vi khuan bacillus cereus

Download Vi khuan Bacillus cereus

Post on 20-Jun-2015

755 views

Category:

Documents

2 download

Embed Size (px)

TRANSCRIPT

BO CO TI U LU N:

VI KHU N BACILLUS CEREUS

1

N I DUNG1. M+

u - Gi i thi u Bacillus cereus

c i m Bacillus cereus + Tnh ch t sinh ha + Tnh ch t gy b nh

2.

c t v c ch sinh+ Gi i thi u chung v + C ch gy b nh

ct nh

c t Ba.cereus

3. Cc ph+ Ph + Ph

ng php xc

ng php truy n th ng ng php hi n i2

GI I THI U BAC. CEREUS

Tr c khu n Gram d Thu c gi i bacteria

ng

Ngnh (phylum) firmicutes L p (class) bacilli B (order) Bacillales H (family) Bacillaceaem Chi (genius) Bacillus3

Loi (species) Cereus

GI I THI U BAC. CEREUSTrong chi ny, ngoi loi cereus, cn c m t s loi khc nh :

Bacillus coagulans Bacillus subtilis Bacillus thuringiensis Bacillus natto Paenibacillus larvae4

GI I THI U B. CEREUS

c pht hi n

u tin c

trong m t ca nhi m

th c ph m vo n m 1955

Bacillus cereus l loi vi khu n hi u kh

Bo t d ng hnh ovan c kh n ng sinh nha boBacillus cereus trn knh hi n vi5

GI I THI U BAC. CEREUSBacillus cereus Infections Bacillus cereus subsp. mycoides. Gram stain

6

GI I THI U BAC. CEREUSBacillus cereus Infections Leifson flagella stain. B cereus food poisoning is often associated with contaminated rice containing heat-resistant B cereus spores.

7

C I M BACILLUS CEREUS

Tr c khu n Gr+ T o n i bo t Kch th c 0.5-1.5 x 2-4 m

Khng t o gip m, khng c kh n ng di ng

Nhi t

t i thch: 35-400CM hnh c u t o B.cereus8

pH t i thch: 4.5-9.3

C I M BACILLUS CEREUS

Trn MT NA hay TSA sau 24 gi t o khm l n, nh n nheo, x x

Trn MT BA t o dung huy t r ng Trn MT MYP (Mannitol Egg Yolk Polymixin): khm h ng chung quanh c vng sng

Trn MT Mossel (th ch cereus selective agar): khm to h ng chung quanh c vng sng 9

TNH CH T SINH HA B.CEREUS

Trn mi tr

ng

ng: ln

men glucose trong i u ki n hi u kh v k kh, khng ln men mantose

Kh nitrat thnh nitrit Phn gi i Tyroxin Catalase (+), Citrate (+)10

TNH CH T GY

C

Vi khu n Bacillus cereus phn b nhi u trong t nhin, nhi m vo cc lo i th c n qua m hay tr l nh lu, th ng gy ng c th c ph m

11

CT

C A BACILLUS CEREUSc th c ph m

Pht hi n

u tin cc v cc m m b nh gy ng

do vk bac.cereus l t n m 1949 khi Hauge phn l p m u t x t vani sau khi c m t ca ng b nh vi n v b o qu n phn l p nhi u n nhi t c th c ph m gy tiu ch y t i c n u tr n khi s d ng. c khi tiu th kh ng nh Oslo, Norway. X t vani phng cho

B. cerus l nguyn nhn gy ng n n ng

c, Hauge pht tri n m u

kho ng 4x106 ml-1 v cho vo 200ml

cocktail. Sau khi u ng13h, ng c m th y au b ng v i tiu ra c, tri u ch ng ny dai d ng kho ng 8h.12

CT

C A BACILLUS CEREUS

c t gy tiu ch y (Diarrhoed toxin): Vi khu n s n sinh c t trn th t , rau qu , gia v . B n ch t l m t lo i protein gy h y ho i bi u b v nim m c ru t, gy tiu ch y c th nguy hi m n tnh m ng. c t gy nn m a emetic toxin: Vi khu n nhi m trong g o, c m ngu i, u cc lo i. B n ch t c t l phospholipit c tnh n nh cao khng b phn h y nhi t cao v d ch d dy. Ngoi ra vi khu n cn c enzyme hemolyzin l m t protein gy c m nh c th gy ch t ng i. c t ny c th trung ha b i cholesterol trong huy t thanh nh ng n gp ph n cho s pht tri n c a vi khu n Bacillus cereus c th gy ra s nhi m trng v nhi m c khc nhau nh : nhi m trng mu, vim mng no, v nhi m trng m t.13

