baktériumok biokémiai vizsgálata - sotepedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid...
TRANSCRIPT
![Page 1: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/1.jpg)
Baktériumok biokémiai vizsgálata
![Page 2: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/2.jpg)
Baktériumok jellemzése
Makroszkópos morfológia
Mikroszkópos morfológia
Biokémia
![Page 3: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/3.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Biokémiai identifikálás => baktérium fajra jellemző enzimek kimutatása (bizonyos enzim megléte vagy hiánya)
Módszer => a baktériumot szubsztrát tartalmú táptalajba oltjuk, enzim aktivitást indikátorral mutatjuk ki
Feltétel => izolált telep
![Page 4: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/4.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Szénhidrát anyagcsere
OF-táptalaj Oxidatív /fermentatív glükózbontás csöves szilárd táptalaj, eredeti szín zöld (1% glükóz + pepton + indikátor (brómtimolkék))
fermentáció: alul sárga (Clostridium tetani) anaerob oxidáció: felül sárga (Pseudomonas aeruginosa) aerob oxidáció + fermentáció: egész cső sárga (E.coli)
fakultativ anaerob
![Page 5: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/5.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Russel táptalaj: cukorbontás + gázképzés detektálása (laktóz + dextróz + szacharóz + Andrade-indikátor)
brillant cukor: laktóz + dextróz + szacharóz 1) laktóz + : egész táptalaj piros 2) laktóz - : piros szín a táptalaj alján 3) gázképzés: táptalaj feltöredezik
![Page 6: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/6.jpg)
Módosított Russel vagy TSI (Triple Sugar Iron) táptalaj
cukorbontás + gázképzés + H2S termelés egyszerre (laktóz, szacharóz, dextróz+ ferrifoszfát) H2S termelés: feketedés ⇒ vas-szulfid a két táptalaj indikátorában különbözik Russel: Andrade-indikátor ⇒ piros (cukorbontás) TSI: fenolvörös indikátor ⇒ sárga (cukorbontás) (kisebb
csövek) gázképzés: táptalaj feltöredezik
![Page 7: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/7.jpg)
Enterális baktériumok
Bélbaktériumok elkülönítésére szolgáló biokémiai reakciók
TSI táptalaj
![Page 8: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/8.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Eozin-metilénkék táptalaj:
szelektív-differenciáló táptalaj Szelektív : Gram-negatív nő csak rajta Differenciál : laktóz pozitív: laktóz bontás ⇓ pH csökken ⇓ eozin kicsapódik a telepekre ⇓ metilén-kék megfesti a telepeket L+ telep: sötét eozinos laktóz negatív telep: színtelen
![Page 9: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/9.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
ONPG – próba (Orto-nitro-phenil-ß-galaktozidáz) β-galaktozidáz aktivitás vizsgálata laktóz ⇒ glükóz + galaktóz (in vivo baktériumban) - orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid elbontásakor sárga színű orto-nitrofenol szabadul fel
Laktóz pozitív: van permeáz, β-galaktozidáz Laktóz negatív: nincs permeáz, β-galaktozidáz “lassú laktóz fermentálók”: csak β-galaktozidáz
![Page 10: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/10.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Citokróm-oxidáz rendszer vizsgálata
Oxidáz-reakció: módszer: 1) tárgylemezre szűrőpapír 2) 2 csepp reagens (parafenilén-diamin származék) 3) egy másik tárgylemez sarkával minta vétel a
tenyészetből 4) összekeverni parafenilén-diamin + oxidáz enzim ⇒ oxidáció ⇒ lila színváltozás oxidáz + : sötét lila szín (P. aeruginosa, Neisseria) oxidáz - : nincs színváltozás
![Page 11: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/11.jpg)
![Page 12: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/12.jpg)
Enterális baktériumok
Bélbaktériumok elkülönítésére szolgáló biokémiai reakciók
![Page 13: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/13.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Indol termelés: triptofán metabolizmusából keletkezik
Kémcsőben baktérium tenyészet Kovács reagens hozzáadása, összerázás A reagens piros komplexet képez az indollal E. coli indol pozitív Klebsiella pneumoniae indol negatív
![Page 14: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/14.jpg)
Enterális baktériumok
Bélbaktériumok elkülönítésére szolgáló biokémiai reakciók
![Page 15: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/15.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
![Page 16: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/16.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
![Page 17: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/17.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
![Page 18: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/18.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
![Page 19: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/19.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
![Page 20: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/20.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
CAMP-próba (Christine, Atkins, Much-Petersen)
Streptococcus agalactiae és Staphylococcus aurus szélesztése véres agarra. A S. agalactiae egy erős diffúzibilis anyagot képez, amely teljessé teszi a Staphylococcus sphingomyelinázának kitett vörösvérsejtek haemolízisét.
![Page 21: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/21.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
![Page 22: Baktériumok biokémiai vizsgálata - SotePedia...- orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid peptonvízben - nincs indikátor adagolva A színtelen orto-nitrofenil- β-galaktopiranozid](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022081410/6097ae778955da7145233c58/html5/thumbnails/22.jpg)
Biokémiai vizsgálatok
Automatizált mikromódszerek: API (Automated Profile Identification)
mikropléteken is elvégezhetők a biokémiai reakciók
detektálás után számítógép segítségével azonosítás egyszerre több vizsgálat végezhető, gyorsabb