1 dna struttura e replicazione cromosomi. 2 nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i...
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DNA struttura e replicazioneDNA struttura e replicazioneCromosomiCromosomi
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Nei primi decenni del ‘900 si raccolgono evidenze che i Nei primi decenni del ‘900 si raccolgono evidenze che i
cromosomi sono costituiti da DNA e proteine.cromosomi sono costituiti da DNA e proteine.
- Qual è la molecola responsabile dell’informazione - Qual è la molecola responsabile dell’informazione
biologica? biologica?
- Qual è la sua struttura? - Qual è la sua struttura?
Esperimenti di importanza fondamentale (Griffith, Esperimenti di importanza fondamentale (Griffith,
Avery et al., Hershey et al.) vengono effettuati negli Avery et al., Hershey et al.) vengono effettuati negli
anni ’30-50 su organismi semplici, quali batteri e anni ’30-50 su organismi semplici, quali batteri e
batteriofagi e dimostrano che il materiale genetico è il batteriofagi e dimostrano che il materiale genetico è il
DNADNA
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1950 E. Chargaff scopre che nel DNA di specie diverse1950 E. Chargaff scopre che nel DNA di specie diverse c’è proporzionalità nella composizione in basi azotate:c’è proporzionalità nella composizione in basi azotate:
organismoorganismo A%A% T%T% G%G% C%C%
PneumococcoPneumococco 29.829.8 31.631.6 20.520.5 18.018.0
lievitolievito 31.331.3 32.932.9 18.718.7 17.117.1
Riccio di Riccio di maremare
32.832.8 32.132.1 17.717.7 18.418.4
E.coliE.coli 2626 24.924.9 24.824.8 25.225.2
uomouomo 30.930.9 29.429.4 19.919.9 19.819.8
rattoratto 28.628.6 28.428.4 21.421.4 21.521.5
La quantità totale delle purine (A+G) è uguale a quella delle pirimidine (T+C)La quantità totale delle purine (A+G) è uguale a quella delle pirimidine (T+C)
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Cristallografia a raggi X (1952 R. Franklin)Cristallografia a raggi X (1952 R. Franklin)
L’ immagine di diffrazione ottenuta è compatibile con una struttura elicoidaleL’ immagine di diffrazione ottenuta è compatibile con una struttura elicoidale
R. FranklinM. Wilkins
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Nel 1953 James Watson e Francis Crick, basandosi sulle Nel 1953 James Watson e Francis Crick, basandosi sulle
osservazioni di cristallografia ai raggi X di Rosalind osservazioni di cristallografia ai raggi X di Rosalind
Franklin e sull’osservazione di Erwin Chargaff, propongono Franklin e sull’osservazione di Erwin Chargaff, propongono
il modello a doppia elica per la molecola di DNAil modello a doppia elica per la molecola di DNA
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Il DNA è un polimero di nucleotidiIl DNA è un polimero di nucleotidiNucleotide: molecola formata da uno zucchero pentoso (desossiribosio),Nucleotide: molecola formata da uno zucchero pentoso (desossiribosio),un gruppo fosfato e una base azotata (A, C, G, T)un gruppo fosfato e una base azotata (A, C, G, T)
A
G
T
C
5’
3’
5’
3’
1’
2’
4’
purine pirimidinepurine pirimidine
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Il DNA ha una struttura ad elica (in accordo coi dati di cristallografia) a doppio Il DNA ha una struttura ad elica (in accordo coi dati di cristallografia) a doppio
filamentofilamento
Gli scheletri zucchero-fosfato sono posizionati esternamente, mentre le basi sono Gli scheletri zucchero-fosfato sono posizionati esternamente, mentre le basi sono
dirette verso l’interno e si appaiano (tramite legami dirette verso l’interno e si appaiano (tramite legami
idrogeno) alle basi “complementari” del filamento idrogeno) alle basi “complementari” del filamento
opposto in accordo con quanto osservato da opposto in accordo con quanto osservato da
Chargaff (in tutti i DNA % A = % T; % C = % G). Chargaff (in tutti i DNA % A = % T; % C = % G).
