5 exame andrologico no cao

7/25/2019 5 Exame Andrologico No Cao

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JBCA Jornal Brasileiro de Cincia Animal 2008 v. 1, n. 1, p. 49-65

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Exame androlgico do co

Breeding soundness evaluation of male dog

Isabel Candia Nunes da Cunha1

Resumo

O aumento do interesse na reproduo canina parece oferecer um futuro

brilhante medicina veterinria, sendo assim, se faz necessrio o

conhecimento das tcnicas e dos parmetros mnimos de avaliao da

fertilidade do co. Desta forma, os proprietrios de ces e os grandes

criatrios podero desfrutar brevemente, e em larga escala, das novas

biotecnologias propostas pelos pesquisadores da rea de reproduo em

pequenos animais. O objetivo desta reviso atualizar os conceitos,

principais tpicos e a metodologia a ser empregada para a realizao do

exame androlgico de ces.

Palavras chave: exame androlgico, avaliao do smen, co.

Abstract

The increasing interest in canine reproduction offers a great future in

veterinary medicine. To achieve this goal, the understanding of new

technologies available for the male dog reproduction evaluation is

mandatory. With these advances, new technologies will be offered in the

small animal reproduction field and they will be available to dog owners andkennels, in the coming future. The aim of this paper is review the concepts,

main topics and methodology to perform male reproductive examination.

Key words: Breeding soundness evaluation, semen evaluation, dog.

1Mdica veterinria. Professora da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Ncleo

de Apoio a Reproduo de Carnvoros Laboratrio de Reproduo e Melhoramento Gentico

Animal/CCTA. Email: [email protected]


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Introduo

A determinao das

caractersticas seminais umrecurso importante para se predizer

o potencial fertilizante de um

macho. Deve ser comumente posta

em prtica para avaliao da

capacidade reprodutiva dos animais

domsticos1.

A realizao do exameandrolgico em ces, prvio sua

seleo e/ou utilizao em um

esquema de reproduo artificial,

de grande importncia, sendo ainda

indicada em outras circunstncias

como: compra ou venda de

reprodutores, seleo de doadores

para uso em programas deinseminao artificial ou diagnstico

de patologias do sistema genital

masculino2,3,4,5.

Primeiramente, necessrio

realizar uma boa anamnese e um

exame fsico completo do animal,

observando-se a possibilidade da

existncia de doenas sistmicas

que podem interferir na esfera

reprodutiva. Aps isso, o trato

reprodutivo do macho deve ser

completamente avaliado.

I - Exame androlgico

1 - Anamnese

Deve ser realizada uma

anamnese cuidadosa do animal

para que o clnico obtenha uma

histria completa, partindo de todos

os rgos antes de investigar o trato

reprodutivo. Doenas de outros

rgos ou sistemas podem,secundariamente, afetar o trato

reprodutivo por extenso direta,

devido a infeces ou neoplasias,

ou indireta, por alterao dos

padres normais de secreo

hormonal (testosterona, FSH, LH ou

GnRH). Devemos ainda considerar

a adio exgena de drogas (ex:corticides), condies de estresse,

traumas ou doenas sistmicas

prvias5 .

2 - Exame Fsico

Um exame fsico completo

to importante quanto uma histria

completa. O reconhecimento de

problemas crnicos de outros

sistemas, assim como o

reconhecimento de defeitos

genticos, so importantes para um

bom direcionamento e avaliao de


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qualquer desordem reprodutiva6.

Dever ser solicitado o exame de

brucelose (figura 1) alm da

verificao de outros processos

patolgicos que podem sertransmitidos sexualmente ou por

contato direto (no caso de animais

que realizaro a monta natural).

3 - Exame especfico do trato

reprodutivo do co

O trato reprodutivo do co

deve ser completamente avaliado,partindo-se da bolsa escrotal,

testculos, epiddimo, prosseguindo

para o pnis e, finalmente,

examinando-se a glndula

prosttica. Durante o exame deve-

se observar principalmente os

seguintes aspectos2,3,4,5,7:

3.1 - Bolsa escrotal

Deve ser esparsamente

recoberta de plos, apresentar

espessura uniforme, ser

relativamente fina e macia ao toque

e apresentar-se mvel em relao

ao testculo. O animal no deve

apresentar dor palpao. A

inspeo visual do escroto tem

como objetivo verificar sinais de

inflamao, trauma, alteraes de

volume ou cicatrizes (figura 2).

