adln - airlangga digital library networkrepository.unair.ac.id/9845/12/fulltext- muchlis.1.pdf ·...
TRANSCRIPT
PEMERIKSAAN KADAR TOTAL CHOLESTEROL DAL AM SERUM DENGAH METODA LIEBERMANH HJRCHARD DANLBESI<III) CHLORIDA
SKRIPSIDIHJAT UNTUK MEMENUHI SYARAT-SYARAT MENCAPAI GELAR SARJANA FAfMASl PADA FAKULTAS FAi&SASl
UNIVERSITAS AIRLAHGGA 1978
oleh
MUCHLIS DAEMAWAN 306 F.F.
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
KATA PENGANTAR
Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih dan aha Pe-
nyayang, dengan memanjatkan puji syukur kehadirat fuhan-
Yang Maha Esa atas taufiq dan hidayahnya, maka selesai *
lah tuges skripsi yang diberikan kepada kami.
Dalam menyelesaikan tugas skripsi ini telah banyak
bantuan dan budi baik yang kami terima dari berbagai pihak*
Rasa terima kaslh kami ucapkan kepada Almamater kami, -
Fakultas Farmasi Universitas Airlangga yang telah mendi-
dik kami selama Ini.!
Pada kesempatan ini perkenankanlah kami menyampai1 "I
kafi rasa terima kasih dan penghargaan yang se-besar-besar
nya kepada pembimbing kami dr*S.P* Edljanto dari bagian**
Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga
yang dengan rela hatl telah membimbing kami secara sekaa
ma dan memberikan kesempatan yang seluas-luasnya dalam *
menggunakan segala fasilitas yang ada pada Laboratorium-
Patologl Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlang-
ga.
Ucapan terima kasih juga kami sampaikan kepada -
Bapak &jr*FX Budhianto^ Suhadi, Bapak dr.Siswanto Darmudi-
serta seluruh Staff den karyawan bagian Patologi Klinik*
Fakultas Ke&okteran Universitas Airlangga yang telah ba^
nyak membantu dalam penjxisunan skripsi ini..
ill
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Tele lupa pula kami ucapksn terima kasitx kami kepa-
da rekan-rekan mahasiswa serto pthak-pihak loin yang tak
dapat koml sebutkan dalara kesempatan ini, yang telah ba*
nyak membantu dalara penyusunan skripsi Ini*
Semoga Tuhan Xeng Haha Esa cnelimpahkan rakhraadNya
kepada Bapak-Bapak, Ibu-Ibu ssrta rekan-rekan samua seau
al dengan araal balk yang teleh diberikan kepada kaai%.
Akhirnya kepada Panitis Skripsi yang teleh memeriksa dan
menerima skripsi ini, kami ueapkan terima kasih*
Sebagai akhir kata kami berharap semoga skripsi »
ini ada pula monf aafcnya Amin»;
Surabaya# akhir Mei 1970*
Penyusun*
iv
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
D4FIAR ISI I
HalamanKA$A PIKGAKTAH .......... ...... Ill
DAF3PAR ISI ............. ....................... ..v
DAFTAI TABEL |Mi i H m • M i • M4 i i i t i • t « « i • H i m t i m ViHil
DAFTjlP GAMBAH i>X
DAFSAB Xij^PXHAK # # *;* • * • • « . « « * • « t i n • « * » • * • * • » • • • * • • K
PMDAHOliUAR ........ .................. 1
B A B :
X * TXN*J AU AN PU5TAKA I* * * • ■• i • 6
1« Cholesterol dalam darah • 6
2* Motoda pemeriksaan kadar total choleste-
rol dalam ssnliB *« * Q
a* Motoda iilebermann Burchard ..».**»*** 8
Motoda Bos l (X i l ) Chlorids -# • * • # * * * . • 10
Xi* Metoda Kerja •*«#♦*«•• ***•••*!** 12
1« Bah an penelitian **«*••*««•»•»•*****••••• 12
2» Pemeriksaan kadar ............ 13
3* a.Pemerlksaan kadar total cholesterol ~
dalam serum dengan motoda Liebermann -
Burchard • #*..«*«***** ****.•**•*****« * 14
fc.Alat yang dipergunakan 14
c .Pembuatan reagencia . ...........*«*« Ik
d.Prosedur pemeriksaan kadar total cho ■-
lestorol dalam serum kontrol **«•«••** 15
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
B A B
XIX.
