genetska struktura populacija ljekovite kadulje s...

31
GENETSKA STRUKTURA POPULACIJA GENETSKA STRUKTURA POPULACIJA LJEKOVITE KADULJE LJEKOVITE KADULJE S BALKANSKOG I APENINSKOG POLUOTOKA S BALKANSKOG I APENINSKOG POLUOTOKA Zlatko Zlatko Š atovi atović Sveu Sveuč ili iliš te u Zagrebu, Agronomski fakultet te u Zagrebu, Agronomski fakultet Znanstveni centar Znanstveni centar i zv zvr snosti snosti za bioraznolikost i molekularno oplem za bioraznolikost i molekularno opleme njivanje bilja (CroP njivanje bilja (CroP- BioDiv) BioDiv) e- mail: [email protected] mail: [email protected] 10. m 10. m eđunarodni kongres eđunarodni kongres Oplemenjivanje bilja, sjemenarstvo i rasadni Oplemenjivanje bilja, sjemenarstvo i rasadnič arstvo arstvo Sv. Martin na Muri, 10. studenog 2017.

Upload: others

Post on 12-Feb-2020

32 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

GENETSKA STRUKTURA POPULACIJAGENETSKA STRUKTURA POPULACIJALJEKOVITE KADULJELJEKOVITE KADULJE

S BALKANSKOG I APENINSKOG POLUOTOKAS BALKANSKOG I APENINSKOG POLUOTOKA

Zlatko Zlatko ŠŠatoviatovićSveuSveučiliiliššte u Zagrebu, Agronomski fakultette u Zagrebu, Agronomski fakultet

Znanstveni centar Znanstveni centar iizvzvrrsnostisnostiza bioraznolikost i molekularno oplemza bioraznolikost i molekularno oplemeenjivanje bilja (CroPnjivanje bilja (CroP--BioDiv)BioDiv)

ee--mail: [email protected]: [email protected]

10. m10. međunarodni kongreseđunarodni kongresOplemenjivanje bilja, sjemenarstvo i rasadniOplemenjivanje bilja, sjemenarstvo i rasadniččarstvoarstvo

Sv. Martin na Muri, 10. studenog 2017.

(1) Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

(2) Genetska raznolikost populacija

(3) Genetske struktura

(4) Raznolikost genetskih skupina

(5) Buduća istraživanja

PLANPLAN

(1) Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

(2) Genetska raznolikost populacija

(3) Genetske struktura

(4) Raznolikost genetskih skupina

(5) Buduća istraživanja

PLANPLAN

LJEKOVITA KADULJALJEKOVITA KADULJA

- vrsta:

Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

- višegodišnja, stranooplodna biljna vrsta- eterično ulje: cis- i trans-tujon, kamfor- raznolikost kemotipova

- rasprostranjenost

obalno područje zapadnog Balkana

središnji i južni Apenini

- uzgoj: Sredozemlje, Balkan, Njemačka, SAD, Australija

- prikupljanje u prirodi: Albanija, BiH, Hrvatska

- negativan utjecaj na bioraznolikost- naturalizirane (feralne) populacije: Sredozemlje, Balkan

- biljke koje su pobjegle iz uzgoja

RRAASPROSTRANJENOST LJEKOVITE KADULJESPROSTRANJENOST LJEKOVITE KADULJE

SVNHRV

BIH

MNE

MKDALB

GRC

ITA

KOS

SRB

ROM

MDA

BLG

HUN

- uzorci:

62 populacije / 1350 biljakaItalija (13), Slovenija (2), Hrvatska (23),

Bosna i Hercegovina (2), Crna Gora (7), Srbija (2), Albanija (5), Makedonija (1), Grčka (7)

- analiza:

8 mikrosatelitnih biljega

- dinukleotidni motivSoUZ001, SoUZ002, SoUZ003, SoUZ007, SoUZ011

- trinukleotidni motiv

SoUZ013, SoUZ014, SoUZ019

UZORCI / ANALIZAUZORCI / ANALIZA

BiljegPonavljajući

motivRaspon(pb)

