bao cao pthl

8/8/2019 BAO CAO PTHL

http://slidepdf.com/reader/full/bao-cao-pthl 1/25

SEMINAR

SC KÝ LNG HiU NNGCAO(HPLC)

CÁC PP PHÂN TÍCH HÓA LÝ

TRNG I HC BÁCH KHOA TP. H CHÍ MINHKHOA K THUT HÓA HC

GIÁO VIÊN HNG DN:Tin s Nguyn Th Lan Phi

SINH VIÊN THC HIN:1. Bùi Tài2. Phan Kim Anh3. Trn Th Ngc4. Phan Th Thiên Trang5. ng Thun6. Hunh Th Mai Trang

7. Phm Th Hoàng Oanh



I.Gii thiu k thut sc ký lng

Cht hu c khó bay h i??



Q uá trình táchy Quá trình tách da vào

tính cht hóa hc, vt

lý và hóa lý ca cáccht.

y Da trên 2 quá trình:

+Hp ph

+Gii hp ph

Pha tnh

Pha ng



Phân loi HPLC da bn cht tng tác:

Sc ký phân b (partitionchromatography)

Sc ký hp ph hoc lng-rn (adsorption or liquid-solid chromatography)

Sc ký trao i ion (ion exchange chromatography)

Phân o HPLC

SKL chia thành 2 nhóm:-SK lng áp sut thng(sc ký c in)-SK lng áp sut cao (SKL hiu nng cao: HPLC)(High Performance Liquid Chromatography)



Phân loi HPLC

yPhân loi HPLC da vào trng thái phat nh

y

Pha ng: Lngy Pha t nh:Lng SK lng lng

(LLC)

y

Pha ng: lng SK lng rny Pha t nh:R n



nh tính và nh lngy K hi ni vi u do

(detector), HPLC

cho phé p:-nh tính: da vàothi gian lu

-nh lng: da vào

chiu cao hoc dintích peak



u im ca phng pháp HPLC:

-Có th phân tích ng th i nhiu h p cht

-Không cn làm bay h i mu

- phân gii cao nh quá trình tách trên ct

- nh ycao (nh u dò

- Th tích mu phân tích nh (1-100mL)



Degasse Pump

Tiímmu

Column

Detector

II. H thng H L



Loi b hoàn toàn khí hòa tan vàcn trong dung môi ( tránh làm hng

ct sc ký hay nhiu ng nn, tora các Peak t p trong quá trình phântích và nh hng n cht lngdetector.

Trang b các loi valves t l( pro portionating valves) cho phé pa dung môi t hai bình cha vicác lu lng thay i liên tc

1. Bình ng dung môi



2. B kh khí (Degasse)

-Mc ích ca b kh khí nhm loi tr các bt nhcòn sót li trong dung môi pha ng.

-Nu trong quá trình phân tích mà dung môi pha ngcòn sót các bt khí thì mt s hin tng:

-T l pha ng ca các ng dung môi ly khôngúng s làm cho thi gian lu ca P ak thay i .

- Trong trng hp bt quá nhiu b kh khí khôngth loi tr ht c thì có th pump s không hútc dung môi, khi ó áp sut không lên và máy scký s ngng hot ng .



3. Pump Cao áp :

y Pum p phi to c á p sut cao: 250at n - 500 at ( 1at =0.98 Bar)

y Pum p phi to dòng liên tc (B m có

2 Pistone thay phiên nhau y dungmôi liên tc).

y Lu lng b m t 0.1 n 9.999ml/ phút .



4. B phn tiêm m u ( injecter):

y a mu vào ct phân tích.Vi dung tích 5 - 100Ql .

y Có 2 cách ly mu vào

trong ct:-Bng tiêm mu th công(

tiêm bng tay )

-Tiêm mu t ng(

Autosam ple) .



