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TIPI DI COLTURE CELLULARI
colture di tessuto
colture di organo
colture di cellule
Universita’ di Bari
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COLTURE CELLULARI
TIPI DI COLTURE
Colture cell.ri primarie
Colture cell.ri stabilizzateNO Cariotipo normale
NO Senescenza
SI Trasformazioni spontanee
NO Inibizione da contatto
SI Cariotipo normale
SI Inibizione da contatto
SI Senescenza
No Trasformazioni spontanee
COLTURE CELLULARIUniversita’ di Bari
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EMBRIONE
FINO ALLA 11° SETTIMANA DI AMENORREA
FETO
DALLA 12° SETTIMANA DI AMENORREA (iniziano i processi di ossificazione)
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DISTINZIONE TRA EMBRIONE E FETO
CAMERA GESTAZIONALE
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
CAMERA GESTAZIONALE
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
CAMERA GESTAZIONALE E SACCO VITELLINO
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
PRELIEVO DI UN PICCOLO FRAMMENTO DI MEMBRANA
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
ELIMINAZIONE DEI VILLI
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MEMBRANA PARZIALMENTE
PRIVA DEI VILLI
ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
FRAMMENTAZIONE DI UN PICCOLO PEZZO DI CAMERA
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
PRELIEVO DI PARTE DELLA MEMBRANA FRAMMENTATA
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POSIZIONAMENTO DEI FRAMMENTI IN UNA CAPSULA PETRI PICCOLA
ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
DISTRIBUZIONE DEI FRAMMENTI NELLA CAPSULA PETRI PICCOLA
FRAMMENTI DISTRIBUITI UNIFORMEMENTE
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
POSIZIONAMENTO DEL VETRINO ROTONDO
ELIMINAZIONE
DELLE BOLLE D’ARIA
AGGIUNTA DEL TERRENO
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ALLESTIMENTO DELLE COLTURE
FIBROBLASTI CRESCIUTI INTORNO AD UN FRAMMENTO DI TESSUTO
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ALONE DI CRESCITA
FIBROBLASTI CRESCIUTI INTORNO AD UN FRAMMENTO DI TESSUTO
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ALONE DI CRESCITA
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FIBROBLASTI
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FIBROBLASTI
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CELLULE ENDOTELIALI
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CELLULE EPITELIALI
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LINFOBLASTI
Eliminazione del terreno di coltura
Aggiunta di colchicina
Aggiunta della soluzione ipotonica
Prefissaggio
Fissaggio
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PREPARAZIONE DEL VETRINO
BANDEGGIO COL FLUOROCROMO MOSTARDA DI QUINACRINA
ANALISI DELLE IMMAGINI
CARIOTIPO
OSSERVAZIONE AL MICROSCOPIO E ACQUISIZIONE
DELLE IMMAGINI
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OSSERVAZIONE DEL PREPARATO
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CARIOTIPO QM
METAFASE 45, X0METAFASE 47,XX + 15
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ESEMPI DI CARIOTIPI ABORTIVI
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ESEMPIO CARIOTIPO ABORTIVO
METAFASE 92 XXYY
PERCENTUALE DELLE ANOMALIE
ETA’ GESTAZIONALE (settimane)
2 78.0%
3 69.0%
4 61.6%
5 62.2%
6 69.9%
7 48.2%
Totale dalla 2^-7^ sett. 66.0%
8 22.2%
9 14.3%
10 50.0%
11 12.5%
12 37.5%
Totale dall’ 8^-12^ sett. 23%
Totale 62.2%
ANOMALIE ED ETA’ GESTAZIONALE
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20 104 18.3 4.8 13.5
20-24 256 28.5 12.1 16.4
25-29 339 26.3 10.6 15.6
30-34 161 32.3 19.3 13.0
35-39 99 34.3 25.3 9.0
40+ 32 65.6 50.0 15.6
ETA’ MATERNA (anni)
NUMERO DI CARIOTIPI
% DI ANOMALIE
% DI TRISOMIE
% DI NON-TRISOMICI
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EFFETTO DELL’ETA’ MATERNA
ANOMALIAABORTI SPONTANEI NATI VIVI
Trisomie autosomi
13 1.10% 0.01%
16 5.58% 0.00%
18 0.84% 0.02%
21 2.00% 0.11%
Altre 11.81% 0.00%
Totale trisomie 21.33% 1.34%
Monosomie della X
0.84% 0.01%
Trisomie crom. sessuali
0.33% 0.15%
Triploidie 5.79% 0.00%
Tetraploidie 2.39% 0.00%
Totale anomalie 41.52% 0.60%
Numero dei cariotipi
3353 31521
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CONFRONTO ABORTI E NATI VIVI
Monosomie degli autosomi
100.0%
Tetraploidie 100.0%
Triploidie 99.9%
Monosomie della X 99.8%
Trisomie degli autosomi
96.5%
Mosaicismi 68.8%
Riarrangiamenti strutturali
53.4%
Trisomie dei cromos. sessuali
11.0%
ANOMALIA % di MORTE PRENATALE
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ESITI DELLE ANOMALIE CROMOSOMICHE