UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE GUERREROUNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICO
BIOLÓGICAS
PROGRAMA EDUCATIVO QUÍMICO BIÓLOGO PARASITÓLOGO
Manual de procedimientos
analíticos del área de
parasitología
P R E S E N T A :
Dra. ITZEL ARIANA BELLO GAMA
Revisado por:
Dr. Neftalí Jordy Juárez Martínez
Chilpancingo, Gro. 2015
Tabla de contenido
1. Examen coprológico.............................................................................................................1
1.1. Fundamento..................................................................................................................1
1.2. Preparación...................................................................................................................1
1.2.1. Indicaciones al paciente..........................................................................................1
1.2.2. Obtención de la muestra de excremento................................................................2
1.2.3. Recolecta de la muestra.........................................................................................2
1.2.4. Registro por el laboratorio.......................................................................................2
1.2.5. Rechazo de la muestra por el laboratorio...............................................................3
1.2.6. Manejo de la muestra.............................................................................................3
1.3. Procedimientos..............................................................................................................4
1.3.1. Examen macroscópico de la materia fecal.............................................................4
1.3.2. Examen microscópico de la materia fecal...............................................................4
1.3.3. Examen químico de la materia fecal.......................................................................6
1.4. Resultados.....................................................................................................................7
1.4.1. Examen macroscópico de la materia fecal.............................................................7
1.4.2. Examen microscópico de la materia fecal...............................................................8
1.4.3. Examen químico de la materia fecal.......................................................................8
1.5. Valores o intervalos de referencia.................................................................................9
1.5.1. Examen macroscópico de la materia fecal.............................................................9
1.5.2. Examen microscópico de la materia fecal.............................................................11
1.5.3. Examen químico de la materia fecal.....................................................................13
1.6. Bibliografía...................................................................................................................15
2. Búsqueda de Tricomonas..................................................................................................16
3. Búsqueda de Cryptosporidium...........................................................................................16
I
4. Elisa para Hidatidosis.........................................................................................................16
5. Pneumocystis jiroveci.........................................................................................................16
6. Sangre oculta en deposiciones..........................................................................................16
7. Sudán III.............................................................................................................................16
8. Test de Graham.................................................................................................................16
II
Manual de procedimientos analíticos del área de
parasitología
Código: APL-TM-MA-002
Edición: 1
Fecha de edición: 10/10/15
Vigencia: 2015-2019
Páginas: 16
1. Examen coprológico
1.1. Fundamento
El examen químico funcional de la materia fecal (examen coprológico) se refiere al estudio de
las características físicas, organolépticas y químicas, las cuales cuando están alteradas
pueden estar asociadas a alguna patología del tracto gastrointestinal. Este examen analiza
además las características microscópicas de la materia fecal, siendo aplicado a la
determinación de las funciones intestinales (Diaz Chiguer, 2009).
1.2. Preparación
1.2.1. Indicaciones al paciente
Tres días antes de la toma de muestra el paciente deberá tener una dieta que incluya los
diferentes grupos alimenticios, con porciones iguales de carne, vegetales y carbohidratos.
Deberá evitar consumir los siguientes alimentos: a) espinacas, b) moronga, c) carnes rojas, d)
melón, e) aspirina, f) levadura, g) rábanos, h) vitamina “C”, i) brócoli y, j) yogurt. Si no está
indicado por el médico, evitar medicamentos como: ibuprofeno, pepto bismol, kaopectate,
antibióticos, bario, bismuto, hierro o magnesio (Diaz Chiguer, 2009).
1Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
Revisado por:Firma: Nombre: Dr. Neftalí Jordy Juárez MartínezCargo: Responsable sanitarioFecha: 09/11/2015
Autorizado por:Firma: Nombre: Dra. Stephany Lescieur BlancoCargo: Jefe de laboratorio clínicoFecha: 29/11/2015
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Edición: 1
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1.2.2. Obtención de la muestra de excremento
Obtener la materia fecal sobre un recipiente seco y limpio por ejemplo: a) bacinica, b) retrete,
al cual se le ha eliminado el agua (Sugerencia: cerrar la llave de paso de agua que alimenta al
escusado, bajar la palanca para que se vacíe el agua). Otra alternativa es depositar la materia
fecal en un periódico, papel estraza o un cartón.
La muestra debe ser el resultado de una evacuación espontánea, es decir, sin ayuda de
laxantes y/o estímulos mecánicos para favorecer la evacuación. De preferencia, la muestra
deberá ser la primera del día, obtenerla por la mañana y trasladarla al laboratorio lo antes
posible (Diaz Chiguer, 2009).
