Beca: “Ramón Carrillo-Arturo Oñativia”

LA DETERMINACIÓN DE L-CARNITINA COMO MÉTODO DE “SCREENING” EN LA DETECCIÓN DE PACIENTES CON “ALTO

RIESGO” DE DIABETES TIPO 1

Nombre del becario: Dra. Gisel Anabel PassicotDirector de beca: Dr. Juan C. Cresto

Lugar donde se realiza la beca: Centro de Investigaciones Endocrino-lógicas (CEDIE – CONICET), Endocrinología, Htal. de Niños “R. Gutierrez” Gallo 1330, Buenos Aires.

ESTUDIO PILOTO

Se evaluaron 55 niños, hermanos de pacientes diabéticos. (1 de ellos falleció).

En los pacientes se determinó:

1 - L-carnitina total y libre.

2 - Anticuerpos para determinar autoinmunidad en Diabetes: -anti-glutamato decarboxilasa (GADA). -anti-insulina/proinsulina (IAA). -anti-tirosina fosfatada (Ia-2A).

3 - HLA (específico para Diabetes Tipo I).

4 - Pruebas funcionales (PTEVG) -1er. pico de secreción de insulina. -pendiente de desaparición de glucosa (Kg). -área integrada de insulina.

VALORES DE LA PRUEBA DE GLUCOSA EV TOMADOS PARA ESTE TRABAJO

Valores del trabajo1 -1er. Pico de Secreción de Insulina Tanner I: 49 µU/ins (Diabetologia 34: 93-102, 1991)

2 - Pendiente de desaparición de glucosa Kg (mg%/min), P10: 1,40 (Diabetologia 34: 93-102, 1991)

Literatura

Soc. Ital. Endocr. Pediat. Diabetologia (1996) 39: 370 Tanner I - P3: 53 P25: 93 (µU/ins)Tanner II-III - P3: 53 P25: 99 (µU/ins)Tanner IV-V - P3: 77 P25: 127(µU/ins)

Finland Study GroupTanner I - P3: 45 (µU/ins)

y = 0,2783x + 6,502

R2 = 0,2177

5

6

7

8

9

0 2 4 6

Pendiente de glucosa (Kg)

log

n (

áre

a in

su

lina

)

DIAGNÓSTICO EN DIABETES TIPO 1

Correlación entre el área total de insulina y la pendiente de glucosa

Existe correlación lineal entre el logn del área de insulina (PTEVG) y la pendientede desaparición de la glucosa (Kg).

DIAGNÓSTICO EN DIABETES TIPO 1

Correlación entre primer pico (ins.: 1+3 min) y logn (área ins) x Kg

y = 4,4394x - 3,755

R2 = 0,6046

0

20

40

60

80

0 5 10 15 20Logn (ins. total) x Kg

1 +

3 (

µU

in

s.)

y = 7,0375x - 27,746

R2 = 0,9807

0

100

200

300

0 15 30 45Logn (ins. total) x Kg

1 +

3 (

µU

in

s.)

y = -5,3385x + 243,46

R2 = 0,0476

0

100

200

300

0 10 20 30

Logn (ins. total) x Kg

1 +

3 m

in (

µU

in

s)

Todos los niños fueron estudiados con la misma metodología (PTEVG). La caracterización de pa-tología se determinó por la caída del 1er.pico de secreción de insulina por debajo de P3. Se utilizó la fórmula: [logn (área de insulina bajola curva) x Kg] como forma de relacionar en una ecuación el consumo de glucosa con la secreción de insulina. Se observa que hay una correlación positiva al considerar 4 niños con “alto riesgo” (hipoinsuline-mia) y un niño con hiperinsulinemia. Esta correla-ción no se pierde si se toman solamente los niños con baja secreción de insulina. Cuando en el estudio se toman los niños norma-les la correlación se pierde, indicando que en elequilbrio metabólico puede variar el primer pico de secreción de insulina con escasa influencia enla relación: [logn (área ins) x Kg]. La utilidad de esta relación es que define la zona normalidad (entre 20 y 30), la zona de “alto riesgo”de diabetes (por debajo de 15) y la zona de hiper-insulinismo (por arriba de 30). Se requieren mas estudios para certificar la utilidad de esta relación.

- Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - Pacientes - Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - Pacientes

COMPARACIÓN ENTRE HIPERINSULINISMO E HIPOINSULINISMO

COMPARACIÓN ENTRE HIPERINSULINISMO E HIPOINSULINISMO

0

200

400

600

0 10 20 30 40 50

logn (área ins) x Kg

PP

(1

+ 3

) µ

U i

ns.

- Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - Pacientes - Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - Pacientes

COMPARACIÓN ENTRE HIPERINSULINISMO E HIPOINSULINISMO

COMPARACIÓN ENTRE HIPERINSULINISMO E HIPOINSULINISMO

COMPARACIÓN ENTRE HIPERINSULINISMO E HIPOINSULINISMO

COMPARACIÓN ENTRE HIPERINSULINISMO E HIPOINSULINISMO

0

200

400

600

0 10 20 30 40 50

logn (área ins) x Kg

PP

(1

+ 3

) µ

U i

ns.

CORRELACION ENTRE LA SECRECION INICIAL DE INSULINA Y LA EXPRESIÓN: logn (área ins) x Kg

0

200

400

600

0 10 20 30 40 50

logn (área ins) x Kg

PP

(1

+ 3

) µ

U in

s.

- Normales; - Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - - Normales; - Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - Pacientes

- Paciente LB

- Normales; - Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - - Normales; - Obesos con acantosis; - Obesos sin acantosis; - Pacientes

- Paciente LB -- Pendiente: Y= 36,67x -747,44 - R2 = 0,51

Estudios realizados

0

10

20

30

40

50

60

55Tot.

8 Perd.

42Tot.

20 Baj.

10 Ev.

10 REv.

45Tot.

10Pos.

12Tot.

9 N

3 Pat.

Resultados del estudio

Niñ

os

estu

dia

do

s Niños

L-carnitina

Anticuerpos

PTEVG

0

10

20

30

40

50

60

55Tot.

8 Perd.

42Tot.

20 Baj.

10 Ev.

10 REv.

45Tot.

10Pos.

12Tot.

9 N

3 Pat.

Resultados del estudio

Niñ

os

estu

dia

do

s Niños

L-carnitina

Anticuerpos

PTEVG

0

10

20

30

40

50

60

55Tot.

8 Perd.

42Tot.

20 Baj.

10 Ev.

10 REv.

45Tot.

10Pos.

12Tot.

9 N

3 Pat.

Resultados del estudio

Niñ

os

estu

dia

do

s Niños

L-carnitina

Anticuerpos

PTEVG

0

10

20

30

40

50

60

55Tot.

8 Perd.

42Tot.

20 Baj.

10 Ev.

10 REv.

45Tot.

10Pos.

12Tot.

9 N

3 Pat.

Resultados del estudio

Niñ

os

estu

dia

do

s Niños

L-carnitina

Anticuerpos

PTEVG

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1

0

10

20

30

40

50

60

55Tot.

8 Perd.

42Tot.

20 Baj.

10 Ev.

10 REv.

45Tot.

10Pos.

12Tot.

9 N

3 Pat.

Resultados del estudio

Niñ

os

estu

dia

do

s Niños

L-carnitina

Anticuerpos

PTEVG

0

10

20

30

40

50

60

55Tot.

8 Perd.

42Tot.

20 Baj.

10 Ev.

10 REv.

45Tot.

10Pos.

12Tot.

9 N

3 Pat.

Resultados del estudio

Niñ

os

estu

dia

do

s Niños

L-carnitina

Anticuerpos

PTEVG

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

) Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

)

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

) Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

)

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

) Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a(m

mo

l/l

±D

S)

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Estudio de L-carnitina en suero

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

)

0

10

20

30

40

50

Total 1er. est.

Libre 1er. est.

Total 2do. est.

Libre 2do. est.

Determinaciones de L -carnitina

L-c

arn

itin

a (m

mo

l/l ±

DS

) Estudio de L-carnitina en suero

1er. est. 1er. est. 2do. est. 2do. est.

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Determinación de anticuerpos específicos de autoinmunidad

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Determinación de anticuerpos específicos de autoinmunidad

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

1er. est. 1er. est. 2do. est. 2do. est.Total Libre Total Libre Total Libre Total Libre

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Determinación de anticuerpos específicos de autoinmunidad

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Determinación de anticuerpos específicos de autoinmunidad

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Determinación de anticuerpos específicos de autoinmunidad

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1PREVENCIÓN EN DIABETES TIPO 1Determinación de anticuerpos específicos de autoinmunidad

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

!A-2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

0

4

8

12

Niños 10

GADA 4

PAA 5

Ia -2A 1

Clase de anticuerpos

Niñ

os

Actualizado al 17 de Julio de 2007 - Pruebas para realizar (indicadas con asterisco)

1ra.

MUESTRA 2da.