Na PIC

SoUZ001 (AG)15 141-221 41 0.954

SoUZ002 (TG)11 133-217 23 0.818

SoUZ003 (GT)13 160-212 22 0.766

SoUZ007 (GT)11 138-210 13 0.654

SoUZ011 (GA)25 150-214 30 0.945

SoUZ013 (AAC)8 173-218 15 0.836

SoUZ014 (AGA)10 175-241 22 0.891

SoUZ019 (AGA)16 132-204 25 0.827

Prosjek 23.88 0.836

Ukupno 191

- Na - broj alela- PIC - informacijski sadržaj polimorfizma

INFORMATIVNOST BILJEGAINFORMATIVNOST BILJEGA

(1) Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

(2) Genetska raznolikost populacija

(3) Genetske struktura

(4) Raznolikost genetskih skupina

(5) Buduća istraživanja

PLANPLAN

GENETSKA RAZNOLIKOST POPULACIJAGENETSKA RAZNOLIKOST POPULACIJA

Parametar Prosjek Raspon

Broj alela (Na) 7.242 1.38-11.48

Alelno bogatstvo (Nar) 6.669 1.35-10.11

Zapažena heterozigotnost (HO) 0.665 0.081-0.832

Očekivana heterozigotnost (HE) 0.683 0.087-0.846

11109876543210

GRCITA HRV MNE ALBSVN MKDBIH SRB

Alelno bogatstvo (Nar)

ALELNO BOGATSTVOALELNO BOGATSTVO

Nar < 5

Br. Populacija DržavaP38 Konavle HRVP41 Vrbanj MNEP35 Pelješac HRVP40 Mostar BIHP39 Međugorje BIHP34 Hvar HRVP45 Rumija MNEP28 Šparadići HRV

P59 Arta GRCP03 Maratea ITAP04 Cilento ITAP52 Prespa ALBP01 Pollino 2 ITAP48 Miljkovac SRBP02 Pollino 1 ITAP06 Savoia ITAP10 d'Antino ITAP14 Novokračine SVNP11 M. Salviano ITAP12 Maiella ITA

Nar > 9

(1) Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

(2) Genetska raznolikost populacija

(3) Genetske struktura

(4) Raznolikost genetskih skupina

(5) Buduća istraživanja

PLANPLAN

Metoda:Bayesovska analiza genetske strukture(Bayesian model-based clustering method)

Software:STRUCTURE (Pritchard et al., 2000)

Pretpostavka:- u analiziranom uzorku postoje jedinke koje pripadaju različitim

skupinama sa svojstvenim alelnim učestalostima

Cilj:- svrstati jedinke u skupine na takav način da je unutar svake skupine

maksimalizirana(A) Hardy-Weinbergova ravnoteža (HWE)(B) ravnoteža vezanosti gena (linkage equilibrium)

GENETSKA STRUKTURAGENETSKA STRUKTURA

BROJ GENETSKIH SKUPINA: BROJ GENETSKIH SKUPINA: lnln P(X|K) i K

4889.88

3.97

0.69

21.49

0.42

3.54

0.36

1.57

0.56

-52000

-50000

-48000

-46000

-44000

-42000

-40000

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

lnP(X

|K)

0.1

1

10

100

1000

10000

100000K

K

ln P(X|K): vjerodostojnost (posteriorna vjerojatnost; 30 prohoda za svaki K)K: stopa promjene vjerodostojnosti između uzastopnih vrijednosti K

K = 2K = 2

100

75

50

25

0

Q

GRCITA HRV MNE ALBSVN MKDBIH SRB

K = 2K = 2

- izračun % genoma (Q) svake jedinke koji potječe iz određenog genetske skupine

- svaka je populacija predstavljena stupcem, a boja odgovara prosječnom % genoma jedinki u populaciji koji potječe iz određene genetske skupine

