bài giảng hóa học acid nucleic
TRANSCRIPT
![Page 2: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/2.jpg)
HÓA HỌC ACID NUCLEIC
VÀ ACID NUCLEIC
BS. HOÀNG HIẾU NGỌC
BỘ MÔN SINH HÓA
9/26/2010 1
![Page 3: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/3.jpg)
9/26/2010 2
![Page 4: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/4.jpg)
1. Acid phosphoric
2. Pentose
3. Base nitơ (nitrogenous base)
9/26/2010 3
THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA NUCLEOTID
VÀ ACID NUCLEIC
![Page 5: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/5.jpg)
THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA NUCLEOTID VÀ ACID NUCLEIC
9/26/2010 4
1. Acid phosphoric
![Page 6: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/6.jpg)
9/26/2010 5
2. Đường pentose
THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA NUCLEOTID VÀ ACID NUCLEIC
![Page 7: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/7.jpg)
9/26/2010 6
3. Base nitơ
THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA NUCLEOTID VÀ ACID NUCLEIC
![Page 8: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/8.jpg)
Tính chất vật lý – hóa học của base purin và pyrimidine
• Tính đồng phân: enol (lactim) và ceton (lactam)• Tính hòa tan: Ở pH trung hòa, guanin ít hòa tan nhất
9/26/2010 7
![Page 9: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/9.jpg)
Các base hiếm
• Tỉ lệ thấp
• Dẫn xuất củabase lượng nhiều
• Dạng methyl hóa, acetyl hóa, hydroxymethylhóa
• Vai trò điều hòavà bảo vệ thôngtin di truyền.
9/26/2010 8
• N6, N6 – dimethyladenin
• N7 – methylguanin
• 5 – methylcytosin
• 5 – hydroxy –methylcytosin
• 5,6 - dihydrouracil
![Page 10: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/10.jpg)
So sánh thành phần hóa học giữa DNA và
RNA
Thành phần cấu tạo DNA RNA
Base purin ADENIN (A) ADENIN (A)
GUANIN (G) GUANIN (G)
Base pyrimidine CYTOSIN (C) CYTOSIN (C)
THYMIN (T) URACIL (U)
Đường pentose Deoxyribose Ribose
Acid phosphoric H3PO4 H3PO4
9/26/2010 9
![Page 11: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/11.jpg)
NUCLEOSID VÀ NUCLEOTID
HÓA HỌC ACID NUCLEIC VÀ ACID NUCLEIC
9/26/2010 10
![Page 12: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/12.jpg)
Nucleoside
• Sản phẩm thủy phân không hoàn toàn củaacid nucleic.
• Dễ bị thủy phân bởi nucleosidase• Gồm: base nitơ và pentose• -N-glycosid (C1’ pentose và N9 của base
purin/N1 của pyrimidine)• (base): purin – nucleosid/pyrimidin –
nucleosid• (pentose): ribonucleosid /
deoxyribosenucleosid
9/26/2010 11
![Page 13: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/13.jpg)
Liên kết glycoside giữa base nitơ và đường
pentose
9/26/2010 12
-N-glycosid
![Page 14: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/14.jpg)
• Base tạo ra 2 hình dạng xoay quanh liên kết β – N –glycosid được gọi là đồng (syn) hoặc đối (anti). Dạngđối chiếm ưu thế trong tự nhiên
9/26/2010 13
Liên kết glycoside giữa base nitơ và đường pentose
![Page 15: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/15.jpg)
NUCLEOSID PHOSPHAT
9/26/2010 14
![Page 16: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/16.jpg)
9/26/2010 15
NUCLEOSID PHOSPHAT
![Page 17: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/17.jpg)
NHỮNG NUCLEOTID TRONG TỰ NHIÊN
• Dự trữ và vận chuyển năng lượng sinh học
• Coenzym:
– NAD+: nicotinamid adenin dinucleotid
– NADP+: nicotinamid adenin dinucleotidphosphat
– FAD+: flavin adenin dinucleotid
• Yếu tố truyền thông tin nội bào
9/26/2010 16
![Page 18: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/18.jpg)
Dẫn xuất của Adenosin
• Adenosindiphosphat (ADP)
• Adenosintriphosphat (ATP)
– ATP-ADP: tích trữ
và vận chuyển nănglượng
– ATP: nguồn NL chính của tế bào
9/26/2010 17
ADP + H3PO4 ATP
(1)
(2)
E H2O
H2OE
![Page 19: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/19.jpg)
• AMP vòng: Adenosin 3’, 5’ –monophosphat(cAMP)
• Chất vận chuyểnthông tin thứ 2
9/26/2010 18
Dẫn xuất của Adenosin
![Page 20: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/20.jpg)
9/26/2010 19
AMP vòng
ATP AMP vòng
Adenyl cyclase
AMP
phosphodiesterase
![Page 21: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/21.jpg)
Dẫn xuất của guanosin
• GDP và GTP
– Oxy hóa acid α – ketoglutaric thành acid succinic
– GTP cần cho sự hoạt hóa adenyl cyclase
– GTP: NL cần cho sự tổng hợp protein củaribosome
– cGMP: tín hiệu nội tế bào hay chất truyền tin thứ 2
9/26/2010 20
![Page 22: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/22.jpg)
9/26/2010 21
![Page 23: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/23.jpg)
Các dẫn xuất khác
• UTP, UDP: coenzym trong chuyển hóaglucid, hợp chất giàu NL
• CTP, CDP: hợp chất giàu NL
9/26/2010 22
![Page 24: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/24.jpg)
DNA
Acid deoxyribonucleic
9/26/2010 23
![Page 25: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/25.jpg)
Thành phần của DNA
1. H3PO4
2. Deoxyribose
3. Base nitơ (A, G, C, T)
dAMP, dGMP, dCMP,
dTMP.
