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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SINALOA
FACULTAD DE MEDICINA
MAESTRÍA EN SALUD, SEGURIDAD E HIGIENE
LABORAL SUSTENTABLE
TESIS
GENOTOXICIDAD EN HUMANOS POR INTOXICACIÓN
CON PLAGUICIDAS EN EL VALLE DE CULIACAN
PRESENTA:
Marco Antonio Valenzuela Mejía
TUTOR: D. en C. Blanca Rosa Noriega Ortega
ASESOR: MC e IQ. Rafael de Jesús Trujillo Preciado
LECTORES: Dr. en C. Luis Nabor Alejo Armenta
MC Dra. Paula Flores Flores
CULIACÁN, SINALOA OCTUBRE DE 2011
i
Contenido
DEDICATORIA ............................................................................................................... iv
TITULO:............................................................................................................................ 1
MARCO TEÓRICO: ........................................................................................................ 1
ANTECEDENTES: ........................................................................................................ 15
JUSTIFICACIÓN ........................................................................................................... 23
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ......................................................................... 25
OBJETIVOS: .................................................................................................................. 25
Objetivo General:....................................................................................................... 25
Objetivos específicos: ............................................................................................... 25
HIPÓTESIS: ................................................................................................................... 26
Hipótesis de Trabajo (HT): ........................................................................................ 26
METODOLOGÍA ............................................................................................................ 26
Obtención y tratamiento de las muestras sanguíneas: ......................................... 27
Obtención y tratamiento de las muestras de mucosa oral: ................................... 27
Tinción con anaranjado de acridina: .................................................................... 28
Lectura de las laminillas:....................................................................................... 30
Tipo de estudio: ......................................................................................................... 31
Universo de estudio: ................................................................................................. 32
Criterios para el Personal Ocupacionalmente Expuesto: ...................................... 32
Selección: ............................................................................................................... 32
Inclusión: ................................................................................................................ 32
Exclusión: ............................................................................................................... 33
ii
Eliminación: ............................................................................................................ 33
Criterios para el Grupo Testigo: ............................................................................... 34
Selección: ............................................................................................................... 34
Inclusión: ................................................................................................................ 34
Exclusión: ............................................................................................................... 34
Eliminación: ............................................................................................................ 34
Definición operacional de las variables ................................................................... 35
DISEÑO ESTADÍSTICO ............................................................................................... 38
Hipótesis Cero (H0): .................................................................................................. 40
RECURSOS HUMANOS .............................................................................................. 40
RECURSOS MATERIALES ......................................................................................... 41
Equipo. ....................................................................................................................... 41
Material. ...................................................................................................................... 41
Reactivos.................................................................................................................... 42
CRONOGRAMA DE TRABAJO ................................................................................... 43
RESULTADOS. ............................................................................................................. 44
DISCUSIÓN ................................................................................................................... 63
CONCLUSIONES.......................................................................................................... 67
SUGERENCIAS: ........................................................................................................... 68
BIBLIOGRAFIA .............................................................................................................. 69
BIBLIOGRAFÍA .............................................................................................................. 69
ANEXOS ........................................................................................................................ 76
iii
Carta de consentimiento para toma de muestra sanguínea con fines de investigación .............................................................................................................. 78
Instrumento para la obtención de información de trabajadores del campo que ha utilizado plaguicidas. ................................................................................................. 79
Glosario de abreviaturas........................................................................................... 84
iv
DEDICATORIA
Dedico el presente trabajo de tesis a las personas que me alentaron y me
brindaron su apoyo incondicional en lo anímico, académico, económico, que me
dieron los conocimientos y fortaleza para la culminación de este proyecto. Para
Sugey García Sandoval, mi esposa, las palabras que utilice como agradecimiento
o halagos hacia ella son poca cosa comparado con el apoyo brindado. Hoy
confirmo una vez más que recibí una bendición al tenerla como mi esposa.
Agradecerle infinitamente a mis pequeños Valeria y Marco Antonio, el
tiempo no compartido con ellos, el cual sé que no recuperaré pero en cambio les
puedo brindar la enseñanza de superación para que en un futuro no muy lejano
esos pequeños superen a su padre en sabiduría y con eso brindarles la mejor
riqueza que es la educación que en estos momentos ellos me permitieron recibir.
También dedico este proyecto a dos personas que sé que aunque no están
presentes en cuerpo, nos observan desde el cielo (así lo siento). Uno de ellos es
mi padre Florencio Valenzuela Verdugo y mi inseparable y colega sobrino Dr.
Miguel Ángel Valenzuela Figueroa. Sé que están con Dios llenos de alegría por
este logro que también es de ustedes.
v
AGRADECIMIENTO
Cómo no agradecerle a la persona que me dio la oportunidad, junto con
Dios de ofrecerme la vida, no tengo cómo agradecer a mi madre sus esfuerzos en
este y todos los procesos de mi vida, de los cuales ella siempre participa con su
infinito amor.
A mis queridos hermanos, si es cierto que existe otra vida quisiera tenerlos
a todos como mis hermanos nuevamente, le agradezco mucho a Dios la
oportunidad de formar parte de la familia tan maravillosa y noble como la familia
Valenzuela Mejía.
No puedo dejar de agradecer a la otra familia García Sandoval, a la cual le
agradezco de todo corazón la oportunidad brindada para formar parte de ella. A
mis suegros Ramona y José Abel, gracias por traer al mundo a esa persona que
medio dos sentidos de vida. Agradezco infinitamente a mis cuñadas y cuñados,
que Dios los Bendiga a todos, nuevamente agradecerles el apoyo brindado.
No existen formas terrenales de agradecimiento por el apoyo ofrecido por
mi tutora de Tesis: Dra. en C. Blanca Rosa Noriega Ortega. y por parte de mis
Asesores. MC. IQ. Rafael de Jesús Trujillo Preciado y MC. Dr. Jesús Ramón
Acosta Amador. Qué decir de ellos: son excelentes personas y seres humanos, le
agradezco a Dios porque me brindó la oportunidad de conocerlos y que me
guiaran por este camino, que Dios los bendiga y conserve por mucho tiempo para
vi
poder agradecer de alguna forma lo enseñado, quiero agradecer su tiempo,
paciencia y sabiduría compartida con su alumno ahora amigo incondicional y
sobre todo sus consejos que me hicieron crecer tanto en lo académico y como ser
humano.
Mi máximo agradecimiento al grupo de trabajo que se conformó para la
realización de esta tesis, ya que sin la conformación de este grupo
multidisciplinario hubiese sido difícil su realización, destacando el trabajo en
equipo, bien coordinado por cada uno de los participantes.
Agradezco a la Dirección General de Investigación y Posgrado de la
Universidad Autónoma de Sinaloa, por el apoyo brindado para la realización de
esta tesis, así como a la Asociación de Agricultores del Rio de Culiacán, y en
especial al Ing. Fernando Zamudio Jiménez que por medio de su persona fue
posible obtener los permisos para las tomas de muestra correspondientes en los
diversos campos agrícolas incluidos en este trabajo. A la Facultad de Medicina y
Maestros que participaron con diferentes formas de apoyo en la realización de
este trabajo M. C. Ernesto Armenta Aispuro, QFB. José Ángel Cervantes Pompa y
Dr. Rafael Valdez Aguilar; al Centro de Investigaciones Biomédicas de Occidente,
con sede en Guadalajara, Jalisco, donde nos brindaron apoyo técnico inicial de la
metodología aplicada en este trabajo, en especial al Dr. en C. Guillermo M. Zúñiga
González.
vii
Por último, quiero agradecer también a mis compañeros de clases por
compartir conmigo sus conocimientos, gracias por cruzarse en mi camino y
ofrecerme su amistad, Dios los bendiga a ustedes y su familia.
viii
En la infinidad de la vida donde me encuentro, todo es perfecto, pleno
y completo y, sin embargo la vida siempre cambia. No hay principio ni fin,
solo un constante ciclaje y reciclaje.
Louise L. Hay
1
TITULO:
GENOTOXICIDAD EN HUMANOS POR INTOXICACIÓN
CON PLAGUICIDAS EN EL VALLE DE CULIACAN
MARCO TEÓRICO:
A través de los años se ha relacionado los problemas de intoxicaciones
agudas por plaguicidas con inhibición de la respuesta inmune, estrés oxidativo,
daño neurológico y genotoxicidad, así como daño a la respuesta inmunológica en
estudios en animales de laboratorio, pero existen muy pocas investigaciones
sobre los efectos crónicos en animales y humanos.
Los plaguicidas, a pesar de las medidas, controles y legislación para su
uso, siguen siendo utilizados de manera importante; el crecimiento poblacional y la
falta de alimentos de origen vegetal hacen cotidiano el manejo indiscriminado de
los agroquímicos, así como las plagas se hacen más resistentes a estos
productos, lo que hace que se realicen mezclas a partir de productos conocidos
que potencialicen su efecto (generando nuevas presentaciones comerciales) o se
comercialicen nuevas sustancias. Aunado esto al uso indiscriminado, a la
alteración de las dosis adecuadas, todo esto ha generado una serie de
repercusiones a la salud del ser humano: desde intoxicaciones agudas,
2
enfermedades dermatológicas, respiratorias y la alteración de la susceptibilidad de
los humanos. (1; 2; 3; 4; 5; 6)
Los plaguicidas son de los grupos de agentes químicos más ampliamente
utilizados por el hombre, tanto para proteger de organismos nocivos, la
producción y calidad de las cosechas, como para el control de vectores y plagas
importantes en la salud pública. Estas sustancias han sido consideradas como
mutágenos potenciales, por contener ingredientes con propiedades para provocar
cambios en el ácido desoxirribonucleico (ADN). (7)
La Organización para la Alimentación y la Agricultura (FAO) de la
Organización de las Naciones Unidas, define a los plaguicidas como: cualquier
sustancia o mezcla de sustancias destinadas a prevenir, destruir o controlar
cualquier plaga, incluyendo vectores de enfermedades humanas o de los
animales, las especies no deseadas de plantas o animales que causen perjuicios
o que interfieren de cualquier otra forma en la producción, elaboración,
almacenamiento, transporte o comercialización de: alimentos, productos agrícolas,
madera y sus derivados o alimentos para animales, para combatir insectos,
arácnidos u otras plagas en o sobre sus cuerpos. (7; 8; 9)
El primer uso intencional de un plaguicida se remonta a 2.500 años a.c.
cuando los sumerios cubrían sus cuerpos con compuestos azufrados para repeler
insectos y ácaros. Los griegos y los romanos usaron diferentes sustancias
químicas para controlar plagas de insectos, principalmente compuestos azufrados
3
y extractos vegetales. Hacia el año 1000 a.c. Homero refirió la utilidad del sulfuro
como un agente plaguicida.
Nuevas estrategias se inician de manera más rigurosa y sistémica recién en
el siglo XIX, mediante la aplicación de elementos naturales como el azufre, cobre,
arsénico y fósforo, de los cuales se descubrió su acción plaguicida. Se destacan
productos de empleo masivo como el verde de París y la mezcla de Bordeaux, la
cual actualmente continúa siendo un fungicida empleado en diversos cultivos.
También en este siglo comienza el uso de los primeros plaguicidas orgánicos
como los nitrofenoles, clorofenoles, creosota, naftaleno y aceites derivados del
petróleo. (8)
La génesis de la era moderna de los plaguicidas se inicia entre 1930 y 1940
como resultado de investigaciones enfocadas al desarrollo de armas químicas que
originalmente fueron probadas en insectos. Uno de los primeros compuestos, el
diclorodifeniltricloroetano (DDT) fue sintetizado por Zeidler en 1874, y sus
propiedades insecticidas fueron descritas por Paul Hermann Müller hacia 1939. El
DDT se utilizó por primera vez durante la segunda guerra mundial para proteger a
los soldados estadounidenses contra enfermedades transmitidas por vectores y se
comercializó en los E.U.A. en 1945.
El DDT fue un insecticida ampliamente utilizado en los países de América
Latina como parte de las campañas contra el control de paludismo y malaria, el
DDT es una mezcla de compuestos organoclorados. En los Estados Unidos de
4
Norte América desde el principio de la década de los 70’s se prohibió debido en
gran parte al efecto devastador en varias especies animales y vegetales.
Aún cuando el uso DDT se suspendió en México en 1999, los estudios
avaluados reportan niveles importantes de su principal metabolito, en muestras
biológicas de suero, tejido adiposo y leche materna de poblaciones
ocupacionalmente expuestas. Así mismo, existen evidencias sobre daño a la
salud, relacionado con el área reproductiva masculina, la lactancia materna y más
recientemente daño a nivel celular, así como desarrollo psicomotor de niños
expuestos in útero. Aún cuando existen muchas lagunas, acerca de otros efectos
adversos a la salud relacionada con la exposición a DDT o sus metabolitos, la
experiencia lograda hasta ahora, debe ser tomada en México y el resto de
Latinoamérica, para que considerando el principio precautorio se legisle sobre el
uso DDT y otros contaminantes orgánicos persistentes que tienen actividad y
características similares. (10)
La pujante industrialización, los intereses económicos de los grandes
productores de los plaguicidas, así como la necesidad de controlar químicamente
las plagas, favoreció su fabricación y consumo a escala mundial. Al paso de los
años se ha hecho evidente los efectos indeseables de los plaguicidas sobre la
salud del ser humano y sobre el medio ambiente. (9)
Los plaguicidas se clasifican en función de algunas de sus características
principales, como son la toxicidad aguda, la vida media, la estructura química y su
5
uso. En 1978, la Organización Mundial de la Salud (OMS) estableció una
clasificación basada en su peligrosidad o grado de toxicidad aguda, definida ésta
como la capacidad del plaguicida de producir un daño agudo a la salud a través de
una o múltiples exposiciones en un periodo de tiempo relativamente corto.
La toxicidad se mide a través de la dosis letal media (DL50) o de la
concentración letal media (CL50), dependiendo si estamos hablando de la cantidad
de sustancia efectiva que penetra en el organismo del afectado o la cantidad de
sustancia presente en el ambiente en el cual desarrolla su actividad, en cantidad
tal que puede provocar la muerte del 50% de los individuos expuestos. Ambos
parámetros son afectados por múltiples factores como la presentación del
producto (sólido, gel, líquido, gas, polvo), la vía de entrada (oral, dérmica,
respiratoria), la temperatura, la dieta, la edad, el sexo, etc.
Desde el punto de vista de la toxicidad aguda, los plaguicidas se clasifican
de acuerdo con su dosis letal media (DL50) indicada en miligramos de la sustancia
activa por kilogramo de peso corporal de los animales de prueba, según su DL50,
los plaguicidas se agrupan como se aprecia en la tabla siguiente:
Clasificación toxicológica de plaguicidas
Clase DL50 Color de identificación según
NOM-045-SSA1-1993 (11)
Extremadamente tóxicos Menor de 5 mg/Kg Pantone Rojo (199-C)
Altamente tóxicos De 5 a 50 mg/Kg Pantone Amarillo (C)
Medianamente tóxicos De 50 a 500 mg/Kg Pantone Azul (293-C)
Poco tóxicos De 500 a 5000 mg/Kg Pantone Verde (347-C)
Prácticamente no tóxicos Mayor de 500 mg/Kg No definido.
6
Esta clasificación es útil para informar sobre el riesgo de intoxicación
aguda, pero no da indicación alguna de otros problemas que puedan aparecer
como consecuencia de la absorción continuada de pequeñas dosis durante
períodos largos. (12)
De acuerdo a su estructura química, los plaguicidas se clasifican en
diversas familias que incluye desde los compuestos organoclorados y
organofosforados hasta compuestos inorgánicos.
