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METODOS DE CONSERVACIOMATERIAL VEGETAL (IN V
NEHEMIAS MORALES R
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Mtodos de conservade materia ve!eta vitro).
Metodoo!"a Crioconservacion Medios de c#tivo
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Mtodos $ara a conservacin
!ermo$asma%La estrate!ia a se!#ir $ara a conservacinde !ermo$asma& de$ende de a nat#rae'ade materia ve!eta
D#racin de s# cico de vida% E modo de re$rod#ccin %
E tamao de s#s individ#os%
aternativas de conservacin E tradiciona *anco de semias mantenimiento de +reas de reservas%
GERMO,LASMA or!ano de
sera conservadas& . -#!enerar #na n#eva $anta%
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Los mtodos de conservacin de!ermo$asma
se $#eden dividir enMtodos de
Conservacin in situ
se *asan en a conservacin de as$antas en s#s /+*itats nat#raes e
inc#.en a conservacin en ,ar-#esNacionaes . en Reservas Eco!icas%
Conservacin en s# #!ar de ori!en%
Mtodos Conservacin
se *asan en e mantmateria *io!ico en
semillas& *ancos de ccoecciones de $antasviveros& 0ardines *ot+nic
1#era de #!ar%
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2ancos de semias
Este $rotocoo de conservacim+s recomendado $ara es$e$ro$a!an $or semias . c#.aresisten a desecacin sin -#im$i-#e $rdida de viabilid
a Internationa ,ant GeneticReso#ces Instit#te (I,GRI)recomienda
s# desecacin /asta #n 3456 de /#medad
amacenamiento a *a0astem$erat#ras (4789C)%
VIABILIDAD:estodo asemias& es decir& -#e !erminar en e momeden as condiciones ad
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Ti$os de semias
Semias ortodo:as
semias resisten a desecacin sin -#eeo im$i-#e $rdida de via*iidad%
como $or e0em$o as semias de arro'&tri!o& avena& ta*aco& tomate . ec/#!a%
Semias recacLa es$ecie se $ro$a!a& en a $r+ctic(como a mandioca& $a$a& caa de*ananos) o *ien $or-#e s#s r+$idamente a via*iidad c#ando
$rocesos de desecacin%No se $#eden esterii'ar en a*oracam$o
Las semias de n#merosas es$ec'onas tro$icaes o s#*tro$icaes scate!or"a& como $or e0em$o as d
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Otro mtodo de conservacin de !ermo$ex situ& es mediante e c#tivo in vitro de
Lo -#e evo a c#tivo in vitro
La totipotencia: /a $ermitido $ensar en e esta*ecimientode !ermo$asma #tii'ando e c#tivo de te0idos ve!etaes%
E mantenimiento de os rec#rsos =to!enticos mediante os mc#tivo in vitro se o!ra /aciendo cam*ios en e am*iente de c#desaceerar e crecimiento de as c#as . de os te0idos%
Eobjetivo es a#mentar a m+:imo e $er"odo de trans
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Tcnicas de c#tivo in vitr
*a0o condiciones de ase$sia& de r!anos o
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Mtodos de conservacin in vitro
Limitacin decrecimiento
E crecimiento r+$ido de os c#tivos a tasasnormaes e:i!e mas mano de o*ra . a#menta a$osi*iidad de $erdidas%
Es necesario red#cir a m"nimo a
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Limitaciones de crecimiento%
Temperatura: la reduccin de la temperatura recurso mas comnmente utilizado para discrecimiento de los cultivos.
la mayora de los cultivos in vitro son mantenidos ey 30 C.
A temperaturas mas a!as el crecimiento disminuye
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Limitaciones de crecimiento
Concentracin de nutrimentos: la relacinconcentracin de carohidratos y los comnitro"enados del medio nutritivo puede tener e#elas tasas de crecimiento y mor#o"$nesis en los
vitro. la sacarosa tiene i"ualmente un e#ecto en la viaili
cultivos%
Concentraciones muy altas o muy a!as de eresultan nocivas para la conservacin de te!idos in v
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Limitaciones de crecimiento
Concentracin de reguladores de crecimiento
Cito&uininas 'nhiidores de crecimiento (ac. ascisico)'nteraccionan con la sacarosa y temperatura de reseviailidad de los cultivos in vitro.
Reguladores de crecimiento empleados:
AA Cloruro de #os#onio Acido acetil saliclico.
