a magyar andrológiai társaság x. kongresszusa tapolca ... fileaz uro-genitalis traktus...
Post on 09-Apr-2019
217 Views
Preview:
TRANSCRIPT
1 | O l d a l
Az áramlási citometria alkalmazása a
modern andrológiai kivizsgálásban
Az áramlási citometria (flow cytometry) alapú
diagnosztikai módszerek alkalmazása egyre
nagyobb teret nyer az andrológiai
kivizsgálásokban. A módszer nagy előnye, hogy
a sejtek
elkülönítése mellett
festékek alka
elkülöníteni az ondóban levő spermiumokat a
többi sejttől, illetve baktériu
további előnye
technikákhoz képest, hogy kis minta
mennyiségből, rövid idő alatt
tízezer) spermiumot
értékelni
található egyéb sejtfajt
1. ábra BD Facs Canto II áramlási citométer
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
O l d a l w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
amlási citometria alkalmazása a
modern andrológiai kivizsgálásban
Az áramlási citometria (flow cytometry) alapú
diagnosztikai módszerek alkalmazása egyre
nagyobb teret nyer az andrológiai
kivizsgálásokban. A módszer nagy előnye, hogy
a sejtek lézer
elkülönítése mellett
tékek alkalmazásával
elkülöníteni az ondóban levő spermiumokat a
többi sejttől, illetve baktériu
további előnye a hagyományos mikroszkópos
technikákhoz képest, hogy kis minta
mennyiségből, rövid idő alatt
tízezer) spermiumot
ni (1.ábra).
található egyéb sejtfajt
BD Facs Canto II áramlási citométer
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
amlási citometria alkalmazása a
modern andrológiai kivizsgálásban
Az áramlási citometria (flow cytometry) alapú
diagnosztikai módszerek alkalmazása egyre
nagyobb teret nyer az andrológiai
kivizsgálásokban. A módszer nagy előnye, hogy
fényszórás alapján való
elkülönítése mellett, specifikus fluoreszcens
mazásával, szelektíven képes
elkülöníteni az ondóban levő spermiumokat a
többi sejttől, illetve baktériumtól. A módszer
a hagyományos mikroszkópos
technikákhoz képest, hogy kis minta
mennyiségből, rövid idő alatt, nagyszámú (több
tízezer) spermiumot képes
Ugyanez igaz az ondóban
található egyéb sejtfajtákra is.
BD Facs Canto II áramlási citométer
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
amlási citometria alkalmazása a
modern andrológiai kivizsgálásban
Az áramlási citometria (flow cytometry) alapú
diagnosztikai módszerek alkalmazása egyre
nagyobb teret nyer az andrológiai
kivizsgálásokban. A módszer nagy előnye, hogy
fényszórás alapján való
specifikus fluoreszcens
szelektíven képes
elkülöníteni az ondóban levő spermiumokat a
mtól. A módszer
a hagyományos mikroszkópos
technikákhoz képest, hogy kis minta
nagyszámú (több
képes kvantitatívan
Ugyanez igaz az ondóban
BD Facs Canto II áramlási citométer
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
amlási citometria alkalmazása a
modern andrológiai kivizsgálásban
Az áramlási citometria (flow cytometry) alapú
diagnosztikai módszerek alkalmazása egyre
nagyobb teret nyer az andrológiai
kivizsgálásokban. A módszer nagy előnye, hogy
fényszórás alapján való
specifikus fluoreszcens
szelektíven képes
elkülöníteni az ondóban levő spermiumokat a
mtól. A módszer
a hagyományos mikroszkópos
technikákhoz képest, hogy kis minta
nagyszámú (több
kvantitatívan
Ugyanez igaz az ondóban
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
Az áramlási cito
alábbi andrológiai
1. Az
élő/apoptotikus/halott spermiumok
abszolút száma és részaránya
2. A spermiumok DNS állományának
integritása/fragmentáltsága
3. Az ondófolyadékban levő gyulladásos
sejtek alosztályainak azonosítása és
kvantifikálása (neutrofil granulocita,
limfocita alpopulációk, monocyta)
4. Gyulladásos fehérjék (citokinek és
kemokinek) kvantitatív meghatározása
5. A spermiumok reaktív oxigén gyök
(ROS) előfordulását és
spermiumonkénti mennyiségét
6. Az egyes spermiumok in vitro
akroszóma reakció készségét (spontán
és kiváltott akroszóma reakció)
A fentiekben felsorolt áramlási citometriás
módszerek mindegyike hozzáférhető a
LabMagister Kft.