Los organoclorados (OC) Su estructura química corresponde a de los
hidrocarburos clorados. Su vida media es de 5 años, aunque varía según el
producto; por ejemplo para el beta hexaclorociclohexano es de 3 años, para el
aldrín de 6 años y para el DDT es de 30 años. El compuesto como tal o sus
metabolitos son contaminantes ubicuos de varios tejidos en humanos y de los
mamíferos en general. Productos representativos de este grupo son el DDT, el
aldrín, el dieldrín, y el endrín, el endosulfán y el lindano.
Los compuestos organosfosforados (OF) son los plaguicidas más
ampliamente utilizados, son esteres, amidas o tioles derivados de los ácidos
fosfóricos, fosfónicos y fosforoicos. Se descomponen con mayor facilidad y se
degradan por oxidación e hidrólisis, dando origen a productos solubles en agua,
tentativamente menos persistente y poco acumulables en el organismo humano.
Pertenece en este grupo el paration, el malatión, el diazinón, el clorpirifós y el
diclorvos.
7
Los carbamatos (C) pueden ser de tres tipos principales: a) derivados de
éteres carbamatados, comúnmente usados como insecticidas; b) derivados del
ácido tiocarbámico, utilizado como fungicida y c) carbamatos propiamente dichos
que se emplea como herbicidas. Todos ellos son relativamente inestables. Entre
los más comunes se encuentran el lannate, el carbarilo y sevin.
Las piretrinas (P) son plaguicidas obtenidos por secado, molienda y
pulverización de la flor del crisantemo. Las principales piretrinas son las cinerinas I
y II, las jasmilinas I y II y las piretrinas I y II, consideradas estas últimas como las
de efecto más potentes. (7; 8; 9)
En la República Mexicana se utiliza el 60% de los 22 plaguicidas
clasificados como perjudiciales para la salud y el ambiente, el 42% de los cuales
se fabrican en el país. Asimismo se emplean 30 plaguicidas de 90 que han sido
cancelados o restringidos en EUA (INEGI 1998). Según la Organización Mundial
de la Salud, el 80% de los casos de intoxicación por plaguicidas registrados cada
año en el mundo ocurre en países en vía de desarrollo. En México se emplean
260 marcas de plaguicidas, de las cuales 24 están prohibidas y 13 restringidas,
siendo las principales causas de intoxicación las deficientes medidas de control y
previsión. Los estados con mayor uso de plaguicidas son: Sinaloa, Veracruz,
Jalisco, Colima, Sonora, Baja California, Tamaulipas, Michoacán, Tabasco, Estado
de México, Puebla y Oaxaca, siendo aproximadamente el 80% de los plaguicidas
totales lo que se aplica en esta región. (7)
8
Para efecto de este trabajo, los marcadores biológicos o biomarcadores son
los cambios bioquímicos, fisiológicos o morfológicos medibles que se producen en
un sistema biológico y se interpretan como reflejo o marcador de la exposición a
un agente tóxico. Los biomarcadores suelen utilizarse como indicadores del
estado de salud o de riesgo a enfermedades y se emplean en estudio tanto in vitro
como in vivo que pueden incluir a seres humanos. Los marcadores biológicos se
clasifican por lo general en tres tipos concretos: de exposición, de efecto y de
susceptibilidad, son una herramienta útil para evaluar el riesgo potencial de las
diferentes exposiciones ambientales.
Los biomarcadores utilizados en el biomonitoreo de poblaciones
ocupacionalmente expuestas a plaguicidas son: (4; 5; 13)
Aberraciones Cromosómicas (AC) detecta cambios citológicamente
identificables que afecta al número o las estructuras de los cromosomas que
constituye el cariotipo de la especie y pueden ser observados al microscopio
óptico. Las aberraciones estructurales han sido consideradas como marcadores
de riesgo.
Micronúcleos (Mns) son de los biomarcadores de genotoxicidad más
frecuentemente empleados en mamíferos y en la actualidad se utilizan para la
evaluación a exposiciones ocupacionales o mutágenos. Los micronúcleos son la
expresión en interfase de los fragmentos acéntricos, que al no tener centrómeros
9
no se incluirán en los núcleos hijos durante la división celular, ya que no
interactúan con las fibras del huso mitótico en anafase; estos fragmentos se
rodean de membrana nuclear y aparecen como pequeños núcleos en interfase.
Mientras que cuando el daño se da en el centrómero, alterando el cinetocoro o
bien las fibras del huso acromático, se produce un desequilibrio en la distribución
de los cromosomas, provocando que quede fuera de la cinética normal de la
anafase y se rodeen de envoltura nuclear, como ocurre con los fragmentos
acéntricos, originando también micronúcleos aunque de mayor tamaño. Este
ensayo puede realizarse utilizando células de descamación de la vejiga urinaria y
de las mucosas oral y nasal.
Se pueden observar a continuación imágenes comparativas de una célula
normal con respecto a micronucleada y binucleada (Figuras. 1, 2, 3).
Figura 1. Célula Normal Figura 2. Célula Micronucleada
Figura 3. Célula Binucleada
10
Cariorrexis (CR): Es la fragmentación de la
cromatina y su distribución por el citoplasma como un
resultado de la desintegración nuclear.
Cariolisis (CL): Proceso de degeneración
nuclear que consiste en la disolución de la cromatina
del núcleo en el
citoplasma.
Cromatina Condensada (CC) en esta se
puede apreciar diferentes divisiones celulares en
las cuales se puede generar alguna alteración del
mensaje de ADN.
Broken Egg: Es una alteración
donde el núcleo se observa como huevo
estrellado.
Figura 4. Cariorrexis
Figura 5. Cariolisis
Figura 6. Cromatina Condensada
Figura 7. Huevo Estrellado
11
Intercambio de cromátides hermanas (SCE) son eventos que se
producen durante la fase de síntesis. Representa el intercambio simétrico entre los
homólogos, de productos de replicación. Ocurre sin pérdida del ADN ni cambios
en la morfología cromosómica y es posible detectarlos en metafase obtenida de
cultivos adicionados con bromodesoxiuridina que es un análogo de la base
nitrogenada de la timina del ADN. Este ensayo se utiliza en investigaciones sobre
monitoreo biológico de individuos expuestos a agentes genotóxicos potenciales o
conocidos.
Ensayo cometa (EC) es un biomarcador rápido, simple, visual y sensible,
conocido como electroforesis unicelular alcalina, que se utiliza para medir y
analizar rupturas en el ADN. Detecta diferencias intracelulares y daño en los
procesos de reparación de virtualmente todas las células. La capacidad de
migración del ADN depende de la cantidad de rompimientos producidos por el
agente en cuestión de esta manera cada célula lesionada tiene la apariencia de un
cometa con una cabeza y una cola brillante y fluorescente; las células que no han
sido dañadas aparecen con núcleos intactos, sin cola. (7; 14)
Unos de los aspectos que mayormente se enfatizan en muchos de los
análisis sobre plaguicidas, es el riesgo en su manejo. Su manejo inadecuado
puede resultar en severas intoxicaciones agudas; en algunos casos, efectos
adversos a la salud pueden también resultar en exposiciones a bajas
concentraciones pero a largo plazo. La exposición ocupacional ocurre en
trabajadores involucrados en la manufactura y formulación de plaguicida y entre
12
los usuarios de la salud pública. En la agricultura, las exposiciones pueden ocurrir
entre granjeros y aquellas personas dedicadas a la aplicación de los plaguicidas.
La población en general puede estar expuesta a plaguicidas desviados por el
viento o a residuos en alimentos y en agua utilizada para beber. (15)
Los problemas se agravan en países donde no existe una vigilancia estricta
de leyes y reglamentos de protección ambiental y por ignorancia – complicidad de
las personas que comercializan pesticidas, éstos son adquiridos sin la asesoría
técnica para el control y evaluación de las aplicaciones que en ocasiones se
realizan con limitantes técnicos que impactan al ecosistema y la salud de quienes
laboran en el campo y en los consumidores de alimentos contaminados. (16)
Existen más de 200 sustancias químicas de plaguicidas organofosforados
que se emplean principalmente como insecticidas y nematicidas, sin embargo,
algunas de ellas se utiliza también como herbicidas, fungicidas, plastificantes,
fluidos hidráulicos (en la industria) y como arma de guerra química. Como ejemplo
de uso en el Estado de California, EUA, la utilización de clorpirifos, ocupa el lugar
14 dentro de los pesticidas usados. En contraste, el empleo de compuestos
organofosforados (COF) en Sinaloa se ubica en el primer lugar. Siendo Sinaloa un
estado líder nacional en alimentos, se encuentra con una superficie agrícola de
más de 850 mil hectáreas de riego y más de 500 mil de temporal en la que se
aplican en promedio 7 a 8 mil toneladas anuales de plaguicidas, con lo que se
produce un importante desecho tóxico, 500 toneladas anuales de envases vacíos
de plaguicidas; los agroquímicos son contaminantes de fuentes acuíferas.
13
En un estudio de vigilancia epidemiológica realizado en 2011 por El
Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica (SINAVE), se documentó un gran
número de pesticidas en agua, sedimentos y en los tejidos de camarón. (17)
Todo lo anterior ha puesto en riesgo la salud de los jornaleros agrícolas y
del resto de la población, por lo que se creó en Febrero de 1994 en Sinaloa, el
Comité Estatal de Seguridad para el manejo y uso de Plaguicidas, Fertilizantes y
Sustancias Tóxicas (COESPLAFEST). En México, la autoridad que regula a los
plaguicidas es la Comisión Intersecretarial para el Control del Proceso y Uso de
Plaguicidas, Fertilizantes y Sustancias Tóxicas (CICOPLAFEST). Fue creada a
través del decreto publicado el día 15 de Octubre de 1987. En la base de datos del
Sistema Único Automatizado de Vigilancia Epidemiológica (SUAVE), se
registraron durante los años 2009 y 2010: 168 y 144 casos de intoxicación por
plaguicidas, respectivamente. Mientras que en el presente año hasta el día 28 de
julio del 2011 se encuentran registrados un total de 107 casos. (17)
El crecimiento de la población humana requiere de una mayor capacidad de
producción, almacenamiento y protección de los alimentos, así como para la
protección de la salud en enfermedades transmitidas por insectos y conservación
de áreas verdes, lo que convierte el uso de los plaguicidas en más frecuente y
necesario. Las plagas se vuelven cada vez más resistentes y en consecuencia
aumenta la dosis mínima tolerada por el hombre, el uso indiscriminado de estos
compuestos puede ocasionar problemas a la salud con el consumo de productos
14
contaminados, así como el contacto durante su manejo y aplicación. Se relaciona
el uso de plaguicidas con inmunodepresión, infecciones oportunistas,
autoinmunidad y cáncer. (17; 18; 19; 20; 21; 22; 23; 24; 25; 26) (27; 28)
En nuestra legislación de la Secretaría de Trabajo y Prevención Social ante
el Comité Consultivo Nacional de la Normatización de Seguridad, Higiene y Medio
Ambiente Laboral se encuentran las siguientes Normas Oficial Mexicanas: NOM-
005-STPS-1998, Relativa a las Condiciones de Seguridad e Higiene de los
Centros de Trabajo para el manejo, transporte y almacenamiento de sustancias
químicas peligrosas (29), así como NOM-017-STPS-2008, Equipo de Protección
Personal, selección, uso y manejo de los centros de trabajo. (30) La NOM-044-
SSA1-1993, establece los requisitos que deben cumplir los envases y embalajes
que se utilizan para contener plaguicidas. (31) La NOM-052-FITO-1995, establece
los requisitos y especificaciones fitosanitarias para presentar el aviso de inicio de
funcionamiento por las personas físicas o morales que se dediquen a la aplicación
aérea de plaguicidas agrícolas, a fin de minimizar los riesgos a la salud de los
trabajadores ocupacionalmente expuestos y de la población en general, además
de prevenir los efectos adversos al ambiente y garantizar la integridad de los
productos, durante su manejo, almacenamiento y transporte. (32)
Este trabajo valora la genotoxicidad en los trabajadores agrícolas, para
prevenir las intoxicaciones a largo plazo, por medio del control especializado de
salud y mejorar la productividad.
15
ANTECEDENTES:
La Bioquímica es parte fundamental de la ciencia para conocer y descifrar
la función, composición de las células, así como el tipo de especie química y los
mecanismos de acción que intervienen en ellas, como son: almacenamiento,
replicación y transferencia de información genética. Las reacciones donde
producen metabolitos son casi idénticas, aun así no todas la células contienen o
expresan la misma información, de hecho las diferencias y similitudes entre ellas
se han utilizado para la aparición de nuevas especies.
La Toxicología Ambiental es una ciencia apoyada en varias especialidades
relacionadas con la ciencia médica, que permite determinar los daños causados al
medio ambiente y seres vivos del planeta por el contacto con sustancias químicas.
Se apoya en los estudios del macro-ambiente y micro-ambiente, determinando así
su posible daño al ambiente y a los seres vivos del planeta. (18)
Se han realizado estudios en ratones con plaguicidas, principalmente
organoclorados y se ha demostrado que ocasionan cáncer en altas dosis, cambios
hormonales concretamente en la producción de estrógenos, pueden ocasionar
esterilidad y alteraciones en el metabolismo de calcio, lo que afecta el desarrollo
de los huesos y mutaciones que originan fallas genéticas. (1) - (16) Muchos
plaguicidas resultan tóxicos para el metabolismo de las células del tejido linfoideo
que participan en la respuesta inmune del organismo. Se han hecho experimentos
in vitro con piretroides como permetrina y cipermetrina en esplenocitos murínos
16
y ambos procesos de estimulación mitogénica que involucran tanto al linfocito B
con lipopolisacárido (LPS) como mitógeno en la respuesta humoral, y linfocito T en
la respuesta celular (con mitógeno Concanavalina A) son afectados inhibiendo la
estimulación mitogénica y lo mismo sucede in vivo con permetrina a corto plazo.
