Desde tiempos remotos, Desde tiempos remotos, se ha estudiado el se ha estudiado el envejecimiento y la envejecimiento y la “fuente de la eterna “fuente de la eterna

juventud”.juventud”.

Arkin, R. Arkin, R. Biology of Aging: bservations and principles. 2nd ed. Suderland, Massachusetts: Sinauer;1998.

Extensión de la esperanza de Extensión de la esperanza de vida por la introducción de la vida por la introducción de la

telomerasa en células humanas telomerasa en células humanas normalesnormales

Bodnar, GA; Oullette, M; Frolkis, M; et. al. Bodnar, GA; Oullette, M; Frolkis, M; et. al. Science 279 (1998): 349 – 352.Science 279 (1998): 349 – 352.

IntroducciónIntroducción

Los telómerosLos telómeros

Los telómeros se localizan Los telómeros se localizan en los extremos de los en los extremos de los

cromosomas eucarióticos.cromosomas eucarióticos. Constituidas por regiones de Constituidas por regiones de ADN no codificante.ADN no codificante.

En los humanos, el ADN del En los humanos, el ADN del telómero está constituido por telómero está constituido por TTAGGG, repetidas muchas TTAGGG, repetidas muchas veces en tandem y veces en tandem y

perdiéndose sucesivamenteperdiéndose sucesivamente durante las divisiones durante las divisiones celulares.celulares.

FunciónFunción

Mantener estable la estructura de los cromosomas en Mantener estable la estructura de los cromosomas en las células eucariotas.(Protección de exonucleasas).las células eucariotas.(Protección de exonucleasas).

Ayudan a que los cromosomas homólogos se emparejen Ayudan a que los cromosomas homólogos se emparejen y entrecrucen durante la profase de la meiosis.y entrecrucen durante la profase de la meiosis.

Cumple como reloj mitóticoCumple como reloj mitótico

TelomerasaTelomerasaEsta formada por un complejo proteína-ácido Esta formada por un complejo proteína-ácido ribonucleico con actividad polimerasa.ribonucleico con actividad polimerasa.

Enzima cuyo rol es mantener la integridad telomérica.Enzima cuyo rol es mantener la integridad telomérica.

Actuaría elongando los extremos cromosómicos.Actuaría elongando los extremos cromosómicos.

Actividad de telomerasa en las fases G1, S y G2 Actividad de telomerasa en las fases G1, S y G2 del ciclo celular, represión en G0. del ciclo celular, represión en G0.

Telomerasa = actividad de subunidad catalíticaTelomerasa = actividad de subunidad catalítica

Estructura del telómeroEstructura del telómero

Estructura en doble bucle.Estructura en doble bucle.

El extremo final se curva sobre su eje formando El extremo final se curva sobre su eje formando un gran bucle (t-loop) un gran bucle (t-loop)

El extremo 3’ rico en G se une a las secuencias El extremo 3’ rico en G se une a las secuencias repetitivas en el extremo 5’ formando un bucle repetitivas en el extremo 5’ formando un bucle de desplazamiento (d-loop). de desplazamiento (d-loop).

La estructura t-loop-d-loop enmascara el La estructura t-loop-d-loop enmascara el extremo 3’libre , lo cual podría tener un rol extremo 3’libre , lo cual podría tener un rol protectivo.protectivo.

T-loop-d-loopT-loop-d-loop

La integridad del telómero requiere:La integridad del telómero requiere:

Un número mínimo de secuencias TTAGGGUn número mínimo de secuencias TTAGGG

La integridad del extremo terminal simple cadenaLa integridad del extremo terminal simple cadena

Proteínas reguladoras: TRF1 y TRF2Proteínas reguladoras: TRF1 y TRF2

TRF1TRF1– Formación y estabilización del bucle.Formación y estabilización del bucle.– Se une con Pot1 para unir el extremo 3’ libre Se une con Pot1 para unir el extremo 3’ libre

con las secuencias doble cadena repetitivas. con las secuencias doble cadena repetitivas. – Su exceso Su exceso inhibeinhibe a la telomerasa. a la telomerasa. – La unión con TIN2 favorece la compactación La unión con TIN2 favorece la compactación

del DNA, estabiliza el loop y del DNA, estabiliza el loop y limita el accesolimita el acceso de la telomerasa.de la telomerasa.

