Caso Clinico 1: Maria, de 28 anos de idade, é filha do Sr. José (60 anos), que é

afetado por ataxia espinocerebelar tipo 3 (SCA3), uma doença de herança autossômica dominante causada por expansões de trinucleotideos na região codificadora . Um tio paterno e duas tias paternas, já falecidos, tiveram SCA3. A penetrância da SCA3 varia com a idade, sendo de 20% em indivíduos com menos de 30 anos de idade e de 80% em indivíduos entre 50-60 anos de idade. Apesar de existir teste genético para SCA3, Maria não quer realizar o teste. Contudo, ela quer vir a ter filhos e não quer correr risco que eles venham a ser portadores da mutação responsável pela SCA3 em seus familiares.

Ataxia espinocerebelar tipo 3 (SCA3) Doença de Machado-Joseph

• Doença neurodegenerativa – AD – a mais frequente

• Em geral de início tardio, com grande variabilidade clínica, caracterizadas pela perda progressiva de coordenação da marcha, dos movimentos das mãos dos olhos e da fala.

• Estudos moleculares:

– aumento de repetições CAG no gene ATXN3

– Indivíduos normais: 12 a 40 cópias

– Afetados: > 61 ou mais cópias da repetição.

Caso Clinico 1: a) A preocupação de Maria em vir a ter filhos com SCA3 se justifica?

Porque?

I

II

III

1 2

1 2 3 4 6

60a

28a

SCA3

Maria

José

?

I

II

III

1 2

1 2 3 4 6

:

60a

28a

portadora nao portadora

A PRIORI 1/2 1/2

~

Nao manifestar 0,8 1

A posteriori 0,4

0,9

0,4 0,5

SCA3

4 = 44,4%

9

?

I

II

III

1 2

1 2 3 4 6

60a

28a

~

1/2

2/9

~2%

4

9

?

Caso Clinico 1: b) O que você ofereceria como opções quanto a medidas preventivas

em relação a SCA3 para os futuros descendentes de Maria.

- Realizar um teste genético (analise da região de trinucleotídeo no gene SCA3) no pai de Mariana, para confirmar o diagnóstico clinico.

- Se a mutação patogênica é identificada: é possível fazer diagnóstico pré-implantação.

- A confidencialidade pode ser mantida

Caso Clinico 2: Mariana, 24 anos de idade, tem um irmão (Ricardo)

com Distrofia muscular tipo Duchenne (DMD). O laudo do teste molecular e da bióspia muscular encontram-se em anexo. Não há nenhum outro caso de DMD na família. Mariana agendou uma consulta com você, pois quer decidir quanto a sua futura prole.

Nome: GBL Registro: C- 26010

Data de Nascimento: 24/05/2006 Sexo: ( ) F ( X )M

Material: amostra de sangue periférico coletada pelo CEGH Coleta: 29/11/2012 Exame Solicitado: Pesquisa de mutação no gene da Distrofina

Encaminhamento: Dra. Adriana Relatório: 28/01/2013

_________________________________________________________________________________________ CENTRO DE ESTUDOS DO GENOMA HUMANO (CEGH) – http://www.genoma.ib.usp.br

Depto de Genética e Biologia Evolutiva – IB – Universidade de São Paulo Rua do Matão, travessa 13, nº 106 - Cidade Universitária - SP - CEP: 05508-090

Telefone: (55 11) 3091-0878 / Fax: 3091-0852

Página 1 de 1

Indicação: Teste molecular solicitado para pesquisa de deleção ou duplicação no gene

da Distrofina. O paciente apresenta quadro clínico compatível com o

diagnóstico de Distrofia Muscular do tipo Duchenne.

Metodologia: 1. Dosagem da Enzima Creatinofosfoquinase (CK) realizada pelo Laboratório de

Análises Clínicas da Faculdade de Ciências Farmacêuticas – USP (Valores de referência para mulheres: 26-155 U/L e para homens: 26-189 U/L)

2. Análise de deleção e duplicação nos 79 exons e da região promotora do gene

da Distrofina pela técnica de MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe

Amplification - MRC Holland SALSA kit P034/P035). Este método não detecta mutações de ponto.

Resultados: 1- CK : 22275 U/L (laudo de resultados nº 8854F). 2- Não foi detectada deleção ou duplicação no gene da Distrofina.

Interpretação: O resultado acima não exclui o diagnóstico de Distrofia Muscular do tipo

Duchenne (DMD).

Comentários: 1- A DMD é uma doença genética ligada ao cromossomo X que afeta indivíduos

do sexo masculino.

