1

Závěrečná zpráva studie s přípravkem VIUSID VET

Název: Vliv přípravku VIUSID VET na zdraví a mléčnou produkci dojnic

Autor: Doc. MVDr. Josef Illek, DrSc., Dipl. ECBHM.

Veterinární a farmaceutická univerzita Brno Fakulta veterinárního lékařství

Klinická laboratoř pro velká zvířata

Dojnice, zejména v počátečních fázích laktace vyžadují nejen vysokou koncentraci energie v krmné dávce, ale i odpovídající množství dusíkatých a minerálních látek, vitaminů, optimální strukturu a zdravotní nezávadnost krmné dávky. Krmná dávka musí být chutná a musí zabezpečovat potřebné živiny pro organismus jako celek, ale i pro bachorový ekosystém. Především v období rozdojování a vysoké laktace je však vhodné zařadit do krmné dávky některá krmná aditiva, která mají stimulační vliv na fermentační procesy v bachoru, pozitivně ovlivňují intermediární metabolismus, snižují výskyt metabolických poruch, pozitivně ovlivňují produkci a fertilitu, či eliminují některé negativní vlivy dieteticky nevyvážené krmné dávky. V současné době používané aditivní látky u skotu jsou zaměřeny na ovlivnění fermentačních procesů v bachoru a na ovlivnění intermediárního metabolismu.

Do skupiny látek ovlivňujících fermentaci v bachoru náleží pufry, probiotika, prebiotika, oligosacharidy, organické kyseliny, propionáty, enzymy, alkoholy, éterické silice a jiné oleje. Do skupiny aditiv, které ovlivňují intermediární metabolismus, řadíme především niacin, cholin, biotin, L- karnitin, beta karoten, vitamin E, obdukované aminokyseliny - methionin a lyzin, dále omega 3 mastné kyseliny, aniontové suplementy a organické formy některých stopových prvků jako je selen, zinek, měď a mangan. Z nových aditivních přípravků se začíná uplatňovat VIUSID vet. Tento přípravek má prokázané hepatoprotektivní, imunomodulační, protizánětlivé, antivirové a antioxidační účinky.

VIUSID VET – doplňkový krmný přípravek

základní charakteristika Přípravek je vyráběn technologií MOLEKULÁRNÍ AKTIVACE. Tato inovativní metoda byla vyvinuta v laboratořích španělské farmaceutické firmy Catalysis:

Výrazně zvyšuje kapacitu antioxidantů – potvrzeno studií ORAC

Několikanásobně zesiluje biologickou aktivitu a účinnost všech komponent

Molekulová struktura látek zůstává zachována

2

Co obsahuje VIUSID VET společnosti Catalysis Imunomodulátory: arginin, glycin, kyselina glycyrrhizinová, kalcium pantothenát, zinek Hepatoprotektiva: kyselina listová, kyselina glycyrrhizinová, Vitamín B6 Vitaminy: B6, B12, kyselina askorbová, pantothenát kalcia Antioxidanty: kyselina jablečná, kyselina askorbová, kyselina glycyrrhizinová Antianemika: kyselina listová, vitamín B6 a B12 Biokatalyzátory: pantothenát zinku, pantothenát kalcia Prevence viróz: kyselina jablečná, kyselina glycyrrhizinová, glukosamin, kyselina ascorbová Protizánětlivý efekt: kyselina glycyrrhizinová, glukosamin

Složení ve 100 ml/100 g VIUSID VET: Kyselina jablečná 9,2 g Glukosamin 9,2 g Arginin 8,3 g Glycin 4,7 g Kyselina ascorbová (vitamín C) 2,3 g Monoamonná sůl kyseliny glycyrrhizinové 0,46 g Pyridoxin hydrochlorid (vitamín B6) 0,45 g Síran zinečnatý 0,23 g Kalcium pantothenát 0,23 g Kyselina listová 0,1 g Kyanokobalamin (vitamín B12) 0,01 g

Obecné dávkování: 15gramů/15 ml VIUSID vet na 100kg živé hmotnosti zvířete a den.