L’appaiamento è sempre purina-pirimidinaL’appaiamento è sempre purina-pirimidina
e questo mantiene il diametro dell’elica uniformee questo mantiene il diametro dell’elica uniforme
I due filamenti sono antiparalleliI due filamenti sono antiparalleli
Modello a doppia elica del DNAModello a doppia elica del DNA
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Il diametro si mantiene costante perché le purine si appaiano alle Il diametro si mantiene costante perché le purine si appaiano alle pirimidinepirimidine
2nm
G ≡ C: 3 legami H
A = T: 2 legami H
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Il modelloIl modello
prefigurava genialmente una modalità diprefigurava genialmente una modalità di
replicazione semiconservativa che verràreplicazione semiconservativa che verrà
poi sperimentalmente dimostrata da poi sperimentalmente dimostrata da
Meselson e Stahl nel 1958Meselson e Stahl nel 1958
Ogni filamento dell’elica funziona Ogni filamento dell’elica funziona
da stampo per la sintesi di un nuovo filamento, sfruttando la da stampo per la sintesi di un nuovo filamento, sfruttando la
complementarietà delle basi complementarietà delle basi
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Modelli di replicazione del DNAModelli di replicazione del DNA
Alla fine del processo di sintesi potremmo ottenere:
due molecole di DNA ciascuna costituita a un filamento di nuova sintesi e da un filamento originario (semiconservativa)
una molecola di DNA costituita da due filamenti parentali e l’altra da due filamenti di nuova sintesi (conservativa)
due molecole di DNA costituite entrambe da un’alternanza di filamenti nuovi e parentali (dispersiva)
Filamento parentaleFilamento nuovo
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La replicazione del DNA è semiconservativa:La replicazione del DNA è semiconservativa:
ciascuno dei due filamenti parentali serve da stampociascuno dei due filamenti parentali serve da stampo
per la sintesi di un nuovo filamento e le due nuove doppie per la sintesi di un nuovo filamento e le due nuove doppie
eliche sono costituite da ognuna da un filamento vecchio eliche sono costituite da ognuna da un filamento vecchio
e da un filamento nuovoe da un filamento nuovo
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DNADNA polimerasipolimerasi
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nucleotide (nucleoside trifosfato): nucleotide (nucleoside trifosfato):
elemento costitutivo (monomero) degli acidi nucleicielemento costitutivo (monomero) degli acidi nucleici
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1414
La DNA polimerasi allunga il filamento nascente aggiungendo un
nucleoside trifosfato (nucleotide) all’estremità 3’OH
5’
3’
5’
3’
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La DNA polimerasi allunga il filamento nascente aggiungendo un
nucleoside trifosfato all’estremità 3’OH
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Entrambi i filamenti servono da stampo per la sintesi di nuovi
filamenti, quindi la sintesi procede sui due filamenti stampo in
direzione opposta 5’ 3’
3’5’5’
5’
3’
3’Direzione di sintesi
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Replicazione del DNA 1Replicazione del DNA 1 In corrispondenza delle origini di replicazione l’elicasi svolge i In corrispondenza delle origini di replicazione l’elicasi svolge i
filamenti parentali della doppia elica rompendo i legami H tra le basi filamenti parentali della doppia elica rompendo i legami H tra le basi e generando due filamenti singolie generando due filamenti singoli
Le ssbp (single strand binding proteins) legano il singolo filamento e Le ssbp (single strand binding proteins) legano il singolo filamento e lo stabilizzanolo stabilizzano
helicase
Denaturazione del DNA
Origin of replication
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Replicazione del DNA 2Replicazione del DNA 2 La primasi (RNA polimerasi-DNA dipendente) sintetizza un breve La primasi (RNA polimerasi-DNA dipendente) sintetizza un breve
innesco (primer) a RNA (le DNA pol non sono in grado di iniziare innesco (primer) a RNA (le DNA pol non sono in grado di iniziare ex novo la sintesi, ma solo di allungare un 3’ preesistente)ex novo la sintesi, ma solo di allungare un 3’ preesistente)
La DNA polimerasi III estende l’innesco a RNA sintetizzando DNALa DNA polimerasi III estende l’innesco a RNA sintetizzando DNA
helicase
innesco
3’
helicase
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2020
La DNA polimerasi procede, sul filamento leading, nella stessa La DNA polimerasi procede, sul filamento leading, nella stessa direzione di avanzamento della elicasi e quindi in maniera continua …direzione di avanzamento della elicasi e quindi in maniera continua …Ma cosa succede sul filamento complementare?Ma cosa succede sul filamento complementare?