Halaman
©•Proeedur pemeriksaan kadar total cholesterol
dalam serum sampel **•.«*»•*.... **•..... 16
f* a*Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam so
nun dengan metoda Besi(III) Chlorlda •»*«»•• 16
b.Alat yang dipergunakan • *......17
caPembuatan reagensia ... ............. 1?
d «Pembuatan kurva absorbs! terhadap/Ranjang ge
lombang *.*«•** - .. * .••*.***»*«*,*.. * * . 16
©.Pembuatan kurva baku **"••****.••'.* i • * • 19
f*Prosedur pemeriksaan kadar total cholesterol
dalam serum kontrol •.«*<•••*« . 20
g.Prosedur pemeriksaan kadar total cholesterol
dalam serum compel « 21
HASIL P35ECOBAAK ...............22
L. Basil pengamatan dari metoda Liebcrmann Bur -
chard .......................22
a. Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam -
serum kontrol 22
b* Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam *
serum sarapel ......... ***** 25
2* Hasil pengamatan dari metoda Besi{III) Chlo -
rida . ............. *........ 25
a* Pembuatan kurva absorbs! terhadap pancang -
gelonbang • •••••*•••**«•< •***»••*•*«••**«•• 25
vi
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
B A B : Halaman
b* Pembuatan kurva baku *«.*...*<.... 2?
X. Perhitungan adanya korclaci linlair(Pear -*
80n) antara koneentrasi dengan absorbs! •• 30
2* Persamaan garis regressi linialr ......... 33
c. Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam se-
rum kontrol .«•*••«** * **•»*«« #«. *. **«*#.»«»• . 34
d* Pemeriksaan kadar total cholesterol,dalam se-
rum sanpel *. * ... ....................... 35
3* Analisa hasil-hasil yang didapat dari dua me-
toda k * * * * * * . * . . , . * * 3 9
1« Hasil pengamatan pengamatan dari dua meto-
da terhadap serum kontrol .*•*.. 39
2*a«Hasil pengamatan-pengamatan dari dua me *
toda terhadap serura eompel .*»•««*.****»• 40
b.Paxred **t** test •««..#..#•*«*******«•**«• 40
IV* PEMBICARAAN. .•..*•*«*•#•» ..***.•*• *«•*■<•••••**•• 48
V. KESIMPULAN.... ................... ......... 49
VI* saran-saran... ............ .......30
VII. hihgkasab ................. ................ 51
LAMPIRAN ..... ............ *.....** ... 45
DAJFTAR PUSTAKA ...... ......... ............. ...... 53
Vii
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
M W Vm f A S S L
i Urnlmm
I# K#*U U*6*r fc©t«&
m l dti** i#S’Ua kontrol doarl mtatLQ *
Lftobtfmro «urchard •»**♦•»##*»*«**«*»* 22
21« Htail jp*rhltun£«ifc kftdtar fcafcal Cholo*fc**
r&X <Ul*ss ******** fs&mpei 1 4« * i u t t o e * *
Li«fr«rwftsn Buretiarrt 33
I I I * f t a t i X t m r i g * » * t * n &U«lftb«o*frai t * r b e *
d®l> psnjtn* 6©rl «#*©£* J3**i-
(XIX) Chlorlfi. ............ ......... 26
If*...... p w y p m ztm , nll«i &&#&rt>st $+rhft «
d a p f a m j t t a t r a f t i « a a u r u f c w a f c a d o B » « l {111 *
ChlOFldi *M«M<«««t*«**«t*lMt«#*M«ll 21?
V» Dtftm tcMitJk p « ssb u ktt« n AftMtJPft &$*•«&•*£ *
<mt*ris to»*e»tr**l €*oe*!» *b*or?>»i pad*
«*•**•**#•••«*•••**••• 50
Tim Xhifca «mtufc mmfUkQxm p a r a * » * a n £1* 1# r a *
&*a«#l p#di« $p#te&3*etfo$os&trt ********** 33
VXX* &4t*i& jjarkittttt ett fecfte* total Cfcoieafca*
&&% 6*lm aarwkontrol d«ri &*te£« %»i
(XIX} Chior iC* 35
9X11* Hmmil p * r h l t i m s * n feadar CtioXaafa**
roi dalasft 'sampell 6«rl ata*o6a U#»
« i { X X I) Chlor ida • • * # * * • • • # * * « * * * # * # * * 3 7
XX* fiaall r a t a - r a f c a t i t p a a a ^ a X a a r u a d a H *
dua c»to6« *»*•••**••***«**»*•**#****«* /+1
«ill
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
M W Vm f A S S L
i Urnlmm
I# K#*U U*6*r fc©t«&
m l dti** i#S’Ua kontrol doarl mtatLQ *
Lftobtfmro «urchard •»**♦•»##*»*«**«*»* 22
21« Htail jp*rhltun£«ifc kftdtar fcafcal Cholo*fc**
r&X <Ul*ss ******** fs&mpei 1 4« * i u t t o e * *
Li«fr«rwftsn Buretiarrt 33
I I I * f t a t i X t m r i g * » * t * n &U«lftb«o*frai t * r b e *
d®l> psnjtn* 6©rl «#*©£* J3**i-
(XIX) Chlorlfi. ............ ......... 26
If*...... p w y p m ztm , nll«i &&#&rt>st $+rhft «
d a p f a m j t t a t r a f t i « a a u r u f c w a f c a d o B » « l {111 *
ChlOFldi *M«M<«««t*«**«t*lMt«#*M«ll 21?