3.2 - Testculos

Nos ces, a descida dos

testculos geralmente se completa

aos 10 dias de vida, e ambos os

testculos podem ser palpados apsseis semanas de vida. Somente

aps seis meses de vida do animal

que a ausncia dos testculos no

saco escrotal pode sugerir

criptorquidismo. Em ces jovens,

contudo, a retrao temporria do

testculo no canal inguinal ou lateral

ao pnis pode ocorrer devido aagitao ou excitao do animal8.

Os testculos devem ser

palpados e avaliados quanto ao

tamanho, forma e consistncia. O

testculo esquerdo geralmente

caudal ao direito. Apesar do

testculo dos ces ter um tamanho

mdio de 2 a 4cm de comprimento

e de 1,2 a 2,5cm de dimetro, as

diferenas de tamanho entre as

diversas raas excluem um padro

rgido com referncia a todos os

tamanhos de ces. Entretanto, o

profissional deve atentar para uma

grande diferena de tamanho entre

os dois testculos.

O par de testculos deve ser

oval, com contorno fino e regular, e

estar posicionado dorsoventralmente. A


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palpao de irregularidades, como

ndulos ou aderncias, pode sugerir

inflamao crnica, infeco ou

neoplasias.

A palpao do testculo no

deve ser dolorosa quando realizada

gentilmente. A dor palpao

sugere orquite aguda ou toro,

especialmente se o testculo estiver

aumentado de volume. Alm disso,

deve ter consistncia firme

(semelhante de bceps semi-flexionado) e no ser duro

palpao. Uma consistncia macia

ou pastosa sugere degenerao

testicular, enquanto uma

consistncia endurecida sugere

neoplasia ou orquite.

3.3 - Epiddimo e cordo

espermtico

O epiddimo fixado

dorsolateralmente superfcie do

testculo, com a cabea e a cauda

localizadas nos plos cranial e

caudal respectivamente. O

epiddimo continua como ducto

deferente, localizado dentro do

cordo espermtico, que contm:

ducto deferente, artria

espermtica, veias do plexo

pampiniforme, linfticos, nervos e

msculo cremaster. O epiddimo e o

cordo espermtico devem ser

palpados para observar provveis

reas de espessamento ou

aumento de volume.

3.4 - Pnis e prepcio

Sem a ereo, o prepcio

cobre completamente o pnis

canino normal. Devemos nos

preocupar com descargas

purulentas, sangue ou urina. O

pnis deve ser facilmente removido

do prepcio e completamenteexposto. O prepcio deve ser

tracionado caudalmente e o bulbo

da glande exposto. Quando h falha

na exposio do pnis, devemos

suspeitar de estreitamento do stio

prepcial (fimose) ou aderncia

entre o pnis e prepcio.

Depois de exposto, o pnis

deve ser totalmente avaliado para a

presena de inflamaes,

hematomas, trauma, fraturas,

corpos estranhos ou massas

tumorais (figuras 3 e 4).

A mucosa peniana deve ser

rsea clara, fina e indolor ao toque.

Uma balanopostite normal vista

como uma descarga mucopurulenta

mdia cobrindo a mucosa peniana.

O pnis deve ser palpado para


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tamanho e conformao. Uma

deformao congnita ou fratura

pode resultar em desvio e

inabilidade em retrair o pnis

completamente para a bainhaprepucial. Igualmente, uma

diminuio congnita do osso

peniano pode causar uma

excessiva flacidez da ponta do

pnis e uma habilidade de cpula

prejudicada.

3.5 - Glndula prosttica

A glndula prosttica a

nica glndula acessria em ces.

Normalmente localiza-se

cranialmente plvis, porm, a

disposio cranial pode estar

alterada no abdmen devido

disteno da bexiga por urina. A

glndula prosttica rodeia o colo da

bexiga, a poro cranial da uretra e

a poro terminal do ducto

deferente. Um septo mdio divide a

glndula em dois lobos iguais, finos

e firmes, que podem casualmente

ser palpados pelo reto. Em ces

grandes, a poro caudal da

prstata palpvel. O tamanho e o

peso da glndula prosttica so

dependentes da idade, raa e peso

corpreo do co.

A presena de tamanho e

consistncia anormais, assimetria

entre lobos ou dor palpao

suporta a presena de disfuno

prosttica e indica a necessidade deum diagnstico complementar para

a avaliao da glndula.

4 - Avaliao do smen

A anlise do smen deve ser

includa na avaliao androlgica

para detectar possveis problemas

de infertilidade ou sub-fertilidade,alm de fazer parte da rotina pr-

cobertura ou inseminao em ces.

4.1 - Tcnicas para a obteno do

smen

A coleta do smen pode ser

realizada excitando-se o macho na

presena ou ausncia de uma

fmea no cio, por estimulao

manual do pnis (figura 5) ou,

ainda, em casos excepcionais, por

meio de eletroejaculao3.