Cílem našeho sledování bylo ověřit účinky zkrmování přípravku VIUSID VET plv. u krav v provozních podmínkách na základě zadávacího protokolu společnosti Catalysis. Lokace: Studie byla provedena na farmě dojnic Uherčice společnosti ZEMOS, a.s. Kapacita farmy: 550 dojnic Plemeno: Holstein cross Pokusné skupiny dojnic: 20 dojnic 3 týdny před otelením, s předešlou laktací od 9,000 do 11,000 kg mléka (za 305 dnů) byly rozděleny do dvou pokusných skupin:

VIUSID vet, n=10 (11)

Kontrola, n=10 Housing and management: Sledované dojnice byly umístěny volně do kotců s podestýlkou slámy. V kotci se skupinou 1 (VIUSID VET) byla 1x denně prováděna aplikace práškového VIUSID vet do ranního krmení individuálně. Skupiny VIUSID VET a kontrola byly krmeny stejnou bazální krmnou dávkou během celého pokusu od počátku do 30 dnů laktace. Výživa: Krmení krav bylo realizováno směsnou krmnou dávkou 2x denně

Složení krmné dávky odpovídalo standartním požadavkům.

3

Krmná dávka VIUSID VET Uherčice 2016

krmivo dry cows

close-up cows

fresh cows

Siláž kukuřice kg 11 20 22,5

Senáž vojtěška kg 3 4 8,5

Senáž žito kg 4 5 5

Seno vojtěška kg 0 0,8 1,7

Seno luční kg 3 0,6 0

Sláma ječná kg 3 1 0

Řízky cukrovarské kg 4 3 4

Mláto pivovarské kg 0 0 3

CCM kg 0 0,5 0,8

Jadrná směs Př. kg 0,5 3 0

DOVP kg 0 0 6,8

Směs Mlk Start. kg 0 0 0,5

Minerální směs kg 0,17 0,17 0,2

Průběh pokusu: Do sledování bylo zařazeno 21 vysoko březích krav plemene Holstein, které byly

rozděleny na pokusnou skupinu 11 kusů a kontrolní skupinu 10 kusů. Pokusná skupina dostávala

bazální krmnou dávku s aplikací VIUSIDU VET individuálně na krmivo při ranním krmení v dávce 100 g

VIUSID VET plv. na dojnici. Přípravek VIUSID VET byl zkrmován 10 až 20 dnů před porodem až do 30.

dne po porodu.

Krávy z kontrolní skupiny dostávaly bazální krmnou dávku.

Monitoring: Byl sledován zdravotní stav krav, průběh porodu, množství a kvalita prvního kolostra,

odchod lůžka, puerperium, denní produkce mléka, složení a kvalita mléka a vitalita narozených telat.

Termíny odběru vzorků krve a bachorové tekutiny:

1 – dry cows (10-20 dnů před porodem)

2 – close-up cows (1-3 dny před porodem)

3 – fresh cows (2-3 dnů po porodu)

4 – fresh cows (10 - 15 dnů po porodu)

5 – 25 – 30 days postpartum( 25-30 dnů po porodu dnů po porodu)

Složení parametrů krve: Následující parametry byly analyzovány v krevním séru nebo krvi za použití standardizovaných analytických metod: celkové bílkoviny, albumin, celkový bilirubin, glukóza, močovina, celkový bilirubin, volné mastné kyseliny NEMK, BHB, triglyceridy TG, cholesterol (Chol.), AST, GMT, LDH, Ca, P, Mg, Zn, Cu, Se, GPx, SOD, celková antioxidační kapacita TAS. Celková antioxidační kapacita: Kvantitativní stanovení antioxidační kapacity in vitro (TAS) Hematologie krve: hematokrit, hemoglobin, erytrocyty (RBC), leukocyty (WBC), leukogram. Bachorová tekutina: pH, VFA, kyselina octová, kyselina propionová, kyselina máselná acid, kyselina valerová, kyselina mléčná, NH3 , infusoria Kolostrum: celkové bílkoviny, globuliny, vitamín A, vitamín E. Mléko: Tuky, bílkoviny, laktóza, močovina, počet somatických buněk (SCC) Telata: Metabolické a imunologické profily telat od matek z jednotlivých skupin byly sledovány dle odběrů 2. – 3. den po narození a 15. – 30. den věku.

