enzim lipase kelompok 111
DESCRIPTION
Laode Muhammad KamalTRANSCRIPT
L/O/G/O ENZIM LIPASE
Enzimologi
Presented by:RATNA (F1C1 10 009)
ROSDIANA (F1C1 10 0 018)L.M.KAMAL (F1C1 10 019)
EKO WIBOWO (F1C1 10 020)JUMAING (F1C1 10 022)
www.themegallery.com
ISI MATERIEnzim lipase
P E N D A H U L U A N
PENGERTIAN ENZIM LIPASE & LIPOKSIDASE
TATA NAMA, SPESIFIKASI DAN KLASIFIKASI ENZIM LIPASE
SUMBER ENZIM LIPASE
SIFAT-SIFAT/KARAKTERISTIK ENZIM LIPASE
FUNGSI ENZIM LIPASE
ISOLASI, KARAKTERISASI DAN AKTIVITAS ENZIM LIPASE
FAKOR YANG MEMPENGARUHI ENZIM LIPASE DAN APLIKASINYA
www.themegallery.com
PENDAHULUAN
Reaksi Kimia
suhu, tekanan, waktu, dll
“Laboratorium Rumit”
Enzim lipase
LIPASELIPASE
Mahasiswa
Pengetahuan
www.themegallery.com
ENZIM LIPASEEnzim lipaseLipase adalah kelas turunan dari enzim esterase enzim yang
mengkatalisis pemecahan lemak menjadi asam lemak dan gliserolwikipedia
Enzim lipase termostabil atau asilgliserol hidrolase (E.C 3.1.1.3) merupakan enzim yang dapat menghidrolisis rantai panjang trigliserida.
Tika, et.al., 2012
Lipase merupakan kelompok enzim yang secara umum berfungsi dalam hidrolisis lemak, mono-, di-, dan trigliserida untuk menghasilkan asam lemak bebas dan gliserol
Falony et. al., 2006
www.themegallery.com
LIPOSIDASEEnzim lipase
Lipoksidase adalah enzim protein yang dapat dikristalkan secara
primer mampu mengkatalisis oksidasi dengan oksigen asam
lemak tak jenuh dan lemak tak jenuh , dan secara sekunder
mengoksidasi karotenoid sehingga menjadi senyawa tak
berwarna, terdapat dalam kedelai dan padi-padian
Kamus Kimia
Lipoksidase adalah enzim yang mengkatalsis penambahan oksigen pada ikatan rangkap dari asam lemak tak jenuh dan tumbuhan asal
Kamus Kimia
www.themegallery.com
TATA NAMA, SPESIFIKASI DAN KLASIFIKASI ENZIM
LIPASE Enzim lipaseTATA
NAMATATA
NAMA
International Union of
Biochemistry
lipase termasuk kelompok enzim yang dikenal sebagai ester hidrolase dan
diklasifikasikan sebagai enzim kelas 3.1
Ester hydrolase (3.1)
Carboxyl ester hydrolase (3.1.1)
Glycerol ester hydrolase (3.1.1.3)
Ngom, 2000
Ngom, 2000
www.themegallery.com
TATA NAMA, SPESIFIKASI DAN KLASIFIKASI ENZIM
LIPASE Enzim lipaseSPESIFIKASIEkspresi kemampuan
suatu enzim untuk membedakan substrat-substratnya berdasarkan pada perbedaan afinitas substrat dalam berasosiasi dengan sisi aktif enzim untuk membentuk komplek enzim substrat dan akhirnya menghasilkan produk
Spesifisitas Gabungan
Spesifisitas Jenis Lipid
Spesifisitas Posisi
Spesifisitas Asam Lemak
Spesifisitas Alkohol
www.themegallery.com
TATA NAMA, SPESIFIKASI DAN KLASIFIKASI ENZIM
LIPASE Enzim lipaseKLASIFIKASI
Berdasarkan kemampuannya dalam mensintesis ikatan ester, lipase diklasifikasikan ke dalam
3 golongan menurut kekhasannya (deMan, 1997)
Lipase Yang Tidak Khas.
Lipase Yang Mempunyai
Kekhasan Posisi
Kekhasan Untuk Asam
Lemak Tertentu.
www.themegallery.com
SUMBER ENZIM LIPASE Enzim
lipase
HEWAN
MIKROORGANISME
TANAMAN
Lipase hewan (mamalia) dikelompokkan
berdasarkan sumbernya, yaitu lipase
dalam sistem pencernaan seperti
lambung dan pankreas, lipase dalam jaringan
hati, paru-paru, jantung dan ginjal, serta lipase
dalam air susu
Lipase tanaman dibagi menjadi 4 kelompok yaitu :
lipase triasilgliserol
lipase asilhidrolase,
lipase fosfolipid dan lipase
lisofosfolipase
Lipase mikroorganisme dapat diproduksi dari golongan bakteri, khamir dan jamur (Falony, 2006) baik sendiri maupun bersama-sama dengan jenis lain dari family hydrolase, seperti esterase (Pera, 2006).
www.themegallery.com
SIFAT / KARAKTERISTIK ENZIM LIPASE
Enzim lipaseEnzim ini dapat bekerja pada lapisan antar muka karena adanya perbedaan
kepolaran antara lipase dengan substrat yang dikatalisisnya. Lipase cenderung bersifat polar
Aktivasi pada lapisan antar muka dari lipase ini akan meningkat ketika substrat yang tersedia berada dalam bentuk emulsinya. Sebagai akibat dari karakteristik ini, maka kinetika dari lipase tidak mengikuti aturan klasik model Michaelis-Menten (Jaeger, et al, 1994).
Substrat dan produk yang dihasilkan dari katalitik lipase ini terkadang bersifat tidak dapat larut dengan baik dalam media air.