– Sustrato de ribosilasas (Tankirasa 1 y 2). Sustrato de ribosilasas (Tankirasa 1 y 2). Ribosilado, pierde afinidad por el DNA Ribosilado, pierde afinidad por el DNA telomérico dejando DNA libre para la telomérico dejando DNA libre para la telomerasa.telomerasa.

TRF2TRF2

Estabiliza y permite la unión del extremo 3’ Estabiliza y permite la unión del extremo 3’ libre al DNA doble cadenalibre al DNA doble cadenaSe une a proteínas reguladoras de la longitud Se une a proteínas reguladoras de la longitud del telómero (hRAP1)del telómero (hRAP1)Se une a proteínas reparadoras: Se une a proteínas reparadoras:

1.1. complejo MRE11 = repara DNA doble cadenacomplejo MRE11 = repara DNA doble cadena2.2. DNA PK = impide la fusión de los telómerosDNA PK = impide la fusión de los telómeros

Unión de TRF2: formación del loopUnión de TRF2: formación del loop

Cél germinales: hTRT+(telomerasa activa)= telómeros Cél germinales: hTRT+(telomerasa activa)= telómeros 15 kbp15 kbp

Cél somática: hTRT- (telomerasa inactiva)= telómeros Cél somática: hTRT- (telomerasa inactiva)= telómeros más cortosmás cortos

¿Es el acortamiento de los telómeros la causa ¿Es el acortamiento de los telómeros la causa del envejecimiento humano?.del envejecimiento humano?.

Las células se dividen hasta un punto crítico la Las células se dividen hasta un punto crítico la “senescencia replicativa”“senescencia replicativa” en la cual los en la cual los telómeros han alcanzado una determinada telómeros han alcanzado una determinada longitud debido a su acortamiento progresivo longitud debido a su acortamiento progresivo por las sucesivas divisiones.por las sucesivas divisiones.SenectudSenectud división acumulativadivisión acumulativa

NO TIEMPO NO TIEMPO CRONOLÓGICO.CRONOLÓGICO.

ObjetivosObjetivos

Demostrar si es posible activar la telomerasa en Demostrar si es posible activar la telomerasa en células somáticas (hTRT). células somáticas (hTRT). Determinar si está expresión prolonga la Determinar si está expresión prolonga la esperanza de vida celularesperanza de vida celularLograr la elongación de los telómeros con la Lograr la elongación de los telómeros con la activación de la telomerasaactivación de la telomerasaDeterminar sí la pérdida de telómeros controla la Determinar sí la pérdida de telómeros controla la entrada en la senectud replicativa.entrada en la senectud replicativa.Determinar el promedio de divisiones celulares Determinar el promedio de divisiones celulares en células hTRT- y hTRT+, antes de entrar a la en células hTRT- y hTRT+, antes de entrar a la senescencia.senescencia.

Hipótesis del envejecimiento Hipótesis del envejecimiento celularcelular

Las células se dividen hasta un punto crítico Las células se dividen hasta un punto crítico la la ““senescenciasenescencia replicativa” replicativa” en la cual en la cual los telómeros han alcanzado una longitud los telómeros han alcanzado una longitud crítica debido a su acortamiento crítica debido a su acortamiento progresivo por las sucesivas divisiones.progresivo por las sucesivas divisiones.

