bacteriophages: biology and history
TRANSCRIPT
������ �� ������ ��������� �� ������������ � ��� ������ ��������� ./@224124� A� �9,B�@ � �� �>5����.'.
ReviewBacteriophages: biology and historyRichard Sharp�Centre for Applied Microbiology and Research, Porton Down, Salisbury, Wiltshire SP4 0JG, UK
(Rec� Co
� �
��������� ������ ���� �� ��������� �������� �� ���� �� �� �� �� ������� �� �������� ����������
���� ������� ������ ���� ������ ������������ �� �� ��� � ��� ��! �� ������� ������ ���� ��
�������� ��� ��������� �� ����" ��� ����������� ���� �� ����� ��� �� ���� #�� �� #�������
������� ��� � � ����# �� �� �����������������$���� ���������� ������ ���� ��� �� ����� #���
���������� ���� � �� �������#� ��� �� �������� ��� �� ������ ������� ���# ����� ����� ���
���� ��� #��� ������#��� �������� �� �������� %������������ ���� �� �� ����� ��� ��
������� �� ���� ����� ���� ��# ��� �� ������ &��#� �� �# ����� '� �� �!°() ��� &��#� ��
* �� ��� �� * ��
� + � ,����� �� (�#���� ��������
-������� ������������ ��� ���� � ��� �������������
1 INTRODUCTION�� �� ���� � ������ ����� ������� ������� ��
������������� ������� �� ������� ����� ��������� ����
�� ������ ��� ����� �� ������ ������ ��
��������� ��� �������� �� ����� ����� ��� ���������
�� ��������� �� ����� �� ������� �� ��� � ����
����� ��� ��� !�������� "����� �� �� #�����
$������ ��� !���% �&�������' �� !����� ������(
����� ��������� ������������ �� ���������) �����(
�������� ������ �� ��������� � ���� "� ���� ��������
����� �� �� �� �� �� ����������� ��������� ����������
��� ��� �� �� ���� ������� ����� ������ �����(
������� ��� �� ���� ��������� ������� �� ������(
������� ������ � �� ������ �� ������������
*� ��� ���� ��� �� ����������� ������� �����)
������� �������� ��� ���������� � �� ���� �� +�%
,������� ��� ����� ������ �� �-. �� /����������
������ � ����� ��� �� ���� �� ������� ���
����������� ��������� ��� ������� �������� "���
���� ������� ���� �� ���������� ��� ������ ���
������ ��� �� ���������� �� ��������� ������ �
2 EARLY MEDICAL AND INDUSTRIAL INTEREST"� �������� ���������� ��� ������������ ��
�������� ��� 0����� ������ ������� / �-��
���� ���� ����� ��������� ��� �� ������� �� � ���
����� ��� �������� � ������ �.12 3���� ��� +�(
$���� 4 �������� � ������ �� �� ���� ���������
���������� �� ������������ ��� ��������� ��� ��
������� ���� ��������) ��� �� ��� ����� ���� �������(
��� �� ����������� ����������
�� �-�� ������������ ��5������� �� ��� ����
eived 12 March 2001; accepted 13 March 2001�rrespondence to: Richard Sharp, Centre for Applied Microbiology and
� 3����� �� =������ ������� � � ��� ������ ��������� �
������� �� ������� �� ���������� ��� ������� �������� �����������6 �� �-�. +�$���� 4 ����� "��� �� 3�%
����� ���������� �� ���) ������� �� ����������
��������� �� ���� � ���� ������� ����������
��������� ���� �� ������� �� ���� ���� � �������
�������� �� ������ ��� ������ ������� "�������� �� ���
����� �� � ��� ��� ���� ��� ����� ��� ���������
����� ������������ ���� ��� ������������ �������(
������� �� ���� �� ���� ����� � ����� ��������
����� .6 ��� �� �� ���� ���) ������� ��������
���� �������� ��� ���� �������� ���� ���� �����(
��������- "�� ����� �� ������� ���� ������ ����
������� ��� ������������ ��5������� �� ��� ������
������� ������� ����) �� ��� �� ���������� ��������
�� ������ ����� .6�4 �� �-�� ������������ ��5��(
���� �� ��� ��� ������ ��5������ �� �7��' �� ���
������� ���� �� ������� ��� ���� �� ����� � ���� ��
���������� �� �� ��%� ���� �� ������� ���
� ����� ��������� ����� .6�� "�������� �� �
����� �� �������� � ������ �� ������� ���� ��� ��
8������� �������& 3��� ��� �� �� 8������� ��������& !��%���9 ��� � ��' ����� �� ���) ������������
����� ���� ����� � �� ��� ������� �� �-��� "�
�������� ���� ��� ������� �� � : ������� ���
. : �� � ������� ���� ���� �� ���� ��������-
+��� �%������� ��� �� ����������� �� �������
������ ��������� �� ����� �� ������� � +���������
�� �-'�� ;��� ������� ������� ����������� �������)
