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8/16/2019 Enzimologia Ver

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CONCEPTOS BCONCEPTOS B Á ÁSICOS DE ENZIMOLOGSICOS DE ENZIMOLOGÍÍ A CL A CLÍÍNICANICA

Dr. LuisDr. Luis Antonio Antonio Salazar Salazar

Facultad de MedicinaFacultad de Medicina – – Universidad de La FronteraUniversidad de La Frontera

20042004


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• Coenzima

• Es la porción dializable y es un tipo de sustrato esencial en laactividad catalit ica. Está esctrechamente ligada a la enzima y no es

proteína.

• Son sustratos orgánicos de P.M. relativamente bajos. Asumenfunciones específicas:

• Transferencia de H (NAD y NADP)• Transferencia de grupos Acil (CoA en la oxidación y sintesis de AG)• Isomerización (Uridin difosfato en la epimerización de glucosa a galactosa)

CONCEPTOS…


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• Activadores

• Son sustancias que modifican las reacciones

catalizadas. Por ejemplo iones metálicos como el Zinc yMagnesio.

CONCEPTOS…


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IsoenzimasSe consideran isoenzimas las proteínas que catalizan la

misma reacción, ocurren en la misma especie, pero poseendiferentes propiedades físicas y químicas.

Las isoenzimas pueden proceder de:

diferentes órganos (isoenzimas de la fosfatasaalcalina)

de diversos espacios celulares (isoenzimas de laGOT)

del mismo espacio celular (isoenzimas de la LDH)


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Las isoenzimas pueden diferenciarse mediante:

Electroforesis, Cromatografía, con la ayuda de

inhibidores, en virtud de su termoestabilidad.


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FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

1. pH

2. Temperatura

3. Concentración de sustrato

4. Inhibidores

5. Activadores


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FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA


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ACTIVADOR ALOSTERICO


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INHIBIDOR ALOSTERICO


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Clasificación de las Enzimas


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La Unión Internacional de Bioquímica (IUB) clasifica a las enzimasen 6 clases:

•I. Oxidorreductasas

• Oxidasas

• Citocromooxidasa

• Deshidrogenasas

•

Lactato-deshidrogenasa (LDH)• Malato-deshidrogenasa (MDH)

• Isocitrato-deshidrogenasa (ICD)


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•

II. Transferasas

• Aspartato aminotransferasa (ASAT)• Alanín-aminotransferasa (ALAT)• Creatincinasa (CK)

• III. Hidrolasas

• Esterasas

• Fosfatasa ácida• Fosfatasa alcalina• Lipasa• Colinesterasa

• Peptidasas

• Tripsina

• Glucosidasas

• Amilasa


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• IV. Liasas

• Aldolasa• Glutamato-descarboxilasa• Piruvato-descarboxilasa

• V. Isomerasas

• Clucosa-fosfoisomerasa• Ribosa-fosfatoisomerasa

• VI. Ligasas


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Nomenclatura de las Enzimas

• La designación numérica utilizada para cada enzima consiste en 4 númerosseparados por puntos. Por ejemplo:

• E.C. 1.1.1.27 para la LDH

• EC, indica Comisión de Enzimas (Enzyme Commision)

• La primera cifra (1) indica la clase a la que pertenece la enzima (en este caso

oxidorreductasa).

• Las dos cifras siguientes indican la sub-clase y la sub-sub-clase a la que se ha asignado laenzima (Deshidrogenasa; lactato-deshidrogenasa).

• La última cifra que se da a cada enzima en su sub-sub-clase es su número de serie

específico.

• En general la denominación de una enzima describe su función a la que se le sueleañadir el sufijo “ asa” . Otras tienen el sufi jo “ ina” : tripsina, pepsina, etc.


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ACTIVIDAD ENZIMATICA


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ACTIVIDAD ENZIMATICA

• Unidad Internacional (Unit)

• “Cantidad de enzima que cataliza la transformación de unmicromol de sustrato por minuto, bajo condiciones óptimas” .

• Katal (Kat)

• “Actividad catalítica que transforma 1 mol de sustrato porsegundo, bajo condiciones definidas” .

• 1 U/L = 16.67 nKat/L


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DETERMINACIÓN DE ACTIVIDAD ENZIMATICA

• Fundamentalmente, hay 2 caminos para medir una actividad enzimática:

• Mediante la determinación del consumo de un sustrato transformadoen la reacción enzimática.

• Mediante la medida del producto formado en la reacción enzimática.

• Cada uno de los 2 caminos permite por su parte 2 procedimientos demedición, a saber:

•

Medida en dos puntos “ reacción parada”• Medición continua “ método cinético”

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