INTRODUCCION DE INTRODUCCION DE TELOMERASA EN CELULAS TELOMERASA EN CELULAS

HUMANASHUMANASOBJETIVO : TRANSFECTAR OBJETIVO : TRANSFECTAR

CELULAS NORMALES CELULAS NORMALES hTRT– CON 2 DIFERENTES hTRT– CON 2 DIFERENTES

VECTORES cDNA hTRT VECTORES cDNA hTRT

A) Construcción del primer promotor de A) Construcción del primer promotor de expresión expresión fue creado para aumentar la fue creado para aumentar la eficacia de la traducción por separación de la eficacia de la traducción por separación de la región 5´-3´ no codificante y creación de un región 5´-3´ no codificante y creación de un consenso kozak. consenso kozak.

– Secuencia de consensoSecuencia de consenso: Secuencia ideal que : Secuencia ideal que representa los nucleótidos que se encuentran con representa los nucleótidos que se encuentran con mayor frecuencia en un fragmento de ADN. Es una mayor frecuencia en un fragmento de ADN. Es una secuencia breve de nucleótidos que suele servir de secuencia breve de nucleótidos que suele servir de sitio de reconocimiento para ciertas proteínas sitio de reconocimiento para ciertas proteínas

– El cDNA hTRT fue clonado utilizando como promotor El cDNA hTRT fue clonado utilizando como promotor el PGRN145 del virus del SARCOMA el PGRN145 del virus del SARCOMA MIELOPROLIFERATIVO (MPSV).MIELOPROLIFERATIVO (MPSV).

células (RPE – BJ ) células (RPE – BJ )

ELECTROPORACION – TRANSFECCION ELECTROPORACION – TRANSFECCION

vector control vector hTRT + consenso vector control vector hTRT + consenso kozak kozak

TRANSFECCIÓNTRANSFECCIÓN

después de 48 hrs. las células se después de 48 hrs. las células se trasladaron a un medio con HYGROYCIN–B trasladaron a un medio con HYGROYCIN–B (50 ul/ml durante dos a tres semanas, (50 ul/ml durante dos a tres semanas, después se redujo la concentración a 10 después se redujo la concentración a 10 ul/ml ).ul/ml ).

Los clones estables fueron analizados por Los clones estables fueron analizados por TRAP ( Telomeric Repeat Amplification TRAP ( Telomeric Repeat Amplification Polimerase).Polimerase).

CULTIVOCULTIVO

TRAP ASSAY TRAP ASSAY

El método de TRAP (Telomeric Repeat El método de TRAP (Telomeric Repeat Amplification Protocol), basado en la Amplification Protocol), basado en la técnica de PCR, permite detectar la técnica de PCR, permite detectar la presencia de actividad de telomerasa en presencia de actividad de telomerasa en extractos celulares utilizando primers de extractos celulares utilizando primers de regiones teloméricas regiones teloméricas

TELOMERIC REPEAT TELOMERIC REPEAT AMPLIFICATION PROTOCOLAMPLIFICATION PROTOCOL

Para medir el rango de producción Para medir el rango de producción telomerasa se utilizo como referencia la telomerasa se utilizo como referencia la actividad telomerasa de la línea celular actividad telomerasa de la línea celular H1299 de cáncer de pulmón humano.H1299 de cáncer de pulmón humano.

Los clones RPE expresaron un rango de Los clones RPE expresaron un rango de actividad de 65 a 360% de actividad actividad de 65 a 360% de actividad telomerasa.telomerasa.

Los clones BJ expresaron de 86 a 95% de Los clones BJ expresaron de 86 a 95% de actividad de telomerasa.actividad de telomerasa.

RESULTADOS – 1RESULTADOS – 1ER ER

TRANSFECCIÓNTRANSFECCIÓN

27 de 39 clones estables RPE transfectadas 27 de 39 clones estables RPE transfectadas con MPSV- hTRT expresaron actividad de con MPSV- hTRT expresaron actividad de telomerasa ( 69 %) .telomerasa ( 69 %) .

3 de 22 clones estables de BJ transfectado 3 de 22 clones estables de BJ transfectado con MPSV- hTRT expresaron actividad de con MPSV- hTRT expresaron actividad de telomerasa.telomerasa.

