veq proteine specifiche ciclo 2016...2016/11/14 · cv 2016 prestazione metodo max iga immunodiff....
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Paolo Chiarugi
U.O. Analisi Chimico-Cliniche
AOUPPisa
VEQ Proteine SpecificheVEQ Proteine SpecificheCiclo 2016Ciclo 2016
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Proteine Specifiche o Aspecifiche ?Proteine Specifiche o Aspecifiche ?PROTEINAPROTEINA Val.Rif. (g/L)Val.Rif. (g/L) SintesiSintesi
Alfa 1 Alfa 1 -- AntitripsinaAntitripsina 0,9 0,9 -- 2,02,0 FegatoFegato
Alfa 1 Glicoproteina AcidaAlfa 1 Glicoproteina Acida 0,5 0,5 -- 1,21,2 FegatoFegato
Alfa 2 Alfa 2 -- MacroglobulinaMacroglobulina 1,3 1,3 –– 3,03,0 FegatoFegato
AptoglobinaAptoglobina 0,3 0,3 –– 2,02,0 FegatoFegato
Beta 2 Beta 2 -- MicroglobulinaMicroglobulina 0,0008 0,0008 –– 0,00250,0025 UbiquitariaUbiquitaria
C3C3 0,9 0,9 –– 1,81,8 FegatoFegato
C4C4 0,1 0,1 –– 0,40,4 FegatoFegato
CeruloplasminaCeruloplasmina 0,2 0,2 –– 0,60,6 FegatoFegato
Cistatina CCistatina C 0,0006 0,0006 –– 0,00140,0014 UbiquitariaUbiquitaria
Fattore ReumatoideFattore Reumatoide <10 UI/mL<10 UI/mL S.I.S.I.
IgAIgA 0,7 0,7 –– 4,04,0 S.I.S.I.
IgEIgE <0,00043<0,00043 S.I.S.I.
IgGIgG 7 7 –– 1616 S.I.S.I.
IgMIgM 0,4 0,4 –– 2,32,3 S.I.S.I.
KappaKappa--Catena LeggeraCatena Leggera 2 2 -- 44 S.I.S.I.
LambdaLambda--Catena LeggeraCatena Leggera 1 1 –– 2,42,4 S.I.S.I.
Proteina C ReattivaProteina C Reattiva < 0,005< 0,005 FegatoFegato
PrealbuminaPrealbumina 0,2 0,2 –– 0,40,4 FegatoFegato
Proteina Legante il RetinoloProteina Legante il Retinolo 0,03 0,03 –– 0,060,06 FegatoFegato
Recettore Solubile TransferrinaRecettore Solubile Transferrina 0,0008 0,0008 –– 0,00180,0018 UbiquitariaUbiquitaria
TransferrinaTransferrina 2,0 2,0 –– 3,63,6 FegatoFegato
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VEQ Proteine SpecificheVEQ Proteine Specifiche
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4,7
6,8
8,8
8,8
8,8
9,1
27,6
28,5
35,3
37,1
37,1
39,1
43,8
55,9
69,1
69,1
76,2
82,6
83,2
83,2
88,8
98,2
87,1
0 20 40 60 80 100 120
Proteina Legante Retinolo
Recettore Solubile Transferrina
Alfa 2 - Macroglobulina
Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG
Cistatina C
Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG
Prealbumina
Ceruloplasmina
Alfa 1 - Antitripsina
Kappa - Catena Leggera
Lambda - Catena Leggera
Aptoglobina
IgE
Beta 2 - Microglobulina
C3
C4
Alfa 1 Glicoproteina Acida
IgM
IgA
IgG
Fattore Reumatoide
Transferrina
PCR
Frequenza Frequenza di dosaggiodi dosaggio
340 CENTRI PARTECIPANTI, 18 REGIONI:Lombardia: 46%Toscana: 21%Piemonte: 7,5%Abruzzo: 6,6%Marche: 5%
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Metodi usati 20538 test, campioni 7 su 8Metodi usati 20538 test, campioni 7 su 8
METODO % VARIANTI
STRUMENTO e/o REAGENTE + STRUMENTO e/o REAGENTE +
USATOUSATO
AGGLUTINAZIONE 0,4 11 SIEMENS
CARD 0,1 4 I-CHROMA BODITECH
CHEMILUM. 1,2 12 IMMULITE 2000 MEDICAL SYSTEM
COLORIMETRICO 0,004 2 CHEMACOMP 100 G.D.