9/26/2010 24
![Page 26: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/26.jpg)
9/26/2010 25
![Page 27: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/27.jpg)
Liên kết phosphodiester
• Trục liên kết chínhgồm đường pentose và gốc phosphat
• Ưa nước
• Các gốc OH củađường đều hìnhthành liên kếthydrogen với phântử nước
• Nhóm phosphattích điện âm ở pH 7
9/26/2010 26
![Page 28: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/28.jpg)
Đặc tính của base nitơ ảnh hưởng lên cấu
trúc 3 chiều của acid nucleic
• Purin và pyrimidine tự do là base yếu
• Có đặc tính liên hợp cao cấu trúc, phânbố ion, hấp thụ ánh sáng UV (260 nm) củaacid nucleic
• Cộng hưởng giữa các nguyên tử trongvòng làm cho các liên kết có đặc tính liênkết đôi 1 phần
9/26/2010 27
![Page 29: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/29.jpg)
• Pyrimidine là phân tử có cấu trúc phẳng
• Purin thì hơi phẳng vì có 1 chút gấp khúc
• Base kị nước nên khó tan ở pH 7 tế bào.
• Tăng, giảm pH thì acid nucleic tan trongnước dễ hơn
9/26/2010 28
Đặc tính của base nitơ ảnh hưởng lên cấu
trúc 3 chiều của acid nucleic
![Page 30: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/30.jpg)
Tương tác kị nước xếp chồng (hydrophobic
stacking interaction)
• Các base trong cấu trúc acid nucleic xếpchồng lên nhau như xếp chồng các đồngxu
• Các chồng base liên quan đến tương tácVan der Waals và tương tác lưỡng cực giữacác base
• Xếp chồng ít tiếp xúc với nước và ổnđịnh cấu trúc 3 chiều của acid nucleic.
9/26/2010 29
![Page 31: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/31.jpg)
Các lực liên kết giúp hình thành DNA xoắn
đôi
• Trục liên kết phosphat
• Tương tác xếp chồng (stacking interaction)
• Tương tác kị nước: trục phosphat mangđiện tích âm cao đối lại với các base khôngphân cực
• Liên kết hydro: duy trì khoảng cách giữahai trục đường phosphat
• Liên kết ion: muối giúp ổn định cấu trúcduplex của DNA
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 30
![Page 32: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/32.jpg)
DNA
• Gồm 2 chuỗipolynucleotidxoắn đôi theohướng ngượcchiều nhau
• Đầu 5’: thiếu 1 nucleotid ở vị trí5’
• Đầu 3’ : thiếu 1 nucleotid ở vị trí3’
9/26/2010 31
![Page 33: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/33.jpg)
Sự biến tính DNA
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/images/chapter5/F05-14.jpg 32
![Page 34: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/34.jpg)
Các nguyên nhân gây biến tính
• Nhiệt độ,
• Thay đổi pH,
• các dung môi hữu cơ(urea, formamide)
• Nhiệt độ nóng chảy (Tm): nhiệt độ mà ở đómột nửa lượng DNA bị tách rời– Phương trình Marmur-Doty về tương quan
nhiệt độ chảy và hàm lượng G, C và muốiTm=41.1 XG+C + 16.6 log[Na+] + 81.5
– G, C, muối cao thì Tm càng cao
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 33
![Page 35: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/35.jpg)
Rãnh lớn – rãnh nhỏ
vị trí gắn của các protein điều hòa bằng cácliên kết hydro để kiểm soát biểu hiện gen
9/26/2010 34
Rộng 22Ao
Rộng 12Ao
![Page 36: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/36.jpg)
Qui luật bổ sung đôi base – Sự cân bằng
base
• A G; C = T
• Purin = pyrimidine
• G + T = A + C
• Thành phần base thay đổi theo loàinhưng không thayđổi theo tuổi, trạngthái dinh dưỡng, môi trường.