(19) Se ha trabajado con toxafeno (organofosforado con dosis 10,100 y 200 ppm en
ratones y producen una depresión de la respuesta inmune con disminución de la
capacidad fagocítica de los macrófagos. (20) Con Lindano (organofosforado), en
cultivos de linfocitos de 72 horas con fitohemaglutinina (PHA) y timidína tritiada,
se ha observado decremento en la división de las células blásticas y sugieren que
el lindano alteró los eventos mediadores de la membrana para la división celular,
también aumenta el citocromo P450 en hígado y la generación del radical
superóxido, aumento del superóxido dismutasa, disminuye la catalasa lo que
induce estrés oxidativo en hígado de rata. (21; 22) El efecto del malatión
(organofosforado), sobre la síntesis de ácidos nucléicos en linfocitos humanos
estimulados con fitohemaglutinina se ha observado que en dosis pequeñas hay
menor incorporación de timidina. (23) El dimetoate (éster fosfórico) causa
disminución de los linfocitos a un 50% en ratones y ocasiona depresión de la
respuesta inmune. (24) En pruebas de fagocitosis y muerte intracelular de bacterias
como la salmonella thyphimurium en cepas de ratones resistentes y
semiresistentes tratados con dieldrín (insecticida organoclorado) da como
resultado supresión de la respuesta de resistencia natural a la infección de estas
cepas. (25) En macrófagos murinos activados por infecciones micobacterianas con
el bacilo de Calmette-Guerin (BCG) se ha observado un aumento del óxido nítrico
como producto de excreción en exceso de nitrato. (26) El óxido nítrico como
17
producto de liberación es mediador de citostásis inducida por macrófagos e
inhibición respiratoria mitocondrial en células de linfoma. (27) Se ha demostrado
que agroquímicos como dieldrín (organoclorado), fosfamidón (organofosforado),
deltametrina, cianazina, metaclor, cloropirifos y endosulfan, incrementan la
expresión de micronúcleos en linfocitos y eritrocitos. (28; 33; 34; 35; 36; 37; 38; 39; 40)
En Agosto del 2005, Blanca R. Noriega Ortega y colaboradores, realizaron
una valoración de genotoxicidad con determinación de micronúcleos en ratones
expuestos a metamidofos (O,S-dimetil fosforoamidotioato), el cual es uno de los
plaguicidas más utilizado en México, particularmente en Sinaloa. Se utilizaron
ratones de la cepa Balb/c, se determinó la DL50 en animales expuestos al
plaguicida metamidofos en diferentes tipos de exposición: 2, 12, 20 y 24 semanas
y como testigo animales sin exposición, se evaluó el efecto genotóxico con la
cuantificación de micronúcleos en eritrocitos de sangre periférica. Los ratones
tratados con metamidofos aumentaron la formación de micronúcleos en eritrocitos
de sangre periférica conforme pasó el tiempo de exposición, por lo tanto se le
consideró genotóxico. (41)
Este mismo grupo de investigación, ha publicado tres artículos más en los
cuales consigna la toxicidad en ratones expuestos a metamidofós en la actividad
macrofágica celular (oct/2007) (42), estrés oxidativo (nov/2006) (43) y neurotoxicidad
(2011) (44).
18
Benjamín Ayarde Romero y colaboradores (2008) evaluaron la frecuencia
de micronúcleos en células epiteliales de la mucosa bucal, para determinar el
daño genotóxico como una indicación de ruptura cromosómica o interferencia en
la mitosis, en 200 estudiantes de la Universidad Mayor de San Andrés en la ciudad
de La Paz (3600 m.s.n.m.) y la ciudad de El Alto (4100 m.s.n.m.) expuestos al
consumo de tabaco y sus componentes. El grupo de estudiantes que vive a 4100
msnm mostró una frecuencia de micronúcleos en células descamadas de mucosa
oral mayor y estadísticamente significativa (p<0.04) en relación a la frecuencia
encontrada en estudiantes que viven a 3600 m.s.n.m. Este estudio sugiere que la
altura sobre el nivel del mar representa un factor importante que debe tomarse en
cuenta y que el uso del ensayo de Mns en células epiteliales de mucosa oral es un
marcador sensible y no invasivo para evaluar daño genotóxico. (45)
Marcela Varona y colaboradores determinaron la frecuencia de alteraciones
citogenéticas (micronúcleos y aberraciones cromosómicas), deficiencias en la
reparación del ADN y actividad de la acetilcolinesterasa como biomarcadores de la
exposición a plaguicidas organofosforados y carbamatos en trabajadores de
cultivo de flores en Bogotá. Se realizó un estudio en 31 trabajadores con riesgo
ocupacional de exposición a plaguicidas y 30 sin riesgos; se seleccionaron los
trabajadores por medio de una entrevista. Se emplearon como pruebas
citogenéticas estándar la frecuencia de aberraciones cromosómicas y de
micronúcleos; la prueba de reto (challenge assay) se utilizó para determinar la
respuesta a los rayos gamma y como indicador de deficiencias en la reparación
del ADN. Los datos se analizaron por porcentajes de células aberrantes,
19
frecuencia de aberraciones cromosómicas y rompimiento cromatídico en 1000
células en metafase analizadas en cada trabajadora. En los ensayos
citogenéticos, se encontró que el grupo expuesto presentó frecuencias mayores
de células con aberraciones cromosómicas y micronúcleos que el grupo no
expuesto, con diferencias significativas (p<0.02); sin embargo, con la prueba de
reto, la diferencia no fue significativa (p>0.1). Estos hallazgos requieren ser
confirmados por estudios de tipo analítico que involucren exámenes clínicos;
además es necesario un mayor número de biomarcadores para la monitorización
de trabajadores expuestos a plaguicidas en cualquier situación (46)
En el año 2008 Carlos Hernán Barrera, Liz C. Prado y Germán D. Cortina
evaluaron a partir de la prueba de aberraciones cromosómicamente estructurales
(ACE), el efecto genotóxico del Antracol WP70 en cultivo de linfocitos humanos de
sangre periférica. Se establecieron con réplicas, cultivos de linfocitos humanos en
medio de RPMI 1640 complementado, e incubaron a 37oC. Estos cultivos se
trataron con agua destilada estéril (testigo), concentración alta del plaguicida (2.5
mg/ml), media (1.25 mg/ml) y baja (0.02 mg/ml), durante un periodo de 48 horas.
Se evaluaron las células en metafase, se registraron las ACE observadas y se
analizaron los datos para calcular los respectivos valores estadísticos. El mayor
número de aberraciones cromosómicas se encontró en las células tratadas con la
concentración media y el menor fue para el grupo control. Sin embargo, no se
encontraron diferencias estadísticamente significativas a un nivel de confianza de
95% entre la frecuencia de aberraciones cromosómicas en relación con el grupo
testigo (p>0.63). Los porcentajes entre aberraciones de tipo cromatídico y
20
cromosómicos encontradas fueron 77.3 y 22.7%. De la misma manera, no se
encontraron diferencias estadísticamente significativas. (47)
En el año 2004, R. Vindas y otros investigadores realizaron un estudio para
determinar la genotoxicidad de tres plaguicidas utilizados en las plantaciones
bananeras de Costa Rica. La genotoxicidad in vitro de los fungicidas imazalil y
tiabendazol y del insecticida clorpirifos, compuestos utilizados en esta área
agrícola, se evaluaron mediante técnicas de electroforesis de células únicas
(ensayo cometa). Este ensayo detecta roturas en el ADN de una sola cadena y
sitios álcalis-lábiles en células individuales. Los efectos fueron analizados
utilizando linfocitos humanos expuestos a dosis de 0, 25, 50, 75 y 100 mg/ml de
cada plaguicida por 30 minutos a 370C. Las células se introducen en agarosa,
lisadas y sometidos a electroforesis alcalina (pH >13) durante 20 minutos a 25V,
neutralizado y deshidratado para ser teñido por un tinte fluoresente y visualización
cometa más tarde por el microscopio de epifluorescencia. El Clorpirifos y el
Imazalil inducen daño en el ADN de una manera significativa a dosis-dependiente.
El Clorpirifos fue el inductor importante de ruptura en el ADN. Estos resultados
indicaron que ambos son compuestos genotóxicos in vitro. El fungicida
Tiabendazol no produce daño en el ADN de acuerdo con el ensayo cometa para
todas las concentraciones probadas. (48)
En el 1996, Anastasios Kourakis y colaboradores publicaron una
investigación realizada a 56 de trabajadores agrícolas expuestos a mezclas
químicas complejas (29 trabajadores internos y 27 externos), fueron seleccionados
21
de las misma zona geográfica situada en Jonia, en la provincia de Salónica. La
aberración de cromosomas (CA) y el intercambio cromátidas hermanas (SCE), se
estudiaron en los linfocitos de sangre periférica. La comparación entre los
trabajadores y el grupo de testigo reveló que las personas expuestas a plaguicidas
mostraron importantes efectos clastogénicos (CA=2.66% frente al 0.53%,
p<0.0001), en sus linfocitos, sin indicación de los aumentos en la frecuencia basal
de SCE. Por otra parte, la condición de la exposición se ha encontrado para influir
en la CA de frecuencia. Se observó que las personas que trabajan exclusivamente
en los invernaderos (espacios confinados) mostraron mayor niveles de CA que los
sujetos que trabajan en espacios abiertos (337 frente a 188, p<0.01). No hubo
diferencias significativas en su expresión de CA entre fumadores y no fumadores.
El estudio de los cromosomas presentes se realizó en trabajadores que viven en
las inmediaciones de una gran zona industrial, cerca de Tesalónica. (49)
La frecuencia de micronúcleos (Mns) en linfocitos de sangre periférica
(PBL) es ampliamente utilizado como un biomarcador de daño cromosómico y la
estabilidad de genomas en poblaciones humanas. Un total de 6,718 sujetos de 10
países , seleccionados en 20 laboratorios para la frecuencia de Mns entre 1980 y
2002 en estudios de vigilancia citogenética de rutina, fueron seleccionados de la
base de datos de los micronúcleos humanos del proyecto de colaboración
internacional y el seguimiento de la incidencia de cáncer o mortalidad. Un aumento
significativo de la incidencia de todos los cánceres se encontró en los grupos de
ingresos medios y alta frecuencia de Mns. Los mismos grupos también mostraron
un cáncer sin disminución de la supervivencia, es decir p<0.001 y p<0.025,
22
respectivamente. Esta asociación estuvo presente en todos los grupos nacionales
y de todos los cánceres más importantes, especialmente urogenital y los cánceres
gastrointestinales. Los resultados de este estudio proporcionan evidencia
preliminar de que la frecuencia de Mns en el ABP es una predicción en los
biomarcadores de riesgo de cáncer en una población sana. La utilización de
ensayos de Mns ofrece una valiosa oportunidad de aplicar esta prueba en la
planificación y la validación de vigilancia del cáncer y programas de prevención. (50)
En el año 2010 Marisol Larrea Poma y colaboradores realizaron estudios con
gente ocupacionalmente expuesta a plaguicidas del municipio de Luribay de la
Paz, Bolivia para identificar efectos adversos a la salud y el medio ambiente, en
personal ambos sexo, los estudios realizados fueron el ensayo cometa y ensayo
de micronúcleos en mucosa bucal, los resultados encontrados indicaron que existe
un incremento significativo donde p<0.05 de daño genotóxico en trabajadores
expuestos a plaguicidas en relación con el grupo testigo, también se encontró un
mayor daño genotóxico en relación a los que contaban con más tiempo de
exposición a plaguicidas. (51)
23
JUSTIFICACIÓN
El valle del municipio de Culiacán tiene a la agricultura como la principal
actividad económica, se encuentra entre las principales la producción de tomate,
maíz, pepino, chile y hortalizas, mueve gran parte de la economía de la zona del
valle, su consumo es masivo y la producción tiene como destino la venta en el
mercado. Los agricultores utilizan diversos agroquímicos y plaguicidas para la
producción de casi todos los diferentes cultivos.
De acuerdo con la Secretaría de Salud del Estado de Sinaloa (52), la entidad
en el 2010 ocupa el 8° lugar por casos (144) y 6° por tasa (5.42) de los 3112 casos
registrados de intoxicación aguda a nivel nacional, al corte de los primeros siete
meses de 2011, el Estado de Sinaloa se encontraba en 5° lugar por casos (107) y
3° por tasa (4.02) de los 1,729 casos reportados a nivel nacional (tasa de 1.58). En
el período de 1997 al 07 de Agosto 2011, el Valle de Culiacán se lleva el primer
lugar de intoxicaciones agudas como se aprecia en la siguiente gráfica.
0
20
40
60
80
100
120
140
160
90 89
124
157
3225
14 16 1329
Cas
os
Intoxicaciones por lugar de ocurrencia
N= 679
24
De los cuales el 80% de los casos han ocurrido en varones, siendo
prácticamente la totalidad de ellos (96.88%) desde el punto de vista laboral.
Se ha evidenciado que la mayoría de los agricultores no utilizan protección
personal ni hábitos higiénicos para el manejo de los plaguicidas, los productores
manejan estos productos de forma empírica, realizando mezclas indebidas sin
respetar dosis adecuadas y recomendadas, sin equipo de protección personal. A
esto se ha adicionado el problema ambiental con la eliminación de los envases de
forma incorrecta, lo que ocasiona la contaminación de fuentes de agua, por lo
tanto se ha visto la necesidad de realizar estudios de biomonitoreo, desde el punto
de vista del daño genotóxico.
El efecto de la toxicidad crónica por agroquímicos en Sinaloa se desconoce.
Por lo que es interesante realizar investigaciones sobre las probables pequeñas
dosis de sustancias tóxicas contenidas en los agroquímicos como producto de la
exposición de individuos humanos por largo tiempo, por medio del estudio de las
alteraciones celulares y la valoración de micronúcleos.
0
50
100
150
200
250
300
11
247
0
281
13
66 61
Cas
os 77.7%
N= 679
25
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En base a lo anteriormente expuesto en la justificación, existen pocos
estudios relacionados con las exposiciones a los plaguicidas en el valle de
Culiacán, sin embargo se tienen documentadas intoxicaciones agudas a éstos. Se
desconoce la magnitud de la exposición crónica a los plaguicidas en sus diferentes
formas, la genotoxicidad generada y alteraciones celulares ocasionadas.
OBJETIVOS:
Objetivo General:
Evaluar el daño genotóxico por exposición a plaguicidas en trabajadores
agrícolas y personal ocupacionalmente expuesto a plaguicidas del del valle de
Culiacán, mediante el método de micronúcleos en células de mucosa bucal.
Objetivos específicos:
1. Realizar biometría hemática en la persona expuesta y testigos.
2. Observación de las alteraciones celulares en personas expuestas y
testigos.
3. Evaluar la genotoxicidad por la técnica de micronúcleos.
26
HIPÓTESIS:
Hipótesis de Trabajo (HT):
La exposición a los plaguicidas en sus diferentes formas producen
genotoxicidad con la presencia de micronúcleos y alteraciones celulares de la
mucosa bucal.
METODOLOGÍA
El presente proyecto es de cohorte al ser observacional, analítico
comparativo, transversal y retrospectivo.
Se realizó, con la colaboración del Centro de Investigación Biomédica de
Occidente-IMSS en los laboratorios de la División de Inmunología de Guadalajara,
Jalisco y la Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Sinaloa.
En el desarrollo de este trabajo se aplicaron técnicas innovadoras de
laboratorio que indican al médico una mayor descripción del problema de salud
por el efecto de los agroquímicos y podrá contribuir a la prevención de otras
enfermedades asociadas que pudieran originarse.
De un universo total de 92 personas que se encontraban laborando en
27
campos agrícolas, de diferentes años de exposición y edades variables, se
aplicaron los criterios de inclusión y por exclusión resultó un tamaño muestral de
20 personas.
Como grupo testigo, se seleccionaron el mismo número de personas con
similares condiciones ambientales, sexo y edad de las personas en estudio, pero
que no se hayan intoxicado con plaguicidas, ni trabajen en campos y empresas
agrícolas.
Obtención y tratamiento de las muestras sanguíneas:
Se trabajaron en tubos de vacutainer(MR) de 3ml con anticoagulante para
obtener sangre total de la vena arterial del antebrazo del trabajador agrícola. A la
sangre total con anticoagulante se le practicó biometría hemática completa (BHC),
la cual es utilizada en el estudio de los fenómenos vitales del organismo para el
conocimiento cualitativo de la variabilidad física y química de los elementos
formadores de la sangre, mediante frotis de sangre y cuenta diferencial de
leucocitos.
Obtención y tratamiento de las muestras de mucosa oral:
A las personas se les hizo un raspado de la mucosa oral para observación de
micronúcleos y alteraciones celulares, las cuales fueron tratadas de la siguiente
28
manera:
1. Las muestras se recolectaron en portaobjetos codificados, limpios y
desengrasados, elaborándose dos frotis de raspado de la mocosa oral a
cada persona.