Todo o material que ser

utilizado para a coleta e exame do

smen dever ser de vidro ou

plstico aquecido a 37C, sendo

que o material plstico minimiza os

riscos de acidentes envolvendo o

animal e o coletador durante a

coleta7.


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O ejaculado canino

apresenta trs fraes distintas e,

segundo Heidrich (1977)9, foi

Freiberg, em 1935, o primeiro a

identificar o fracionamento noejaculado do co, chamando a

primeira frao de uretral ou pr-

espermtica, a segunda, de frao

rica em espermatozides, e a

terceira, de frao prosttica ou

ps-espermtica.

A primeira frao (ou pr-espermtica) apresenta um aspecto

aquoso, cujo pH varia de 6,2 a 6,5

com um volume mdio de 2,4

1,8ml. A segunda frao (ou

espermtica) apresenta um aspecto

de cremoso a aquoso, sua

colorao fisiolgica varia de branco

opalescente ao marfim, o pH situa-

se entre 6,3 a 6,6 e o volume mdio

varia de 0,5 a 3,5ml. A ltima frao

do ejaculado de origem prosttica,

apresenta um aspecto aquoso e seu

pH oscila entre 6,5 e 7,07,10,11,12. O

volume desta frao diretamente

proporcional atividade secretria

da glndula prosttica, sendo seu

volume mdio 6,48 4,32 ml13,4.

O fluido prosttico

produzido continuamente nos

machos caninos no castrados e

reflui retrogradamente para a bexiga

ou eliminado pelo orifcio externo

da uretra em quantidades variando

de pequenas gotas at muitos

mililitros, dependendo do tamanhoprosttico7.

De acordo com Feldman e

Nelson (1996)5, as freqncias de

coletas de smen para o co podem

ser: 1) uma coleta a cada 48 horas;

2) uma coleta ao dia durante 3 dias

consecutivos e um repouso de 2dias ou 3) duas coletas ao dia e

repouso de 2 dias, podendo ocorrer

um aumento na concentrao total

de espermatozides aps alguns

dias de repouso sexual.

4.2 - Avaliao macroscpica do

smen

a) Volume:

O volume mensurado atravs

da graduao do tubo coletor e a

quantidade de ejaculado obtida

podem variar de acordo com a

idade, tamanho, freqncia de

coletas, mtodo e durao das

coletas. O volume normal vai de 1 a

40ml por ejaculado2,3,5. Aguiar et al.

(1994)4, citaram valor de 5,98

2,3ml para ejaculado total de ces

de at 20 kg.


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O volume de um ejaculado

canino est diretamente ligado

quantidade de lquido prosttico

eliminado durante a ejaculao e,como descrito anteriormente, a

prstata canina tende a aumentar

com o avano da idade como

resultado de uma hiperplasia

prosttica benigna. A maioria dos

animais no castrados e com mais

de cinco anos apresenta a prstata

aumentada de volume eposicionada na regio

abdominal7,14.

b) Cor e aspecto:

A cor e o aspecto devem ser

mensurados por meio de anlise

subjetiva. A cor do ejaculado canino

pode variar de branco opalescente

ao turvo. Esta variao decorrente

de alteraes na concentrao

espermtica e o aspecto vai do

leitoso ao aquoso, dependendo da

quantidade de frao prosttica

coletada.

A cor amarelada de um

ejaculado canino sugere a presena

de urina; a cor verde com ou sem

grumos, sugestiva de pus e de

infeco do trato reprodutivo; a cor

vermelha sugere hemorragia, que

geralmente originria de

ferimentos ocorridos no pnis ereto

ou de processos patolgicos da

glndula prosttica2,3,5.

4.3 - Avaliaes microscpicas

do smen

a) Motilidade e Vigor:

A motilidade e o vigor so

avaliados subjetivamente colocando-se

uma gota de smen sobre lmina

aquecida (35-37 C), sendo estarecoberta por lamnula. O exame

realizado sob microscopia de

contraste de fase. O resultado

obtido deve ser expresso em

porcentagem (0-100) para a

motilidade e um escore de zero a

cinco (0-5) para o vigor6.

A avaliao da motilidade

espermtica definida como o

percentual de espermatozides

mveis de um ejaculado e o vigor

representa a intensidade com a qual

as clulas espermticas se

locomovem. O conjunto destas duas

avaliaes um importante

parmetro da qualidade e

viabilidade do smen6.

O movimento retilneo

progressivo considerado normal


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em ces e reflete habilidade e

viabilidade para fertilizar o

vulo2,3,5,15. Aguiar et al. (1994)4

observaram valores mdios de

68,91 12,38% para motilidadeespermtica e de 3,19 0,76 para o

vigor espermtico em ces com

peso corpreo de, no mximo,

20kg.