általa használt vizsgálatokhoz
előírt belső referencia tartománnyal is
rendelkezik. Ennek alapján az andrológus
módjában
laboreredmény
betegpopuláció adatállományához viszonyítani
A felsorolt m
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa Tapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
Az áramlási citometriát leggyakrabban az
alábbi andrológiai vizsgálatok
ondófolyadékban levő
élő/apoptotikus/halott spermiumok
abszolút száma és részaránya
A spermiumok DNS állományának
integritása/fragmentáltsága
Az ondófolyadékban levő gyulladásos
sejtek alosztályainak azonosítása és
kvantifikálása (neutrofil granulocita,
limfocita alpopulációk, monocyta)
Gyulladásos fehérjék (citokinek és
kemokinek) kvantitatív meghatározása
A spermiumok reaktív oxigén gyök
(ROS) előfordulását és
spermiumonkénti mennyiségét
Az egyes spermiumok in vitro
akroszóma reakció készségét (spontán
és kiváltott akroszóma reakció)
A fentiekben felsorolt áramlási citometriás
módszerek mindegyike hozzáférhető a
LabMagister Kft.-nél. A LabMagister Kft. a
általa használt vizsgálatokhoz
belső referencia tartománnyal is
k. Ennek alapján az andrológus
áll egy
dményét a
betegpopuláció adatállományához viszonyítani
A felsorolt módszerek által jellemzett
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t f r o m 2 0 1 6
metriát leggyakrabban az
vizsgálatokhoz használják:
ondófolyadékban levő
élő/apoptotikus/halott spermiumok
abszolút száma és részaránya
A spermiumok DNS állományának
integritása/fragmentáltsága
Az ondófolyadékban levő gyulladásos
sejtek alosztályainak azonosítása és
kvantifikálása (neutrofil granulocita,
limfocita alpopulációk, monocyta)
Gyulladásos fehérjék (citokinek és
kemokinek) kvantitatív meghatározása
A spermiumok reaktív oxigén gyök
(ROS) előfordulását és
spermiumonkénti mennyiségét
Az egyes spermiumok in vitro
akroszóma reakció készségét (spontán
és kiváltott akroszóma reakció)
A fentiekben felsorolt áramlási citometriás
módszerek mindegyike hozzáférhető a
nél. A LabMagister Kft. a
általa használt vizsgálatokhoz az ISO 15189 által
belső referencia tartománnyal is
k. Ennek alapján az andrológus
egy adott páciens
a teljes vizsgált
betegpopuláció adatállományához viszonyítani
dszerek által jellemzett
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1-3
f r o m 2 0 1 6
metriát leggyakrabban az
hoz használják:
ondófolyadékban levő
élő/apoptotikus/halott spermiumok
abszolút száma és részaránya
A spermiumok DNS állományának
integritása/fragmentáltsága
Az ondófolyadékban levő gyulladásos
sejtek alosztályainak azonosítása és
kvantifikálása (neutrofil granulocita,
limfocita alpopulációk, monocyta)
Gyulladásos fehérjék (citokinek és
kemokinek) kvantitatív meghatározása
A spermiumok reaktív oxigén gyök
(ROS) előfordulását és
spermiumonkénti mennyiségét
Az egyes spermiumok in vitro
akroszóma reakció készségét (spontán
és kiváltott akroszóma reakció)
A fentiekben felsorolt áramlási citometriás
módszerek mindegyike hozzáférhető a
nél. A LabMagister Kft. az
az ISO 15189 által
belső referencia tartománnyal is
k. Ennek alapján az andrológusnak
adott páciens
teljes vizsgált
betegpopuláció adatállományához viszonyítani.
dszerek által jellemzett
Workshop összefoglaló 3
f r o m 2 0 1 6
metriát leggyakrabban az
ondófolyadékban levő
élő/apoptotikus/halott spermiumok
A spermiumok DNS állományának
Az ondófolyadékban levő gyulladásos
sejtek alosztályainak azonosítása és
kvantifikálása (neutrofil granulocita,
Gyulladásos fehérjék (citokinek és
A spermiumok reaktív oxigén gyök
(ROS) előfordulását és
Az egyes spermiumok in vitro
akroszóma reakció készségét (spontán
A fentiekben felsorolt áramlási citometriás
módszerek mindegyike hozzáférhető a
z
az ISO 15189 által
belső referencia tartománnyal is
nak
adott páciens
teljes vizsgált
.
dszerek által jellemzett
2 | O l d a l
ondó/spermium
összefüggésben vannak egymással
2. ábra
gyakorolt káros hatása
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PM
C3921845/
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
O l d a l w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
ondó/spermium
összefüggésben vannak egymással
A reaktív oxigén gyökök spermiumokra
gyakorolt káros hatása
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PM
C3921845/
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
ondó/spermium paraméterek szoros
összefüggésben vannak egymással
A reaktív oxigén gyökök spermiumokra
gyakorolt káros hatása
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PM
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
paraméterek szoros
összefüggésben vannak egymással (2.ábra).