BBalkan

AApenini

K = 3K = 3

100

75

50

25

0

Q

100

75

50

25

0

Q

GRCITA HRV MNE ALBSVN MKDBIH SRB

K = 3K = 3

K = 2K = 2

BalkanApenini

jugoistočne

populacije

sjeverozapadne

populacije

K = 4K = 4

100

75

50

25

0

Q

100

75

50

25

0

Q

100

75

50

25

0

Q

GRCITA HRV MNE ALBSVN MKDBIH SRB

K = 4K = 4

K = 3K = 3

K = 2K = 2

BalkanApenini

Albanija

Grčka

sjeverni

Jadran

srednji

Jadran

K = 5K = 5

100

75

50

25

0

Q

100

75

50

25

0

Q

100

75

50

25

0

Q

100

75

50

25

0

Q

K = 5K = 5

K = 4K = 4

K = 3K = 3

K = 2K = 2

GENETSKE SKUPINEGENETSKE SKUPINE

Skupina

A južni Apenini

B središnji Apenini

C sjeverni Jadran

D srednji Jadran

E Albanija/Grčka

(1) Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

(2) Genetska raznolikost populacija

(3) Genetske struktura

(4) Raznolikost genetskih skupina

(5) Buduća istraživanja

PLANPLAN

RRAZNOLIKOST GENETSKIH SKUPINAAZNOLIKOST GENETSKIH SKUPINA

0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

7.00

8.00

9.00

0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0.80

0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0.80

A B C D E

AA

AA

AAAA

AA ABABBBCC

ABAB

ABAB

BB

CC

CC CC

BBBB

SkupinaBroj

populacijaNpr

A južni Apenini 6 6

B središnji Apenini 6 0

C sjeverni Jadran 15 2

D srednji Jadran 26 26

E Albanija/Grčka 9 9

Npr - broj jedinstvenih alelaNar - alelno bogatstvoHO - zapažena heterozigotnostHE - očekivana heterozigotnost

HO

HE

Nar

Vrijednosti označene istim slovom signifikantno se ne razlikuju na razini 5%

GGENETSKI ODNOS IZMEĐU SKUPINAENETSKI ODNOS IZMEĐU SKUPINA

A: južni apenini

B: središnji ApeniniC: sjeverni Jadran

D: srednji Jadran

E: Albanija/Grčka

0.05

Mjerilo udaljenosti:Neto nukleotidne udaljenost (net nucleotide distance)

Izrada stabla:Metoda sparivanja susjeda (Neighbor–Joining method)

MODELIRANJE EKOLOMODELIRANJE EKOLOŠŠKIH NIKIH NIŠŠAA

- Modeliranje ekoloških niša(Ecological Niche Modelling; ENM)

- Modeliranje rasprostranjenosti vrsta(Species Distribution Modelling; SDM)

- procijeniti odnos između rasprostranjenosti vrste po određenim nalazištima i okolišnih uvjeta tih nalazišta

- procijeniti pogodnost staništa za vrstu- izraditi model rasprostranjenosti vrste

(= utvrditi povoljno stanište za vrstu)

- ulazni podaci:(1) zemljopisna rasprostranjenost

90 podataka o rasprostranjenosti(2) okolišni uvjeti nalazišta

19 bioklimatskih parametara (WorldClim database)- 11 temperaturnih- i 8 oborinskih parametara- predstavljaju godišnja kretanja, sezonske promjene, te

temperaturne i oborinske ekstreme

POGODNOST STANIPOGODNOST STANIŠŠTA: BTA: BIIOKLIMATSKA STVOJSTVAOKLIMATSKA STVOJSTVA

0.23 - 0.450.45 - 0.680.68 - 0.90

Pogodnost staništa:

