viroides mexico 1
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Los viroides de los cítricos:
Enfermedades y control
Núria Duran-Vila
Departamento de Protección Vegetal y Biotecnología
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
• El descubrimiento de los viroide como
agentes patógenos de citricos está
ligado a su propagación por injerto.
LOS VIROIDES DE LOS CITRICOS
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Historia de los cítricos injertados (1)
España 1850: Utilización de plantas injertadas
en lugar de plantas de semilla. Elección de un
buen patrón (cidro, limonero, naranjo dulce,
naranjo agrio,....
España 1862: La mayoría de patrones resultaron
ser sensibles a Phytophthora.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Phytophthora gummosis
on sweet orange seedling tree,
Bijayachap, Nepal, 1994
Daños producidos por PhytophthoraI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Historia de los cítricos injertados (2)
España 1862: La mayoría de patrones resultan ser
sensibles a Phytophthora. EL NARANJO AGRIO
resultó ser resistente.
España 1870: Auge del naranjo agrio como patrón
tolerante en España, los países de la cuenca del
Mediterráneo, California y América del Sur.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Una nueva enfermedad en árboles
injertados en naranjo agrio: Tristeza
1904. Declinamiento de
árboles en Sudáfrica.
1930. Declinamiento rápido
de árboles en Argentina.
1937. La misma enfermedad
en Brasil.
1939. La misma enfermedad
en California.
Declinamiento rápido afectaba los árboles sobre naranjo
agrio, pero no los árboles sobre otros patrones. Riverside,
California.
Una nueva enfermedad en árboles
injertados en naranjo agrio: Tristeza
1946. La enfermedad es trasmisible por injerto
Probablemente causada por un virus
Los pulgones actuan como vectores
1963. Se observa el virus (CTV) por EM
Control de la TristezaCTV:
Afecta la combinación de dos individuos: patrón
(naranjo amargo) y variedad (naranjo dulce,
mandarino y otros)
Búsqueda de patrones alternativos que den
combinaciones tolerantes:Poncirus trifoliata y sus híbridos (citranges,
citrumelo), naranjo, mandarino Cleopatra,
tangelos, limón rugoso, lima Rangpur,
Citrus volkameriana,…I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Problemas asociados con la sustitución
del naranjo amargo (1)
Exocortis (California, 1948)
Scaly butt (Australia, 1949)
Rangpur lime disease (Brazil, 1956)
Descamaciones: P. trifoliata,
citranges, citrumelos (?), lima
Rangpur, .....
Un viroide es el agente causal: CEVd
Xiloporosis (Palestina, 1934)
Caquexia (Florida, 1950)
Acanaladuras y exudación de goma
en algunos patrones: lima dulce de
Palestine, tangelo Orlando, lima
Rangpur, C. macrophylla
Variedades: mandarinas, clementinas,
satumas, ....
Un viroide es el agente causal: HSVd
Problemas asociados con la sustitución
del naranjo amargo (2)
¿Qué son los viroides?
Los viroides no son virus
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Viroides• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Viroides• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Viroides• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos
Diagnóstico de viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos
Diagnóstico de viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos
Diagnóstico de viroides
exocortis
caquexia- xiloporosis
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
• Auto-complementaridad.
• Estructura secundaria en forma de varilla.
• Apareamiento de bases alternando con bucles.
• Estabilidad.
• Transmisión mecánica.
Estructura secundaria de los viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
• Auto-complementaridad.
• Estructura secundaria en forma de varilla.
• Apareamiento de bases alternando con bucles.
• Estabilidad.
• Transmisión mecánica.
Estructura secundaria de los viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Criterios de clasificación
• Pospiviroidae (PSTVd)
• Avsunviroidae (ASBVd)
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Viroides de cítricos
Familia Género Especie
Pospiviroidae Pospiviroid CEVd
Hostuviroid HSVd
Cocadviroid CBCVd (CVd-IV)
Apscaviroid CBLVd (CVd-I)
Apscaviroid CDVd (CVd-III)
Apscaviroid “CVd-OS”
Apscaviroid “CVd-V”I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
CBLVd
HSVd
CEVd
CDVd
CVd-IV
Viroides de cítricos
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
CBLVd
HSVd
CEVd
CDVd
CVd-IV
Viroides de cítricos
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Enfermedades
producidas por viroides
Viroide Enfermedad
CEVd Exocortis
HSVd Caquexia (xiloporosis)
CBCVd
CBLVd
CDVd
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Enfermedades
producidas por viroides
• Exocortis producida por CEVd
• Caquexia producida por HSVd
• Efecto de otros viroides
• Métodos de control
• Otras enfermedades atribuidas a viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
CEVd es el agente causal de exocortisDescamaciones de la corteza en P. trifoliata
Exocortis•Clementino injertado en Poncirus trifoliata
•Escamas en el patrón Poncirus trifoliata
•Enanismo acusado
EnanismoI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Exocortis: CitrangesI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Exocortis: Citranges I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Exocortis: Citranges I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Exocortis: Clementino / C. carrizo
Exocortis: Navelina / C. carrizo
Síntomas en lima RangpurI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Síntomas en lima RangpurI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
HSVd es el agente causal de caquexiaExhudaciones de goma en tangelo Orlando
Síntomas en Citrus macrophylla
Síntomas en C.macrophylla como
patrón de limonero
Síntomas en clementino
Cachexia
No-cachexia
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Síntomas de cachexia en
mandarino Parson’s I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
¿Qué producen los otros viroides?
