基因的表达与调控（上）基因的表达与调控（上）原核生物的基因调控原核生物的基因调控

一、绪论一、绪论 原核生物和单细胞真核生物直接暴露在变幻莫测的环境中，食物供应毫无保障，只有能根据环境条件的改变合成各种不同的蛋白质，使代谢过程适应环境的变化，才能维持自身的生存和繁衍。

假如在大肠杆菌内，平均一个基因 1000bp ，一个细胞中约有 2500-3000 个基因。正常情况下，可带有 107个蛋白质，平均每个基因产生 3000 多个蛋白质分子。

但实验却表明，每细胞中有些蛋白质少之 10 个分子，而有一些却多达 500000 个分子。

一个大肠杆菌中只有 15 个分子的 β －半乳糖苷酶，若将细胞培养在只含乳糖的培养基中，每细胞中酶量可高达几万个分子，其合成的速度和总量随环境的变化而改变。

表明基因的表达受到调控。

细菌在进行调控时： 一个体系在需要时被打开，不需要时被关闭。这种“开 - 关”（ on-off ）活性是通过调节转录来建立的，也就是说 mRNA 的合成是可以被调节的。

1 、基因表达及基因表达调控 是指生物体基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录及翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定生物学功能的全过程 ,称为基因表达（ gene expression ）。

对这个过程的调节就称为基因表达调控（ gene regulation 或 gene control ）。

基因表达调控主要表现在以下几个方面： ① 转录水平上的调控 (transcriptional regulation) ； ② mRNA 加工成熟水平上的调控 (differential processing of RNA transcript) ； ③ 翻译水平上的调控 (differential translation of mRNA) 。

2 、基因表达调控的基本原理基因表达调控的基本原理 多级调控多级调控 :: 主要是转录水平的调控主要是转录水平的调控 四个基本的调控点：四个基本的调控点： 基因的结构活化基因的结构活化 转录起始：最有效的调节环节转录起始：最有效的调节环节 转录后加工及转运转录后加工及转运 翻译及翻译后加工翻译及翻译后加工

3 、基因表达的调控方式 负调控（ negative transcription regulation ） :

调控蛋白 +DNA 序列 基因表达 ( 相应蛋白质降低 )

正调控（ positive transcription regulation ） :

调控蛋白 +DNA 序列 基因表达 ( 相应蛋白质增加 )

负调控 根据作用特征根据作用特征 负控诱导负控阻遏

正调控 根据作用特征根据作用特征 正控诱导正控阻遏

正调控与负调控并非互相排斥的两种机制，而是生物体适应环境的需要，有的系统既有正调控又有负调控；　　原核生物以负调控为主，真核生物以正调控为主；　　降解代谢途径中既有正调控又有负调控；合成代谢途径中一般以负调控来控制产物自身的合成。

主要环节在转录，起始 σ 因子决定 RNA 聚合酶识别特异性。

◆ 操纵子（操纵子（ operonoperon ）：）： 原核生物中几个原核生物中几个功能相关功能相关的结构基因的结构基因成簇串成簇串联联排列组成的一个基因表达的排列组成的一个基因表达的协同单位协同单位（（ DNADNA 序列）。序列）。 一个操纵子一个操纵子 ＝＝编码序列（编码序列（ 2-62-6 ）） ++启动序列启动序列 ++ 操纵序列操纵序列 +(+( 其他其他调节序列调节序列 ))

二、原核基因调节特点

1、乳糖操纵子的发现：葡萄糖充分时： 葡萄糖代谢有关的酶基因 ---表达 其他糖代谢有关的酶基因 ---关闭葡萄糖耗尽时 ,乳糖存在： 乳糖代谢有关的酶基因 ---表达 葡萄糖代谢有关的酶基因 ---关闭 说明酶可以诱导

一）乳糖操纵子一）乳糖操纵子 (lactose operon)(lactose operon)

乳糖的利用及其相关的酶 : 乳糖 ( 在通透酶作用下进入细菌） 别位乳糖 葡萄糖 + 半乳糖

ββ 半乳糖苷酶半乳糖苷酶

☻乳糖的利用

ββ 半乳糖苷酶半乳糖苷酶

乳糖确实可诱导 Lac mRNA 的合成

能以乳糖作为唯一碳源和能源生长的定为 lac+；相反，称之为 lac-。

安慰诱导物（安慰诱导物（ gratuitous inducergratuitous inducer ））

诱导物的加入和去除对 lac mRNA 的影响

2 、结构基因顺序 乳糖操纵子包括三个结构基因： Z 、 Y 、 A

P Y Z A O

转录方向转录方向

A A 模型的提模型的提出出• 1940年， Monod 发现细菌“二次生长曲线”；• 1950年， Monod 和 Tacob 发现两对基因 Z 和 I ；• Szilard 发现 I 基因决定阻遏物的合成；• Jocob提出结构基因旁边还有开关基因，即操纵基因。

J.Lederberg 1948

不同 Lac-突变型

细菌结合转移和转导试验 证明三基因紧密连锁

B 实验验证 结构基因

Lac Z-Y+A+ ： β- 半乳糖苷酶基因突变

Z编码 β- 半乳糖苷酶； Y编码 β- 半乳糖苷透过酶；A编码 β- 半乳糖苷乙酰基转移酶。

β- 半乳糖苷酶是一种 β- 半乳糖苷键的专一性酶，除能将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖外，还能水解其他 β- 半乳糖苷（如苯基半乳糖苷）。

β- 半乳糖苷透过酶的作用是使外界的 β- 半乳糖苷（如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。

β- 半乳糖苷乙酰基转移酶的作用是把乙酰辅酶 A 上的乙酰基转到 β- 半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。

在这些突变体中，有一类突变体，它体内的半乳糖苷酶的形成不依赖于诱导物的存在，即没有乳糖或别的半乳糖苷存在时也能合成 β- 半乳糖苷酶，这种突变体称为组成型突变。分为两类： I型和 O型。

I型：野生型为 I+，突变型为 I-； O型：野生型为 O+，突变型为 Oc。

调节基因

I+→I-或 O+ →Oc后， Z 、 Y 、 A 结构基因均表现为永久表达，所以 I 基因被称为调节基因 (regulatory gene) 。

I 基因是一个产生阻遏物的调节基因，其产物使体系关闭。 I-突变体由于不能产生阻遏物，使细胞成为 lac永久表达型。 I-/I+局部二倍体由于带有一个正常阻遏物，使细胞中的 lac仍然被抑制。