2. Se dejaron secar a temperatura ambiente y se fijaron en etanol absoluto por
10 min.
3. Se tiñeron con anaranjado de acridina (ver método líneas abajo).
4. Se observaron al microscopio de fluorescencia con el objetivo 100x.
5. Se contaron 1000 células por muestra y se consideran los siguientes
parámetros: Células de la mucosa oral Mns c/ 1000 células de la mucosa
oral, para determinar daño acumulado.
Para dar cumplimiento a lo anterior, se tienen etapas intermedias que son
detalladas a continuación:
Tinción con anaranjado de acridina:
La tinción de las laminillas se realizó con anaranjado de acridina (No. CAS
10127-02-3; SIGMA), colorante específico para ácidos nucléicos. El anaranjado de
acridina emite fluorescencia y dado que el núcleo y los Mns están formados de
ADN, ésta propiedad es aprovechada para la visualización de Mns, los cuales, al
igual que el núcleo de la célula, aparecen de color amarillo o verde brillante,
mientras que el ARN se tiñe de rojo o naranja cuando son observados con
microscopia de fluorescencia, mientras que el citoplasma se tiñe de verde opaco
semitransparente. El equipo de microscopia empleado para el análisis de las
29
muestras fue de la marca OLYMPUS modelo CX40, con sistema iluminador de
fluorescencia OLYMPUS modelo CXRFLT50 (lámpara de mercurio 50W y filtro de
fluorescencia azul DMB-2 OLYMPUS) y sistema fotográfico (35 mm, manual)
OLYMPUS modelo SC3512Y.
Se debe tomar en consideración que el anaranjado de acridina es un
compuesto que se intercala entre las bases del ADN y por lo tanto, es necesario
contar con medidas de seguridad tales como uso de guantes, bata y cubre bocas
para evitar contacto y aspiración durante su manejo.
Procedimiento Zúñiga-González 2003b para la fijación y observación de las
muestras de mucosa oral:
Se preparó un buffer de fosfatos, para lo cual se pesaron 2.16g de fosfato
de sodio dibásico anhidro (Na2HPO4) (No. 3828-01, JT BAKER) y 11.49g de fosfato
de sodio monobásico monohidrato (NaH2PO4•H2O) (No. 3818-01, JT BAKER). Estas
cantidades se disolvieron en 1,000 ml de agua desmineralizada (pH final a 7.4).
Se separaron en una jeringa de 10 ml aproximadamente 5 ml de buffer para
emplearlo posteriormente en la lectura de laminillas. En dos cajas de tinción con
capacidad para 50 laminillas se vacían 500 ml en cada una. En oscuridad, en una
de las cajas se agregaron 0.02g de anaranjado de acridina y se disolvieron
mezclando con abatelenguas. Posteriormente, se sumergió una gradilla con las
laminillas a teñir en el anaranjado de acridina y se dejaron ahí por 10 min., se
movieron de vez en cuando para que el colorante llegue a todas las laminillas. Una
30
vez transcurrido el tiempo, se sacó la gradilla y se eliminó el exceso de líquido al
sacudir suavemente la gradilla sobre papel absorbente para posteriormente
colocarla por 10 minutos en la caja que contiene únicamente el buffer con la
finalidad de lavar excesos de colorante. Pasado este tiempo se sacó la gradilla, se
sacudió para eliminar excesos, se pasan las laminillas a una caja con tapa y se
dejan secar en la estufa a 45°C con la tapa abierta, en oscuridad. Una vez secas
las laminillas, se tapa bien la caja y se guardan en oscuridad hasta su lectura. Las
laminillas se leen en un plazo no mayor a 5 semanas posterior a la tinción ya que
la fluorescencia se pierde con el tiempo.
Lectura de las laminillas:
Para la lectura de las laminillas, se tomó una de la caja tapada, se le
agregaron unas gotas del buffer que se separó en una jeringa, se cubrió la
laminilla con un cubreobjetos, se eliminaron excesos de buffer con presión suave
por ambos lados con una gasa y se colocó la laminilla en la platina del microscopio
para su lectura con lámpara de fluorescencia mediante observación con el objetivo
100x, para el conteo de 1000 células de la mucosa oral.
Las características tomadas en cuenta para considerar a una célula como
normal fueron: que presentara citoplasma intacto y relativamente homogéneo,
poco o ningún empalme con células adyacentes; mientras que en el caso de las
células de la mucosa oral se tomó en cuenta que tuvieran las características de la
célula normal, además de que el Mns tuviera una forma redonda o almendrada,
con un tamaño menor al núcleo de la célula de mucosa oral, que presentara un
31
perímetro liso y redondo que sugiriera membrana, así como intensidad de tinción,
textura y plano focal similar al del núcleo normal.
La toma de muestras, fue realizada con el apoyo de un grupo
multidisciplinario compuesto por un Químico Farmacéutico Biólogo, con grado de
Doctor en Inmunología, entrenado por personal del Centro de Investigación
Biomédica de Occidente (CIBO) del IMSS, con sede en Guadalajara, un Químico
Farmacéutico Biólogo en entrenamiento y un Biólogo con Maestría en Ciencias
que aceptaron coadyuvar en el presente trabajo de tesis.
Parte la preparación de las laminillas se realizó en las instalaciones del
CIBO, terminándose en las instalaciones de la Facultad de Medicina en el
Laboratorio de Histología y Embriología.
La lectura de las muestras en las laminillas fue realizada por el Doctor en
Inmunología en compañía del postulante.
Tipo de estudio:
El presente es un estudio de cohorte (epidemiológico), observacional,
analítico, longitudinal, retrospectivo, en el que se hace una comparación de la
frecuencia de daños genotóxicos entre dos poblaciones, una de las cuales está
expuesta al manejo de plaguicidas. También es llamado de incidencia y tiene por
objetivo medir la causalidad entre factores de riesgo y el daño a observar.
32
Universo de estudio:
Tomando en cuenta que son pocas las personas que permanecen
laborando por periodos largos en contacto con los plaguicidas en forma directa y
pensando en la intoxicación crónica como objetivo principal de este trabajo, sin
olvidar que generalmente en los trabajadores agrícolas, en la gran mayoría su
trabajo es temporal, ya que vienen de otros Estados de la República Mexicana y
algunos no regresan, el lograr un grupo para su estudio con las características
deseadas significó un problema, más considerando los siguientes criterios:
Criterios para el Personal Ocupacionalmente Expuesto:
Selección: 1. Trabajadores agrícolas con diferentes actividades de trabajo que involucren
utilización de agroquímicos y en la selección del campo agrícola, que éste
sea concertado por la AARC.
2. Que acepten ingresar y firmen la carta de consentimiento informado.
3. Que no hayan recibido previamente algún tipo de tratamiento médico
vigente en la fecha de estudio.
Inclusión: 1. Trabajador de cualquier categoría: bombero mezclador, almacenista,
aplicador de insecticidas, ingeniero encargado de agroquímicos, etc. que
cuente con más de 3 años de antecedente en este trabajo.
2. Que hayan tenido una intoxicación aguda o más por plaguicidas.
3. Con atención médica en el campo Villa Juárez y/o Costa Rica.
4. Sexo masculino.
33
Exclusión: 1. Personas que no tengan el tiempo de exposición de más de 3 años.
2. Con tratamiento de enfermedad infectocontagiosa.
3. Personas que por algún motivo enfermedad o accidente hayan tenido
exposición a radiaciones ionizantes en el último mes.
4. Personas que por motivo de enfermedades sea necesaria la utilización de
antibióticos al momento de toma de la muestra.
5. Tabaquismo, drogadicción y antecedentes de enfermedades crónicas tales
como diabetes, hipertensión, cáncer, que pudieran alterar el resultado de la
investigación.
Eliminación: 1. Muestras incompletas.
2. Con registros incompletos.
3. Personas que no utilicen los agroquímicos (en el grupo de POE).
4. Personas enfermas.
Al tener el apoyo de la AARC, se visitaron un total de 28 campos agrícolas donde
se encontraron un total de 92 trabajadores que podrían incorporarse al estudio, de
los cuales al iniciar el protocolo de estudio, sólo calificaron 20 al aplicárseles los
criterios enumerados; al ser éste un estudio de cohorte, se buscó conformar un
grupo testigo que cumpliese con los siguientes criterios:
34
Criterios para el Grupo Testigo:
Selección: 1. Trabajadores de diferentes actividades de trabajo sin contacto con
plaguicidas fuera de los campos agrícolas.
2. Que acepten ingresar y firmen la carta de consentimiento informado.
3. Que no hayan recibido previamente algún tipo de tratamiento médico
vigente en la fecha de estudio.
Inclusión: 1. Que tenga edad similar a algún elemento del grupo POE para su pareo.
2. Que no haya tenido una intoxicación aguda.
3. Sexo masculino.
Exclusión: 1. Con tratamiento de enfermedad infectocontagiosa.
2. Personas que por algún motivo enfermedad o accidente hayan tenido
exposición a radiaciones ionizantes en el último mes.
3. Personas que por motivo de enfermedades sea necesaria la utilización de
antibióticos al momento de toma de la muestra.
4. Tabaquismo, drogadicción y antecedentes de enfermedades crónicas tales
como diabetes, hipertensión, cáncer, que pudieran alterar el resultado de la
investigación.
Eliminación: 1. Muestras incompletas.
2. Con registros incompletos.
3. Personas enfermas.
35
Definición operacional de las variables
Alteraciones celulares Variable Definición operativa Escala de medición
Micronúcleos Expresión en interfase
de los fragmentos
acéntricos, sin
centrómeros.
Ausencia – Normalidad Presencia – Alteración
(conteo)
Núcleos Lobulados Núcleo hendido o con
muescas dentro de la
membrana celular.
Ausencia – Normalidad Presencia – Alteración
(conteo)
Cariolisis Degeneración nuclear
que consiste en la
disolución de la cromatina
del núcleo en el
citoplasma.
Ausencia – Normalidad Presencia – Alteración
(conteo)
Cariorrexis Fragmentación de la
cromatina y su
distribución por el
citoplasma como un
resultado de la
desintegración nuclear.
Ausencia – Normalidad Presencia – Alteración
(conteo)
Células Binucleadas Células con más de un
núcleo en su interior.
Ausencia – Normalidad Presencia – Alteración
(conteo)
36
Alteraciones celulares Variable Definición operativa Escala de medición
Cromatina Condensada Apreciación de diferentes
divisiones dentro de una
célula.
Ausencia – Normalidad Presencia – Alteración
(conteo)
Serie blanca en sangre periférica Variable Definición operativa Escala de medición
Leucocitos
Son células móviles con
núcleo, mitocondrias y otros
orgánulos, su tamaño de 8 a
20 Micrómetros.
Mecanismos defensivos del
organismo.
Continua dentro de un
rango de 5,000 a 10,000
para la normalidad, fuera
de ello se considera
anormal.
Linfocitos
Células esféricas u
ligeramente ovoide de 8 a 12
micrones, a los estímulos
químicos puede dividirse
formar anticuerpos
Continua dentro de un
rango de 25 a 33 para la
normalidad, fuera de ello
se considera anormal.
Banda
Célula inmadura con núcleo
en forma de C, son
importantes para la defensa
de bacterias y otros
microorganismos
Continua dentro de un
rango de 0 a 3 para la
normalidad, fuera de ello
se considera anormal.
37
Serie blanca en sangre periférica Variable Definición operativa Escala de medición
Monocito
Células fagociticas
bactericidas, siguen a los
neutrofilos en los procesos
inflamatorios, retiran material
extraño de la sangre.
Continua dentro de un
rango de 0 a 4 para la
normalidad, fuera de ello
se considera anormal.
Neutrófilo
Es un tipo de glóbulo blanco
su función fagocitar, destruir
bacterias. Su tamaño es de
10 a 15 micrones, es el tipo
celular mas abundante en
sangre en humanos.
Continua dentro de un
rango de 68 a 57 para la
normalidad, fuera de ello
se considera anormal.
Eosinófilo
Célula fagocitaría que
elimina o se come agentes
extraños al organismo,
modula reacciones alérgicas.
Continua dentro de un
rango de 1 a 6 para la
normalidad, fuera de ello
se considera anormal.
38
DISEÑO ESTADÍSTICO
Se toma el 100% del universo en estudio en los campos agrícolas en los
que se obtuvo permiso de trabajo, aplicándoseles los criterios de inclusión,
exclusión y eliminación, con lo cual se trabajó con una muestra total del mismo
(n=20).
El análisis estadístico se realizará para todas las variables mencionadas en el
apartado de definición de variables, de acuerdo a su naturaleza:
1. Nominales y Ordinales.
2. Dicotómica: Frecuencia y porcentajes.
3. Medidas de dispersión: Media, varianza, distribución normal (Z).
4. Pruebas no paramétricas:
a. U de Mann-Whitney para dos muestras independientes, utilizada
para comprobar la heterogenicidad de dos muestras ordinales.
Tomando en cuenta que:
i. Las observaciones de ambos grupos son independientes.
ii. Las observaciones son variables ordinales o continuas.
iii. Bajo la hipótesis nula, las distribuciones de partida de ambas
distribuciones es la misma.
iv. Bajo la hipótesis alternativa, los valores de una de las
muestras tienden a exceder a los de la otra: P(X > Y) + 0.5
P(X = Y) > 0.5.
39
b. W de Wilcoxon. La prueba de los signos de Wilcoxon es una prueba
no paramétrica para comparar la mediana de dos muestras
relacionadas y determinar si existen diferencias entre ellas. Se utiliza
como alternativa a la prueba t de Student cuando no se puede
suponer la normalidad de dichas muestras. Se utiliza cuando la
variable subyacente es continua pero presupone ningún tipo de
distribución particular.
c. Razón de momios. (disparidad, razón de posibilidades, razón de
oportunidades, odds ratio, razón de odds). Es una medida
epidemiológica utilizada en los estudios epidemiológicos, (sobre todo
en los estudios de cohorte y en los de casos-controles) y en los meta
análisis. Es una forma de expresar la proporción de veces que un
suceso ocurra frente a que no ocurra.
Los resultados estadísticos fueron obtenidos por medio del software SPSS
(Statistical Package for the Social Sciences), el cual fue alimentado por un Físico –
Matemático con Doctorado en Ciencias, quien se encargó de establecer el
significado estadístico de los resultados.
Con el fin de clarificar lo que se considera como hipótesis cero dentro de las
pruebas estadísticas, se define a continuación para este trabajo de tesis en lo
particular.
40
Hipótesis Cero (H0):
“La exposición a los plaguicidas en sus diferentes formas no produce
genotoxicidad ni micronucleos o alteraciones celulares de la mucosa bucal, por lo
que no hay diferencia entre los grupos de expuestos y no expuestos”.
RECURSOS HUMANOS
Para el desarrollo de la presente tesis, se trabajó desde la multidisciplina con un
equipo de colaboradores que coadyuvaron desde su particular formación:
• Postulante con formación de Médico Cirujano Partero en la interpretación
de los efectos a la salud, recolección de muestras e identificación de daños.
• Químico Farmacéutico Biólogo, con grado de Doctor en Inmunología en
recolección de muestras e identificación de daños.
• Químico Farmacéutico Biólogo en recolección de muestras.
• Biólogo con Maestría en Ciencias en recolección de muestras.
• Físico – Matemático con grado de Doctor en Ciencias para la interpretación
estadística.