¿Cómo saber que el hTRT mRNA ¿Cómo saber que el hTRT mRNA es originado del clonado y no de un es originado del clonado y no de un

gen endógeno?gen endógeno?

El mRNA endógeno del hTRT fue El mRNA endógeno del hTRT fue detectado con los primers RA58 y detectado con los primers RA58 y hTRT3’UTR.hTRT3’UTR.

El mRNA exógeno del hTRT fue detectado El mRNA exógeno del hTRT fue detectado con primers RA58 y el RA55.con primers RA58 y el RA55.

La RT-PCR demostró que el mRNA hTRT La RT-PCR demostró que el mRNA hTRT derivó del cDNA clonado y no del mRNA derivó del cDNA clonado y no del mRNA endógeno.endógeno.

CONSTRUCCIÓN DEL SEGUNDO CONSTRUCCIÓN DEL SEGUNDO VECTOR DE EXPRESIÓNVECTOR DE EXPRESIÓN

Se clonó un cDNA hTRT completo en el Se clonó un cDNA hTRT completo en el promotor pZeoSV del SV40.promotor pZeoSV del SV40.

célula BJ Electroporacióncélula BJ Electroporación

Transfección con hTRT SV40Transfección con hTRT SV40

RESULTADOS – 2ª RESULTADOS – 2ª TRANSFECCIÓNTRANSFECCIÓN

de las células BJ transfectadas con el de las células BJ transfectadas con el pZeoSV-hTRT e la división 40, solo 6 de pZeoSV-hTRT e la división 40, solo 6 de 76 clones estables (8% ) expresaron 76 clones estables (8% ) expresaron telomerasa actividad en un rango de 10 a telomerasa actividad en un rango de 10 a 30% en comparación a la línea celular 30% en comparación a la línea celular H1299..H1299..El hTRT mRNA no era detectable en El hTRT mRNA no era detectable en células BJ negativas (hTRT- ), pero células BJ negativas (hTRT- ), pero fácilmente observables en clones hTRT+. fácilmente observables en clones hTRT+.

Medición de la longitud de los Medición de la longitud de los telómeros:telómeros:

Fragmentos de restricción terminal (TRF), Fragmentos de restricción terminal (TRF), secuencias repetitivas (TTAGGG)n obtenidos secuencias repetitivas (TTAGGG)n obtenidos mediante la digestión de ADN genómico con mediante la digestión de ADN genómico con una enzima de restricción de corte muy una enzima de restricción de corte muy frecuente (HinfI), que no corta en el core de las frecuente (HinfI), que no corta en el core de las repeticionesrepeticiones

Southern Blot :se detectan poblaciones de Southern Blot :se detectan poblaciones de longitudes teloméricas de distintos clones longitudes teloméricas de distintos clones celulares utilizando una sonda complementaria celulares utilizando una sonda complementaria (AATCCC) marcada radiactivamente(AATCCC) marcada radiactivamente

Southern Blot:Southern Blot:

1. ¿Qué sucederia si logramos activar la 1. ¿Qué sucederia si logramos activar la telomerasa en células normales?telomerasa en células normales?

2. ¿Es posible alargar los telómeros para 2. ¿Es posible alargar los telómeros para conservar la capacidad de la célula de conservar la capacidad de la célula de dividirse?dividirse?

3. ¿Existe algún límite para el alargamiento 3. ¿Existe algún límite para el alargamiento de los telómeros?de los telómeros?

Longitud de los telómeros de los Longitud de los telómeros de los distintos clones celulares utilizando distintos clones celulares utilizando

TRF en gel de agarosa.TRF en gel de agarosa.

