5/7/2018 -...
TRANSCRIPT
5/7/2018
1
Edi DharmanaNeni Susilaningsih
Noorwijayahadi
Fakultas KedokteranUniversitas DIPONEGORO
PT INDUSTRI JAMU DANFARMASI SIDOMUNCUL
PENELITIAN YANG PERNAH DILAKUKANBERSAMA SIDOMUNCUL
EchinaceaAndrografis paniculata
Allium sativumTolak Angin CairTolak Angin Anak
SimunoxTolak Linu
Curcuma domesticaDll.......
PENGARUH TOLAK ANGIN
TERHADAP SISTIM IMUNITAS
2010 -- NOW
METODOLOGI PENELITIAN
Pengaruh TAC terhadap manusia dewasa sehat
Uji coba pada mencit Balb/C betina sehat
5/7/2018
2
The Immune System
B
T
IL-4
Helminths
IFN
MAJORCYTOKINEPODUCTS
PROTECTAGAINST
Innate immunity
Mac IL-10, TGF IL-10TGF-
Autoimmunity, allergy?
Inducedchronicinfection
T regTnaive
IL-12, IL-18 IFN- IntracellularpathogensTh1
IL-4IL-45, 13
Helminths,extracellularpathogens
Th2
EOSAdapted and redrawn from Playfair J. Infection and Immunity 2004
ROI
Bacteria
Fungi
Viruses
Fungi
NO
Fagositosis
Limfosit
Interferon gamma
IL-4
Makrofag
Limfosit
Amomi fructus (kapulaga)
Foeniculi fructus (minyak adas)
Myristicae semen (pala)
Centellae herba (pegagan)
Parkiae semen (kedawung)
Menthae arventis (daun mint)
Zingiberis rhizoma (jahe merah)
Amomi fructus (kapulaga)
Foeniculi fructus (minyak adas)
Myristicae semen (pala)
Centellae herba (pegagan)
Parkiae semen (kedawung)
Menthae arventis (daun mint)
Zingiberis rhizoma (jahe merah)
Beberapa kandungan TABeberapa kandungan TA
Anti-inflamasi, penghangat
Anti-inflamasi, anti-mikroba
Anti-inflamasi, nafsu makan
Anti-tumor, tonik
Tonik, obat luka
Anti-bakteri, anti-virus
Meningkatkan imunitas
5/7/2018
3
Andrograhis paniculata Meningkatkan IL-2
Menghambat prod. NO
Centella herba Meningkatkan fagositosis
Meningkatkan TNF dan IL-2
Zingiberis rhisoma Meningkatkan IL-1, Il-6,GMCSF
Amomi fructus Menekan ekpresi TNF dan IL-6
Myristicae semen Menghambat TNF, IL-6, IL-1, NO
METODOLOGI PENELITIAN
Uji Coba Pada Mencit Balb/C betina
5/7/2018
4
BalbC betina usia 6 – 8 minggu , BB 20- 40 gram
Perlakuan : 250 ul TAC selama 7 hari
Kontrol : Aquabidest 250 uL selama 7 hari
Hari ke 7 : Diambil : Serum, Lien dan Makrofag peritoneal
EKSPERIMEN IN VIVO PADA MENCIT INBRED BalbC BETINA EKSPERIMEN IN VIVO PADA MENCIT INBRED BalbC BETINA
1. Kapasitas Produksi Interferon gamma dan Interleukin 4 ELISA
2. Kapasitas Fagosistosis Makrofag mempergunakan Latex
3. Kapasitas Produksi NO oleh Makrofag ELISA
HARI KE 7
Pemeriksaan Kapasitas Produksi Sitokin
Dengan melakukan kultur splenosit dan distimulasi denganConA selama 72 jamSupernatan kemudian dipisahkan dan diperiksa kadar IL4dan IFN gamma
Fungsi fagositosis Makrofag
Makrofag peritoneal dipaparkan terhadap Latex
Supernatan diperiksa kadar NO
Index Fagositosis Makrofag
5/7/2018
5
Kapasitas Produksi NO Kapasitas Produksi IFN
Kapasitas Produksi IL-4
0
5
10
15
20
25
30
KP1
P2P3
IFN-ϒIL-4
Kontrol TAC
RASIO IFN / IL-4
5/7/2018
6
PENGARUH TAC TERHADAP MANUSIA DEWASA SEHAT :
1. PROSENTAS I SEL T PERIFER
2. KAPASITAS PRODUKSI INTERFERON GAMMA
3. FUNGSI ORGAN : HEPAR DAN GINJAL
METODOLOGI PENELITIAN
1. SUDAH MEMILIKI IJIN EDAR DARI BADAN POM
2. SUDAH LOLOS UJI TOKSISTAS
3. SUDAH LOLOS UJI TERATOGENIK
4. SUDAH LAMA BEREDAR DI MASYARAKAT LUAS
Kriteria Inklusi :
1. Pria / wanita sehat usia 15 s/d 45 tahun
2. Berat badan 45-60 kg
3. Tidak sedang menggunakan obat-obatimustimulan / imunosupresan minimal 15hari sebelum penelitian
4. Tidak sedang hamil / menstruasi
Respondenn: 99
Hari ke 0 dan 6 diperiksakadar IFN-g dan IL-4 pada
20 sampel
Hari ke 0 dan 6 dilakukanpemeriksaan kadar Hb,
jumlah leukosit, SGOT,SGPT, Kreatinin, ureum
pada 30 sampel
Hari ke 0 dan ke 6dilakukan penghitungan
prosentase limfosit Tpada ke 99 sampel.