1.2.3. Recolecta de la muestra
Con ayuda de una cuchara de plástico o de un abatelenguas de madera, trasladarla materia
fecal al frasco colector. Llenar hasta la cuarta parte del frasco. El frasco colector deberá ser
de boca ancha, limpio, no necesariamente estéril, transparente, con tapa de rosca y hermético
(Diaz Chiguer, 2009).
1.2.4. Registro por el laboratorio
2Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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Una vez recibida la muestra en el laboratorio, se deberá cerciorar que el frasco contenga la
cantidad de muestra necesaria, el frasco debe ser rotulado con una pequeña etiqueta del
paciente. La persona que recibe la muestra deberá iniciar el llenado de la hoja de registro del
informe, anotando la siguiente información: Nombre del paciente, edad, fecha, diagnostico
presuntivo (si está registrada en la solicitud del examen que escribió el médico). Anotar si
siguió la dieta recomendada, y si está bajo un régimen de medicamentos (Diaz Chiguer,
2009).
1.2.5. Rechazo de la muestra por el laboratorio
- Demora en el envío al laboratorio.
- Muestra sin rotular o mal rotulada.
- Muestra que presente evidencia de haber sido derramada.
- Recipiente o contenedor inapropiado.
- Muestra con contaminación (hongos).
- Muestra en cantidad inadecuada.
- Muestras de personas que reciben tratamientos médicos.
En caso de rechazar una muestra se debe de explicar al solicitante las observaciones y
motivos del rechazo con la finalidad de obtener una nueva muestra (Diaz Chiguer, 2009).
3Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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1.2.6. Manejo de la muestra
El analista debe usar bata, guantes y cubrebocas como medidas mínimas de seguridad, ya
que son muestras frescas sin fijador alguno, por lo que pueden ser fuente de microorganismos
infecciosos (Diaz Chiguer, 2009).
1.3. Procedimientos
1.3.1. Examen macroscópico de la materia fecal
El color de la muestra se observa a través del frasco transparente y el olor se aprecia
destapando el frasco. Posteriormente la muestra se manipula con una varilla de vidrio o
aplicador para apreciar grosso modo la consistencia y la presencia de elementos como sangre
macroscópica, moco, pus y parásitos (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.2. Examen microscópico de la materia fecal
Se lleva a cabo colocando una gota de NaCl 0.85% en el extremo izquierdo de un
portaobjetos y una gota de lugol en el lado derecho. Con el extremo de un aplicador de
madera o carilla de vidrio se colecta una muestra de la materia fecal (2 mg aproximadamente)
4Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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mezclando hasta homogeneizar. Se coloca un cubreobjetos y se observa minuciosamente al
microscopio (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.2.1. Preparación teñida con Sudán III para la observación de grasas
Con el extremo de un aplicador de madera o varilla de vidrio (con extremos romos) se colecta
una muestra de la materia fecal (2 mg aproximadamente), se coloca en un portaobjetos
extendiéndose, se deja secar al aire y se deposita una gota del colorante, se aplica el calor
suave de una llama durante 15 segundos y se cubre con un cubreobjetos. Posteriormente se
cuenta el número de gotas de grasa por campo 40X (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.2.2. Técnica de azul de Nilo para la observación de grasas, ácidos grasos y jabones
Con el extremo de un aplicador de madera o varilla de vidrio (con extremos romos) se colecta
una muestra de la materia fecal (2 mg aproximadamente), se coloca en un portaobjetos
extendiéndose, se deja secar al aire y se deposita una gota de Sudán III, se aplica a calor
suave de una llama por 15 segundos. Posteriormente se añade una gota de colorante azul de
Nilo. La preparación se cubre con el cubreobjetos y se observa (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.2.3. Técnica de azul de metileno amortiguado (AMA)
5Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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Se toma una pequeña porción de la muestra (de preferencia del moco) y se realiza una
extensión en un portaobjetos. Se le adiciona una gota del colorante AMA y se coloca el
cubreobjetos, se deja reposar 5 min y se observa con objetivo 40x (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.3. Examen químico de la materia fecal
1.3.3.1. pH.
La determinación se lleva a cabo utilizando tiras indicadoras de pH 5.0 – 10.0 (intervalos de
0.5) de Merck. Las mediciones se efectúan con materia fecal fresca (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.3.2. Azúcares reductores.