helicase
Leading strand
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2121
primase
3’5’ helicase
Il filamento ritardato (lagging strand) viene sintetizzato in maniera Il filamento ritardato (lagging strand) viene sintetizzato in maniera discontinua, attraverso la sintesi di una serie di frammenti (fr. di discontinua, attraverso la sintesi di una serie di frammenti (fr. di Okazaki)Okazaki)
5’
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2222
Replicazione del DNA 3Replicazione del DNA 3 Rimozione del primer a RNA e “gap filling” da parte della Rimozione del primer a RNA e “gap filling” da parte della
DNA pol IDNA pol I Saldatura dei frammenti (ligasi)Saldatura dei frammenti (ligasi)
5’ helicase
ligase
helicase5’
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2323
La direzione di sintesi della DNA pol. è sempre 5’3’ uno dei due nuovi filamenti è sintetizzato in maniera discontinua, i frammenti vengono poi saldati
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La DNA polimerasi III è costituita da 10 diversi polipeptidi. La DNA polimerasi III è costituita da 10 diversi polipeptidi. Complessivamente l’enzima ha una struttura dimerica, che contiene Complessivamente l’enzima ha una struttura dimerica, che contiene due copie di ciascuna subunità e due siti cataliticidue copie di ciascuna subunità e due siti catalitici
La DNA polimerasi III agisce come un dimero a livello della forca La DNA polimerasi III agisce come un dimero a livello della forca replicativareplicativa
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2626
topoisomerasitopoisomerasi
LeLe Topoisomerasi Topoisomerasi hanno il compito di hanno il compito di rilassarerilassare (eliminare) le tensioni (eliminare) le tensioni che si creano nella doppia elica del DNA in seguito ai processi cellulari che si creano nella doppia elica del DNA in seguito ai processi cellulari che implichino un cambiamento di topologia del DNA (trascrizione, che implichino un cambiamento di topologia del DNA (trascrizione, replicazione del DNA) replicazione del DNA)
La separazione dei filamenti di una struttura elicoidale genera dei La separazione dei filamenti di una struttura elicoidale genera dei superavvolgimentisuperavvolgimenti
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2929
Replicazione del DNA circolareReplicazione del DNA circolare
Direzione di replicazione bidirezionale a partire da ORI
ORI è sequenza ricca in A-TNei procarioti l’origine di replicazione è singola
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3030
Le lunghe molecole di DNA lineare dei cromosomi eucarioti hanno Le lunghe molecole di DNA lineare dei cromosomi eucarioti hanno origini di replicazioni multipleorigini di replicazioni multiple
Direzione di replicazione bidirezionale a partire da ORImultiple
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3131
Le lunghe molecole di DNA lineare dei cromosomi eucarioti hanno Le lunghe molecole di DNA lineare dei cromosomi eucarioti hanno origini di replicazioni multipleorigini di replicazioni multiple
Le DNA polimerasi eucariotiche hanno una velocità di incorporazioneLe DNA polimerasi eucariotiche hanno una velocità di incorporazionedi 75 nucleotidi al secondodi 75 nucleotidi al secondo
La lunghezza media di un cromosoma umano è 1.4 x 10La lunghezza media di un cromosoma umano è 1.4 x 108 8 bpbp(3.2 x 10(3.2 x 1099 bp genoma aploide/ 23 cromosomi) bp genoma aploide/ 23 cromosomi)
Se ci fosse una singola ORI, per duplicare un singolo cromosomaSe ci fosse una singola ORI, per duplicare un singolo cromosomamedio occorrerebbero più di 10 giornimedio occorrerebbero più di 10 giorni
In realtà la fase S dura circa 8 oreIn realtà la fase S dura circa 8 ore
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3232
Il cromosoma batterico ha un’unica ORIIl cromosoma batterico ha un’unica ORI