V» Dtftm tcMitJk p « ssb u ktt« n AftMtJPft &$*•«&•*£ *
<mt*ris to»*e»tr**l €*oe*!» *b*or?>»i pad*
«*•**•**#•••«*•••**••• 50
Tim Xhifca «mtufc mmfUkQxm p a r a * » * a n £1* 1# r a *
&*a«#l p#di« $p#te&3*etfo$os&trt ********** 33
VXX* &4t*i& jjarkittttt ett fecfte* total Cfcoieafca*
&&% 6*lm aarwkontrol d«ri &*te£« %»i
(XIX} Chior iC* 35
9X11* Hmmil p * r h l t i m s * n feadar CtioXaafa**
roi dalasft 'sampell 6«rl ata*o6a U#»
« i { X X I) Chlor ida • • * # * * • • • # * * « * * * # * # * * 3 7
XX* fiaall r a t a - r a f c a t i t p a a a ^ a X a a r u a d a H *
dua c»to6« *»*•••**••***«**»*•**#****«* /+1
«ill
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
M f T M &AIBAB
Oemfecr t itelrcaan
1* Xtirva rat let sbsorbei tsrfceda# jsftD ang #© ~
lonbang derl Chole&tftrol fcansefttreet XQOmj/
100 ol{ 200 mg/lQQ&ti 300 «g/iOQ ml ..... 28
2. £urva tiilsl ohe&rbsi ter&etiep koneentraet- ^ftri Chaleatdvol» podo ptnjang goloabong -
§90 Cta 51
3. Kurva bsfeta <5»rl psraeseaeR gori® regreesi -
y # 0f00262 x ~ 0,012 ............. . 36
£x
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
DAFfAR MIHMg
lampiran i Haldsssn
U Mfltrtboel *tw ............ ».*-.... 45
2* Sebel £feooritl«si*l valuoe of correlation * «
coefficient {3?* 0,05) .................... 47
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
1
PENDAHULUAN
Cholesterol akhir-akhir ini banyak dibicarakan di-
masyarakat luas dinegara kita*
Didalam kesehatan manusia menurut beberapa penyelidik dinya-
takan adanya hubungan yang erat antara type hyperlipoprote-
inemia dengan konsentrasi cholesterol dal am darah dimariaN
bagai manifestasi dari penyakit diabetes mellitusjhypothy -
roidism;obstruktive biliaris;nephritis;pangkreatitis(l,10
20).Dan oleh beberapa penyelidik lainnya terdapat bukti-bukti
yang menyokong adanya sangkut paut antara lemak darah dengan
penyakit arteriosclerosis(20).
Dengan mengingat hal-hal tersebut diatas penting
sekali terutama dokter untuk mengetahui secara tepat dan
cepat kadar total cholesterol dalam darah seorang penderi-
ta sehingga didalam menentukan diagnosa serta terapinya da-
pat secara tepat dan memuaskan.