Inactive re pressor lacI－ gene sythesizes defe ctive re pressor that does not bind to DNA Ope ron is transcribed and translate d lacI－ Ope rantor β -半乳糖苷酶 透性酶 乙酰转移酶 图 16- lac I发生突变，操纵子组成型表达

①① I I 型组成型突变型组成型突变

Hfr lac I+Z+strST6S

F- lac I-Z-strrT6r 培养无诱导物 混合培养

1小时后加入抗生素杀死供体菌 β- β- 半乳糖苷酶活性逐半乳糖苷酶活性逐渐上升渐上升2小时后加诱导物 组成型变为诱导型

说明： ◆ I+合成特异的阻遏物，无诱导物时可阻止 Z 基 因表达 ◆ 诱导物可作为阻遏物的拮抗物，使阻遏物失活， Z 基因表达 ◆ I-不产生无活性阻遏物，因而无需诱导物， Z 基 因就可表达，阻遏物起负调控作用

▲▲II基因产物及其功能基因产物及其功能 1967年 W.Gilbert 和 B.Miller Hill 将 lac I+ 或 lac I- E.coli 细胞提取物分别与放 射性标记的 IPTG混合，发现 lac I+ E.coli 细胞 提取物中有某种蛋白质可以与 IPTG 结合，且每 个蛋白分子可以与 4 个 IPTG 分子结合，而 lac I-

E.coli 细胞提取物中没有这种蛋白质与 IPTG 结 合，说明与 IPTG 结合的蛋白是 I 基因的产物。

lac I+ 的离体反应液（ 35S标记的 I 基因的产物）与不同的 DNA 分子相互作用，发现 I 基因的产物

▲不与失去 lac 操纵子全部基因的 DNA 分子结合

▲在有 IPTG 时不与 lac 操纵子基因结合 ▲不与 lacOC突变体的 DNA 分子结合 说明 I 基因的产物有两个结合位点

• 阻遏蛋白 : N端 : 1～ 59aa －头部片段：为 HTH ，与操纵基因 DNA 的大沟结合；

核心区：有 6 个折叠，诱导物就结合在两个核心区之间的裂缝中；

C端 : 为两组亮氨酸拉链，形成四聚体。

▲活性阻遏蛋白的另一个重要特点是形成四聚

体

等位基因间的互补（interallelic comple

mentation

）

不同等位基因编码的亚基可相互缔合形成杂合多聚体， 其性质不同于任何一种纯合多聚体。

Uninducible lacI S mutations are dominantConstitutive lacI d mutations are dominant

组成型 表达 不可诱导

Lac 阻遏物结构特点

调控机制 （负调控）

由基因 I编码生成的蛋白质具有四级结构的蛋白质具有 4 个相同亚基，每个亚基中都有一与诱导剂和 O 基因结合的位点Lac 阻遏物与 O 基因结合： 结构基因关闭Lac 阻遏物与诱导剂结合： 不与 O 基因结合，结构基因开放 RNA 聚合酶结合，转录开始

▲▲ LacLac 阻遏物阻遏物

I O

O

ρ

诱导剂

乳糖操纵子的负调控

O+Z+ - ＋ OcZ+ ＋ ＋ OcZ+/O+Z+ ＋ ＋OcZ － /O ＋ Z+ － ＋ OcZ+/O ＋ Z － ＋ ＋

基 因 型 组成表达 诱导表达

操纵基因操纵基因②② OO 基因组成型突变基因组成型突变

说明： Oc 对 O+显性，但只对其临近的基因才有作 用，称为顺式显性。

顺式显性（ cis-dominant)：显性效应只对处于同一染色体上它所调控的结构基因才起作用的现象

Active repressor cannot bind to O c mutant operantor

Operon is transcribed and translated lacI O c operantor

β -半乳糖苷酶 透性酶 乙酰转移酶 图 16-7 操纵基因发生组成型突变，操纵子组成型表达

遗传学图谱分析指出， Oc突变位于 I 与Z 之间，所以， lac 体系的 4 个基因的序列为 IOZY 。通过这些观察， Jacob 和 Monod推断 Oc突变代表 DNA链上的一个位点或一个非编码区域，而不是一个基因，因为可编码的基因具有互补性，而 Oc没有这一特性。

O 决定相邻 Z 基因的产物是诱导型合成还是组成型合成， O区域称为操纵基因。

操纵基因的结构

特点： -7---+28 ，以 +11 为对称轴典型特征具有反向重复序列相互作用位点可以缩小在 +5----+17

I P O Z Y A

调控基因 控制位点 结构基因调控基因 控制位点 结构基因DNADNA

阻遏蛋白阻遏蛋白

启动序列启动序列

cAMP-CAPcAMP-CAP结合位点结合位点

操纵序列操纵序列ββ

半乳糖苷酶

半乳糖苷酶

通透酶通透酶

乙酰基转移酶

乙酰基转移酶

33 、乳糖操纵子（、乳糖操纵子（ lactose opronlactose opron ） 结构） 结构

RNARNA 聚合酶聚合酶结合位点结合位点（－ 67~ － 59 ）

（－ 7~＋ 28 ）

General organization of the lac operon of wild-type E. coli.

Order of controlling elements and genes:lacI: promoter-lacI-terminatoroperon: promoter-operator-lacZ-lacY-lacA-terminator

-54 —-58 -65 —-69

-47 — -8 -3 — +21

AUG ： +39 — +41

-47 — -84

1 ） P-O区 Promotor: -84---+ 1 Operator: -7---+28 两者有 7bp重叠，使这段序列可能无法同时结合 RNA 聚合酶和阻遏蛋白，也可能虽然可以同时结合，但无法形成开放的转录起始复合物

22 ）） LacLac 阻遏物的作用阻遏物的作用 ------ 负调控负调控

mRNA

阻遏蛋白

IDNA Z Y AOPpol

没有乳糖存在时

阻遏基因LacLac 阻遏物的作用阻遏物的作用 ------负调控负调控

mRNA

阻遏蛋白

有乳糖存在时

IDNA Z Y AOPpol

启动转录 mRNA

乳糖别乳糖β- 半乳糖苷酶

3 ）诱导物的作用机制 a 诱导模式 平衡模型（间接作用）： DNA 结合的阻遏蛋白和游离的阻遏蛋白迅速平衡，加入诱导物后，诱导物结合到游离的阻遏蛋白上，打破了平衡，从而导致结合的阻遏蛋白释放