TRI U CH NG TRNG

C

Th c n ch a m t gy c.

vi khu n: 105 vi khu n/g th c ph m

Bi u hi n: au b ng, bu n nn v nn sau 1-5 gi n ph i th c ph m nhi m vi khu n. B nh c th ko di 24 gi . Phng: khng n th c n ngu i qua m, th c n lun hm nng trn 800 C tr c khi n

14

TRI U CH NG TRNG

C

So snhc tnh B nv i nhi t pH Tnh nh y

c t type 1 v type 2Type 1 45oC/30 pht n nh pH 4-11 Type 2 120oC/90 pht n nh pH 2-11

Nh y v i enzyme protease v trypsin

Khng pepsin v trypsin

15

C CH SINH

CT

c t Emetic B ng 1-1 c i m c a b nh nn m a v tnh ch t c a tri u ch ng gy nn m a do B. Cereus Tnh ch t/ Ho t ng M t Li u nhi m c sl B.cereus: 105 - 108 tb/g th c ph m Kh i l ng c t 12 - 32 g/kg ct c s n sinh ra Trong th c ph m (25 300C) Th i k b nh n 5h Kho ng th i gian mang b nh 6 - 24h Tri u ch ng Bu n nn, nn m a Lo i th c ph m th ng g p nh t C m n u chin / chin, m ng, ph

16

C CH SINHEmetic Syndrome

CT

B ng 1-1 c i m c a b nh nn m a v tnh ch t c a tri u ch ng gy nn m a do B. Cereus Tn c a ct Cereulide C u trc c a Chu i pp [D-O-Leu-D-Ala-L-O-Val-L-Val] Kh i l ng phn t 1.2 kDa Sinh khng th Khng (none) Ho t ng sinh h c trn ng i Gy nn C quan nh n c m 5-HT3 Cytotoxic No Ho t ng trn t bo HEp-2 Ho t ng khng bo Kh n ng ch u nhi t 90 pht 1210C nh h ng c a s phn gi i protein Khng Vi c s n sinh ra c t nh th no (not known, but probably enzymatically)

17

C CH SINH

CT

Cereulide (polypeptide) l tn c a m t c t quan tr ng gy ra tri u ch ng nn m a do Bacillus cereus s n sinh ra. Bi bo ny nghin c u v qu trnh sinh t ng h p c t d a trn s b t th ng c a depsipeptide t 13C li t k ra trn 3 lo i ti n L- amino acid (Valin, Alanin, Leuzin) trn mi tr ng t ng h p trung gian. S phn tch ny c th c hi n d a vo m c c u t o phn t c a amino hay oxy acid qua NMR v ESI MS c a ph ng php quang ph trn cereulide v s n ph m th y phn l cc dipeptide c a n. S h p nh t c a 13C l chi m n 95% trong OVal, O-Leu v L-Val, trong khi ch c 40% 13C l k t h p trong D-Ala c a Cereulide.

18

C CH SINHDiarrheal Syndrome

CT

- Na-Uy, hai l n b c pht x y ra v i r t nhi u ng i sau khi n th t h m v i khoai ty v rau. Li u l ng gy b nh x p x 104 105. L n u tin bng pht (1992), 17 24 ng i b ng c, 3 trong s cc b nh nhn ph i nh p vi n t 1 3 tu n, tri u ch ng b t u n ng 3 b nh nhn ny kh mu n (>24h). L n th hai, b nh bng pht vo thng 2 n m 1995. - Tri u ch ng tiu ch y do t nh t hai lo i c t ng ru t s n sinh ra trong su t qu trnh sinh tr ng c a B.cereus trong ru t non. S hnh thnh ct ng ru t y trong th c ph m d n n ng c v l thuy t m ni l c th , nh ng i v i th c ph m ph c v cho con ng i th y l i u khng th ch p nh n. i u ny x y ra khi, s l ng B.cereus t n t i trong th c ph m th p nh t l 106/g ho c /ml v l ng l n c a c t ng ru t ph i c hnh thnh ch ng ch u c v i pH c a d dy v enzyme 19 proteolytic c a t trng.