Perlakuan: 2X1TAC,7 hari
ALURPENELITIAN
Tahap 1 Tahap 2
* 10 lainnya mendapatplasebo
5/7/2018
7
Tahap 1 : pemeriksaan limfosit T
pre and post group design
Tahap 2 : pemeriksaan sitokin
randomized pre and post control group design
uji samar ganda
Pre and Post Test
TAC 2 X 1 / hari selama 7 hari
TAHAP 1 : pemeriksaan limfosit T
Synonims :
LFA-2 , srbcR
Main cellular expressions :
T cells, NK cells,Thymocytes
Functions :
T cell activation, CTL andNK cell-mediated lysis
CD 2CD 2
Abbas, 2005. Cellular and molecularImmunology
PEMERIKSAAN SEL T T rosette
5/7/2018
8
Pre and Post Test
TAC 2 X 1 / hari selama 7hr
TAHAP 2 : PEMERIKSAAN IFN-
Metode ex-vivo (whole blood culture)
Produksi sitokin distimulasi denganPHA
Kultur selama 3 X 24 jam pada suhu37C, CO2 7.5 %
Superanatan diperiksa kadar sitokin
Melalui metode Elisa
0102030405060708090
100
hr 0 hr 7
P = 0.001
% T rosette pada sebelum dansesudah Penelitian
KELOMPOK VARIABEL X±SDhr 0
MEDIANhr 0
X±SDhr 6
MEDIANhr 6
Nilai-p
PERLAKUAN(n=20)
% Limfosit
Kadar IFN
73,6±6,6
86,2±45,9
73,0
96,8
80,2±5,4
105,7±42,4
79,5
104,0
< 0,0001 *)
0,001 *)
PLASEBO(n=10)
% Limfosit
Kadar IFN
65,3±7,7
113,8±39,9
63,5
107,9
66,0±7,7
102,3±33,2
63,5
90,1
0,671 *)
0,259 *)
Pengaruh TAC terhadap Hb, lekosit, Kreatinin, Ureum
SGOT dan SGPT pada hari ke 0 dan hari ke 7.
VARIABEL X±SD hr0 X±SD hr6 NILAI-P NILAINORMAL
Hemoglobin
Jumlah Lekosit
Kadar Ureum
Kadar Kreatinin
Kadar SGOT
Kadar SGPT
12,4±1,2
6,4±1,5
13,0±3,6
1.01±0.017
19,6±4,0
23,6±9,8
12,2±1,0
5,9±1,4
10,6±1,8
1.005±0.1
17,7±5,3
19,8±8,4
0,052
0,126
0,001
0.637
0,123
0,082
12 – 14 g/dL
4 -103/mL
7 – 12 mg/dl
0.7 – 1.4
< 31
< 31
5/7/2018
9
KESIMPULAN
TOLAK ANGIN CAIR :1. TAC meningkatkan : kapasitas produksi Interferon g dan IL-4,
index fagositosis dan NO oleh makrofag pada mencit Balb/C
2. TAC meningkatkan prosentase Limfosit T dan Interferon gamma
pada manusia sehat