Resultados:Resultados:

RPE hTRT- disminuyeron sus telómeros en 0,4- RPE hTRT- disminuyeron sus telómeros en 0,4- 1,3 kbp1,3 kbpRPE hTRT+ RPE hTRT+ aumentaronaumentaron los telómeros en los telómeros en 3,73,7 kpbkpbBJ hTRT+ transfectadas con MPSV-hTRT BJ hTRT+ transfectadas con MPSV-hTRT aumentaronaumentaron los telómeros en los telómeros en 7,17,1 kpb kpbBJ hTRT+ transfectadas con pZeoSV-hTRT BJ hTRT+ transfectadas con pZeoSV-hTRT aumentaronaumentaron los telómeros en los telómeros en 0,40,4 kpb kpbLos clones T30 ( RPE) y B13 (BJ) hTRT+ Los clones T30 ( RPE) y B13 (BJ) hTRT+ presentaron actividad telomerasa del 5% y 7% presentaron actividad telomerasa del 5% y 7% pero no presentaron alargamiento significativo pero no presentaron alargamiento significativo de los telómerosde los telómeros

Conclusiones:Conclusiones:

Si logramos activar la telomerasa = Si logramos activar la telomerasa = alargamos alargamos la longitud del telómero = la célula puede la longitud del telómero = la célula puede dividirse, evitando la entrada en dividirse, evitando la entrada en SENESCENCIA REPLICATIVASENESCENCIA REPLICATIVA

La sola presencia de actividad hTRT+ La sola presencia de actividad hTRT+ no es no es suficientesuficiente. . Se requiere una determinada Se requiere una determinada concentración mínima de hTRT +concentración mínima de hTRT +

Clones h TRT +Clones h TRT +

ACTIVIDAD TELOMERASA ? ACTIVIDAD TELOMERASA ?

LARGO DEL TELOMERO? LARGO DEL TELOMERO?

QUE PASA CON LA QUE PASA CON LA LONGEVIDAD DE LA CELULAR?LONGEVIDAD DE LA CELULAR?

Llegan a senescencia al mismo tiempo Llegan a senescencia al mismo tiempo que las hTRT - ?que las hTRT - ?

Pueden continuar dividiéndose por más Pueden continuar dividiéndose por más tiempo ?tiempo ?

O el hecho de alargar sus telómeros no O el hecho de alargar sus telómeros no tiene implicancia en la senescencia?tiene implicancia en la senescencia?

Las células somáticas normales pierden Las células somáticas normales pierden su capacidad proliferativa tras un número su capacidad proliferativa tras un número crítico de divisionescrítico de divisiones

La máxima capacidad de división en La máxima capacidad de división en cultivo de cel . Somáticas humanas de cultivo de cel . Somáticas humanas de dadores jóvenes oscila entre 50 y 100 dadores jóvenes oscila entre 50 y 100 duplicacionesduplicaciones

Este número se reduce si el dador es más Este número se reduce si el dador es más adulto.( debido a la historia replicativa de adulto.( debido a la historia replicativa de la célula in vivo)la célula in vivo)

Senescencia se relaciona con el Senescencia se relaciona con el acortamiento de los telómeros.acortamiento de los telómeros.

Que pasa con los clones h TRT + que Que pasa con los clones h TRT + que expresan la actividad telomerasa?expresan la actividad telomerasa?

ConclusionesConclusiones

Los clones RPE h TRT + excedieron el valor Los clones RPE h TRT + excedieron el valor normal de senescencia por 20 divisiones mas, y normal de senescencia por 20 divisiones mas, y continúan dividiéndose superando el numero continúan dividiéndose superando el numero máximo ( PD 55 a 57 )máximo ( PD 55 a 57 )

Los clones BJ HTRT + excedieron el numero Los clones BJ HTRT + excedieron el numero máximo de PD ( 36 divisiones mas)máximo de PD ( 36 divisiones mas)

Además de la actividad de la telomerasa en la Además de la actividad de la telomerasa en la longevidad de la célula interviene otros factores longevidad de la célula interviene otros factores específicos de cada línea celular. (niveles de específicos de cada línea celular. (niveles de hTR, proteinas asociadas)hTR, proteinas asociadas)

La expresión de h TRT La expresión de h TRT funcional en células funcional en células normales aumenta el tiempo normales aumenta el tiempo de vida celular!! de vida celular!!