MUESTRA

Nº NOMBRE FECHA EDAD CT CL % GADA PAA IA2A FECHA CT CL % GADA PAA IA2A PTEV

VN 46-70.2 VN 41- 58.2 78-90 0.05

a 3.99 b 4.95 2.71 46-70.2 41-58.2

78-90 0.05

a 3.99 b 4.95 2.71

7 CORREA,SOLANGE 20/04/2005 11 10/10/2006 42.2 35.8 85 * * * *

8 CORREA,DENISE 20/04/2005 12 10/10/2006 36.2 27.6 76 NEG NEG NEG *

17 SAMARIN,LUCAS 04/05/2005 15 51.3 42 82 NEG POS 4.95 NEG

23 BENITEZ,JCRUZ 11/05/2005 15 33.5 25.9 77 NEG NEG NEG 38.2 32.1 84 * * * * 24 BENITEZ,FRANCISCO 11/05/2005 13 45.7 39.5 86 NEG NEG NEG 40.9 34.5 84 * * * *

25 TROISI,VALERIA 11/05/2005 10 49.8 42.7 86 POS 0.26 NEG NEG * * * * * * *

26 TROISI,JMANUEL 11/05/2005 11 59.1 40 68 NEG NEG NEG * * * * * * *

28 ALIANO,NAHUEL 18/05/2005 7 40.9 37.2 90 NEG NEG NEG 19/01/2007 50.6 32.4 64 * * * *

29 ALIANO JOSE 18/05/2005 3 46.8 29.6 63 NEG NEG NEG 19/01/2007 58.2 47.5 82 POS 0.14 * * *

30 FILARDI,JULIAN 18/05/2005 5 55.4 50.2 90 NEG NEG

POS 3.51 * * * * * * Hecho

32 PALEARI,ROCIO 15/06/2005 11 44.6 39.5 89 NEG NEG NEG

33 PALEARI,LUCIA 15/06/2005 8 36.1 32.1 89 NEG NEG NEG

34 PALEARI,ENRIQUE 15/06/2005 4 35.9 32.8 91 NEG NEG NEG

35 BORDA,MAXIMILIANO 15/06/2005 9 50.1/44.6 35.9/39.8 72/89 NEG NEG NEG * * * * * *

36 SEGURA,IGNACIO 28/09/2005 15 37.2/39.3 30.5/28.6 82/73 NEG NEG NEG * * * * * *

44 PHAN VAN THU,SEBASTIAN 12/10/2005 8 29.9/37.4 26.5/24.2 89/65 NEG NEG NEG 14/09/2006 50.4 35.1 70 NEG

POS 0.06 NEG HJecho

45 HELU,PABLO 12/10/2005 17 35/38.3 29.6/28.7 85/75 NEG NEG NEG 13/09/2006 44.6 32.4 73 NEG NEG NEG Alterada

46 COPPOLA,FLORENCIA 19/10/2005 14 52.8/56.8 46.8/49.4 87/87 POS 0.08 NEG NEG 18/12/2006 72 62.5 97 * * * *

47 COPPOLA,NATALIA 19/10/2005 5 43.4/49 36.4/38.8 84/79 NEG POS

4.74 a NEG 18/12/2006 46 35.4 77 * * * Hecho

48 BAMBI,ROCIO 19/10/2005 8 39.8/44.5 31.9/34.7 80/78 NEG NEG NEG 30/08/2006 40.8 26.7 65 NEG POS

5.11 b NEG Hecho

53 MENDES NOVO,JOHANA 14/12/2005 17 59.8 53.3 89 POS 0.06 NEG NEG * * * * * *

54 RISCHMANN,PAMELA 14/12/2005 5 54.5 48.1 88 POS 0.67 NEG NEG * * * POS 0.62

POS 6.31 b NEG Hecho

55 RISCHMANN,DAIANA 14/12/2005 8 47.4 34.9 74 NEG NEG NEG * * * POS 0.08 NEG NEG Hecho

56 CIURLEO, FABIO 11/01/2006 17 45.5 36.7 81 NEG NEG NEG 31/01/2007 50.9 49.6 87 NEG * *

57 MARCHIORO,FLORENCIA 11/01/2006 10 42 33.2 79 NEG NEG NEG * * * * * *

58 OYHAMBURO,JEREMIAS 11/01/2006 7 46.2 39.7 86 NEG NEG NEG

59 PHAN VAN THU, VICTORIA 14/09/2006 40.2 36.1 89 NEG

POS 4.95b NEG Alterada

* - Pruebas a realizar

- Carnitinas a determinar

CONCLUSIONES DE LO REALIZADO

-La metodología utilizada es correcta. Los resultados se ajustan a los conocimientos actuales en Diabetes Tipo 1.

-La determinación de L-carnitina no presenta falsos negativos con la PTEVG y resulta orientadora para el estudio de los niños.

-El estudio de una población seleccionada nos ha permitido detectar a varios pacientes en riesgo.

-La determinación de L-carnitina aparenta ser una herramienta eficaz en la selección de los niños que se deben estudiar.

-Esta metodología de selección permitiría estudios poblacionales con costo aceptable.

¡Muchas Gracias!