Se efectúa la técnica de las pastillas reactivas Clinitest de Bayer: Agregar en tubo de
ensayo 10 gotas de agua más un gramo de heces fecales en estudio y mezclar, colocar la
tableta Clinitest en el tubo y observar la reacción completa. No agitar el tubo de la reacción
hasta 15 segundos después de que haya finalizado la ebullición. Al finalizar el periodo de
15 segundos de espera, agitando el tubo suavemente, comparar el color obtenido con la
tabla de referencia (Diaz Chiguer, 2009).
1.3.3.3. Sangre oculta.
6Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
Revisado por:Firma: Nombre: Dr. Neftalí Jordy Juárez MartínezCargo: Responsable sanitarioFecha: 09/11/2015
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Agregar un gramo de heces fecales en estudio en 1 ml de diluyente de Turk (ácido acético
con azul de metileno) en tubo de ensayo y mezclar, añadir unas pizcas de sales de
bencidina y posteriormente agregar 1 ml de peróxido de hidrógeno. Observar la reacción
(Diaz Chiguer, 2009).
1.4. Resultados
1.4.1. Examen macroscópico de la materia fecal
1.4.1.1. Color:
Normal: color marrón. Los cambios del color de las heces pueden deberse a la dieta o ser
indicadores de obstrucción biliar o hemorragia gastrointestinal.
1.4.1.2. Olor:
El olor fecal característico (Sui generis).
1.4.1.3. Consistencia:
Puede ser acuosa o liquida, blanda, pastosa o semiformada, formada y dura.
1.4.1.4. Moco:
Positivo o negativo.
7Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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1.4.1.5. Sangre:
Positivo o negativo.
1.4.1.6. Parásitos macroscópicos:
Presentes o ausentes.
1.4.2. Examen microscópico de la materia fecal
- Negativo: Ausencia de parásitos microscópicos
- Positivo: Presencia de parásitos microscópicos por campo:
Género y especie del parásito
Estadio vital
Aumento utilizado
Estructuras observadas: Escasos, moderados, abundantes, muy abundantes.
- Grasas, ácidos grasos, jabones: Ausencia o presencia: escasas, moderadas,
abundantes, muy abundantes.
- Leucocitos fecales: Se observa celularidad o no se observa celularidad.
1.4.3. Examen químico de la materia fecal
1.4.3.1. pH
8Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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- Observar cambio de coloración en la tira reactiva, comparar con la tabla de colores
anexada en el empaque de la tira.
1.4.3.2. Azúcares reductores
- Negativo: cambio a color azul
- Positivo: cambio de color verde a naranja, reportar como este indicado en la tabla de
colores
1.4.3.3. Sangre oculta
- Positivo: tornando un color azul
- Negativo: sin cambio alguno
1.5. Valores o intervalos de referencia
1.5.1. Examen macroscópico de la materia fecal
1.5.1.1. Color:
Normalmente y con dieta mixta, la deposición es de color café pardo o café marrón más o
menos oscuro en los adultos, en niños debido a la dieta láctea es amarillenta, con dieta
carnea se hace marrón oscuro. Una alimentación rica en verduras, tiñe las heces de color
verdoso, mientras que si preponderan papas o pan las heces se aclaran a marron
9Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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amarillento (Gennaro, 2003). El color puede asociarse, además de con la alimentación, a
indicadores de obstrucción biliar o hemorragias, la siguiente tabla menciona los colores que
se relacionan con este tipo de alteraciones:
Color Significado
Amarillo Pacientes con esteatorrea o malabsorción
Arcilloso La bilis no penetra en el intestino
Rojo o negro Dosis excesiva de anticoagulantes, fenibutazona o salicilatos que
producen hemorragias en el tracto gastrointestinal.
Sustancias como: sales de bismuto y de hierro (heces negras),
tetraciclinas (heces rojas).
Blanquecino Lo producen los antiácidos
Anaranjado Lo produce la sustancia piridio
(Gennaro, 2003)
1.5.1.2. Olor:
El olor fecal característico (Sui generis), se hace fétido en todos los procesos que cursan
con putrefacción de las proteínas ingeridas o endógenas, dado por productos aromáticos
originados por la acción de microorganismo de fermentación o putrefacción que actúan
sobre carbohidratos y proteínas como el Indol (Rivas Alarcón, 2015).
10Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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1.5.1.3. Consistencia:
Normalmente y con dieta mixta, la deposición debo ser sólida y formada, es decir cilíndrica
y consiste para mantener esta forma después de ser excretada (Strasinger & Di Lorenzo ,
2010).