DRY CHEMISTRY 0,4 4 VITROS ORTHO
ELFA 1,13 2 VIDAS BIOMERIEUX
IMMUNODIFF. 1,7 13 LIOFILCHEM
IMMUNOENZ. 0,15 7 CHORUS DIESSE
IMMUNOFLUOR. 0,2 4 AIA TOSOH
IMMUNOPREC. 0,005 1 NYCOCARD SENTINEL
IMMUNOTURB. 64,4 167 COBAS ROCHE
MEIA 0,07 2 AXSYM ABBOTT
NEFELOMETRICO 28,5 34 B.N. SIEMENS
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% Metodi usati per analisi% Metodi usati per analisi
TURBIDIM. NEFELOM. RID ALTRO
Alfa 1 - Antitripsina 42 58 0 0
Alfa 1 Glicoproteina Acida 68 27 4 1
Alfa 2 - Macroglobulina 13 86 0 1
Aptoglobina 55 45 0 0
Beta 2 - Microglobulina 47 23 0 30
C3 68 29 3 0
C4 68 29 3 0
Ceruloplasmina 34 64 2 0
Cistatina C 15 85 0 0
Fattore Reumatoide 76 18 0 6
IgA 74 22 4 0
IgE 10 19 0 71
IgG 73 23 4 0
IgM 74 22 4 0
Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG 9 91 0 0
Kappa - Catena Leggera 40 60 0 0
Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG 8 92 0 0
Lambda - Catena Leggera 40 60 0 0
PCR 86 8 0 6
Prealbumina 55 45 0 0
Proteina Legante Retinolo 0 98 0 2
Recettore Solubile Transferrina 0 86 0 14
Transferrina 83 14 2 1
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CRM 470: la nuova era delle proteine specificheCRM 470: la nuova era delle proteine specifiche
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Cause Cause d’inaccuratezzad’inaccuratezza
Trasferimento dei valori da CRM a calibratori e controlli
Eterogeneità delle proteine
Effetto matrice
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ERMERM--DA470k/IFCCDA470k/IFCC
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%% VARIANTIVARIANTI STRUMENTO e/o STRUMENTO e/o REAGENTI + USATIREAGENTI + USATI
IMMUNODIFFUSIONE IMMUNODIFFUSIONE RADIALERADIALE
1,71,7 1313 SIEMENSSIEMENS
LIOFILCHEMLIOFILCHEM
MEDICMEDIC
HUMATECHHUMATECH
BIODEVICEBIODEVICE
NEFELOMETRIANEFELOMETRIA 28,528,5 3434 VISTAVISTA SIEMENSSIEMENS
BN II BN II SIEMENSSIEMENS
IMAGE IMAGE BECKMANBECKMAN
ARRAY 360ARRAY 360 BECKMANBECKMAN
TURBIDIMETRIATURBIDIMETRIA 64,464,4 167167 COBAS/MODULARCOBAS/MODULAR ROCHEROCHE
ARCHITECT ARCHITECT ABBOTTABBOTT
ADVIAADVIA SIEMENSSIEMENS
AU, LX, CX, DXAU, LX, CX, DX BECKMANBECKMAN
ILABILAB IL/BIOKITIL/BIOKIT
KONELABKONELAB SCLAVOSCLAVO
Principali Principali metodi metodi usatiusati
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Immunodiffusione RadialeImmunodiffusione Radiale
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NefelometriaNefelometria
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TurbidimetriaTurbidimetria
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Curva di HeidelbergerCurva di Heidelberger--KendallKendall
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0 5 10 15 20 25 30 35
Fattore Reumatoide
Cistatina C
Ceruloplasmina
C4
C3
Beta 2 - Microglobulina
Aptoglobina
Alfa 2 - Macroglobulina
Alfa 1 Glicoproteina Acida
Alfa 1 - Antitripsina
2005
2006
2007
2008
2009
2010
2011
2012
2013
2014
2015
2016
CVCV(media)(media)
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0 5 10 15 20 25
Transferrina
Recettore Solubile Transferrina
Proteina Legante il retinolo
Prealbumina
PCR
Lambda - Catena Leggera
Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG
Kappa - Catena Leggera
Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG
IgM
IgG
IgE
IgA
2005
2006
2007
2008
2009
2010
2011
2012
2013
2014
2015
2016
CVCV(media)(media)
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CVCV20162016
Analita Media Min MaxAlfa 1 - Antitripsina 5,2 2,8 10,3Alfa 1 Glicoproteina Acida 6,8 4,3 10,3Alfa 2 - Macroglobulina 15,8 15,0 16,6Aptoglobina 5,0 2,2 11,3Beta 2 - Microglobulina 9,0 4,5 22,2C3 4,6 2,4 7,6C4 5,5 3,7 10,7Ceruloplasmina 7,9 2,7 13,7Cistatina C 11,7 6,4 18,2Fattore Reumatoide 8,3 3,0 20,3IgA 4,8 2,2 23,4IgE 9,3 3,9 19,7IgG 4,4 1,8 18,7IgM 5,1 1,6 21,9Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG 5,0 4,3 6,5Kappa - Catena Leggera 6,3 4,3 9,2Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG 4,9 3,2 10,8Lambda - Catena Leggera 6,5 4,7 8,8PCR 6,0 3,2 16,5Prealbumina 6,7 2,8 12,1Proteina Legante Retinolo 6,3 6,3 6,3Recettore Solubile 8,2 0,4 11,1Transferrina 4,8 1,7 13,9
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CVCV20162016
Metodo Media Min MaxCHEMILUM. 11,4 7,6 20,0CHEMILUM. LIAISON 22,2 22,2 22,2DRY CHEMISTRY 10,8 7,7 16,5ELETTROCHEMIL ROCHE 6,8 5,3 8,6ELFA 13,4 6,0 22,2IMMUNODIFF. 19,1 9,7 23,4IMMUNOT.ROCHE COBAS 6-8000/MODULAR 4,0 2,2 9,1IMMUNOTURB SIEMENS 5,1 3,2 6,5IMMUNOTURB ADVIA SIEMENS 3,9 2,6 6,0IMMUNOTURB SIEMENS 8,6 5,4 14,0IMMUNOTURB ABBOTT ARCHITECT 5,2 3,1 10,0IMMUNOTURB BECKMAN RF LATEX 4,9 4,1 5,5IMMUNOTURB. 7,6 3,5 16,7IMMUNOTURB. ABBOTT ARCHITECT 3,5 2,1 6,0IMMUNOTURB. ADVIA SIEMENS 4,9 2,7 7,1IMMUNOTURB. BECKMAN AU 4,5 3,2 5,8IMMUNOTURB. BECKMAN AU 4,1 3,0 6,0IMMUNOTURB. BECKMAN LX/CX/DX 3,5 1,6 10,1IMMUNOTURB. I.L./BIOKIT 5,2 2,4 8,9IMMUNOTURB. INTEGRA 9,9 4,3 16,4IMMUNOTURB.ABBOTT ARCHITECT 7,7 4,3 11,4IMMUNOTURB.BECKMAN AU 3,5 2,3 4,0IMMUNOTURB.ROCHE COBAS 6- 3,4 2,9 3,7NEFEL. BECKMAN IMAGE 4,9 4,2 6,5NEFELOM .BECKMAN IMAGE 5,0 4,1 6,7NEFELOM. BECKMAN 5,6 3,3 7,6NEFELOM. BECKMAN IMAGE 5,3 3,1 6,5NEFELOM. SIEMENS 5,8 0,4 11,1NEFELOM. SIEMENS BN 7,7 3,6 20,3NEFELOMET.- BECKMAN 6,8 2,8 10,3NEFELOMETRICO 5,9 2,8 18,7NEFELOMETRICO BECKMAN 4,7 2,7 6,9NEFELOMETRICO/BECKMAN 10,1 8,3 13,7
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CV 2016CV 2016
Prestazione Metodo MaxIgA IMMUNODIFF. 23,4Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2Beta 2 - Microglobulina ELFA 22,2IgM IMMUNODIFF. 21,9Fattore Reumatoide NEFELOM. SIEMENS BN 20,3Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. 20,0IgE ELFA 19,7Alfa 1 - Antitripsina (Nefelom. Siemens) NEFELOMETRICO 18,7IgG IMMUNODIFF. 18,7Cistatina C NEFELOM. SIEMENS BN 18,2Fattore Reumatoide IMMUNOTURB. 16,7Alfa 2 - Macroglobulina NEFELOM. SIEMENS BN 16,6PCR DRY CHEMISTRY 16,5PCR IMMUNOTURB. INTEGRA 16,4IgE CHEMILUM. 14,1Fattore Reumatoide IMMUNOTURB SIEMENS 14,0Transferrina IMMUNOTURB. 13,9Fattore Reumatoide NEFELOMETRICO/BECKMAN 13,7Ceruloplasmina NEFELOMETRICO 13,7Prealbumina NEFELOM. SIEMENS BN 12,1
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VEQ ImmunoglobulineVEQ Immunoglobuline
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IgGIgGm
g/d
L 1Campione:
600
1200
1800
2400
NEFELOM. TURBIDIM. RID
2Campione:
NEFELOM. TURBIDIM. RID
3Campione:
600
1200
1800
2400
NEFELOM. TURBIDIM. RID
4Campione:
NEFELOM. TURBIDIM. RID
Media±DS
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IgGIgG
