forensik saliva

7/21/2019 Forensik Saliva

1/8

Identifikasi adalah prosedur penentuan identitas individu, baik dalam keadaan hidup

ataupun mati, yang dilakukan melalui perbandingan berbagai data dari individu yang

diperiksa dengan data dari orang yang disangka sebagai individu tersebut. Sebagai prinsip

umum dapat dikatakan bahwa :

1. Pada identifikasi pengumpulan data dilakukan dengan menggunakan sebanyak mungkin

metode identifikasi.

2. Jika ada data yang tidak cocok, maka kemungkinan tersangka sebagai individu tersebut

dapat disingkirkan (eksklusi).

3. Setiap kesesuaian data akan menyebabkan ketepatan identifikasi semakin tinggi.

Ada beberapa cara untuk mengidentifikasi individu diantaranya adalah melalui

pemeriksaan serologi.

II. Forensik Serologi

Forensik serologi adalah studi dan pemeriksaan yang bertujuan untuk menganalisis

darah dan cairan tubuh lainnya dalam berbagai tindak pidana.Serologi forensik melibatkan

identifikasi dari berbagai tipe cairan tubuh. Salah satu jenis pemeriksaan serologi adalah

identifikasi golongan darah korban dan pelaku yang dapat dideteksi melalui suatu barang

bukti seperti bercak darah ataupun darah kering pada kasus perlukaan, semen pada kasus

pemerkosaan ataupun saliva pada kasus gigitan.1

Perbandingan dari antigen-antigen yang ditemukan pada sel-sel darah dan cairan

tubuh manusia merupakan suatu bukti yang eksklusif yang dapat ditemukan untuk

mengidentifikasi seseorang. Bukti macam ini digunakan untuk mengesampingkan seseorang

dari suatu kasus jika ditemukan hasil yang negatif. Hasil positif sendiri hanya terbatas untuk

menempatkan seseorang masuk dalam populasi individu yang memiliki antigen serologik

yang sama, namun belum tentu sifatnya spesifik.1

Sejak awal perkembanganya pemanfaatan serologi / biologi molekuler dalam bidang

forensik lebih banyak untuk keperluan identifikasi personal (perunutan identitas individu)

baik pelaku atau korban. Sistem penggolongan darah (sistem ABO) pertama kali

dikembangkan untuk keperluan penyidikan (merunut asal dan sumber bercak darah pada

tempat kejadian). Belakangan dengan pesatnya perkembangan ilmu genetika (analisi DNA)

telah membuktikan, bahwa setiap individu memiliki kekhasan sidik DNA, sehingga kedepan

sidik DNA dapat digunakan untuk menggantikan peran sidik jari, pada kasus dimana sidik

jari sudah tidak mungkin bisa diperoleh. Di lain hal, analisa DNA sangat diperlukan pada


2/8

penyidikan kasus pembunuhan mutilasi (mayat terpotong potong),penelusuran paternitas

(bapak biologis). Analisa serologi dalam bidang forensik bertujuan untuk:1

- Uji darah untuk menentukan sumbernya (darah manusia atau hewan, atau warna dari

getah tumbuhan, darah pelaku atau korban, atau orang yang tidak terlibat dalam tindak

kejahatan tersebut).

- Uji cairan tubuh lainnya (seperti: air liur, semen vagina atau sperma) untuk menentukan

sumbernya.

- Uji imonologi atau DNA individu untuk mencari identitas seseorang.2

A. Cara Pengambilan Sample Saliva

Sample saliva bisa didapat dari berbagai skenario dan dari berbagai macam benda

seperti baju, makanan, rokok, sikat gigi, tempat minuman, gigi tiruan, perangko dan amplop.

Sampel saliva untuk uji DNA bisa diambil dari bitemark atau melalui teknik buccal swab.

Saliva utamanya tersusun dari air namun juga mengandung elektrolit, buffer,

glikoprotein, antibodi, dan enzim. Tes awal untuk screening saliva adalah dengan

mendeteksi satu kelompok enzim pada saliva yaitu enzim alpha amilase.

Selain itu bisa juga dilakukan screening secara visual untuk melihat bercak saliva.

