manual de procedimientos analíticos de parasitología coprológico. iabg 705 copia

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE GUERREROUNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICO

BIOLÓGICAS

PROGRAMA EDUCATIVO QUÍMICO BIÓLOGO PARASITÓLOGO

Manual de procedimientos

analíticos del área de

parasitología

P R E S E N T A :

Dra. ITZEL ARIANA BELLO GAMA

Revisado por:

Dr. Neftalí Jordy Juárez Martínez

Chilpancingo, Gro. 2015

Tabla de contenido

1. Examen coprológico.............................................................................................................1

1.1. Fundamento..................................................................................................................1

1.2. Preparación...................................................................................................................1

1.2.1. Indicaciones al paciente..........................................................................................1

1.2.2. Obtención de la muestra de excremento................................................................2

1.2.3. Recolecta de la muestra.........................................................................................2

1.2.4. Registro por el laboratorio.......................................................................................2

1.2.5. Rechazo de la muestra por el laboratorio...............................................................3

1.2.6. Manejo de la muestra.............................................................................................3

1.3. Procedimientos..............................................................................................................4

1.3.1. Examen macroscópico de la materia fecal.............................................................4

1.3.2. Examen microscópico de la materia fecal...............................................................4

1.3.3. Examen químico de la materia fecal.......................................................................6

1.4. Resultados.....................................................................................................................7


1.4.2. Examen microscópico de la materia fecal...............................................................8

1.4.3. Examen químico de la materia fecal.......................................................................8

1.5. Valores o intervalos de referencia.................................................................................9


1.5.2. Examen microscópico de la materia fecal.............................................................11

1.5.3. Examen químico de la materia fecal.....................................................................13

1.6. Bibliografía...................................................................................................................15

2. Búsqueda de Tricomonas..................................................................................................16

3. Búsqueda de Cryptosporidium...........................................................................................16

I

4. Elisa para Hidatidosis.........................................................................................................16

5. Pneumocystis jiroveci.........................................................................................................16

6. Sangre oculta en deposiciones..........................................................................................16

7. Sudán III.............................................................................................................................16

8. Test de Graham.................................................................................................................16

II

Manual de procedimientos analíticos del área de

parasitología

Código: APL-TM-MA-002

Edición: 1

Fecha de edición: 10/10/15

Vigencia: 2015-2019

Páginas: 16

1. Examen coprológico

1.1. Fundamento

El examen químico funcional de la materia fecal (examen coprológico) se refiere al estudio de

las características físicas, organolépticas y químicas, las cuales cuando están alteradas

pueden estar asociadas a alguna patología del tracto gastrointestinal. Este examen analiza

además las características microscópicas de la materia fecal, siendo aplicado a la

determinación de las funciones intestinales (Diaz Chiguer, 2009).

1.2. Preparación

1.2.1. Indicaciones al paciente

Tres días antes de la toma de muestra el paciente deberá tener una dieta que incluya los

diferentes grupos alimenticios, con porciones iguales de carne, vegetales y carbohidratos.

Deberá evitar consumir los siguientes alimentos: a) espinacas, b) moronga, c) carnes rojas, d)

melón, e) aspirina, f) levadura, g) rábanos, h) vitamina “C”, i) brócoli y, j) yogurt. Si no está

indicado por el médico, evitar medicamentos como: ibuprofeno, pepto bismol, kaopectate,

antibióticos, bario, bismuto, hierro o magnesio (Diaz Chiguer, 2009).

1Elaborado por:Firma: Nombre: Dra. Itzel Ariana Bello GamaCargo: Encargado del área de parasitologíaFecha: 11/10/2015

Revisado por:Firma: Nombre: Dr. Neftalí Jordy Juárez MartínezCargo: Responsable sanitarioFecha: 09/11/2015

Autorizado por:Firma: Nombre: Dra. Stephany Lescieur BlancoCargo: Jefe de laboratorio clínicoFecha: 29/11/2015


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1.2.2. Obtención de la muestra de excremento

Obtener la materia fecal sobre un recipiente seco y limpio por ejemplo: a) bacinica, b) retrete,

al cual se le ha eliminado el agua (Sugerencia: cerrar la llave de paso de agua que alimenta al

escusado, bajar la palanca para que se vacíe el agua). Otra alternativa es depositar la materia

fecal en un periódico, papel estraza o un cartón.