Il genoma di E. coli è lungo 4.6x10 Il genoma di E. coli è lungo 4.6x10 66 bp bp
La velocità dellla Pol III arriva fino a 1000 nt/ secLa velocità dellla Pol III arriva fino a 1000 nt/ sec
Per replicare il cromosoma occorrono:Per replicare il cromosoma occorrono:
4.6x10 4.6x10 66 bp bp = 70 min c.a = 70 min c.a1000nt/sec1000nt/sec
su ogni lato della forca replicativasu ogni lato della forca replicativa
quindi 35 min c.aquindi 35 min c.a
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3333
Alla DNA polimerasi è associata un’attività esonucleasica che Alla DNA polimerasi è associata un’attività esonucleasica che
consente la “correzione di bozze”= rimozione di nucleotidi erraticonsente la “correzione di bozze”= rimozione di nucleotidi errati
(tasso di errore durante la sintesi (tasso di errore durante la sintesi 11xx1010-4-4 nt; dopo correzione nt; dopo correzione 1x101x10-10 -10 nt).nt).
Con questo sistema vengono corretti gli errori di appaiamento commessiCon questo sistema vengono corretti gli errori di appaiamento commessi
dalla DNA pol mentre la replicazione è in corsodalla DNA pol mentre la replicazione è in corso
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3434
Nel genoma umano (aploide) ci sono c.a. 3 x10Nel genoma umano (aploide) ci sono c.a. 3 x1099 nt nt
di questi solo 6 x 10di questi solo 6 x 107 7 nt (il 2%) sono sequenze codificanti (esoniche)nt (il 2%) sono sequenze codificanti (esoniche)
Se non ci fosse correzione di bozzeSe non ci fosse correzione di bozze (tasso di errore durante la sintesi (tasso di errore durante la sintesi 1x101x10--4 nt):4 nt):6000 mutazioni cadrebbero in sequenze codificanti a ogni 6000 mutazioni cadrebbero in sequenze codificanti a ogni replicazione del DNAreplicazione del DNA
Dopo correzione di bozzeDopo correzione di bozze ( (1x101x10-10-10 nt ): nt ):0.006 mutazioni cadono in sequenze codificanti a ogni replicazione 0.006 mutazioni cadono in sequenze codificanti a ogni replicazione del DNA (1 mutazione ogni 166 replicazioni)del DNA (1 mutazione ogni 166 replicazioni)
Sono comunque maggiori di quelle osservate in una cellula, perché Sono comunque maggiori di quelle osservate in una cellula, perché intervengono dei processi di riparazione del DNAintervengono dei processi di riparazione del DNA
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3535
RIPARAZIONE DEI DISAPPAIAMENTI (mismatch repair)RIPARAZIONE DEI DISAPPAIAMENTI (mismatch repair)
provvede ad effettuare una scansione del DNA provvede ad effettuare una scansione del DNA dopo la dopo la replicazione replicazione alla ricerca di appaiamenti erratialla ricerca di appaiamenti errati
Il sistema di riparazione èIl sistema di riparazione èin grado di riconoscere ein grado di riconoscere eriparare il filamento di riparare il filamento di nuova sintesinuova sintesi
![Page 33: 1 DNA struttura e replicazione Cromosomi. 2 Nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i cromosomi sono costituiti da DNA e proteine. - Qual](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062512/5542eb57497959361e8c1627/html5/thumbnails/33.jpg)
3636
Un errore non corretto viene poi perpetuato nei cicli di replicazioneUn errore non corretto viene poi perpetuato nei cicli di replicazionesuccessivisuccessivi
![Page 34: 1 DNA struttura e replicazione Cromosomi. 2 Nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i cromosomi sono costituiti da DNA e proteine. - Qual](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062512/5542eb57497959361e8c1627/html5/thumbnails/34.jpg)
3737
Difetti nel “mismatch repair”Difetti nel “mismatch repair”
Mutazioni nei geni che codificano per gli enzimi coinvolti Mutazioni nei geni che codificano per gli enzimi coinvolti
nel mismatch repair sono associate al cancro.nel mismatch repair sono associate al cancro.
