graptpphyllum pictum L. Grift.). Skripsi. Institut Pertanian
Bogor, Bogor.
Winata, E. dan Yunianta. 2015. Ekstraksi Antosianin Buah Murbei (Morusalba
L.) Metode Ultrasonic Batch (Kajian Waktu dan Rasio Bahan : Pelarut),
Jurnal Pangan dan Agroindustri. 3(2) 773-783.
Xu, B.J. and Chang, S.K.C. 2007. A comparative study on phenolic profiles and
antioxidant of legumes affected by extraction. Journal of Food Science.
72: 59-66.
Yahaya, A. T., Taiwo, O., Shittu, T. R., Yahaya, L. E., and Jayeola, C. O., 2012.
Investment in Cashew Kernel Oil Prouction: Cost and Return Analysis of
Three Processing Methods. American Journal of Economics
Yangthong, M., H.T. Nongporn, and W. Phromkunthong. 2009. Antioxidant
activities of four edible seaweeds from the southern coast of Thailand.
Plant Foods Human Nutr, 64: 218-223
59
LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Analisa Statistik Rendemen
RENDEMEN (%)
Descriptives
rendemen
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence Interval for
Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
P0 3 ,3467 ,01155 ,00667 ,3180 ,3754 ,34 ,36
P1 3 1,3267 ,01155 ,00667 1,2980 1,3554 1,32 1,34
P2 3 1,6767 ,00577 ,00333 1,6623 1,6910 1,67 1,68
P3 3 3,9267 ,01155 ,00667 3,8980 3,9554 3,92 3,94
P4 3 4,4567 ,00577 ,00333 4,4423 4,4710 4,45 4,46
P5 3 3,0500 ,00000 ,00000 3,0500 3,0500 3,05 3,05
Total 18 2,4639 1,50589 ,35494 1,7150 3,2128 ,34 4,46
Test of Homogeneity of Variances
rendemen
Levene Statistic df1 df2 Sig.
4,571 5 12 ,014
ANOVA
rendemen
Sum of Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups 38,550 5 7,710 99128,814 ,000
Within Groups ,001 12 ,000
Total 38,551 17
60
Post Hoc Tests Homogeneous Subsets
Rendemen
Duncana
perlakuan N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6
P0 3 ,3467
P1 3 1,3267
P2 3 1,6767
P5 3 3,0500
P3 3 3,9267
P4 3 4,4567
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
Descriptives Fenol
N Mean Std.
Deviation Std.
Error
95% Confidence Interval for Mean
Min Max Lower Bound
Upper Bound
P0 3 ,329933 ,0024502 ,0014146 ,323847 ,336020 ,3275 ,3324 P1 3 ,393667 ,0025541 ,0014746 ,387322 ,400011 ,3908 ,3957 P2 3 ,492233 ,0031786 ,0018352 ,484337 ,500129 ,4897 ,4958 P3 3 ,501633 ,0026083 ,0015059 ,495154 ,508113 ,4997 ,5046 P4 3 ,844900 ,0060000 ,0034641 ,829995 ,859805 ,8389 ,8509 P5 3 ,529133 ,0024502 ,0014146 ,523047 ,535220 ,5267 ,5316 Total 18 ,515250 ,1673757 ,0394508 ,432016 ,598484 ,3275 ,8509
61
Lampiran 2. Hasil Analisa Statistik Uji Fenolik
Test of Homogeneity of Variances
Fenol
Levene Statistic df1 df2 Sig.
,739 5 12 ,609
ANOVA
Fenol Sum of Squares df Mean
Square
F Sig.
Between
Groups
,476 5 ,095 7997,666 ,000
Within
Groups
,000 12 ,000
Total ,476 17
Fenol
Duncana
Perlakuan N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6
P0 3 ,329933
P1 3 ,393667
P2 3 ,492233
P3 3 ,501633
P5 3 ,529133
P4 3 ,844900
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
62
Lampiran 3. Hasil Analisa Statistik Uji Flavonoid
Test of Homogeneity of Variances
Flavonoid
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1,997 5 12 ,151
ANOVA
Flavonoid Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups ,002 5 ,000 10,077 ,001
Within Groups ,000 12 ,000
Total ,002 17
Flavonoid
Duncana
Perlakuan N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4
P0 3 ,057167
P1 3 ,066800 ,066800
P2 3 ,072133 ,072133
P3 3 ,073133 ,073133
P5 3 ,081633 ,081633
P4 3 ,086233
Sig. ,059 ,217 ,074 ,340
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
Descriptives
Flavonoid N Mean Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Min Max
Lower
Bound
Upper
Bound
P0 3 ,057167 ,0084560 ,0048821 ,036161 ,078172 ,0498 ,0664
P1 3 ,066800 ,0028000 ,0016166 ,059844 ,073756 ,0640 ,0696
P2 3 ,072133 ,0055501 ,0032043 ,058346 ,085920 ,0666 ,0777
P3 3 ,073133 ,0016166 ,0009333 ,069118 ,077149 ,0722 ,0750
P4 3 ,086233 ,0078520 ,0045333 ,066728 ,105739 ,0817 ,0953
P5 3 ,081633 ,0042771 ,0024694 ,071009 ,092258 ,0779 ,0863
Total 18 ,072850 ,0108565 ,0025589 ,067451 ,078249 ,0498 ,0953
63
Lampiran 4. Hasil Analisa Statistik Uji Tanin
Test of Homogeneity of Variances
Tanin
Levene Statistic df1 df2 Sig.