������) �����) ������ ������ ������� ���0�������
������� ��� �� ������� ����� ������ ����������
� �� ������������ �� ��� �� ���� ������ <���
����������� ��������� ������ ������ ��� ��
������� �� �� ��������� �� ���) �� ��� ��� ����� ��
Research, Porton Down, Salisbury, Wiltshire SP4 0JG, UK
261�747>� �>?' � 224
� ���
�� ����������� ������� �� ����������� ��� ��
���������� �� ������ ������ �����������
�� �������� �� �� ������� �� ���� ��� ���������
���������� ���� ��� ������������ ���� �������� �� ��
������� �� ���� ��������� /����������� �������� ����
������� ������� ���� ���� �� �� ������ �� ��
�������� ���� �������� ���� ������� ���������' C����
���� ������������ ��� �� ������� �� �������� ������� ��
������. ��� ������������ A��������� �� 8� � ���
�������&9 ������� ���� � ���� ����� ���� �����(
������� �� ������ �� ������� �� ��������7
"� ������������� �� ���� ������� �������� �� ������
����������� ��� ������������ ��� ���� ����������
�� � ���������� �������� �� �� ���� ������� ��
�-'2��2 �� �� ���� ��� �� ��������� �� ������� ��
����� ��� ������ �� ���������� �� �������������
��� ��������� ��� ���� � ������� �� ����� 0����� ��4
/���������� � ��� ��� ��� �� �� ���� ���������
���� �����0��� ��� �� ������������� ��� ���������(
���� �� �������� ������� ��� ���� ��������� �� ��
�������� �� ��� ���� ��� ���� �����6 "�
���� ��� �� ������� �� ���������� �� � ������ ���� ��
������������ ���� � ������ �����0�� ��� ��
������������� �� ��������� * ��� �� ���� ��� ��
�������������� � ��� �� � ���� ��� ��������� ��
�-.���- "� ��������� �� ����� � ������� ����
�������� AD",9) ��� ��� ������ �� �� ���������(
���� �� ��� �� ������ � ����(���E���� � ��� �� ��
��������� ������) ��� ����������� �� �-7') "�
������������� 3����������� �� C��� " ��� ���
������ �� ��(�������� �� ��������� �� ����� ���� ��
��� ��� �� ������ �� ��������� � "� =������
C����� ����� F�������� �� F����� ��������� ���
����������� �� ������������� /���� 3�� �� ��� ���
���� ��������� ��������� C��� � ��� � ����� ���
���� ���� ���������� ��� ��� ���� ����� �� �����(
��������� ��������� � ���� �74)������������������������)�������� �' ��� �� ���������.
3 THE DEVELOPMENT OF MOLECULAR BIOLOGY�� �� �-� �) � ������ �� ������� ���� ������� �� ��
��������� � ��������7 ������ ��������� ���������
������ �� ����������� �� ������� �� ���� <���(
����2 ��������� ��� � ����� ���� �������� ��
���������� ������������� �� �� �������� �� ��������
���� F�����4 �������� ��� ������ ���� �
���� ����� ������������� ��� �� ���� �������� ���
������� ����� �������� �� ������ �� ������ ����
�� �������� ��� � ����� ������ �� ����� �����(
������ � ��� �� ������� ��� ��� ��� ���� � ��� ��
�� ���� �������� ����� �� ������� ��� �����(������
����) ��� ������ ����� �� � ������� ����������
�� �-'2) 3����������6 ���� ��� �� �������
���������� �� ���� ��� ��������� ��� �� ��
���������� 7 : ������ ��� 7 : ������� ����� �� ���
����� ��� =����- ��) �� �-7�) ��������)
����� �����(��������� �� ������ �� �� �������
���� ��� ������ �� �� ������) ��� ������ ���������
��� �� ������� ���� ������� �� ����) ������� ��
226
������ �������� �������� ;������� ��������
������� �� �-.� ��������� �� ���� ������ �� ������
����������� �� 8����(���� �������� ���������� ��
� ��� ��� � ����&�'
�� �� ���� �-. �) �� ������(������ ���������)
+�% ,������� ������� � ������ �� ������� �� ��
������ �� ������������ ��� �� ���������� ���
���� ��������� ���� "��� �������� �����������
���������) ������������� �� �� �����������) � ���
�� �� ���) ��������� �� ��� ��������� �� ��
���������� ������ �� �� ��������� ���) �� ������
�� �� ����� ��G� ��� �� �������� �� � ��� ����
�������'�1'' /���������� ������� ����� �� E�����
����� �� ��������� �� ,������� ��� �� ���������(
���� ��� �� ������� 3������� F����� "� �����(
������� �� ������ �%������� ������� ���� ��� ���
��� � � �������� � ����� ��������� �� �� �%�������
�� ������ "� ���� ������� �� 8!���������� ����& ��
����������� ���������� �������� �� �����������(
��������� �������� �� �����������(����������'. �� �-..