B-galactosidasa como marcador B-galactosidasa como marcador de la senescenciade la senescencia

B- GalactosidasaB- GalactosidasaSenectud celularSenectud celular es una progresión de acontecimientos por es una progresión de acontecimientos por lo cual las células pasan de dividirse activamente a un lo cual las células pasan de dividirse activamente a un estado donde no se dividen, quedando metabólicamente estado donde no se dividen, quedando metabólicamente activo.activo.Diferenciación terminal:Diferenciación terminal: Es también un mecanismo Es también un mecanismo genéticamente programado. La célula es incapaz de originar genéticamente programado. La célula es incapaz de originar otros tipos celulares u otras células del mismo tipo. A otros tipos celulares u otras células del mismo tipo. A diferencia de las células en **quiescencia** (detenidas en la diferencia de las células en **quiescencia** (detenidas en la fase Go del ciclo celular), es un estadio irreversible de donde fase Go del ciclo celular), es un estadio irreversible de donde la célula no logra salir a pesar de la estimulación con factor la célula no logra salir a pesar de la estimulación con factor de crecimiento (FC) y que la lleva a la muerte en poco de crecimiento (FC) y que la lleva a la muerte en poco tiempo.tiempo.QuiescenciaQuiescencia las células cesan de proliferar , pero retienen las células cesan de proliferar , pero retienen la capacidad de dividirse posteriormente, también se la capacidad de dividirse posteriormente, también se denomina a esta detención del proceso en G1 como fase G0 denomina a esta detención del proceso en G1 como fase G0 . Estas células pueden entrar de nuevo en fase G1 por . Estas células pueden entrar de nuevo en fase G1 por estímulos externos y proliferar.estímulos externos y proliferar.

ObjetivoObjetivo

Determinar la presencia de la enzima Determinar la presencia de la enzima telomerasa transcriptasa reversa (TRT) en telomerasa transcriptasa reversa (TRT) en las células epiteliales del pigmento las células epiteliales del pigmento retiniano y en los fibroblastos, utilizando la retiniano y en los fibroblastos, utilizando la B-galactosidasa como marcador de la B-galactosidasa como marcador de la senescencia.senescencia.

Determinar la existencia de cambios Determinar la existencia de cambios morfológicos y funcionales asociados a morfológicos y funcionales asociados a este fenómeno.este fenómeno.

Materiales y MetodologíaMateriales y MetodologíaPrueba histoquímica para la actividad Prueba histoquímica para la actividad

dede B-galactosidasa B-galactosidasa

Ph 6Ph 6PBS (phosphate buffered saline) PBS (phosphate buffered saline) Fijador: formaldehído 2 %, Fijador: formaldehído 2 %, glutaraldehido 0.2 %, glutaraldehido 0.2 %, formaldehído 0.3 %.formaldehído 0.3 %.Sustrato artificial X-gal (5 bromo- Sustrato artificial X-gal (5 bromo- 4cloro-3 indol- beta D 4cloro-3 indol- beta D galactósido).galactósido).

Microfotografía de campo brillanteMicrofotografía de campo brillante

- Clones T8 y T 71 son - Clones T8 y T 71 son hTRT+ con un número hTRT+ con un número

similar o mayor de similar o mayor de divisiones. Mostraron divisiones. Mostraron una baja tinción de B-una baja tinción de B-

galactosidasa.galactosidasa.

-Clones C22 y C23 son -Clones C22 y C23 son hTRT -- RPE senescentes hTRT -- RPE senescentes o cercanos a la o cercanos a la senescencia, senescencia, mostraron una fuerte mostraron una fuerte

tinción.tinción.

ResultadosResultados

Círculos: Círculos: Clones hTRT –Clones hTRT –

Símbolos cerrados: Clones senescentes Símbolos cerrados: Clones senescentes

Símbolos medio llenos: Células cercanas a la Símbolos medio llenos: Células cercanas a la senescencia.senescencia.