A avaliao subjetiva do

movimento espermtico muito

importante e deve ser realizadarotineiramente. No entanto, por ser

realizada por um tcnico, pode estar

sujeita a um grande nmero de

variaes, principalmente no que

diz respeito ao grau de habilidade e

experincia do avaliador.

Para que estas variaes

sejam minimizadas, uma avaliao

computadorizada do movimento

espermtico pode ser realizada.

Iguer-Ouada e Verstegen (2001)16

propuseram a padronizao de um

mtodo computadorizado de

avaliao do movimento

espermtico, que apresentou

timos resultados na avaliao de

espermatozides da espcie

canina.

(HTR-IVOS10 analyzer, Hamilton Thorn

Research, Beverly, Mass, USA)

Utilizando-se o sistema

computadorizado podemos avaliar a

qualidade do movimento. Dentre as

possveis avaliaes ressalta-se:

motilidade espermtica total (MT),motilidade total progressiva (MP),

padro mdio de velocidade

espermtica (VAP), velocidade de

deslocamento em linha reta (VSL),

velocidade de deslocamento

curvilneo (VCL), sobreposio do

deslocamento retilneo e do

deslocamento curvilneo VSL/VCL(STR) e, ainda, a linearidade do

movimento, ou seja a proximidade

da linha de deslocamento com uma

linha linear (LIN) dos

espermatozides16.

Ellington et al. (1993)17

apresentaram resultados mdios de

73 9% para a motilidade

espermtica de ces atravs de

avaliao computadorizada. Eles

concluram que a motilidade

progressiva pode variar

consideravelmente entre indivduos,

e que a associao da motilidade

progressiva e da concentrao

espermtica caracteriza, na prtica,

de modo satisfatrio, o potencial

fertilizante de uma amostra de

smen.


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b) Concentrao espermtica:

A concentrao

determinada atravs da contagem

das clulas espermticas em

Cmara de Neubauer, aps diluiode 1:20 em gua, e o nmero de

espermatozides expresso em

mm3. Aguiar et al. (1994)4

confirmaram ser normal para ces

de at 20 kg de peso corpreo, a

concentrao espermtica de 47,73

12,20 x 106/ ml de ejaculado.

c) Avaliao da morfologia

espermtica:

Uma das metodologias que

pode ser utilizada para a avaliao

da morfologia espermtica a

colorao dos esfregaos de smen

pelo mtodo Karras modificado18,

incluindo-se a etapa de fixao dos

esfregaos de smen canino por

imerso em soluo salina aquecida

a 37C19. A colorao com

Vermelho Gongo e Cristal Violeta6

tambm possibilita a colorao de

esfregaos de smen de co. Aps

a colorao, os esfregaos devem

ser avaliados em microscopia de

campo claro com aumento de

1000x, observando-se as estruturas

da cabea, colo, pea intermediria

e cauda. Devem ser avaliadas 200

clulas espermticas em cada

esfregao. Os resultados devem ser

expressos em porcentagem e

registrados individualmente.

Feldman e Nelson (1996)5

eJohnston et al. (2001)20

classificaram as alteraes da

morfologia espermticas de ces

como: 1) primrias (aquelas

advindas de defeitos na

espermatognese) e 2) secundrias

(aquelas surgidas durante o trajeto

entre o testculo e o epiddimo, nointerior do epiddimo ou devido a

manipulao do smen). Segundo

estes autores, reprodutores normais

devem apresentar 70% de clulas

espermticas com morfologia

normal. Dentre as clulas

espermticas consideradas

alteradas podero haver, no

mximo, 10% de alteraes

morfolgicas primrias e 20% de

alteraes morfolgicas secundrias.

De acordo com o Manual

para Avaliao Androlgica do

CBRA6, as alteraes morfolgicas

dos espermatozides dos

reprodutores caninos devem ser

classificadas como: 1) defeitos

maiores (aqueles de maior impacto

sobre a fertilidade) e 2) defeitos

menores (aqueles que traduzem


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menor impacto para a fertilidade da

clula espermtica)21. Ainda

segundo este manual, os

reprodutores podem apresentar, no

mximo, 20% de defeitos menorese 10% de defeitos maiores em seus

ejaculados.