Lipase dapat stabil dan tetap aktif dalam suatu pelarut organik tanpa adanya penambahan senyawa penstabil
Aktivitas lipase tergantung pada sumber, jenis substrat, pH dan temperatur. pH dan temperatur optimum reaksi hidrolisis lipase tergantung pada jenis dan sumber substrat, larutan penyangga (bufer) dan pengujian yang digunakan.
www.themegallery.com
FUNGSI ENZIM LIPASE Enzim
lipaseFUNGSI Sebagai biokatalisator dalam proses reaksi
Hidrolisis Sistesis
RCOOR’ + H2O RCOOH + R’OH
Esterifikasi
RCOOH + R’OH RCOOR + H2O
Interesterifikasi
RCOOR + R’COOR’’ RCOOR’’+ R’’ COOR’
Alkoolisis
RCOOR’ + R’’OH RCOOR’’+ R’ OH
Asidolisis
RCOOR’ + R’’COOH R’’COOR’+ RCOOH
www.themegallery.com
Loading ...
www.themegallery.com
ISOLASI DAN AKTIVITAS ENZIM LIPASE
Enzim lipase
ISOLASI “Isolasi Enzim Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Air Panas
Banyuwedang Kecamatan Gerogak, Buleleng Bali”
Identifikasi Bakteri Termofilik Dan Isolasi Enzim Lipase
Uji Aktivitas Lipase Termostabil
Penentuan Kadar Protein
www.themegallery.com
PENDAHULUAN
Enzim lipase termostabil
Enzim yang dapat
menghidrolisis rantai
panjang trigliserida
Enzim ini memiliki potensi untuk digunakan
memproduksi asam lemak,
Latar Belakang
Jatropha curcas Linn
Enzim lipase termostabil dari bakteri termofilik merupakan enzim yang sangat potensial untuk mengatasi kendala teknis industri, namun masih ditemukannya kendala lain, dalam hal perolehan hasil (yield) enzim lipase termostabil dari mkroorganisme termofilik yang sangat rendah.
www.themegallery.com
Mengatasi kendala itu beberapa pendekatan ditempuh :
Rekayasa genetika untuk menghasilkan enzim lipase termostabil dengan ekspresi tinggi.
Sumber baru enzim lipase termostabil dari mikroorganisme termofilik yang tumbuh dari habitat yang unik.
PENDAHULUAN Latar Belakang
Suhu fermentasi yang sesuai untuk menghasilkan lipase termostabil.
www.themegallery.com
PROSEDUR KERJA
Koloni tunggal yang tumbuh pada media padat LB
• Ditumbuhkan pada media yang mengandung Rhodamin B
• Di inkubasi selama 2 x 24 jam pada suhu 50oC
• disinari dengan sinar UV • diukur halo yang terbentuk
Hasil
Identifikasi Bakteri Termofilik dan Isolasi Enzim Lipase
www.themegallery.com
filtrat kultur (1 mL)
• dikocok dengan emulsi 2,5 mL (1:1,v/v) minyak olive (70% residu oleate
• Di tambahkan 20 µL CaCl 2 0,02 M yang dikocok 200 rpm dalam water bath.
water bath. Emulsi yang terbentuk
• dicampur minyak olive dan 50 mL bufer posfat.• Diinkubasi pada suhu 50°C.• dihentikan reaksi dengan penambahan 6 N HCl (1
mL) dan isooktan 5 mL,• ditambah isooktan 4 mL• dipindahkan ke tabung analisis dan ditambahkan
reagen Cu (tembaga) dan larutan tembaga II asetat 1-hidrat pH 6,1 yang mengandung piridin.
• diukur pada panjang gelombang 715 nm.
Hasil Pengamatan
UJI AKTIVITAS LIPASE TERMOSTABIL
www.themegallery.com
Lokasi Banyuwedeng air panas 60-70 derajat Celsius, dan sering berubah karena bercampur dengan sumber air tawar yang juga digunakan oleh penduduk, serta adanya rembesan air payau dari pantai.
HASIL ISOLAT
www.themegallery.com
TABEL DAN GRAFIK
www.themegallery.com
KESIMPULAN
1. Enzim lipase yang dihasilkan oleh bakteri termofilik biasanya dihasilkan pada seluruh fase kehidupan mikroorganisme (Brockman, et al., 1988).
2. Enzim ini digunakan untuk memecah lemak menjadi komponen asam lemak, yang amat dibutuhkan dalam metabolisme mikroorganisme yang bersangkutan.
3. Ekspresi enzim lipase meningkat saat mikroorganisme memasuki fase kematian karena jumlah produk lemak dari sel-sel yang mati meningkat (Madigan, 1994).
www.themegallery.com
Enzim lipase
Potensiometri
Metoda Titrimetri
Interfacial tensiometry,
Spectroscopy (photometry, fluorimetry, Infrared dan turbidimetri
Kromatografi immunochemistry
Konduktometri.
AKTIVITAS ENZIM LIPASE
AKTIVITAS
www.themegallery.com
FAKTOR YANG MEMPENGARUH I AKTIVITAS ENZIM LIPASE DAN APLIKASINYA Enzim
lipaseFAKTOR
Aktivitas enzim lipase dipengaruhi oleh beberapa faktor, diantaranya adalah temperatur, air, pelarut organik, konsentrasi enzim dan substrat
APLIKASI
Enzim lipase memiliki banyak aplikasi di dalam berbagai bidang industri ( kosmetik, makanan, parfum, sintesis bahan organik, dll) maupun bioteknologi (biokatalis untuk reaksi reaksi hidrolisis, esterifikasi, alkoholisis, asidolisis and aminolisis.).
L/O/G/O
www.themegallery.com
Terima Kasih…