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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICADE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE CONTROL DE MEDICAMENTOS

Profesor: BQF. Carlos García MSc.

Alumno: Khatherine Elizabeth Cayambe Avilés

Curso: Quinto Año Paralelo: “A”

Grupo Nº 3

Fecha de Elaboración de la Práctica: Viernes,16 de Enero del 2015

Fecha de Presentación de la Práctica: Viernes,23 de Enero del 2015

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TÍTULO DE LA PRACTICA:

OBJETIVO DE LA PRACTICA

Estudiar la actividad hipoglucemiante en ratas Wista .

Determinar la eficacia de un medicamento (meftformina) en ratas Wistar

INTRODUCCION

Cuando las células beta (en los islotes de Langerhans del páncreas) no producen insulina, se

origina la Diabetes Mellitus Insulinodependiente (DMID) o tipo I; en tanto que si los receptores

de insulina de las células del cuerpo no funcionan, se genera la Diabetes Mellitus No

Insulinodependiente (DMNID) o tipo II.

En cualquier caso, la glucosa no puede penetrar en las células del cuerpo y utilizarse

eficazmente; se produce entonces un desbalance entre la elaboración de especies reactivas de

oxígeno (EROS) y la capacidad de defensa antioxidante del cuerpo; desbalance conocido como

estrés oxidativo .

Esto ocasiona, a su vez, degeneración de las paredes celulares y de los vasos sanguíneos, daños

en la retina, deterioro renal, aterosclerosis, afecciones en el si stema nervioso central e incluso

múltiples alteraciones reproductiva

Hipoglucemiante es aquella sustancia que posee la capacidad de disminuir los niveles de

glucosa en sangre.

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SUSTANCIAS

Glucosa 40%

CMC 1%

Metformina

Tiopental sódico

Agua destilada

Se utilizan para tratar la diabetes mellitus tipo 2.Los hipoglucemiantes como la insulina, las

sulfamidas y las biguanidas se utilizan en el tratamiento de la diabetes.

MATERIALES

Bata sanitaria

Mascarilla

Guantes

Jeringuillas

Cánula

Tubos de ensayo

Gradilla

Cronometro

Vaso de precipitación

Agitador

Tijeras Espátula

Papel Manteca

Tubos de Ensayo

Calculadora

EQUIPOS

Balanza analítica

Glucómetro

Tiras Reactivas

Cocineta

PROCEDIMIENTO

1. Limpiar y desinfectar el área donde se va a realizar el experimentó, equiparse

adecuadamente para evitar contaminación alguna, tener materiales y sustancias a

emplearse en óptimas condiciones.

2. La rata que se va a experimentar se le debe retirar el alimento un día antes al

experimentó.

3. Se pesa a la rata, antes de comenzar el ensayo se extrajo la sangre de la cola mediante

una ligera punción en la misma desechando las 3 primeras gotas y con la 4ta gota se

procede a la lectura de glucosa con un glucómetro.

4. Luego se administrara 0.3 ml. de tiopental sódico vía intraperitoneal para que este

ligeramente anestesiado se espera unos minutos a que haga efecto.

5. Con una cánula se administra una solución de CMC 1% (0,2 gr. de C.M.C. en 20 ml.

H2O) y metformina con cuidado sin lastimar pulmones y trato digestivo.

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6. A los 60 minutos se les administra 400 mg/mL de solución de glucosa (40%) por vía

intraperitonial.

7. Después se realizara las lecturas de glucosa a los 15, 30, 60 y 120 minutos con un

glucómetro marca NIPRO – TRUE Test con las correspondientes tiras.

GRAFICO:

Animal de experimentó

rata wistar ( 1 día antes

s in a l imentación)

Pesarlo (182 g) Real izar una pequeña punción en la

punta de la cola

Descartar las 3 primeras gts Uti l i zar la 4ta gta . Para medir glucosa en el

glucómetro

Ad. 0,3 ml .de tiopental sódico esperar unos minutos

hasta que este l igueramente anestes iado.

Ad.con una cánula la

solución de CMC 1% y

metformina

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CALCULOS

GLUOSA HIDRATADA:C6H12O6.H2O = 198 g

Concentración de Metformina = 500mg/kg

Cálculos para la glucosa al 40%

Peso de glucosa al 40%

180 𝑔 C6H12O6 100 %

𝑥 40 %

x = 92 g C6H12O6

198 𝑔 C6H12O6. H2O 180 g C6H12O6

𝑥 72 g C6H12O6

x = 79,2 g C6H12O6. H2O

Peso de glucosa a preparar en un volumen de 5 ml

79,2 𝑔 C6H12O6. H2O 1000 ml

𝑥 5 ml

x = 0,4 g C6H12O6. H2O

A los 60 min.ad.por vía intraperi toneal la

glucosa a l 40 % Después realizar las lecturas de glucosa a los 15, 30, 60 y 120

minutos con un glucómetro marca NIPRO – TRUE Test con las correspondientes ti ras

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Cálculos para Metformina

500 𝑚𝑔 Metformina 100 g 𝑥 182 g

x = 91 mg Metformina

125 𝑚𝑔 Metformina 1 ml

91 𝑚𝑔 Metformina x

x = 0,73 ml de Solución de Metformina

Preparación de Metformina suspendida en C.M.C.

C.M.C. al 1%:

0,2 gr. de C.M.C. en 20 ml. H2O

INTERPRETACION DE RESULTADOS

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58

60

62

64

66

68

Lectura

Inicial

Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3

VALORES DE GLUCOSA

VALORES DE GLUCOSA

LECTURAS VALORES DE GLUCOSA

Lectura Inicial 66 mg/dl

Lectura 1 68 mg/dl

Lectura 2 65 mg/dl

Lectura 3 59 mg/dl

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Al realizar cada determinación en los intervalos de tiempo respetivos de las lecturas de la

Glucosa concentrado en la sangre del animal se normaliza hasta llegar su valor normal (60 -135

mg/dl), demostrando que la metformina actúa como hipoglucemiante.

CONCLUSIONES

Mediante la práctica se comprueba la actividad hipoglucemiante de la metformina en una rata wistar, basándonos en una metodología sencilla que aseguran resultados confiables.

RECOMENDACIONES

Conocer y aplicar las normas de bioseguridad del bioterio.

Utilizar medidas de protección adecuada como bata, mascarilla, guantes.

Antes de proceder al experimento conocer bien como tratar al animal para evitar que nos muerda.

Al administrar el tiopental sódico hacerlo con la cantidad adecuado solo para que este

ligeramente anestesiado.

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es el mecanismo de acción de la metformina?

Reduce la glucosa en plasma postprandial y basal. Actúa por 3 mecanismos. 1: Reduce la

producción hepática de glucosa por inhibición de gluconeogénesis y glucogenolisis. 2: En el

músculo incrementa la sensibilidad a insulina y mejora de captación de glucosa periférica y su

utilización. 3: Retrasa la absorción intestinal de glucosa. No estimula la secreción de insu lina

por lo que no provoca hipoglucemia

2. ¿Cuáles son las indicaciones terapéuticas de la metformina?

Diabetes mellitus tipo 2 en especial en pacientes con sobrepeso, cuando no logran control

glucémico adecuado solo con dieta y ejercicio. En ads. en monoterapia o asociada con otros

antidiabéticos orales, o con insulina. En niños ≥ 10 años y adolescentes en monoterapia o en

combinación con insulina.

3. ¿Cuál es la posología de la metformina?

Expresado en hidrocloruro de metformina, oral. Ads., monoterapia y asoci ada con otros

antidiabéticos orales: inicial habitual 500 u 850 mg 2-3 veces/día, durante o después de

comidas y ajustar a los 10-15 días según glucemia (un aumento lento mejora la tolerancia

gastrointestinal), máx.: 3 g/día en 3 tomas; combinada con insul ina: inicial 500 u 850 mg 2-3

veces/día, ajustar dosis de insulina según glucemia. Niños ≥ 10 años y adolescentes,

monoterapia y combinada con insulina: 500 u 850 mg 1 vez/día durante o después de comidas,

ajustar a los 10-15 días según glucemia, máx.: 2 g/día en 2-3 tomas.

4. ¿Cuál es el modo de administración de la metformina?

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Se puede administrar junto con o después de las comidas. Debe continuar su dieta con una

distribución regular de la ingesta de carbohidratos durante el día. Si tiene sobrepeso, debe

continuar con su dieta hipocalórica.

5. ¿Qué contraindicaciones presenta la metformina?

Hipersensibilidad. Cetoacidosis diabética, precoma diabético. I.R. (Clcr < 60 ml/min). Patología

aguda con riesgo de alteración renal: deshidratación, infección grave, shock . Enf. aguda o

crónica con riesgo de hipoxia tisular: insuf. cardiaca o respiratoria, infarto de miocardio

reciente, shock. I.H., intoxicación alcohólica aguda, alcoholismo.

6. Indique las advertencias y precauciones de la metformina.

Interrumpir y hospitalizar de inmediato ante signos inespecíficos como calambres musculares

con trastornos digestivos, dolor abdominal y astenia grave, posible acidosis láctica. Vigilar

función renal antes de iniciar tto., mín. 1 vez/año si es normal y mín. 2-4 veces/año si nivel

creatinina ≥ LSN y en ancianos (en ellos además precaución al iniciar tto. con antihipertensivos,

diuréticos o AINE por riesgo de deterioro renal). Suspender 48 h antes de cirugía con anestesia

general, raquídea o peridural, reanudar pasadas 48 h de la mi sma o tras reanudación de

nutrición oral, y sólo si función renal normal. Suspender antes o en el momento de exploración

radiológica con medio de contraste yodado (intravascular) y no reanudar hasta pasadas 48 h,

sólo si función renal normal. Seguimiento de parámetros de crecimiento y pubertad en niños,

especialmente de 10 a 12 años.

7. ¿Qué reacciones adversas provoca la metformina?

Náuseas, vómitos, diarreas, dolor abdominal, pérdida de apetito; alteración del gusto

GLOSARIO

1. Hipoxia tisular: es afección en la cual se produce disminución del aporte de oxígeno a

un tejido, debido a la isquemia (trastorno celular causado por la disminución

transitoria o permanente del riego sanguíneo) y es sumamente peligroso, ya que

puede derivar en necrosis (muerte del tejido), daño irreversible que, a veces, es

mortal.

2. Epidural o anestesia peridural: es la introducción de anestésico local en el espacio

epidural, bloqueando así, las terminaciones nerviosas en su salida de la médula espinal

3. Glucemia: se llama así a la glucosa que circula por la sangre. Los niveles de glucemia,

en los seres humanos, deben mantenerse entre unos valores relativamente estables.

4. Glucemia basal: es la cantidad de glucosa que está presente en la sangre por la

mañana, en ayunas, después del descanso nocturno.

5. Glucemia postprandrial: es la cantidad de glucosa que puede determinarse en la

sangre después de haber comido. Los alimentos responsables de las elevaciones de la

glucemia son aquellos que contienen hidratos de carbono.

En las personas SIN DIABETES, los aumentos de glucemia postprandrial se normalizan

aproximadamente dos horas después de las comidas.

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6. Insulina: es una hormona que interviene activamente en el metabolismo de los

Hidratos de Carbono. Las células de todo el organismo pueden utilizar la glucosa como

sustrato energético gracias a la intervención de la insulina.

Esta hormona se produce en el páncreas, concretamente en las células beta

pancreáticas

7. Glucosa: es un monosacárido; se obtiene del desdoblamiento de los hidratos de

carbono. Es el nutriente más simple contenido en los alimentos glucídicos.

El cuerpo humano no lo puede crear por sí solo, llega al organismo a partir de la

alimentación (alimentos ricos en hidratos de carbono). En situaciones de necesidad o

emergencia el cuerpo obtiene glucosa a partir de la transformación de grasas o

proteínas.

La glucosa penetra en el interior de las células del cuerpo humano y es utilizada como

sustrato energético para mantener las funciones vitales.

Para que el organismo pueda aprovechar la glucosa es necesaria la intervención de la

insulina.

8. Gluconeogénesis: Es la formación de nuevas glucosas a partir de sustancias que no son

hidratos de carbono. Es una ruta metabólica anabólica que permite la biosíntesis de

glucosa a partir de precursores no glucídicos. Incluye la utilización de varios

aminoácidos, lactato, piruvato, glicerol y cualquiera de los intermediarios del ciclo de

los ácidos tricarboxílicos (o ciclo de Krebs) como fuentes de carbono para la vía

metabólica

9. Glucogenólisis: es un proceso catabólico llevado a cabo en el citosol que consiste en la

remoción de un monómero de glucosa de una molécula de glucógeno mediante

fosforilación para producir glucosa 1 fosfato, que después se convertirá en glucosa 6

fosfato, intermediario de la glucólisis. Síntesis de glucosa a partir de glucogeno. Es

antagónica de la glucogenogénesis. Estimulada por el glucagón en el hígado, epinefrina

(adrenalina) en el músculo e inhibida por la insulina.

10. Hipoglucemia: también conocido como hipoglicemia (no confundir con hiperglucemia)

es una concentración de glucosa en la sangre anormalmente baja, inferior a 50-60 mg

por 100 ml

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WEGRAFIA

ONMEDA.ES. DIABETES. DISPONIBLE EN URL: http://www.fundaciondiabetes.org/escuela/glosario.htm

VADEMECUM. METFORMINA. DISPONIBLE EN URL:

http://www.vademecum.es/principios-activos-metformina-a10ba02

FIRMAS DE RESPONSABILIDAD

KHATHERINE CAYAMBE ___________________________

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Animal de experimentación (RATA WISTAR)

Materiales y Sustancias a utilizarse

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Administración de glucosa (VÍA INTRAPERITONEAL)

Medición de glucosa con el glucómetro (NIPRO – TRUE Test) con las

correspondientes tiras)