维持阻遏 过量的阻遏物可结 合在DNA 阻遏物结合在 的其它位点 操纵基因上 aaaa aaa

a a 诱导物 a 诱导 所有的阻遏物都结合 a a 在 DNA的随机位点上 a a a aa 诱导物解离 a 建立阻遏 阻遏物恢复 活性状态 a a a 阻遏蛋白通过直接取代 a 从随机位点移向 a 操纵基因 a a a a a a 图 16-14 在细胞中所有的阻遏蛋白都结合在 DNA上 (仿 B.Lewin:《GENES Ⅵ》 ,1997, Fig .12.18)

阻遏蛋白从操纵基因上解离下来的速率非常低以

至不能和平衡模型相吻合。

b 解离模型（直接作用）：诱导物直接和结合在操纵基因上的阻遏蛋白相互作用。可能通过改变其构象使其离开操纵基因。

44 ）两个矛盾）两个矛盾第一个诱导物如何进入细胞？第一个 β- 半乳糖苷酶如何产生？解释： 本底水平表达

在非诱导状态下有少量（ 1-5 个 mRNA 分子）lac mRNA 合成。由于阻遏物的结合并不是绝对紧密，即使在与操纵基因紧密结合时，也会偶尔掉下来，这时启动子的阻碍被解除， RNA 聚合酶开始转录，导致在非诱导情况下少量透过酶可以合成。

－－ mRNA 的这种合成称为本底水平表达。

55 ）） CAP-cAMPCAP-cAMP复合物在乳糖操纵子表达中复合物在乳糖操纵子表达中 的作用 的作用 -------- 乳糖操纵子的乳糖操纵子的正调控正调控

1965年， Sutherland 发现大肠杆菌培养液中葡萄糖的含量总是与 cAMP 含量成反比。 1968年，发现大肠杆菌培养液中加入 cAMP可增加半乳糖苷酶的产量。

葡萄糖消耗完

• Adenylate cyclase converts ATP into cAMP.• Phosphodiesterase converts cAMP to AMP.• Glucose catabolite may inhibit adenylate cyclase and stimulate Phosphodiesterase

◆ cAMP 的作用： 刺激多种可诱导的操纵子。 cAMP 和 CRP 结合后发挥作用。◆ CRP （分解物基因激活物蛋白）：由 Crp 基因编码，有二个相同亚基的蛋白质。其中一个与 DNA 结合的 domain ， 一个与 cAMP 结合的 domain 。◆ CRP 和 cAMP 结合后 , 称为 CAP ，刺激操纵子 , 导致结构基因转录 ( 正调控 ) 。

• CAP （ catabolite activator protein ）以两种方法来激活转录：

（ 1 ）它可能直接和 RNA Pol 相互作用； （ 2 ） 作用于 DNA ，改变其结构，从而帮 助 RNA Pol 结合。

　 葡萄糖 cAMP Lac 操纵子被抑制 + + + + 转录

无葡萄糖， cAMP浓度高时

有葡萄糖， cAMP浓度低时

Z Y AOPDNA CAP

CAPCAPCAP CAP

CAP

cAMP-CAP 与 DNA 相结合，造成双螺旋弯曲，形成一个“环状”结构， lacI+基因产物（阻遏物）无法与 O区相结合，易于形成三元转录起始复合物，只要有这个“环”的亚基存在， lac operon 就可以得到表达。

cAMP-CAP还能直接影响 RNA 聚合酶的活性。

66 ））乳糖操纵子基因表达的一般情况乳糖操纵子基因表达的一般情况基因表达的外界信号基因表达的负调控基因表达的正调控正、负调控协同表达

葡萄糖、乳糖浓度的变化Lac 阻遏物与操纵基因cAMP+CAP 与相应的 DNA 序

列

条件 2:

低乳糖

条件 3:

低乳糖

条件 4:高葡萄糖低 cAMP高乳糖

Lac 阻遏蛋白封闭转录时 , CAP 对该系统不发挥作用 条件 1:低葡萄糖高 cAMP高乳糖

Lac 阻遏蛋白不封闭转录时 ,没有 CAP 存在 , 也无高效转录活性。

Lac 阻遏蛋白不封闭转录 , CAP+ cAMP 加强转录。

OO

OO O

※当阻遏蛋白封闭转录时， CAP 对该系统不能发挥作用；※如无 CAP 加强转录，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。※ 若有葡萄糖或葡萄糖 / 乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏 (catabolic repression) 。※ lac 操纵子的诱导作用既需要乳糖又需缺乏葡萄糖。

mRNA

无乳糖时 有乳糖时 无葡萄糖 cAMP 浓度高

有葡萄糖 cAMP 浓度低

RNA-pol

O O

O O

lac 操纵子基因表达既需要乳糖又需缺乏葡萄糖

色氨酸操纵子 (tryptophane operon) 负责色氨酸的生物合成，当培养基中有足够的色氨酸时，这个操纵子自动关闭，缺乏色氨酸时操纵子被打开， trp 基因表达，色氨酸或与其代谢有关的某种物质在阻遏过程（而不是诱导过程）中起作用。由于 trp 体系参与生物合成而不是降解，它不受葡萄糖或 cAMP-CAP 的调控。

二）色氨酸操纵子

色氨酸的合成分 5步完成。每个环节需要一种酶，编码这 5 种酶的基因紧密连锁在一起，被转录在一条多顺反子 mRNA 上，分别以 trpE 、 trpD 、 trpC 、 trpB 、 trpA 代表，编码邻氨基苯甲酸合成酶、邻氨基苯甲酸焦磷酸转移酶、邻氨基苯甲酸异构酶、色氨酸合成酶和吲哚甘油 -3-磷酶合成酶。

1. 色氨酸操纵子的结构 ◆ trpR(89’) 和 trpABCDE(25’) 不紧密连锁； ◆ 操纵基因在启动子内 ◆ 有衰减子 (attenuator)

◆ 启动子和结构基因不直接相连， 二者被前导顺序 (Leader) 所隔开

trpE 基因是第一个被翻译的基因，与其相邻的是前导区 trpL 和衰减子 trpa 。 trp 操纵子中产生阻遏物的基因是 trpR ，该基因距 trp 基因簇很远，后者在大肠杆菌染色体图上 25min处，而前者则位于 90min处。