La muestra debe ser el resultado de una evacuación espontánea, es decir, sin ayuda de

laxantes y/o estímulos mecánicos para favorecer la evacuación. De preferencia, la muestra

deberá ser la primera del día, obtenerla por la mañana y trasladarla al laboratorio lo antes

posible (Diaz Chiguer, 2009).

1.2.3. Recolecta de la muestra

Con ayuda de una cuchara de plástico o de un abatelenguas de madera, trasladarla materia

fecal al frasco colector. Llenar hasta la cuarta parte del frasco. El frasco colector deberá ser

de boca ancha, limpio, no necesariamente estéril, transparente, con tapa de rosca y hermético

(Diaz Chiguer, 2009).

1.2.4. Registro por el laboratorio





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Una vez recibida la muestra en el laboratorio, se deberá cerciorar que el frasco contenga la

cantidad de muestra necesaria, el frasco debe ser rotulado con una pequeña etiqueta del

paciente. La persona que recibe la muestra deberá iniciar el llenado de la hoja de registro del

informe, anotando la siguiente información: Nombre del paciente, edad, fecha, diagnostico

presuntivo (si está registrada en la solicitud del examen que escribió el médico). Anotar si

siguió la dieta recomendada, y si está bajo un régimen de medicamentos (Diaz Chiguer,

2009).

1.2.5. Rechazo de la muestra por el laboratorio

- Demora en el envío al laboratorio.

- Muestra sin rotular o mal rotulada.

- Muestra que presente evidencia de haber sido derramada.

- Recipiente o contenedor inapropiado.

- Muestra con contaminación (hongos).

- Muestra en cantidad inadecuada.

- Muestras de personas que reciben tratamientos médicos.

En caso de rechazar una muestra se debe de explicar al solicitante las observaciones y

motivos del rechazo con la finalidad de obtener una nueva muestra (Diaz Chiguer, 2009).





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1.2.6. Manejo de la muestra

El analista debe usar bata, guantes y cubrebocas como medidas mínimas de seguridad, ya

que son muestras frescas sin fijador alguno, por lo que pueden ser fuente de microorganismos

infecciosos (Diaz Chiguer, 2009).

1.3. Procedimientos

1.3.1. Examen macroscópico de la materia fecal

El color de la muestra se observa a través del frasco transparente y el olor se aprecia

destapando el frasco. Posteriormente la muestra se manipula con una varilla de vidrio o

aplicador para apreciar grosso modo la consistencia y la presencia de elementos como sangre

macroscópica, moco, pus y parásitos (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.2. Examen microscópico de la materia fecal

Se lleva a cabo colocando una gota de NaCl 0.85% en el extremo izquierdo de un

portaobjetos y una gota de lugol en el lado derecho. Con el extremo de un aplicador de

madera o carilla de vidrio se colecta una muestra de la materia fecal (2 mg aproximadamente)





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mezclando hasta homogeneizar. Se coloca un cubreobjetos y se observa minuciosamente al

microscopio (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.2.1. Preparación teñida con Sudán III para la observación de grasas

Con el extremo de un aplicador de madera o varilla de vidrio (con extremos romos) se colecta

una muestra de la materia fecal (2 mg aproximadamente), se coloca en un portaobjetos

extendiéndose, se deja secar al aire y se deposita una gota del colorante, se aplica el calor

suave de una llama durante 15 segundos y se cubre con un cubreobjetos. Posteriormente se

cuenta el número de gotas de grasa por campo 40X (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.2.2. Técnica de azul de Nilo para la observación de grasas, ácidos grasos y jabones

Con el extremo de un aplicador de madera o varilla de vidrio (con extremos romos) se colecta

una muestra de la materia fecal (2 mg aproximadamente), se coloca en un portaobjetos

extendiéndose, se deja secar al aire y se deposita una gota de Sudán III, se aplica a calor

suave de una llama por 15 segundos. Posteriormente se añade una gota de colorante azul de

Nilo. La preparación se cubre con el cubreobjetos y se observa (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.2.3. Técnica de azul de metileno amortiguado (AMA)





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Se toma una pequeña porción de la muestra (de preferencia del moco) y se realiza una

extensión en un portaobjetos. Se le adiciona una gota del colorante AMA y se coloca el

cubreobjetos, se deja reposar 5 min y se observa con objetivo 40x (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.3. Examen químico de la materia fecal

1.3.3.1. pH.