POVIJESNO RASPROSTRANJENJEPOVIJESNO RASPROSTRANJENJE

- modeliranje rasprostranjenosti vrste u vrijeme posljednjeg glacijalnog maksimuma

(Last Glacial Maximum; LGM; ~21,000 g.pr.n.e.)- otkrivanje mogućih glacijalnih refugija vrste

- glacijalni refugij (glacial refugium) - regija u kojoj je određena vrsta preživjela ledeno doba

- ulazni podaci:(1) model za sadašnje stanja

(2) klimatski uvjeti u prošlosti

19 bioklimatskih varijabli

bioklimatski podaci za LGM razvijeni u okviru projekta

Paleoclimate Modelling Intercomparison Project Phase II

- dva modela:

CCSM (Community Climate System Model; USA)

MIROC (Model for Interdisciplinary Research on Climate; Japan)

Suitability0.26 - 0.50

0.51 - 0.75

0.76 - 0.84

Jadransko more

- MIROC: umjereni pad temperature

EENNMM: POSLJEDNJI GLACIJALNI MAKSIMUM : POSLJEDNJI GLACIJALNI MAKSIMUM (MIROC)(MIROC)

0.26 - 0.500.51 - 0.750.76 - 0.94

Pogodnost staništa:

POGODNOST STANIPOGODNOST STANIŠŠTA: TA: PPEDOLOEDOLOŠŠKA SVOJSTVAKA SVOJSTVA

Soil Atlas of EuropeKlasifikacija: The World Reference Base for Soil Resources (WBR)

Leptosol- kamenjar- rendzina- ranker

Kambisol- smeđe tlo- crvenica

(1) Ljekovita kadulja (Salvia officinalis L.)

(2) Genetska raznolikost populacija

(3) Genetske struktura

(4) Raznolikost genetskih skupina

(5) Buduća istraživanja

PLANPLAN

BUDUBUDUĆĆA ISTRAA ISTRAŽŽIVANJAIVANJA

(1) Rekonstrukcija demografske povijesti vrste- Apsoksimativna Bayesovska analiza

(Approximate Bayesian Computation; ABC)- usporediti alternativne scenarije i procijeniti parametre

najvjerodostojnijeg scenarija(efektivna veličina populacije; vrijeme razdvajanja)

posljednji glacijalni maksimum(Last Glacial Maximum; LGM)

~21,000 g.pr.n.e.

?

?

Mesinska kriza salinitetaZanklijska poplava

~5.33 milijuna g.pr.n.e

BUDUBUDUĆĆA ISTRAA ISTRAŽŽIVANJAIVANJA

(2) Usporediti rezultate analize mikrosatelitnim biljezimas rezultatima analize haplotipova na temelju kloroplastne DNA

Sićevačka klisura

KaduljaKadulja

docdoc.. dr. sc. Ivan dr. sc. Ivan ŠŠoošštaritarićć

GENETSKA STRUKTURA POPULACIJAGENETSKA STRUKTURA POPULACIJALJEKOVITE KADULJELJEKOVITE KADULJE

S BALKANSKOG I APENINSKOG POLUOTOKAS BALKANSKOG I APENINSKOG POLUOTOKA

Zlatko Zlatko ŠŠatoviatovićSveuSveučiliiliššte u Zagrebu, Agronomski fakultette u Zagrebu, Agronomski fakultet

Znanstveni centar Znanstveni centar iizvzvrrsnostisnostiza bioraznolikost i molekularno oplemza bioraznolikost i molekularno oplemeenjivanje bilja (CroPnjivanje bilja (CroP--BioDiv)BioDiv)

ee--mail: [email protected]: [email protected]

10. m10. međunarodni kongreseđunarodni kongresOplemenjivanje bilja, sjemenarstvo i rasadniOplemenjivanje bilja, sjemenarstvo i rasadniččarstvoarstvo

Sv. Martin na Muri, 10. studenog 2017.