在位于 65min处还有一个 trpS （色氨酸 tRNA 合成酶），它和携带有 trp 的 tRNATrp也参与 trp 操纵子的调控作用。

2.阻遏物对色氨酸操纵子的负调控 -阻遏系统 trpR 基因在其自身的启动子作用下，合成分子量 47000 的调控蛋白，但没有与 O 结合的活性，因此被称为辅阻遏蛋白 (aporepressor) ，除非培养基中有色氨酸。 辅阻遏蛋白与色氨酸相结合形成有活性的阻遏物，与操纵区结合并使之关闭转录 trp mRNA 。

高Trp时：辅阻遏物蛋白 +Trp 结合操纵基因 不转录

低Trp时：辅阻遏物蛋白 不结合操纵基因 转录

Trp

有 Trp

无 Trp mRNA

OPtrpR

调节区 结构基因 RNA 聚合酶 RNA 聚合酶

色氨酸操纵子

3.3. 衰减作用对色氨酸操纵子的调控衰减作用对色氨酸操纵子的调控◆◆前导区的序列特点前导区的序列特点◆◆ 转录衰减机制转录衰减机制◆◆衰减机制的实验证据衰减机制的实验证据

前导区（ Leader ）：结构基因起始密码子前有 162 个碱基，其中的 139 个碱基构成前导区。☻前导肽（ Leader peptide ）：推测前导区mRNA 可编码 14 个氨基酸 组成的多肽，其中第 10 和第 11位均为色氨酸。☻有四个富含 GC 的区段，相邻的区段之间可形成茎环结构。

☻弱化子（ attenuator ）： 一段位于结构基因上游前导区，具有终止子结构的短序列，通过前导序列转录产生的 mRNA 形成类似于终止子的二级结构，达到转录终止的目的。

UUUU……UUUU……

调节区 结构基因 trpR OP

前导序列 衰减子区域 UUUU……

前导 mRNA 1 2 3 4

衰减子结构 第 10 、 11 密码子为 trp 密码子

终止密码子 14aa 前导肽编码区: 包含序列1

形成发夹结构能力强弱： 序列 1/2> 序列 2/3> 序列 3/4

trp 密码子

UUUU……

UUUU……3 4

UUUU 3’3

4核糖体

前导肽

前导 mRNA

A. 当色氨酸浓度高时

1 ）转录衰减机制

1 25’

trp 密码子

衰减子结构就是终止子可使转录

前导 DNA

UUUU 3’ RNA 聚合酶

终止

UUUU……3 42 4

2 3

UUUU……核糖体

前导肽

前导 mRNA

15’

trp 密码子

结构基因前导 DNA

RNA 聚合酶

B. 当色氨酸浓度低时

Trp 合成酶系相关结构基因被转录

序列 3、 4不能形成衰减子结构

Low TrpLow Trp

High TrpHigh Trp

高 Trp 时： Trp-tRNATrp 存在 核糖体通过片段 1(2 个 Trp密码子 ) 封闭片段 2 片段 3 ， 4形成发夹结构 类似于不依赖 ρ 因子的转录终止序列 RNA 聚合酶停止转录 , 产生衰减子转录产物

转录、翻译偶联转录、翻译偶联 ,, 产生前导肽产生前导肽

低 Trp 时： Trp-tRNATrp 没有供应 核糖体翻译停止在片段 1 （ 2 个 Trp密码子） 片段 2 ， 3 形成发夹结构 转录不终止 RNA 聚合酶继续转录

22 ）衰减机制的实验证据）衰减机制的实验证据 a 衰减作用的发现 ☻ trp 操纵子受阻遏蛋白阻遏时，表达仅下降为阻遏 前的 1/70 ，而 Lac 操纵子受阻遏蛋白阻遏时，表达 下降为阻遏前的 1/1000 ☻ trpS5突变株 温度敏感型突变株，它所编码的 Trp-tRNAtrp合成酶 只在 30℃时有活性， 42℃时无酶活性。比较野生型和 突变型在 42℃和 30℃时 Asase 的酶活性，表明 Trp- tRNAtrp有调节功能 ☻ trpΔLD102突变株 该细菌在有色氨酸的培养基中仍有很高的色氨酸合 成酶活性

trpΔED53 中 L 不缺失（弱化子存在）， trpΔLD102 中 L缺失（弱化子不存在），缺失前导区后的表达比有前导区的表达要高得多，充分说明 trp 操纵子的表达调控除阻遏作用外，还受到前导区的影响，失去了这个因素就失去了一个调控机制。

b 衰减作用的遗传学证据 ☻ trpL29突变株 增强终止突变型 前导区 29位核苷酸G→A ，使 AUG→AUA ☻ trpL75突变株 增强终止突变型 前导区 75位核苷酸G→A,减弱了 2区和 3区形成茎环能力 ☻ trpL29 trpL131G→C双突变株 trpL29 ΔtrpLC1419双突变株 解除终止

• Trp 的存在对终止转录是有效的，弱化子仅允许约 10% 的 R

NA 聚合酶通过。

• 缺乏 Trp 时，弱化子允许所有的聚合酶通过。

3)3) 其他氨基酸饥饿对其他氨基酸饥饿对 TrpTrp衰减子的影响 ☻ 当所有的氨基酸都不足时，核糖体翻译移动的速度就更慢， 结果有利于 1+2 和 3+4 发夹结构的形成，于是 RNA pol停止 转录。☻ 大多数其他氨基酸的缺乏， 核糖体停止运转的位置可让 1区和 2区配对，并不影响 3区和 4 区形成终止子结构，所以 trp 基因不表达☻当 Gly饥饿时， 1区和 2区中可形成部分双链结构，不影响 3区和 4区☻当 Thr饥饿时， 影响 1区 /2区和 2区 /3区配对。但不影响 3区和 4区配对☻当 Arg饥饿时， 影响 1区 /2区配对，但不影响 2区 /3区配对， 3区和 4区不配对

44 ）协调）协调☻阻遏作用：粗调开关 阻遏物的作用是当有大量外源色氨酸存在时，阻止非必需的先导 mRNA 的合成，它使这个合成系统更加经济。阻遏作用的信号是细胞内色氨酸的多少。