A reaktív oxigén gyökök spermiumokra
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PM
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
paraméterek szoros
A reaktív oxigén gyökök spermiumokra
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PM
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
Az uro-genitalis traktus
gyulladásának
által használt áramlási citometriára alapuló
leukospermia vizsgálat
nyújt a gyulladás okának felderítésére, mint a
hagyományos peroxidáz teszt
nem a fehérvérsejteket, hanem az által
termelt peroxidáz jelenlétét mutatja ki
szemben az áramlási citometria
fehérvérsejteken található specifikus felületi
markerek detektálásával képes az ondóban
található leukocitákat
limfocitákat
sorolni (3. Ábra
3. ábra Az ondóban található fehérvérsejtek és
cytokinek kimutatása és kvantifikálása
Gyulladásos sejtek és
14
Gyöngyök + CD45 festék segítségével összleukocitaszám meghatátozása
Sejtpopulációk %-os meghatározása (granulociták/monociták/l
Megjegyzés: A vitális festés alkalmazásával az esetlegesen jelenlévő baktériumok is láthatóvá válnak, meghatározhatók a mintából.
Gyulladásos sejtek
Leukocytospermia and sperm preparation Reproductive Biology and Endocrinology 2009,
A gyulladás sejtes elemeinek detektálása
mellett az áramlási citometria
biztosít a gyulladásos mediátorok pl.
kemokinek, citokinek, növekedési faktorok
mennyiségi
természetű mediátorok mellett gyuladásra
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa Tapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
genitalis traktus feltételezett
ásának diagnózisára a
által használt áramlási citometriára alapuló
leukospermia vizsgálat sokkal több információt
nyújt a gyulladás okának felderítésére, mint a
hagyományos peroxidáz teszt
nem a fehérvérsejteket, hanem az által
termelt peroxidáz jelenlétét mutatja ki
z áramlási citometria
fehérvérsejteken található specifikus felületi
markerek detektálásával képes az ondóban
található leukocitákat és azon belül a
limfocitákat, kvantitatív módon
3. Ábra).
Az ondóban található fehérvérsejtek és
cytokinek kimutatása és kvantifikálása
Gyulladásos sejtek és
LabMagister Ltd.
Gyöngyök + CD45 festék segítségével meghatátozása
os meghatározása ták/limphociták)
A vitális festés alkalmazásával az esetlegesen jelenlévő baktériumok is láthatóvá válnak, meghatározhatók a mintából.
Gyulladásos sejtek
Giuseppe Ricci, et al.and sperm preparation - a flow cytometric study
Reproductive Biology and Endocrinology 2009, 7:128 doi:10.1186/1477-7827-7-128
A gyulladás sejtes elemeinek detektálása
mellett az áramlási citometria
biztosít a gyulladásos mediátorok pl.
kemokinek, citokinek, növekedési faktorok
meghatározására is. A protein
természetű mediátorok mellett gyuladásra
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t f r o m 2 0 1 6
feltételezett
diagnózisára a LabMagister Kft.
által használt áramlási citometriára alapuló
sokkal több információt
nyújt a gyulladás okának felderítésére, mint a
hagyományos peroxidáz teszt. A peroxidáz teszt
nem a fehérvérsejteket, hanem az által
termelt peroxidáz jelenlétét mutatja ki
z áramlási citometria a különböző
fehérvérsejteken található specifikus felületi
markerek detektálásával képes az ondóban
és azon belül a
kvantitatív módon, alpopulációkba
Az ondóban található fehérvérsejtek és
cytokinek kimutatása és kvantifikálása
Gyulladásos sejtek és cytokine
LabMagister Ltd.