La determinación se lleva a cabo utilizando tiras indicadoras de pH 5.0 – 10.0 (intervalos de

0.5) de Merck. Las mediciones se efectúan con materia fecal fresca (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.3.2. Azúcares reductores.

Se efectúa la técnica de las pastillas reactivas Clinitest de Bayer: Agregar en tubo de

ensayo 10 gotas de agua más un gramo de heces fecales en estudio y mezclar, colocar la

tableta Clinitest en el tubo y observar la reacción completa. No agitar el tubo de la reacción

hasta 15 segundos después de que haya finalizado la ebullición. Al finalizar el periodo de

15 segundos de espera, agitando el tubo suavemente, comparar el color obtenido con la

tabla de referencia (Diaz Chiguer, 2009).

1.3.3.3. Sangre oculta.





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Agregar un gramo de heces fecales en estudio en 1 ml de diluyente de Turk (ácido acético

con azul de metileno) en tubo de ensayo y mezclar, añadir unas pizcas de sales de

bencidina y posteriormente agregar 1 ml de peróxido de hidrógeno. Observar la reacción

(Diaz Chiguer, 2009).

1.4. Resultados


1.4.1.1. Color:

Normal: color marrón. Los cambios del color de las heces pueden deberse a la dieta o ser

indicadores de obstrucción biliar o hemorragia gastrointestinal.

1.4.1.2. Olor:

El olor fecal característico (Sui generis).

1.4.1.3. Consistencia:

Puede ser acuosa o liquida, blanda, pastosa o semiformada, formada y dura.

1.4.1.4. Moco:

Positivo o negativo.





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1.4.1.5. Sangre:

Positivo o negativo.

1.4.1.6. Parásitos macroscópicos:

Presentes o ausentes.


- Negativo: Ausencia de parásitos microscópicos

- Positivo: Presencia de parásitos microscópicos por campo:

Género y especie del parásito

Estadio vital

Aumento utilizado

Estructuras observadas: Escasos, moderados, abundantes, muy abundantes.

- Grasas, ácidos grasos, jabones: Ausencia o presencia: escasas, moderadas,

abundantes, muy abundantes.

- Leucocitos fecales: Se observa celularidad o no se observa celularidad.


1.4.3.1. pH





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- Observar cambio de coloración en la tira reactiva, comparar con la tabla de colores

anexada en el empaque de la tira.

1.4.3.2. Azúcares reductores

- Negativo: cambio a color azul

- Positivo: cambio de color verde a naranja, reportar como este indicado en la tabla de

colores

1.4.3.3. Sangre oculta

- Positivo: tornando un color azul

- Negativo: sin cambio alguno

1.5. Valores o intervalos de referencia


1.5.1.1. Color:

Normalmente y con dieta mixta, la deposición es de color café pardo o café marrón más o

menos oscuro en los adultos, en niños debido a la dieta láctea es amarillenta, con dieta

carnea se hace marrón oscuro. Una alimentación rica en verduras, tiñe las heces de color

verdoso, mientras que si preponderan papas o pan las heces se aclaran a marron





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amarillento (Gennaro, 2003). El color puede asociarse, además de con la alimentación, a

indicadores de obstrucción biliar o hemorragias, la siguiente tabla menciona los colores que

se relacionan con este tipo de alteraciones:

Color Significado

Amarillo Pacientes con esteatorrea o malabsorción

Arcilloso La bilis no penetra en el intestino

Rojo o negro Dosis excesiva de anticoagulantes, fenibutazona o salicilatos que

producen hemorragias en el tracto gastrointestinal.

Sustancias como: sales de bismuto y de hierro (heces negras),

tetraciclinas (heces rojas).

Blanquecino Lo producen los antiácidos

Anaranjado Lo produce la sustancia piridio

(Gennaro, 2003)

1.5.1.2. Olor:

El olor fecal característico (Sui generis), se hace fétido en todos los procesos que cursan

con putrefacción de las proteínas ingeridas o endógenas, dado por productos aromáticos

originados por la acción de microorganismo de fermentación o putrefacción que actúan

sobre carbohidratos y proteínas como el Indol (Rivas Alarcón, 2015).