4

VÝSLEDKY

Dry cows (C1) Krávy v období zaprahlosti nejevily klinické příznaky onemocnění. Jejich kondice byla optimální a pohybovala se v rozmezí 3,25 až 3,75 body condition score (BCS) u obou skupin. V každé skupině bylo vyšetřeno 6 vysoko březích krav. Hodnoty biochemických I hematologických parametrů se pohybovaly v referenčním rozmezí. U kontrolní skupiny byly zjištěny významně vyšší hodnoty SOD, snížené procento lymfocytů a monocytů a nižší obsah granulocytů. Bachorová tekutina nevykazovala patologické alterace během celého období studie a korespondovala s typem diety. Koncentrace čpavku byla u kontrolní skupiny významně vyšší, ale hodnoty nevybočovaly z referenčního rozmezí. Koncentrace TMK byly na spodní hranici referenční normy.

3-1 days prepartum (C2) Zdravotní stav krav u pokusné I kontrolní skupiny byl dobrý, krávy nejevily klinické příznaky onemocnění. Hodnoty biochemických parametrů krve byly u většiny krav v rozmezí referenčního rozmezí. Pouze u krávy č. 11 v pokusné skupině a u krávy č. 7 v kontrolní skupině byly zvýšené hodnoty bilirubinu. U krávy č. 1 pokusné skupiny (VIUSID VET) byla diagnostikována subklinická hypofosforémie a u poloviny krav subklinická karence zinku. U kontrolní skupiny byla subklinická karence zinku diagnostikována pouze u tří krav. Meziskupinový statisticky významný rozdíl byl zjištěn v koncentraci triglyceridů a SOD. Hematologickým vyšetřením byla zjištěna statisticky významně vyšší hodnota hemoglobinu u pokusné skupiny, a to v rozmezí referenčního rozmezí. U jedné krávy kontrolní skupiny byla diagnostikována anemie. Vyšetření bachorové tekutiny byla diagnostikována jednoduchá indigesce, charakterizovaná snížením koncentrace TMK, při čemž u krav pokusné skupiny byly hodnoty vyšší - 87,2 a 74,3.

2-3 days postpartum (C3) Zdravotní stav krav obou skupin byl dobrý, krávy pokusné I kontrolní skupiny nejevily klinické příznaky onemocnění, porody byly spontánní. U 1 krávy kontrolní skupiny došlo k zadržení placenty. U 2 krav pokusné skupiny I u 2 krav skupiny kontrolní se vyskytovala hypoproteinemie, u čtyř krav kontrolní skupiny byla koncentrace celkového bilirubinu zvýšená, přičemž rozdíl průměrných hodnot byl statisticky významný. U jedné krávy pokusné skupiny a u dvou krav skupiny kontrolní se vyskytovala lipomobilizace a subklinická ketóza. V každé skupině se vyskytovala jedna kráva se zvýšenou aktivitou AST. Ve srovnání s vyšetřením v období před porodem došlo k významnému snížení koncentrace vápníku a fosforu v krevním séru krav, meziskupinové rozdíly nebyly prokázány. U ojedinělých krav obou skupin byly zjištěny snížené koncentrace zinku a mědi v krevním séru bez významných meziskupinových rozdílů. Hodnoty selenu a GPX byly v rozmezí referenčních hodnot bez významných meziskupinových rozdílů. Statisticky vysoce významné rozdíly byly zjištěny v koncentraci vitamínu A. U krav obou skupin došlo ke snížení hodnot, přičemž u skupiny pokusné byly hodnoty významně vyšší. Hodnoty antioxidační kapacity byly u krav pokusné skupiny statisticky významně vyšší než u krav skupiny kontrolní. Hematologické parametry nejevily patologické příznaky a meziskupinové rozdíly nebyly významné.