Cytokine tartalomCytokine meghatározás CBA technikával ondó plazmából
20-30 fg/mL-es koncentrációig képes detektálni a módszer
IL-6/IL-8 meghatározás jelenleg
Irodalmi adatok alapján meghatározott, általunk alkalmazott ondó plazma koncentrációk
IL-8 conc. in the semenplasma:
High
Elevated
NormalIL-6 conc. in the semen
plasma: High
Normal
Waltraud Eggert-Kruse, et al.Relationship of seminal plasma interleukinHuman reproduction Vol. 16; No. 3, pp. 517-
A gyulladás sejtes elemeinek detektálása
mellett az áramlási citometria
biztosít a gyulladásos mediátorok pl.
kemokinek, citokinek, növekedési faktorok
meghatározására is. A protein
természetű mediátorok mellett gyuladásra
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1-3
f r o m 2 0 1 6
feltételezett
LabMagister Kft.
által használt áramlási citometriára alapuló
sokkal több információt
nyújt a gyulladás okának felderítésére, mint a
. A peroxidáz teszt
nem a fehérvérsejteket, hanem az általuk
termelt peroxidáz jelenlétét mutatja ki. Ezzel
különböző
fehérvérsejteken található specifikus felületi
markerek detektálásával képes az ondóban
és azon belül a
opulációkba
Az ondóban található fehérvérsejtek és
cytokinek kimutatása és kvantifikálása
cytokine tartalom
tartalommeghatározás CBA technikával ondó
koncentrációig képes detektálni a
8 meghatározás jelenleg
Irodalmi adatok alapján meghatározott, általunk alkalmazott ondó plazma koncentrációk
2000 pg/mL
Elevated 1000-2000 pg/mL
Normal <1000 pg/mL
>15 pg/mL
Normal <15 pg/mL
interleukin (IL) -8 and IL-6 with semen quality-528, 2001
A gyulladás sejtes elemeinek detektálása
mellett az áramlási citometria lehetőséget
biztosít a gyulladásos mediátorok pl.
kemokinek, citokinek, növekedési faktorok
meghatározására is. A protein
természetű mediátorok mellett gyuladásra
Workshop összefoglaló 3
f r o m 2 0 1 6
. A peroxidáz teszt
opulációkba
A gyulladás sejtes elemeinek detektálása
lehetőséget
biztosít a gyulladásos mediátorok pl.
kemokinek, citokinek, növekedési faktorok
meghatározására is. A protein
természetű mediátorok mellett gyuladásra
3 | O l d a l
utaló jel
is. A gyulladás során a leukociták,
neutrofil gran
(ROS) ter
folyadékba mely onnan bejuthat
belsejébe.
citometriával kvantitatívan jellemezhető.
LabMagister
megadja a ROS tartalmú (ROS pozitív)
spermiumok százalékos részarányát az össz
spermiumszámhoz képest és értékeli a ROS
pozitív spermiumokban levő ROS mennyiséget.
Mivel vannak minták, ahol a ROS tartalmú
spermiumok részaránya vi
a ROS intenzitás magas és
spermiumok ROS tartalmának
jellemzésére a
intenzitás értéket is megadja
4. ábra A spermiumok reaktív oxigén gyök (ROS)
tartalmának a mérése
11
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
O l d a l w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
utaló jel a szabad gyökök
A gyulladás során a leukociták,
neutrofil granulociták reaktív ox
termelnek és sze
folyadékba mely onnan bejuthat
belsejébe. A spermiumok ROS tartalma áramlási
citometriával kvantitatívan jellemezhető.
LabMagister Kft. által
megadja a ROS tartalmú (ROS pozitív)
spermiumok százalékos részarányát az össz
spermiumszámhoz képest és értékeli a ROS
pozitív spermiumokban levő ROS mennyiséget.
Mivel vannak minták, ahol a ROS tartalmú
spermiumok részaránya vi
a ROS intenzitás magas és
spermiumok ROS tartalmának
jellemzésére a LabMagister Kft. a
intenzitás értéket is megadja
A spermiumok reaktív oxigén gyök (ROS)
tartalmának a mérése
ROS tartalom a spermiumokban
Pink label
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
a szabad gyökök emelkedett
A gyulladás során a leukociták,
lociták reaktív ox
elnek és szekretálnak az ondó
folyadékba mely onnan bejuthat
A spermiumok ROS tartalma áramlási
citometriával kvantitatívan jellemezhető.
Kft. által kifejlesztett ROS teszt
megadja a ROS tartalmú (ROS pozitív)
spermiumok százalékos részarányát az össz
spermiumszámhoz képest és értékeli a ROS
pozitív spermiumokban levő ROS mennyiséget.
Mivel vannak minták, ahol a ROS tartalmú
spermiumok részaránya viszonylag alacsony, de
a ROS intenzitás magas és vica versa
spermiumok ROS tartalmának egy számmal való
LabMagister Kft. a
intenzitás értéket is megadja (4. ábra
A spermiumok reaktív oxigén gyök (ROS)
tartalmának a mérése
0
2e+5
4e+5
6e+5
8e+5
1e+6
400060008000100001200014000
Mea
n flu
ores
cenc
e in
tens
ity x
% R
OS+
spe
rm
Mean fluorescence intensity (MFI)
Association among sperm ROS positivity parameters
.
ROS tartalom a spermiumokban
% ROS+MFI
Pink label
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
emelkedett jelenléte
A gyulladás során a leukociták, különösen a
lociták reaktív oxigén gyököket
kretálnak az ondó
folyadékba mely onnan bejuthat a spermiumok
A spermiumok ROS tartalma áramlási
citometriával kvantitatívan jellemezhető.
kifejlesztett ROS teszt
megadja a ROS tartalmú (ROS pozitív)
spermiumok százalékos részarányát az össz
spermiumszámhoz képest és értékeli a ROS
pozitív spermiumokban levő ROS mennyiséget.
Mivel vannak minták, ahol a ROS tartalmú
szonylag alacsony, de
vica versa, ezért a
egy számmal való
LabMagister Kft. a %ROS x R
4. ábra).
A spermiumok reaktív oxigén gyök (ROS)
0 20406080100120
020004000 % ROS+ sperm
Mean fluorescence intensity (MFI)
Association among sperm ROS positivity parameters
ROS tartalom a spermiumokban
% ROS+ Magas (73.7%)Magas (7609)
The best samples
The worth samples
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
jelenléte
különösen a
gyököket
kretálnak az ondó
a spermiumok
A spermiumok ROS tartalma áramlási
citometriával kvantitatívan jellemezhető. A
kifejlesztett ROS teszt
megadja a ROS tartalmú (ROS pozitív)
spermiumok százalékos részarányát az összes
spermiumszámhoz képest és értékeli a ROS
pozitív spermiumokban levő ROS mennyiséget.
Mivel vannak minták, ahol a ROS tartalmú
szonylag alacsony, de
, ezért a
egy számmal való
%ROS x ROS
A spermiumok reaktív oxigén gyök (ROS)
Magas (73.7%)Magas (7609)
The best samples
The worth samples
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
Az laboreredmény több ezer spermium egyedi
mérése nyomán
által használt áramlási citometria teszt a
spermiumokban levő
addig a hagyományo
Oxisperm) csupán
szemi kvantitatív
gyökök mennyiségét.
tartalma szoros összefüggést mutat a
spermiumok DNS állományának
fragmentáltságával. A tudományos irodalom
egy mintából származó
egyedi kvantitatív jellemzéséből született
eredményt megbízhatóbbnak tekinti, mint a
szemi kvantitatív
analízisén alapuló eredményeit.
elterjedtebb
LabMagister Kft. által használt
“spermium
módszer 5. ábra
5. ábra
integritás vizsgálata
5
DFI = 12 %
Acrid
in O
rang
e em
issz
ió50
0⁄52
6 nm
-en
(dup
la s
zálú
DN
S)
Enyhe savas kezelés denaturálja a DNS
Acridin Orange (AO) festék képes kötődni a szimpla szálú illetve a dupla szálú DNS lánchoz
Eltérő emissziós maximum a kötődés függvényében
Acridin Orange emisszió 460⁄650 nm
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa Tapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
eredmény több ezer spermium egyedi
e nyomán születik.
által használt áramlási citometria teszt a
spermiumokban levő ROS mennyiséget méri,
hagyományos ROS gyorsteszt (pl.
) csupán az ondófolyadékban jellemzi
emi kvantitatív módon
gyökök mennyiségét.
tartalma szoros összefüggést mutat a
spermiumok DNS állományának
fragmentáltságával. A tudományos irodalom
egy mintából származó
egyedi kvantitatív jellemzéséből született
eredményt megbízhatóbbnak tekinti, mint a
szemi kvantitatív tesztek néhány száz spermium
analízisén alapuló eredményeit.
elterjedtebb és egyben
LabMagister Kft. által használt
spermium chromatin s
5. ábra.
Spermiumok DNS állományának
integritás vizsgálata
Módszer
LabMagister Ltd.
DFI = 12 % DFI = 27 %
Enyhe savas kezelés denaturálja a DNS-t a törések mentén
Acridin Orange (AO) festék képes kötődni a szimpla szálú illetve a dupla szálú DNS lánchoz
Eltérő emissziós maximum a kötődés függvényében
emisszió 460⁄650 nm-en (ssDNS)
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t f r o m 2 0 1 6
eredmény több ezer spermium egyedi
k. Míg a LabMagister Kft.
által használt áramlási citometria teszt a
ROS mennyiséget méri,
s ROS gyorsteszt (pl.
az ondófolyadékban jellemzi
módon, a reaktív oxigén
A spermiumok ROS
tartalma szoros összefüggést mutat a
spermiumok DNS állományának
fragmentáltságával. A tudományos irodalom
egy mintából származó több ezer spermium
egyedi kvantitatív jellemzéséből született
eredményt megbízhatóbbnak tekinti, mint a
tesztek néhány száz spermium
analízisén alapuló eredményeit.
egyben a legelfogadottabb
LabMagister Kft. által használt,
romatin structure assay
Spermiumok DNS állományának
Módszer
LabMagister Ltd.
DFI = DNS fragmentációs index
Átlag:Medián (Kvartilis 2):
Kvartilis 1:Kvartilis 3:
Dar
absz
ám
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1-3
f r o m 2 0 1 6
eredmény több ezer spermium egyedi
Míg a LabMagister Kft.
által használt áramlási citometria teszt a
ROS mennyiséget méri,
s ROS gyorsteszt (pl.
az ondófolyadékban jellemzi,
a reaktív oxigén
A spermiumok ROS
tartalma szoros összefüggést mutat a
spermiumok DNS állományának
fragmentáltságával. A tudományos irodalom az
több ezer spermium
egyedi kvantitatív jellemzéséből született
eredményt megbízhatóbbnak tekinti, mint a
tesztek néhány száz spermium
Ezért egyre
a legelfogadottabb a
úgynevezett
assay” azonos
Spermiumok DNS állományának
DFI = DNS fragmentációs index
Átlag: 15,3Medián (Kvartilis 2): 13,0
Kvartilis 1: 8,6Kvartilis 3: 20,5
DFI (%)
Workshop összefoglaló 3
f r o m 2 0 1 6
eredmény több ezer spermium egyedi
Míg a LabMagister Kft.
által használt áramlási citometria teszt a
ROS mennyiséget méri,
s ROS gyorsteszt (pl.
,
a reaktív oxigén
A spermiumok ROS
tartalma szoros összefüggést mutat a
spermiumok DNS állományának
az
több ezer spermium
egyedi kvantitatív jellemzéséből született
eredményt megbízhatóbbnak tekinti, mint a
tesztek néhány száz spermium
Ezért egyre
a
úgynevezett
” azonos
Spermiumok DNS állományának
4 | O l d a l
A mérési módszer akár több tízezer
spermiumot is képes rö
DNS fragentáltság szempontjából szemben a
hosszadalmas, csupán néhány száz spermiumot
analizáló
módszerekkel. A DNS fragmentáltság igen
fontos paraméter, tekintve, hogy szoros az
összefüggés a spermiumok DNS
fragmentáltsága és az első trimeszterben
bekövetkező abortuszok száma között
A DNS fragmentáltság szintén kihatással van a
spermiumok akroszóm
(http://www.crh.com.br/pdf/59.pdf
körülmények között az akroszóma reakciónak
akkor kell bekövetkeznie, amikor a spermium
áthalad a zona pellucidán. Mind a korai
csökkent akroszóma reakció a termékenyülés
elmaradásához ve
azoknál a pároknál, ahol
kifolyólag nem születik gyermek és a pár nő
tagjánál nem
amely a pár meddőségére
szolgáltat, érdemes elvégeztetni az
akroszóma rea
az in vitro
guideline útmutatásit
Friss ondó mintából preparált spermiumokon
megméri a spontán és a kiváltott akroszóma
reakciót, majd megadja az akroszóma reakciót
mutatató sp
(6. ábra
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
O l d a l w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
A mérési módszer akár több tízezer
permiumot is képes rö
DNS fragentáltság szempontjából szemben a
hosszadalmas, csupán néhány száz spermiumot
analizáló hagyományos
módszerekkel. A DNS fragmentáltság igen
fontos paraméter, tekintve, hogy szoros az
összefüggés a spermiumok DNS
fragmentáltsága és az első trimeszterben
bekövetkező abortuszok száma között
A DNS fragmentáltság szintén kihatással van a
spermiumok akroszóm
http://www.crh.com.br/pdf/59.pdf
körülmények között az akroszóma reakciónak
akkor kell bekövetkeznie, amikor a spermium
áthalad a zona pellucidán. Mind a korai
csökkent akroszóma reakció a termékenyülés
elmaradásához vezet. Ebből következik, hogy
azoknál a pároknál, ahol
kifolyólag nem születik gyermek és a pár nő
tagjánál nem állapítható
amely a pár meddőségére
szolgáltat, érdemes elvégeztetni az
akroszóma reakció tesztet
in vitro akroszóma reakció tesztet a WHO V.
guideline útmutatásit
Friss ondó mintából preparált spermiumokon
megméri a spontán és a kiváltott akroszóma
reakciót, majd megadja az akroszóma reakciót
mutatató spermiumok százalékos részarányát
6. ábra) LabMagister Kft. az akroszóma reakció
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m
A mérési módszer akár több tízezer
permiumot is képes rövid idő alatt
DNS fragentáltság szempontjából szemben a
hosszadalmas, csupán néhány száz spermiumot
hagyományos szemi kvantitatív
módszerekkel. A DNS fragmentáltság igen
fontos paraméter, tekintve, hogy szoros az
összefüggés a spermiumok DNS
fragmentáltsága és az első trimeszterben
bekövetkező abortuszok száma között
A DNS fragmentáltság szintén kihatással van a
spermiumok akroszóma reakciójára
http://www.crh.com.br/pdf/59.pdf
körülmények között az akroszóma reakciónak
akkor kell bekövetkeznie, amikor a spermium
áthalad a zona pellucidán. Mind a korai
csökkent akroszóma reakció a termékenyülés
zet. Ebből következik, hogy
azoknál a pároknál, ahol ismeretlen okból
kifolyólag nem születik gyermek és a pár nő
állapítható meg olyan elváltozás,
amely a pár meddőségére
szolgáltat, érdemes elvégeztetni az
kció tesztet. A LabMagister Kft.
akroszóma reakció tesztet a WHO V.
guideline útmutatásit figyelembe véve
Friss ondó mintából preparált spermiumokon
megméri a spontán és a kiváltott akroszóma
reakciót, majd megadja az akroszóma reakciót
ermiumok százalékos részarányát
LabMagister Kft. az akroszóma reakció
A Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
w w w . l a b m a g i s t e r . c o m M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
A mérési módszer akár több tízezer
d idő alatt analizálni
DNS fragentáltság szempontjából szemben a
hosszadalmas, csupán néhány száz spermiumot
szemi kvantitatív
módszerekkel. A DNS fragmentáltság igen
fontos paraméter, tekintve, hogy szoros az
összefüggés a spermiumok DNS
fragmentáltsága és az első trimeszterben
bekövetkező abortuszok száma között.
A DNS fragmentáltság szintén kihatással van a
a reakciójára
http://www.crh.com.br/pdf/59.pdf). Fiziológiás
körülmények között az akroszóma reakciónak
akkor kell bekövetkeznie, amikor a spermium
áthalad a zona pellucidán. Mind a korai, mind a
csökkent akroszóma reakció a termékenyülés
zet. Ebből következik, hogy
ismeretlen okból
kifolyólag nem születik gyermek és a pár nő
meg olyan elváltozás,
amely a pár meddőségére magyarázatot
szolgáltat, érdemes elvégeztetni az in vitro
. A LabMagister Kft.
akroszóma reakció tesztet a WHO V.
figyelembe véve végzi.
Friss ondó mintából preparált spermiumokon
megméri a spontán és a kiváltott akroszóma
reakciót, majd megadja az akroszóma reakciót
ermiumok százalékos részarányát
LabMagister Kft. az akroszóma reakció
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
A mérési módszer akár több tízezer
analizálni
DNS fragentáltság szempontjából szemben a
hosszadalmas, csupán néhány száz spermiumot
szemi kvantitatív
módszerekkel. A DNS fragmentáltság igen
fontos paraméter, tekintve, hogy szoros az
összefüggés a spermiumok DNS
fragmentáltsága és az első trimeszterben
A DNS fragmentáltság szintén kihatással van a
a reakciójára
. Fiziológiás
körülmények között az akroszóma reakciónak
akkor kell bekövetkeznie, amikor a spermium
mind a
csökkent akroszóma reakció a termékenyülés
zet. Ebből következik, hogy
ismeretlen okból
kifolyólag nem születik gyermek és a pár nő
meg olyan elváltozás,
agyarázatot
in vitro
. A LabMagister Kft.
akroszóma reakció tesztet a WHO V.
végzi.