La cellula non riesce a riparare le mutazioni che si La cellula non riesce a riparare le mutazioni che si
accumulano in tutto il genoma e che, quando colpiscono accumulano in tutto il genoma e che, quando colpiscono
geni che regolano la proliferazione cellulare, inducono la geni che regolano la proliferazione cellulare, inducono la
trasformazione cancerosa (es: cancro del colon non trasformazione cancerosa (es: cancro del colon non
poliposico ereditario HNPCC, autosomica dominante)poliposico ereditario HNPCC, autosomica dominante)
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3838
CromosomiCromosomi
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3939
CromatinaCromatina
All’interno del nucleo della cellula eucariotica si trova la cromatina (DNA genomico + proteine)
La cromatina appare organizzata in entità separate (cromosomi) quando la cellula è in mitosi
interfase tarda profase inizio anafase
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4040
centromero
= telomeri
Ciascun cromosoma prima della mitosi è costituito da due cromatidi fratelli, tenuti insieme dal centromero
braccio p
braccio q
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4141
TelomeriTelomeri Sequenze ripetute all’estremità dei Sequenze ripetute all’estremità dei
cromosomi cromosomi costituiti da alcune migliaia di costituiti da alcune migliaia di
ripetizioni di sequenze brevi ripetizioni di sequenze brevi nell’uomo: (TTAGGG)nnell’uomo: (TTAGGG)n Proteggono il cromosoma dalla Proteggono il cromosoma dalla
degradazione ad opera di nucleasi degradazione ad opera di nucleasi ed impediscono che le estremità dei ed impediscono che le estremità dei cromosomi si saldino tra di lorocromosomi si saldino tra di loro
![Page 39: 1 DNA struttura e replicazione Cromosomi. 2 Nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i cromosomi sono costituiti da DNA e proteine. - Qual](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062512/5542eb57497959361e8c1627/html5/thumbnails/39.jpg)
4242
TelomeriTelomeri Nelle cellule germinali e nelle cellule Nelle cellule germinali e nelle cellule
staminali la lunghezza dei telomeri staminali la lunghezza dei telomeri rimane costante ad ogni divisione rimane costante ad ogni divisione cellulare grazie all’attività della cellulare grazie all’attività della telomerasi telomerasi
Nelle cellule somatiche differenziate ad Nelle cellule somatiche differenziate ad ogni replicazione del DNA il telomero ogni replicazione del DNA il telomero subisce un accorciamentosubisce un accorciamento
La riduzione dei telomeri dopo n La riduzione dei telomeri dopo n divisioni provoca arresto della crescita divisioni provoca arresto della crescita cellulare e apoptosicellulare e apoptosi
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4343
Replicazione dell’estremità del Replicazione dell’estremità del cromosomacromosoma
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4444
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4545
CentromeroCentromero
È la regione del cromosoma in cui i È la regione del cromosoma in cui i
cromatidi fratelli sono uniticromatidi fratelli sono uniti
Sequenza ripetute, eterocromatinaSequenza ripetute, eterocromatina
In corrispondenza del centromero In corrispondenza del centromero
ci sono due cinetocori (uno per ci sono due cinetocori (uno per
cromatidio) che servono ad cromatidio) che servono ad
agganciare il cromosoma alle fibre agganciare il cromosoma alle fibre
del fusodel fuso
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4646
Lunghezza del DNA genomico Lunghezza del DNA genomico
Distanza tra due coppie di basi Distanza tra due coppie di basi 0.34nm0.34nm
3x103x1099 bp (numero di basi di un bp (numero di basi di un genoma aploide umano) x 0.34nm genoma aploide umano) x 0.34nm (distanza tra due coppie di basi) = (distanza tra due coppie di basi) = 1 metro1 metro (lunghezza di un genoma (lunghezza di un genoma umano aploide)umano aploide)
Deve essere compattato in un Deve essere compattato in un nucleo di pochi nucleo di pochi
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4747
NucleosomaNucleosoma L’unità fondamentale della cromatina è il nucleosoma: L’unità fondamentale della cromatina è il nucleosoma:
tratto di DNA (146bp) avvolto con c.a. due giri attorno a tratto di DNA (146bp) avvolto con c.a. due giri attorno a
un un corecore formato da un ottamero istonico formato da un ottamero istonico
Istoni: proteine cariche positivamente (arg, lys) che Istoni: proteine cariche positivamente (arg, lys) che
interagiscono coi gruppi fosfato del DNAinteragiscono coi gruppi fosfato del DNA
11 nm
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4848
(1.65 giri,146 pb)
Ottamero istoni: 2 molecole di H2A, H2B, H3 e H4Ottamero istoni: 2 molecole di H2A, H2B, H3 e H4
H3
H3
H4
H2A
H2B
H2A
H4
11 nm
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4949
Istone H1 e fibra da 30nmIstone H1 e fibra da 30nm
L’istone H1 (di giunzione) ha la funzione di compattare L’istone H1 (di giunzione) ha la funzione di compattare
ulteriormente i nucleosomiulteriormente i nucleosomi
Promuove la formazione della fibra solenoide da 30nmPromuove la formazione della fibra solenoide da 30nm
H1H1
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5050
Il cromosoma metafasico
presenta un alto grado di
compattazione della
cromatina
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5353
Eucromatina-eterocromatinaEucromatina-eterocromatina
Eterocromatina è più compatta Eterocromatina è più compatta e trascrizionalmente inattivae trascrizionalmente inattiva
Eucromatina interfasica trascrizionalmente attiva; si trova allo stato di Eucromatina interfasica trascrizionalmente attiva; si trova allo stato di cromatina distesa ed è accessibile agli enzimi della trascrizionecromatina distesa ed è accessibile agli enzimi della trascrizione
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5454
aa eucromatina: eucromatina:
frazione nucleare frazione nucleare trascrizionalmente trascrizionalmente attiva e a bassa densitàattiva e a bassa densità
sezione al microscopio elettronicosezione al microscopio elettronico
a
bbb eterocromatina: eterocromatina:
frazione frazione
trascrizionalmentetrascrizionalmente
inattiva ed inattiva ed elettrondensa elettrondensa
Eucromatina-eterocromatinaEucromatina-eterocromatina
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5555
Nelle femmine di mammifero uno dei due cromosomi X è Nelle femmine di mammifero uno dei due cromosomi X è inattivatoinattivatoIl cromosoma X inattivo è visibile nel nucleo interfasico di cellule Il cromosoma X inattivo è visibile nel nucleo interfasico di cellule ♀♀ come una masserella di cromatina condensata, addossata alla come una masserella di cromatina condensata, addossata alla membrana nuclearemembrana nucleare
Viene chiamata cromatina sessuale o Viene chiamata cromatina sessuale o corpo di Barrcorpo di Barr
Nuclei di cellule della mucosa orale Nuclei di cellule della mucosa orale di ♀di ♀ (sinistra) e (sinistra) e ♂♂ (destra) (destra)
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5656
CariotipoCariotipo