C CH SINH

CT

Diarrheal SyndromeB ng 1-2 c i m b nh tiu ch y gy ra b i ch ng vi khu n B. cereus c tnh Li u gy nhi m 105/g ho c /ml ct c s n sinh ra Trong ru t non Lo i c t Protein Th i k b nh 8 16h Kho ng th i gian mang b nh 12 24h au b ng dai d ng, i Tri u ch ng tiu nhi u n c, th nh tho ng bu n nn

20

C CH SINH

CT

Bo t c a B. cereus t m t u tin trn (ph n gi i thi u chung) l c phn bi t cho th y r ng chng c kh n ng bm vo cc t bo Caco-2 (trn cc t bo bi u m c a ng i). Sau khi bm vo, cc bo t ny n y m m m t cch nhanh chng (trong vng 1h), hnh thnh t bo B. cereus sinh d ng trn nh c a cc t bo bi u m, ti p l s n sinh ra c t , n u c t ny xu t hi n trong ng ru t, c t ng ru t s t p trung khoanh vng vng ngo i bin c a ng ru t s t ng cao h n trong lumen v v v y gy nn m i nguy l n h n v gy b nh m t cch tr m tr ng. M t i u c th x y ra i v i c ch ny l th i gian b nh s lu h n nh quan st.21

CC PH

NG PHP XC

NH

- Cc ph ng php truy n th ng: Ph ng php m khu n l c Ph ng php MPN - Cc ph ng php hi n i: Ph ng php RPLA Ph ng php ELISA Ph ng php PCR

22

PH NG PHP TRUY N TH NG

23

u & nh-

c i mt ti n

u i m: Khng ph i u t d ng c , thi t b - Nh c i m: nh y khng cao Yu c u k n ng thao tc T n nhi u ha ch t Th i gian phn tch lu T n nhi u nhn cng

24

Cc

c tnh c a Bacillus nhm 1Loi c tnh Gram Catalase Di ng B.cereus +(a) + +/-(b) + + + + + + + B.thuringiensis + + +/+ + + + + + + B.mycoides + + -(c) + +/+ + + + + B.anthracis + + + -(d) + + + + -(d) B.megaterium + + +/-(d) +/+ 25

Kh nitrate Phn h y tyrosine Khng lysozyme Ph n ng v i lng tr ng

Ln men glucose Ph n ng VP Sinh acid t manitol Tan mu (c u)

Ph

ng php truy n th ngPh ng php m khu n l cM u ng nh t m u Phn l p Kh ng nh

m s khu n l c i n hnh

Nhu m Gram

Test sinh ha

26

Cch tnh k t qu :M t (CFU/ml)=AixDi/V

Ai:s khu n l c trung bnh/ a Di: pha long a (ml) V: Dung tch huy n ph t bo cho vo m i

27

Ph

ng php truyn th ngPh ng php MPNm

M u pha long vo peptone 9 ng mi tr Ch n ng ng TSP

c c y sang MYP

30oC/24-48h

Ch n khm h ng c vng sng

TSA th ch nghing Nhu m Gram, th sinh ha

28

Tra b ng MPN

Cc th nghi m phn bi t cc loi Bacillus nhm 1

Th nghi m tnh di B.thuringgiensis l di

ng: h u h t cc ch ng B.cereus; ng, B.anthracis, B.mycoides khng di ng

S hnh thnh r gi : B.cereus khng t o c u trc r gi , B.mycoides t o c u trc r gi

Th nghi m lm tan mu: B.cereus lm tan mu m nh, t o vng tan mu hon ton ( ) 2-4m, B.thuringiensis v B.mycoides c ng lm tan mu, B.anthracis th ng khng lm tan mu trong 24h ct ,29

S t o

c t protein d ng tinh th :B.thuringiensis t o tinh th ct

B.cereus v cc Bacillus khc khng t o tinh th

Tiu chu n vi sinh cho php trong th c ph m , B y t 4/1998G i h n cho php (CFU/g ho c CFU/ml th c ph m) Nhm th c ph m Nhm th t yTh t t i, th t ng, th t xay nh , th t nghi n, th t ch bi n yS n ph m ch bi n t th t: th t hun khi, pat, xc xch S n ph m ch bi n t ng c c, khoai c , u : yC n x l nhi t tr c khi dng: b t, mi n, m s i yDng tr c ti p khng x l nhi t: bnh b t Nhm th c n kh v ch a dinh d ng cho tr em, th c n thay th c bi t yPh i x l nhi t tr c khi s d ng yDng tr c ti p, khng qua x l nhi t B.cereus 102

Recommended

View more >