Oettl (1993)22afirmou que a

avaliao da morfologia

espermtica o teste que

apresenta maior correlao com a

fertilidade, aps verificao de queces com mais de 60% de

espermatozides normais

apresentaram taxa de fertilidade de

61%, enquanto outros, com menos

de 60% de espermatozides

normais, uma taxa de fertilidade de

apenas 13%.

d) Avaliao da integridade das

membranas espermticas:

A manuteno da integridade

das membranas espermtica de

fundamental importncia para que

uma clula espermtica finalize sua

funo primordial que a

fertilizao. A membrana de uma

clula espermtica intacta realiza

transporte seletivo de fluidos e em

condies de hiposmolaridade.

Estas trocas continuam at que um

ponto de equilbrio osmtico (extra e

intracelular) seja alcanado. Para

que o equilbrio seja alcanado

ocorre um aumento de volume

intracelular, j que a clula

espermtica dever diluir o seumeio intracelular at que a condio

hiposmtica do meio externo seja

atingida. Este processo fisiolgico

induz ao edema da cauda dos

espermatozides, que pode ser

facilmente verificado atravs de

microscopia ptica pelo

enrolamento das caudas dosespermatozides. Este mecanismo

simples de defesa da clula

espermtica gerou um mtodo de

avaliao da integridade das

membranas celulares denominado

teste hiposmtico (HOS), que logo

foi includo na rotina de vrios

laboratrios de andrologia23,24.

O teste hiposmtico pode ser

considerado mais do que uma

avaliao da morfologia e da

integridade da clula espermtica.

Ele tambm um indicativo da

capacidade funcional da membrana

em realizar trocas com o meio

extracelular, que uma das

principais necessidades no

momento da capacitao e posterior

fecundao, principal objetivo de

uma clula espermtica23,24.


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Para realizao do teste

hiposmtico, os espermatozides

so incubados em uma soluo

hiposmtica (150mOSM) eposteriormente avaliados quanto

sua morfologia sob contraste de

fase. As clulas espermticas

ntegras apresentam enrolamento

de caudas, evento que pode ser

visualizado atravs de microscopia

de contraste de fase. A

porcentagem de espermatozidescom enrolamento de cauda, ou seja,

ntegros, pode ento ser

computada24.

Um novo teste hiposmtico

para o smen do co utilizando a

gua como soluo hiposmtica foi

desenvolvido25, verificando alta

correlao entre o HOS e a

motilidade espermtica. Para a

realizao deste teste, uma parte de

smen deve ser misturada a quatro

partes de gua, obtida diretamente

da torneira, e incubada em banho-

maria a 37C por 5 minutos. O

resultado do HOS deve ser

verificado sob microscopia ptica

comum utilizando-se cmara de

Neubauer, onde 200

espermatozides devem ser

avaliados. Estes devem ser

classificados como reativos ao HOS

quando apresentarem cauda

enrolada e o resultado deve ser

expresso em porcentagem (%).

Um outro mtodo que pode

ser utilizado para a verificao da

integridade das membranas

espermticas de ces a uma

associao das sondas

fluorescentes Iodeto de Propdio e

Carboxifluorescena , descrita por

Harrison e Vickers (1990)26 emodificada por Cunha et al.

(1996)27. Para a execuo do teste,

10l de smen so acrescidos de

40l da soluo de trabalho,

composta por: 960 l de soluo de

citrato de sdio a 3 %; 10 l soluo

de iodeto de propdio (10 mg de

iodeto de propdio + 20 ml soluo

fisiolgica); 20ml soluo de

carboxifluoresceina (9,2mg

carboxifluoresceina + 20ml

DMSO); 10l soluo 1:80 de

formalina a 40%. As amostras

devero ser avaliadas sob

iluminao epifluorescente

(400x) e devero ser contadas

200 clulas que sero classificadas

como: ntegras (as clulas emitindo

fluorescncia verde) ou lesadas (as

clulas com o ncleo emitindo fluorescncia

vermelha).


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Figura 1: Co. Bolsa escrotal. Orquite. 1- Acmulo delquido que levou ao aumento de volume da bolsaescrotal causado por brucelose canina.

Figura 2:Co. Bolsa escrotal. Orquite. 1- Ulceraes eaumento de volume da bolsa escrotal.


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Figura 3:Co. Pnis. 1- Hematoma peniano.

Figura 4: Co. Pnis. 1- Base do pnis; 2- Tumorvenreo transmissvel.


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Figura 5:Co. Coleta de smen por meiode estimulo manual do pnis.

Figura 6: Co. Espermatozides. 1 Espermatozidentegro; 2- Espermatozide parcialmente lesado; 3-Espermatozide lesado. 1000x. Carboxifluorescena eIodeto de propdio.


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Recebido em: Novembro de 2007

Aceito em: Junho de 2008

Publicado em: Abril / Maio / Junho de 2008

5 exame andrologico no cao

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