• Ingeniero Químico con Maestría en Toxicología como apoyo en el manejo
de la información.
41
RECURSOS MATERIALES
Equipo.
• Vehículo de transporte para la toma de muestras.
• Microscopio óptico Carl Zeiss.
• Microscopio OLYMPUS modelo CX40, con sistema iluminador de
fluorescencia OLYMPUS modelo CXRFLT50 (lámpara de mercurio 50W y
filtro de fluorescencia azul DMB-2 OLYMPUS) y sistema fotográfico (35 mm,
manual) OLYMPUS modelo SC3512Y.
• 2 Cámaras de tinción con canastilla.
• Estufa de laboratorio.
Material.
• Caja de herramientas.
• Mesa portátil y sillas.
• Lápiz de punta de diamante.
• Torniquete.
• Portavacutainer.
• Tubos de vacutainer(MR) de 3ml con anticoagulante.
• Laminillas portaobjetos.
• Cubreobjetos.
• Jeringas de 10 ml con aguja.
• Dos cajas de tinción con capacidad para 50 laminillas.
• Abatelenguas.
• Gradilla.
42
• Papel absorbente.
• Papel de estrasa.
• Gasas.
• Cajas portalaminillas para 50 muestras.
• Guantes.
• Bata.
• Cubre bocas.
• Pipetas de 1 y 5 ml.
• Pipeta de Thoma para globulos rojos y blancos.
• Cámara de Neubauer.
• Hielera con hielo.
• Algodón.
Reactivos.
• Etanol al 90%.
• Etanol absoluto.
• Metanol.
• Anaranjado de acridina (No. CAS 10127-02-3; SIGMA).
• Fosfato de sodio dibásico anhidro (Na2HPO4) (No. 3828-01, JT BAKER)
• Fosfato de sodio monobásico monohidrato (NaH2PO4•H2O) (No. 3818-01, JT
BAKER).
• Agua desmineralizada.
• Colorante de Wright.
• Colorante de Giemsa.
43
CRONOGRAMA DE TRABAJO
Elaboración del Protocolo 2008 – 2011
Revisión con el asesor 2 días de la semana
Evaluación y Registro del Proyecto 1 mes
Permiso de la Asociación de Agricultores del
Río Culiacán Enero 2008– Mayo de 2008
Permiso a entrada a Empresas Enero 2008– Mayo de 2008
Acondicionar al área de trabajo esc. Medicina Enero 2008-Julio de 2008
Estandarizar técnicas Julio 2008-Septiembre 2008
Recolección de Datos Septiembre 2008-Septiembre 2009
Análisis de Datos tesis Septiembre 2009-Julio 2010
Revisión de Tesis Julio 2010-Agosto 2011
Presentación de Examen -----
44
RESULTADOS.
Se estudiaron 20 personas del sexo masculino, de un universo total de 92
personas que se encontraban laborando en los campos agrícolas, con diferentes
años de exposición y edades que variaban en un rango de 20 a 48 años, con una
media de 31.95 años (gráfica 1), que tuvieran cuando menos 3 años laborando
expuestos a plaguicidas, con atención médica en las áreas geográficas de Villa
Juárez o Costa Rica y que hayan tenido una intoxicación aguda o más por
plaguicidas, para determinar la intoxicación crónica.
Así como también se estudiaron 20 personas con similares condiciones
ambientales, sexo y edad de las personas en estudio, pero que no se hayan
intoxicado con plaguicidas, ni trabajen en campos y empresas agrícolas.
Gráfica 1
Los grupos se encuentran apareados con respecto a la variable Edad (Ambos grupos con la misma distribución de edades).
0
1
2
3
4
5
20 21 23 24 26 27 29 31 33 35 38 42 43 48
Fre
cue
nci
a
Edad
Distribución de Edad de los grupos en estudio
Expuestos
No expuestos
45
Las actividades del grupo expuesto son: 11 bomberos (55%). Ver grafica 2.
Así como la distribución de grupo no expuesto las actividades son: 4 estudiantes
(20%). Ver gráfica 3.
Gráfica 2
Gráfica 3
0
2
4
6
8
10
12
Bombero Encargado de
Aplicación
Ing. Resp.
Mezclador
Invernadero Mezclador
Bombero
Operador Quimico
Fre
cue
nci
a
Ocupación
Distribución por actividad de trabajoGrupo expuesto
0
1
2
3
4
Abarrotero Chofer Electrico Empleado Empleado
Coppel
Empleado de
Ley
Estudiante Mecanico Vendedor
Fre
cue
nci
a
Ocupación
Distribución por actividad de trabajoGrupo no expuesto
46
Al realizar la comparación de ambos grupos, se observan resultados
estadísticamente significativos, ya que 16 personas del grupo expuesto (80%)
manifestaron presencia de Micronúcleos en aumento como lo muestra la gráfica
en comparación de 4 personas del grupo no expuesto (20%).
En las siguientes gráficas observamos valores de error probabilístico (p)
menores que 0.001.
En la gráfica 4 podemos observar que existe una mayor cantidad de
personas (80%) que presentaron Micronúcleos comparativamente con el grupo de
no expuestos (20%), la gráfica 5 nos muestra en qué puestos de trabajo se
desempeñan los individuos con elevación de Micronúcleos.
Gráfica 4
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
0 1 2 3 4 5 0 1 2 3 4 5
Fre
cue
nci
a
Micronúcleos
Distribucion de Micronúcleos
Grupo de
expuestos
Grupo de no
expuestos
47
Gráfica 5
Comparativa de actividad laboral y presencia de Micronúcleos en ambos grupos, el valor es significativo con p<0.001.
Al obtener la Razón de momios (OR) como medida epidemiológica, se
obtuvo la siguiente tabla de contingencia, con sus pruebas de independencia:
Tabla de contingencia de micronúcleos Micronúcleo
Total No Si
Grupo 1.00 Observado 4 16 20 Esperado 10.0 10.0 20.0
2.00 Observado 16 4 20 Esperado 10.0 10.0 20.0
Total Observado 20 20 40 Esperado 20.0 20.0 40.0
Tabla de pruebas de independencia de micronúcleos
Valor Grados libertad
Sig. Asint. (2-colas)
Sig. Asint. Exacta
(2-colas)
Sig. Asint. Exacta (1-cola)
Estadística Pearson 14.400b 1 0.000 Correcc. continuidada 12.100 1 0.000 Est. razón verosim. 15.420 1 0.000 Prueba de Fisher 0.000 0.000 Asociación lineal 14.040 1 .0000 Num. casos 40
a. Calculada sólo para tabla 2x2 b. 0 celdas (.0%) tienen valores esperados menores que 5.
0
1
2
3
4
5
6
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Pre
sen
cia
de
An
orm
ali
da
d
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Distribución de Individuos con Micronúcleos
por puesto de trabajo
Anormalidad
Normalidad
Micronúcleos
Bomberos
En
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caci
ón
Ing
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or
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ern
ad
ero
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om
be
roO
pe
rad
or
Qu
ímic
o
48
Tabla que arroja:
• Logaritmo de razón de momios: -2.773, con un intervalo del 95% de
confianza: (-4.322, -1.223).
• Razón de momios: 0.063. Intervalo del 95% de confianza: (0.013,0.294)
Resultados que refuerzan la significancia de exposición a agro insumos y
posibilidad de daño genotóxico.
Se valoró también la Biometría Hemática para ver el comportamiento de la
serie blanca al contacto con sustancias químicas, ya que estas cifras pueden
modificarse por varios factores citados a continuación: Hemodilución,
Deshidratación, Embarazo, Residencia a Gran Altitud, Hemorragias Recientes,
Medicamentos, Ingestión de Alimentos, Actividad Física, Estrés, en las personas
que por algún motivo se extirpó el bazo. El comportamiento de los resultados de
los dos grupos estudiados arrojan valores estadísticos significativos donde p<0.05
con las pruebas estadísticas t-Student y Mann-Whiney (Ver cuadro 1). Se
presupone aceptación a nuestra H0 (Hipótesis cero: no hay comportamiento
diferencial entre grupos), en el caso de que cualquier valor que se aproxime a 0.05
o sea superior a esta cifra (si p ≥ 0.05 ∴ H0 es verdadera).
49
Cuadro 1
Micronucleos Leucocitos Linfocitos Monocitos Neutrofilo Banda Eosinofilos Basofilos NL CL CR BN CC U de Mann-Whitney
53.000 59.000 87.500 1.500 155.000 0.000 2.000 200.000 127.500 126.500 152.000 179.500 187.000
W de Wilcoxon 263.000 269.000 297.500 211.500 365.000 210.000 212.000 410.000 337.500 336.500 362.000 389.500 397.000
Z -4.266 -3.815 -3.048 -5.528 -1.219 -5.794 -5.681 0.000 -2.245 -2.259 -1.385 -0.795 -0.532
Sig. Asimp. (2-tailed) 0.000 0.000 0.002 0.000 0.223 0.000 0.000 1.000 0.025 0.024 0.166 0.426 0.595
Sig. Exact [2*(1-tailed Sig.)] 0.000(a) 0.000(a) 0.002(a) 0.000(a) 0.231(a) 0.000(a) 0.000(a) 1.000(a) 0.049(a) 0.046(a) 0.201(a) 0.583(a) 0.738(a)
a No corregida por observaciones idénticas, (NL) Núcleo Lobulado, b Variable de agrupación: Grupo. (CL) Cariolisis,
(CR) Cariorrexis, (BN) Células Binúcleadas, (CC) Cromatina Condensada.
50
El comportamiento de la serie blanca en las gráficas evidencia cambios
tanto en la depresión celular como en la excitación de algunos de sus
componentes, como se explica en cada una de las graficas.
Gráfica 6
Recuento de Leucocitos por actividades de trabajo de los grupos expuestos y no expuesto, el valor de p<0.0004, por lo que es considerado significativo.
Al constituirse los Leucocitos en una parte importante del sistema
inmunitario y de defensa del organismo contra agentes extraños, su
comportamiento ha sido tradicionalmente estudiado como un indicador de
afectación a la salud, en la gráfica 6 se observa activación de los mismos con
valores significativos estadísticamente, tal como se mostró en el cuadro número 1.
Los Leucocitos a su vez se dividen en diferentes formas celulares que
cumplen con funciones específicas, el recuento de los mismos corresponde a la
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Numero Total de Leucocitos
Máximo Mínimo Leucocitos
Bomberos
En
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Me
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r B
om
be
ro
Op
era
do
r
Qu
ímic
o
51
presencia porcentual de cada uno de ellos en sangre periférica y están divididos
en: Linfocitos, Banda, Monocitos, Neutrófilos, Basófilos. Ver gráficos 7, 8, 9, 10 y
11.
Al analizar el comportamiento de los linfocitos en ambos grupos
(representados en la gráfica numero 7), se observa excitación celular en el grupo
no expuesto, la cual se considera normal a la respuesta inmunológica a una
situación de estrés o de defensa por la toma de muestra sanguínea; en el caso del
grupo de expuestos, se observa una repuesta inmunológica retardada la cual
puede ser inferida como efecto del contacto con sustancias químicas,
comparativamente el grupo alterado pareciera ser el no expuesto por contar con
una buena reacción inmunológica, existen cultivos celulares invitro que
demuestran depleción en la proliferación celular por esta causa37.
Gráfica 7
Se muestra proliferación celular como respuesta inmunológica del grupo no expuesto y deficiente respuesta del grupo expuesto. El valor es significativo con p<0.002.
0
10
20
30
40
50
60
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Porcentaje de Linfocitos
Máximo
Mínimo
Linfocitos
Bomberos
En
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Qu
ímic
o
52
Gráfica 8
Se observó proliferación celular en bandas como una respuesta inmunológica. El valor es significativo con p<0.001.
Gráfica 9
Existe presencia de elevación celular de Monocitos del grupo expuesto comparativamente con el grupo no expuesto. El valor es significativo p<0.001.
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Porcentaje de Banda
Máximo
Mínimo
Banda
Bomberos
En
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caci
ón
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2
4
6
8
10
12
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Porcentaje de Monocitos
Máximo
Mínimo
Monocitos
Bomberos
En
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53
Gráfica 10
Existe depleción de ambos grupos en Neutrófilos presentando predominio en grupo expuesto. El valor es no significativo con p=0.1>0.05.
Gráfica 11
Existe depleción en ambos grupos. El valor no significativo, con p=1.000>0.5.
30
35
40
45
50
55
60
65
70
75
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Porcentaje de Neutrófilos
Máximo
Mínimo
NeutrofiloBomberos
En
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2
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4
5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Porcentaje de BasófilosMáximo Mínimo Basofilos
Bomberos
En
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54
Gráfica 12
Existe elevación de Eosinófilos en el grupo expuesto. El valor es significativo con p<0.0001.
En las gráficas comparativas de los frotis bucal (13, 14, 15, 16 y 17), se ha
encontrado la proliferación celular de Núcleo lobulado, Cariolisis, Cariorrexis,
Célula Binucleada y Cromatina Condensada, considerando daño celular, las
categorías de los trabajadores con más proliferación celular fueron Ingeniero
Mezclador, Bombero, Químico.
Gráfica 13
Núcleo Lobulado (NL) donde se observa que el conteo más alto de daño le corresponde al Encargado de Aplicación e Ingeniero responsable mezclador. El valor es significativo con p<0.029.
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Porcentaje de Eosinófilos
Máximo
Mínimo
Eosinofilos
Bomberos
En
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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Pre
sen
cia
de
An
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ali
da
d
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Conteo de Núcleo LobuladoAnormalidad Normalidad NL
Bomberos
En
c d
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caci
ón
Ing
Re
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or
Inv
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ad
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o
55
Al obtener la Razón de momios (OR) como medida epidemiológica, se
obtuvo la siguiente tabla de contingencia, con sus pruebas de independencia:
Tabla de contingencia de células con Núcleos Lobulados NL
Total No Si
Grupo 1.00 Observado 9 11 20 Esperado 12.0 8.0 20.0
2.00 Observado 15 5 20 Esperado 12.0 8.0 20.0
Total Observado 24 16 40 Esperado 24.0 16.0 40.0
Tabla de pruebas de independencia de células con Núcleos Lobulados
Valor Grados libertad
Sig. Asint. (2-colas)
Sig. Asint. Exacta
(2-colas)
Sig. Asint. Exacta (1-cola)
Estadística Pearson 3.750b 1 0.053 Correcc. continuidada 2.604 1 0.107 Est. razón verosim. 3.822 1 0.051 Prueba de Fisher 0.105 0.053 Asociación lineal 3.656 1 0.056 Num. casos 40
c. Calculada sólo para tabla 2x2 d. 0 celdas (.0%) tienen valores esperados menores que 5.
Tabla que arroja:
• Logaritmo de razón de momios: -1.229, con un intervalo del 95% de
confianza: (-2.641, -0.043).
• Razón de momios: 0.273. Intervalo del 95% de confianza: (0.071,1.044).
Resultados que refuerzan la significancia de exposición a agroinsumos y
posibilidad de daño genotóxico.
56
Gráfica 14
Cariolisis (CL) donde se observa conteo más alto de daño en los puestos de Ingeniero Responsable Mezclador y Químico. El valor es significativo con p<0.021.
