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INFECCIONES PARASITARIAS EN EPISODIOS INFECCIONES PARASITARIAS EN EPISODIOS
DIARREICOSDIARREICOS
DIAGNOSTICO DE DIARREASDIAGNOSTICO DE DIARREAS
Bioq. Florencia Mongi- 2015 [email protected]
Laboratorio de Parasitología- HNC
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Pte sintomático + clínica + epidemiología: DIAGNOSTICO PRESUNTIVO
Laboratorio + muestra adecuada + método apropiado: DIAGNOSTICO CERTERO
¿Cuando sospechar de infecciones parasitarias en episodios diarreicos?¿Cuando sospechar de infecciones parasitarias en episodios diarreicos?
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Etapas del diagnósticoEtapas del diagnóstico
Etapa pre-analítica Etapa analítica Etapa post-analítica
• Datos del paciente • Indicaciones: Recolectar
materia fecal en recipiente limpio y seco, NO del inodoro, NO contaminar con orina
• Muestra rotulada
• Identificación de trofozoítos, quistes, larvas, huevos y adultos
• Análisis macro y microscópico, método de concentración y cultivo
• Validación e informe de los resultados
• Observaciones y sugerencias
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Toma de muestraToma de muestra
Numero de muestras y frecuencia de recolección
-Muestra fresca: 1 muestra remitida antes de las 2 horas de recolección
CONCENTRAR!!!!CONCENTRAR!!!!
-Muestra conservada: 4 muestras, 1/día, días consecutivos en líquido conservante
IDEAL: 1 muestra fresca/ día Mínimo 4 muestras
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Kit comercial Solución conservante
preparada
Ventaja Mayor volumen de muestra a analizar Relación conservante: muestra 3:1
Por qué muestra conservada? Comodidad para el paciente Comodidad para el analista
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ConservantesConservantes
Ventajas Desventajas
• Preserva morfología de trofozoítos, quistes, huevos y larvas
• Apropiado para algunos métodos de concentración
•Interfiere en la extracción de ADN: técnicas de biología molecular (PCR) •No permite el cultivo ni desarrollo de estadios in vitro
SAF (acetato de sodio-ácido acético- formaldheído)
Solución salina o acuosa formolada (5 o 10 %)
PVA (alcohol polivinílico)- Schaudinn
Solución de dicromato de potasio (2,5%)
Merthiolate-yodo-formaldehído (MIF)
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Procesamiento de la muestraProcesamiento de la muestra
Flotación Faust Willis Sheather
Sedimentación Espontánea
Centrifugación Ritchie
Cultivo de larvas Baermann
Método directo Métodos de concentración
Macroscópico
Microscópico
Coloraciones húmedas
Coloraciones permanentes
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Solución fisiológica (SF) movilidad MUESTRA FRESCA!!
Coloraciones: HúmedasColoraciones: Húmedas
* Lugol * Tionina * Azul de metileno
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Coloraciones: PermanentesColoraciones: Permanentes
Coccidios Protozoos Microsporidios
Kinyoun +++ - -
Ziehl-Neelsen (ZN) + - -
Safranina + - -
Tricrómica de Wheatley (TCR)
+/- +++ +
Hematoxilina Férrica (HF) - +++ -
Weber - +/- +++
Gram Cromotropo (GC) - +/- +++
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Coloraciones: PermanentesColoraciones: Permanentes
Coccidios Protozoos Microsporidios
Kinyoun +++ - -
Ziehl-Neelsen (ZN) + - -
Safranina + - -
Tricrómica de Wheatley (TCR)
+/- +++ +
Hematoxilina Férrica (HF) - +++ -
Weber - +/- +++
Gram Cromotropo (GC) - +/- +++
Si Si no se cuenta con no se cuenta con alguna de alguna de estas estas coloraciones y/o persisten dudas en el resultado coloraciones y/o persisten dudas en el resultado
DERIVAR A CENTROS DE REFERENCIADERIVAR A CENTROS DE REFERENCIA
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Métodos Métodos de concentraciónde concentración
Centrifugación- Flotación
Flotación
Centrifugación
Sedimentación espontánea (SE)
Cultivo de larvas: Baermann
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Métodos de concentraciónMétodos de concentración
Método de Telemann modificado/ Ritchie/ FAE
Objetivo: Recuperar quistes, huevos
y larvas
Coloraciones:
* Húmedas: Lugol
* Permanentes: TCR, Kinyoun,
Safranina, GC
Solventes
SAF
Sedimento
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Métodos de concentraciónMétodos de concentración
Objetivo: Recuperar trofozoítos, quistes y huevos
Coloraciones:
*Húmedas: Lugol
*Permanentes: TCR, Kinyoun, Safranina, GC
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EVALUACIÓN DE UNA TÉCNICA DE SEDIMENTACIÓN ESPONTÁNEA Y DEL EXÁMEN
DIRECTO COMO MÉTODOS PARASITOLÓGICOS APLICABLES EN LABORATORIOS NO
ESPECIALIZADOS
Laconte L, Mongi F, Casero R.
Departamento de Parasitología. Hospital Nacional de Clínicas, UNC
Conclusiones:
La técnica de sedimentación espontánea (SE) demostró valores aceptables de Sensibilidad y Especificidad como método de identificación tanto para helmintos como protozoos.
Nuestros resultados indican que la técnica de SE es un método válido, sencillo y económico para concentración e identificación de parásitos si no se contara con otras técnicas para diagnóstico parasitológico
Método sencillo Buena sensibilidad y especificidad
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Otros métodos de concentraciónOtros métodos de concentración
Sheather (sacarosa) Willis/Faust (Na Cl/ ZnSO4)
Objetivo: concentración de ooquistes de coccidios
concentración de huevos de bajo peso específico/ no operculados
Observación: En fresco
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Otros métodos de concentraciónOtros métodos de concentración
Objetivo: recuperación de larvas
rhabditiformes
de Strongyloides sp
Cultivo de larvas
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Cultivo Cultivo y aislamiento de y aislamiento de larvas:larvas:
Rabhditoides
Método Harada- Mori
Filariformes (F1) (Strongyloides stercoralis)
Objetivo: transformación de larvas
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Objetivo: evidenciar larvas viables de S stercoralis y Uncinarias
Cultivo en Placa de agar (CPA)
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RecomendacionesRecomendaciones
Métodos sencillos y de bajo costoMétodos sencillos y de bajo costo
Técnica de FAE (Formol-acetato de etilo)
Sedimentación espontánea
Técnica de Willis
Técnica de Sheather
Métodos específicos Métodos específicos
Cultivo de Baermann
Harada Mori
Cultivo en Placa de Agar
DERIVAR Muestra fresca!!!
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Fresco con Lugol
Blastocystis sp
Coloración Tricromica de Wheatley
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Fresco con Lugol Fresco con Lugol Fresco con Tionina
Entamoeba histolytica/ dispar/ moshkovskii/ dysenteriae
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Coloración Tricromica de Wheatley
Entamoeba histolytica/ dispar/ moshkovskii/ dysenteriae
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Fresco con AM
Dientamoeba fragilis
Fresco con SF Fresco con Lugol
Col Tricromica de Wheatley
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Giardia lamblia
Fresco con Lugol
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Balantidium coli
Fresco con Lugol Fresco con SF
ARTEFACTO
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Fresco con SF
Cryptosporidium parvum
Coloración Kinyoun
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Fresco sin Lugol
Fresco con Lugol
Cystoisospora belli
Coloración Kinyoun
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Coloración: Kinyoun
Cyclospora cayetanensis
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Microporidios
Coloración Gram Cromotropo
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Strongyloides stercoralis
Fresco con SF
Fresco con SF
Fresco con Lugol
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