UNIVERSITA’ DI FIRENZEUNIVERSITA’ DI FIRENZECENTRO DI SPETTROMETRIA DI MASSACENTRO DI SPETTROMETRIA DI MASSA
FIORENZA
Università di Firenze
Centro InterdipartimentaleSpettrometria di Massa
V.le G. Pieraccini, 6 - 50139 - Florence - ItalyE-mail: [email protected]
Prof. Gloriano Moneti and Dr.Giuseppe Pieraccini
SPME SPME –– GCGC--MS/MS: ANALISI DI TRICLOROANISOLO (TCA) MS/MS: ANALISI DI TRICLOROANISOLO (TCA) NEL VINO E NEI TAPPINEL VINO E NEI TAPPI
Padova 4 Luglio 2001
Cl
Cl
Cl
OCH3
2,4,6 2,4,6 -- TRICLOROANISOLOTRICLOROANISOLO
TRICLOROANISOLO (TCA): PICCOLO MA POTENTE TRICLOROANISOLO (TCA): PICCOLO MA POTENTE
1 grammo di TCA può1 grammo di TCA puòinquinare circa 10 milioniinquinare circa 10 milioni
di litri di vinodi litri di vino
OH
OH
Cl
Cl
Cl
Cl
Cl
OH
Cl
Cl
Cl
Da dove proviene il TCA ?Da dove proviene il TCA ?
Fenoli naturali
Sughero
Fungicidi, Insetticidi
PCF
degr
adaz
ione
disinfettanti(OCl -)
? TCPTCPMicrorganismi
(penicillum, aspergillum)
Vino Cl
Cl
Cl
OCH3
TCATCA
TricloroanisoloTricloroanisolo
Libreria NIST
STD 2,4,6-TCA
CONFRONTO CON LA LIBRERIACONFRONTO CON LA LIBRERIA
AMD METHODAMD METHOD
130 140 150 160 170 180 190 200 210
100%
175
195
210
100%
147
167
175
195
210m/z
10.8 10.9 11.0 11.1 11.2 11.3 11.4 11.5 minutes
10.0
kCou
nts
12.5
kCou
nts
CID Resonant
CID Non-Resonant
SCELTA TIPO DI COLLISIONESCELTA TIPO DI COLLISIONE
130 140 150 160 170 180 190 200 210 m/z
100%
147
169
175
195
210
SCELTA: CID NONSCELTA: CID NON--RESONANT W5RESONANT W5
3800 Saturn
Metodo SPMEMetodo SPME• 10ml Vino Bianco o Rosso + 2g NaCl agitare in vortex x 15 sec • SPME (100µm PDMS) in spazio di testa per 20 min a 30°C• Iniezione splitless 3 min su Chrompak CP-Sil8-MS • CID su m/z 211.9 in Non-resonant 70 Volt Window 5
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
75
Cou
nts
200
Cou
nts
1.00
kCou
nts
1.5
kCou
ntsCURVA DI TARATURA 1CURVA DI TARATURA 1--100 100 pptppt
1 ppt
10 ppt
50 ppt
100 ppt
Ioni m/z 167+169S/N = 12
CURVA DI CALIBRAZIONECURVA DI CALIBRAZIONE11--100ppt100ppt
r2: 0,996834
y = 23,2 x +105,1
2,4,6-TCA
Peak
Size
Amount (ppt)25 50 75 100
0
500
1000
1500
2000
2500
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
5
15
25
Cou
nts
10
30
50
Cou
nts
50
100
Cou
nts
100
200
Cou
nts
Ions: 167+169Chianti supermercato
Carmignano rosso
San Felice rosso
Pomino bianco
Circa 5 ppt
Circa 10 ppt
RISULTATI SUL VINORISULTATI SUL VINO
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
70
Cou
nts
125
Cou
nts
150
Cou
nts
300
Cou
nts
CURVA DI TARATURA 1CURVA DI TARATURA 1--20 20 pptppt
1 ppt
5 ppt
10 ppt
20 ppt
Ioni m/z 167+169S/N = 10
2,4,6-TCA
r2: 0,995376y = 19,9 x + 54,52
Peak
Size
Amount (ppt)5 10 15 20
0
100
200
300
400
CURVA DI CALIBRAZIONECURVA DI CALIBRAZIONE11--20ppt20ppt
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
5
15
25
Cou
nts
10
30
50
Cou
nts
50
100
Cou
nts
100
200
Cou
nts
Ions: 167+169Chianti supermercato
Carmignano rosso
San Felice rosso
Pomino bianco
4.7 ppt
11.1 ppt
RISULTATI ACCURATI SUL VINORISULTATI ACCURATI SUL VINO
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
5
15
25
Cou
nts
10
30
50
Cou
nts
15
25
Cou
nts
5
15
25
Cou
nts
50
100
Cou
nts
100
200
Cou
nts
Ions: 167+169
Ions: 167+169
Ions: 167+169_2_bottiglia_9000
Ions: 167+169_3_bottiglia_9056
Ions: 167+169_8_sanfelice
Ions: 167+169_9_pomino
Chianti Putto
Piaggia bott. 1945
Piaggia bott. 9000
Piaggia bott. 9056
San Felice rosso
Pomino bianco
4.7 ppt
11.1 ppt
Risultati della misura del TCA nei campioni di vino
Tappo A
Tappo B12 ml Chianti
12 ml Chianti
X 24 h
ANALISI SUL TAPPO ANALISI SUL TAPPO
10 mL + 2g NaCl
10 mL + 2g NaCl
SPME-GC-MS/MS
++ TCA nel tappo A problemi nel vino
++ TCA nel tappo B inquinamento dall’ambiente
+- TCA nel tappo A e B problemi nel tappo
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
05
101520
Counts
010203040
Counts
05
10152025
Counts
0102030
Counts
05
101520
Counts
05
10152025
Counts
Ions: 167+169
RISULTATI SUI “1/2”TAPPIRISULTATI SUI “1/2”TAPPITappo A bott. 1945
Tappo A bott. 9000
Tappo A bott. 9056
Tappo B bott. 1945
Tappo B bott. 9000
Tappo B bott. 9056
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
0
25
50
75
Counts
0
100
200
300
Counts
0255075
100125
Counts
0
10
20
30
40Counts
Ions: 167+169
RISULTATI SUI “1/2”TAPPI DI VINO POSITIVORISULTATI SUI “1/2”TAPPI DI VINO POSITIVO
San Felice Tappo A
San Felice Tappo B
Pomino Tappo A
Pomino Tappo B
3.2 ppt
19.7 ppt
5.5 ppt
N.D.
RISULTATI SUL VINO ED I “1/2”TAPPIRISULTATI SUL VINO ED I “1/2”TAPPI
N.D5.511.1POMINOBIANCO
(problemi nel vino)
19.73.24.7SAN FELICE
ROSSO(problemi nel tappo)
N.D.N.D.N.D.CARMIGNANOROSSO
TAPPO B (esterno)
(ppt)TAPPO A (interno)
(ppt)NEL VINO
(ppt)TIPO
PRECISIONEPRECISIONE
1. CHIANTI + 5ppt TCA 4.1 ppt
2. CHIANTI + 5ppt TCA 3.8 ppt 3.8 pp 0.35 9.3%3. CHIANTI + 5ppt TCA 3.4 ppt
CAMPIONE TROVATI MEDIA SD RSD
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
0
100
250
Cou
nts
150
250
Cou
nts
Ions: 167+169
Ions: 167+169
ACCURATEZZAACCURATEZZASan Felice
San Felice + 10ppt
4.7 ppt
14.6 ppt
CONTROLLO DI QUALITA’CONTROLLO DI QUALITA’TCA NEI TAPPI DI SUGHERO METODO UFFICIALETCA NEI TAPPI DI SUGHERO METODO UFFICIALE
Estrazionecon EsanoAnalisi GC/MS
1 g di sugherograttato1 sughero
circa 4g
CONTROLLO DI QUALITA’CONTROLLO DI QUALITA’TCA NEI TAPPI DI SUGHEROTCA NEI TAPPI DI SUGHERO
Barattolo da 500 mL16 tappi + 350 mL vino
X 24 h 10 mL + 2g NaCl
SPME-GC-MS/MS
10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes
50
100
150
Cou
nts
3.36 ppt
3.36/16 tappi = 0.21 ppt/tappo
RINGRAZIAMENTIRINGRAZIAMENTI
•• Dr. Dr. Urban Frey Urban Frey -- Haute Haute Ecole Valaisanne Ecole Valaisanne (Sion(Sion--CH)CH)
•• Dr.Dr.ssa ssa Francesca Francesca BoscaroBoscaro
•• Gianni GuidaGianni Guida Varian Varian