10-15 days postpartum (C4) U dojnic obou skupin došlo k mírnému zhoršení BCS. Průběh puerperia byl u většiny krav fyziologický, pouze u dvou krav pokusné skupiny se vyskytla metritida, ale metritida byla zjištěna u čtyř krav kontrolní skupiny. U krávy č. 54 z kontrolní skupiny došlo k výrazné hypoproteinemii a hypoalbuminemia. U dojnic obou skupin byl pozorován mírný pokles glykémie. Koncentrace celkového hemoglobinu byla zvýšená u dvou krav v každé skupině, meziskupinové rozdíly však nebyly významné. U ojedinělých krav obou skupin probíhala lipomobilizace a vyskytovaly se subklinické ketózy. Byla zjištěna nevýznamně vyšší aktivita AST u dojnice č. 54 pokusné skupiny. Enormní zvýšení

5

aktivity AST bylo zjištěno u krávy č. 5 pokusné skupiny a u krávy č. 2 kontrolní skupiny. Výsledky poukazují na poškození jater. Zjištěné průměrné hodnoty AST byly zvýšené u obou skupin, ale rozdíl nebyl statisticky významný. U dojnic obou skupin se ojediněle vyskytovaly mírné hypokalcémie a hypofosforemie. Průměrné hodnoty nevykazovaly významné rozdíly. Hodnoty antioxidační kapacity byly u pokusné skupiny významně vyšší (13.09%). V hematologickém vyšetření nebyly zjištěny patologické hodnoty sledovaných parametrů. Mírná acidóza byla zjištěna analýzou bachorové tekutiny u některých krav obou skupin. Jaterní enzymy byly extrémně vysoké u jedné krávy pokusné skupiny VIUSID VET a jedné krávy kontrolní skupiny, což ovlivnilo průměrné hodnoty. Hladiny vápníku byly na nižším fyziologickém prahu. Hodnoty Zn a Cu byly u krav variabilní a v obou skupinách marginální nebo suboptimální. Hodnoty BHB a NEFA nebyly u pokusné skupiny VIUSID VET vyšší, což je indikace lipomobilizace. Krávy suplementované VIUSIDEM VET vykazovali vyšší produkci mléka. Celková antioxidační kapacita krve byla vyšší u pokusné skupiny VIUSID VET než u kontrolní skupiny (0,926 vs. 0,83). Krávy z pokusné skupiny VIUSID VET vykazovaly také vyšší hodnoty hematokritu, hemoglobinu a RBC ve srovnání s kontrolou. Vyšetřením bachorové tekutiny nebyly zjištěny rozdíly mezi oběma skupinami v tomto období. Byla diagnostikována a nuceně odporažena kráva s těžkou metritidou v kontrolní skupině. Její BCS bylo 2.5.

25-30 days postpartum (C5) U dojnic obou skupin se zvýšil příjem sušiny krmné dávky a zvýšila se produkce mléka. 30 denní monitoring produkce mléka ukázal průměrnou denní užitkovost dojnic pokusné skupiny 41 kg a u dojnic kontrolní skupiny 45 kg. U dvou krav pokusné skupiny došlo k postižení paznehtů laminitidou, u dvou krav kontrolní skupiny rovněž. Rovněž byla diagnostikována mastitida dojnic, a to u pokusné skupiny u jedné dojnice, u kontrolní skupiny u tří kusů. Metabolický profil u dojnic poukazuje na signifikantně sníženou koncentraci glukózy u pokusné skupiny, ve srovnání se skupinou kontrolní. U obou skupin dojnic se vyskytovala lipomobilizace, subklinická ketóza a narušená funkce jater. Subklinická ketóza byla diagnostikována u tří dojnic pokusné skupiny a u čtyř dojnic kontrolní skupiny. Tomu odpovídaly I zvýšené jaterní enzymy AST, GMT a LDH. Rovněž zjištěná hypokalcémie byla mírného stupně a vyskytla se u jedné dojnice pokusné skupiny a u dvou dojnic skupiny kontrolní. Celková antioxidační kapacita setrvávala na dřívějších hodnotách, přičemž u pokusné skupiny VIUSID došlo k zvýšení antioxidační kapacity. Sledované hematologické parametry nevykazovaly patologické hodnoty. Bachorová fermentace probíhala na dobré úrovní u všech krav, jednotlivé sledované parametry bachorové tekutiny se signifikantně nelišily.