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1.5.1.3. Consistencia:

Normalmente y con dieta mixta, la deposición debo ser sólida y formada, es decir cilíndrica

y consiste para mantener esta forma después de ser excretada (Strasinger & Di Lorenzo ,

2010).

1.5.1.4. Moco:

Si se encuentra finamente dividido y mezclado entre las heces, dándole un color brillante,

entonces procede del intestino delgado a diferencia del moco en copos visibles tiene un

origen más bajo y sobre todo el que se observa en tira tiene un origen en el colon distal

(Rivas Alarcón, 2015).

1.5.1.5. Sangre:

Su presencia es anormal debida a una acción traumática por algún agente infeccioso. Se

puede encontrar fresca dándole una coloración rojo brillante cuando los daños son en el

colon o bien encontrarse metabolizada, proporcionándole a las heces un color rojo oscuro

o negruzco cuando los daños son a nivel de intestino delgado (Rivas Alarcón, 2015).





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1.5.1.6. Parásitos macroscópicos:

La presencia de parásitos en muestras fecales es anormal, lo cual indica que el paciente

está atravesando por una infección parasitaria (Rivas Alarcón, 2015).


- En una muestra fecal normalmente no debe de existir la presencia de parásitos tanto

macroscópicamente como microscópicamente (Rivas Alarcón, 2015). Los parásitos

observados por campo y la interpretación es la siguiente:

0 – 5 Escaso

5 – 10 Moderado

10 - 20 Abundante

Más de 20 Muy abundante

(Rivas Alarcón, 2015)

- Grasas:

Grasas neutras: < de 50 glóbulos de grasa por campo en 40x se reporta como normal.

Estas se observan como gotas de color naranja o rojo (Rivas Alarcón, 2015).





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Grasas acidas: < 100 glóbulos de grasa por campo en 40x se reporta como normal. Se

observan como escamas que se tiñen ligeramente, o cristales en forma de agujas largas y

finas, que no se tiñen (Rivas Alarcón, 2015).

- Ácidos grasos: Valor normal 5.6% de sustancia total seca.

- Jabones: Valor normal 4.6% de sustancia total seca. Se observan como escamas o

cristales que no se tiñen.

- Leucocitos fecales: Si hay mayor cantidad de leucocitos, de 10-20 por campo,

principalmente polimorfonucleares, es indicativo de pus y la infección es causada por

bacterias, si hay mayor cantidad de mononucleares la infección es de tipo viral. Menos de

10 leucocitos por campo es sugestivo de amibiasis (Rivas Alarcón, 2015).


1.5.3.1. pH





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Las heces normales son neutras o ligeramente alcalinas entre 6.8 y 7.2, pero la reacción

depende de múltiples factores, dietéticos y endógenos, por lo que se pueden presentar

variaciones, tanto en la salud como en la enfermedad (Rivas Alarcón, 2015).

Ilustración 1. Papel indicador universal pH 0-14 Merck.

1.5.3.2. Azúcares reductores:

El valor normal es <2 mg/g o 0 gr/dl (Rivas Alarcón, 2015).





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1.5.3.3. Sangre oculta:

Valor normal negativo (Rivas Alarcón, 2015).

1.6. Bibliografía

Diaz Chiguer, D. L., 2009. Estandarización del análisis químicofuncional (examen coprológico)

de la materia fecal, México: Instituto Politécnico Nacional, Mastría en Ciencias

Quimicobiologicas.

Gennaro, A. R., 2003. Remington Farmacia. Veinteava ed. Buenos Aires, Argentina: Médica

Panamericana.

Rivas Alarcón, M. A. A., 2015. Manual de prácticas de parasitología, Chilpancingo, Guerrero:

Universidad Autónoma de Guerrero.





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Vigencia: 2015-2019

Páginas: 16

Strasinger, S. K. & Di Lorenzo , M. S., 2010. Análisis de orina y de los liquídos corporales.

Quinta ed. Buenos Aires, Argentina: Médica Panamericana.

2. Búsqueda de Tricomonas

3. Búsqueda de Cryptosporidium

4. Elisa para Hidatidosis

5. Pneumocystis jiroveci

6. Sangre oculta en deposiciones

7. Sudán III

8. Test de Graham




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