9/26/2010 35
![Page 37: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/37.jpg)
Những loại cấu trúc xoắn đôi của DNA
• Có 6 loại cho đến nay: A, B, C, D, E, Z
– Chiều xoắn
– Số đôi base trong mỗi vòng xoắn
– Khoảng cách giữa mỗi đôi base
– Khoảng cách lớn nhất giữa hai sợi
• Loại B gặp nhiều nhất trong điều kiện sinhlý
9/26/2010 36
![Page 38: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/38.jpg)
9/26/2010 37
![Page 39: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/39.jpg)
Các dạng cấu trúc của DNA
• Xoắn đơn (virus)
• Xoắn đôi (phổ biến nhất)
• Xoắn đơn vòng (DNA ti thể và virus)
• Xoắn đôi vòng
9/26/2010 38
![Page 40: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/40.jpg)
• Các trình tự đặc biệt có ảnh hưởng lên chứcnăng và chuyển hóa của đoạn DNA trongvùng lân cận.
• VD: gập khúc (bend) sẽ xuất hiện trongchuỗi xoắn DNA khi 4 đến 6 base adenosine xuất hiện cạnh nhau trên 1 mạch đơn. 6 base adenosin sẽ tạo nên 1 gấp khúc 18o chỗ gắn protein trên DNA
9/26/2010 39
![Page 41: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/41.jpg)
Một số dạng cấu trúc DNA ít gặp
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 40
Trình tự acid nucleic đối xứng nhau hai lần, tự bổ
sung trong 1 mạch nên có thể tạo ra cấu trúc kẹp tóchoặc dạng chữ thập
Trình tự acid nucleic đối xứng nhau một lần, không thể hìnhthành cấu trúc kẹp tóc hoặc chữ thập
![Page 42: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/42.jpg)
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 41
Một số dạng cấu trúc DNA ít gặp
![Page 43: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/43.jpg)
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 42
Một số dạng cấu trúc DNA ít gặp
Triplex formation
- Ổn định ở pH thấp- Gồm 1 chuỗi dài chỉ gồmbasepurin và 2 chuỗi chỉ
gồm base pyrimidine hoặcngược lại
![Page 44: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/44.jpg)
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 43
Một số dạng cấu trúc DNA ít gặp
Hoogsten base pairing
![Page 45: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/45.jpg)
9/26/2010 http://www.siumed.edu/~bbartholomew/course_material/nucleic_acids.html 44
Một số dạng cấu trúc DNA ít gặp
G – tetraplex gặptrong cấu trúctelomere
![Page 46: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/46.jpg)
Vai trò của những cấu trúc DNA đặc biệt
• DNA của tế bào sống luôn có những trìnhtự đặc hiệu để giúp nhận biết protein gắnkết.
• Trình tự đó có thể là dạng palindrome, polypyrimidine, polypurin tạo ranhững xoắn ba hoặc H – DNA
• Vùng có liên quan đến điều hòa biểu hiệngen
9/26/2010 45
![Page 47: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/47.jpg)
Vai trò của DNA
• Mang thông tin di truyền
• Làm khuôn cho sự chuyển mã và tái bản
9/26/2010 46
![Page 48: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/48.jpg)
RNA
Acid ribonucleic
9/26/2010 47
![Page 49: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/49.jpg)
Các loại RNA
1. mRNA– 5% RNA
– 900 – 12000 nucleotid
– Đầu 5’ :7 – methylguanosin triphosphat (mũ)
– Đầu 3’: Poly A
2. tRNA– 10 – 15%RNA
– Có base hiếm
– Ít nhất có 20 loại tRNA
9/26/2010 48
![Page 50: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/50.jpg)
tRNA
• Nhánh tiếp nhận
• Nhánh đối mã
• Nhánh D (DHU)
• Nhánh T C
9/26/2010 49
![Page 51: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/51.jpg)
Nhánh tiếp nhận tRNA
• 7 cặp base
• Nhóm kết thúc: CCA (5’ – 3’)
• Nhóm COOH củaacid amin gắn vàonhóm 3’ – OH củaadenosin tạo liên kếtester
9/26/2010 50
![Page 52: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/52.jpg)
Nhánh đối mã của tRNA
• 5 đôi base• 3 nucleotid đối mã• Nhận mã ba tương ứng trên mRNA khuôn
9/26/2010 51
![Page 53: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/53.jpg)
Các dạng RNA
9/26/2010 52