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
CV
%
1 2 3 4 5 6 7
Nefelom.
Turbidim.
RID
CVB
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PCRPCRm
g/L 1
Campione:
10
30
50
70
90
NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM.
2Campione:
NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM.
3Campione:
10
30
50
70
90
NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM.
4Campione:
NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM.
Media±DS
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PCRPCR
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
CV
%
1 2 3 4 5 6 7
Nefelom.
Turbidim.
Dry Chemistry
0,5.CVB
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PCR PCR ultrasensibileultrasensibile
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Fattore ReumatoideFattore Reumatoide
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Fattore ReumatoideFattore ReumatoideU
I/m
L 2Campione:
30
60
90
NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN.
3Campione:
NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN.
4Campione:
30
60
90
NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN.
5Campione:
NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN.
Media±DS
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Fattore ReumatoideFattore Reumatoide
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
CV
%
1 2 3 4 5 6 7
Nefelom.
Turbidim.
Agglutinaz.
CVB
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Fattore Reumatoide (Turbidim.)Fattore Reumatoide (Turbidim.)U
I/m
L 1Campione:
30
60
90
ROCHE SIEMENS BECKMAN
2Campione:
ROCHE SIEMENS BECKMAN
3Campione:
30
60
90
ROCHE SIEMENS BECKMAN
4Campione:
ROCHE SIEMENS BECKMAN
Media±DS
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Fattore ReumatoideFattore Reumatoide
Standardizzazione non ERMStandardizzazione non ERM--DA470DA470
Non dosabile come Non dosabile come IgMIgM in unità di in unità di massamassa
Persistenza di metodi qualitativi Persistenza di metodi qualitativi --semiquantitativisemiquantitativi
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Recenti esordientiRecenti esordienti
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
CV
%
1 2 3 4 5 6 7
Recettore SolubileTransferrina
Cistatina C
CVB
NEFELOMETRICO SIEMENS
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Leggere le catene leggereLeggere le catene leggere
LIBEREK(3-19)mg/L(6-26)mg/L
LEGATEK(2-4)g/L(1-2,4)g/L
MONOCLONALI
POLICLONALI
MONOCLONALI
POLICLONALI
CATENE LEGGERE
ANTISIERI ANTI-CL TOTALI
ANTISIERI ANTI-CL LIBERE
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Leggere le catene leggereLeggere le catene leggere
LIBERE
LEGATE
MONOCLONALI
POLICLONALI
MONOCLONALI
POLICLONALI
CATENE LEGGERE ANTISIERI ANTI-CL TOTALI
Dosaggio CL totali k o λ come se fossero tutte libere
Dosaggio immunoglobuline che montano CL k o λ
Fattore di conversione = 150 (PMIgG) / 46 (2xPMCL) 3
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Leggere Leggere le catene le catene leggereleggere
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Kappa catena leggeraKappa catena leggera
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
CV
%
1 2 3 4 5 6 7
K(nefelom.)
