diagnóstico laboratorial de tuberculosis
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Diagnóstico laboratorial TB
Mariano Alarcón ParraMR4 INFECTOLOGIA
HNERM – Noviembre 2015
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¿POR QUÉ ES IMPORTANTE EL DX TBC?
• Un billón de individuos infectados con TBC.• 1.5 a 2 millones desarrollan enfermedad.• 1/5 infectado con HIV.• 250 000 TBC MDR entre 2010 a 2012.• 20 000 a 10000 XDR.
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Bacteriología TBC• MTB complex• Forma «coma»/Largo de 2 a 4 micras. • Transmisión por gotas de Pffuger.• Pared celular rica en lípidos.• No toxinas, no flagelo.• Aeróbico.• Único reservorio: ser humano.
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Patogenia de MTB
• TBC lenta replicación en condiciones adversas. ALTA QUIESCENCIA.
• Cantidad de inóculo, virulencia y desarrollo de inmunidad celular TH1.
• Complejo de Ghon : va a calcificarse (primaria)/o diseminación (secundaria)
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• Lento diagnóstico
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Talón de Aquiles de pruebas dx de TBC
Pacientes con baciloscopía negativa.
Pacientes viviendo con VIHPrueba diagnóstica inicial.
TB extrapulmonar
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Relación entre poblaciones bacilares y pruebas dx
0 1 10 100 1000 10.000 100.000 1.000.000AFB per ml of sputum
X-Ray and clinical (15%)
Poor microscopy (30%)
Excellent microscopy (65%)
Culture, PCR (85%)
UNION INTERNACIONAL CONTRA LA UNION INTERNACIONAL CONTRA LA TUBERCULOSISTUBERCULOSIS
Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Prof. José A. Caminero
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Baciloscopia Baciloscopia DirectaDirecta
- Técnica de Elección por:- Técnica de Elección por:
- Rapidez- Rapidez- Sencillez- Sencillez- Bajo Costo- Bajo Costo- Importancia Salud Pública:- Importancia Salud Pública:
¡ CONTAGIOSIDAD !¡ CONTAGIOSIDAD !
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Tomar en cuenta falsos positivos.Tomar en cuenta correlación
cultivo + / Bk –Operador dependiente :
promedio ver 100 campos 5 a 10 minutos.
BK en muestras extrapulmonares
Un Un BK+ durante el TtoBK+ durante el Tto puede ser M.TB vivo, Muerto u otra Micob. puede ser M.TB vivo, Muerto u otra Micob.
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• ¿Esputos seriados?: uno en el lugar de detección y el otro a la mañana siguiente.
• ¿Concentrado o directo? • Microscopía convencional es la más usada y la
más económica.• LED vs microscopía fluorescente, menos
contaminación y es la recomendada.
Baciloscopia DirectaBaciloscopia Directa
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CULTIVOS
• Método fenotípico vs Genotípico:• Morfología / color / pruebas bioquímicas
(LJ /MIDDLEBROOK / GRIESS )• Detección de proteínas ribosomales /
Detección directa de ADN bacteriano
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Generalidades de medios de cultivo • Contaminación.
• Transporte.• Uso de radiación.• Posibilidad de estudiar
sensibilidad.• Demora en resultados
En general permiten realizar pruebas de sensibilidad DEFINITIVAS
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Técnicas de amplificación de AN (NAA)
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GeneXpert/RIF
• La prueba depende de la prevalencia de la enfermedad. Si la resistencia a la rifampicina es baja y la población MR es baja, el VPP cae.
• Monoresistencia a R menor a 5% , es alto predictor de TBC MDR.
OMS : repetir el Xpert cuando haya alta sospecha de TB MDR, y población de riesgo.
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7 bases estudiadasIncluidos 27 estudios y 6026
muestrasBasado en correlación con
CULTIVO SÓLIDO como gold standard
Resistencia a R: DSTHeterogenicidad : dx TBC ,
variación en método de cultivo , no uniformidad en procesar las
muestras.
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8 Centros de Italia1493 muestrasRetrospectivo
238 + MTB CULTIVO / 38 con cultivo - / Xpert +
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La resistencia a la R , predice MDR
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MIC de antiTB
UNION INTERNACIONAL CONTRA LA UNION INTERNACIONAL CONTRA LA TUBERCULOSISTUBERCULOSIS
Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Prof. José A. Caminero
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Mecanismos de resistencia a drogas
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Genes frecuentemente mutados en la TBC resistente / MDR
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Informa sobre mutaciones a KatG
e inhA
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Genetic Mutations Associated with Isoniazid Resistance in Mycobacterium tuberculosis: A Systematic Review.Seifert M, et al.. PLoS ONE 2015; 10(3): e0119628. doi:10.1371/journal.pone.0119628
UNION INTERNACIONAL UNION INTERNACIONAL CONTRA LA TUBERCULOSISCONTRA LA TUBERCULOSIS
Y ENFERMEDADES Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)RESPIRATORIAS (La Union)
Prof. José A. Caminero
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• LPA’s vs DST : sensibilidad 97% , especificidad 99% para detectar resistencia R o asociada a H.
• No reemplazan a pruebas de sensibilidad convencional especialmente en XDR.
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IGRAS vs InmunoSPOT HIV : LT diagnosis
• La evidencia actual sugiere similar performance. • Dado el performance subóptimo: usarlo depende de
las guías de manejo actuales.• IGRAs mayor especificidad en lugares con baja
incidencia de TBC y menor exposición a la misma.
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Costo efectividad de los métodos dx para TBC
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