☻弱化作用：细调开关 弱化作用的信号是 Trp-tRNAtrp的多少，通过控制前导肽的翻译来控制转录的进行

依靠弱化作用，色氨酸的存在就使色氨酸操纵子的转录被抑制了 10倍。与色氨酸阻抑物的作用 (70倍 ) 合在一起，这就意味着色氨酸水平对色氨酸操纵子的表达施加了 700倍的调节效果。

有实验证明，在不加色氨酸的培养基中， trp mRNA 的合成仍然受到部分阻遏，现在一般认为，野生型细胞中同时存在着有活性和无活性的阻遏物，培养基中色氨酸浓度的变化，能够使这两种阻遏物间的平衡发生倾斜，最终做出关闭或启动 trp 操纵子的决定，从而维持一定的色氨酸含量。

5 ）原核生物衰减作用的普遍性

三）三）半乳糖操纵子半乳糖操纵子 (galactose operon)(galactose operon) 包括 3 个结构基因： 异构酶 (UDP-galactose-4epimerase,galE) ， 半乳糖 -磷酸尿嘧啶核苷转移酶 (galactose transferase, galT) ， 半乳糖激酶 (galactose kinase, galK) 。 这 3 个酶的作用是使半乳糖变成葡萄糖 -1-磷酸。 GalR （调节基因）与 galE 、 T 、 K 及操纵区 O 等离得很远，而 galR 产物对 galO 的作用与 lacI-lacO 的作用相同。

A gal 操纵子的特点：① 它有两个启动子，其 mRNA 可从两个不同的起始点开始转录；② 它有两个 O区，一个在 P区上游 -67--53 ，另一个在结构基因 galE 内部。

两个相距仅 5bp 的启动子，可以分别起始 mRNA 的合成。每个启动子拥有各自的 RNA聚合酶结合位点 S1 和 S2 。 从 S1 起始的转录只有在培养基中无葡萄糖时，才能顺利进行， RNA 聚合酶与 S1 的结合需要半乳糖、 CAP 和较高浓度的 cAMP 。从 S

2 起始的转录则完全依赖于葡萄糖，高水平的 cAMP-CAP 能抑制由这个启动子起始的转录。当有cAMP-CAP 时，转录从 S1 开始，当无 cAMP-CAP 时，转录从 S2 开始。

B 双启动子的功能 半乳糖不仅可以碳源供细胞生长，而且尿苷二磷酸半乳糖（ UDPgal ）是大肠杆菌细胞壁合成的前体。在没有外源半乳糖的情况下， UDP-gal 是通过半乳糖差向异构酶（ galE

）的作用由 UDP-葡萄糖合成的。生长过程中的所有时间里细胞必须能够合成差向异构酶。

葡萄糖存在时 cAMP缺少 S1 不能启动 S2启动转录

半乳糖存在时 cAMP浓度升高 S1启动转录 S2启动受抑制

结果：在两种不同的环境里都可以形成细胞壁物质的前体

• 阿拉伯糖 (arabinose) 是可作为碳源的五碳糖。• 参与阿拉伯糖代谢酶的基因分布于不同操纵子中，但由一个调节基因（ araC ）的产物调控。

四）阿拉伯糖操纵子（ arabinose operon）

1 、基因组成结构基因： araA 、 araB 和 araD

分别编码 L －阿拉伯糖异构酶、核酮糖激酶和 L －核酮糖－ 5 －磷酸－ 4 －差向异构酶。

调节基因： araC

操纵基因： O1 、 O2

基因 E 、 F ：负责转运阿拉伯糖进入细胞

araC 基因位于另一个操纵子中，它编码的 araC 蛋白是操纵子的调控因子。

araBAD 和 araC 基因的转录是分别在两条链上以相反的方向进行的。

• AraC 的结构： AraC由 292aa残基组成，其 N端结构域 (1--170aa)

可结合阿拉伯糖并参与形成二聚体， C端（ 178--292aa) 为 DNA 结合结构域。 AraC 对 araBAD 的调控包括正、负调控两种方式。

araBAD 上有三个 AraC 结合位点： araO1 （ -106—-144 ）、 araO2(-265—-294 和位于 araBAD启动子的 araI位点。 araI位点为两个“半位点” (-56—-78 和 -35—-51) 。araO1 在 araBAD 表达调控中的作用较小。

22、调节机制、调节机制

• 调节蛋白 AraC 的作用 第一，它调节它自己的生物合成。 当 AraC 水平较低时，其基因从 Pc 开始表达。当 AraC

蛋白浓度高时，由于 AraC 与 AraO1 结合，而 araO1 与AraC 基因的启动子重叠，可阻遏 araC 基因的表达。

第二，它对 araBAD 既是负的调节子也是正的调节子 (regulator) ，它既能结合于 araO2 又能结合于 araI 。通过两种异构体实现： Pr （阻遏作用）； Pi （诱导作用）。

• 负调控 当 cAMP 水平较低且缺乏阿拉伯糖时， AraC二聚体结

合在 araO2 和 araI1 半位点使 DNA 成环，阻遏 araBAD的表达。

• 正调控 当 Ara 存在而无葡萄糖时， Ara 与 AraC 蛋白

结合使其构象改变而释放 araO2 ，此时 AraC 结合在 araI1 和 araI2处。同时由于 cAMP 的积累激活 CRP ，活化的CRP 结合在位于 araO1 和 araI间的 CRP位点。

araC+Ara 和 CRP共同作用可激活 RNA pol 转录 araBAD 。因此， AraC具有正、负调控的双重作用。

由于 Ara+araC 结合在 araO1处使 araC 不能表达。

但当同时有葡萄糖和 Ara 时，由于 cAMP 不能激活 CRP ， araBAD则不表达，同时 araC 也不表达。

3 、小结①AraC 蛋白是双功能的，单纯的 C 蛋白结合于 araO1(-100~-144) ，起到阻遏的作用；当 C 蛋白和诱导物 Ara 结合形成的复合体时是 Cind 蛋白（ ind 是

induction 的缩写），即诱导型的 C 蛋白，它结合于 araI区（ -40~-78 ）使RNA 聚合酶结合于 PBAD位点（ +140 ），转录 B 、 A 、 D三个基因；

②C 蛋白结合 araO1 时也反馈性地阻遏了其本身的表达；③C 蛋白的两种状态（ Cind 和 Crep ）功能不同，结合的位点也不同。 Cind结合于 araI ； Crep 可结合于 araO1 和 araO2 ；④ara 操纵子的 C 蛋白还可以调节分散的基因 araE 和 F ，因此此转录单位也称调节子（ regulon ）；⑤本操纵子有两个启动子 Pc 和 PBAD ，可以双向转录；⑥Pc启动子和 araO1重叠。