,710 5 12 ,627
ANOVA
Tanin Sum of Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups ,607 5 ,121 9337,394 ,000
Within Groups ,000 12 ,000
Total ,607 17
Descriptives
Tanin N Mean Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence Interval
for Mean
Min Max
Lower
Bound
Upper
Bound
P0 3 ,355033 ,0025502 ,0014723 ,348698 ,361368 ,3525 ,3576
P1 3 ,421767 ,0026502 ,0015301 ,415183 ,428350 ,4188 ,4239
P2 3 ,525000 ,0032187 ,0018583 ,517004 ,532996 ,5220 ,5284
P3 3 ,534233 ,0029160 ,0016836 ,526989 ,541477 ,5325 ,5376
P4 3 ,933233 ,0062501 ,0036085 ,917707 ,948759 ,9270 ,9395
P5 3 ,563333 ,0025502 ,0014723 ,556998 ,569668 ,5608 ,5659
Total 18 ,555433 ,1889210 ,0445291 ,461485 ,649382 ,3525 ,9395
Tanin
Duncana
Perlakuan N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6
P0 3 ,355033
P1 3 ,421767
P2 3 ,525000
P3 3 ,534233
P5 3 ,563333
P4 3 ,933233
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
64
Lampiran 5. Hasil Analisa Statistik Uji Aktivitas Antioksidan
Test of Homogeneity of Variances
Aktivitas_Antioksidan
Levene Statistic df1 df2 Sig.
,239 5 12 ,937
ANOVA
Aktivitas_Antioksidan Sum of Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups 347,905 5 69,581 592,479 ,000
Within Groups 1,409 12 ,117
Total 349,315 17
Descriptives
Aktivitas_Antioksidan N Mean Std.
Deviation
Std. Error 95% Confidence Interval
for Mean
Min Max
Lower
Bound
Upper
Bound
P0 3 30,302967 ,3387069 ,1955525 29,461572 31,144361 29,9334 30,5986
P1 3 32,963767 ,3386414 ,1955147 32,122535 33,804999 32,5943 33,2594
P2 3 34,737567 ,3387069 ,1955525 33,896172 35,578961 34,3680 35,0332
P3 3 37,176567 ,3387069 ,1955525 36,335172 38,017961 36,8070 37,4722
P4 3 42,572000 ,2217000 ,1279986 42,021267 43,122733 42,3503 42,7937
P5 3 41,463367 ,4434500 ,2560260 40,361776 42,564958 41,0199 41,9068
Total 18 36,536039 4,5329820 1,0684341 34,281840 38,790238 29,9334 42,7937
65
Lampiran 6. Pembuatan Etanol 70 %
Pembuatan Etanol 70% sebanyak 2000 ml
Cara Pembuatan :
1. Diukur Etanol 96% sebanyak 729 ml
2. Dimasukkan kedalam labu takar 1000 ml
3. Ditambahkan Aquadest add 1000 ml hingga garis batas
4. Ulangi Pengenceran sebanyak 2 kali hingga didapat Etanol 70% sebanyak
2000 ml
5. Dimasukkan Etanol 2000 ml kedalam botol coklat, Dihomogenkan
Duncana
Perlakuan N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6
P0 3 30,302967
P1 3 32,963767
P2 3 34,737567
P3 3 37,176567
P5 3 41,463367
P4 3 42,572000
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
66
Lampiran 7. Pengukuran Suhu Pada Microwave
Power Microwave 40P setara dengan 320 Watt
Waktu Suhu
2 menit 37oC
4 menit 39oC
6 menit 41oC
8 menit 43oC
10 menit 45oC
67
Lampiran 8. Dokumentasi Hasil Penelitian
Tepung Kacang Mete
Alkohol 96 %
Microwave Assisted Extraction
Kacang Mete
Segar