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Limitaciones de crecimiento
Concentracin osmtica: a imitacin de cr$or ca#sa de a concentracin osmtica se de*e&$osi*emente& $osi*emente a a red#ccin de a*soa!#a . de n#trimentos de medio%
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Tcnicas de c#tivoin vitro
Estas tcnicas deamacenamiento se reai'an
a mediano $a'o& es decir& se*asan en red#cir e
meta*oismo ce#ar . con eored#cir e crecimiento . en;mero de s#*c#tivos d#rantemeses /asta #n ao& sin -#eeo a
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Figura 1: Estrategias para la conservacin de germoplasma de
paraso (Melia azedarach L.), desarrolladas en el Laboratorio de
Cultivo in vitro de Tejidos Vegetales. !"#E. $acultad de
Ciencias %grarias. #E
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Ti$os de conservacin in vitro en*ancos !enticos%
2anco !entico in vitroactivo
Los c#tivos se mantienen encrecimiento ento%
Esta desarroado& en ato !rado& $araas es$ecies de .#ca& $a$a& *atata&*anano . caa de a';car%
Constit#.e #na !ran coeccin detra*a0o%
2anco !entico*+sico%
Los c#tivos son criocons Constit#.e #na coecci
conservada en plazos la
activa o de traa!o.
,ermite #n mantenimienesta*iidad !enot"$ica d!ermo$asma%
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As$ecto
sim$ort
antesde
conservac
ininv
itro.
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Re!eneracin
Es a men#do e $aso -#e imita a a$icacin de tcc#tivo in vitro a es$ecies ve!etaes -#e no se $#ed$ro$a!ar mediante meristemas $re
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Via*iidad
Se de*e reai'ar sistem+ticamente% Las caracter"sticas masim$ortantes -#e se eva;an en e amacenamiento de creciento son
Contaminacin
Senescencia de a /o0a (a ra'n /o0as verdes/o0as m#ert N#mero de *rotes verdes ($ara micro $ro$a!acin adicion N#mero de n#dos via*es (verdes)% ,resencia o a#sencia de ra"ces%
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Control de la viabilidad desemillas
El objetivo: detectar a $rdida de via*iidad d#rante e amacenamie-#e se red#'ca $or de*a0o de #m*ra $ara a re!eneracin (86)% ,araes$ecies ocaes se $#ede esta*ecer #n #m*ra m+s *a0o& como e 5B6
,r#e*as iniciaes de via*iidad de as semias& a =n de conocer a caidamismas& a e:ce$cin de a-#eas m#estras en as -#e se dis$one de $ecantidades de semias& .a -#e stas se dedican en s# totaidad a a re!
as semias se someten a $r#e*as de via*iidad antes de s# amacenamde detectar $ro*emas d#rante e $roceso de m#ti$icacin . acondicio
,ara as $r#e*as de !erminacin se #tii'a $ara cada es$ecie& o !r#$o dos $rotocoos normai'ados de a Asociacin Internaciona de An+isis d(ISTA)%
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Esta*iidad !entica
E materia rec#$erado de a conservacin in vitro dre$resentar !enticamente a materia #tii'ado%
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Sistemati'acin de a in
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CRIOCONSERVACION
La Crioconservacin consta de seis $asos
!" #eleccin del material a crioconservar:
C#ando se reai'a a seeccin de materia a crioco
de*e tener a a*so#ta se!#ridad de -#e a $artir de mo*tienen $antas com$etas% E e:$ante seeccionadde o*0etivo de conservacin . est+ estrec/amente
reacionado con e ti$o de $ro$a!acin de a es$ecie%
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$!"Des%idratacin:
La des/idratacin de e:$ante es #n $aso cr#cia $ade a crioconservacin& .a -#e es necesario eiminara!#a i*re $resente en e te0ido ve!eta& minimi'ando
$osi*es $rdidas $or con!eacin% La des/idratacin $#ede reai'arse en #na c+mara a B9C o en c+mara/ermticamente cerradas%
&!" Aclimatacin:
La acimatacin se $#ede reai'ar en
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'!" Almacenamiento:
De ac#erdo a materia ve!eta -#e se #tiice&se $rese!randes sistemas
4Sistemas Secos: com$rende todos a-#eos te0ido
ve!etaes end!enamente resistentes . toerantes a tem$erat#ras . a a des/idratacin%
4Sistemas Hidratados : son todos a-#eos te0idosno toerantes a as *a0as tem$erat#ras . a a des/idrao -#e se re-#iere #na $roteccin e:!ena%
(!" Descongelamiento ) Re%idratacin:C#ando se desea rec#$erar a e:$ante de nitr!ense $#ede reai'ar #n descon!eamiento r+$ido a 2ao(!eneramente 74> min% a 3B ?B 9C) o en
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*!" Test de viabilidad:
Los test de via*iidad nos $ermiten com$ro*ar as 'onte0ido -#e /an m#erto . c#aes /an so*revivido a