K(turbidim.)
K(rif.IgG)
CVB
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Lambda catena leggeraLambda catena leggera
0
2
4
6
8
10
12
CV
%
1 2 3 4 5 6 7 8
L(nefelom.)
L(turbidim.)
L(rif.IgG)
CVB
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CL totaliCL totali
Dosaggio CL totali. Utilità clinica:
Rapporto k/ come indizio di monoclonalità
Parametro di follow-up per CM già tipizzate
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CL libereCL libere
![Page 39: VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2016...2016/11/14 · CV 2016 Prestazione Metodo Max IgA IMMUNODIFF. 23,4 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2 Beta 2 - Microglobulina ELFA](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042712/5f9e1f03ba05b632b326b795/html5/thumbnails/39.jpg)
CL libereCL libere
![Page 40: VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2016...2016/11/14 · CV 2016 Prestazione Metodo Max IgA IMMUNODIFF. 23,4 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2 Beta 2 - Microglobulina ELFA](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042712/5f9e1f03ba05b632b326b795/html5/thumbnails/40.jpg)
CL libereCL libere
![Page 41: VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2016...2016/11/14 · CV 2016 Prestazione Metodo Max IgA IMMUNODIFF. 23,4 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2 Beta 2 - Microglobulina ELFA](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042712/5f9e1f03ba05b632b326b795/html5/thumbnails/41.jpg)
CL libere: discrepanza CL libere: discrepanza tra letteratura e tra letteratura e praticapratica
Nonostante il crescente numero di pubblicazioni in materia e l’adattabilità del metodo sui principali strumenti, la maggior parte dei laboratori ignora il dosaggio delle CLL nel siero continuando ad utilizzare il dosaggio di CL totali, equivoco e destinato ad obsolescenza.
![Page 42: VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2016...2016/11/14 · CV 2016 Prestazione Metodo Max IgA IMMUNODIFF. 23,4 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2 Beta 2 - Microglobulina ELFA](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042712/5f9e1f03ba05b632b326b795/html5/thumbnails/42.jpg)
CL libere: CL libere: VEQVEQ
Variabilità fra strumenti
Problema dell’eccesso di antigene
![Page 43: VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2016...2016/11/14 · CV 2016 Prestazione Metodo Max IgA IMMUNODIFF. 23,4 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2 Beta 2 - Microglobulina ELFA](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042712/5f9e1f03ba05b632b326b795/html5/thumbnails/43.jpg)
Coming soon (?): Coming soon (?): HevyliteHevylite
![Page 44: VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2016...2016/11/14 · CV 2016 Prestazione Metodo Max IgA IMMUNODIFF. 23,4 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. LIAISON 22,2 Beta 2 - Microglobulina ELFA](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042712/5f9e1f03ba05b632b326b795/html5/thumbnails/44.jpg)
Proteine specifiche: conclusioniProteine specifiche: conclusioni
Variabilità inter- e intra-metodo:
Limiti di standardizzazione
Metodi manuali
Vecchie e nuove proteine:
Nuove esigenze cliniche
Svecchiamento del repertorio