1.5.1.4. Moco:
Si se encuentra finamente dividido y mezclado entre las heces, dándole un color brillante,
entonces procede del intestino delgado a diferencia del moco en copos visibles tiene un
origen más bajo y sobre todo el que se observa en tira tiene un origen en el colon distal
(Rivas Alarcón, 2015).
1.5.1.5. Sangre:
Su presencia es anormal debida a una acción traumática por algún agente infeccioso. Se
puede encontrar fresca dándole una coloración rojo brillante cuando los daños son en el
colon o bien encontrarse metabolizada, proporcionándole a las heces un color rojo oscuro
o negruzco cuando los daños son a nivel de intestino delgado (Rivas Alarcón, 2015).
11Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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1.5.1.6. Parásitos macroscópicos:
La presencia de parásitos en muestras fecales es anormal, lo cual indica que el paciente
está atravesando por una infección parasitaria (Rivas Alarcón, 2015).
1.5.2. Examen microscópico de la materia fecal
- En una muestra fecal normalmente no debe de existir la presencia de parásitos tanto
macroscópicamente como microscópicamente (Rivas Alarcón, 2015). Los parásitos
observados por campo y la interpretación es la siguiente:
0 – 5 Escaso
5 – 10 Moderado
10 - 20 Abundante
Más de 20 Muy abundante
(Rivas Alarcón, 2015)
- Grasas:
Grasas neutras: < de 50 glóbulos de grasa por campo en 40x se reporta como normal.
Estas se observan como gotas de color naranja o rojo (Rivas Alarcón, 2015).
12Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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Grasas acidas: < 100 glóbulos de grasa por campo en 40x se reporta como normal. Se
observan como escamas que se tiñen ligeramente, o cristales en forma de agujas largas y
finas, que no se tiñen (Rivas Alarcón, 2015).
- Ácidos grasos: Valor normal 5.6% de sustancia total seca.
- Jabones: Valor normal 4.6% de sustancia total seca. Se observan como escamas o
cristales que no se tiñen.
- Leucocitos fecales: Si hay mayor cantidad de leucocitos, de 10-20 por campo,
principalmente polimorfonucleares, es indicativo de pus y la infección es causada por
bacterias, si hay mayor cantidad de mononucleares la infección es de tipo viral. Menos de
10 leucocitos por campo es sugestivo de amibiasis (Rivas Alarcón, 2015).
1.5.3. Examen químico de la materia fecal
1.5.3.1. pH
13Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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Las heces normales son neutras o ligeramente alcalinas entre 6.8 y 7.2, pero la reacción
depende de múltiples factores, dietéticos y endógenos, por lo que se pueden presentar
variaciones, tanto en la salud como en la enfermedad (Rivas Alarcón, 2015).
Ilustración 1. Papel indicador universal pH 0-14 Merck.
1.5.3.2. Azúcares reductores:
El valor normal es <2 mg/g o 0 gr/dl (Rivas Alarcón, 2015).
14Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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Edición: 1
Fecha de edición: 10/10/15
Vigencia: 2015-2019
Páginas: 16
1.5.3.3. Sangre oculta:
Valor normal negativo (Rivas Alarcón, 2015).
1.6. Bibliografía
Diaz Chiguer, D. L., 2009. Estandarización del análisis químicofuncional (examen coprológico)
de la materia fecal, México: Instituto Politécnico Nacional, Mastría en Ciencias
Quimicobiologicas.
Gennaro, A. R., 2003. Remington Farmacia. Veinteava ed. Buenos Aires, Argentina: Médica
Panamericana.
Rivas Alarcón, M. A. A., 2015. Manual de prácticas de parasitología, Chilpancingo, Guerrero:
Universidad Autónoma de Guerrero.
15Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
Revisado por:Firma: Nombre: Dr. Neftalí Jordy Juárez MartínezCargo: Responsable sanitarioFecha: 09/11/2015
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Edición: 1
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Vigencia: 2015-2019
Páginas: 16
Strasinger, S. K. & Di Lorenzo , M. S., 2010. Análisis de orina y de los liquídos corporales.
Quinta ed. Buenos Aires, Argentina: Médica Panamericana.
2. Búsqueda de Tricomonas
3. Búsqueda de Cryptosporidium
4. Elisa para Hidatidosis
5. Pneumocystis jiroveci
6. Sangre oculta en deposiciones
7. Sudán III
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16Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015
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