Screening secara visual ini menggunakan sumber cahaya yaitu laser dan cahaya

intensitas tinggi yang difilter sehingga menghasilkan satu panjang gelombang

Yang menjadi target uji DNA dari sampel saliva adalah sel-sel yang terdapat

didalamnya. Sel ini masuk ke saliva karena aktivitas lingkungan rongga mulut.

Contohnya ada sel mukosa mulut yang tercampur dalam saliva karena aktivitas

pengunyahan. Kemudian misalnya, ada sel darah putih yang didapat dari cairan sulkus

gingiva saat adanya inflamasi.3

1.

Bekas Gigi tan

Metode pengambilan sampel saliva dari bekas gigitan di kulit bisa dengan metode double

swabbing. Teknik ini membutuhkan dua cotton budsteril dan 3 ml air steril.

Prosedurnya:

o Basahi satu ujung cotton bud dengan air

o Aplikasikan ujung cotton bud ini ke daerah dimana terdapat saliva dengan gerakan

memutar dan tekanan ringan


3/8

o Biarkan cotton bud pertama ini mengering di lingkungan bebas kontaminasi

selama paling tidak 30 menit

o Segera setelah swab pertama diambil, aplikasikan ujung cotton bud kedua yang

kering ke daerah bekas saliva yang sudah dibasahi oleh cotton bud pertama.

Gunakan gerakan memutar dan tekanan ringan

o Biarkan cotton bud kedua ini mengering di lingkungan bebas kontaminasi selama

paling tidak 30 menit

o Setelah kering, kedua cotton bud dimasukkan ke satu tempat, ditutup dan ditandai

o Sampel bisa dikirim ke laboratorium untuk diuji

Penting selain mengambil sampel dari kulit korban, perlu juga diambil sampel dari

korban sendiri untuk membedakan hasil uji. Intinya untuk membedakan apakah sampel

saliva itu berasal dari korban atau dari orang lain.3

2.Air liur kering

Pada beberapa kasus medikolegal biasanya, air liur ditemukan dalam bentuk kering.

Oleh karena itu, langkah pertama adalah untuk menentukan apakah noda kering itu

adalah air liur atau noda karena bahan lainnya. Noda yang disebabkan air liur, hasil tes

amylase akan positif.

Prosedur pengambilan sample saliva dari air liur yang telah mengering sebagai berikut :

1.

Ambil sepotong bahan dari benda yang terkena noda air liur, lalu simpan di dalam

tabung tes

2. Masukkan 3-4 ml air salin, lalu rendam selama kurang lebih 12 jam. Lalu beri label

sebagai 'Extract'.

3. Dari ekstrak, 0,5 ml diambil lalu disimpan dalam tabung reaksi yang lain dan

sisanya 3,5 ml disimpan dalam inkubator di 37oC selama setengah jam.

4.

Setelah keluar dari incubator, 0,5 ml ekstrak ditambahkan

5. Lalu tambahkan 0,75 ml asam sulfat (H2SO4) dan 0,25 ml natrium tungstat

6. Larutan ini disentrifus selama 10 menit.

7. Lalu 2 ml tembaga sulfat (CuSO4) basa ditambahkan

8. Larutan ini disimpan selama 10 menit dalam air mandi mendidih.

9. Larutan siap untuk di periksa3


4/8

3.Mukosa oral

Pengambilan sampel dari mukosa mulut bisa menggunakan teknik buccal swab.

Targetnya adalah sel epitel pipih berlapis (squamous epithelial cells) yang bisa diperoleh

dari mukosa di bukal, namun biasanya ada sejumlah saliva yang juga terambil. Teknik

buccal swab ini:

o Sederhana dan tidak sakit

o Mudah dilakukan sendiri

o Donor lebih nyaman

Pengambilan swab dilakukan dengan cotton bud steril. Pertama kita mencatat identitas

donor atau memberi label nomer sampel. Pakai glove dan hindari mengkontaminasi

swab. Prosedur buccal swabnya kemudian:

o Minta donor untuk berkumur dengan air (bila diperlukan*)

o Lap satu sisi mukosa bukal dengan kain kasa steril (bila diperlukan*)

o Aplikasikan ujung cotton bud dengan mantap di daerah mukosa 10 kali, dengan

sedikit memutar ujung cotton bud setiap kali melakukan swab

o Ulangi langkahnya dari awal pada mukosa bukal di kontralateral

o Biarkan kedua swab mengering di lingkungan bebas kontaminasi selama paling

tidak 30 menit

o

Masukkan kedua swab di pembungkus, kemudian masukkan ke container yang

sejuk, kering, bebas sinar UV.