Hodnocení produkce mléka: v kg

produkce za: minulá laktace současná laktace rozdíl Pokusná skupina 10 682 11 665 + 983 Kontrolní skupina 11 161 11 692 + 531 Skupina VIUSID Skupina kontrola Kontrola užitkovosti kg mléka SCC/1000 ml kg mléka SCC/1000 ml 1. 41 184 45 130 2 . 45 130 44 126 3. 44,4 200 40 571

6

Produkce mléka v kg za skupina VIUSID skupina kontrola

100 dnů laktace 4 471 4 306 rozdíl +165 kg

Skupina VIUSID Skupina kontrola Reprodukce hodnoceno ks 8 8 Zabřezlo po 1. inseminaci 3 1 Zabřezlo po všech inseminacích 5 4 Zdravotní stav – hodnoceno ks 11 10 Retence placenty 0 1 Metritidy 2 4 Mastitidy 1 3 Fraktura pánve 0 1 Laminitida 2 2 Steatóza jater 4 5 Subklinická ketóza 3 4 Nutná porážka ze zdravotních důvodů v průběhu 1 měsíce p. p. 1 1

Kolostrum Složení prvního kolostra prokazuje pozitivní vliv přípravku VIUSID VET. U krav pokusné skupiny mělo kolostrum vyšší koncentraci celkové bílkoviny, vitamínu A, zinku a selenu. Celková bílkovina prvního kolostra je tvořena především IgG a dalšími globuliny. Tyto proteiny mají zásadní význam pro imunitu telat.

Telata Narozená telata byla vitální u obou skupin a nejevila žádné příznaky onemocnění. Porody proběhly spontánně. Všechna narozená telata byla bezprostředně po narození standardním způsobem ošetřena a do 2 hodin napojena kolostrem. Nejednalo se však o kolostrum vlastní matky, ale rozmražené směsné kolostrum. Směsným kolostrem byla telata napájena do 3 dnů stáří. Následně byla telata napájena mléčnou krmnou směsí a od 10. dne stáří jim byl k dispozici starter. Pitná voda jim byla k dispozici po celou dobu odchovu. Telatům byl do mléka při ranním napájení přidáván přípravek VIUSID VET v dávce 10 ml na kus a den. Ve stáří 3 až 6 dnů byla od telat odebrána krev a stanoven metabolický profil telat. Další vyšetření bylo provedeno 30. den stáří telat. V průběhu celého sledování byl zdravotní stav všech telat dobrý. U ojedinělých telat v prvním a druhém týdnu stáří se vyskytovaly mírné a krátkodobé průjmy, které nevyžadovaly nutnou terapii. Žádné tele neuhynulo. Koncentrace celkové bílkoviny byla u části neonatálních telat subnormální, a to u obou skupin. V krevním séru telat pokusné skupiny byla vyšší koncentrace selenu, statisticky významně vyšší koncentrace beta karotenu a významně vyšší celková antioxidační kapacita. Ostatní parametry krve se významně nelišily. Podávání přípravku VIUSID VET telatům v průběhu prvního měsíce života mělo pozitivní vliv na tvorbu

celkové bílkoviny krevního séra, především globulinů a na koncentraci selenu v krvi. Rozdílné

hodnoty byly zjištěny i v celkové antioxidační kapacitě, kdy u pokusné skupiny byly hodnoty vyšší.

Hematologickým vyšetřením bylo zjištěno, že u telat pokusné skupiny je vyšší počet erytrocytů, vyšší

hodnota hematokritu a vyšší koncentrace hemoglobinu. Rovněž byl zjištěn u pokusné skupiny vyšší

počet neutrofilních granulocytů.

7

ZÁVĚREČNÉ VYHODNOCENÍ

Zkrmování přípravku VIUSID VET kravám v závěru zaprahlosti, v období přípravy na porod a v období jednoho měsíce po porodu mělo následující vliv na zdraví krav, produkci mléka, reprodukci a metabolický profil:

Zkrmování přípravku VIUSID VET nemělo žádný negativní vliv na zdravotní stav krav

Mělo pozitivní vliv na kvalitu kolostra. U krav pokusné skupiny VIUSID VET mělo kolostrum vyšší koncentraci bílkovin, vitamínu A, zinku a selenu.