,������� ������ ��� �� ������ ���� ���� �������)
��� ������� ����� ����� �� � ���������� ���� ��
����������� ����� ������������ �%��������� �����(
������ "� " ������ �� ��� ��������� � ���� ������ / ��
��������) ��� ����� �� �������� ���� �� '4°=� ���-.7 ,������� ��������� �� ������ �������� ������ ��
=�������� ������ ��� ��� ���������� ��� ��� ��
��� ��� ���� � ����� "� ���������� �������� ���
�� ���� �� ����� ���� �� ������������� �� ��
���������� �� ��� ������ ��� ��������� ������ �
"� ���� �� ��� �������� ����� �� �� �-. � ���
�� ������������ �� ��������������� ���'7 ��� ���
�������� � �� �������� �� ���� �� ��%���)'2
��� ����� ��� ��� ������� �� �� ���� ���
��(������) ��� ������� ��� ����� ���� � ������
���� /��G��'4 ���� ��� �� ������ �� ��� ���������
���� ��� �� �� ��� ������ �� ��� ". ����� ��������
�������� "� �������� �� ������������ ����� ����(
����� �� ������ ��� ". ������� ����� �� ���� �
������ ���� ��� �� �� ��� ���������� � ����'6)'-
"� ��������� �� ��������� ������������ ����
�� ��(������� �� ��������� ��%������ ������� ��� ��
�� ����������� ��� ����� �� �� ��%������ ������
��� �� ����(���� �%����� �� � ������ ��%���� ����
�������� �� ��������� �������������. "� ���� ��
����������� �� ��������� ������� �������� ���
�������� � �� ����������� ��� ��������� �� ��
��%���� ��� ��� CF"(�� A��9 ���� �������� ��
��������� �������������.�
����(������� ����������� �� ��� ��� ����
������� � F���� ��� �����.� �� ������������
��� �� ������ �� � ��� ����� ��� ��� ������
������� ��� �������� �� ������ �� � ������ �������
*���� ��� ,�����%.' ������������ ��� �� �����(
������ �� ��� ����� ��� �� ������ �� � ����� �� ��
����������� ,H* ��� ��� ����� ���� �� ��
����� �� ��� ������ �� �� ,H*�.. "� �����������
�� �� ��������� ,H* ��� ������������ �� �� ��� ��
���(������ �������������� �� ��� �� ���������
��0����� ����������� �� ���� ��G ��� ���� ���������
� ��� ������ ��������� ./�224124� A� �9
Table 1. The distribution of phages in the environment
������ �����
��� ����� ����� ��� �� ���������
��� ���������
������ �������������
��������� � ������ ����������� ������� ���� �����
������ ��
���� ������ ����������
������ ��� ������� �� �������
������� ��� ������� �� ���������� �� ����(������
�������� �� ,H* ��� ���� �� ���������� ��� ��
���������� �� ���� ��������
4 BACTERIOPHAGE ISOLATION AND THEENVIRONMENT/����������� ��� �� �������� ���� ���� �������(
����� ������� � �������� ��� ���� �������
�������� ��E��� ��� �� �� ��������� ��������� D��
������ ��� ������� ��E����� �������� ������� �����
������� �� ��������.7).2 ������ ��������� �����
��������� ������ ������� ��� ����� ��������
�������� ���� ��������� ��� �������� ��������
��� ���� ������ ��� ���� ������� �� ���� ���� �� �
������ ��� �������� �� ������ ���������
�� �� ���) ������� ��� � ����� �� ���� ��������
�������� ������) ��������� � �� � 4���' ���
�������� �%������� �� ������� �� �������� ������
� 71�7(�����.4).6 "� ������� ��� �������� � (����
���� �� ��� ������� ������ ������� ��� ��
���������� ��� ������ I���� ������� ��������
��������� ��� ��������� ������� ��� � 71� (����
�������� ������� ������� ������ ��� ���� �� 7 �
��� ������ ���������� �������� �� �� ���� ����� 3��
��� �� ��� ������� ��� ������� A��� ��������9
������� ��� �� ����� ������ ��� �� �������� �� ��
������� �� ���� �����������) 4�: �� ���� �������
��������� �������� ���� �� H������ *������� ����
������������ �� �� � ��������.-
"� ������������� �� ��� �� ��� �������� �����(
����� �� �� �� ����� �� � 71� 4�����') ��������0�� ���� ��� ������� '�6: �� �� ����� A� 61� � 9
��� �������� ���������� � ;+�.7 C��0�� ���� � ���
���� � ����� �� ���� � ������� ����� ����� ����� ��
��� �������� ��� �� ��� �� ������� ���� �� ��0��
��� ��� �� ��������� ��� � �� ������� 3������7
�������� ��� ��� �� �� ������ ������ ���� ����
Table 2. Bacteriophage infectivity under extreme physiological conditions
�� �� � ��� ��� �������
��!"� #��� �$������ ��������� ��� � � ��°%&&!"� ���������� ��� � '�°%)�'* �������� ����� ���� (°%��+%,-� � ����� �� ��� � ��. �
�% � � ���� ������ � � ��� -� ��� ��
�� � #��� �$������ � �� ��� ��� ��� ���� � ��
� ��� ������ ��������� ./�224124� A� �9
����������� ��������� ��� ��� �: �� ������
����� �������������� �� � 7������ �� �� ����
������� ��� 4.1-�: �� ������ ������ ���� ���(
���� ��� ����� �� � G�� ��� � 1' : �� ������ ����
����� ��� �������� ������� A����) �����) �����9
��������� ����'
D����� ��� +���7� �������� ��� �� ���
������ �� ���� ��� �������� ��� �� ���������� ����
�������� ��� �� ������������ �� �� ���� 3�������
������� ��� ���� ��� ���� �� �������� �� ��
����������� ��� �� ��������� ������������� ���
�'�� .������'� "���� � ���� �� ������������ ��
���� �� �� ������������
+��� ����� �� �������� ��� ���������� �� ������(
����� ��������� ��� ��������� �� ��������� ���� ��
�� *����� ���� �� ��� � ���� ��� ��� ������ ��
������������� ��� ���� ��������� ������� ���
���� ���������� ��������7� 3������ ������ �� ��
*����� ��� ���� ���� �� �� �������� ��� � �����(
���� � ������� ��� �� ��� �� �� ������������� ��
��� ��������>������ �� ���� C���� ��� ������
�������� ���� ���� ������������ ��������� � �����(
��������� ��� ��� ����������� ��� ����������� ��
������ ��� ��������� �� ���� ����� "� ����������
����� ��� �������� ��� ������ ��������� ���� ����
�.°= �� -7°=)7�177 ��� ��� � ����� ���� � � �� �
���72)74 /����������� ��������� ������� �����(
��������� ��� ������ �� � �� 7+ ����76)7- A"���� �9�
BACTERIOPHAGE CLASSIFICATION"� ������������� �� ������� �� ����� ������� �� ��
������ �� �� ������� ��������� /���������� ���(
���� ������� �� ����� ������ �� ������ �������� ,H*
�� DH* ��� �� ��� �� ��G� ���� . �� 4�7��2� A���
"���� '9 ��� �� �� �������� �� ������� �� ���� �����
�� ,H* �� ������� �� ������� �������� ��������
��� �� �� ���� �� ��� �=�� ���� ������������������ �� ��� ��� �������� ��� ,H* ���
DH*�2 "������� ���� ��� �������� ������
�������� ,H* �� ��� "����� ���� ������� 7 @7
,H*>������ ������ �� ����� ��� ����� ���� �� ��
������ ��� ���(���������� C��� C�� ��� ���� . : ��
��� ������ ������ ��������� � ��� ����� �� � ��(
��� �2�
/����������� ��� ���� ��������� ���� �' ��������)
���� �� ����) �� + ��������) 3��������� ���
C���������� ������� �� ������ ����) ��� ���
������ �������� ,H* ��� ��� ��������� ����� ��
��� � ������� �� ��������� ���
�
�(
���� � �(�°% ��
��� � �� � �� ��
�� (/ �� � ������ ����� ����� ��� ��� �������$��� �� ���0 �
�/ ��� �0�(1 �� � �'
22-
Table 3. The bacteriophage genome
�� �� ������� ���� ������ � �
&� 2��� � �������� 23- ��4�
&�. &� 2��� � �������� 23- 5�4�
&� 2��� � �������� 23- ���4�
&(. &5. & 2��� � �������� 23- ���4�
� 2��� � �������� 23- 5�0�4�
6 ���������� � ��� ������ 2��� � �������� 23- �(�4�
� *��5 ���� � �������� 23- 50�4�
/�� ���� � �������� 23- 054�
)72� 2��� � �������� 23- ��4�
��!� 2��� � �������� 23- ��0�4�
/�( ���� � �������� 73- 54�
�% � 2��� � �������� 23- ��4�
73- ���� ������� ����� ��� �������
� � �������� �� 73- ��054�
� ���
����� =������������2� "� ������ ���� �������
-2: �� �������� ��������� ����������� �� ��� ��
3��������� ���������� 2��4:) �� + �������� �.�7:
��� �� C���������� �'�-:�
"� + �������� ������� ���� "�) ".) "2 ��� C�
��� ��� ������������ � �� ������� �� �����������
������ /���������� ������ A�9 ��� ���� ������� ����� ���� $�� � F��������2' ��� �� � ���� � ��
������� �� � ���� E�%���� ���� ��� �� � ������ �� ��
3���������� "� ���� ���� �� ������ ���� ��� ��
C���������� ��� ��� � ���� � ����������� C���
"� +����������� ��� �� ���������� �������
����� �� ���� ��� ������ ������� �� A�9 ��������,H* �� �� ������� "� +����������� ��� ��
���������� ����� ������� �� ���� �� �����
������) ��� �� ��� ��� ���������� �� �� ����
������� ��� ��� �� ������ ������� ������
��������� �� �������� �� �� ������ "� ����� ���
��������� ��� ��������� �� ������ /����������
�J�4.) ��� �� � ������ �� �� +�����������)
�� � �������� �� �71'7���
"� ���������� ��� ���������� ���� ��� ������
�������� ������ ������� �� ��� ���� ����� ���������
� �������� ������ �������� ,H* �������� ��� ��
������ ������ �� ������� "� ,H* �� .�.16�7�� ��
����� ��� �������� 21��: �� �� ������ "� ������
��� �� ����� ���� 42 1�-7 �� ��� 2 �� 6�� ��
��������� ��������� �� ��� ��������� �� �� ��� �� ��
����� �� �� �������� �� �� ! ����) �� ��� � ���� �
���� +�' ��� ��� "� ���������� ����) ������(
���� +�') ��� ���� ����� �%������ �� �������
������� ��� �� ���� �� �����) �� ������� �� �
�������� ����� ��� �� ������ ������������ �� ��
�������2.
"� "����������� ������� �� ������� ���� *C7 )� H3��) �� ������� CD,� ��� �� "�����
��� '412�� "� ��� ����������) ����(����������
���� ��� ������ ������ �������� ,H* "� ���
������������ ������� �� �� ������ ��� ���� ���
������ � ���� ������ ����� ��� �� ��������� ������
�� ���� �����
=������������� ��� ������� �� �� "����������� ��
����� ��G� ��� �� �� ������� �� ����� ��� ����������
24
�� ����) ��������� ��� ����������� "� ������ ��
������� � ������ ����� ��� �� ������� �� �� ��5������
������� C��� C+� �� ���������� ������ ��������
,H*�
"� ������ DH* ���� ��� ������� �� ��
F���������� ����� ) �� ��� ����������) �2�� ��
�������� ��� '� �������� �� ������������ "�
������ �������� � ������ �������� ������ DH*
�������� ����� .�� �� ����� �������� ���� �� ����
������ "� ��� ��������� �� ����������) ��� ���
��������� �� ��(�� � ����� "� ��� ��� ���� ��
������ �������� ��������� �� ! ������ ��� ���� ��
�� ! ����� +3� ��� ���� �������� ���� ������ �� H��
K��� �� �-2 � "��� ����� ������ ��G� ��� ����
�������� ���� �� ��� �� ���� ��� �� ������� �� �� !��������������27
"� ������ ���� �� DH* ���� ��� �� = ������(
���� ��� ������� ��� �222 ��� �������
"�������� ������� "� ������ ��� ������� ���
���������� � ����� ) 62�� �� �������� ��� ���
6�� ���� ������� ������ "� ������ ������� � : ����
��� � : ������� ���� ��� �������� �� ���� �������� ��
������ �������� ,H*) '� ) .� ) ��� 2�.�� �� ������
"� F�����%������� ������ ������� �� �� *�(
����� I���� ""I� ������� ����� ����� ��#) �
��������� *����� ������� �� 4 1� °= ���
�������� ���� ��� ���) ���� �� ������ ��� ����������
����� �� � ��714� � ""I� �� � E�%���� ������� . ��
�� ����� ��� . �� �� �������� ��� � ���� ����������
������ ������ �������� ,H* ��� ,H* �������
������� ����� �� � ���� �������� ���������� ��
��� ����� ��� ������ ������� ��������7�
* ������ ���� �� ������� ��������� �� *����� ���
�� !�������������� "� �����(���� ������ 33I�72 ��
� ������� ��� ���������� ����� ��� �� ���� �� ������ ����������� �� ����������� � �� 67°=� �� �� � �7�7���������� ������ ��� �� ������� �� � ������ ���� ����
�� ��� ������� "� ����� �� � ���� ���������� � :
���� ��� �� ������� ���� �� ��� ��� ���� ����� ���
������� �� ��� ��� �� �� ������ "� ������
�������� �� �������� �������� ����(������ ������
�������� ,H*� * ����� ������� ��� ������� �����(
�� ��� �������� ���� �������� ������ �� ����(����
� ��� ������ ��������� ./�224124� A� �9
������ ��� ������� �� �������
*��������� ����� ��� ��� � ��� ��� �� ������ ������
$������ ��� ���� "� �����(���� �������� ����
4.�� �� ����� ��� ..�� �� �������� ��� � ������
���������� �� ������ �������� ,H*) �.�-�� ��
������7-
REFERENCES� ������ ;�) %��& � �'(��� "���� � @7�� A�6-29�
� "���� !<) *� ������������� �� �� ������ �� �� �����(
���������� �������� ����) ��.�1��.' A�-�79�
' �&������� !) 3�� �� ������� ��������� ����������� ��� ��������
� �����L��0���� �� %�� ��� �� ) �/!@'4' A�-�49�
. /������� * ��� ������� C) "� ��������� ���� ���� ��
�������� � ������ �� �������� "�������� ��������� ��
��������� ������ �&�������&� ��������� ��� � ��� ��� ����
0/@�261 A�-��9�
7 ,������ <=) ,�� �� �����L������ ���� �� ��������� �� �� ��M���
� �NO��� %� � )�� ����� +1@7'�1 A�-��9�
2 �� =���� =��G �) /���������� �� ����������� ��*�����
1.@�-6 A�-�'9�
4 3���� D= ��� +�$���� ;/) "� ��������� ����� ��
����������� �� �� ��������� �� �������� � ������ � �������
� � �.@72'1 A�-�.9�
6 /������ D ��� +����� �) ;����� �� ��������0�� �� �� �� ��
/���������� �� 3�� ����0��� ��� � ��� ��� ����
0!@� �-1���� A�-��9�
- /������� * ��� ������� C) F� ����������� ���� ��
���������� �� �� ������ ��� � ��� ��� ���� 0/@�26 A�-��9�
� =������% *) C������� C ����������� ���� � � ����� �����
�� $�� ���#) C���� �/@��7� A�-��9�
�� +������� �) ������ �� �� �� ������ �� "�!����� ��
�����) �$ F���� P =�) F����� A�-'�9�
�� C�����G�� D) �����) <���� ����� B�����������) ������ A�-7-9�
�' +������� <F ��� ��������� =�) %���������� ����� +0@7--1
2 � A�-�.9�
�. $����� �; ��� =���� ��) �������������� �� �� �������� �������
�� ������ ������� %�� �# � �� ��� ���� /.@ A�-�79�
�7 F��� �$) /������� �� �������� �� ���� ��������) �� �� �+�
,��+��� �� ���������� �� (���������) ;� � ������ ;B
��� !��� �3) #�������� �� =����� C����� 72 12 2 A�-�69�
�2 <������ �D ��� =�% �*) /���������� �������� ��
�������� �� ������ ������������ � )��� �� .@7712� A�-'29�
�4 =������ ;) "� ������� �� ����������� �� ������ �� � �����
�� 5������ ���� 0����� � �! $�� �� "�! !0@'4� A�-'29�
�6 C����� +") C��� � ��� �� �� ���������� ����) �� +����� ��
+���������� ) I�� 4/) ;� � H����� �D ��� D������ ,)
*������� C����� �1�6 A�-4�9�
�- !��� D") C��� � ��� �� �� ���������� ����� � (���� )��
.�@�7'1�2 A�-.�9�
� =������ /,) 3�� �������� ������) �� "����� �� �� "����� ��
������� ����������) ;� � ;������� *+) ����� C+ ���
�������� 3�� � -1�' A�--29�
�� $����� D) ,��� , ��� F��� �) ;%������ ��� � ��� �����
��� ��������� ���� B�74@�4� � ������ (���� � !@7��17�
A�-- 9�
�� D������ </) /����������� �� �� + ����������� * �������
%�! ��� �� �+@�-�1��- A�-2'9�
�' F�������+�) C����� �������� ��� F�������� ��� ���������� G��
*����������������� )����� �����+�������� 11@���71���6
A�-- 9�
�. B��� D�) ��������G � ��� /����� !) ,H* ����������� ������ ���
D�������� DH* ���� ������� �� �� ������� --���@ �
��������� ��� ���) ����) ��� �����������(� �� �� #�����
$������ �������� �������� � ������ (���� � !@A�9�271�47
A�-- 9�
�7 /������ !+ ��� +�$�� +) B����������� �� � ���������
� ������� ������ �� � ��������� ��������� %����� � �# ���� ��
��� /@�441�6. A�-�-9�
� ��� ������ ��������� ./�224124� A� �9
�2 <������ ;) /���������� �� �������� ����������� �������&� ��
���������� ���� (��� "���� A�-�69�
�4 F���� *) F ����� � ������� �! �.@�2-1''4 A�-7'9�
�6 3��������� +) "� !������ �������� �� �� �����������
���������� ���� �10@7 617 - A�-'29�
�- ����� *, ��� =��� +) ���������� ��������� �� ����� ��(
���� ��� ������� ���� �� ����� �� ������������� � .� "������
1/@'�172 A�-7�9�
' F���� 3;) ,������� + ��� *������� "!) ;������� ����������
������� �� �������� � ������� �/@74124 A�-.'9�
'� ;���� ;F ��� ,������� +) "� ����� �� ������������ � .�
"������ ++@'27) .��) .�7 A�-'-9�
'� ,�������+) "� ����� �� ����������� ��� � ��� �� �� ���� �
.� "������ +1@2.'122 A�-. 9�
'' ,������� +) *�������� �� ����������� ����� ������� ���(
������� ���������� �� �� ���� � .� "������ +1@2'�12.�
A�-. 9�
'. F���� 3; ��� ,������� +) +�������� �� �������� ���� �����
���������� �� ����� ����������� .����� [email protected]�17�� A�-.'9�
'7 ����� *, ��� D����� D) ������� ������������� �������
��� ����� ��� ��0��(� � ������� �� ����������� �� ������
��������� ������ .����� 1�@..17 A�-.-9�
'2 H���� * ��� 3G����� F) ;%�������� ��� �� �������� ��
���������� ��������� �� ��������� "��� ��� %�� ��� 1/@4 61
4� �
'4 /��G�� 3) !��� ��������� �� � ������� ������ �� ������������
"��� ��� %�� ��� ��@'.. A�-779�
'6 =������ *) 3�������� ������� �� ����������� ������� ��������
+.@'. 1'.6 A�-2�9�
'- ;����� D�) /���� * ��� 3�������� =+) C ���������� ������� ��
����������� ����� ������� �� ����������� ".,� ���� � ����
$�� ��� /��� ���� +0@'471'6 A�-2'9�
. F�������� �) F�������� ;+) Q����� H, ��� F���� ;D)
D������������ ���� ��� �� ��������� ������ � ���� � ���� $��
��� /��� ���� �/@.�' A�-7�9�
.� Q����� H, ��� F�������� �) ������� �%����� �� �������� �
������� /�@24- A�-7�9�
.� F���� 3; ��� ����� +F) * ��� �������� ��� �������
��������� �� ��������� �������� � ������� /�@774172� A�-7�9�
.' *���� < ��� ,�����% ,) ���� �������� �� ,H* ������� �
��������� ����� � ���� ��������� ����������� �� ��������(
���� � ��� ���� !@7�217�6 A�-2�9�
.. ������ +) �������� D) ���� + ��� ������G) "� ��G �����
��� ������ �� ����������� ���� ��� ���% ����������� �����
/���������� "' ������� �(������ ���������� ��������� �
���� ��� +��@�--71� . A�-229�
.7 /����� �) !��� �� ������������ �� ����� ��� ����������
��������� �����) �� "�� �������) ;� � �� �� 3+) �����
=C ��� /����� �*� �6�1�-7 A�-649�
.2 ;���� ,F ��� C� ���� +�/) ;���������� �� ����������� ���
��� �������� �� ������ ��� �� ��������� ������ ���������
������� % � ��!���� ��������� 1�@742176' A�-6 9�
.4 !����� �*) +����� ������� ��� ���� ������������� ���
���������� �������� ���� 1��@7.�17.6 A�---9�
.6 3����� =) I������ �� ���������� ������� ������ ��� ������ ��
������ ���������) �� "�������� �� �� ���+� ��� ������)
;� � +�;�� *) H�� K��� 3�� ����� ���������� 4�142
A�--29�
.- =���� * ��� 3���� ,) !��0���� �� � ����� ��� �� � �����
�� �������� �������� ���� H������ *������� 3��) �� %������� ��
�������� "�� ������� �����) +������� A� 9�
7 B���� 3) !����� $ ��� <������� �) ,����������� �� �����������
���� �������� �� �������� % � ��!���� ��������� �!@�2.1�26
A�-6�9�
7� D����� ,= ��� +��� 3=H) "� ������ �� ���� ���������
������� ��������� ����� �� ����� ���� ���� ������ !@7'-1. 6
A�-4'9�
7� Q����� <) D����� <,) C��� C) ��� !) H������ � ���
D����������� +) I������ �� *������������) �� �� �����
�� ���) I�� �) ;� � =������� D) C����� C����) H�� K����
7�41776 A�-669�
24�
� ���
7' 3�� D�) *��� 3*) ,������ /) +������ *C ��� *������� ")
"� ��������� ��� ��������������� �� ������������ ���������
��������� ��������� ������� �� �������� � .� �����
�1+@�4 -1�4�� A�-679�
7. D���� H,�) +������ *C ��� 3�� D�) =�������������� ��
������ ����������� K/� ) �� %������� �� 0(� (���������
������� �� ������������� C� .12 � � A�-629�
77 ,������ *F ��� F���� D;) =������������� �� ���� ����
���������� ��� � ������� ���� �������� �� "��������
������� �� %����� !� ��+���1 10@�16 A�-4�9�
72 3����� =) $��� $ ��� Q����� <) "� ������� 33I� ���� ��
�%������ ��������� ������� ���������� �� � �����@ �����(
�������� �� ���������� ��� �� ������������ ��� ����� ,H*� "���
��� %�� ��� 0�@42.7142.- A�--�9�
74 ������� $!) I � ��� ") F�� C) *���� +, ��� "���� H*)
��������� ��� ��������������� �� ����������� /=�*�) � �����
�������� ����������� ������ ������� �� ���������� ������(
���) ������� ���1��� �#���� ���� �@�--1� 2 A�--49�
76 3������ ,H ��� , ���(3��� +F) �!� ��� �!�@ �����
������������ �� ��� ��� *������ ����� ��.@246126.
A�--'9�
7- /�� = ��� , ���(3��� +F) ��� �) �� ������� ����� �� ��
24�
2�����!���� ����� ��� ������� $������ ��� ���� � �����
������� .+@-'-�1-'-7 A�--69�
2 <���� *) /���� � #) $���� D) 3��G��� +) F�� =) <����� �)
$����� ,I ��� F����G <) =�������������� �� �����������
��� ����� ��� =�) � ���0�� ������� ��� ����������
,H* ��� DH*� ��� ��������� +1@2 '12�2 A�--49�
2� *������� �<) "����� ������������@ �� ����!����� %�!
����� �� !�@�'71� � A�--69�
2� C������ *D) �� �� ������ ��� I�� �) ;� � =������� D)
C�����) H�� K���� 2.4126� A�-669�
2' F�������� ;+) F ����� �� �& ���� $(��� .����� 1/@72 174�
A�-7 9�
2. =������ *+) /�����������) �� 2���� ��������) '�� ��� ;� �
!����� /H) $��� ,H) ����� C+ �� �� F�������(D����)
C��������� 76412 4 A�-229�
27 $����� ,F) +���� ,D) $����� !D ��� 3��������� 3) *
���������� DH* �������� �������� ��� �������� ���� ��� ��
�%����������� ��������� ��� ����������� "��� ��� %�� ���
/�@' '61' .� A�-4�9�
22 +����� F) /���������� �2@ * ���0�� ����� ����� � ����
���������� �������� ��� � ������ ������� �� ����
��DH* ��������� %�! ��� �� 1!@�'41�42 A�---9�
� ��� ������ ��������� ./�224124� A� �9