o Sampel siap dikirim ke laboratorium4

(*) Berkumur sebelum mengambil sampel bertujuan untuk mengurangi sisa makanan dan

bahkan mengurangi kontaminasi dari sumber lain (bakteri atau jamur, dll). Mengelap mukosa

juga membantu membersihkan debris seperti plak.

(*) Jadi, berkumur dan mengelap mukosa bukal jangan dilakukan apabila korban diduga

mengalami pemerkosaan dan diduga terjadi seks oral. Pada kondisi ini, pemeriksaan DNA

dari buccal swab lebih bertujuan untuk mencari identitas dari si pelaku.

B. Apakah cairan tersebut adalah saliva.

Pemeriksaan air liur dapat menjadi alat yang berguna dalam berbagai jenis kasus

criminal, meskipun pemeriksaan air liur tidak diminta sesering pemeriksaan untuk air mani

atau darah. Pemeriksaan air liur masih memiliki banyak keterbatasan, saat ini metode yang

paling banyak di gunakan di laboratorium forensik untuk pemeriksaan air liur adalah deteksi

amylase, enzim yang ditemukan dalam air liur.


5/8


6/8

analisis DNA, memotong sekitar 1cm x 1cm bagian dari item dan kertas

Phadebas, lalu masukkan ke dalam tabung yang telah dilabeli dengan identitas.5

b. Phadebas Forensic Tube Test.

Jika diduga bahwa noda yang akan diperiksa adalah noda air liur yang lemah

atau air liur dari swab, maka digunakan Phadebas tube test yang hasilnya lebih sensitif

dibandingkan kertas Phadebas. Sebelumnya untuk pengambilan ekstrak air liur dari

pemeriksaan swab dilakukan prosedur pemeriksaan yang terpisah. Air liur dari

prosedur ekstraksi kemudian dapat diuji dengan menggunakan Phadebas tube di

bawah ini.

Langkah-langkah pemeriksaan Phadebas Forensic Tube :

1. Siapkan 1 tabung untuk saliva dan 1 tabung untuk control.

2. Ekstraksi sampel:

o Bercak Air liur: Potong sebagian kecil dari bercak dan pindahkan ke tabung

steril (kira-kira 3x3 mm.)

o Tambahkan 0,5-1 ml air suling steril dan rendam selama 1 menit. Biarkan di

dalam shaker selama 30 detik.

3. Teteskan 0,5-1 ml ekstrak dari bercak atau swab ke dalam tabung lain.

4. Tambahkan 1 (satu) tablet Phadebas untuk masing-masing tes dan kontrol tabung.

5. Tambahkan 1 ml air salin steril ke sampel dan kontrol tabung lalu masukkan

kembali kedalam shaker.

6. Inkubasi tabung pada suhu 37 C selama 30 menit.

7. Centrifuge tabung pada 10.000 g selama 1 menit.

8. Reaksi amilase positif akan menghasilkan cairan berwarna biru, kepekekatan warna

tergantung pada konsentrasi amilase. Reaksi negatif akan menghasilkan cairan yang

jernih.6

c. Starch Iodine Radial Diffusion Gel Test

Langkah-langkah pemeriksaan Starch Iodine Radial Diffusion Gel :

Sebelumnya disiapkan control positif dan control negative untuk interpretasi hasil

pemeriksaan :


7/8

a. Kontrol Positif : Air liur cair segar yang dikenal (pengenceran 1/500 di H2O)

b. Kontrol Negatif : Air Salin

1. Buat sumur bebentuk lingkaran di cawan petri menggunakan pipet, dengan jarak

1,5 cm antar sumur sampel (sample kontrol positif, sample kontrol negatif dan

sample yang diperiksa)

2. Teteskan sampel yang akan diperiksa sebanyak 4 ml dalam cawan petri dengan

menggunakan pipet.

3. Tutup cawan petri dan masukkan dalam inkubator pada suhu 37 C selama 6 jam.

4. Tetesi larutan yodium yang telah diencerkan 1:50 ke atas cawan ke dalam masing-

masing sumur sampel. Kemudian bilas dengan air.

5.

Lingkaran jelas di sekitar sumur menunjukkan bidang kegiatan amilase. Diameter

lingkaran yang jelas sebanding dengan akar kuadrat dari konsentrasi amilase.

Catat diameter dan hasil dalam catatan.

Interpretasi :

- Sebuah tes positif jika :

Ukuran cincin sama atau lebih besar dibanding ukuran kontrol positif.

Ukuran cincin kurang dari kontrol positif tapi lebih besar dari kontrol negatif.

- Sebuah hasil negatif adalah tidak adanya cincin yang jelas. 7

d.

SALIGaE Test

Pemeriksaan Saligae digunakan untuk menentukan adanya air liur di dalam sebuah

sample yang ditemukan di TKP. Dalam prosedur ini, sejumlah kecil sampel

ditambahkan ke botol tes yang mengandung larutan tidak berwarna. Jika air liur

terdapat di dalam sample tersebut, maka cairan yang tidak berwarna tersebut akan

berubah menjadi kuning. 8

Prosedur SALIGaE Tes sebagai berikut :

1.

Tempatkan sekitar 5mm2 potongan atau 1/2 dari swab yang di ambil di tkp

kedalam 1,5ml tabung microcentrifuge steril.

2. Masukkan 30 ml - 50 ml air deionisasi steril ke dalam tabung.

3.

Inkubasi selama 30 menit pada suhu kamar.


8/8

4. Biarkan botol hangat pada suhu kamar.

5. Hapus gelembung dari tabung test dengan menekan botol secara lembut.

6.

Tambahkan 8 ml sampel ke botol uji

7. Mix lembut

8. Baca hasil setelah 10 menit.

9.

Perubahan warna kuning menunjukkan hasil yang positif. Tidak ada perubahan

warna menunjukkan hasil negatif. Hasil negatif menunjukkan bahwa tidak ada air

liur saat ini atau di bawah batas deteksi tes.8

C. Apakah Cairan Tersebut Berasal Dari Manusia Atau Hewan.

Saliva merupakan komponen tubuh yang dapat dihasilkan oleh berbagai

mammalia, termasuk manusia. Komponen penting yang membedakan saliva manusia

adalah adanya enzim -amylase, yang dihasilkan oleh kelenjar air liur dalam jumlah

besar pada manusia. Berbagai pemeriksaan dapat dilakukan untuk mendeteksi enzim

ini seperti yang telah dijelaskan sebelumnya.9

Selain pemeriksaan langsung terhadap enzim yang terdapat pada saliva, terdapat

pemeriksaan khusus yang memeriksa antibody. Pemeriksaan tersebut adalah

immunochromatographic assay yang menggunakan dua antibody monoclonal yang

spesifik khusus untuk saliva -amylase manusia. Jadi antibody tersebut khusus hanya

untuk saliva manusia dan tidak untuk saliva dari hewan atau mammalia lainnya.9

Pemeriksaan lain yang dapat dilakukan untuk membedakan saliva manusia dengan

lainnya adalah pemeriksaan pH. pH saliva manusia berkisar antara 6.5 sampai 7.5.

Hal ini berbeda dengan pH saliva hewan lainnya seperti anjing yang berkisar 8.5

sampai 8.65. Berbeda dengan anjing, pH yang lebih tinggi memungkinkan untuk efek

dari lisozim hipocyanite dan peroxidase yang 3 kali lebih tinggi sehingga lebih

bersifat antibacterial. Ratio Ca:P pada manusia berkisar 0.5 (0.05-1.9), dimana jauh

lebih rendah pada anjing yaitu 9.9.10

forensik saliva

Documents