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TIPI DI COLTURE CELLULARI

colture di tessuto

colture di organo

colture di cellule

Universita’ di Bari

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COLTURE CELLULARI

TIPI DI COLTURE

Colture cell.ri primarie

Colture cell.ri stabilizzateNO Cariotipo normale

NO Senescenza

SI Trasformazioni spontanee

NO Inibizione da         contatto

SI Cariotipo normale

SI Inibizione da   contatto

SI Senescenza

No Trasformazioni    spontanee

COLTURE CELLULARIUniversita’ di Bari

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EMBRIONE

FINO ALLA 11° SETTIMANA DI AMENORREA

FETO

DALLA 12° SETTIMANA DI AMENORREA (iniziano i processi di ossificazione)

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DISTINZIONE TRA EMBRIONE E FETO

CAMERA GESTAZIONALE

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

CAMERA GESTAZIONALE

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

CAMERA GESTAZIONALE E SACCO VITELLINO

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

PRELIEVO DI UN PICCOLO FRAMMENTO DI MEMBRANA

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

ELIMINAZIONE DEI VILLI

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MEMBRANA PARZIALMENTE

PRIVA DEI VILLI

ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

FRAMMENTAZIONE DI UN PICCOLO PEZZO DI CAMERA

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

PRELIEVO DI PARTE DELLA MEMBRANA FRAMMENTATA

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POSIZIONAMENTO DEI FRAMMENTI IN UNA CAPSULA PETRI PICCOLA

ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

DISTRIBUZIONE DEI FRAMMENTI NELLA CAPSULA PETRI PICCOLA

FRAMMENTI DISTRIBUITI UNIFORMEMENTE

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

POSIZIONAMENTO DEL VETRINO ROTONDO

ELIMINAZIONE

DELLE BOLLE D’ARIA

AGGIUNTA DEL TERRENO

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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE

FIBROBLASTI CRESCIUTI INTORNO AD UN FRAMMENTO DI TESSUTO

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ALONE DI CRESCITA

FIBROBLASTI CRESCIUTI INTORNO AD UN FRAMMENTO DI TESSUTO

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ALONE DI CRESCITA

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FIBROBLASTI

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FIBROBLASTI

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CELLULE ENDOTELIALI

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CELLULE EPITELIALI

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LINFOBLASTI

Eliminazione del terreno di coltura

Aggiunta di colchicina

Aggiunta della soluzione ipotonica

Prefissaggio

Fissaggio

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PREPARAZIONE DEL VETRINO

BANDEGGIO COL FLUOROCROMO MOSTARDA DI QUINACRINA

ANALISI DELLE IMMAGINI

CARIOTIPO

OSSERVAZIONE AL MICROSCOPIO E ACQUISIZIONE

DELLE IMMAGINI

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OSSERVAZIONE DEL PREPARATO

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CARIOTIPO QM

METAFASE 45, X0METAFASE 47,XX + 15

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ESEMPI DI CARIOTIPI ABORTIVI

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ESEMPIO CARIOTIPO ABORTIVO

METAFASE 92 XXYY

PERCENTUALE DELLE ANOMALIE

ETA’ GESTAZIONALE (settimane)

2 78.0%

3 69.0%

4 61.6%

5 62.2%

6 69.9%

7 48.2%

Totale dalla 2^-7^ sett. 66.0%

8 22.2%

9 14.3%

10 50.0%

11 12.5%

12 37.5%

Totale dall’ 8^-12^ sett. 23%

Totale 62.2%

ANOMALIE ED ETA’ GESTAZIONALE

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20 104 18.3 4.8 13.5

20-24 256 28.5 12.1 16.4

25-29 339 26.3 10.6 15.6

30-34 161 32.3 19.3 13.0

35-39 99 34.3 25.3 9.0

40+ 32 65.6 50.0 15.6

ETA’ MATERNA (anni)

NUMERO DI CARIOTIPI

% DI ANOMALIE

% DI TRISOMIE

% DI NON-TRISOMICI

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EFFETTO DELL’ETA’ MATERNA

ANOMALIAABORTI SPONTANEI NATI VIVI

Trisomie autosomi

13 1.10% 0.01%

16 5.58% 0.00%

18 0.84% 0.02%

21 2.00% 0.11%

Altre 11.81% 0.00%

Totale trisomie 21.33% 1.34%

Monosomie della X

0.84% 0.01%

Trisomie crom. sessuali

0.33% 0.15%

Triploidie 5.79% 0.00%

Tetraploidie 2.39% 0.00%

Totale anomalie 41.52% 0.60%

Numero dei cariotipi

3353 31521

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CONFRONTO ABORTI E NATI VIVI

Monosomie degli autosomi

100.0%

Tetraploidie 100.0%

Triploidie 99.9%

Monosomie della X 99.8%

Trisomie degli autosomi

96.5%

Mosaicismi 68.8%

Riarrangiamenti strutturali

53.4%

Trisomie dei cromos. sessuali

11.0%

ANOMALIA % di MORTE PRENATALE

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ESITI DELLE ANOMALIE CROMOSOMICHE