5. C t s c k ý :y Ct sc ký thông thng làm bng thé p

không r.

y Chiu dài ct khong: 10 -30cm

y ng kính trong: 1-10mm

y Ht cht nhi c J: 5-10 Qm.

y Nhit gn 150°C vi sai s <0,05°C.

y

i vi mt s ph ng phá p phân tíchòi hi phi có nhit cao hoc thph n nhit phòng thì ct c ttrong b phn iu nhit.

y

c gn thêm ct bo v



6. Detector( u dò)

y Thit b phát hin cht phân tích(nh tính và nh lng).

y Có nhiu loi detector khác nhau,tùy mc ích phân tích và tính chtca các cht cn phân tích mà ngita s dng loi detector phù h p.



7 . B phn ghi tín hi u và in k t

quy ghi tín hiu phát hin

do detector truyn sang.

y

Trong các máy th h cthì s dng máy ghi ngin có th v sc ký ,thi gian lu, din tích ca

Peak ,chiu cao «



Degasse u p

ií

ol n

Dete to

Ngu ên lý hot ng ca HPL



III. CHN IU KIN SC KÝ

y Mun có mt kt qu tách tt nhttaphi t ìm c cáciu kin sc k ý tt nht cho mt hn h p mu.

y Các iu kin ó bao gm :

y Pha t nh : - Loi pha t nh

- Kích th c ct

y Pha ng

y

Loi Detector.y V an tiêm mu,th tích tiêm .

y Các y u t khác : nhit , nh y ca detector b c sóngphân tích.



CHN IU KIN SC KÝLa chn pha ng và pha tnh

Ch yu da vào s phân cc ca cu t phân

tích, pha ng, pha tnh.Quy tc chung: phân cc (polarity) ca cu tcn phân tích và pha tnh là tng ng còn phang có phân cc sai bit

Khi phân cc ca cu t và pha tnh quá gingnhau: tng tác mnh gia cu t cn phân tíchvà pha tnh thi gian phân tích kéo dài



Sc ký lng pha thng và pha oPha th ng Pha o

Pha t nh Phân cc Không phân cc

Pha ng Không phân cc Phân cc

CHN IU KIN SC KÝ



1. L a chn k pha tnh:y Ct pha thun ( NP)

Ct này là loi ct dùng tách các cht không phân cc hay

ít phân cc .Trên b mt hot ng ca nócócha cácnhóm OH phân cc a n c .

y Ctphao ( R P) : ( Silicagel ã A lky l hóa )

Dùng tách các cht không phân cc, ít phân cc ,các chtphân cccóth to cp Ion .Trên b mt hot ng cácnhóm OH ã b A lky l hóa. V ì th nó ít phân cc hay phâncc rt í t .

CHN IU KIN SC KÝ



2. L a chnphangy Pha ng có th làm thay i :

+ chn lc E

+ Th i gian lu

+ Hiu nng tách ca ct

+ phân gii

+T

ính i xng ca Peak

CHN IU KIN SC KÝ



L a chn pha ng+ Pha ng phi tr v i pha t nh ã có. Không c làm cho

pha t nh b bin i hóa hc . ( vd giá tr pH : 2.5< pH <8.5)+Pha ng phi hòa tan c các cht phân tích thì m i ra

gii c chúng.

+ Pha ng phi bn v ng theo th i gian.

+ Phi c ó tinh khit cao.



+ Phiphùh p v i loi Detector :

V d: U V - V IS thì dung môi không c hp th quang

Detector huü nh quang thì dung môi không c phátquang.

+ Phi kinh t , không quá him v àt

vd: Thêm n c vào dung môi hu c to thành mt phang phân cc h n cht hu c nguyên mt mình nó . V d

thêm n c vào ACN hay MeOH .. S to cphangphân cc h n nó

CHN IU KIN SC KÝ



Referencesy Dr. Phm Lun, c s l ý thuy tphân tích sc ký lng hiu

sut cao, NXB H và THCN, Hà Ni. 1999.y http://www.chemcenter/orgy http://www.kerouac.pharm.uky.edu/asrg/wave/wavehp.ht

mly http://www.anachem.umu.se/jumpstation.htmy http://www.lplc.com/y http://www.zirchrom.com/y http://hplc.chem.vt.edu/y http://www.chrom.com/y http://www.isopro.net/web8.htmy http://hiq.linde-

gas.com/International/W eb/LG/SPG/likelgspg.nsf/DocByA lias/anal_super

bao cao pthl

Documents