五） 五） DNADNA 重排对基因表达的调重排对基因表达的调节节鼠伤寒沙门氏菌（ S.typhimrium ） ： 鞭毛蛋白亚基的合成由 2 个非等位基因控制而出现两相性 (diphasic) 。 鞭毛抗原有两种（ H1 和 H2 ），单个细菌只有一种鞭毛抗原，但同一菌落既可以表现为

H1型，也可以表现为 H2型。 在细菌的分裂中有 1/1000 的概率会出现由一相转变为另一相，称为相转变（ phase variation ） 。

◆ H1 和 H2 是由两个非等位基因编码，位于不同的染色体座位。◆ H2 基因与抑制 H1 转录的阻遏物基因（ rhl ）紧密连锁◆ H2 基因的上游有 995bp 的片断（两侧为反向重复序列，右反向重复序列上游 16bp处含有 H2 基因的启动子，中间含有倒位蛋白基因）可以倒位，一旦发生倒位，则 H2 和 rh1 无法转录

Phase 1

• 在沙门氏菌鞭毛合成中，通过改变启动子的方向来实现调节：

2 相： H2 与 rhl 基因同时表达，且阻止 H1 基因的表达；

1 相： H2 与 rhl 基因都不表达， H1 基因进行表达。

六） 六） RNARNA 聚合酶转录起始对基因表达的调控聚合酶转录起始对基因表达的调控1 、 σ 因子的替换 ---- 级联调控

早期

☆ 从一套基因的转录到另一套基因的表达是噬菌体感染的共同特点。

通过噬菌体编码的 RNAPol 的合成来完成。

◆正常营养生长期中，枯草杆菌 σ 因子为 σ43或 σA

（分子量为 43KD ），与大肠杆菌的 RNA 聚合酶相似， α2ββ’ σ。

◆σ 因子更换用于噬菌体基因表达时序的控制 早期基因转录： α2ββ’ σ43 （宿主）， gp28 基因表达 中期基因转录： α2ββ’ gp28 ， gp33 和 gp34 基因表达 晚期基因转录： α2ββ’ gp33gp34◆σ 因子更换意义 亚基更换后只识别新的一类基因 导致 RNA 聚合酶活性改变

几乎大部分的 σ 因子转换都发生在孢子形成中。 孢子的形成涉及到生物合成活性的剧烈变化，这些变化和很多基因有关。 营养时期的基因被关闭，孢子形成的特异基因表达。

α2ββ’ σ43

SpoOA （转录调节物） σF 表达中隔形成前

α2ββ’ σ43 σH σE 表达

前孢子中：α2ββ’ σF ：第一套孢子形成基因表达（ σG ，信号蛋白）α2ββ’ σG ：转录孢子形成晚期基因

母细胞中：α2ββ’ σE ：母细胞中基因表达（ σK ）α2ββ’ σK ：母细胞中晚期基因表达

• 孢子形成是由两种级联调控控制的，在级联调控中每一间隔部分的 σ 都相继被激活，每个 σ 因子指导一套特殊的基因合成蛋白质。

• 当一种新的 σ 因子被激活，原来的 σ 因子被取代，这样通过转移因子来打开基因或关闭基因。

22 、修饰核心酶替换、修饰核心酶替换 σσ亚基亚基 T4噬菌体的时序调节依赖本身携带的蛋白对宿主的核心酶加以修饰 , 改变其和 σ亚基的结合能力 ,乘机将本身编码的蛋白取代原来的 σ亚基 ,从而改变 RNA 聚合酶的识别能力。

◆ T4噬菌体在生活周期的不同阶段合成不同的 mRNA 。 早期转录 mRNA ：编码有关 DNA 合成、 RN

A 的转录调控、重组等的酶 晚期转录 mRNA ：编码噬菌体结构蛋白及与粒子装配和裂解宿主等有关的基因。◆ 内部蛋白： T4 的头部含有几种小分子蛋白，可伴随着 D

NA 一道注入到细菌中 .◆ ADP- 核糖转移酶（ ADPRT ）（内部蛋白）：将 ADP-核糖（ ADPR ）连接到宿主 RNA 聚合酶的 α亚基上的精氨酸胍基上使其被修饰

◆内部蛋白伴随着 DNA 一道注入到细菌中，包括 ADPRT ；◆利用宿主的 RNA 聚合酶转录第一批早期mRNA ；◆ADP- 核糖转移酶（ ADPRT ）将 ADP- 核糖（ ADPR ）连接到 宿主 RNA 聚合酶的 α亚基上的精氨酸胍基上使其被修饰 ，降低了 RNA 核心酶与 σ 因子的结合能力，而增加了其 与 T4噬菌体编码的蛋白 Mot 的亲和力，◆Mot 蛋白取代了 σ亚基，使新的 RNA 聚合酶不再识别寄主 的基因和 T4早期基因的启动子，而能识别下一批基因的 启动子。◆到转录晚期同时， RNA 聚合酶被进一步地修饰，其两个 α亚基各结合了一个 ADPR 分子及 4 个修饰性蛋白，称其 为超修饰（ hupermodified ）的 RNA 聚合酶。

基本步骤

33 、 、 RNARNA 聚合酶的代聚合酶的代换换◆T7噬菌体根据自身的感染特点而采用RNA聚合酶的代换方式来进行时序调控。◆ T7是E.coli的烈性噬菌体，基因组长为39,936nt，可能具有55个基因，其中44个基因的产物已鉴别 .