Al obtener la Razón de momios (OR) como medida epidemiológica, se
obtuvo la siguiente tabla de contingencia, con sus pruebas de independencia:
Tabla de contingencia de células con Cariolisis CL
Total No Si
Grupo 1.00 Observado 9 11 20 Esperado 12.0 8.0 20.0
2.00 Observado 15 5 20 Esperado 12.0 8.0 20.0
Total Observado 24 16 40 Esperado 24.0 16.0 40.0
Tabla de pruebas de independencia de células con Cariolisis
Valor Grados libertad
Sig. Asint. (2-colas)
Sig. Asint. Exacta
(2-colas)
Sig. Asint. Exacta (1-cola)
Estadística Pearson 3.750b 1 0.053 Correcc. continuidada 2.604 1 0.107 Est. razón verosim. 3.822 1 0.051 Prueba de Fisher 0.105 0.053 Asociación lineal 3.656 1 0.056 Num. casos 40
e. Calculada sólo para tabla 2x2 f. 0 celdas (.0%) tienen valores esperados menores que 5.
0
1
2
3
4
5
6
7
8
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Pre
sen
cia
de
An
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ali
da
d
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Conteo de Células con CariolisisAnormalidad
Normalidad
CL
Bomberos
En
c d
e a
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caci
ón
Ing
Re
sp M
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lad
or
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ad
ero
Me
zcla
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r B
om
be
ro
Op
era
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ímic
o
57
Tabla que arroja:
• Logaritmo de razón de momios: -1.229, con un intervalo del 95% de
confianza: (-2.641, -0.043).
• Razón de momios: 0.273. Intervalo del 95% de confianza: (0.071,1.044).
Resultados que aún cuando fueron obtenidos de conteos en diferentes puestos
de trabajo con respecto a las ocupaciones que presentaron Núcleos Lobulados,
presentan los mismos resultados numéricos y refuerzan la significancia de
exposición a agro insumos y posibilidad de daño genotóxico.
Gráfica 15
Cariorrexis (CR) donde se observa que el conteo más alto de daño corresponde a un bombero siguiéndolo el responsable de invernadero, el ingeniero responsable mezclador, uno de los encargados de aplicación y un segundo bombero. El valor es significativo con p<0.04.
Al obtener la Razón de momios (OR) como medida epidemiológica, se
obtuvo la siguiente tabla de contingencia, con sus pruebas de independencia:
0
1
2
3
4
5
6
7
8
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Pre
sen
cia
de
An
orm
ali
da
d
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Conteo de Células con Cariorrexis
Anormalidad
NormalidadCR
Bomberos
En
c d
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caci
ón
Ing
Re
sp M
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ero
Me
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om
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Op
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do
r
Qu
ímic
o
58
Tabla de contingencia de células con Cariorrexis CR
Total No Si
Grupo 1.00 Observado 7 13 20 Esperado 7.0 13.0 20.0
2.00 Observado 7 13 20 Esperado 7.0 13.0 20.0
Total Observado 14 26 40 Esperado 14.0 26.0 40.0
Tabla de pruebas de independencia de células con Cariorrexis
Valor Grados libertad
Sig. Asint. (2-colas)
Sig. Asint. Exacta
(2-colas)
Sig. Asint. Exacta (1-cola)
Estadística Pearson 0.000b 1 1.000 Correcc. continuidada 0.000 1 1.000 Est. razón verosim. 0.000 1 1.000 Prueba de Fisher 1.000 0.629 Asociación lineal 0.000 1 1.000 Num. casos 40
g. Calculada sólo para tabla 2x2 h. 0 celdas (.0%) tienen valores esperados menores que 5. Tabla que arroja:
• Logaritmo de razón de momios: 0.000, con un intervalo del 95% de
confianza: (-1.299, 1.299).
• Razón de momios: 1.000. Intervalo del 95% de confianza: (0.273,3.666).
Resultados que no concluyentes para la correlación con daño genotóxico.
59
Gráfica 16
Células Binucleadas (CB), donde se observa que el conteo más alto de daño lo tienen un bombero y el Químico en el grupo expuesto, existe presencia en tres personas del grupo no expuesto contra cinco del POE. El valor es no significativo con p=0.4>0.05.
Al obtener la Razón de momios (OR) como medida epidemiológica, se
obtuvo la siguiente tabla de contingencia, con sus pruebas de independencia:
Tabla de contingencia de células con Binucleadas BN
Total No Si
Grupo 1.00 Observado 15 5 20 Esperado 16.0 4.0 20.0
2.00 Observado 17 3 20 Esperado 16.0 4.0 20.0
Total Observado 32 8 40 Esperado 32.0 8.0 40.0
Tabla de pruebas de independencia de células con Binucleadas
Valor Grados libertad
Sig. Asint. (2-colas)
Sig. Asint. Exacta
(2-colas)
Sig. Asint. Exacta (1-cola)
Estadística Pearson 0.625b 1 0.429 Correcc. continuidada 0.156 1 0.693 Est. razón verosim. 0.630 1 0.427 Prueba de Fisher 0.695 0.347 Asociación lineal 0.609 1 0.435 Num. casos 40
i. Calculada sólo para tabla 2x2 j. 0 celdas (.0%) tienen valores esperados menores que 5.
0
1
2
3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Pre
sen
cia
de
An
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Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Conteo de Células Binucleadas
Anormalidad Normalidad BN
Bomberos
En
c d
e a
pli
caci
ón
Ing
Re
sp M
ezc
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ad
ero
Me
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om
be
ro
Op
era
do
r
Qu
ímic
o
60
Tabla que arroja:
• Logaritmo de razón de momios: -0.636, con un intervalo del 95% de
confianza: (-2.227, 0.995).
• Razón de momios: 0.529. Intervalo del 95% de confianza: (0.108,2.599).
Resultados que no concluyentes para la correlación con daño genotóxico.
Gráfica 17
Cromatina Condensada (CC) se tienen cuatro personas con presencia de CC, donde se observa nuevamente que el conteo más alto de daño es del Ingeniero Responsable Mezclador y de uno los bomberos en el grupo expuesto, se aprecian tres personas con daño en el grupo no expuesto. El valor es no significativo con p=0.3>0.05.
Al obtener la Razón de momios (OR) como medida epidemiológica, se
obtuvo la siguiente tabla de contingencia, con sus pruebas de independencia:
Tabla de contingencia de células con Cromatina Condensada BN
Total No Si
Grupo 1.00 Observado 16 4 20 Esperado 16.5 3.5 20.0
2.00 Observado 17 3 20 Esperado 16.5 3.5 20.0
Total Observado 33 7 40 Esperado 33.0 7.0 40.0
0
1
2
3
4
5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41
Pre
sen
cia
de
An
orm
ali
da
d
Grupo de Expuestos Grupo de No expuestos
Conteo de Células con Cromatina Condensada
Anormalidad Normalidad CC
Bomberos
En
c d
e a
pli
caci
ón
Ing
Re
sp M
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ad
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Me
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o
61
Tabla de pruebas de independencia de células con Cromatina Condensada
Valor Grados libertad
Sig. Asint. (2-colas)
Sig. Asint. Exacta
(2-colas)
Sig. Asint. Exacta (1-cola)
Estadística Pearson 0.173b 1 0.677 Correcc. continuidada 0.000 1 1.000 Est. razón verosim. 0.174 1 0.677 Prueba de Fisher 1.000 1.297 Asociación lineal 0.169 1 0.681 Num. casos 40
k. Calculada sólo para tabla 2x2 l. 0 celdas (.0%) tienen valores esperados menores que 5.
Tabla que arroja:
• Logaritmo de razón de momios: -0.348, con un intervalo del 95% de
confianza: (-1.993, 1.297).
• Razón de momios: 0.706. Intervalo del 95% de confianza: (0.136,3.658).
Resultados que no concluyentes para la correlación con daño genotóxico.
Gráfica 18
Se muestra daño en aumento de acuerdo al tiempo de exposición, la cantidad de Micronúcleos encontrados e inicio laboral del grupo expuesto.
0
1
2
3
4
5
6
Grupo de Expuestos
Tiempo de Exposición, Micronúcleos
y Edad de Inicio laboral
Anormalidad Normalidad
62
Los valores mostrados en las gráficas 6, 7, 8, 9 y 12 corresponden a las
células sanguíneas (Leucocitos, Linfocitos, Banda, Monocitos, Eosinofilos
respectivamente), muestran valores estadísticamente significativos. Las graficas 5,
13, 14 y 15 correspondientes a las células de la mucosa oral (Micronúcleos,
Núcleos Lobulado, Células con Cariolisis y Células con Cariorrexis
respectivamente), contienen valores estadísticamente significativos. En relación a
los resultados obtenidos se observa un probable aumento del daño genotóxico en
referencia al tiempo de exposición, los hallazgos confirman la utilidad de la prueba
de micronúcleos en mucosa oral para la realización del biomonitoreo humano para
evaluar daño genotóxico y la necesidad de realizar biomonitorización permanente
en trabajadores agrícolas ocupacionalmente expuestos.
63
DISCUSIÓN
Con base en los resultados obtenidos, se observa daño genotóxico
en el grupo expuesto, los cuales al aplicárseles métodos de validación estadística,
nos indican que no son fruto del azar.
Se observaron características particulares en el trabajo que realizan los
trabajadores en estudio, así como actividades agrícolas variadas, donde el uso de
plaguicidas es en distintas cantidades, mezclas diversas y posiblemente con un
manejo inadecuado, situación que pone en alto nivel de exposición a los
empleados agrícolas de la región del valle agrícola del Municipio de Culiacán,
Sinaloa, los cuales están en una continua exposición a diferentes plaguicidas y en
ocasiones a una mezcla compleja de ellos, de acuerdo con los ciclos agrícolas de
la diversidad de cultivos en los cuales laboran.
Los resultados obtenidos nos sugieren que la exposición ocupacional
a plaguicidas causó daño en el ADN; de acuerdo con el recuento de Micronúcleos
en mucosa bucal, se observó daño genotóxico en los trabajadores con actividades
agrícolas expuestos a plaguicidas en relación a los no expuestos (p<0.05). Esto
nos indica que la población que realiza actividades agrícolas con manejo de
plaguicidas en el municipio de Culiacán pone en riesgo su salud al no protegerse
ante su contacto crónico, como lo observa Marcela Varona y colaboradores con un
valor de significativo de p<0.02 con el uso de la técnica de micronúcleos. En otro
estudio por Vindas R. y colaboradores con linfocitos humanos en trabajadores
64
agrícolas de plantaciones bananeras expuestos a Imazalil, Clorpirifos y
Tiabendazol encontraron daño en una sola cadena del ADN con la prueba de
ensayo cometa. Existen otros tóxicos que se valoraron con micronúcleos como lo
observa Benjamin Ayarde Romero y colaboradores (2008) con un valor
significativo de p<0.04 en estudiantes que consumen tabaco como contaminante.
Es complejo establecer conclusiones específicas sobre el daño genotóxico
real existente causado por los plaguicidas o algún plaguicida en especial porque
los trabajadores agrícolas no se dedican a un único tipo de cultivo, ya que las
necesidades en función de eliminación de plagas y la conservación de los cultivos
son diferentes en cada uno de los campos agrícolas. Por tal motivo, se realizan
las mezclas de plaguicidas para una mejor efectividad. Se cuenta con muy poca
información sobre el efecto genotóxico de las mezclas de plaguicidas, aunque se
ha comprobado que el uso de varios plaguicidas por separado produce
genotoxicidad de forma significativa en poblaciones expuestas a estos productos.
El tiempo de exposición o los años que los trabajadores llevan empleando
plaguicidas, es un factor muy importante a ser considerado ya que existe una
tendencia de aumento de presencia de Micronúcleos en las personas con más
años de uso de plaguicidas y un inicio laboral más temprano en relación a los que
tienen menos tiempo expuestos, Como lo observan Marisol Larrea Poma y
colaboradores, en un estudio realizado en Bolivia en trabajadores agrícolas del
Municipio de Luribay, en cual encuentran Mns elevados en los trabajadores
agrícolas con incremento significativo de p< 0.05 y lo compararon con pruebas de
65
ensayo cometa, demostrando que ambas metodologías son útiles para el
biomonitoreo humano para la evaluación de daño genotóxico en células de la
mucosa oral. Esto nos muestra un daño crónico acumulativo, que se incrementa
con el paso del tiempo, situación observada y documentada en los resultados en
la gráfica 17. Las exposiciones crónicas son difíciles de evaluar ya que los efectos
que se observan son de exposiciones continuas a diferentes compuestos y en
concentraciones desconocidas. Como una manera de encontrar una explicación
lógica, Marisol Larrea Poma y colaboradores ejemplifican que a mayor tiempo de
exposición es mayor cantidad de producto el que se puede acumular en el
organismo y por lo tanto presentar diferentes efectos sobre la salud del trabajador
expuesto.
Se han llevado a cabo muchos estudios sobre la genotoxicidad de
plaguicidas utilizando métodos citogenéticos, los resultados obtenidos en estudios
in vitro demostraron que diferentes plaguicidas fueron capaces de inducir
incremento en el número de Micronúcleos en células de mucosas bucal, así como
en Linfocitos de sangre periférica y en la prueba de ensayo cometa.
Son conocidos muchos efectos adversos para la salud y que son el
resultado de la exposición a los plaguicidas incluyendo los daños genéticos, tanto
en las células somáticas como en las germinales. Si el daño inicia en las células
somáticas, esto pudiera derivar en cáncer de diferentes tipos, contribución de
envejecimiento prematuro y enfermedades vasculares, entre otras. Si el daño es
en células germinales esto afecta a los individuos expuestos en efectos sobre la
66
fertilidad. Por consiguiente, está claro que el impacto en la salud humana a causa
de las enfermedades genéticas existentes pudiera tener una relación muy
estrecha con la exposición a plaguicidas, pero hay que hacer estudios continuos, a
largo plazo y con diferentes biomarcadores actualizados. Hay que dedicar todo
los esfuerzos posibles para minimizar las exposiciones a plaguicidas que puedan
provocar dichas alteraciones.
67
CONCLUSIONES
Los trabajadores agrícolas del Valle de Culiacán expuestos a plaguicidas en
diferentes tipos de actividades laborales presentan mayor número de micronúcleos
que los no expuestos, lo que podría sugerir daño al ADN. Estos resultados
requieren ser confirmados con otros biomarcadores como intercambio de
cromátides hermanas (SCE), ensayo cometa, etc., necesarios para demostrar el
daño genotóxico. La técnica utilizada en el presente trabajo nos da una idea
general, cualitativa, de que existe la toxicidad en buena parte de los individuos
expuestos. Con una metodología sencilla, no costosa, que no requiere de
infraestructura especializada y que ha sido confirmada por otros investigadores,
logramos demostrar una asociación de mayor presencia de micronúcleos en los
individuos expuestos a los agroquímicos en la región central de Sinaloa. Con esta
metodología y medidas sanitarias adecuadas en los campos agrícolas y en los
lugares en donde se producen, procesan y aplican los agroquímicos, se pueden
prevenir los daños crónicos más severos por la exposición a plaguicidas, como
enfermedades genéticas, neurodegenerativas, cáncer, etc.
68
SUGERENCIAS:
Con base en los resultados obtenidos, se sugiere que se implementen en
los centros de trabajo en los cuales exista exposición, estándares que garanticen
la salud del personal ocupacionalmente expuesto y la prevención de la
contaminación al ambiente que pueda acarrear los contaminantes a los centros
poblados que se encuentran cercanos o alrededor de los campos agrícolas.
Como es bien sabido, el fin de una investigación es el comienzo de una o
más líneas de trabajo, por lo que es necesario continuar con estudios dirigidos a la
investigación de agroquímicos, en donde se busque determinar los daños a la
salud en los trabajadores agrícolas y personas expuestas.
Con el fin de garantizar que el acceso a la información sobre los daños a la
salud que han provocado los plaguicidas esté a disposición de todas las
instituciones de salud, el Gobierno del Estado, asociaciones de profesionistas y
empresas interesadas, se recomienda que el COESPLAFEST genere una base de
datos electrónica, con acceso por medio de Internet, abierta al público y que sea
publicitada en los medios masivos de comunicación.
Dentro del marco universitario, por parte del Colegio de Ciencias de la
Salud de la Universidad Autónoma de Sinaloa, es necesario promover la
realización de trabajos multidisciplinarios de manera integral en el manejo de los
agroquímicos con las instituciones del Sector Salud, las Asociaciones de
Agricultores, empresas interesadas y el Gobierno del Estado.
69
BIBLIOGRA FIA
BIBLIOGRAFÍA
1. J., Salmerón de D. Generalidades de plaguicidas, intoxicaciones producidas por
pesticidas. 2a. s.l. : Ed. M.A., 1977. págs. 13-80.
2. Turk A. Turk J. and Wittes J.T. Ecología contaminación medio ambiente.
Interamericana. 1972. pág. 3. Vol. 27.
3. A., Albert Lilia. Introducción a la Toxicología Ambiental. s.l. : Centro Panamericano de
Ecología Humana y Salud. División de Salud y Ambiente, 1977. págs. 359-382.
4. De la Jara F. De la Parra C. Manual de Toxicología y Tratamiento de las
Intoxicaciones con Plaguicidas. [ed.] A.C. Asociación Mexicana de la Industria de
Plaguicidas y Fertilizantes. D.F. : s.n., 1980. págs. 10-16.
5. M.A., Montoya. Toxicología clínica, Plaguicidas. D.F. : Ed. Méndez Fco., 1980. págs.
257-264.
6. Vélez, E. Primeros auxilios y tratamiento de envenenamientos por plaguicidas. [ed.]
SARH. 2a. 1979. págs. 19-69. Vol. 79.
7. Riesgo Genotóxico a Plaguicidas en Trabajadores Agrícolas. Martínez C.; Gómez
Arroyo S. 4, 2007, Rev. Int. Contam. Ambient., Vol. 23, págs. 185-200.
8. Genotoxicidad y Citotoxicidad de Pesticidas, Evaluación de los Principios Activos y
Formulaciones Comerciales Usadas en Argentina. González Norma; Molinary G.;
Soloneski S.; Larramendy M. 2, 2008, Theoria, Vol. 17, págs. 27-45.
9. Plaguicidas: Clasificación, Uso, Toxicidad y Medición de la Exposición. Ramírez J. A.;
Lacasaña M. 2, 2001, Arc. Prev.Riesgos Lab., Vol. 4, págs. 67-75.
70
10. Efectos a la salud y exposición a p,p’-DDT y p,p’-DDE. El caso de México. Torres-
Sánchez, Luisa; López-Carrillo, Lizbeth. 1, Cuernavaca : s.n., 2007, Ciencia &
Saúde Coletiva, Vol. 12, págs. 51-60.
11. México, Gobierno de, [ed.]. NOM-045-SSA1-1993. D.F. : Diario Oficial de la
Federación, 1995.
12. Almeida, Waldemar F. Biblioteca Virtual de Desarrollo sostenible y Salud Ambiental.
Fundamento Toxicológico de los Plaguicidas. [En línea] [Citado el: 11 de 09 de 2011.]
http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/eco/003106/03106-03-b.pdf.
13. Gutiérrez de Aguas, Ricardo. PhD. www.uninorte.edu.co. Ponencia: Técnicas para
la evaluación genotóxica en organismos expuestos a contaminantes ambientales. [En
línea] [Citado el: 25 de Agosto de 2011.]
http://www.uninorte.edu.co/extensiones/IDS/Ponencias/Eco_III_parte/Tecnicas_Genot
oxicidad.pdf.
14. Arencibia Arrebola D.; Fernández L. Actualización Sobre el Ensayo Cometa y de
Micronúcleos InVitro. s.l. : RETEL, 2003. págs. 24-41.
15. Plaguicidas que Afectan a la Salud humana y la Sustentabilidad. Badii M.; Landeros
J. 19, 2007, CULCyT, Vol. 4, págs. 21-34.
16. Insecticidas Organofosforados: Efecto Sobre la Salud y el Ambiente. Badii M.;
Landeros J. 28, 2008, CULCyT, Vol. 5, págs. 5-17.
17. Revisión de la Literatura: Intoxicación por Plaguicida Organofosforado en Sinaloa.
Diarte Arellano I.; Gastelum B. 2, Culiacán : s.n., 2007, Arch Salud Sin, Vol. 1,
págs. 62-68.
18. Peña, C. Toxicología Ambiental. Evaluación de Riesgo y Restauración Ambiental. [ed.]
The University of Arizona. 2001. págs. 9-40.
71
19. Effects of pyrethroids on lymphocyt mitogenic responsiveness. Stelzer J.K.; Gordon A.
M. 1, 1984, Res Comming Chem. Pat. and Pham., Vol. 46, págs. 137-150.
20. Effect of toxaphene exposure on immune resposes in mice. Allien A. C. Koller L. D.
Polloch G. A. 1, 1983, Veterinary Med. J. Toxicol. Environ. Health., Vol. 11.
21. Lindane on Human lymphocyte response to phytohemagglutinin. Roux F., Treich I.,
Brunch C. H., Dezoize B.,Fournier E. 24, 1979, Bioch. Pharm., Vol. 28, pág. 2419.
22. Lindane-induce doxidative stress. I. Time couse of changes in hepatic microsomal
parameters antioxidant enzimes, lipid peroxidative indice and morphological
characteristies. Junqueirs V. B. C. Simizu K. Halsema L. [ed.] Depto de Bioq. Inst.
de Quim. Sao Pablo. 1990, Medical and Veterinary Entomalogy. Review.
23. Effect of malathion on nucleic acid Synthesisin phytohemagglutinnin-stimulated human
limphocytes. Czajkowska A., Walter Z. 56, 1980, Human Genet, pág. 189.
24. Studies on the action of dimethoate on the immune system. Tiafenbach B., Lange P.
1980, Arch. Toxicol. J. Code III, Vol. 4, pág. 167.
25. Suppression of microbicidal activity of peritoneal exudate by sublethal dieldrin
exposure of outbred and inbred mice. Jolicoeur P., Fournier M., Krzystyniak K. 3,
1990, Pesticide- Bichemistry and phisiology, Vol. 31, págs. 203-212. Index-
veterinarius.
26. Urinary nitrate excretion in relation to murine macrophage activation. Donald L.
Granger, John B. Hibbs J. R., Louis M. Broadnax. 4, 1991, The Journal of
immunology, Vol. 146:15, págs. 1294-1302.
27. Nitric oxide.A macrophage product responsible for cytostasis and respiratory inhibition
in tumor target cells. Dennis J. Stuehr, Carl F. Nathan. 1989, J. Exp.Med., Vol. 169,
págs. 1543-1555.
72
28. Paraquat – induced DNA damage in mammalian cell. W.E. Ross, E.R. Block
R.Y.Chang. 1979, Biochem. Biophys. Res., Vol. 91, págs. 1302-1308.
29. México, Gobierno de, [ed.]. NOM.005-STPS. Relativa a las condiciones de Seguridad
e Higiene en los centros de Trabajo para el manejo, transporte y almacenamiento de
sustancias químicas peligrosas. D.F. : Diario Oficial de la Federación, 1999.
30. —. NOM-017-STPS-2008. Equipo de Protección Personal, selección Uso y Manejo en
los Centros de trabajo. D.F. : Diario Oficial de la Federación, 2008.
31. —. NOM-044-SSA1-1993, Embases y embalajes. Requisitos para Contener
Plaguicidas. D.F. : Diario Oficial de la Federación, 1995.
32. —. NOM-052-052-FITO-1995, Por la que se establecen los requisitos y
especificaciones fitosanitarias para presentar el aviso de inicio de funcionamiento por
las personas físicas o morales que se dediquen a la aplicación aérea de plaguicidas
agrícolas. D.F. : Diario Oficial de la Federación, 1997.
33. Relevance of developmental testing of exposure to methamidophos during gestation to
its toxicology evaluation. De Castro V.L. Chiorato S.H., Pinto N.F. 118, 2000,
Toxicol Lett. Dec., Vol. 20, págs. 93-102.
34. Inducción of micronuclei in bone marrow by two pesticides and their differentiation
with CREST staining: an in vivo study in mice. Cicchetti R, Bari M, Argentin G. [ed.]
University of Rome 'Tor Vergata' Department of Public Health and Cell Biology. 2,
Roma : s.n., 19 de Feb de 1999, Mutation Research-Genetic Toxicology and
enviromental Mutagenesis, Vol. 439, págs. 239-248.
35. Cypermethrin induction of micronuclei in mammalian somatic cell. Bakhitova L. M.,
Pashin luV. 4, Jul-Aug de 1988, Tsitol Genet., Vol. 22, págs. 32-35.
73
36. Genotoxicity of paraquat: micronuclei induced in bone marrow and peripheral blood
ar inhibited by melatonin. Genaro G. Ortiz, Russel J. Reiter, Guillermo Zúñiga,
Daniela Melchiorri, Ewa Sewerynek, Marta I. Pablos, Chang S. Oh, Joaquìn J.
Garcìa, Oscar K. Bitzer-Quintero. 2000, Mutation Research, Vol. 464, págs. 239-
245.
37. Morphological and Biochemical Assay of Apoptosis. John E. Coligan, Ada M
Kruisbeek, David H. Margulies, Athan M. Shevach, Warren Strober. 3, 1992,
Current Protocols in Immunology, Vol. 3, pág. 17.1.
38. Micronuclei as an index ofcytogenetic damage; past, present and future. J.A. Heddle,
M.C. Cimino, M. Hayashi, F. Romagna, M.D. Shelby J. D. Tucher, Ph Vanparys,
J.T. Mac Gregor. 1991, Environ. Mol. Mutangen., Vol. 18, págs. 277-291.
39. Differences in the of micronucleated erythrocytes among young an adult animals
including humans spontaneous micronuclei in 43 species. G. Zuñiga González, O.
Torres Bugarín, A Zamora Pérez, B.C. Meda, M. I. Ramos Ibarra, S. Martínez
González, A González Rodríguez , J Luna Aguirre A. Ramos Mora, D. Ontiveros
Lira, M. P. Gallegos Arreola. 2001, Mutation Research, Vol. 494, págs. 161-167.
40. Determination of diesel genotoxicity in firebreathers by micronuclei and nuclear
abnormalities in bucal mucosa. O. Torres Bugarín, A. de Anda-Casillas, M.P.
Ramirez Muñoz, J. Sánchez-Corona, J.M. Cantú, G. Zúñiga. 1998, Mutation
research, Vol. 413, págs. 277-281.
41. Valoración de Genotoxicidad con Determinación de Micronúcleos en Ratones
Expuestos a Metamidofos. Noriega Ortega B. 8-9, 2005, Bol. Med., Vol. 1, págs. 13-
17.
74
42. Determinación de la actividad de macrófagos peritoneales mediante la producción de
óxico nítrico en ratones expuestos crónicamente al plaguicida metamidofos. Noriega
Ortega, BR. Armienta Aldana, E. Cervantes Pompa, JA. 18, Culiacán :
Universidad Autónoma de Sinaloa, Agosto - Octubre de 2007, Bol Med UAS, Vol. 2,
págs. 7 - 11.
43. Evaluación de estrés oxidativo en ratones expuestos crónicamente a un plaguicida
organofosforado. Noriega Ortega, B.R. Armienta Aldana, E. Cervantes Pompa,
J.A. 15, Culiacán : Universidad Autónoma de Sinaloa - Facultad de Medicina,
Noviembre 2006 - Enero 2007 de 2007, Bol Med UAS, Vol. 2, págs. 8 - 11.
44. GABA and Dopamine Release from different brain regiona in mice with cronic
exposure to organophosphate methamidophos. Noriega Ortega, B.R. Armienta
Aldana, E. Cervantes Pompa J.A. Hernández Ruiz, E. Chaparro Huerta, V.
Bravo Cuéllar, A. Beas Zárate, C. 3, Culiacnán, Sinaloa : s.n., 2011, Journal of
Toxicology Patholgy, Vol. 24, págs. 163 - 168.
45. Efecto Genotóxico del Consumo del Tabaco en Estudiantes de la Facultad de Medicina
de la UMSA que Habitan en la Altura. Ayarde Romero B. 2008, BIOFARBO, Vol.
16, págs. 67-71.
46. Alteraciones Citogenéticas en Trabajdoras con Riesgo Ocupacional de Exposición a
Plaguicidas en Cultivos de Flores en Bogotá. Varona M. 2, 2003, Biomédica, Vol. 23,
págs. 141-152.
47. Evaluación del Efecto Genotóxico del Antracol WP 70 en Cultivos de Linfocitos
Humanos. Hernán C. Pardo L., Cortina G. 2, 2008, Colombia Médica, Vol. 39, págs.
29-34.
75
48. Genotoxicidad de tres Plaguicidas en la Actividad Bananera de Costa Rica. Vindas R.,
Ortiz F., Ramirez V., Cuenca P. 3, 2004, Biol. Trop., Vol. 52, págs. 601-609.
49. Cytogenetic Effects of Occupational Exposure in the Peripheral Bloos Iymphocytes of
Pesticide Sprayers. Kourakis Anastasio, Mouratidou M, Barbouti A, Dimikiotou
M. 1, 1996, Carcinogenesis, Vol. 17, págs. 99-101.
50. An Increased Micronucleus Frequency In Peripheral Blood Lymphocytes Predicts the
Risk of Cancer in Humans. Bonassi Stefano. 3, 2007, Carcinogenesis, Vol. 28, págs.
625-631.
51. Daño Genotóxico por exposción a plaguicidas en agricultores del Municipio de
Luribay, La Paz, Bolivia. Masirol Larrea Poma, Noemí Tirado Bustillo, M.
Eugenia Ascarrunz G. 2, La Paz : s.n., 2010, BIOFARBO, Vol. 18, págs. 31-43.
52. Panorama Epidemiológico de las Intoxicaciones por Plaguicidas. Delgado Lugo,
Jesús Ramón. Culiacán : Secretaría de Salud de Sinaloa, 2011.
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ANEXOS
ANEXOS
• Carta de consentimiento para toma de muestra sanguínea con fines de investigación.
• Instrumento para la obtención de información de trabajadores del
campo que ha utilizado plaguicidas.
• Glosario de abreviaturas.
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Resumen
GENOTOXICIDAD POR INTOXICACIÓN CON PLAGUICIDAS EN HUMANOS,
EN EL VALLE DE CULIACAN
Se trabajaron las muestras de 20 trabajadores agrícolas del Valle de Culiacán,
Sinaloa, México, expuestos a plaguicidas en por lo menos tres años (GEP),
comparando los resultados con un grupo similar (N-GEP) en edad y sexo sin
exposición a los mismos. Se examinó frotis de la mucosa oral de ambos grupos
(GEP y N-GEP), con el fin de determinar la presencia de alteraciones a nivel
celular tales como Micronúcleos (Mns), Núcleos Lobulados (NL), Cariolisis (CL),
Cariorrexis (CR), Células Binucleadas (CB) y Cromatina Condensada (CC), así
como sangre periférica para el conteo de la serie blanca. Se encontró presencia
de Mns en el 80% del GEP contra el 20% del N-GEP, con P<0.001, sólo 4 de los
bomberos no tuvieron presencia de daño. En el caso de NL (55% del GEP) la
presencia de daño se encontró fuertemente correlacionado en las actividades de
mayor formación académica, tales como encargados de aplicación, ingeniero
responsable mezclador, mezclador bombero y químico (p<0.029). Se observó
presencia de CL en el 50% del GEP (con p<0.021), destacando los niveles de más
alto daño en el ingeniero responsable mezclador, químico y mezclador bombero;
en el caso de CR, en el 65% del GEP se apreció la presencia de esta anormalidad
con conteos altos en dos de los bomberos, el encargado de invernadero, el
ingeniero responsable mezclador y uno de los encargados de aplicación. Aún
cuando se observan daño en CB y CC, estos valores no presentaron significancia
estadística. En la serie blanca se observa una repuesta inmunológica retardada en
los leucocitos deficiente respuesta en linfocitos, proliferación de bandas, elevación
de monocitos, depleción de neutrófilos y una elevación fuertemente significativa en
eosinófilos del GEP, en comparación del N-GEP.
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Carta de consentimiento para toma de muestra sanguínea con fines de investigación
Lugar y fecha de toma de la muestra -------------------------------------------------------- Por medio de la presente doy mi consentimiento en la toma de mi muestra sanguínea para participar en el protocolo de investigación titulado GENOTOXICIDAD EN HUMANOS POR INTOXICACIÓN CON PLAGUICIDAS EN EL VALLE DE CULIACAN, registrado ante el comité de investigación del Instituto Mexicano de Seguridad Social (IMSS), de Culiacán, Sinaloa y de la Coordinación General de Investigación y Posgrado (CGIP) de la Universidad Autónoma de Sinaloa (UAS). Objetivo del estudio es hacer pruebas de genoxicidad crónica. Se me explicó que mi participación en este estudio consiste en obtención de la muestra de mucosa bucal y sangre de la vena arterial del antebrazo. Declaro que se me ha informado claramente cuál es mi aporte a dicha investigación y que mi muestra no se empleará para otro fin, eliminando así posibles molestias e inconvenientes. Los datos relacionados con el trabajo y publicación serán manejados con fines de investigación y los relacionados con mi privacidad serán manejados en forma confidencial. El investigador responsable se compromete a darme el resultado y la información necesaria para aclararme cualquier duda. -------------------------------------------------------------------------------------------------- Nombre y firma del trabajador -------------------------------------------------------------------------------------------------- Nombre y firma del responsable del proyecto
Números telefónicos a los cuales pueden comunicarse para dudas o preguntas relacionadas con el estudio. 0446671765246.
----------------------------------------------- --------------------------- Testigo Testigo
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Instrumento para la obtención de información de trabajadores del campo que ha utilizado plaguicidas.
FICHA DE IDENTIFICACIÓN NOMBRE DEL TRABAJADOR______________________________________ (OPCIONAL) ESTADO CIVIL________CASADO__SOLTERO___DIVORCIADO_____ ESCOLARIDAD________NINGUNA_______PRIMARIA_____SECUNDARIA______ PREPARATORIA______LICENCIATURA____NIVEL TÉCNICO___ SEXO__________MASCULINO____FEMENINO_______ NOMBRE DEL CAMPO______________________________________________________ PROPIETARIO______________________________________________________ TIEMPO DE VIVIR EN EL CAMPO_________________________ TIEMPO DE TRABAJAR USANDO PLAGUICIDAS, INSECTICIDAS O HERBICIDAS. TIPO DE VIVIENDA_________MATERIAL_______LÁMINA_________JACAL__________MIXTO___________ MANEJO Y APLICACIÓN DE INSECTICIDAS. 1-¿QUÉ SUSTANCIAS QUÍMICAS SE APLICAN CON MAS FRECUENCIA? A.-MALATION B-PARACUAT C.- TEMEPHOS D.- MEZCLAS E.- OTRAS 2.- ¿CUÁL DE ELLAS HA MANEJADO CON MAS FRECUENCIA? A.-MALATION B-PARACUAT C.- TEMEPHOS D.- MEZCLAS E.- OTRAS 3.-¿CÓMO SE HACE EL MANEJO DE LAS SOLUCIONES Y BAJO QUÉ CONDICIONES? A.-EN AMBIENTE CERRADO B.- EN ESPACIO ABIERTO C.- EN EL DREN D.- EN LA NORIA E.- EN CUALQUIER LUGAR 4.-¿CÓMO SE HACE EL MANEJO DE LAS SOLUCIONES? A.-CON CUBETAS B.- CON AGUA Y ALCOHOL C.-CON ACEITE Y AGUA DE LA LLAVE D.- CON POLVO Y AGUA E.- SE MEZCLA DIRECTO EN LOS APLICADORES.MANUALES F.- SE MEZCLA EN LOS APLICADORES DEL AVIÓN. 5.-¿CÓMO SE TRASLADA EL PREPARADO DE LA CASA COMERCIAL (TIENDA QUE LOS VENDE) HASTA EL CAMPO? A.-EN CAMIONES ESPECIALES B.- EN CAMIONETAS NORMALES C.- EN TRACTORES D.- EN PIPAS 6.-¿CÓMO SE TRASLADA EL PREPARADO DEL CAMPO A LAS SIEMBRAS?
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A.- EN TRACTORES B.- EN CAMIONETAS C.- EN PESO DIRECTO POR EL TRABAJADOR D.- EN PIPAS APLICACIÓN 1.-¿QUÉ INSTRUMENTOS UTILIZA PARA LA APLICACIÓN? A.-UNA BOMBA ASPERSORA B.- UNA BOMBA LIQUIDA DE PRESION D.- LAS MANOS 2.-¿CUÁL TIPO DE SUSTANCIA SE UTILIZA MÁS FRECUENTEMENTE? A.-POLVO B.- LÍQUIDA C.- ALTERNANDO A VECES UNA Y A VECES OTRA 3.-¿SE LE HA DICHO LA FORMA DE APLICARLO? SÍ____NO_______ SEGURIDAD E HIGIENE: 1.-¿SE LE HA INFORMADO DE LAS CONDICIONES DE USO DE SUSTANCIAS PLAGUICIDAS? A.- SÍ B.-NO 2.-¿…SOBRE LA FORMA EN QUE SE PREPARAN? A.- SÍ B.-NO 3.-¿SE LE HA INFORMADO DE LAS CONDICIONES EN QUE SE TRANSPORTAN? A.- SÍ B.-NO 4.-¿SE LE HA INFORMADO DE LAS CONDICIONES EN QUE SE APLICAN? A.- SÍ B.-NO 5.- ¿CUÁNDO RECIBIO INFORMACION? A.- HACE 1 MES B.- HACE 3 MESES C.- HACE 6 MESES D.- HACE 1 AÑO O MÁS E.-NUNCA 6.- ¿CUÁNDO RECIBIO CAPACITACION O ADIESTRAMIENTO? A.- HACE 1 MES B.- HACE 3 MESES C.- HACE 6 MESES D.- HACE 1 AÑO O MÁS E.-NUNCA 7.- ¿CUENTA CON EQUIPO DE SEGURIDAD? A.- SÍ B.- NO 8.- ¿LO UTILIZA? A.- SÍ B.- NO 8.- SI LO UTILIZA,¿ DE QUÉ TIPO ES? A) CUBREBOCAS B) GUANTES C).- TRAJE ESPECIAL D.- LOS 3 ANTERIORES E.-MASCARA ESPECIAL F.- NINGUNO 9.-DESPUES DE LA UTILIZACION DE LAS SUSTANCIAS, A LOS RESIDUOS
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SOBRANTES COMO MATERIALES UTILIZADOS, ¿QUE MANEJO LES DAN? A.-LOS TIRAN A BASURA COMÚN D.-AL DRENAJE C.- AL RÍO O CANAL D.- REGRESAN A LA EMPRESA QUE LOS VENDE. E.- SE TRANSPORTAN AL CENTRO DE ACOPIO. 10.- ¿EXISTE VIGILANCIA O SUPERVISIÓN DURANTE LAS APLICACIONES? A.-. POR LA SECRETARÍA DE SALUD B.- POR EL SEGURO SOCIAL C.- POR EL CAMPERO D.- SEMARNAT A PRS E.- PROFEPA F.- AYUNTAMIENTO G.- NINGUNO 11- ¿SE HA INTOXICADO EN ALGUNA OCASIÓN? A.- SÍ B.- NO 12.- ¿QUIÉN Y CÓMO SE LAVAN LOS IMPLEMENTOS? HIGIENE 1.- DESPUÉS DE LA APLICACIÓN, COMO MEDIDA DE ASEO PERSONAL O PROTECCION, ¿ACOSTUMBRA USTED? A.- BAÑARSE CON AGUA SOLA B.- BAÑARSE CON AGUA Y JABON C.- COMER D.- LAVARSE LA MANOS E.- SEGUIR LA RUTINA NORMAL. F.- NADA 2.-.¿CONSUME ALIMENTOS O AGUA EN EL LUGAR DE APLICACIÓN? A.- SÍ B.- NO 3.- ¿ COME DURANTE LA APLICACIÓN DE SUSTANCIAS ? A.- SÍ B.- NO 4.-DURANTE LA PREPARACION O APLICACIÓN, ¿USTED FUMA O UTILIZA OTRAS DROGAS? A.- SÍ B.- NO SINTOMATOLOGÍA 1.- ¿HA TENIDO DOLORES DE CABEZA? A.- SÍ B.- NO 2.- ¿HA PRESENTADO VOMITOS? A.- SI B.- NO 3.- ¿HA PRESENTADO DIARREA? A.- SI B.- NO 4.- ¿HA TENIDO SANGRADOS? A.- NARIZ B.- OIDOS C.- ENCIAS. D.- RECTAL
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5.- ¿HA TENIDO MORETONES EN PIEL? A.- SÍ B.- NO 6.- ¿HA TENIDO DIFICULTAD RESPIRATORIA AL MOMENTO DE APLICAR, PREPARAR ESTAS SUSTANCIAS? A.- SÍ B.- NO 7.- ¿HA PRESENTADO TOS? A.- SÍ B.- NO 8.- ¿HA TENIDO DOLOR TORÁCICO? A.- SI B.- NO 9.- ¿SE HA PUESTO MORADO (A), DE LA PIEL, LABIOS Y DEDOS DE LAS MANOS? A.- SÍ B.- NO 10.- ¿HA PRESENTADO DIFICULTAD PARA RESPIRAR, PRODUCCIÓN DE FLEMAS DE APARICION BRUSCA AL MOMENTO DE PREPARAR O APLICAR ESTAS SUSTANCIAS ? A.- SÍ B.- NO 11.- ¿HA TENIDO RONCHAS, ENROJECIMIENTO, COMEZONES O LESIONES DE OTRO TIPO EN LA PIEL ? A.- SÍ B.- NO 12.- ¿HA TENIDO ALTERACONES SENSORIALES ? SUBRAYE LAS QUE HAYA PRESENTADO AL ESTAR TRABAJANDO O PREPARANDO ESTAS SUSTANCIAS: A.- SALIVACIÓN ABUNDANTE. B.- QUE SE SEQUEN LOS LABIOS Y A LENGUA. C.- LAGRIMEO. D.- MAREOS. E.-VER LUCECITAS F.- PROBLEMAS DE OÍDOS. G.- VISIÓN BORROSA. H.- VÉRTIGO. I.- PÉRDIDA DE LA MEMORIA. J.- CALAMBRES K.- TEMBLORES. L.-AGRANDAMIENTO DE LA PUPILA DE OJOS. M.- PUPILA PEQUEÑITA. N.- DESMAYO O.-ATAQUES TIPO CONVULSIONES. 13.- ¿HA TENIDO QUE RECIBIR ATENCION MÉDICA POR ELLO ? A.- SÍ B.- NO 14.-¿HA SIDO VISTO EN?: A.- CONSULTORIO MEDICO PARTICULAR. B.- EN UNA CLÍNICA DEL IMSS. C.- EN EL CENTRO DE SALUD D.- EN UN HOSPITAL. 15.- ¿ES PORTADOR DE ALGUNA ENFERMEDAD SIGUIENTE? (A.P.P.) A.- DIABETES. B.- PRESIÓN ALTA. C.- ANEMIA. D.- EPILEPSIA. E.- ALERGIA. F.- CÁNCER TIPO______________ G.- TUBERCULOSIS. H.- ALCOHOLISMO. I.- ASMA. 16.-ALGUN FAMILIAR DIRECTO PADECE. (A.H.F.) A) DIABETES. B.- PRESIÓN ALTA. C.- ANEMIA. D.-
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EPILEPSIA. E.- ALERGIA. F.- CÁNCER TIPO_____________ G.- TUBERCULOSIS. H.- ALCOHOLISMO. I.- ASMA. 17.- ¿ALGUN FAMILIAR DIRECTO SE HA INTOXICADO POR PLAGUICIDAS? A.- SÍ B.- NO 18.- EN CASO DE SER MUJER LA TRABAJADORA, INDICAR: EDAD ACTUAL_______ NÚMERO DE EMBARAZOS______PARTOS_______ABORTOS______CESÁREAS__________ ÚLTIMA REGLA__________ EDAD AL TENER PRIMER HIJO_______
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Glosario de abreviaturas
AARC Asociación de Agricultores del Río Culiacán
ACE Aberraciones Cromosómicas Estructurales
ADN Acido Desoxirribonucléico
AEC Aberraciones Cromosómicamente Estructurales
ARN Acido Ribonucléico
BCG Bacilo de Calmette-Guerin
BHC Biometría Hemática Completa
BN Células Binucleadas
C Carbamatos
CC Cromatina Condensada
CA Aberración de Cromosomas
CICOPLAFEST Comisión Intersecretarial para el Control del Proceso y Uso de Plaguicidas, fertilizantes y Sustancias Tóxicas
CGIP Coordinación General de Investigación y Pösgrado
CL Cariolisis
CL50 Concentración Letal Media
COESPLAFEST Comité Estatal de Seguridad para el manejo y uso de Plaguicidas, Fertilizantes y Sustancias Tóxicas
COF Compuestos Organofosforados
CR Cariorexis
DDT Diclorodifeniltricloroetano
DL50 Dosis Letal Media
EC Ensayo cometa
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EMN Eritrocitos micronucleados
ET Eritrocitos totales
E.U.A. Estados Unidos de América
FAO La Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación
GEP Grupo de Expuestos a Plaguicidas
H0 Hipótesis Cero
HT Hipótesis de Trabajo
ICH Intercambio de Cromátidas Hermanas
IMSS Instituto Mexicano del Seguro Social
INEGI Instituto Nacional de Estadisticas y Geografia
LB Linfocito B
LPS Lipopolisacárido
LT Linfocito T
Mns Micronúcleos
MN Mononucleares
N-GEP Grupo de No Expuestos a Plaguicidas
NL Núcleo Lobulado
OC Organoclorados
OF Organosfosforados
OMS Organización Mundial de la Salud
P Piretrinas
PHA Fitohemaglutinina
POE Personal Ocupacionalmente Expuesto
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SCE Intercambio Cromátidas Hermanas
SUAVE Sistema Único Automatizado de Vigilancia Epidemiológica
UAS Universidad Autónoma de Sinaloa