4uga sudah hampir merupakan hal yang rutin bila seorang pen
derita menanyakan berapa tinggi kadar cholesterolnya untuk
mencegah hal-hal yang tak diinginkan bterhubungandengan kese-
hatan tubuhnya. *
Untuk membantu pemeriksaan-pemeriksaan rutin da-
lam suatu laboratorium klinik sangatlah diinginkan suatu
cara pemeriksaan kadar total cholesterol dalam serum darah
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
2
yang cepat serta masih mempunyai precision(ketelitian)
yang baik(3)*
Suatu pemeriksaan dikatakan mempunyai precision(kete-r
litian) yang baik apabila hasil pemeriksaan tersebut
dilakukan berulang-ulang mempunyai selisih yang kecil*
Dalam kepustakaan banyak kita jumpai cara pe-
meriksaan kadar total cholesterol dalam serum(3»6»7»
10,14,16,20) dan pada umumnya fase-fase analisanya «
sbb:
s I strj&si j:
Ekstraksi cholesterol' bebas maupun dalam ben-
tuk ester dengan pelarut-pelarut organik
misalnyas chloroform5asam aeetat glasialjiso-
propanol;
Ekstraksi dengan pelarut organik campuran mi-tsalnya ; chloroform-H^SO^pekat;ethyl asetat -
etanoljchlorof®"®^^11©!» etanol-eter«
11:Sagoni fikasi£
Saponifikasi dari cholesterol ester dengan
KOH dalam alkohol panas,kemudian cholesterol
bebasnya dipresipitasikan baru hasil presipi-
tatnya diekstraksi dengan pelarut organik ter-
tentu selanjutnya baru direaksikan dengan re-
agen warna
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
III:Isolasi :
Baik cholesterol bebas maupun ester dapat dii-
solasi dengan cara :
ekstraksi ci
presipitasi dengan suatu zat tertentu ;
kromatografi kolom 5
Penentuan titik akhir ini dapat pula dibagi-
bagi berdasarkan cara penentuannya yaitu3
l*secara gravlmetri
2*secara tetrasi
3«secara kolorimetri
^•secara spektrofotometri*
Pemeriksaan kadar cholesterol paling sering dilakukan
secara spektrofotometri dengan mempergunakan metoda
reaksi warna Liebermann Burchard (4,6,7*8) .
Kemudian pada akhir-akhir ini telah dimulai dipakai
metoda reaksi warna. Besi(III)Chlorida dalam lingkungan
HgSO pekat (3,6,10*16,19#20) .
Dalam pemeriksaan kadar total cholesterol
dalam serum dari dua metoda tersebut pemeriksaannya,
dapat secara pemeriksaan langsung dan dapat juga se-
cara tidak langsung*
Pemeriksaan langsung ialah,: pemeriksaan kadar total
cholesterol dilakukan tanpa ekstraksi ataupun presi-
pitasi dari protein serum*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Pemeriksaan tak langeung ialah ; pemeriksaan kadar to*
ted cholectorol dilakuka» dongan ©katrakoi ataupun pre
alpltaei dari protein corunj *
Ponoriknaun secara epoktro £otoaotri kadar total »
cholcetorol dalem aorum dari penelitian kami ini*kaai~
memilih motoda roakoi warn kiobomonn Barchord dari *
Herckoteot kit (4) dan metoda roakcl trama Booi(III) ~
Chlorida (19) dari S5ak«B*
Metoda roaksl warno Lioboroonn Burehard dari ltor-
koteot kit ini s
pemeriksaannya oecara langsung; caranya nudah ; banyak
dipergunakan dHaboratorium-iafeoratoriua klinik ; tota
pl harpanya ralativ aafaal •
Sedangkan netoda roakci warna Bosi{XXI) Chlorida*
dan Sak*B* ini i
pmoz&keaannya cocnra tak lancoung $ waktu pcraerlkeaan
rolativ oingkat j barganya rclatlv mwah *
Balea ponolitiaa kami inl^kacl Ingin aengotahui *
apakah kodua notodo tersobut Gccurccy(kotopatamya) •
fcaiiv'tidak baik *
Untuk makeud toroobut nacin^nacinc notoda kaai*»
lokukan penoritoaan torhadap eorun kontrol yaitu n cm «*
porgunaitan "lilptd Control*1 Procilipj Bochringer Hannhoin
Boct Gojraaany *
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Serum kontrol tersebut mempunyai harga rata-rata choles-
terol (x) & 133 mg% dan range pemeriksaan s 110 ** 166 rag#
( 1*2 S D ) *
Serum kontrol ialah suatu serum yang telah diperiksa *
berulang-ulang kali kadar total cholesterolnya dengan -
pemeriksaan yang telltt dan saksaraa dari metoda dan
alat-alat yang terbaik sehingga menghasilkan harga rata-
rata total cholesterol(x) dalam serum tersebut dengan -
batas-batas pemeriksaan tertentu ( x * 2 S D ) *
Apabila hasil rata-rata pemeriksaan masing-masing*
metoda tersebut sama/mendekati harga rata-rata dari se -
rrnn kontrol dan juga memenuhi range pemeriksaan *maka -
metoda tersebut accuracy(ketepatannya) baik *
Sebaliknya apabila hasil rata-rata pemeriksaan masing -
macing metoda tersebut jauh dari harga rata-rata serum -
kontrol dan juga tidak memenuhi range pemeriksaan* maka-
metoda tersebut accuracy(ketepatannya) tidak baik •
Selanjutnya kami melagukan pemeriksaan kadar to -
tal cholesterol dalam serum pasien (penderita) dengan -
kedua motoda tersebut s kemudian kami ingin mencoba me **
ngetahui preclsion(ketelitlan) dari kedua motoda terse -
but •
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan