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Experiencia Panel GI FilmArray
Dr. Carlos Valenzuela
Gatroenterologo (PUC)
Hospital Las Higueras de Talcahuano
Universidad Católica de la Santísima Concepción
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Temario
• Introducción.
• Resultados Trabajo Investigación diarrea aguda.
• Casos clínicos.
• Experiencia Calprotectina.
• Conclusiones.
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INTRODUCCION: Nuevas técnicas biología molecular
• PCR Clostridium difficile
• PCR Yersinia enterocolitica
• PCR E. coli enterohemorrágica
• PCR Salmonella
• PANEL VIRAL GASTROINTESTINAL (Adenovirus, Astrovirus, Norovirus GI, Norovirus GII y/o Rotavirus)
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Kits PCR múltiples Test FilmArray® GI
Panel xTAG® Gastrointestinal Pathogen Panel
Seeplex® Diarrhea ACE Detection
FTD Gastroenteritis
Gastroenteritis
Multiplex
Fabricante Biofire Diagnostics Inc.
Luminex Corporation
Seegene
Fast-track Diagnostics
Diagenode
Bacterias Nº 13 9 7 0 2
Virus Nº 5 4 4 5 4
Parásitos Nº 4 3 0 3 4
Total 22 16 11 8 10
Tiempo requerido
65 min 5 hrs 10 hrs 6 hrs 3 hrs
Detección automática
SI Semi automática
Semi automática
Semi automática
Semi automática
Gray et al. Epidemiol. Infect. (2014)
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Trabajo de investigación: “Caracterización etiológica y clínica de las diarreas agudas”
• Estudio de corte transversal.
• Periodo de estudio: enero 2015 a marzo 2016.
• Criterios inclusión: • Paciente adulto (≥ 18 años) con diarrea aguda de la comunidad.
• Pacientes que consulten al servicio de urgencia de la red Salud UC, o a un especialista gastroenterólogo de la Red de Salud UC.
• Indicación de estudio microbiológico de deposiciones.
Diarrea aguda: 3 o más deposiciones líquidas por día, > 24 horas y < 14 días de duración
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Indicaciones de estudio microbiológico
1. Diarrea grave
2. Fiebre
3. Disentería
4. Deshidratación
IDSA. 2013. A guide to utilization of the microbiology Laboratory for Diagnosis of Infectious Diseases. Clin Infect Dis;57(4):e22-e121
1. Diarrea grave
2. Fiebre
3. Disenteria
4. Presencia leucocitos fecales, lactoferrina o sangre oculta.
ACG. 1997. Guidelines on acute infectous diarrhea in adults. Am J Gastroenterol 92: 1962-1975.
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Resultados Panel GI FilmArray
67%
33%
Total pacientes: 199
Positivos
Negativos
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Microorganismos identificados por PCR
50%
75%
32%
15%
Bacterias Virus Parásitos
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
Microorganismos identificados
100/133
42/133
20/133
Porc
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rop
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Caso clínico 1
• Paciente sexo femenino 21 años.
• Sin antecedentes mórbidos, estudiante.
• MC: SU PUC, dolor abdominal intenso 10/10, asociado a diarrea aguda 2 días evolución 8 episodios/día sin elementos patológicos, vómitos y con fiebre hasta 38ºC. Deshidratación moderada.
• Hospitalización
• Hidratación parenteral
• Inicio tratamiento antibiótico empírico
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• ¿Hospitalización?
• Razonable, para hidratación parenteral, analgesia.
• ¿Uso de antibiótico empírico?
• Planteable por necesidad de Hospitalización.
Caso clínico 1
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• Coprocultivo: negativo.
• Parasitológico: negativo.
• Panel viral Gastrointestinal: negativo (Adenovirus, Astrovirus, Norovirus GI, Norovirus
GII y/o Rotavirus).
• Panel GI FilmArray:
• Sapovirus.
• Suspensión tto. ATB.
Caso clínico 1
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[VALOR] (18)
[VALOR] (9)
[VALOR] (9)
[VALOR] (6)
[VALOR] (2)
0%
2%
4%
6%
8%
10%
12%
14%
16%
Norovirus Sapovirus Rotavirus Astrovirus Adenovirus
Porcentajes de virus identificados
Porc
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tifi
cad
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osi
tivo
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Virus: 32%
de los
resultados
positivos
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• Paciente 28 años. Sexo masculino.
• Sin antecedentes mórbidos.
• MC: • Consulta SU, desde hace 3 días con dolor abdominal intenso 10/10 ,
acompañado de fiebre hasta 39ºC, diarrea acuosa 4 veces/día, acompañado de estrías sanguinolentas.
• Parámetros inflamatorios elevados.
• TAC abdomen y pelvis: engrosamiento difuso colon descendente y sigmoides, colitis colon izquierdo.
• Hospitalización.
Caso clínico 2
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• Colonoscopía: • Perdida transparencia vascular, eritema y erosiones colon izquierdo, biopsias.
• Colitis izquierda inespecífica.
• Biopsia: • Elementos de inflamación aguda inespecífica. Sin hallazgos de cronicidad.
• Panel GI FilmArray (a las 48 hrs de hospitalización):
• Salmonella sp.
• Coprocultivo: Salmonella typhi.
Caso clínico 2
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[VALOR] (34)
[VALOR] (28)
[VALOR] (26)
[VALOR] (17) [VALOR]
(14) [VALOR] (13) [VALOR]
(9) [VALOR]
(9) [VALOR]
(3) [VALOR]
(3) [VALOR] (1)
0%
[VALOR] (1)
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
Porcentaje de bacterias identificadas
Porc
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je d
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acte
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Bacterias:
75% de los
resultados
positivos
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Análisis resultados Salmonella sp.
Salmonella sp.: 13(+) FilmArray
Coprocultivo (+): 10/13 (76,9%)
Coprocultivo (-): 3 PCR específica: 2/2 (+).
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• Paciente 50 años, sexo femenino.
• Sin antecedentes mórbidos, arsenalera en Hospital Público.
• Antecedente ITU tratada con ciprofloxacino.
• MC:
• Diarrea líquida de 1 semana evolución, 14 episodios/día, sin elementos patológicos, sin fiebre, con leve dolor abdominal.
• Deshidratación leve.
• Hospitalización.
Caso clínico 3
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• PCR Clostridium difficile: Positivo, Ribotipo 027(+).
• Panel GI FilmArray:
• Clostridium difficile
• Coprocultivo: negativo.
• Parasitológico: negativo.
Caso clínico 3
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[VALOR] (34)
[VALOR] (28)
[VALOR] (26)
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(9) [VALOR]
(9) [VALOR]
(3) [VALOR]
(3) [VALOR] (1)
0%
[VALOR] (1)
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
Porcentaje de bacterias identificadas
Porc
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• ¿Como se comporta FilmArray en relación con PCR específica para Clostridium difficile?
Caso clínico 3
• Clostridium difficile: 13 (+) FilmArray. PCR específica 7/8 positivas.
• Clostridium difficile: 22 PCR específica (-) FilmArray 22/22 (-).
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• Paciente 58 años, sexo masculino.
• Antecedente de HTA y cirrosis hepática Child C compensado.
• MC: • Consulta Gastroenterologo de la Red, por cuadro de diarrea 10 días evolución,
4 veces/día, sin elementos patológicos, sin fiebre, acompañado de dolor abdominal moderado.
• Sin deshidratación.
• Se decide estudio etiológico.
Caso clínico 4
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• Panel GI FilmArray:
• Cryptosporidium
• Coprocultivo: negativo.
• Parasitológico:
• Ooquistes Cryptosporidium
• Tratamiento con azitromicina:
• Buena respuesta clínica.
Caso clínico 4
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[VALOR] (12)
[VALOR] (7)
0% 0% 0%
1%
2%
3%
4%
5%
6%
7%
8%
9%
10%
Cryptosporidium Giardia lamblia Entamoeba histolytica
Cyclospora cayetanensis
Porcentajes de parásitos identificados Po
rcen
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par
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Parásitos:
15% de los
resultados
positivos
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• Cryptosporidium: 12 (+) FilmArray Parasitológico 10/12 (+).
• Giardia: 7 (+) FilmArray Parasitológico: 1/6 (+).
Caso clínico 4
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• Paciente 20 años, sexo masculino.
• Sin antecedentes mórbidos, estudiante.
• MC: • Consulta en SU por Diarrea 12 días evolución, con sangre en deposiciones,
promedio de 14 deposiciones/día, acompañado de fiebre, dolor abdominal, deshidratación.
• Recibe tratamiento con ciprofloxacino ambulatorio, con respuesta parcial.
• Hospitalización: • Hidratación.
• Alta sospecha de ¿EII?, ¿colitis psudomembranosa?.
Caso clínico 5
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• Plan: • Colonoscopía ….
• Panel GI FilmArray: • Campylobacter sp.
• Tratamiento: • Azitromicina • Buena respuesta, cede diarrea y mejoría clínica.
• Coprocultivo: negativo. Tinción Hucker (-).
• Cultivo especial para Campylobacter: Negativo.
• Parasitológico: negativo.
Caso clínico 5
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[VALOR] (34)
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[VALOR] (26)
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(9) [VALOR]
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Porcentaje de bacterias identificadas
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Bacterias:
75% de los
resultados
positivos
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Campylobacter: 27 (+) FilmArray Cultivo específico (+): 13/20 (65%)
PCR específica (+): 6/6 (100%) Tinción Hucker (+): 0/27
Caso clínico 5
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• Paciente 23 años, sexo femenino.
• Antecedente psoriasis.
• MC: • Consulta en SU por diarrea 10 días de evolución, con sangre y mucosidad,
promedio de 7 deposiciones/día, acompañado de dolor abdominal.
• Deshidratación leve.
• Recibió tratamiento antibiótico empírico con ciprofloxacino y metronidazol.
• Hospitalización.
Caso clínico 6
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• Panel GI FilmArray: • Negativo.
• Coprocultivo: negativo.
• Parasitológico: Negativo.
• Colonoscopía:
Caso clínico 6
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Caso clínico 6
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• Resultado negativo: Pensar en causa no infecciosa de diarrea.
Caso clínico 6
• 66 muestras negativas por FilmArray: todas negativas por coprocultivos.
• De los 66 pacientes con resultado negativo en al menos 29 de ellos se
identificó una causa no infecciosa de diarrea. • Colitis isquémica, EII, Amiloidosis, Por sales biliares, Funcional, Enteropatía
diabética, etc.
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Sensibilidad de las distintas técnicas
Adaptado de Platt-Mills et al. Nature 2013; 6(5)
Límite analítico Límite clínico
Detección por cultivo
Seve
rid
ad d
e en
ferm
edad
Examen optimo
Detección por PCR
Cantidad de patógenos en deposiciones
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Pacientes calprotectina
Selección pacientes sin comorbilidad y Panel (+)
Calprotectina basal
Repetir Panel GI Film Array y calprotectina (6-8 semanas).
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Pacientes Calprotectina
Paciente Resultado PCR FilmArray Calprotectina
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366
2 ECEP, Giardia lamblia >600
3 Sapovirus 544
4 Campylobacter, Clostridium difficile >600
5 Norovirus GI/GII, ECEA <19,5
6 Salmonella >600
7 Campylobacter >600
8 ECET, ECST 353
9 Salmonella, Norovirus >600
10 C. Difficile 62,2
11 Cryptosporidium 276
12 Salmonella >600
Promedio 435
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Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366
2 ECEP, G. lamblia >600
7 Campylobacter >600
8 ECET, ECST 353
9 Salmonella, Norovirus >600
Promedio
Controles 100% asintomáticos
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Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366 Negativo 187
2 ECEP, G. lamblia >600
7 Campylobacter >600
8 ECET, ECST 353
9 Salmonella, Norovirus >600
Promedio
Controles 100% asintomáticos
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Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366 Negativo 187
2 ECEP, G. lamblia >600 ECEP, G. lamblia, 287
7 Campylobacter >600
8 ECET, ECST 353
9 Salmonella, Norovirus >600
Promedio
Controles 100% asintomáticos
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Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366 Negativo 187
2 ECEP, G. lamblia >600 ECEP, G. lamblia, C. difficile 287
7 Campylobacter >600
8 ECET, ECST 353
9 Salmonella, Norovirus >600
Promedio
Controles 100% asintomáticos
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Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366 Negativo 187
2 ECEP, G. lamblia >600 ECEP, G. lamblia, C. difficile 287
7 Campylobacter >600 ECEP < 19,5
8 ECET, ECST 353
9 Salmonella, Norovirus >600
Promedio
Controles 100% asintomáticos
![Page 41: Experiencia Panel GI FilmArray · 2017-06-24 · •Colitis izquierda inespecífica. •Biopsia: •Elementos de inflamación aguda inespecífica. Sin hallazgos de cronicidad. •Panel](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022050520/5fa34e23bdedf41eaa0e8d08/html5/thumbnails/41.jpg)
Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366 Negativo 187
2 ECEP, G. lamblia >600 ECEP, G. lamblia, C. difficile 287
7 Campylobacter >600 ECEP < 19,5
8 ECET, ECST 353 ECEA, ECST < 19,5
9 Salmonella, Norovirus >600
Promedio
Controles 100% asintomáticos
![Page 42: Experiencia Panel GI FilmArray · 2017-06-24 · •Colitis izquierda inespecífica. •Biopsia: •Elementos de inflamación aguda inespecífica. Sin hallazgos de cronicidad. •Panel](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022050520/5fa34e23bdedf41eaa0e8d08/html5/thumbnails/42.jpg)
Paciente Resultado PCR inicial
Calprotectina
inicial PCR control
Calprotectina
control
1 Campylobacter, Cryptosporidium 366 Negativo 187
2 ECEP, G. lamblia >600 ECEP, G. lamblia, C. difficile 287
7 Campylobacter >600 ECEP < 19,5
8 ECET, ECST 353 ECEA, ECST < 19,5
9 Salmonella, Norovirus >600 ECEA, ECEP 324
Promedio 167
Controles 100% asintomáticos
![Page 43: Experiencia Panel GI FilmArray · 2017-06-24 · •Colitis izquierda inespecífica. •Biopsia: •Elementos de inflamación aguda inespecífica. Sin hallazgos de cronicidad. •Panel](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022050520/5fa34e23bdedf41eaa0e8d08/html5/thumbnails/43.jpg)
Platt-Mills et al. Nature 2013; 6(5)
Conclusiones
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• Necesidad de hospitalización.
• Inmunodeprimidos.
• Cuadro severo.
• Disentería.
• Diarrea del viajero.
• Prolongada.
• EII.
• Diarrea crónica.
• Intrahospitalaria.
Conclusiones
¿Cuándo solicitar estudio etiológico por Panel GI FilmArray?
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• Rapidez en obtener resultado.
• Amplia cobertura de agentes infecciosos.
• Buena sensibilidad y especificidad.
• Uso criterioso de las nuevas tecnologías, son un gran apoyo, pero se debe considerar el contexto clínico del paciente.
Conclusiones
Principales ventajas
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MUCHAS GRACIAS Dr. Carlos Valenzuela
Gatroenterologo (PUC)
Hospital Las Higueras de Talcahuano
Universidad Católica de la Santísima Concepción
Agradecimientos:
Dra. Paulette Legarraga, Dr. Arturo Peña, Dr. Alex Arenas, Enrique Geoffroy, Carolina Miranda, Andrea Vera, Dra. Patricia García, Dr. Manuel Álvarez.