◆早期转录：在感染后的前 6 分钟，使用了宿主 E.coli 的 RNA 聚合酶，转录的基因主要有 10 个。 0.3 基因编码宿主限制酶的抑制蛋白，使 T7 进入宿主免遭降解； 0.7 基因编码一种蛋白激酶，能将 E.coli 的 RNA 聚合酶磷酸化，为抑制宿主 RNA Pol 作准备；基因1编码 T7 RNA Pol 聚合酶，它所识别的启动子是由 23bp 组成的保守顺序（ -17～ 16 ）。

◆晚期转录分为二组（Ⅱ和Ⅲ） 感染后 6～ 12 分钟后 T7 就利用自己的

RNA 聚合酶转录第Ⅱ组基因。 其中基因 2 的产物是 E.coli 聚合酶抑制剂，最终废除了宿主 RNA 聚合酶的功能，而将自己编码的 RNA 聚合酶取而代之。

感染 12 分钟后表达Ⅲ 组基因。此转录物约含 15 个基因，它们主要编码头部蛋白，尾部蛋白以及负责装配，这样使得 T7噬菌体不至于过早地装配成粒子。

七） 翻译调七） 翻译调控控1 、翻译起始的调控 ◆ SD 序列与 AUG 的距离： 4-10 为佳， 9 最佳 ◆ mRNA二级结构对翻译起始的调控

A 基因

A 基因

cp 基因lys 基因

Rep 基因

Rep 基因

cp 基因

A 转录一个顺反子需要二级结构的改变，而这种二级结构的改变依赖于前一个顺反子的翻译

B 翻译阻遏对起始的调控

Qβ噬菌体的复制酶可结合于 SD顺序阻断核糖体在 mRNA 上的移动，抑制了翻译

C 重叠基因对翻译起始的调控

D D 核糖体蛋白是自身合成的转录抑制子核糖体蛋白是自身合成的转录抑制子– 大肠杆菌的核糖体中含有 50 多种蛋白，各种核糖体蛋白在体内的量是平衡的，它们与 rRNA 组装成核糖体。– 核糖体蛋白的基因组合成数个操纵子，每一个操纵子都包含多至 11 个核糖体蛋白基因（某些与其合成与生长速度耦联的非核糖体蛋白也包括在这些操纵子中，包括 RNA 聚合酶的亚基 α 、 β 、 β’ ）。– 与其他操纵子一样，这些操纵子在转录水平受到调控。

在核糖体组装时，与 rRNA 结合的蛋白为关键蛋白，它对核糖体蛋白的合成起调控作用。 每一个操纵子编码自己的关键蛋白，它抑制整个操纵子的表达。

某种 r 蛋白合成过快时， r蛋白可与其模板mRNA 上的 SD 序列结合，而使其不能与核糖体结合，导致mRNA 的降解而使这种 r 蛋白合成速度降低。

与关键蛋白结合的 rRNA 和关键蛋白的 mRNA 有相似性。当核糖体蛋白的 mRNA 表达过量时，关键蛋白较多地与核糖体蛋白的 mRNA 结合，导致其不能与 rRNA 结合形成核糖体。这样就可调控核糖体蛋白的合成。

E 核糖体开关（ Riboswitch ） 调节性的 RNA 成分，它们通过直接探测到小分子代谢物，控制基因转录和翻译而起作用。

有些核糖核酸开关对转录终止起作用，有些则在翻译水平上来控制形成的 RNA 结构，阻碍核糖体与 mRNA 的结合 .

蛋白或与蛋白紧密相关的代谢物，与 mRN

A 上的 riboswitch 结合并改变 riboswitch 的空间结构，阻止核糖体继续读取编码蛋白的 mRNA片段。

比如，当焦磷酸硫胺素（ TPP ）与大肠杆菌 thiM riboswitch 结合后，核糖体识别的 mRNA

片段（ TPP 的阅读起点）被掩盖起来。

FF 反义反义 RNARNA （ （ antisenseRNAantisenseRNA ）的调）的调控控反义 RNA （ antisenseRNA ）： 能与 mRNA 互补结合，从而阻断mRNA 翻译的 RNA 分子反义基因： 转录产生反义 RNA 的基因 可调控原核细胞中基因表达、控制噬菌体溶菌 -溶源状态以及抑制转座子的转位作用等。

在真核细胞中也存在反义 RNA ，但功能尚不全部明了。

反义 RNA 的作用机制 ①反义 RNA 直接作用于其靶mRNA 的 SD

序列和（或）编码区，引起翻译的直接抑制或与靶mRNA结合后引起该双链 RNA 分子对 RNaseⅢ的敏感性增加，使其降解。

②反义 RNA 与 mRNA 的 SD 序列的上游非编码区结合，从而抑制靶mRNA 的翻译功能。其作用机制可能是反义 RNA 与靶mRNA 的上游序列结合后阻止了核糖体的结合。

③反义 RNA 可直接抑制靶mRNA 的转录。 反义 RNA 和 mRNA 有不完全的互补序列，可以形成双链的 RNA杂交体。而在 mRNA 上紧随杂交区之后的是一段 U丰富区。其结构类似于终止子结构，从而使转录开始不久后即终止。

E.coli 中有两种外膜蛋白（ OmpC 和 OmpF ）和 OmpB 基因座（ OmpR 和 envZ ）与渗透压应答有关 高渗透压时 OmpC 产量增加， OmpF 产量受到控制； 低渗透压时 omF 产量增加， OmpC 产量受到控制序列分析发现 OmpC 基因上游存在另一个转录单位，转录形成的 RNA 可与 OmpFmRNA 翻译起始区部分互补

▲干扰mRNA 作用的互补 RNA（ mic-RNA, mRNA-interfering complementary RNA ）

ompF 基因有 ompR 产物的高亲和位点ompC 基因有 ompR 产物的低亲和位点 低渗透压时， ompR 基因产物少，只结合高亲和位点， ompF 基因表达量升高；高渗透压时， ompR 基因产物多，可结合低亲和位点，与 ompC 基因结合，双向转录，促使 ompC 基因表达量升高外，反向转录生成 micFRNA 可与 ompF 的 mRNA 结合，阻碍翻译。

2、翻译延长的调控

A 稀有密码子：在基因中利用频率很低的密码子• 细胞可通过翻译，调控不同蛋白含量的高低。即使对于同一操纵子上不同的基因，其产物在数量上也可大不相同。

• 许多调控蛋白在细胞内含量很低，编码这些蛋白的基因中高频率地使用了很多稀有密码子，稀有密码子对应低丰度的 tRNA ，因此，翻译速度受 tRNA 供应的限制，影响了蛋白质合成的总量。

• 而其它基因中利用这些稀有密码子频率很低。

dnaG rhoD 25种非调节蛋白 Ile AUU 36 26 37 AUC 32 74 62 AUA 32 0 1

B B 二级结构对翻译延伸的调控二级结构对翻译延伸的调控◆红霉素能与核糖体大亚基的 23S rRNA 结合，抑制翻译。◆抗红霉素基因编码的甲基化酶是使 23s rRNA 上的腺苷酸甲基化 , 使红霉素无法与其结合，从而达到抗红霉素的作用。◆抗红霉素基因的 mRNA 的前导顺序中有 4段 RN

A顺序，可以相互配对形成二级结构。编码甲基化酶区域的 S-D顺序正好处在 3-4区之间

1. Off confomation (no erythromycin present) Initiation sequence of methylase gene G A G 1 2 3 4 mRNA Methylase gene coding region

2.On conformation (erythromycin present)

2 3 GAG 4 Fig. Control of erythromycin methylase gene expression by a leader peptide and by alternate RNA structures that determine whether ribosome can initiate translation of its gene.

