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ZOONOSI
PROTOZO RIE
TR SMISSIONE
IDRIC
http://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpg
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Le patologie ascrivibili ai parassitideterminano una significativa morbosità
nell’uomo e negli animali e costi economicielevati per la comunità.
Gli stadi infettanti di alcuni parassiti,
escreti con le feci e le urine, possonocontaminare le risorse idriche impiegate ascopi potabili
http://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpg
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Aumento del numero di epidemie correlateal consumo di acqua potabile nei paesi
industrializzati.
Negli ultimi anni maggiore attenzione
verso le problematiche connesse allapresenza di microrganismi patogeni nellerisorse idriche, anche potabilizzate.
http://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpghttp://giardinaggio.efiori.com/media/image/acqua/6_acqua.jpg
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Contaminazione delle riserve idriche
attraverso il dilavamento del terreno in
presenza di escrementi e urine
Principali cause di rischio
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Reflui urbani Reflui zootecnici
Acque di dilavamento artificiali o naturali
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Contaminazione di vegetali con feci e
urine infette
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Epidemie da acque ricreazionali
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Tra le diverse specie di protozoi la cui presenza è
strettamente associata ad acqua ed alimenti
contaminati da materiale fecale di origine umana
e/o animale
Giardia, Cryptosporidium e
Toxoplasma
costituiscono gli agenti di zoonosi più importanti
http://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpghttp://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpghttp://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpg
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Cryptospor id ium e Giardia sono considerati alivello mondiale i più diffusi protozoi idrotrasmessi;
numerose evidenze dell’origine idrica di episodi epidemici
sia in paesi in via di sviluppo che in quelli occidentali
l’infezione da Toxoplasma gondi i è correlata
prevalentemente all’assunzione di alimenti di origine
animale parassitati/contaminati;sono stati appurati anche in questo caso epidemie per
idrotrasmissione.
http://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpghttp://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpghttp://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpg
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Alta resistenza agli agenti chimici e fisici, inparticolare alla clorazione
Elevata sopravvivenza delle forme infettanti
Bassa dose infettante
Dimensione ridotta delle (oo)cisti
Caratteristiche comuni
http://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpghttp://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpghttp://www.marvistavet.com/assets/images/cryptosporidium_oocyst.gifhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/Images/T_gondii_tachy.jpg&imgrefurl=http://www.stanford.edu/group/parasites/ParaSites2006/Toxoplasmosis/index.html&usg=__8hTHEH48295Nk6MUBLzdQTZU_vQ=&h=200&w=200&sz=6&hl=it&start=8&tbnid=TpM5Kkt6vJqBWM:&tbnh=104&tbnw=104&prev=/images?q=toxoplasma&ndsp=18&hl=it&rlz=1T4SKPB_itIT209IT210&sa=Nhttp://www.wildernesstravels.co.uk/pct/images/washington/giardia.jpg
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Epidemie protozoarie in Europa
da Karanis et al ., 2007
UK
Svezia
Germania
Italia
Olanda
Spagna
Francia
81 %
3 %5 %
2 %2%
5 %
3 %
Secondo l’OMS negli ultimi anni circa 1 milione di casi di infezioni da
Giardia e Cryptospor id ium, dovute a contaminazione delle acque, sono
avvenute in Europa
-
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Epidemie protozoarie in Italia
In Italia, i dati sulla diffusione
di questi parassiti
nell’ambiente sono ancoralimitati, poiché Giardia,
Cryptosporidium e
Toxoplasma non hanno
l’obbligo di monitoraggio
-
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Giardia and Cryptospor id ium in acque di superficie in Italia
Region Years Type
of
water
Numberof
samples
GiardiaPositive Mean cyst
samples N/L SD
(%)
Cryptosporidium Positive Mean oocyst
samples N/L SD
(%)
References
Piedmont 1997 river 22 22 (100) 1.16 0.78 22 (100) 0.19 0.08 Carraro et al., 2000
Lazio 2001/02 river 10 10 (100) 80 90 10 (100) 5 4 Briancesco andBonadonna, 2005
Sicily 2003/04 river 7 7 (100) 465 413 7 (100) 9.86 6.79 Di Benedetto et al., 2005
Sicily 2003/04 watersheds 10 1 (10) 0.12 0.36 1 (10) 0.23 0.73 Di Benedetto et al., 2005
Lazio 2001/02 watersheds 4 2 (50) 0.006 0.009 0 0 Briancesco andBonadonna, 2005
Apulia 2000/01 watersheds 27 0 0 4 (14.8) 0.13 0.07 Brandonisio et al., 2004
Apulia 2001/02 watercourse 7 3 (42.9) 0.01 0.02 0 0 Briancesco andBonadonna, 2005
Tuscany 2003/04 watercourse 16 14 (87.5) 2.05 10 (62.5) 0.19 Sacco et al., 2006
Lazio 2001/02 lakes 3 1 (33.3) 0.28 N. I. N. I. Di Cave et al., 2005
N/L: number of oo/cysts per liter; N. I. = not investigated
Giangaspero et al., 2007
-
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Giardia e Cryptospor id ium in acqua di pozzo
Region Years
Number
of
samples
GiardiaPositive Mean cyst
samples N/L SD
(%)
Cryptospor id iumPositive Mean oocyst
samples N/L SD
(%)
References
Lazio 2001/02 14 0 0 0 0 Briancesco and Bonadonna, 2005
Apulia 2004/05 18 2 (11.1) 0.28 0.31 0 0 Lonigro et al ., 2006
Sicily 2003/04 14 2 (14.3) 0.33 0.25 1 (7.1) 1.5 Di Benedetto et al., 2005
Da Giangaspero et al., 2007
Gi di C id i i fl i i It li
-
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Region
Typeof
wastewater
Numberof
samples Giardia
Positive Mean/Range
samples cyst N/L
(%)
Cryptosporidium Positive Mean/Range
Samples oocyst N/L
(%)
References
Piedmont Raw sawage 3 3 (100) 54 3 (100) 4.5 Carraro et al., 2000
Lombardy
Campania
Sardinia
Sicily
Raw sawage 16 16 (100) 2,100 - 42,000 3 (18.75) 107 Cacciò et al., 2000
Lazio Raw sawage 10 10 (100) 800 - 7,000 10 (100) 0.4 - 30 Briancesco and Bonadonna, 2005
Lazio Raw sawage 5 5 (100) 3,500 – 34,000 N. I. N. I. Di Cave et al., 2005
Sicily Primary effluent 8 8 (100) 108,00 8 (100) 702 Di Benedetto et al., 2005
Sicily Secondary effluenta 8 8 (100) 6,160 7 (87.5) 56.9 Di Benedetto et al., 2005
Apulia Secondary effluenta 4 4 (100) 1,800 5 (50) 56 Lonigro et al., 2006
Apulia Tertiary effluent b 4 4 (100) 253 4 (100) 0.26 Brandonisio et al., 2000
Apulia Tertiary effluent c 4 4 (100) 6.65 4 (100) 0.23 Brandonisio et al., 2000
Piedmont
Apulia
Lazio
Lazio
Apulia
Apulia
Tertiary effluent d
Chlorinated effluent
Chlorinated effluent
Chlorinated effluent
Chlorinated effluent
UV-Treated effluent
11
14
6
2
11
10
11 (100)
11 (78.6)
6 (100)
2 (100)
9 (81.82)
7 (70)
1.4
37.5
60
31 – 670
98.85
37.8
11 (100)
3 (21.4)
6 (100)
N. I.
4 (36.4)
1 (10)
0.21
0.29
30
N. I.
6.99
2.67
Carraro et al., 2000
Brandonisio et al., 2000
Briancesco and Bonadonna, 2005
Di Cave et al., 2005
Brandonisio et al., 2007
Brandonisio et al., 2007
Giardia e Cryptospor id ium nei reflui in Italia
a Activated Sludge; b Chemical Flocculation; c Chemical Flocculation followed by slow sand filtration; d Chemical dephosphorization and multilayer filtration
-
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Acqua potabile e ricreazionale in Italia
Negativo l’esame di 19 campioni di
acqua potabile (Briancesco e Bonadonna
2005)
Cryptosporidium e/o Giardia sono statirinvenuti occasionalmente nell’acquadi piscine (Bonadonna et al. 2004;Briancesco e Bonadonna 2005; Oliveri et al.
2006)
-
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Per stimare il potenziale zoonotico diuna specie/genotipo è necessariovalutare la presenza delle possibili
varianti nei diversi ospiti e
nell’ambiente
Epidemiologia molecolare:
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Cryptospor id ium spp.
-
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Criptosporidiosi
Patologia particolarmente grave neiruminanti neonati (vitelli e capretti inmodo particolare).
La malattia interessa anche numerosialtri mammiferi, gli uccelli, i pesci, irettili.
-
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Cryptosporidium
TASSONOMIA• Phylum: Apicomplexa
• Famiglia:Cryptosporiididae
• Genere:
Cryptosporidium
Cryptosporidium: tassonomia
-
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Specie (16) di Cryptospor id ium ritenute valide e relativi ospitiCryptosporidium: tassonomia
Specie Ospiti più frequenti Ospiti minori
C. parvum bovini, pecore, capre,
uomo
cervi, topi, maiali
C. hominis uomo, scimmie dugongo, pecore
C. muris roditori, cammelli uomo, irace, capra di
montagna
C. canis cani uomo
C. felis gatti uomo , bovini
C. suis maiale uomo
C. andersoni bovini, cammelli pecore
C. bovis bovini,
C. ryanae bovini
C. wrairi cavia
C. meleagridis tacchini, uomo pappagallo
C. baileyi polli, tacchini calopsitta, quaglie, struzzo,
anatre
C. galli fringuelli, galline,
beccogrosso
C. serpentis serpenti, lucertole
C. saurophilum lucertole
C. molnari pesci
-
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Ciclo del parassita: Simile a quello dei coccidiForma infettante:oocisti ovalare,
di ~4-5μm priva di sporocisti con 4
sporozoiti a virgola di ~ 1μm
Se ingerite o inalate dall’ospite si liberano gli sporozoiti
Può avvenire anche in sedi
diverse dall’intestino (congiuntiva, app. resp., ovaie, testicoli)
Gli sprozoiti prendono contatto concon la sup. luminale delle cell. epit. e
si invaginano nella loro membrana(vacuolo parassitoforo intr acell ulare-
extracitoplasmatico) poi nell’area dicontatto si hanno modificazioni che
portano al feeder organel le (nutrimento per pinocitosi).
Poi diviene trofozoita
-
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Ciclo del parassita:
Il trofozoita a sua volta daràorigine ad uno schizonte
Con le fasi schizogonichesi formano i merozoiti
Macrogameti fissi(da un macrogametocita un solo macrogamete)
Microgameti senza flagello
ma mobili fusiformi(da un microgametocita 14-16 microgameti)
Si forma lo zigote(che si riveste della parete formando l’oociste)
C. baileyi: 3 generazioni schizogonicheC. meleagridis e parvum: 2 generazioni schizogoniche
2 tipi di oocisti (non necessitano di sporulazione sono già infettanti):- a parete spessa (di 2 strati): forme di resistenza per l’esterno eliminate con le feci - a parete sottile (un solo strato): liberano gli sporozoiti nell’intestino con auto-reinfezione
Durata del ciclo:
3-14 gg
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Uccelli
C. meleagr idis : intestino tenue eapparato respiratorio (seni
infraorbitali, laringe, trachea,bronchi, sacchi aerei, polmoni) C. baileyi : a livello di borsa diFabrizio, cloaca e apparato
respiratorio (trachea) e congiuntiva
-
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Trachea di tacchino invasa da numerosi criptosporidi
(da Gardiner ed al., 1988, An atlas of protozoan
parasites in animal tissues, USDA Agriculture Handbook n°
651)
-
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SUTURE
SPOROZOITE
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Trasmissione
Trasmissione oro-fecale:
• Acqua
• Alimenti Trasmissione per via aerogena
Diretta
-Ruolo delle madri nei ruminanti Emissione di oocisti nell’ultimo periododi gravidanza-primo periodo di lattazione
Notevole resistenza oocisti nell’ambiente (3 mesi a 15-20 °C e più di 1anno a 4-6°C) ed ai comuni disinfettanti (sensibili solo nei confrontidell’ammoniaca a 5-50%, formalina al 10% e perossido di idrogenoal 3%).
-
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Epidemiologia
criptosporidiosi ruminanti
Cattle are commonly infected with four Cryptosporidium
spp: C. parvum, C. andersoni, C. bovis, C. ryanae.
Earlier studies in the United States indicated the existence
of an age-related occurrence of Cryptosporidium spp.
In dairy cattle, C. parvum is mostly found in pre-weaned
calves, C. bovis and C. ryanae in weaned calves, and C.
andersoni in yearlings and adult cattle
The same pattern of infections probably also exist in beefand other breeds of cattle
Thus, in cattle, only pre-weaned calves are major source
of C. parvum.
-
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Epidemiologia
criptosporidiosi ruminanti C. parvum
In USA fino al 60% degli allevamentiesaminati risulta positivo (fattori di rischioallev.)
Fino al 50% vitelli 1-3 settimane di vita risultapositivo
Nei vitelli con diarrea, nei vari studi nei varipaesi, dal 9 all’88% risultano infetti. Lamortalità non risulta elevata.
Prima causa di diarrea neonatale nei vitellida solo o associato ad altri patogeni.
In Italia molto frequente nei vitelli
-
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Epidemiologia
criptosporidiosi ruminanti
C. parvum, C. bovis and the Cryptosporidium cervine
genotype in sheep
In goats, C. parvum, C. bovis, C. hominis, a
Cryptosporidium goat genotype and a new
Cryptosporidium genotype
-
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Epidemiologia criptosporidiosi
altre specie animali
Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium horsegenotype in horses
C. suis and the Cryptosporidium pig genotype II in
pigs. Cryptosporidium parvum was only rarely seenin pigs
-
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Epidemiologia
criptosporidiosi C. hominis, C. parvum, C. meleagridis, C. felis, C. canis are found in
humans
A few other Cryptosporidium species and genotypes are occasionally
found in humans, including C. muris, C. suis, C. andersoni and
Cryptosporidium cervine, horse, rabbit genotypes C. hominis more commonly found in children and C. parvum more in
adults
C. parvum and C. hominis are thus far associated with most waterborne,
foodborne and direct contact-associated (person-to-person and animal-to-
person) outbreaks of cryptosporidiosisIn studies conducted in Peru there were no significant differences in the
distribution of Cryptosporidium species or genotypes between children and
HIV+ persons,indicating that there is no preferential infection with zoonotic
species/genotype in immunocompromised persons
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PatogenesiLocalizzazioni intestinali:
Diarrea emalassorbimento
Scarso assorbimento di H2O e Na+ Liberazione di tossine enterotossicheDiminuito assorbimento zuccheri, vitamine, proteine e
lipidiAppiattimento e necrosi degli enterociti,villi accorciati
e fusi. Infiltrazione cellule infiammatorie(plasmacellule e linfociti)
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PatogenesiLocalizzazioni respiratorie:
Tosse, sternuti,rantoli, dispnea
Scomparsa Appiattimento e necrosi dell’epitelio
tracheale oppure ipertrofia e iperplasia epiteliorespiratorio. Ciglia ridotte o assenti. Infiltrazione
cellule infiammatorie (istiociti e linfociti) nella mucosa.Presenza di abbondante quantità di muco in seni, primevie respiratorie e trachea.
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Sintomatologia
• Localizzazione intestinaleforma asintomatica
forma diarroica autolimitante
Forma diarroica persistente
Forma diarroica grave e mortale
Prolasso cloaca negli uccelli
Localizzazione respiratorie
Tosse, sternuti, dispnea e congiuntiviti
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Diarrea
Immunocompetenti Immunodeficienti
Adulti
Giovani o Neonati
Sintomi assentio blandi e forme per lo più autolimitanti
Grave diarrea
Danni permanenti
Sist. Imm.1 contatto
Flora enterica
Diarrea perennee non autolimitante
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Immunologia
Sia immunità cellulare che umorale
sembrano svolgere un ruolo importante
per il controllo di questa parassitosi.
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Diagnosi
Escrezione delle oocisti intermittente:
esaminare più campioni fecali
(almeno 3 campioni raccolti in giorninon consecutivi).
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Diagnosi:
Colorazionidi strisci fecali
Zihel-Nielsen modificata(oocisti come granuli rosso brillante su sfondo verde)
Kinyoun modificata(protozoi come corpi sferici rossi su sfondo blu)
Heine (2 gocce di feci diarroiche su vetrino, aggiungere 2 gocce di carbol-fucsina,appoggiare un secondo vetrino, separare i vetrini e farli asciugare, osservare al microscopiooocisti non assumono il colore e spiccano su sfondo rosso)
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Diagnosi
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Diagnosi
Metodi immunoenzimatici
Immunofluorescenza PCR
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Diagnosi:
Colorazioni impiegateper i preparati istologici
Ematossilina-EosinaGiemsa (oocisti di colore blu-verde)Zihel-Nielsen (oocisti rosso brillante)
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Fonte di infezione per l’uomo
Materiale fecale umano o
animale contenente oocisti
Trasmissione:
Tra animale e uomoTra uomo e uomo(promiscuità, scarsa igiene)
IdricaAlimentare(poco conosciuta)
Reservoir del parassita
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Terapia
Colostro bovino iperimmune
Paromomicina
Spiramicina
Lasalocid (coccidiostatico- molto
tossico per i ruminanti) Alofuginone (coccidiostatico)
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Profilassi:
ANIMALI:
Ridurre i parti distocicinei boviniStabulare madre e figli separatida altri vitelliStabulare in box singoli vitelli ecapretti per almeno 2-3 sett. o
separarli per gruppi di età
Nascita di animali ipossicicon acidosi metabolicaStress per la madre =
scarsa produzione di colostro
Altri vitelli possono assumerecolostro destinato al figlio
Scarsa assunzione di colostroda parte del vitello, scarsa
protezione vs Criptosporidium
Si riduce l’esposizione al patogeno nella fase più critica
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Profilassi:
ANIMALI:
Distruggere i parassitinell’ambiente A fine ciclo di allevamento, farepulizia locali ed attrezzature acaldo ad alta pressione e poivuoto sanitario
Separare eventuali malati daisani quanto primaSe il patogeno entra inallevamento attenzione all’uomo
per la trasmissione
Ammoniaca (5%-50%)Perossido di Idrogeno al 3%Formolo al 10%Esposizione alla luce solarediretta per 3 gg
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Profilassi:
ANIMALI:Sterilizzare quotidianamente leattrezzatureProfilassi contro altri patogeni
Terapia farmacologica
RotavirusCoronavirusE. coli
Alofuginone lattato(coccidiostatico)
Paromicina solfato(Ab aminoglicosidico)
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OOCISTI
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Epidemiologia molecolare:
Cryptospor id ium spp.
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Negli ultimi anni sono stati ottimizzati numerosi protocolli
per l’amplificazione tramite PCR di differenti regioni del
DNA di Cryptosporidium che vengono utilizzati per:
•l’epidemiologia
•la filogenesi
•l’identificazione da campioni fecali umani ed animali
•la tassonomia
•l’identificazione da campioni di acqua e cibo
R i i i h li t t di h tili t l li i
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REGIONE GENOMICA METODICA APPLICAZIONE
18S rDNAPCR, nested PCR, sequenziamento,
PCR-RFLP, Real time PCR, microarray
identificazione specie e
genotipi, analisi filogenetica
Heat Shock Protein 70
(Hsp70)
PCR, nested PCR, sequenziamento,
PCR-RFLP, Real time PCR, microarray
identificazione specie e
genotipi, analisi filogenetica
Oocyst Wall Protein
(COWP)
PCR, nested PCR, sequenziamento,
PCR-RFLP, microarray
identificazione specie e
genotipi
Actina PCR, nested PCR, sequenziamento. identificazione specie egenotipi
β-tubulinaPCR, nested PCR, sequenziamento,
PCR-RFLP
identificazione specie e
genotipi
Glycoproteina 60 (GP60) PCR, nested PCR, sequenziamento.identificazione
sottogenotipo
Microsatelliti PCR, nested PCR, sequenziamento,PCR-RFLP, microarray, fragment typing
identificazionesottogenotipo
MinisatellitiPCR, nested PCR, sequenziamento,
PCR-RFLP, microarray, fragment typing
identificazione
sottogenotipo
Extra-cromosomal duoble
stranded RNAReverse trascriptase, PCR,
identificazione
sottogenotipo
Regioni genomiche analizzate, metodiche utilizzate e loro applicazione
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Identificazione di numerose specie e genotipi da molte
specie animali domestiche, selvatiche, dall’uomo e
dall’ambiente.
Epidemiologia molecolare: Cryptospor id ium
Cryptospor id ium : specie e ospiti
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C. andersoniC. baileyiC. bovisC. canisC. felis
C. galli C. hominis C. meleagridis C. molnariC. muris C. parvum C.scophthalmiC. serpentisC. suis C.varaniC. wrairi
Cattle, Camel ………………Chicken, Turkey……………Cattle .……………………………Dog …………………………………Cat .…………………………………
Chicken, Passeriformes Human, monkey.…………… Turkey,Human .……………Fish …………………………………Rodent .…………………………
Cattle, Human .……………Fish …………………………………Snake .……………………………Pig ……………………………………Lizard………………………………Guinea pig .……………………
Human3 Avian Orders Human-HumanHuman, Cattle
-Dugong, SheepParrot-Human,hyrax,Mtn goat
Rodents, Ruminants --LizardHuman, CattleSnakes -
Specie Ospiti principali Ospiti minori
Cryptospor id ium : specie e ospiti
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Più di 33 genotipi, differenti da un punto di vista genetico
ma ancora non definiti vere specie
Da Smith et al. 2007
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Acqua contaminata
Cibo contaminato
Contatto diretto
Uomo Animali
Epidemiologia
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Numerose le epidemie riportate tra studenti
di Veterinaria e tra il personale a contatto
con bovini nelle stalle e nei laboratori indiversi paesi del mondo
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• L'acqua principale veicolodi trasmissione delle oocistila cui presenza è statarilevata sia nelle acque
grezze, soprattutto diorigine superficiale, sianelle acque potabili
• Le oocisti sono resistentiagli stress ambientali e aitrattamenti chimici e fisicicomunemente attuati neiprocessi di potabilizzazione
Epidemiologia
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http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.mazzonigroup.com/surgelati/Frutti_di_Bosco/frutti_di_bosco2.gif&imgrefurl=http://www.mazzonigroup.com/surgelati/Frutti_di_Bosco/frutti_di_bosco.html&h=237&w=210&sz=24&tbnid=sJ3S9WRUBrsJ:&tbnh=104&tbnw=92&hl=it&start=1&prev=/images?q=frutti+di+bosco&hl=it&lr=http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.aurorapaterno.it/images/ortaggi1.jpg&imgrefurl=http://www.aurorapaterno.it/ortaggi.htm&h=276&w=350&sz=29&tbnid=PN4IBO9aeCsJ:&tbnh=91&tbnw=115&hl=it&start=47&prev=/images?q=ortaggi&start=40&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.asmmerano.it/Upload/ortaggi.jpg&imgrefurl=http://www.asmmerano.it/Pagine/Mer-36-118.asp&h=182&w=210&sz=17&tbnid=B-gAUqiYqLwJ:&tbnh=86&tbnw=99&hl=it&start=27&prev=/images?q=ortaggi&start=20&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.waterforlife.ca/images/aboutuspic.jpg&imgrefurl=http://www.waterforlife.ca/stats/usage_200402.html&h=241&w=155&sz=18&tbnid=8HcFZpS3tqcJ:&tbnh=104&tbnw=67&hl=it&start=395&prev=/images?q=cryptosporidium&start=380&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.anri.barc.usda.gov/awpl/images/crypto_immune1.jpg&imgrefurl=http://www.lpsi.barc.usda.gov/awpl/cryptosporidium_immune.asp&h=150&w=200&sz=3&tbnid=tv9RsT6qckEJ:&tbnh=74&tbnw=99&hl=it&start=128&prev=/images?q=cryptosporidium&start=120&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.geocities.com/codadilupo_2000/mare/shell0002.jpg&imgrefurl=http://www.geocities.com/codadilupo_2000/mare/bivalvi.htm&h=446&w=430&sz=27&tbnid=laLovFRbzg4J:&tbnh=123&tbnw=119&hl=it&start=6&prev=/images?q=+bivalvi&hl=it&lr=http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.rivm.nl/infectieziektenbulletin/bul1406/zwembad1.gif&imgrefurl=http://www.rivm.nl/infectieziektenbulletin/bul1406/art_zwembaden.html&h=351&w=400&sz=51&tbnid=Lj3bJQ-WahcJ:&tbnh=105&tbnw=120&hl=it&start=76&prev=/images?q=cryptosporidium&start=60&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.watertalk.org/svwa/news/images/horse_log1.jpg&imgrefurl=http://www.watertalk.org/svwa/news/01nov15.html&h=189&w=300&sz=70&tbnid=A0SftpyuCqgJ:&tbnh=69&tbnw=110&hl=it&start=145&prev=/images?q=cryptosporidium&start=140&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.gov.on.ca/OMAFRA/english/engineer/facts/04-015f3.jpg&imgrefurl=http://www.gov.on.ca/OMAFRA/english/engineer/facts/04-015.htm&h=217&w=328&sz=40&tbnid=zay4RcuVuQgJ:&tbnh=75&tbnw=113&hl=it&start=104&prev=/images?q=cryptosporidium&start=100&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.gov.on.ca/OMAFRA/english/engineer/facts/04-015f2.jpg&imgrefurl=http://www.gov.on.ca/OMAFRA/english/engineer/facts/04-015.htm&h=217&w=328&sz=24&tbnid=8PBWu_oQmGEJ:&tbnh=75&tbnw=113&hl=it&start=105&prev=/images?q=cryptosporidium&start=100&hl=it&lr=&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.immucell.com/images/cow.jpg&imgrefurl=http://www.immucell.com/investors.php&h=167&w=234&sz=11&tbnid=zm8GcVokIesJ:&tbnh=74&tbnw=104&hl=it&start=101&prev=/images?q=cryptosporidium&start=100&hl=it&lr=&sa=N
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La maggior parte delle segnalazioni riportate in letteratura
di epidemie di criptosporidiosi da acqua contaminata,
provengono dagli USA, dal Canada e dal Regno Unito.
L’incidenza di queste patologie idrodiffuse rimane ancora
sottostimata, vista l’assenza di un sistema di sorveglianza
nazionale specifico con l’eccezione degli Stati Uniti (attivo
già dal 1971) e del Regno Unito.
APRIL 19,1993Epidemie da consumo di acqua potabile
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p q p
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Gli studi in Italia
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Gli studi in Italia
C. parvum è la specie identificatapiù frequentemente (85.7%)
nell’uomo, negli animali, nelle
acque
112 isolati tipizzati
C. parvum n=96 (85.7%)
C. hominis n=1 (0.8%)
C. felis n=1 (0.8%)
C. canis n=2 (1.7%)C. suis n=8 (7.1%)
Pig genotype II n=4 (3.5%)
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Ruolo degli animali nella
trasmissione di Cryptosporidium all’uomo
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Epidemiologia molecolare: gli animali
La prevalenza del 100% di C.
parvum quale agente di
criptosporidiosi nei vitelli
conferma il ruolo dei bovini
quali possibili reservoir perl’infezione umana.
L’infezione da C. felis in un
paziente HIV-positivosottolinea il possibile impatto
sulla salute pubblica di altre
specie di Cryptosporidium.
http://www.naturamediterraneo.com/Public/data6/steve72/gatto_MG_2586_.jpg_20071015211141_gatto_MG_2586_.jpghttp://eleonoraformisani.files.wordpress.com/2008/08/mucca.gifhttp://eleonoraformisani.files.wordpress.com/2008/08/mucca.gifhttp://www.tantasalute.it/img/gatto2.jpghttp://www.tantasalute.it/img/gatto2.jpghttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=N
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Un’unica epidemia idrodifffusa in Emilia Romagna in una
comunità per il recupero di tossicodipendenti (gennaio 1995).
Prevalenze del 13,6% tra gli individui HIV negativi e del
30,7% tra i sieropositivi, alcuni casi fatali.
Pur non essendo stata effettuata la ricerca delle oocisti
nell’acqua potabile, alcuni campioni di sedimento dai
serbatoi di raccolta dell’acqua sono risultati contaminati daoocisti di Cryptosporidium.
http://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=N
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Giardia
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Giardia è un protozoo flagellato intestinale che
infetta un ampio numero di ospiti vertebrati
EukaryotaPhylum Metamonada
Classe ZoomastigophoreaOrdine DiplomonadidaFamiglia Hexamitidae
Genere Giardia
iardia
http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.yosemite.org/naturenotes/images/Giardia.jpg&imgrefurl=http://www.yosemite.org/naturenotes/Giardia.htm&h=250&w=319&sz=7&tbnid=rx4WGiNukj4J:&tbnh=88&tbnw=112&start=25&prev=/images?q=giardia&start=20&hl=it&lr=&ie=UTF-8&sa=N
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Tassonomia
G. duodenalis (sin. Giardia intestinalis, G.lamblia) che interessa numerose specie dimammiferi incluso l’uomo: è l’unica
specie isolata nell’uomo G. agilis (anfibi)
G. muris (roditori, uccelli ,rettili)
G. psittaci (pappagallini ondulati)
G. ardeae (airone)
G. microti
La specie Giardia duodenalis
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G. duodenalis è l’agente eziologico della giardosi erappresenta uno dei più comuni protozoi grastrointestinalicausa di diarrea di origine non batterica e virale nel mondo.
Giardia duodenalis (sin: Giardia intestinalis, Giardia lamblia) èla sola specie trovata nell’uomo e in molti ospiti vertebrati
La specie Giardia duodenalis
http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.yosemite.org/naturenotes/images/Giardia.jpg&imgrefurl=http://www.yosemite.org/naturenotes/Giardia.htm&h=250&w=319&sz=7&tbnid=rx4WGiNukj4J:&tbnh=88&tbnw=112&start=25&prev=/images?q=giardia&start=20&hl=it&lr=&ie=UTF-8&sa=N
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Il parassita presenta due morfotipi: il trofozoita o stadiovegetativo e la cisti o stadio di disseminazione ambientale
p
La specie Giardia duodenalis
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• La forma cistica di resistenza
(nell’ambiente) e infettante ha forma
ovale
• Misura 8 –14 x 5-8 μm
• contiene 4 nuclei (nelle cisti
immature 2)
•mostra 2 assostili, fibrille corte e
ricurve disposte a gruppi di 4
elementi (residui dei flagelli), 2 corpiparabasali mediani ed una parete
proteico-fibrosa spessa 0.3µm
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•Il trofozoita, piriforme, è dotato di simmetria bilaterale•Misura 12-15 x 6-8 μm•Presenta:una superficie convessa (dorsale)una superficie concava (ventrale) con la quale aderisce alla
parete intestinale (disco adesivo)La concavità ventrale conferisce ai trofozoiti la caratteristicaforma “a cucchiaio” quando visti di profilo.
La specie Giardia duodenalis
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La specie Giardia duodenalis
La specie Giardia duodenalis
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Trofozoita
http://www.promiselandhealth.com/parasites/Giardia_LifeCycle.gif
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•Sviluppa nell’intestinotenue•Il trofozoita si moltiplicaper scissione binaria sullasuperficie della mucosaintestinale•attraversa l’intestino e siincista•le cisti vengono emessecon le feci
CICLO BIOLOGICO
La specie Giardia duodenalis
La specie Giardia duodenalis
http://www.promiselandhealth.com/parasites/Giardia_LifeCycle.gif
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CICLO BIOLOGICO
La specie Giardia duodenalis
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DISINCISTAMENTO
La specie Giardia duodenalis
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CICLO BIOLOGICO
I trofozoiti si moltiplicano con unavelocità che dipende dal ceppo delprotozoo e da fattori legati all’ospite:
• Stato immunitario/malattie intercorrenti• Stato di nutrizione• Giovane età
I trofozoiti si incistano nell’ileo e la paretecistica si completa in 44-70h
La specie Giardia duodenalis
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CICLO BIOLOGICO
Le cisti emesse nell’ambiente sono già
infettanti
Una volta ingerite da un altro ospite laproduzione di nuove cisti inizia dopo
circa 4-15gg
La specie Giardia duodenalis
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RESISTENZA/SENSIBILITA’ Cisti
Resistenti a -20C° x 10 ore
+4C° x 2 mesi
+37C° x 4gg
Sensibili a essiccamento
calore (50C°) formaldeide (2-5%)
fenolo e cresolo (5%)
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GI RDIOSI
Malattia nota dalla finedell’800 ma studiata con più
attenzione con l’avvento
delle patologieimmunodepressive
La specie Giardia duodenalis
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Come si diffonde?
•Giardia vive nell’intestino di animali e uomini infetti cherilasciano nell’ambiente il parassita.
•Può trovarsi nel terreno, nel cibo nell’acqua e su tutte lesuperfici contaminate con feci emesse da animali o uomini
infetti.
vie di tr smissione
La specie Giardia duodenalis
vie di tr smissione
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Uomo-uomo – trasmissione antroponotica: Eterosessuali/omosessuali
Animali-uomo e viceversa– trasmissionezoonotica:da animali da reddito, animali da compagnia,animali selvatici
Animale-animale
ORO-FECALE
La specie Giardia duodenalis
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Acqua contaminata
Cibo contaminato
Contatto diretto
Uomo Animali
vie di tr smissione
La specie Giardia duodenalis
Giardia duodenalis epidemiologia
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Nella trasmissione del parassita è attribuitagrande importanza all’acqua destinata al
consumo potabile.
Acque oggetto di attività ricreativa (acquetermali e piscine)
Acque destinate all’irrigazione checontaminano i vegetali destinati al consumoumano.
Acque reflue depurate destinate ad usidomestici, industriali, pubblici(innaffiamento di zone verdi pubbliche,lavaggio delle strade, ecc.), e perl’irrigazione in agricoltura.
Acque di dilavamento artificiali o naturali
Giardia duodenalis epidemiologia
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Dose infettanteLa dose media infettante calcolata è pari
a 10 e 25 cisti
Giardia duodenalis epidemiologia
Giardia duodenalis epidemiologia
http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.math.ut.ee/~lauriesk/maksalutikas.jpg&imgrefurl=http://www.math.ut.ee/~lauriesk/veereostus.html&h=175&w=282&sz=7&tbnid=u46zLqBrWTUJ:&tbnh=68&tbnw=109&start=15&prev=/images?q=giardia+intestinalis&hl=it&lr=&ie=UTF-8
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L’infezione umana ha una distribuzione cosmopolita.Circa 200 milioni di persone in Asia, Africa e AmericaLatina presentano giardosi sintomatica (con circa 500.000
nuovi casi per anno) (World Health Organisation, 1996).
E’ più diffusa nelle regioni a clima caldo e nei bambini.
Nei paesi industrializzati è considerato un parassita
riemergente a causa del suo frequente ruolo in casiepidemici di diarrea.
Giardia duodenalis epidemiologia
La specie Giardia duodenalis
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EPIDEMIOLOGIA
E’ una zoonosi
l’uomo (++ i bambini) è un importante
serbatoio Ruolo degli animali contaminazione
acque e verdure
Le cisti sono resistenti a basseconcentrazioni di cloro
La specie Giardia duodenalis
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EPIDEMIOLOGIA
Cosmopolita
Più frequente in bovini da latte e neimesi più freddi dell’anno
Ruminanti infezione a 1-10 sett. Ma inCanada e USA isolato nel 20% di boviniadulti asintomatici e quasi nel 100% deivitelli con diarrea
L’eliminazione delle cisti è intermittente
Il colostro non è protettivo
La specie Giardia duodenalis
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EPIDEMIOLOGIA
Cavallo infezione a 22 sett. mafrequente anche nei puledri neonati enelle madri con e senza diarrea
Cane e gatto infezioni frequenti sianei giovani animali che negli adulti,forme sintomatiche più frequenti neigiovani animali o negli animali sottoposti
a fattori stressanti
La specie Giardia duodenalis
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EPIDEMIOLOGIA
Fonti di infezione:
• Trasmissione oro-fecale di forme cistiche• Trasmissione oro-fecale di Trofozoiti (++
lattanti)
Animali giovani escrezione > n° di cisti
Madri escrezione cisti nell’ultimo periodo
di gravidanza e nel primo di lattazione
La specie Giardia duodenalis
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ADESIONE ALL’OSPITE
La specie Giardia duodenalis
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ADESIONE ALL’OSPITE
La specie Giardia duodenalis
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La specie Giardia duodenalis
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AZIONE PATOGENA
Invasione della mucosa:• Rigonfiamento degenerativo delle cell. epit.• Atrofia villare e iperplasia delle cripte
• Edema e infiltrazione linfocitaria• Erosioni dell’epitelio del duodeno
Competizione per i nutrienti
La specie Giardia duodenalis
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AZIONE PATOGENA
aumento enterociti immaturi
diminuzione enzimi digestivi
(disaccaridasi, maltasi, lattasi esaccarasi)
fenomeni allergici per assorbimento di
Ag intestinali
Diarrea e malassorbimento
La specie Giardia duodenalis
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ISTOLOGIA
La specie Giardia duodenalis
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SINTOMATOLOGIA
Diarrea: spesso intermittente e che sirisolve spontaneamente; a volte diarreatransitoria oppure forme croniche con
dimagramento e letargia. Consistenzafeci da pastose a liquide spessomaleodoranti
Ritardo nella crescita
Dimagramento
Forme asintomatiche
La specie Giardia duodenalis
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PATOGENESI DIARREA
Carenza di disaccaridasi: alterato
assorbimento di glucosio, ioni sodio e
cloro, acqua.
Appiattimento dei villi: inibizione attività
enzimatica e trasporto delle sostanze
nutritive.
Enterotossine??
La specie Giardia duodenalis
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RISPOSTA IMMUNITARIA
Locale (++) tessuto linfoide dellamucosa intestinale che coinvolge sial’immunità umorale che cellulare
Umorale IgG, IgM e +++ IgAsecretorie: rottura della parete deltrofozoita e < resistenza della cisti
Cellulare
linfociti T, macrofagi, IFNγ eneutrofili
La specie Giardia duodenalis
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DIAGNOSI
Esame delle feci (3 campioni di 3 giorni nonconsecutivi):• A fresco
• Flottazione (soluzione satura di NaCl – solfato diZn al 33%)• Formol-etere centrifugazione (se poche cisti)• Colorazione strisci fecali• Colorazione delle cisti con sostanze fluorescenti
Elisa
Immunofluorescenza diretta
PCR
La specie Giardia duodenalis
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TERAPIA
Furazolidone: blocco replicazione DNA(molto tossico e cancerogeno)
Quinacrina: blocco replicazione DNA
(molto tossico) Nitroimidazoli: blocco attività enzimatica
(tossici e cancerogeni)
Molti Paesi vietano l’uso di questifarmaci negli animali in produzionezootecnica
La specie Giardia duodenalis
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TERAPIA
Benzimidazolici: blocco e distruzione dei
microtubuli. Il più usato è l’Albendazolo
Spesso si verificano forme di resistenzaai farmaci
La specie Giardia duodenalis
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PROFILASSI
Conoscere l’epidemiologia per eliminare
i fattori di rischio soprattutto per i giovani,
più sensibili all’infezione ed agli effetti
patogeni del protozoo
Migliorare l’igiene ambientale
Impedire contaminazione ambientale
Epidemiologia molecolare
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Giardia
Epidemiologia molecolare
Epidemiologia molecolare: Giardia
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Epidemiologia molecolare: Giardia
PCR targets
Gdh (glutamate dehydrogenase): identificazione
specie/genotipo
Tpi (triose phosphatase isomerase):identificazione
specie/genotipo
EF-1 α (elongation factor-1α): identificazione specie/genotipo
SSU rDNA (small subunit rDNA): identificazionespecie/genotipo
β-Giardin: identificazione del genotipo
Epidemiologia molecolare: il genere Giardia
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Epidemiologia molecolare: il genere Giardia
• G. agilis - anfibi• G. muris - roditori• G. duodenalis - mammiferi e uomo
• G. psittaci - uccelli• G. ardeae - uccelli• G. microti - roditori
La caratterizzazione molecolare di isolati di Giardia da differenti ospiti ha confermato l’esistenza di seidistinte specie:
Epidemiologia molecolare: il genere Giardia
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Epidemiologia molecolare:
la specie G.duodenal is
Epidemiologia molecolare: la specie G. duodenal is
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G. duodenalis presenta alcune varianti
genetiche definite assemblaggi o genotipi
Attualmente se ne riconoscono sette (da A a G)
Alcuni Assemblaggi sembrano presentare una
evidente specificità per l’ospite altri invecemostrano un più ampio “host range”
p de o og a o eco a e la specie G duode a s
Epidemiologia molecolare: la specie G. duodenal is
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ASSEMBLAGGIO OSPITE
Auomo, bestiame, cane, gatto,
castoro, cavie, tardigradi,
B
uomo, tardigradi, cincillà, cane,
castoro, ratto, gibbone
C cane
D cane
Ebestiame (bovini, capre, maiali,
pecore, alpaca)F gatto
G topo muschiato, topo campagnolo
G. duodenalis: un complesso di specie?
p g p
Epidemiologia molecolare: la specie G. duodenal is
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ASSEMBLAGGIO SUB- ASSEMBLAGGIO
A
Gruppo AI – uomo e animali
Gruppo AII – uomo
BGruppo BIII – uomoGruppo BIV - uomo/animali
p g p
Epidemiologia molecolare: la specie G. duodenal is
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Per stimare il potenziale zoonotico è necessario valutare la presenza degli Assemblaggi A e B nei diversi ospiti e nell’ambiente
p g p
Gli studi in Italia
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Gli studi in Italia
Gli studi in Italia
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Gli studi in Italia
352 isolati tipizzati
Ass A n=177 (50.3%)Ass B n=49 (13.9%)Ass C n=29 (8.2%)
Ass D n=43 (12.2%)Ass E n=17 (4.8%)Ass F n=1 (0.5%)
Ass. A (zoonotico) piùdiffuso con alte prevalenze
nell’uomo, negli animali e
nell’acqua
Reflui e Molluschi bivalvi marini in Italia
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Parasitol Int. 2009 Mar;58(1):12-7. Epub 2008 Aug 7.
Giardia and Cryptosporidium in inflowing water and harvested
shellfish in a lagoon in Southern Italy.
Giangaspero A, Cirillo R, Lacasella V, Lonigro A, Marangi M, Cavallo
P, Berrilli F, Di Cave D, Brandonisio O.
Wastewaters carrying Giardia and Cryptosporidium (oo)cysts aredischarged into the Lagoon; however, the shellfish harvested in the
same environment were found to be unaffected, thus suggesting that
physical, ecological and climatic conditions may prevent contamination
of harvested shellfish.
Parasitol Res. 2007 Oct;101(5):1169-82. Epub 2007 Jun 26.
Giardia and Cryptosporidium and public health: the epidemiological scenario from the
Italian perspective.
Giangaspero A, Berrilli F, Brandonisio O.
Source
Dipartimento di Scienze delle Produzioni, dell'Ingegneria e della Meccanica e dell'Economia
Applicate ai Sistemi Agro-Zootecnici, University of Foggia, 71100, Foggia, Italy.
Abstract
This review gives ample information concerning the epidemiology of these parasites in Italy,i.e. prevalence data in humans, farm and pet animals, shellfish and aquatic environment.
Moreover, it reports genotyping results obtained from different isolates, with particular
emphasis on the spread of host-specific and zoonotic species/genotypes of various origin,
and on molecular data that make the Italian situation different from that of other countries.
Finally, possible explanations are given for the infrequent reports of Giardia andCryptosporidium spp. outbreaks, despite widespread faecal contamination by these
parasites.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cirillo%20R%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lacasella%20V%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lonigro%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Marangi%20M%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cavallo%20P%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cavallo%20P%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Di%20Cave%20D%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://images.google.it/imgres?imgurl=http://mariodomina.files.wordpress.com/2007/04/acqua-5.jpg&imgrefurl=http://mariodomina.wordpress.com/2007/04/27/acqua-principio-di-tuttecose/&usg=__ek3fNdAn3d-v-b0FxhvCTPTKles=&h=370&w=500&sz=57&hl=it&start=23&tbnid=3eo7Nv8cW7pDeM:&tbnh=96&tbnw=130&prev=/images?q=acqua&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=it&sa=Nhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Brandonisio%20O%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Di%20Cave%20D%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Di%20Cave%20D%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Di%20Cave%20D%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Di%20Cave%20D%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Di%20Cave%20D%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cavallo%20P%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cavallo%20P%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cavallo%20P%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Marangi%20M%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Marangi%20M%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Marangi%20M%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lonigro%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lonigro%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lonigro%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lacasella%20V%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lacasella%20V%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Lacasella%20V%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cirillo%20R%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cirillo%20R%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Cirillo%20R%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Giangaspero%20A%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%22Berrilli%20F%22[Author]
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Ruolo degli animali nella
trasmissione di Giardia all’uomo?
Epidemiologia molecolare: gli animali
-
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Negli animali, assemblaggi
zoonotici e non-zoonotici sono
associati all’infezione.
In Italia, nei cani gli assemblaggispecifici (C/D non zoonotici)
sembrano prevalenti rispetto a
quelli zoonotici (A).
La trasmissione di Giardia tra
uomo e cane sembra essere, inItalia, poco probabile seppure
possibile
p g g
Epidemiologia molecolare: gli animali
-
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Altre specie, quali il gatto, i
vitelli evidenziano
maggiore prevalenza dell’
Assemblaggio zoonotico A.
Questi ospiti possono
essere fonte di infezione
per l’uomo.
In Italia, trasmissione zoonotica o antroponotica??
http://eleonoraformisani.files.wordpress.com/2008/08/mucca.gifhttp://www.naturamediterraneo.com/Public/data6/steve72/gatto_MG_2586_.jpg_20071015211141_gatto_MG_2586_.jpghttp://eleonoraformisani.files.wordpress.com/2008/08/mucca.gifhttp://eleonoraformisani.files.wordpress.com/2008/08/mucca.gifhttp://www.tantasalute.it/img/gatto2.jpghttp://www.tantasalute.it/img/gatto2.jpg
-
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I dati disponibili per l’ Italia indicano una contaminazione fecale
diffusa da Giardia e Cryptosporidium rinvenute in animali domestici
e selvatici, nei molluschi, nelle acque e nell’uomo.
In Italia, trasmissione zoonotica o antroponotica??
Molte specie presentano specie/genotipi zoonotici(Assemblaggio A G. duodenalis e C. parvum) piuttosto che
specie-specifici.
In Italia il ruolo degli animali può essere significativo per la
trasmissione dell’infezione umana a causa della elevata
circolazione dell’ Assemblaggio A di Giardia e di C. parvum .
In Italia, trasmissione zoonotica o antroponotica??
-
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I dati disponibili supportano l’ipotesi che la trasmissione
di Giardia e Cryptosporidium nel nostro paese avvenga
con un ciclo animale-uomo e viceversa.
L’assenza di epidemie idrodiffuse di criptosporidiosi e
giardiosi suggerisce che la trasmissione attraverso le
acque potabili e/o ricreazionali è poco probabile.
In Italia, trasmissione zoonotica o antroponotica??
CONCLUSIONI
-
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CONCLUSIONI
L’applicazione delle tecniche
molecolari per lo studio della
struttura e della variabilità genetica
dei parassiti è dunque un obiettivo
irrinunciabile
CONCLUSIONI
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8/17/2019 Zoonosi Protozoarie a Trasmissione Idrica Def
133/134
L’esatta identificazione degli strains
rappresenta un requisito fondamentale
per una migliore comprensione
dell'epidemiologia delle parassitosi perpianificare effettivi programmi di
controllo
CONCLUSIONI
Università di Pisa
Facoltà di Medicina Veterinaria
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8/17/2019 Zoonosi Protozoarie a Trasmissione Idrica Def
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I METODI MOLECOL RI COME STRUMENTO
PER L’EPIDEMIOLOGI E L PREVENZIONE
DELLE ZOONOSI TR SMISSIONE IDRIC
Federica Berrilli
Dipartimento di Sanità Pubblica e Biologia Cellulare,
Università di Roma Tor Vergata
Facoltà di Medicina Veterinaria
Prof.ssa Stefania PerrucciUNIVERSITÀ DI PISA
GRAZIE