Il cariotipo di una cellula eucariota è dato dal numero e Il cariotipo di una cellula eucariota è dato dal numero e
dalla morfologia (posizione del centromero e dalla morfologia (posizione del centromero e
dimensioni) dei suoi cromosomi dimensioni) dei suoi cromosomi metafasicimetafasici
![Page 52: 1 DNA struttura e replicazione Cromosomi. 2 Nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i cromosomi sono costituiti da DNA e proteine. - Qual](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062512/5542eb57497959361e8c1627/html5/thumbnails/52.jpg)
5757
Il cariotipo umanoIl cariotipo umano
Nel 1955 Tjio e Levan (analizzando centinaia di metafasi in 5 tessuti Nel 1955 Tjio e Levan (analizzando centinaia di metafasi in 5 tessuti provenienti da 7 individui) dimostrano che il numero esatto di provenienti da 7 individui) dimostrano che il numero esatto di cromosomi umani è 46cromosomi umani è 46
Metafase dal primo rotolo fotografico in cui è stato identificato il numero esatto dei cromosomi umani (Tj io e Levan - 22 dicembre 1955)
Grazie alla cortesia del Prof . Marco Fraccaro
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5858
Cromosomi umaniCromosomi umani #1→ 22 sono uguali nel maschio e nella #1→ 22 sono uguali nel maschio e nella
femmina (autosomi)femmina (autosomi)
La 23La 23esimaesima coppia è quella dei cromosomi sessuali: coppia è quella dei cromosomi sessuali:
XXXX nella femmina nella femmina
(sesso omogametico)(sesso omogametico)
XYXY nel maschio nel maschio
(sesso eterogametico)(sesso eterogametico)
![Page 54: 1 DNA struttura e replicazione Cromosomi. 2 Nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i cromosomi sono costituiti da DNA e proteine. - Qual](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062512/5542eb57497959361e8c1627/html5/thumbnails/54.jpg)
5959
Denaturazione e rinaturazione del DNADenaturazione e rinaturazione del DNA
![Page 55: 1 DNA struttura e replicazione Cromosomi. 2 Nei primi decenni del 900 si raccolgono evidenze che i cromosomi sono costituiti da DNA e proteine. - Qual](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062512/5542eb57497959361e8c1627/html5/thumbnails/55.jpg)
6060
Rinaturazione in presenza di una sondaRinaturazione in presenza di una sonda
La sonda è una sequenza di DNA complementare a una determinata sequenza La sonda è una sequenza di DNA complementare a una determinata sequenza di interesse, che viene marcata con radioattivo o con fluorocromidi interesse, che viene marcata con radioattivo o con fluorocromi
sonda
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6161
Ibridazione del cromosoma con sonde fluorescentiIbridazione del cromosoma con sonde fluorescenti
Cromosomi metafasici su vetrino;Cromosomi metafasici su vetrino; Denaturazione del DNA; Rinaturazione in Denaturazione del DNA; Rinaturazione in presenza di un eccesso di sonda fluorescente specifica per una determinata presenza di un eccesso di sonda fluorescente specifica per una determinata regione del cromosomaregione del cromosoma
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6363
…AATCCCAATCC
TTAGGG*sonda
telomero
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6464
Fluorescent In Situ Hybridization
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6565
Origine evolutiva del cromosoma 2 Origine evolutiva del cromosoma 2 umanoumano
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6666
Origine evolutiva del cromosoma 2 umano: Origine evolutiva del cromosoma 2 umano: fusione di cr 12 e cr 13 di pan trogloditesfusione di cr 12 e cr 13 di pan troglodites
Sequenze telomeriche Sequenze telomeriche