Ribosome translating leader to proceeds tothe end of the leader and releases the RNA,allowing the 1,2 hairpin to form; this allowsthe 3,4 hairpin to form, blocking access of aribosome to the methylase initiationsequence.

Ribosome inhibited by erythromycinstalls while translating the leaderpolypeptide, thereby covering sequence1;this allows hairpin 2,3 toform,leaving the methylase initiationsequence in 4 free to bind a secandribosome.

抗红霉素基因利用 mRNA二级结构的改变来调控甲基化酶的表达

当无红霉素存在时，核糖体顺利地翻译了前导肽，并从 mRNA上释放下来，使得 1-2， 3-4相互配对，形成了二级结构。而其编码甲基化酶区域的 S-D顺序正好处在 3-4区之间，位于二级结构中，无法在翻译起始中发挥作用。因此甲基化酶不能产生，

当红霉素存在时 , 与核糖体大亚基的 23S rRNA结合 ,抑制了前导肽的翻译 ,因此核糖体停留在 mRNA的 1 区 , 使 2 区和 3 区得以相互配对形成发夹结构 ,甲基化酶的S-D顺序就裸露出来可以和第二个核糖体结合 ,翻译出甲基化酶。

• 细菌在葡萄糖缺乏时可产生报警物质 cAMP 。可保证其利用其它糖类，如 lac 操纵子、 gal （半乳糖）操纵子和 ara （阿拉伯唐）操纵子等。

• 培养基中营养缺乏，蛋白质合成停止， RNA 合成也趋于停止，这种现象称为严紧控制。

33 、翻译的终止调控、翻译的终止调控

▲严紧控制 (strigent control) 或严紧反应 (strigent response) 当细菌处于极差的生存条件下，培养基中缺乏足够的氨基 酸，蛋白质合成受到抑制，并关闭大量的代谢过程。是细 菌为渡过困难时期而存活下来的适应性表现。 rRNA 和 tRNA 的合成大幅度下降，某些 mRNA 的合成也下降具有这种特性的细菌的基因型为 rel+

松驰控制 ( relaxed control) 把培养基中营养缺乏，蛋白质合成停止后，但 RNA 合成速率 并不下降。具有这种特性的细菌的基因型为 rel- （松驰型突 变体）（ relaxed mutants ）

研究发现，在氨基酸缺乏时， rel+ 菌株能大量合成两种特殊的核苷酸鸟苷四磷酸（鸟苷 5‘ 一二磷酸 -3’二磷酸， ppGpp ）和鸟苷五磷酸（鸟苷 5‘ 一三磷酸 -3’二磷酸， pppGpp ），其电泳的迁移率和一般的核酸不同，而 rel- 菌则不能。

GTP+ATP→pppGpp+AMP→ppGpp

魔斑Ⅰ魔斑Ⅱ

严紧因子（ RelA ）：是一种（ p ） ppGpp 的合成酶，它可以催化 ATP 将焦磷酸加到另一个 GTP 或 GDP的 3′位点。提纯的 RelA 酶它本身实际是没有活性的，而在核糖体存在时它才有活性（ L11 蛋白）。

• 细菌缺乏氨基酸时会产生鸟苷四磷酸（ ppGpp,魔斑）和鸟苷五磷酸（ pppGpp ）作为报警物质。

• 细菌缺乏任何一种氨基酸时，会在核糖体的 A位点结合无负载的 tRNA ，消耗了 GTP 而无法形成肽键，导致 GTP 不断消耗而产生报警物质。– GTP +ATP →pppGpp+ AMP →ppGpp

任何一种氨基酸的缺乏或使任何氨基酰 -tRNA 合成酶的失活突变都足以起始严紧反应，此表明严紧反应的触发器是位于核糖体 A位点中的空载 tRNA 。 在正常条件下仅有氨基酸 -tRNA 在 EE-Tu 的作用下位于 A位点。但当氨基酸 -tRNA 对一个特殊的密码子不能作出有效反应时，空载 tRNA便能得以进入，就阻断了核糖体的进程，而触发了一个空转反应（ idiling reaction ）

空载 tRNA 到达 A位， L11 蛋白或某些其他成分构象的改变激活 RelA 酶，（ p ） ppGpp 合成。

50S亚基的 rplK 基因编码

• ppGpp 的主要作用可能是影响 rRNARNA pol 与启动子结合的专一性，从而成为细胞内严紧控制的关键。

• ppGpp 也可抑制核糖体和其他大分子的合成，活化某些氨基酸操纵子的转录表达，抑制与氨基酸运转无关的转运系统，活化蛋白水解酶等。

• ppGpp缩短大部分模板的转录延伸阶段。

▲▲ppGppppGpp 对对 rRNArRNA 转录的抑制转录的抑制

ppGppppGpp 使大部分模板的转录效率下降使大部分模板的转录效率下降

44 、、 mRNAmRNA稳定性对翻译的调控稳定性对翻译的调控◆在 E.coli 中降解 mRNA外切酶有两种： RNaseII 和多核苷酸磷酸 化酶（ 3′—5′ ） , mRNA 的二级结构可以阻遏酶的作用。◆malE 和 malF 同在一个操纵子中，且紧密连锁，但 malE 的产物比 malF 的产物的含量高 20-40倍。◆在 malE 5′端有 2 个 IR 存在 , 可以形成茎环保护其不被外切酶降解

IR

周质结合蛋白：膜蛋白＝ 20/40 ：1

总结总结◆基因表达调控、操纵子、弱化子、正调控、负调控、诱导、阻遏

◆乳糖操纵子的正调控及负调控？◆色氨酸的负调控及弱化作用？◆其他水平的调控模式有哪些？◆ 翻译调控的机理？