Símbolos abiertosSímbolos abiertos

Triángulos : Clones hTRT + Triángulos : Clones hTRT +

G Banda: Clones hTRT+ RPE y clones hTRT+ Bj revelaron G Banda: Clones hTRT+ RPE y clones hTRT+ Bj revelaron cls con complemento normal de 46 cromosomas y cls con complemento normal de 46 cromosomas y ninguna anormalidad.ninguna anormalidad.

ConclusiónConclusiónPresencia de B-galactosidasa en células Presencia de B-galactosidasa en células senescentes hTRT de pigmento retiniano y senescentes hTRT de pigmento retiniano y Células Bj.Células Bj.

Los clones hTRT+ estudiados no presentaron Los clones hTRT+ estudiados no presentaron anormalidades cromosómicas.anormalidades cromosómicas.

Células hTRT+ con una esperanza de vida Células hTRT+ con una esperanza de vida extendida parecen tener cariotipo normal y extendida parecen tener cariotipo normal y fenotipo similar a las células jóvenes.fenotipo similar a las células jóvenes.

CONCLUSIÓNCONCLUSIÓN

Pérdida del telómero en la ausencia de la Pérdida del telómero en la ausencia de la telomerasa telomerasa reloj mitótico reloj mitótico control del control del numero de divisiones celularesnumero de divisiones celulares

Homeostasis telomérica Homeostasis telomérica equilibrio entre equilibrio entre alargamiento y acortamiento.alargamiento y acortamiento.

Subunidad catalítica de la telomerasa Subunidad catalítica de la telomerasa alargamiento.alargamiento.

Proteinas de ligación del telómero (TRF-1 Proteinas de ligación del telómero (TRF-1 y 2) y 2) equilibrio de la longitud. equilibrio de la longitud.

Níveles muy bajos de la actividad Níveles muy bajos de la actividad telomerásica al parecer son insuficientes telomerásica al parecer son insuficientes para prevenir el acortamiento del para prevenir el acortamiento del telómero.telómero.

Extensión de la longevidad celular Extensión de la longevidad celular nivel nivel mínimo de actividad telomerásicamínimo de actividad telomerásica

Clones hTRT + derivados de diferentes Clones hTRT + derivados de diferentes tipos celulares y transfectados con tipos celulares y transfectados con diferentes vectores mostraran diferencias diferentes vectores mostraran diferencias notables en la longitud del telómero.notables en la longitud del telómero.

No observaran ninguna anomalia No observaran ninguna anomalia morfológica o fenotípicamorfológica o fenotípica

La capacidad de mantener la célula La capacidad de mantener la célula humana normal en un estado fenotípico humana normal en un estado fenotípico

juvenil puede tener importantes juvenil puede tener importantes aplicaciones en la investigación biológica, aplicaciones en la investigación biológica, la indústria farmacéutica y en la medicina.la indústria farmacéutica y en la medicina.

Los efectos a largo plazo de la expresión Los efectos a largo plazo de la expresión de la telomerasa exógena en el de la telomerasa exógena en el mantenimiento del telómero y la mantenimiento del telómero y la

longevidad de estas células deben aún ser longevidad de estas células deben aún ser determinados en investigaciones determinados en investigaciones

posterioresposteriores

TelomerasaTelomerasaSi logramos aprender a controlar ese gen de alguna Si logramos aprender a controlar ese gen de alguna manera, estaremos tras una de las rutas correctas hacia manera, estaremos tras una de las rutas correctas hacia la extensión de la esperanza de vida. la extensión de la esperanza de vida. 

¿ Lograremos algún día establecer el balance y todos ¿ Lograremos algún día establecer el balance y todos vivir sobre el siglo? vivir sobre el siglo?

¿Será esto bueno o malo para la sobrevivencia de ¿Será esto bueno o malo para la sobrevivencia de nuestra especie? nuestra especie?

AUTORAUTORPor: Wilfredo G. Santa, MDPor: Wilfredo G. Santa, MDDe “La Guia de la Salud, California-2004”De “La Guia de la Salud, California-2004”

¡¡¡GRACIAS!!!