2- Cerca de 60-70% dos pacientes afetados pela DMD apresenta uma deleção molecular no gene da Distrofina; 7-10% dos pacientes apresentam uma

duplicação neste gene e os casos restantes aparentemente resultam de

mutações de ponto.

Dadas as potenciais implicações para outros membros da família, todos os testes genéticos devem ser

acompanhados de aconselhamento genético. Referências Gatta V, Scarciolla O, et. al. Identification of deletions and duplications of the DMD gene in affected males and carrier females by multiple ligation probe amplification (MLPA). Hum Genet. 2005 Jun;117(1):92-8. Epub 2005 Apr 20.

Zatz, M., Genômica das doenças neuromusculares e neurodegenerativas. In: Genômica São Paulo: Ed. Atheneu. p. 347-360, 2004. Gene Reviews: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1119/

OMIM: http://omim.org/entry/300377 MRC-Holland (SALSA MLPA KIT P034/P035) - http://www.mrc-holland.com

Dra. Naila C. V. Lourenço Bach. Antonia M. P. Cerqueira Dra. Rita de C. M. Pavanello CRBio 39008/01-D CRBio 26456/01-D CRM 46300

Certificado pelo EMQN (The European Molecular Genetics Quality Network)

Teste Genético realizado em amostra de DNA de Ricardo

Avaliação da distrofina em amostra de biopsia muscular

de Ricardo

Caso Clinico 2:

a) Como você orientaria Mariana em relação a riscos genéticos para seus futuros filhos

?

HETEROZIGOTA NÃO HETEROZIGOTA

A PRIORI 4 m 1- 4 m = 1 ~

CONDICIONAL 1/2 m

2 m = 2 m = 2

2 m + m 3 m 3 A posteriori

4 m = 2m

2

m

H = 2m + H

2

H - = 2m H

2

2H –H =2m

2

H =2m

2

H = 4m

1/2

1/3

1/4

1/12

2/3

Caso Clinico 2:

b) que testes genéticos você recomendaria

Atualmente: Sequenciamento de nova geração: identifica deleções, duplicações e mutações de ponto.

Sempre que possível, testar o proposito afetado

Caso clinico 3 O Casal Priscila (26 anos) e Mario (27 anos),

clinicamente normais e primos de 1o. grau ( seus pais são irmãos), desejam saber se tem risco de virem a ter crianças afetadas por fenilcetonuria, uma vez que o irmão de Priscila é afetado por esta doença. Fenilcetonuria (PKU) é uma doença com padrão de herança autossômico recessivo, e a incidência da doença é de 1/50.000.

Caso clinico 3

a) Como você faria o aconselhamento genético para esta família, quanto ao risco de recorrência da PKU

b) Há indicação de realizar algum teste genético?

C) Se Priscila e Mario não fossem primos, sua conduta mudaria?

Aa

2/3

Aa Aa

Aa

1/2

1/2

Aa

1/4

Aa

1/4 x 2/3 x 1/4

1/24

Caso clinico 3 b) Há indicação de realizar algum teste genético.

Sim

TESTAR MARIO PARA MUTAÇAO

Quando a frequencia é > 1 É recomendável

Aa

2/3

PKU

p2+2pq+q2

aa = q2 = 1/50.000

q = 1/220

p = 1-1/220 ~1

2pq= 1/110

Aa Aa

aa

1/110 x 2/3 x 1/4

1/660

Aa

1/110

c) Se Priscila e Mario não fossem primos, sua

conduta mudaria?

Doenças de Herança Autossômica Recessiva

Frequência mais alta em certas populações

1/3600 em população de Judeus Ashkenazi 1/400.000 População mundial

Em qual das duas populações há chance maior de ter afetados que são

heterozigotos compostos para mutações no gene HEXA?

Se justifica triagem de heterozigotos nestas populações?

Doença de Tay Sachs

Doença de armazenamento lisossômico

Deficiência de hexosaminidase A

Morte neuronal começando aos 3-6 meses de vida

Regressão motora, perda visual e dos movimentos voluntários

Estado vegetativo após ~1 ano

Incidência

Doenças de Herança Autossômica Recessiva

Frequência mais alta em certas populações

1/3600 em população de Judeus Ashkenazi 1/40.000 População mundial

Em qual das duas populações há chance maior de ter afetados que são

heterozigotos compostos para mutações no gene HEXA?

Se justifica triagem de heterozigotos nestas populações?

Doença de Tay Sachs

Doença de armazenamento lisossômico

Deficiência de hexosaminidase A

Morte neuronal começando aos 3-6 meses de vida

Regressão motora, perda visual e dos movimentos voluntários

Estado vegetativo após ~1 ano

Incidência

Frequencia de heterozigoto= 1/30 1/100

Na população geral

Efeito fundador – um tipo de deriva genética