![Page 54: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/54.jpg)
Vai trò sinh học của RNA
• Tham gia vào quá trình sinh tổng hợpprotein
• mRNA: khuôn cho sự tổng hợp
• rRNA: cấu trúc, hình thành ribosome, nơixảy ra sinh tổng hợp protein
• tRNA: vận chuyển acid amin đếnribosome để tổng hợp protein
• snRNA: tham gia vào quá trình cắt mRNA và điều hòa gen
9/26/2010 53
![Page 55: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/55.jpg)
Thủy phân acid nucleic bằng nuclease
• Nuclease: enzym cắt đứt liên kếtphosphodiester
1. Theo vị trí hoạt động: exonuclease –endonuclease
2. Theo liên kết bị tấn công: 3’ (cắt liên kết 3’ phosphoester); 5’ (cắt liên kết 5’ phosphoester
3. Theo cơ chất: Dnase, RNAse
9/26/2010 54
![Page 56: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/56.jpg)
Endonuclease
• Men cắt hạn chế
• Vị trí cắt hạn chế
• Cơ chế tự bảo vệ của các loài vi khuẩn trước
sự xâm nhập của virus
• Hệ thống RE (restriction modification system): men cắt hạn chế và men methylase hóa
• Nền tảng xây dựng công nghệ DNA tái tổ hợp
9/26/2010 55
![Page 57: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/57.jpg)
9/26/2010 56
CH3
CH3
CH3
CH3
RE
DNA vật chủDNA virus xâm nhập
![Page 58: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/58.jpg)
Các kiểu cắt
9/26/2010 57
• Đầu so le (sticky ends)
– EcoRI
• Đầu bằng (blunt ends)
– SmaI
![Page 59: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/59.jpg)
Danh pháp
9/26/2010 58
EcoRI
Viết tắt Nghĩa Mô tả
E Escherichia Genus (họ)
co coli Species (loài)
R RY13 Strain (chủng)
I Được địnhdanh đầu tiên Thứ tự định danh trong vi khuẩn
![Page 60: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/60.jpg)
Các kiểu nhận biết vị trí cắt
• isoschizomer
– Sph I (CGTAC/G) and Bbu I (CGTAC/G)
• neoschizomers
– Sma I (CCC/GGG) and Xma I (C/CCGGG)
9/26/2010 59
![Page 61: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/61.jpg)
Phân loại
• Type I
– Chủng E.coli K12 và B
– Vị trí nhận biết bất đối xứng
– Cofactor: S-adenosyl methionin; ATP; Mg2+
– Ba tiểu đơn vị: HsdR, HsdM, HsdS
9/26/2010 60
![Page 62: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/62.jpg)
• Type II
– 1 tiểu đơn vị
– Vị trí nhận biết và vị trí cắt là một
– Vị trí nhận biết có trình tự đối xứng: 4 – 8 nu
– Cofactor: Mg2+
9/26/2010 61
Phân loại
![Page 63: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/63.jpg)
• Type III
– Nhận biết 2 trình tự bất đối xứng tách biệt cóchiều ngược nhau
– Cắt DNA thành đoạn dài khoảng 20 – 30 bpsau vị trí nhận biết
9/26/2010 62
Phân loại
![Page 64: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/64.jpg)
Ứng dụng
• Vector plasmid
• SNP (single nucleotidpolymorphism
• PCR - RFLP
9/26/2010 63
![Page 65: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/65.jpg)
Ví dụ về 1 số men cắt
9/26/2010 64
Enzyme Nguồn Trình tự nhận biết Cắt
EcoRI Escherichia coli5'GAATTC
3'CTTAAG
5'---G AATTC---3'
3'---CTTAA G---5'
EcoRII Escherichia coli5'CCWGG
3'GGWCC
5'--- CCWGG---3'
3'---GGWCC ---5'
BamHIBacillus
amyloliquefaciens
5'GGATCC
3'CCTAGG
5'---G GATCC---3'
3'---CCTAG G---5'
HindIIIHaemophilus
influenzae
5'AAGCTT
3'TTCGAA
5'---A AGCTT---3'
3'---TTCGA A---5'
TaqI Thermus aquaticus5'TCGA
3'AGCT
5'---T CGA---3'
3'---AGC T---5'
![Page 66: Bài giảng hóa học acid nucleic](https://reader031.vdocuments.net/reader031/viewer/2022020101/55ae32df1a28ab97648b4838/html5/thumbnails/66.jpg)
Những sản phẩm tương tự nucleotid
– ức chế những enzym đặc hiệu của sự tổng hợpacid nucleic
– Tác dụng lên sự kết hợp đôi base
– Allopurinol (4 – hydroxypyrazolopyrimidin) ứcchế tổng hợp purin và hoạt động của xanthinoxidase trong điều trị bệnh gout
– Nucleosid chứa arabinose điều trị ung thư vànhiễm virus
– 5 – flourouacil: điều trị ung thư
– 5 – iodo – 2’ – deoxyuridin: điều trị viêm giác mạcdo herpes
9/26/2010 65