Mělo pozitivní vliv na produkci mléka. Produkce mléka krav ve skupině VIUSID VET ve srovnání s minulou laktací byla vyšší o 983 kg, zatím co u krav skupiny kontrolní se zvýšila pouze o 531 kg.

V průběhu sledovaného období dojnice pokusné skupiny VIUSID VET vyprodukovaly za 100 dnů laktace 4 471 kg mléka, zatím co dojnice kontrolní skupiny 4 306 kg. Rozdíl činí 165 kg.

V průběhu prvních 3 měsíců, bylo na základě kontroly užitkovosti zjištěno, že u dojnic pokusné skupiny se produkce mléka zvyšovala, a to ze 41 kg na 45 kg a 44,4 kg, zatím co u dojnic kontrolní skupiny došlo k poklesu užitkovosti ze 45 kg na 44 a 40 kg.

U dojnic pokusné skupiny byl zjištěn významně nižší počet somatických buněk než u dojnic skupiny kontrolní. Při 3. kontrole užitkovosti (3 měsíce laktace) činil počet somatických buněk v mléce (SCC) 200 000 a u dojnic skupiny kontrolní 660 000. Rozdíl činí 185.5%

U dojnic pokusné skupiny byl zaznamenán lepší zdravotní stav ve srovnání s kontrolou. Nevyskytla se retence placenty, byl nižší výskyt metritid a mastitid, dále nižší výskyt steatózy jater a ketózy. I když byl hodnocen malý počet zvířat, lze zjištěné výsledky prevalence onemocnění považovat za zajímavé a pozoruhodné.

U dojnic pokusné skupiny byl sledován lepší průběh porodů.

Zkrmování přípravku VIUSID VET mělo pozitivní vliv na tvorbu hemoglobinu, který byl u krav v období 1 až 3 dny před porodem vyšší o 11.22%

Ukázalo se, že VIUSID VET zvyšuje antioxidační kapacitu. Průměrná hodnota celkové antioxidační aktivity v kontrolní skupině byla 0,84 mmol/l, zatímco ve skupině VIUSID VET byla 0,95 mmol/l (o 13,09% vyšší). Celková antioxidační kapacita byla také vyšší ve všech vzorcích skupiny VIUSID VET. Hodnoty GPx byly navíc ve skupině VIUSID VET relativně stabilní, zatímco v kontrolní skupině měly klesající tendenci.

8

Vliv přípravku VIUSID VET na telata

Přípravek VIUSID VET zkrmovaný vysokobřezím kravám měl pozitivní vliv na koncentraci selenu a antioxidační kapacitu narozených telat.

Zkrmovaný přípravek VIUSID VET telatům pozitivním způsobem ovlivnil tvorbu bílkovin krevního séra, koncentraci selenu a antioxidační kapacitu krve.

Přípravek neměl negativní vliv na zdravotní stav telat. Nemocnost telat v prvním měsíci života byla nízká a meziskupinové rozdíly nebyly zjištěny.

Brno 9. 11. 2017 Assoc. prof. MVDr. Josef Illek, DrSC.,Diplo. ECBHM Large Animal Clinical Lab;oratory VFU Brno Překlad z angličtiny MVDr. Josef Komárek, KOMVET, spol. s r.o. Informace: joe.komarek@komvet.cz

9

Fotodokumentace ke studii ve společnosti ZEMOS, a.s., Zubčice, farma Uherčice

Obrázek 1 Skladování VIUSID VET u distributora

Obrázek 2

VIUSID vet prášek 1 kg

VIUSID vet roztok 1 litr

10

Obrázek 3 Stáj dojnic ZEMOS a.s.

Obrázek 4 Ustájení pokusných dojnic před porodem

11

Obrázek 5 Odběr krve dojnic

Obrázek 6 Odběr bachorové tekutiny

12

Obrázek 7 Ustájení narozených telat v individuálních boxech

Obrázek 8 Narozená jalovička z pokusné skupiny

13

Obrázek 9 ....a první odběr krve

Obrázek 10 Příprava dávky VIUSID VET tekutý pro tele do mléka