Friss ondó mintából preparált spermiumokon
megméri a spontán és a kiváltott akroszóma
reakciót, majd megadja az akroszóma reakciót
ermiumok százalékos részarányát
LabMagister Kft. az akroszóma reakció
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
bekövetkeztét, a belső akroszóma membránon
található CD46 fehérjéhez kötődő fluorescens
jelzett antitest segítségével detektálja.
módszer kizárólag az élő spermium
belül vizsgálja az akroszóma reakciót
spermiumok részarányát.
áramlási citometriás elkülönítésre a
LabMagister Kft. a propidium iodid festést
alkalmazza. Igény esetén a LabMagister Kft.
detektálni és
fázisban levő spermium
6. Ábra In vitro akroszóma reakció mérés
áramlási citometriával
9
Indukció nélkül
Pusz
tulá
s
AR spermiumok
További információ:
Dr. Hajnal Ágnes/Dr. Mikus Endre
endre.mikus@labmagister.com
info@labmagister.com
Tel.: +36
Mobil: +36
Workshop összefoglalóA Magyar Andrológiai Társaság X. kongresszusa Tapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t
bekövetkeztét, a belső akroszóma membránon
található CD46 fehérjéhez kötődő fluorescens
jelzett antitest segítségével detektálja.
módszer kizárólag az élő spermium
belül vizsgálja az akroszóma reakciót
umok részarányát.
áramlási citometriás elkülönítésre a
LabMagister Kft. a propidium iodid festést
alkalmazza. Igény esetén a LabMagister Kft.
detektálni és szeparálni képes
fázisban levő spermiumo
In vitro akroszóma reakció mérés
áramlási citometriával
Halott spermiumok: propidium-jodid
pozitív
Élő spermiumok: propidium-jodid
negatív
Áramlási citometriás minta regisztrátumok
Indukció nélkül
AR spermiumok
Spermium
Élő
CD46+ AR
CD46-nincs AR
Halott
További információ:
Dr. Hajnal Ágnes/Dr. Mikus Endre
endre.mikus@labmagister.com
info@labmagister.com
Tel.: +36-1-5052291 iroda
Mobil: +36-30-2793338
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1
M i n d e n j o g f e n n t a r t v a / C o p y r i g h t f r o m 2 0 1 6
bekövetkeztét, a belső akroszóma membránon
található CD46 fehérjéhez kötődő fluorescens
jelzett antitest segítségével detektálja.
módszer kizárólag az élő spermium
belül vizsgálja az akroszóma reakciót
umok részarányát. Az élő/halott
áramlási citometriás elkülönítésre a
LabMagister Kft. a propidium iodid festést
alkalmazza. Igény esetén a LabMagister Kft.
eparálni képes
okat is.
In vitro akroszóma reakció mérés
Áramlási citometriás minta regisztrátumok
.
Indukció után
Halott
Dr. Hajnal Ágnes/Dr. Mikus Endre
endre.mikus@labmagister.com
info@labmagister.com
5052291 iroda
2793338
Workshop összefoglalóTapolca 2016. December 1-3
f r o m 2 0 1 6
bekövetkeztét, a belső akroszóma membránon
található CD46 fehérjéhez kötődő fluorescens
jelzett antitest segítségével detektálja. A
módszer kizárólag az élő spermium állományon
belül vizsgálja az akroszóma reakciót mutató
Az élő/halott sejtek
áramlási citometriás elkülönítésre a
LabMagister Kft. a propidium iodid festést
alkalmazza. Igény esetén a LabMagister Kft.
apoptotikus
In vitro akroszóma reakció mérés
Áramlási citometriás minta
Intakt akroszómávalrendelkező spermiumok:
CD46 negatív
Akroszóma reakció végbement:CD46 pozitív
Dr. Hajnal Ágnes/Dr. Mikus Endre
endre.mikus@labmagister.com
Workshop összefoglaló 3
f r o m 2 0 1 6
bekövetkeztét, a belső akroszóma membránon
található CD46 fehérjéhez kötődő fluorescens
A
állományon
mutató
sejtek
áramlási citometriás elkülönítésre a
LabMagister Kft. a propidium iodid festést
alkalmazza. Igény esetén a LabMagister Kft.
apoptotikus
In vitro akroszóma reakció mérés
top related