Otros síntomas causados por
viroides en P. trifoliata
CEVd HSVd CVd-IV
Estos síntomas están asociados con
síntomas en corteza y madera
Viroide Escamas Grietas Enanismo
CEVd + + Acusado
CBLVd - - Leve
CVd-III - - Moderado
CVd-IV - + -
HSVd - + Leve
Resumen
Alteraciones en P. trifoliata
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Other alterations:
Enanismo
El enanismo causado por viroides
conduce a una reducción de la cosecha
Enanismo Cosecha
Control - 100%
CEVd Acusado 54%
CBLVd Leve 81%
CDVd Moderado 66%
CVd-IV - 99%
HSVd Leve 98%
Disminución de la cosecha
Las plantaciones de cítricos
Cualquier árbol sobre Poncirus trifoliata,
lima Rangpur, citrange Troyer o Carrizo es
sensible a exocortis y a otros viroides.
Cualquier árbol sobre C. macrophylla
es sensible a caquexia – xiloporosis.
Todos los mandarinos, clementinos,
satsumas e híbridos sobre cualquier patrón
son sensibles a caquexia – xiloporosis
El material vegetal en relación a estas
enfermedades
Disponibilidad de plantas libres de viroides
(viveros autorizados)
Distribución de plantas portadoras de viroides
(viveros clandestinos)
Coexistencia de plantaciones antiguas sobre
naranjo amargo que aunque no manifiestan
síntomas son portadoras de viroides
Control
Epidemiología
• No se conocen vectores
• No hay transmisión por semilla
• Dispersión de las enfermedades:
Propagación de material infectado
Transmisión mecánica
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Las plantas portadoras de viroides son
reservorios desde los que pueden ser
transmitidos a plantas inicialmente sanas
Modo de transmisión:
• Propagación
• Sobreinjerto
• Transmisión mecánica
Control de las enfermedades
producidas por viroides
• Utilizar material de propagación sano
• Utilizar yemas procedentes de plantas
sanas para el sobreinjerto
• Evitar la difusión de viroides mediante
transmisión mecánica
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Uso de material libre de viroides para la
propagación
Se necesitan métodos de detección
Se necesitan métodos de saneamiento
Cuarentena y certificación
Evitar la transmisión mecánica
Viveros
Plantaciones comerciales
Control de las enfermedades
producidas por viroides
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Métodos de detección
Bioensayo
Transmisión a plantas indicadoras
Observación de síntomas
Detección por métodos de laboratorio
Análisis de ácidos nucleicos
Detección biológica + laboratorio
El cidro actua como amplificador
Análisis de ácidos nucleicosI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Bioensayo
Bioensayo de exocortis
Uso de cidro Etrog como indicator
Se detectan los otros viroides
Bioensayo de caquexia
Mandariono Parson’s Special
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Respuesta del cidro Etrog
• Inoculation por injerto del cidro Etrog
• Incubación a 28-32ºC durante 3-6 meses
• Observación de síntomas
CEVd HSVd
Respuesta del mandarino Parson’s Special
• Inoculación por injerto del mandarino Parson’s
propagado sobre un patrón vigoroso.
• Incubación a 28-32ºC durante 9-15 meses
• Observación de síntomas en la unión
Métodos de diagnóstico
+
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Métodos de diagnóstico
+
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Métodos de diagnóstico
+
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Hibridación Northern
RT-PCR
Evitar la transmisión mecánica
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Otras enfermedades atribuidas a
viroides
“Quebra galho”
Corteza gomosa (“gummy bark”)
Bolsas de goma-acanaladuras gomosas
(“Gum pocket - Gummy pitting”)
Enfermedad de Kassala (“Kassala disease”)
“Quebra-galho”
Desorden observado en limón Persa
“Quebra-galho”: CEVd
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
“Quebra-galho”: CEVd
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
“Quebra-galho” no es “Wood pocket”
“Gummy bark”
Desorden descrito en naranjo dulce
Descrita en países del este del Mediterráneo,
Norte de Africa and Oriente próximo.
“Gum pocket - Gummy pitting”
Desorden descrito en P. trifoliata
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
“Kassala disease”
Desorden observado en toronja
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Dra. Carmen Fagoaga
Dr. Juan Romero Durbán
Dra. Ana Palacio Bielsa
Dr. Mohammed Chaffai
Dr. Ziad Ghaleb Nimer Fadda
Dra. Mónica GandíaDra. Cristiane de Jesús Barbosa
Dra. Karelia Velázquez
Dra. Lucía Bernad Palomares
Dr. Pedro Serra Alfonso
Mehdi Beni Hashemian, becario
Nubia Murcia, becaria
Esther Debón, becariaI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Dra. Carmen Fagoaga
Dr. Juan Romero Durbán
Dra. Ana Palacio Bielsa
Dr. Mohammed Chaffai
Dr. Ziad Ghaleb Nimer Fadda
Dra. Mónica GandíaDra. Cristiane de Jesús Barbosa
Dra. Karelia Velázquez
Dra. Lucía Bernad Palomares
Dr. Pedro Serra Alfonso
Mehdi Beni Hashemian, becario
Nubia Murcia, becaria
Esther Debón, becaria
Dolores Abanto Peiró
Margarita Bazzi
Ana Gabriela Pagliano
José María Corvera Llúcia Martinez Priego
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS