hicrome - himedia

Pág.

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

33

34

Código HiMedia (Meio em pó) CHROMagarDifco - BD

Merck Oxoid Remel

Agar HiCrome ECC(HiCrome ECC Agar)

CHROMagar ECC Cromogênico E.coli/ Meio ColiformeM1293

Agar HiCrome Seletivo ECC(HiCrome ECC Selective Agar)

Agar ChromocultColiform

Meio CromogênicoSeletivo E.

coli Coliforme M1294

Agar HiCrome Coliformes (com SLS) (HiCrome Coliform Agar (W/ SLS)

Agar ChromocultColiform M1300

Caldo M-E.coli(M-E.coli Broth)M1426

Agar HiCrome Sulfato Lauril(HiCrome Lauryl Sulphate Agar)M1569

Agar HiCrome E-coli / Modificado(HiCrome E. coli Agar / Modified)

CHROMagar E.coliAgar ChromocultTBX Triptona BileX-Glucuoronida

Meio Triptona BileX-Glucuoronida

(TBX)M1295 / M1295i

Agar HiCrome M-TEC(HiCrome M-TEC Agar) Agar M-TECM1571

Agar Base HiCrome MacConkey Sorbitol(HiCrome MacConkey Sorbitol Agar Base) CHROMagar. 0157

Agar SorbiltolMacConkey (c/ subs-trato cromogênico)

Agar MacConkeySorbitol com BCIGM1340

Agar HiCrome EC.0157:H7(HiCrome EC.0157:H7 Agar)

CHROMagar. 0157M1574

Agar Base HiCrome Seletivo EC.0157:H7 *(HiCrome EC.0157:H7 Selective Agar Base)M1575

Caldo Base HiCrome de Enriquecimento ECO157:H7(HiCrome Enrichment Broth Base for ECO157:H7)

M1598

Agar HiCrome Seletivo UTI (HiCrome UTI Selective Agar)M1505

Agar HiCrome UTI Modificado(HiCrome UTI Agar Modified)M1418

Agar HiCrome UTI CHROMagarOrientation

Meio CromogênicoUTI

Meio Cromogênico UTIM1353

Agar Diferencial SalmonellaSalmonella Differential Agar Agar Rambach Agar Rambach M1078

Agar Diferencial Salmonella Modificado (pacote duplo)Salmonella Differential Agar Modified (Twin pack)M1082

Agar HiCrome Salmonella (HiCrome Salmonella Agar)

CHROMagarSalmonella

Agar BaseCromogênicoSalmonella

Agar CromogênicoSalmonellaM1296

Agar HiCrome MM(HiCrome MM Agar)M1393

Agar HiCrome Enterococci(HiCrome Enterococci Agar)

Caldo HiCrome Enterococci (HiCrome Enterococci Broth)

Caldo ChromocultEnterococci

M1414

M1376

Agar Base HiCrome Enterococcus feaciumHiCrome Enterococcus farcium Agar BaseM1580

Agar HiCrome Candida(HiCrome Candida Agar)

CHROMagarCandida

Agar ChromogênicoCandida

Agar CromogênicoCandida M1297A

Agar Base HiCrome OGYE(HiCrome OGYE Agar Base)M1467

Agar HiCrome Enterobacter sakazakii(HiCrome Enterobacter sakazakii Agar)

Agar CromogênicoEnterobacter sakazakii

Meio ChromoE. sakazakiiM1577

Agar HiCrome Enterobacter sakazakii, Modificado(HiCrome Enterobacter sakazakii Agar, Modified)

Agar CromogênicoEnterobacter sakazakiiM1641

Agar Base HiCrome Seletivo Klebsiella(HiCrome Klebsiella Sective Agar Base)M1573

Agar Base Diferencial L.mono(L.mono Differential Agar Base)

CHROMagarListeria

M1540

Agar HiCrome Listeria, Modificado(HiCrome Listeria Agar, Modified)M1417

Agar MCP(MCP Agar)M1354

Agar HiCrome Bacillus(HiCrome Bacillus Agar)

Agar CromogênicoBacillus cereusM1651

Agar Base HiFluoro Pseudomonas(HiFluoro Pseudomonas Agar Base)M1469

Agar HiColiformes Rápido(Rapid HiColiform Agar)

* Similar ao Biosynth’s BCM 0157 Agar

M1465

Índice

M1293AGAR HICROME ECC

AGAR

HIC

RO

ME

ECC

Composição Princípio e Interpretação

Procedimento de Preparo

Avaliação de Resultados

Controle de qualidade

Agar HiCrome ECC é um meio diferencial recomendado para a identificação presuntiva de Escherichia coli e outros coliformes em amostras ambientais e alimentos.

Para Identificação e Diferenciação de E. coli e Coliformes totais.

Ingredientes g/L

Peptona especial 5.00Extrato de levedura 3.00Lactose 2.50Fosfato dissódico 3.50Fosfato ácido de potássio 1.50Cloreto de sódio 5.00Mistura cromogênica 20.30Vermelho neutro 0.03Ágar 15.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 55.83 gramas em 1000 mL de água destilada. Ferva gentilmente para dissolver o meio completamente. Esterilize por autoclavação sob pressão de 1 atm a 121°C por 15 minutos. Resf-rie a 50°C. Misture bem e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a rosado, homogêneo que flui livremente.Solidificação: Firme, comparável com Agar gel a 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor rosa avermelhado, gel opaco em placas de Petri.Reação: A solução aquosa de 5.58% (peso/volume) tem pH final de 6.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó entre 2 e 8°C , em frasco bem fechado . Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Doyle M. P., (Ed.), 198, Foodborne Bacterial Pathogens Marcel Dekker, New York2. Frampton E.W., Restaino L. and Blaszko N., (1988), J. Food Prot., 51:402.3. Kilian M. and Bülow P., (1976), Acta. Pathol. Microbiol. Scand., Sect. B, 84:245.4. Kilian M. and Bülow P., (1979), Acta. Pathol. Microbiol. Scand., Sect. B, 87:271.

Característica da cultura após incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

E. coli, um membro da família Enterobacteriaceae, faz parte damicrobiota normal do trato intestinal de humanos e de uma variedade de animais. Embora a maior parte das E. coli não causem doenças gastrointestinais, certos grupos de E. coli podem causar diarréias com risco de vida e seqüelas severas ou deficiência (1). O Agar HiCrome ECC é um meio diferencial recomendado para a identificação presuntiva de E. coli e outros coliformes em alimentos e amostras ambientais (2). O meio contém dois cromógenos. Um dos cromógenos é clivado pela enzima glucoronidase produzida por E. coli e forma colônias de cor azul a arroxeado enquanto que o outro cromógeno é clivado pela enzima galactosidase, produzida pela maioria dos coliformes, resultando em colônias rosa-choque (3,4).A peptona especial e o extrato de levedura fornecem substâncias nitrogenadas, vitaminas do complexo de B e outros nutrientes essenciais ao crescimento. A lactose é um carboidrato fermen-tável, o qual ajuda na detecção de fermentadores de lactose, com o vermelho neutro como indicador. O fosfato dissódico e o fosfato ácido de potássio tamponam bem o meio. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. Antes do uso a superfície do meio deve estar seca. Dilua a amostra de alimento em 1:5 ou 1:10 com 0,1% de água Peptonada estéril (M028) e homogeneíze em um liquidificador ou em um homogeneizador. Espalhe 0,5 mL ou 1,0 mL do homoge-neizado sobre a superfície do ágar com uma alça de Drygalski e incube as placas a 37°C por 18-24 horas. Conte as colônias de cor azul arroxeadas e multiplique pelo fator de diluição. O número de E. coli é relatado por grama de alimento.O meio deve ser usado apenas com o propósito de diagnóstico in vitro. Use máscara enquanto manuseia o produto desidratado e evite o contato com os olhos.

01

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante 70% Azul/roxoKlebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100 Abundante 70% Rosado/rosa pinkPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 50-100 Bom-abundante 70% PalhaSalmonella Enteritidis ATCC 13076 50-100 Abundante 70% Rosa pink

M1294

02

AGAR BASE HICROME SELETIVO ECCAG

AR B

ASE

HIC

RO

ME

SELE

TIVO

ECC

ComposiçãoPrincípio e Interpretação




Agar Base HiCrome Seletivo ECC é recomendado para detecção de Escherichia coli e coliformes em amostras de água e alimento.


Ingredientes g/L

Peptona especial 6.00Hidrolisado enzimático de caseína 3.30Fosfato ácido de sódio 0.60 Fosfato dissódico 1.00Cloreto de sódio 2.00Piruvato de sódio 1.00L-Triptofano 1.00Sorbitol 1.00Tergitol 7 0.15Mistura cromogênica 0.43Ágar 10.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 26.48 gramas em 1000 mL de água destilada. Aqueça em Banho-Maria fervente com agitação ou em vapor fluente para dissolver o meio completamente (aproximadamente 35 minutos). NÃO AUTOCLAVE OU SUPERAQUEÇA. Se desejar, o meio sele-tivo pode ser preparado adicionando assepticamente 1 frasco de Suplemento Seletivo ECC HiCrome (FD190) ao meio previamente esterilizado e resfriado. Misture bem e distribua em placas de Petri estéreis. O meio pode se apresentar turvo, porém isto não afeta sua performance.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo, homogêneo que flui livremente. Solidificação: Firme, comparável com ágar gel a 1.0%.Cor e Transparência do meio preparado: amarela clara, gel trans-parente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 2.65% (peso/volume) apresenta pH final de 6.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Frampton E.W., Restaino L. and Blaszko N., (1988), J. Food Prot., 51:402.2. Kilian M. and Bülow P., (1976), Acta. Pathol. Microbiol. Scand., Sect. B, 84:245.3. LeMinor L. and Hamida F., (1962), Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102: 267.4. Manafi M. and Kneifel W., (1989), Zentralbl. Hyg., 189:225.

* Confirmação da coloração vermelha em torno das colônias pela adição do reagente de Kovacs (R008)

Características da cultura após incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

O Agar HiCrome Seletivo ECC é um meio recomendado para detecções simultâneas de E. coli e coliformes totais em amostras de água e alimento (1,2). A mistura cromogênica contém dois substratos cromogênicos. A enzima β-D-glucuronidase produzida por coliformes cliva um dos cromógenos e forma colônias salmão a vermelhas. A enzima β-D-lucuronidase produzida por E. coli, cliva o X-glucuronide, e outros cromógenos (4). As colônias de E. coli terão cor azul escura a violeta devido à clivagem de ambos cromógenos. A adição de L-Triptofano melhora a reação indol, aumentando a fidelidade da reação. A peptona especial, piruvato de sódio e o sorbitol fornecem substâncias nitrogenadas, carboidratos fermentáveis e outros nutrientes essenciais para o crescimento dos organismos. Os fosfatos tamponam o meio. A formulação do meio auxilia coliformes danificados a se recuperar e a crescer rapidamente. O Tergitol inibe tanto bactérias gram-positivas como algumas bactérias gram-negativas não coliformes (3). A adição de suplemento seletivo ECC (Cefsulodina) (FD190) ajuda a inibir a microflora heterogênea presente. O meio é inoculado por ambas as técnicas, pour plate ou pela semeadura das amostras na superfície da placa (spread plate). A técnica de filtração por membrana também pode ser usada. Para confirmar E. coli, adicione uma gota do reagente de Kovac sobre as colônias azul-escuras a violeta. A formação da coloração vermelha-cereja indica que a reação é positiva.

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação IndolCor da colôniaCitrobacter freundii ATCC 8090 50-100 abundante ≥50% negativosalmão a vermelho (grande)Enterobacter aerogenes ATCC 13048 50-100 abundante ≥50% negativosalmão a vermelhoEscherichia coli ATCC 25922 50-100 bom-abundante ≥50% positivo*azul escuro a violetaEnterococcus faecalis ATCC 29212 ≥10 3 Inibido 0% --Salmonella Enteritidis ATCC 13076 50-100 bom 40-50% negativoincolorShigella flexneri ATCC 29508 50-100 bom 40-50% negativoazul claro a turquesaEscherichia coli O157:H7 (NCTC 12900) 50-100 abundante ≥50% positivo*salmão a vermelho

M1300AGAR HICROME COLIFORMES COM LAURIL SULFATO DE SÓDIO (SLS)

AGAR

HIC

RO

ME

COLI

FOR

MES

CO

M L

AUR

IL S

ULF

ATO

DE

SÓD

IO (S

LS)





O Agar HiCrome Coliformes com Lauril Sulfato de Sódio é um ágar seletivo recomendado para detecção simultânea de Escherichia coli e coliformes totais em amostras de água e alimentos.

Para Identificação e Diferenciação de E. coli e Coliformes totais

Ingredientes g/L

Peptona especial 3.00Cloreto de sódio 5.00Fosfato dipotássico 3.00Fosfato ácido de potássio 1.70Piruvato de sódio 1.00L-Triptofano 1.00Lauril sulfato de sódio 0.10Mistura cromogênica 0.20Ágar 12.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 27 gramas em 1000 mL de água destilada. Ferva até dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Quando se espera a presença de um alto número de bactérias gram-positivas, adicione 5 mg/L de novobiocina antes de autoclavar o meio.

Aparência do pó: Pó amarelo a bege, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.2%.Cor e Transparência do meio preparado: Incolor, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 2.70% (peso/volume) apresenta pH final de 6.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Frampton E.W., Restaino L. and Blaszko N., 1988, J. Food Prot., 51:402.2. Kilian M. and Bülow P., 1976, Acta. Pathol. Microbiol. Scand., Sect. B, 84:245.3. LeMinor L. and Hamida F., 1962, Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102: 267.4. Manafi M. and Kneifel W., 1989, Zentralbl. Hyg., 189:225.

Características da cultura após de 24 horas (48 horas se necessário) a 35-37°C.

* Confirmação da coloração vermelha em torno das colônias pela adição do reagente de Kovacs (R008)

O Agar Hicrome Coliforme com Lauril Sulfato de Sódio é um meio seletivo recomendado para detecções simultâneas de Escherichia coli e coliformes totais em amostras de água e alimento (4). A peptona especial e o piruvato de sódio fornecem nutrientes essenciais de crescimento para os organismos. Os fosfatos tamponam o meio. A formulação do meio auxilia mesmo coliformes danificados a se recuperar e a crescer rapidamente. O lauril sulfato de sódio inibe organismos gram-positivos. A mistura cromogênica contém dois substratos cromogênicos. A enzima β-galactosidase, produzida pelos coliformes, cliva um cromógeno resultando na coloração púrpura das colônias de coliformes. A enzima β-glucuronidase produzida pela E. coli, cliva X-glucuronida. E.coli forma colônias de coloração azul escuro a violeta devido à clivagem de ambos os cromógenos (1,2,3). A adição de triptofano melhora a reação de indol, e assim, aumenta a confiabilidade da reação em combinação com os dois cromógenos. Para confirmar E. coli, adicione uma gota de reagente de Kovac (R008) sobre as colônias azul-escura ou violeta. A formação de coloração vermelha cereja indica reação positiva.

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação IndolCor da colôniaCitrobacter freundii ATCC 8090 50-100 bom-abundante ≥50% negativosalmão a vermelhoE. coli ATCC 25922 50-100 bom-abundante ≥50% positivo*azul escuro a violetaEnterobacter cloacae ATCC 23355 50-100 bom-abundante ≥50% negativosalmão a vermelhoEnterococcus faecalis ATCC 29212 ≥10 3 inibido 0% --Klebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100 bom-abundante ≥50% negativorosa claroSalmonella Enteritidis ATCC 13076 50-100 bom 40-50% negativoincolorShigella flexneri ATCC 12022 50-100 bom 40-50% negativoincolor

03

M1426CALDO M – E. COLI

CALD

O M

– E

. CO

LI





Caldo recomendado para detecção, diferenciação e quantificação de Escherichia coli e coliformes em amostras de água usando a técnica de filtração por membrana.


Ingredientes g/L

Hidrolisado enzimático de caseína 20.00Mistura de sais biliares 1.50Mistura cromogênica 0.175

pH Final (a 25°C): 7.2 ± 0.2

Dissolva 21.67 gramas em 1000mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE OU SUPER-AQUEÇA. Após resfriamento, adicione assepticamente a quantidade desejada (2 a 5mL) do caldo em uma almofada de algodão absorvente estéril até saturação. O meio deve ser usado dentro de 24 horas da reidratação.

Aparência do pó: Cor amarela clara a bege, homogêneo e pó livre circulante.Cor e Transparência do meio preparado: Cor amarela claro, solução transparente.Reação: A solução aquosa a 2.16% (peso/volume) apresenta pH final de 7.2 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Anderson J.M. and Baird Parker A.C., (1975), J. Appl. Bact., 39:111.2. Hansen W. and Yourassawsky E., (1984), J. clin. Microbiol. 20:1177.

Características da cultura após incubação a 37°C por 18-24 horas.

O Caldo M-E. coli é usado na detecção e diferenciação de Escherichia coli e coliformes em amostras de água usando a técnica de filtração por membrana. O meio está baseado no Agar Bile Triptona usado para detecção de Escherichia coli em alimentos (1) onde a recuperação de Escherichia coli é mais rápida, confiável e precisa.A amostra de água é filtrada através de membranas e então colocada sobre uma almofada de algodão saturado com Caldo M E-coli e incubada a 37°C em placas de Petri seladas. O meio contém mistura cromogênica a qual auxilia na detecção de atividade glicuronidase de Escherichia coli (2). Esta enzima específica diferencia Escherichia coli de outros coliformes. Células de Escherichia coli quebram a mistura cromogênica com auxílio da glicuronidase para dar coloração azul às colônias. Outros coliformes que não sejam Escherichia coli tornam-se vermelhos quando reduzem TTC (cloreto de 2,3,5-trifenil tetrazolio). Desta forma, a coloração resultante distinta permite a interpretação simples do teste sem necessidade de confirmações posteriores. O hidrolisado enzimático de caseína fornece os nutrientes de crescimento essenciais para os organismos. Os sais biliares inibem organismos gram-positivos.

Organismos Crescimento Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 abundante Verde azuladoEnterobacter aerogenes ATCC 13048 abundante vermelha

-Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido

Inóculo

50-10050-100

3≥10

04

M1569AGAR HICROME M-LAURIL SULFATO

AGAR

HIC

RO

ME

M-L

AUR

IL S

ULF

ATO





Recomendado para diferenciação e quantificação de Escherichia coli e outros coliformes por única técnica de filtração por membrana.


Ingredientes g/L

Digesto péptico de tecido animal 40.00Extrato de levedura 6.00Lactose 30.00Vermelho de fenol 0.20Lauril sulfato de sódio 1.00Piruvato de sódio 0.50Cromógeno 0.20Agar 10.00

pH Final (a 25°C): 7.4 ± 0.2

Dissolva 87.9 gramas em 1000mL de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver o meio completamente. Mexa bem. Esterilize autoclavando a 15lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Resfrie o meio a 50°C e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a rosa, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.0%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor vermelha, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 8.8% (peso/volume) apresenta pH final de 7.4 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8ºC. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Mallman and Darby, 1941, Am. J. Public Health, 31:127.2. Sartory D.P. and Howard L, 1992, Lett Appl. Microbiol. 15:273-276.3. Methods for Examination of Waters and Associated Materials, Environment Agency, 1998, Standing Committee of Analysts.

Características da cultura após incubação a 35-37°C por 24 horas.

O Agar Hicrome M-Lauril Sulfato é uma modificação do Caldo Lauril Triptose, formulado por Mallman e Darby (1). Este meio cromogênico é recomendado para a identificação presuntiva e diferenciação de E. coli de outros coliformes por uma única técnica de filtração por membrana (2,3). A incorporação do cromógeno X-glucuronida e do corante vermelho de fenol favorecem a identificação de E. coli e de outros coliformes baseado na coloração. Digesto péptico de tecido animal e o extrato de levedura forne-cem os nutrientes de crescimento essenciais para os organismos. A lactose atua como uma fonte de açúcar fermentável enquanto o lauril sulfato de sódio inibe outros organismos que não são coliformes. A enzima β-glucuronidase produzida por E. coli cliva X-glucuronida é detectada cor verde para as colônias. A fermentação da lactose pelo indicador vermelho de fenol.

Organismos Inóculo Crescimento Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 abundante verdeKlebsiella pneumoniae ATCC 13883 50-100 bom amarela, mucóideStaphylococcus aureus ATCC 25923

50-100inibido -

Salmonella Enteritidis ATCC 13076≥10 3

bom rosa

05

M1295 / M1295IAGAR HICROME E. coli





Agar HiCrome E. coli é recomendado para detecção e quantificação de Escherichia coli em amostras de alimentos sem confirmação posterior em membrana filtrante ou pelo reagente de indol.

Para Identificação de E. coli.

M1295 M1295IIngredientes g/L g/L

Hidrolisado enzimático de caseína 14.00 20.00Peptona especial 5.00 - Mistura de sais biliares 1.50 1.50Fosfato dissódico 1.00 - Fosfato ácido de sódio 0.60 - Cloreto de sódio 2.40 - X-Glucuronida 0.075 0.075Ágar 12.00 15.00

pH Final (a 25°C): 7.2 ± 0.2

Dissolva 36.57 gramas em 1000 mL de água destilada. Aqueça até a fervura para dissolver completamente. Esterilize por autoclavação sob pressão de 1atm a 121°C por 15 minutos. Resfrie a 50°C e despeje em placa de Petri.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.2% para M1295 ou 1.5% para M1295I.Cor e Transparência do meio preparado: Amarelo claro, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação:A solução aquosa de 3.66% (peso/volume) tem pH final de 7.2 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Anderson J.M. and Baird-Parker A.C., (1975), J. Appl. Bact., 39.111.2.Hansen W. and Yourassawsky E., (1984), J. Clin. Microbiol., 20:1117.


O Agar HiCrome E. coli é baseado no Agar Bile Triptona para detectar E. coli em alimentos (1) no qual a recuperação de E. coli é mais rápida, confiável e precisa. A maioria das linhagens de E. coli podem ser diferenciadas de outros coliformes pela presença da enzima glucuronidase a qual é altamente específica para E. coli (2). O agente cromogênico X-glucuronide usado neste meio ajuda a detectar atividade glucurodinase da E.coli. As células de E. coli absorvem X-glucuronidase e a glucuronidase intercelular quebra a ligação entre cromóforo e a glucuronida. O cromóforo liberado fornece a coloração para as colônias de E. coli. O hidrolisado enzimático de caseína e a peptona especial fornecem os nutrientes de crescimento especiais para os organismos. A mistura de sais biliares inibe organismos gram-positivos. O cloreto de sódio e os fosfatos mantêm o balanço osmótico e a ação de tamponamento respectivamente. Secar a superfície do meio antes do uso. Dilua as amostras de alimento em 1:5 ou 1:10 com 0,1% (peso/volume) em Água Peptonada (M028) estéril e homogeneizar em um liquidificador ou homoge-neizador. Pipete 0.5 ml ou 1.0 ml de amostra de alimento homogeneizada na placa e espalhe com uma alça de Drygalski esterilizada. Incube as placas a 30°C por 4 horas e então 44°C por 18 horas.

06

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 abundante ≥ 50% verde azuladoSalmonella Enteritidis ATCC13076 50-100 abundante ≥ 50% incolorStaphylococcus aureus ATCC 25923 inibido 0%≥ 10 3

AGAR

HIC

RO

ME

E. c

oli

M1571AGAR HICROME M-TEC

AGAR

HIC

RO

ME

M-T

EC





Agar recomendado pela Agência de Proteção Ambiental dos Estados Unidos (USEPA) para detecção de Escherichia coli termotolerante em água pela técnica de filtragem por membrana.

Para Identificação de E. coli.

Ingredientes g/L

Protease Peptona 5.00Extrato de Levedura 3.00Lactose 10.00Cloreto de Sódio 7.50Fosfato dipotássico 3.30Fosfato monopotássio 1.00Lauril sulfato de sódio 0.20Desoxicolato de sódio 0.10Cromógeno 0.50Agar 15.00

pH Final (a 25ºC): 7.3 ± 0.2

Dissolva 45.6 gramas em 1000mL de água destilada. Aqueça para dissolver o meio completamente. Esterilizar autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Esfrie a 45°C e distribua em placas de Petri.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com um Agar gel 1.5%Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, levemente opalescente em placas de Petri. Reação: A solução aquosa a 4.56% (peso/volume) apresenta pH final de 7.3 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. U.S. Environmental Protection Agency, 2002, Method 1603; Publication EPA-821-R-02-023.2. Dufour, Strickland e Cabelli,1981, Appl. Environ. Microbiol. 41:1152.

Características da cultura após de 22-24 horas a 44.5 ± 0.2°C.

O Agar Hicrome M-TEC é um meio cromogênico usado para a detecção e contagem de E. coli termotolerante (TEC) em amostras de água pela técnica de filtração por membrana (1), desenvolvida por Dufour (2). O meio modificado contém o cromógeno 5-bromo-6-cloro-3-indolil-β-X-Glucuronida que é clivado pela enzima β-glucuronidase para formar ácido glucurônico, produzido pelas cepas de E. coli. Este transmite a cor púrpura-magenta apenas para as colônias de E. coli.A protease peptona e o extrato de levedura fornecem os nutrientes essenciais. A lactose é o carboidrato fermentável. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. O fosfato monopotássico e fosfato dipotássico fornecem um sistema de tamponamento forte para controlar o pH na presença da ação fermentativa. O lauril sulfato de sódio e o desoxicolato de sódio tornam o meio mais seletivo inibindo bactérias gram-positivas.

07

Organismos (ATCC) Inóculo Crescimento Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Bom a abundante Púrpura /magentaProteus mirabilis ATCC 25933 50-100 Bom Incolor a marrom claroKlebsiella pneumoniae ATCC 13883 50-100 Bom Incolor a cor de canelaEnterococcus faecalis ATCC 29212 ≥10 3 Inibido -

M1340AGAR HICROME MACCONKEY SORBITOL BASE





Agar HiCrome MacConkey Sorbitol é recomendado para o isolamento seletivo de Escherichia coli 0157:H7 de alimentos e ração para animais.

Para Identificação de E. coli 0157:H7

Ingredientes g/L

Hidrolisado enzimático de caseína 17.00Protease Peptona 3.00Sorbitol 10.00Mistura de sais biliares 1.50Cloreto de sódio 5.00Cristal Violeta 0.001Vermelho neutro 0.03Indicador B.C 0.10Ágar 13.50

pH Final (a 25°C): 7.1 ± 0.2

Dissolva 25.06 gramas em 495 ml de água destilada. Ferva gentilmente para dissolver o meio completamente. NÃO AUTO-CLAVE. Resfrie a 50°C. Misture bem e dispense em placas de Petri estéreis. Se desejar, pode adicionar assepticamente conteúdo reidratado de 1 frasco de Suplemento Cefixima-Telurito (FD147) a 495 mL de meio derretido e estéril, resfriado a 50°C, antes de distribuir em placas de Petri.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a roseo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.35%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor vermelha púrpura, transparente a ligeiramente opalescente.Reação: A solução aquosa a 5.01% (peso/volume) apresenta pH final de 7.1 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Rappaport F. and Henigh E., 1952, J. Clin. Path., 5:361.2. March S.B. and Ratnam S., 1986: J. Clin. Microbiol. 23, 869-872.3. Karmali M.A., Petric M., Lim C., et al, 1985, J. Infect. Dis., 151-775.4. Hansen W. and Yourassawsky E., 1984, J. Clin. Microbiol., 20:1177.5. Thompson et al. 1990. J. Clin. Microbiol. 29, 2165-2168.6. Zadik P.M., Chapman P.A. and Siddons C.A., 1993, J. Med. Microbiol., 39, 155-158.

Características da cultura após incubação a 35-37°C por 18-24 horas (48 horas se necessário).

O Agar MacConkey Sorbitol está baseado na formulação descrita por Rappaport e Henigh (1). O meio contém sorbitol ao invés de lactose e é recomendado para detecção de cepas enteropatogênicas de Escherichia coli 0157:H7 a qual fermenta lactose mas não fermenta sorbitol (2) e então produzem colônias incolores. Cepas de Eschericia coli que fermentam o sorbitol produzem colônias rosa avermelhadas. A cor vermelha é devido a produção de ácido a partir do sorbitol, absorção de vermelho neutro e a subseqüente mudança de cor do corante quando o pH do meio cai abaixo de 6.8. A Escherichia coli O157:H7 tem sido reconhecida como causadora de colite hemorrágica (3). March e Ratnam (2) relataram que a detecção de Escherichia coli O157:H7 teve uma sensibilidade de 100% e especificidade de 85% no Agar MacConkey Sorbitol e eles recomendaram este meio como meio confiável de triagem de Escherichia coli 0157:H7. O indicador B.C. é adicionado para detectar a presença de enzima β-D-glucuronidase a qual é específica de Escherichia coli (4). Cepas de Escherichia coli que possuem β-D-glucurodinase aparecem como colônias de coloração verde azulada no meio. Cepas de E. coli fermentadoras de sorbitol com atividade de β-D-glucuronidase aparecem no meio na cor azul púrpura. Cepas enteropatogênicas de E. coli O157:H7 não possuem atividade de β-D-glucuronidase (5) e não fermentam o sorbitol, produzindo portanto colônias incolores. O hidrolisado enzimático de caseína e a protease peptona fornecem compostos de carbono, nitrogenados e outros nutrientes de crescimento essenciais. A maioria dos organismos gram-positivos é inibida pelo cristal Violeta e sais biliares. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. A adição de Suplemento Cefixima-Telurito (FD147) torna o meio seletivo (6). A adição de telurito de potássio torna o meio seletivo, o telurito de potássio seleciona os sorogrup O157 de outro sorogrupo e inibe espécies Aeromonas e espécies Providecia. A cefixima inibe espé-cies de Proteus. Espécies de Pseudomonas, se presentes, produzem colônias incolores no meio. O teste de confirmação de oxidase pode ser realizado com colônias suspeitas e os resultados devem ser observados dentro de 5-10 segundos.

08

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação OxidaseCor da colônia

E. coli 0157:H7 (NCTC 12900) 50-100 bom a abundante ≥ 50% negativaincolor(sem adição do suplemento FD147)

E. coli ATCC 25922 50-100 bom 40-50% negativaazul esverdeado

P. aeruginosa ATCC 27853 50-100

50-100

tênue a bom 30-40% positiva - coloração azul púrpuraforte dentro de 10 segundosincolor

K. pneumoniae ATCC 13883 bom 40-50% negativarosa avermelhado

AGAR

HIC

RO

ME

MAC

CON

KEY

SOR

BITO

L BA

SE

M1574AGAR HICROME EC O157:H7

AGAR

HIC

RO

ME

EC O

157:

H7





Meio cromogênico usado para o isolamento e diferenciação de E. coli O157 de alimentos e amostras ambientais.


Ingredientes g/L

Hidrolisado enzimático caseína 8.00Sorbitol 7.00Mistura de sais biliares 1.50Lauril sulfato de sódio 0.10Mistura cromogênica 0.25Agar 12.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 28.85 gramas em 1000mL de água destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Resfrie a 50°C e distribua em placas de Petri. Esse meio pode se tornar mais seletivo com a adição asséptica de 0.25mL da solução telurito de potássio 1% (FD052) a 1000mL de meio derretido e resfriado (45°C).

Aparência do pó: Cor creme a amarelo, homogêneo e pó livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel a 1.2%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, transparente a levemente opalescente em placas de Petri. Reação: A solução aquosa a 2.88% (peso/volume) apresenta pH final de 6.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Downes F.P. and Ito K., (ED.), 2001, Compendium of Microbiological Examination of Foods, 4th Ed., American Health Association, Washington, D.C.2. Rappaport F. and Henigh E. (1952), J. Clin. Path. 5:361.

Características da cultura após 18-24 horas a 35-37°C.

Escherichia coli O157:H7 pertence ao grupo de E. coli enterohemorrágicas (EHEC) e predomina como patógeno de alimentos. E. coli O157:H7 foi inicialmente reconhecida como um patógeno humano em 1982 quando dois surtos de colite hemorrágica foram associados com o consumo de carne moída bovina mal cozida contaminada com este organismo (1). O Agar HiCrome EC O157:H7 é um meio cromogênico recomendado para o isolamento e a diferenciação de E. coli O157:H7 de alimentos e amostras de ambiente. Este meio está baseado na formulação descrita por Rappaport e Henigh (2). O meio contém sorbitol e uma mistura cromogênica ao invés de lactose e um corante indicador respectivamente, como no meio convencional. O substrato cromogênico é especifico e seletivamente clivado por Escherichia coli 0157:H7 resultando em uma cor púrpura escura a magenta. Escherichia coli forma colônias rosa claro a lilás.Hidrolisado enzimática de caseína fornece nutrientes de carbono, nitrogenados e de crescimento. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. A mistura de sais biliares e o lauril sulfato de sódio inibem organismos gram-positivos. Telurito de potássio seleciona os sorogrupos e inibe Aeromonas spp e Providência spp.

09

Organismos (ATCC) Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥ 50% Rosa claro a lilásEscherichia coli 0157: H7 (NCTC 12900) 50-100 Abundante ≥ 50% Púrpura escuro a magentaKlebsiella pneumonia (13883) 50-100 Abundante ≥ 50% Azul, mucóidePseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Abundante ≥ 50% Incolor

Staphylococcus aureus ATCC 25923

50-100Inibido 0% -Salmonella Enteritidis ATCC 3076

50-100 Abundante ≥ 50% Azul claro esverdeado Bacillus subtilis ATCC 6633 Inibido 0% -

3≥10

3≥10


Ingredientes g/L

Hidrolisada enzimático de caseína 8.00Sorbitol 7.00Mistura de sais biliares 1.50Lauril sulfato de sódio 0.10Mistura cromogênica 0.25Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 31.85 gramas em 990 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Esfrie a 50°C. Adicione assepticamente o conteúdo desidratado de 1 frasco de Suplemento Seletivo HiCrome EC 0157:H7 (FD187). Mexa bem e dispense em placas de Petri.

Aparência do pó: Pó de cor creme a amarelo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com um gel de agarose a 1.5%Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, transparente a levemente opalescente em placas de Petri. Reação:A solução aquosa a 3.18% apresenta pH final de 6.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Rappaport F. and Henigh E. (1952), J. Clin. Path., 5:361.2. Zadik P.M., Cahpman P.A. and Siddons C.A. (1993), J. Med. Microbiol., 39, 155-158. 3. Smith and Scottland, (1988), J. Med. Microbiol., 26:77-85.

Características da cultura após adição do suplemento FD187, incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

Amostras de E. coli enterohemorrágica são chamadas de E. coli produtotras de verotoxina (VTEC/EHEC). Embora muitos sorotipos diferentes de E.coli são conhecidos por produzir verotoxina (3), até o momento os sorotipos O157:H7 e O157:H são os tipos comuns que causam infecções em humanos.Cepas de O157:H7 VTEC apresentam várias características bioquímicas pouco usuais e são explorados em métodos para sua identificação laboratorial. Eles pertencem à minoria das E.coli que são β-glucoronidase negativas e não fermentam o sorbitol ou ramnose em 24 horas. Elas podem ser isoladas de amostras fecais após semeadura em meios contendo D-sorbitol ao invés de lactose. O Agar HiCrome EC 0157:H7 baseia-se na formulação descrita por Rappaport e Henigh (1). O meio contém sorbitol e mistura cromogênica ao invés de lactose e corante indicador, respectivamente. O substrato cromogênico é especifica e seletivamente clivado por Escherichia coli 0157:H7 resultando em uma cor púrpura escura a magenta. E. coli forma colônias rosa claro a lilás.O hidrolisado enzimático de caseína fornece os nutrientes de carbono, nitrogenados e nutrientes de crescimento. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. A adição de Suplemento Seletivo HiCrome EC 0157:H7 (FD187) torna o meio seletivo (2). O telurito de potássio inibe espécies de Aeromonas spp e Providencia spp. A novobiocina inibe bactérias gem-positivas. O lauril sulfato de sódio ajuda a inibir a microbiota gram-positiva.

M1575 AGAR HICROME SELETIVO EC 0157:H7 BASE





Recomendado no isolamento seletivo e fácil detecção de Escherichia coli 0157:H7 de amostras de alimentos.

AGAR

HIC

RO

ME

SELE

TIVO

EC

0157

:H7

BASE

10

Organismos (ATCC) Inóculo (UFC) Crescimento Cor da colôniaEscherichia coli (25922) 50-100 Nenhum a pobre Rosa claro a lilásEscherichia coli 0157: H7 (NCTC 12900) 50-100

50-100

Abundante Púrpura escuro a magentaKlebsiella pneumonia (13883) InibidoPseudomonas aeruginosa (27853) Moderado a bom

Recuperação

Incolor

3≥10

≥ 10%≥ 50%

0%30-40%


Ingredientes g/L

Hidrolisado Enzimático de Caseína 10.00Sorbitol 10.00Mistura de Sais Biliares 1.50Mistura Cromogênica 1.30

pH Final (a 25°C): 7.1 ± 0.2

Dissolva 11.40 gramas em 500mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Para isolamento seletivo da Escherichia coli 0157:H7 adicione assepticamente conteúdo de 1 frasco de Suplemento Seletivo HiCrome EC 0157:H7 I (FD230) a 495mL de meio. Mexa bem e dispense em tubos de ensaio estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro, homogêneo e livre circulante. Cor e Transparência do meio preparado: Cor amarela clara, solução clara sem nenhum precipitado.Reação: A solução aquosa a 2.28% (peso/volume) apresenta pH final de 7.1 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. March S.B and Ratnam. S. 1986. J. Clin. Microbiol. 23:869-872.2. Thompson J.S., Hodge, D. S., BOREZYK, A. A. 1990. J. Clin. Microbiol. 28, 2165-2168.

Características da cultura com adição do suplemento seletivo HiCrome O157:H7 (FD230), incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

* Anteriormente denominado Enterobacter sakazakii.** pode apresentar leve precipitado no crescimento.

March e Ratnam (1) reportaram a incapacidade da E. coli O157:H7 em fermentar o sorbitol enquanto desenvolvia o Meio MacConkey Sorbitol. Subseqüentemente Thomson et al. (2) observaram a ausência da atividade β-glucoronidase em E.coli 0157:H7 de uma variedade de amostras pela cultura direta.O meio contém hidrolisado enzimático de caseína a qual fornece nitrogênio, compostos carbônicos e outros nutrientes de crescimento essenciais. O sorbitol é um açúcar fermentável, a mistura de sais biliares inibe a maioria dos organismos gram-positivos. A adição de telurito (FD230) torna o meio mais específico e seletivo. O desenvolvimento da coloração azulada pela E. coli e pela Klebsiella no meio deve-se às enzimas β-D-galactosidase e β-glucoronidase as quais clivam o substrato cromogênico na mistura cromogênica. A cepa E. coli 0157:H7 fornece uma coloração púrpura ao meio na ausência de β-glucoronidase e incapacidade de fermentar o sorbitol.

M1598CALDO HICROME ENRIQUECIMENTO BASE PARA EC 0157: H7

CALD

O H

ICR

OM

E EN

RIQ

UEC

IMEN

TO B

ASE

PAR

A EC

015

7: H

7





Caldo recomendado para isolamento e diferenciação seletiva de EC O157:H7 de alimentos e amostras ambientais pelo método cromogênico.

11

Organismos (ATCC) Inóculo (UFC) Crescimento Coloração do meio

Escherichia coli ATCC 25922 50-100 Bom a Abundante **Azul Escherichia coli 0157:H7 (NCTC 12900) 50-100 Bom a Abundante **Púrpura Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inibido -*Cronobacter sakazakii (12868) Bom a Abundante **Branco Klebsiella pneumoniae ATCC 13883

50-100Bom a Abundante **Verde azulado

Staphylococcus aureus ATCC 2592350-100

50-10050-100

Inibido -Salmonella Enteritidis ATCC 13076 Bom a Abundante **Verde claro

Crescimento(após adição do FD230) (após adição do FD230)

Coloração do meio

Inibido -Bom a Abundante **Púrpura

Inibido -Leve a nenhum **Incolor

Bom **Verde azuladoInibido -

- **Verde claroShigella flexneri ATCC 12022 Bom Incolor Inibido -

3≥10

3≥10

M1505AGAR HICROME SELETIVO UTI





Agar HiCrome Seletivo UTI é um meio cromogênico diferencial para identificação, diferenciação e confirmação de bactérias entéricas a partir de amostras de urina, que contém grande número de espécies de Proteus bem como outros organismos gram-positivos potencialmente patogênicos.

Para Identificação e Diferenciação de organismos causadores de UTI

Ingredientes g/L

Digesto péptico de tecido animal 18.00Hidrolisado enzimático de caseína 4.00Extrato de carne 6.00Sais biliares 1.50Mistura cromogênica 12.44Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.2 ± 0.2

Dissolva 56.94 gramas em 1000mL de água destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilizar autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Esfrie a 45-50°C e distribua em placas de Petri.

Aparência do pó: Pó amarelo claro, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com um Agar gel 1.5%Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri. Reação: A solução aquosa a 5.69% apresenta pH final de 7.2 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Pezzlo M, 1998, Clin Microbiol Rev., 1:268-2802. Wikie M.E., Almond M.K. and Marsh F.P., 1992, British Medical Journal, 305:1137-11413. Friedman M.P. et al., 1991, J Clin Microbiol, 29:2385-23894. Murray P., Traynor P. and Ponte C., J Clin Microbiol, 30:1600-16015. Soriano F. and Ponte C., 1992, J Clin Microbio, 30:3033-3034. 6. Merlino et al., 1995, Abstr. Austr. Microbiol., 16(4): 17-3.


* Podem ser observados pigmentos esverdeados. ** Adicionar 1-2 gotas do reativo sobre as colônias.

O Agar Hicrome Seletivo UTI foi formulado baseado no trabalho executado por Pezzlo (1), Wilkie et al. (2), Friedman et al. (3), Murray et al. (4), Soriano e Ponte (5) e Merlino et al. (6). Este meio é uma modificação do Agar Hicrome UTI (M1353), o qual pode ser usado no lugar do Agar MacConkey (M081) para o isolamento e identificação de vários microrganismos. O meio facilita e acelera a identificação de algumas espécies de bactérias gram-negativas e bactérias gram-positivas com base nas cores diferentes das colônias produzidas pela reação de enzimas específicas de gêneros ou espécies com dois substratos cromogênicos. Enzimas produzidas pelas espécies de Enterococcus, Escherichia coli e coliformes clivam os substratos cromogênicos incorporados no meio. A presença de uma fonte rica em fenilalanina e triptofano proveniente de digesto péptico de tecido animal e hidrolisado enzimático de caseína fornecem uma indicação da atividade da triptofano deaminase, revelada com o Reagente TDA (R036) indicando a presença de espécies de Pro-teus, Morganella e Providencia, que aparecem na cor marrom. Um sub-strato cromogênico é clivado pela β-glucosidase presente em Entero-coccus resultando na formação das colônias azuis. A Escherichia coli produz colônias rosa-avermelhada devido à enzima β-D-Galactosidase, a qual cliva o substrato cromogênico. A confirmação posterior de Esch-erichia coli pode ser feita pelo teste de indol usando o Reagente DMACA (R035). Além disso, algumas cepas de Enterobacter cloacae desprovidas de β-Galactosidase mostram colônias rosa indistinguível de Escherichia coli. O reagente DMACA para teste de indol (deve ser realizado em papel filtro) distingue entre Escherichia coli e Enterobacter, e também entre Proteus mirabilis e outras espécies. Os coliformes produzem colônias púrpura devido à clivagem de ambos os substratos cromogênicos. A digestão péptica de tecido animal, extrato de carne e o hidrolisado enzimático de caseína fornecem os compostos nitrogenados, compostos de carbono e outros nutrientes essenciais de crescimento. O meio torna-se mais seletivo devido à presença de sais biliares que inibem bactérias gram-positivas.

12

AGAR

HIC

RO

ME

SELE

TIVO

UTI

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Triptofano desaminase(TDA)**Cor da colônia

Escherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥ 50% NegativaRosa-avermelhada

Enterococcus faecalis ATCC 29212 50-100 Moderado 20-30% NegativaAzul (pequenas)Klebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100 Abundante ≥ 50% NegativaAzul a púrpura,mucoidesProteus mirabilis ATCC 12453 Abundante ≥ 50% Positiva - marromMarrom claroPseudomonas aeruginosa ATCC 27853

50-100Abundante ≥ 50% NegativaIncolores*

Staphylococcus aureus ATCC 2592350-100

Inibido 0% --

DMACA(em papel filtro)

Positiva - azul púrpura emtorno do crescimento

NegativaNegativaNegativaNegativa

-3≥10

* Podem ser observados pigmentos esverdeados.

M1418AGAR HICROME UTI MODIFICADO

AGAR

HIC

RO

ME

UTI

MO

DIF

ICAD

O





O Agar HiCrome UTI Modificado é um meio cromogênico diferencial para a identificação, diferenciação e confirmação de bacterias entéricas de amostras tais como urina que podem conter um grande número de Proteus bem como espécies de gram-positivos potencialmente patogênicas.

Para Identificação e Diferenciação de organismos causadores de UTI.

Ingredientes g/L

Digesto péptico de tecido animal 18.00Hidrolisado enzimático de caseína 4.00Extrato de carne 6.00 Mistura cromogênica 12.44Ágar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.2 ± 0.2

Dissolva 55.44 gramas em 1000 mL de água destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilizar autoclavando a 15 lbs de pressão a 121°C por 15 minutos. Esfrie a 50°C e distribua em placas de Petri.

Aparência do pó: Pó de cor creme a amarelo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, transparente a levemente opalescente em placas de Petri. Reação: A solução aquosa a 5.54% (peso/volume) apresenta pH 7.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó em temperatura refrigerada (abaixo de 8°C) e o meio preparado de 2 a 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Pezzlo M., 1998, Clin. Microbiol. Rev., 1:268-2802. Wilkie M.E., Almond M.K. and Marsh F.P., (1992), British Medical Journal, 305:1137-11413. Friedman M.P. et al. (1991), J Clin Microbiol, 29:2385-23894. Murray P., Traynor P. and Ponte C., J Clin Microbiol, 30:1600-16015. Soriano F. and Ponte C., (1992), Journal of clinical Microbiology, 30:3033-3034.6. Merlino et al., 1995, Abstr. Austr. Microbiol. 16 (4):17-3.


O Agar HiCrome UTI Modificado é formulado com base no trabalho realizado por Pezzlo (1) Wilkie et al (2), Friedman et al (3), Murray et al (4), Soriano e Ponte (5) e Merlino et al (6). Esse meio é uma modificação do Agar HiCrome UTI (M1353), o qual pode ser usado substituindo o Ágar MacConkey para isola-mento e confirmação de vários microorganismos. O meio facilita e acelera a identificação de algumas bactérias gram-negativas e gram-positivas com base no contraste entre as diferentes cores das colônias, produzido por reações enzimáticas específicas para gênero ou espécies com dois substratos cromatogênicos. Enzimas produzidas por Enterococcus spp, Escherichia coli e coliformes clivam os substratos cromogênicos incorporados no meio. A presença de fonte rica em fenilalanina e triptofano, provenientes do digesto péptico de tecido animal e hidrolisado enzimático de caseína, fornecem um indicador de atividade de triptofano desaminase, revelada com o indicador (R036), indi-cando a presenca de Proteus spp, Morganella sp e Providencia spp, as quais aparecem marrons. E. coli produzem colônias róseas devido a enzima β-D-galactosidade que cliva o outro substrato cromogenico. Confirmacao posterior de E. coli pode ser feita realizando o teste de indol utilizando o reagente DMACA (R035). Também, algumas cepas de Enterobacter cloacae, desprovidas de β-galactosidade apresentam colônias rosas indistingüível de Escherichia coli. O reagente DMACA (R035) para o teste de indol (feito em filtro de papel) destingue a Escherichia coli de Enterobactee e também entre Proteus mirabilis e outras espécies. Coliformes produzem colônias púr-puras devido a clivagem de ambos os substratos cromogenicos. A digestão peptídica de tecido animal, o extrato de carne e o hidrolizado enzimático de caseina fornecem nitrogênio, carbono e outros nutrientes de crescimento essenciais.

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Triptofano desaminase(TDA)**Cor da colônia

Enterococcus faecalis ATCC 29212 50-100 Abundante ≥ 70% NegativaAzul esverdeada pequena

Escherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥ 70% NegativaPurpura a magenta

Klebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100 Abundante ≥ 70% NegativaAzul a púrpura - mucóideProteus mirabilis ATCC 12453 Abundante ≥ 70% Positiva - marromMarrom claroPseudomonas aeruginosa ATCC 27853

50-100Abundante ≥ 70% NegativaIncolor*

Staphylococcus aureus ATCC 2592350-10050-100 Abundante ≥ 70% NegativaAmarelo dourado

DMACA(em papel filtro)

Positiva - azul púrpura emtorno do crescimento

Negativa

NegativaNegativaNegativaNegativa

13

M1353AGAR HICROME UTI





O Agar HiCrome UTI é um meio diferencial recomendado para a identificação presuntiva de microorganismos que causam infecção urinária.

Para Identificação e Diferenciação de organismos causadores de UTI.

Ingredientes g/L

Peptona especial 15.00Mistura cromogênica 2.45Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 32.45 gramas em 1000 mL de água destilada. Aqueça o meio gentilmente até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilizar autoclavando a 1atm de pressão a 121°C por 15 minutos. Esfrie a 50°C, misture bem e distribua em placas de Petri.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo, homogêneo e livre circulante.Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, claro a levemente opalescente em placas de Petri. Reação: A solução aquosa a 3.24% (peso/volume) apresenta pH 6.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó e o meio preparado entre 2 a 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Collee J.G., Fraser A.G., Marmion B. P., Simmons A., (Eds.), Mackie and McCartney, Practical Medical Microbiology, 1996, 14th Edition, Churchill Livingstone. / 2. Pezzlo M., 1998, Clin. Microbiol. Rev., 1:268-280 / 3. Wilkie M.E., Almond M.K. and Marsh F.P., 1992, British Medical Journal, 305:1137-1141 / 4. Friedman M.P. et al. (1991), J. Clin. Mi-crobiol., 29:2385-2389 / 5. Murray P., Traynor P. and Hopson D., 1992, J. Clin. Microbiol., 30:1600-1601 / 6. Soriano F. and Ponte C., (1992), J. Clin. Microbiol., 30:3033-3034 /7. Merlino et al., 1995, Abstr. Austr. Microbiol. 16 (4):17-3.


*pode ser observado pigmento esverdeado

As infecções do trato urinário são infecções bacterianas que afetam o trato urinário. Os sintomas comuns são a urgência e freqüência miccio-nal, associadas a dor e desconforto. A infecção mais comum é a cistite, causada por infecção da bexiga por bactérias uropatogênicas, das quais a mais freqüente é Escherichia coli, mas algumas vezes Staphylococcus saprophyticus ou especialmente em infecções adquiridas em hospitais, Klebsiella, Proteus mirabilis, outros coliformes, Pseudomonas aeruginosa ou Enterococcus faecalis podem ocorrer (1). Este meio é formulado com base no trabalho realizado por Pezzlo (2) Wilkie et al (3), Friedman et al (4), Murray et al (5), Soriano e Ponte (6) e Merlino et al (7). Esse meio é recomendado para a detecção de patógenos do trato urinários, onde tem ampla aplicação como um ágar nutriente geral para o isolamento de vários microrganismos. Isso facilita e ascelera a identificação de algumas bactérias gram-negativas e gram-positivas com base no contraste da diferença de cores das colônias, produzidas por reações de gênero ou enzimas espécie-específicas com dois substratos cromogênicos. Os substratos cromogênicos são especificamente clivados por enzimas produzidas por espécies de Enterococcus, Escherichia coli e coliformes. A presença de aminoácidos como a fenilalanina e o triptofano das peptonas ajudam na detecção da atividade de triptofano desaminase, indicando a presença de espécies de Proteus, Morganella e Providencia.Um substrato cromogênico é rompido pela β-glucosidase presente em Enterococcus resultam na formação de colônias azuis. Encherichia coli produz colônias rosa devido à enzima β-D-galactosidase que cliva o outro substrato cromatogênico. A confirmação adicional de Escherichia coli pode ser feita realizando o teste de indol. Coliformes produzem colônias de cor púrpura pela clivagem de ambos os substratos cromogênicos. Colônias de espécies de Proteus, Morganella e Providência aparecem em cor marron devido à atividade de triptofano desaminase. Peptona especial fornece compostos nitrogenadas, compostos de carbono e outros nutrientes essenciais de crescimento. O meio pode tornar-se seletivo pela suplementação com antimicrobianos para a detecção de microroganis-mos associados com infecções hospitalares.

AGAR

HIC

RO

ME

UTI

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEnterococcus faecalis ATCC 29212 50-100 Abundante ≥70% Azul, pequenaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥70% Rosa-púrpuraKlebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100

50-100Abundante ≥70% Azul a púrpura - mucóide

Proteus mirabilis ATCC 12453 Abundante ≥70% Marrom claroPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 50-100 Abundante ≥70% Transparente*Staphylococcus aureus ATCC 25923 50-100 Abundante ≥70% Amarelo dourado

14

M1078AGAR SALMONELLA DIFERENCIAL (Meio RajHans)

AGAR

SAL

MO

NEL

LA D

IFER

ENCI

AL (M

eio

Raj

Han

s)





Agar Salmonella Diferencial é recomendado para identificação e diferenciação de espécies de Salmonella de outras espécies do membro Enterobacteriaceae, especialmente espécies de Proteus.

Para Identificação e Diferenciação de espécies de Salmonella

Ingredientes g/L

Parte APeptona, especial 8.00Extrato de Levedura 2.00Desoxicolato de Sódio 1.00Indicador B.C. 2.00Ágar 12.00Parte BPropileno glicol 10.00

pH Final (a 25°C): 7.3 ± 0.2

Dissolva 10 gramas de fluído da parte B em 1000 mL de água destilada. Adicione 25 gramas da parte A (M1078). Misture bem e ferva até dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Esfrie a 45-50°C. Misture bem antes de distribua em placas de Petri esterilizadas.

Aparência do pó: Parte A: Pó amarelo claro a rosa claro, homogêneo que flui livremente. Parte B: Solução incolor viscosa.Solidificação: Gel firme, comparável com Agar gel a 1.2 %.Cor e Transparência do meio preparado: Cor laranja clara, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A reação da solução aquosa a 2.5% (peso/volume) da Parte A (M1078) apresenta pH final de 7.3 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó entre 2 e 8°C , em frasco bem fechado . Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Rambach A., (1990), Environ. Microbiol., 56:301.2. Eaton A. D., Clesceri L. S., Rice E. W. and Greenberg A. W., (Eds), (2005), Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 21st ed., APHA, Washington DC.3. Greenwald, R., Henderson R. W. and Yappaw S., (1991), J. Clin. Microbiol., 29:2354.4. Kilian M. and Bülow P., (1979), Acta. Pathol. Microbiol. Scand., Sect. B, 87:271.

Característica da cultura após incubação a 35-37°C por 24-48 horas

O meio Agar Salmonella Diferencial é uma pequena modificação da formulação original de Rambach (1) usada para diferenciação de espécies de Salmonella de espécies de Proteus e outras bactérias entéricas. A produção de ácido a partir do propileno glicol é uma nova característica de espécies de Salmonella e é utilizada neste meio. Muito meios tais como Agar SS, Agar XLD são recomendados para a identificação e diferenciação de espécies de Salmonella (2) são basea-dos na fermentação da lactose e na produção de sulfeto de hidrogênio. A peptona especial e extrato de levedura pro-movem o crescimento abundante de bactérias, enquanto que o desoxicolato de sódio inibe os organismos gram-positivos tornando o meio seletivo para microorganismos entéricos. O indicador BC torna se rosa na presença de ácido produzido pelo propileno glicol. A habilidade de fermentação da lactose é determinada pelo uso de um indicador que pode detectar a presença da enzima β-galactosidase. Bactérias produtoras de lactose (produtoras de β-galactosidase) resultam em colônias de cor azul violeta (3). Salmonellae forma ácido a partir do propileno glicol e combinando-se com o indicador de pH, formando colônias rosa avermelhas típicas. Outras bactérias gram-negativas entéricas formam colônias incolores. A Salmonellae Typhimurium e a Salmonellae Enteritidis produzem colônias róseas a vermelhas.

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥50% Azul verdeKlebsiella pneumoniae ATCC 13883 50-100 Abundante ≥50% Azul violetaProteus mirabilis ATCC 25933 50-100

50-100Abundante ≥50% Incolor

Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Abundante ≥50% Rosa avermelhadoSalmonella Enteritidis ATCC 13076 50-100 Abundante ≥50% Rosa avermelhadoSalmonella Typhi ATCC 6539 50-100 Abundante ≥50% IncolorShigella flexneri ATCC 12022 50-100 Abundante ≥50% IncolorStaphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -3≥10

15

M1082AGAR SALMONELLA DIFERENCIAL MODIFICADO





Agar Salmonella Diferencial é recomendado para identificação e diferenciação de espécies de Salmonella de outras espécies do membro Enterobacteriaceae, especialmente espécies de Proteus.


Ingredientes g/L

Parte APeptona, especial 8.00Extrato de Levedura 3.00Desoxicolato de Sódio 1.00Cloreto de sódio 5.00Indicador B.C. 2.00Ágar 12.00Parte BPropileno glicol 10.00

pH Final (a 25°C): 7.3 ± 0.2

Dissolva 10 gramas de fluído da parte B em 1000 mL de água destilada. Adicione 31 gramas da parte A. Misture bem e ferva até dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Esfrie a 45-50°C. Misture bem antes de distribuir em placas de Petri esterilizadas.

Aparência do pó: Parte A: Pó amarelo claro a rosa claro, homogêneo que flui livremente. Parte B: Solução incolor viscosa.Solidificação: Gel firme, comparável com Agar gel a 1.2 %.Cor e Transparência do meio preparado: Cor laranja clara, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A reação da solução aquosa a 3.1% (peso/volume) da Parte A apresenta pH final de 7.3 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Rambach A., (1990), Environ. Microbiol., 56:301.2. Eaton A. D., Clesceri L. S., Rice E. W. and Greenberg A. W., (Eds), (2005), Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 21st ed., APHA, Washington DC.3. Greenwald, R., Henderson R. W. and Yappaw S., (1991), J. Clin. Microbiol., 29:2354.

Característica da cultura após incubação a 35-37°C por 24-48 horas.

O meio Agar Salmonella Diferencial é uma pequena modificação da formulação original de Rambach (1) usada para diferenciação de espécies de Salmonella de espécies de Proteus e outras bactérias entéricas. A produção de ácido a partir do propileno glicol é uma nova característica de espécies de Salmonella e é utilizada neste meio. Muito meios tais como Agar SS, Agar XLD são recomendados para a identificação e diferenciação de espécies de Salmonella (2) são basea-dos na fermentação da lactose e na produção de sulfeto de hidrogênio. A peptona especial e extrato de levedura promovem o crescimento abundante de bactérias, enquanto que o desoxicolato de sódio inibe os organismos gram-positivos tornando o meio seletivo para microorganismos entéricos. Cloreto de sódio mantém o equilí-brio osmótico. O indicador BC torna se rosa na presença de ácido produzido pelo propileno glicol. A habilidade de fermen-tação da lactose é determinada pelo uso de um indicador que pode detectar a presença da enzima β-galactosidase. Bactérias fermentadoras de lactose (produtoras de β-galactosidase) produzem colônias de cor azul violeta (3). Salmonellae forma ácido a partir do propileno glicol e combinando-se com o indicador de pH produz colônias rosa avermelhas típicas. Outras bactérias gram-negativas entéricas formam colônias incolores. A Salmonellae Typhimurium e a Salmonellae enteritidis produzem colônias róseas a vermelhas.

16

AGAR

SAL

MO

NEL

LA D

IFER

ENCI

AL M

OD

IFIC

ADO

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥50% Azul verdeKlebsiella pneumoniae ATCC 13883 50-100 Abundante ≥50% Azul violetaProteus mirabilis ATCC 25933 50-100

50-100Abundante ≥50% Incolor

Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Abundante ≥50% Rosa avermelhadoSalmonella Enteritidis ATCC 13076 50-100 Abundante ≥50% Rosa avermelhadoSalmonella Typhi ATCC 6539 50-100 Abundante ≥50% IncolorShigella flexneri ATCC 12022 50-100 Abundante ≥50% IncolorStaphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -3≥10

M1296AGAR HICROME SALMONELLA

AGAR

HIC

RO

ME

SALM

ON

ELLA





Agar Hicrome Salmonella é usado para o isolamento e diferenciação de espécies de Salmonella de coliformes por método cromogênico.


Ingredientes g/L

Digesto péptico de tecido animal 6.00Extrato de levedura 2.50Mistura de sais biliares 1.00Mistura cromogênica 5.40Àgar 13.00

pH Final (a 25°C): 7.7 ± 0.2

Dissolva 27.9 gramas em 1000 mL de água destilada. Ferva gentilmente para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Resfrie a 50°C. Misture bem e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo (M1296), homogêneo e livre circulante.Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.3% (M1296).Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro (M1296), gel levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 2.79% (peso/volume) tem pH final de 7.7 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Murray P.R., Baron J.H., Pfaller M. A., Jorgensen J.H. and Yolken R. H., (Ed.), 2003, Manual of Clinial Microbiology, 8th Ed., American Society for Microbiology, Washington, D.C.2. Rambach A., (1990), Appl. Environ, Microbiol., 56:301.3. Greenwald R., Henderson R.W. and Yappan S., (1991), J. Clin. Microbiol. 29:2354.

Características da cultura após de 24-48 horas a 35-37°C.

Espécies de Salmonella tem sido isoladas de homem e de quase todos os animais ao redor do mundo. Elas causam muitos tipos de infecções desde leves, gastroenterites auto-limitadas até doenças que põem em risco a vida, como a febre tifóide. Salmonella Typhi e Salmonella Paratyphi A & B causam gastroenterite, bacteremiae febre entérica. Salmonella Cholerasuis causa gastroenterite e febre entérica especial-mente em crianças. Salmonella Typhimurium é o sorotipo de Salmonella mais frequentemente isolado(1). Os meios Agar HiCrome Salmonella é uma modificação da fórmula original do Rambach (2) usado para diferenciação de espécies Salmonella e de outras bactérias entéricas. A formulação do Rambach diferencia a Salmonella baseado na utilização do propilenoglicol na presença de um indicador cromogênico. Entretanto, o Agar HiCrome Salmonella usa somente a mistura cromogênica para a identificação e diferenciação de espécies Salmonella. A digesto péptico de tecido animal e a peptona especial fornecem compostos nitrogenados e compostos carbonatos e outros nutrientes essenciais para o crescimento. A Escherichia coli e Salmonella são facilmente diferencia-das devido a suas características coloniais. As espécies de Salmonella formam colônias púrpura-claro com halo púrpura. E. coli apresenta coloração azul, devido a presença da enzima β-glucoronidase. Outros organismos formam colônias incolores. A característica púrpura-claro e azul ocorrem devido à mistura cromogênica (3). A mistura de sais biliares inibe organismos gram-positivos.

17Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaBacillus subtilis ATCC 6633 Inibido 0% -Escherichia coli ATCC 25922 50-100 Abundante ≥50% AzulProteus vulgaris ATCC 13315 50-100

50-100Bom 40-50% Transparente

Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Abundante ≥50% Púrpura claro com haloSalmonella Enteritidis ATCC 13076 50-100 Abundante ≥50% Púrpura claro com haloSalmonella Typhi ATCC 6539 50-100 Bom-abundante ≥50% Púrpura claro com haloStaphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -

3≥10

3≥10

M1393AGAR HICROME MM





Agar HiCrome MM é recomendado para identificação e diferenciação de Salmonella e não-Salmonella e Citrobacter de amostras clínicas de alimento e água.


Ingredientes g/L

Digesto péptico de tecido animal 10.00Extrato de carne 2.00D-Celobiose 3.00Lactose 10.00D-Manitol 1.20D-Trealose 1.33Mistura cromogênica 6.60Agar: 15.00

pH Final (a 25°C): 7.6 ± 0.2

Dissolva 49.13 gramas em 1000 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE OU SUPERAQUEÇA. Resfrie a 45-50°C e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó creme amarelado, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, gel trans-parente a levemente apalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 4.91% (peso/volume) apresenta pH final de 7.6 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Miller R.G. and Mallinson E.T. (2000), J. Food Protection, 63 (10), 1443-46.2. Miller R.G., Tate C.R., Mallinson E.T. and Scherrer J.A. (1991), Pault Sa, 70:2429-32.


O Agar HiCrome MM foi formulado por Miller e Mallison (1) para isolamento específico e detecção de Salmonella. Este meio é superior ao Agar XLT4 para suportar o crescimento de Salmonella devido a presença de proporção apropriada de quatro açúcares. A maioria dos meios diferenciais e seletivos são formulados com um ou mais açucares e indicadores de pH respectivamente. A utilização de açúcares por organismos resulta na mudança de pH. Este é usado com uma forma de distinguir Salmonella de outras bactérias competidoras com base na coloração da colônia. Salmonella spp geralmente são incapazes de fermentar estes açúcares (2) que suportam o crescimento de bactérias competidoras. Dessa forma outras bactérias tendem a sobrepor-se a Salmonella, mascarando sua presença. A inclusão de açúcares como manitol, celobiose e trealose estimulam melhor crescimento inicial das células de Salmonella. Entretanto, baixas concentrações destes açúcares não interferem com a utilização de proteína e produção de H2S. A presença da lactose suprime a produção de H2S por espécies não-Salmonella como Citrobacter freundii. Uma mistura cromogênica presente neste meio ajuda a dife-renciação de fermentadores de lactose e não fermentadores. Fermentadores de lactose dão colônias de coloração verde azuladas, as quais teriam sido impossíveis de diferenciar com o indicador baseado em mudança de pH. A inclusão de tergitol 4 no meio suprime a presença de colônias Proteus e Providencia. O digesto péptico de tecido animal e extrato de carne bovina fornecem compostos nitrogenados essenciais.

18

AGAR

HIC

RO

ME

MM

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 Abundante ≥50%Salmonella sorotipo Enteritidis ATCC 13076 50-100 Abundante ≥50% Centro preto

Azul esverdeado

S. sorotipo Typhimurium ATCC 14028 50-100

50-100

50-100Abundante ≥50% Centro preto

Citrobacter freundii ATCC 8090 Bom a abundante ≥50% Incolor*Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inibido 0% -Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 50-100 Bom a abundante ≥50% Incolor

3≥10

* Pode apresentar coloração verde quando a incubação for prolongada.

M1414RAPID HIENTEROCOCCUS AGAR

RAP

ID H

IEN

TER

OCO

CCU

S AG

AR





Meio de cultura usado para a rápida e fácil identificação e diferenciação de Enterococcus de amostras de água.

Para Identificação de espécies de Enterococcus

Ingredientes g/L

Peptona especial 10.00Cloreto de sódio 5.00Ázida sódica 0.30Mistura cromogênica 0.06Polisorbato 80 2.00Fosfato dissódico 1.25Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.5 ± 0.2

Dissolva 33.61 gramas em 1000mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Misture bem e distribua em placas de Petri.Cuidado: A azida sódica tem a tendência de formar azidas me-tálicas explosivas em materiais de encanamento. É aconselhável utilizar bastante água suficiente para enxaguar o material utilizado.

Aparência do pó: Pó de cor creme a amarelo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com gel agarose 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar clara, gel transparente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 3.36% tem pH final de 7.5. ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Litsky W., Mallmann W.L. and Fifield C.W., (1953), Amer. J. Pbl. Hlth., 43:873-879.2. Manafi M. and Sommer R., (1993), Wat. Sci. Tech., 27:271-274.


Enterococcus são comumente encontrados em fazes de humanos e outros animais de sangue quente. Apesar de algumas cepas sejam onipresentes e não relacionadas com a poluição fecal, a presença de Enterococcus na água é uma indicação de poluição fecal e da possível presença de patógenos entéricos. A pesquisa de Enterococcus é recomendada para o controle de qualidade de águas doce e marinha para recreação. Estudos epidemiológicos levaram ao desenvolvimento de critérios que podem ser usados para estabelecer normas para água recreacionais com base em relações estabelecidas entre os efeitos a saúde e a qualidade da água. O significado de encontrar Enterococcus em amostras de água recreacional, doce e marinha está diretamente relacionada entre a densidade de Enterococcus e os riscos de adquirir doenças gastrointestinais associadas à natação (1, 2). O Agar HiEnterococos Rápido permite a rápida identifica-ção e diferenciação de Enterococcus em amostras de água. A peptona fornece compostos nitrogenados e o cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio para o crescimento rápido de Enterococcus. A azida sódica inibe a microbiota contaminante, especialmente organismos gram-negativos. A enzima β-D-glucosidase presente em Enterococcus cliva o substrato cromogênico, resultando em colônias com a coloração verde azuladas. O polisorbato 80 age como fonte de ácidos graxos.

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 Nenhum a pobre ≤10% -Enterococcus faecalis ATCC 29212 50-100

50-100Bom 40-50% Azul esverdeada

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 50-10050-100

Nenhum a pobre ≤10% -Staphylococcus aureus ATCC 25923 Bom 40-50% Incolor

19

M1376 CALDO HICROME ENTEROCOCCUS





Meio de cultura usado é recomendado para a identificação e diferenciação de Enterococcus de amostras de água.


Ingredientes g/L

Peptona especial 10.00Cloreto de sódio 5.00Azida sódica 0.30Substrato cromogênico 0.04Polisorbato 80 2.00Fosfato dissódico 1.25Ágar -

pH Final (a 25°C): 7.5 ± 0.2

Dissolva 37.18 gramas (concentração dupla) ou 18,59 gramas (concentração simples) em 1000 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. Distribua em tubos e esterilize por autoclavação a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Cuidado: A azida sódica tem a tendência de formar azidas metálicas explosivas em materiais de encanamento. É aconselhável utilizar bastante água para enxaguar o material utilizado.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo, homogêneo e livre circulante.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar clara de aspecto transparente.Reação: A solução aquosa a 185% apresenta pH final de 7.5. ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Althous H., Dott W., Havemeister G., Muller H.E. & Sacre’ C., 1982, Zbl. Bakt. Hyg. I. Abt. Orig. A., 252:154-165.2. Amoras I., 1995, Poster Presentation Congress of Spanish Society of Microbiology, Madrid. 3. Litsky W., Mallmann W.L. and Fifield C.W., 1953, Amer. J. Pbl. Hlth., 43:873-879. 4. Manafi M. and Sommer R., 1993, Wat. Sci. Tech., 27:271-274. 5. Snyder M.L. and Lichstein H.C., 1940, J. Infect. Dis., 67:113-115. 6. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Edition, Edited by L.S. Clesceri, A.E. Greenberg and A.D. Eaton, Published by APHA, AWWA and WEF (1998).


Caldo HiCrome Enterococcus é formulado com base no trabalho realizado por Althouse et al (1), Amoras (2), Litsky et al (3) e Manafi & Sommer (4) e Snyder & Lichstein (5). Este meio é recomendado para a rápida detecção de Enterococcus em amostras de água. A presença do grupo Enterococcus, o qual é um subgrupo dos estreptococos fecais, serve como valioso indicador para a determinação da extensão da contaminação fecal (1,6) e é mais específico que a determi-nação de coliformes, os quais podem ser originários de fonte não fecal. A enzima β-glucosidase produzida por Enterococcus cliva o substrato cromogênico, resultando em colônias com a coloração verde azulada. O meio contém peptona especial, que fornece compostos nitrogenados e outros nutrientes essenciais. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio. A azida sódica inibe a microbiota contaminante, especialmente organismos gram-negativos. O polisorbato 80 age como fonte de ácidos graxos.

20

CALD

O H

ICR

OM

E EN

TER

OCO

CCU

S

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Cor do meioEscherichia coli ATCC 25922 Nenhum a pobre -Enterococcus faecalis ATCC 29212 50-100

50-100Bom Azul-verde

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 50-10050-100

Nenhum a pobre -Staphylococcus aureus ATCC 25923 Bom Incolor

M1580AGAR HICROME ENTEROCOCCUS FAECIUM BASE

AGAR

HIC

RO

ME

ENTE

RO

COCC

US

FAEC

IUM

BAS

E





Agar recomendado para identificação cromogênica de Enterococcus faecium de amostras de fezes, esgoto e de água.


Ingredientes g/L

Peptona especial 23.00Amido de milho 1.00Cloreto de sódio 5.00Substrato cromogênico 0.10Arabinose 10.00Vermelho Fenol 0.10Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.8 ± 0.2

Dissolva 27.1 gramas em 500 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Resfrie 45-50°C e adicione assepticamente o conteúdo reidratado de 1 frasco de Suplemento Seletivo Enterococcus faecium (FD226). Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a bege rosado, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor vermelha, gel trans-parente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 5.42% (peso/volume) apresenta pH final de 7.8 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Skenner F. A. and Quesnel L.B., (1978), Streptococci. Academic Press, Inc. (London) Ltd., London United Kingdom, p. 245-261.2. Chenoweth C, Schaberg D: Eur J Clin Microbiol Infect Dis 9:80-89, 1990.3. Moellering. 1992. Clin. Infect. Dis. 14: 1173.4. Williger B. and Manafi M. 1995. Lett. Appl. Microbiol., 20:300-302.

Características da cultura com adição do Suplemento Seletivo E. faecium (FD226) e incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

O Agar HiCrome Enterococcus faecium é recomendado para a detecção cromogênica de E. faecium de urina, fezes, solo, alimentos, água, plantas e animais. E. faecium é comumente encontrado no trato gastrointestinal de humanos (1). A resistência exibida pelos Enterococcus a vários antimicrobianos tem transformado esses microrganismos na maior causa de infecções humanas incluindo infecções hospitalares (2). Enterococcus faecalis causa 80-90% das infecções enquanto E. faecium causa a maioria dos casos restantes (3). O uso de um meio seletivo para o isolamento de Enterococcus tem sido pesquisado, incluindo todos aqueles contendo substrato cromogênico (4) e meios contendo suple-mentos cefalexina-aztreonam. As espécies de Enterococcus possuem a enzima β-glicosidase, a qual cliva especificamente o substrato cromogênico para produzir colônias de cor azul. E. faecium fermenta arabinose e cliva o substrato cromogênico presente no meio para produzir colônias de cor verde. E. faecalis não fermenta arabinose e então retém a cor azul.A peptona especial serve como a fonte de carbono, nitrogênio e outros nutrientes de crescimento. O amido de milho neutraliza os metabólitos tóxicos, enquanto cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. O vermelho de fenol serve como um indicador de pH com arabinose sendo o carboidrato fermentável.

21

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 Inibido 0% -Enterococcus faecalis ATCC 29212 50-100 Abundante ≥50% AzulEnterococcus faecium ATCC 19434 50-100 Abundante ≥50% VerdeEnterococcus hirae ATCC 10541 Abundante ≥50% AzulPseudomonas aeruginosa ATCC 27853

50-100Inibido 0% -

Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -

3≥10

3≥103≥10

M1297A AGAR HICROME CANDIDA DIFERENCIAL





O Agar HiCrome Candida é recomendado para o isolamento rápido e identificação de espécies de Candida de culturas mistas.

Para Identificação e Diferenciação de Bolores e Leveduras

Ingredientes g/L

Peptona especial 15.00Extrato de levedura 4.00Fosfato dipotássico 1.00Mistura cromogênica 7.22Cloranfenicol 0.50Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 6.3 ± 0.2

Dissolva 42.72 gramas do pó em 1000mL de água destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Esfrie a 50°C e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó creme a bege, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar, límpido a levemente opalescente em placas de Petri. Reação: A solução aquosa a 4.27% (peso/voulme) apresenta pH final de 6.3 + 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Perry J.L. and Miller G.R., (1987), J. Clini Microbiol., 25:2424-2425 2. Rouselle P., Freydiere A., Couillerot P., de Montclos H. and Gille Y., (1994), J. Clin MIcro-biol, 32:3034-3036.

Características da cultura após incubação de 30°C por 40-48 horas.

Perry e Miller (1) relataram que as espécies de Candida albicans produzem uma enzima β-N-acetilgalactosaminidase, e de acordo com Rousselle et al (2) a incorporação de substrato hexosaminidase cromogênico ou fluorogênico, no meio de crescimento do ajuda na identificação de isolados de Candida albicans diretamente no isolamento primário. O Agar HiCrome Candida Diferencial é um meio seletivo e diferencial que facilita o rápido isolamento de leveduras de culturas mistas e permite a diferenciação de espécies de candida como Candida albicans, Candida krusei, Candida tropicalis e Candida glabata com base na coloração e morfologia da colônia. Neste meio são obtidos resultados dentro de 48 horas e isso é útil para identificação rápida e presuntiva de leveduras comuns na Micologia e em laboratórios de Microbiologia Clínica. A peptona especial e o extrato de levedura fornece m componentes de nitrogenados, compostos de carbono e outros nutrientes de crescimento essenciais. O fosfato tamponam bem o meio. O cloranfenicol suprime a microbiota bacteriana. A C.albicans produz colônias lisas de cor verde clara, a C. tropicalis produz colônias azul a azul metálica elevadas. As colônias de C. glabrata são lisas e com coloração creme a branco enquanto que em C. krusei as colônias são púrpuras frisados.

22

AGAR

HIC

RO

ME

CAN

DID

A D

IFER

ENCI

AL

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaC. albicans ATCC 10231 Bom a abundante ≥50% Verde claroC. glabrata ATCC 15126 50-100

50-100Bom a abundante ≥50% Creme a branco

Candida kruzei ATCC 24408 50-10050-100

Bom a abundante ≥50% Púrpura, FuzziCandida tropicalis ATCC 750 Bom a abundante ≥50% Azul a púrpuraEscherichia coli ATCC 25922 Inibido 0% -S. aureus ATCC 25923 Inibido 0% -3≥10

3≥10

M1467AGAR HICROME OGYE BASE

AGAR

HIC

RO

ME

OG

YE B

ASE





Agar recomendado para isolamento e quantificação de bolores e leveduras do leite e derivados do leite através do método cromogênico.

Para Identificação e Diferenciação de Bolores e Leveduras

Ingredientes g/L

Extrato de levedura 4.00Dextrose 20.00Mistura cromogênica 1.10Agar 12.00

pH Final (a 25°C): 7.0 ± 0.2

Dissolva 18,55 gramas em 1000mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a pressão de 1atm (121°C) por 15 minutos. Resfrie a 50°C e adicione assepticamente conteúdo reconstituído de 1 frasco de Suplemento Seletivo Oxitetra (FD032). Mexa bem e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó de cor creme a amarelo homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com gel agarose 1.2%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, gel transparente levemente opalescente.Reação: A solução aquosa a 3.71% apresenta pH final de 7.0 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Mossel D.A.A. et al., 1970, J. Appl. Bact. 33:454.2. Mossel D.A.A., Harrewijn G.A. and Elzebrock J.M., 1973, UNICEF.3. Mossel D.A.A., Visser M. and Mengerink W.H.J., 1962, Lab, Prac. 11:109.

Características da cultura observada com a adição do Suplemento Seletivo Oxitetra (FD032), após incubação de 2-3 dias a 25-30°C.

* Anteriormente conhecido como Aspergillus niger

O Agar HiCrome OGYE Base foi originalmente formulado por Mossel et al. (1,2) para o isolamento e quantificação de bolores e leveduras de alimentos. Mossel et al. (3) posteriormente adicionou Oxitetraciclina como um agente seletivo e descobriram que o uso de Oxitetraciclina em um meio com pH neutro fornece uma contagem maior de bolores e leveduras quando comparado ao meio que tem pH baixo para suprimir o crescimento bacteriano. O Agar HiCrome OGYE é um meio diferencial e seletivo o qual facilita o isolamento rápido de bolores e leveduras de produtos como o leite e seus derivados.O extrato de levedura fornece os nutrientes de crescimento essenciais. A dextrose atua como fonte de energia e carbono. O pH baixo ajuda a reduzir a microbiota bacteriana. A Oxitetraciclina faz o meio mais seletivo por inibir o crescimento de Lactobacillus encontrados no leite e em produtos derivados em pH baixo. A incorporação de compostos cromogênicos no meio de crescimento auxilia na identificação de bolores e leveduras diretamente no isolamento primário. *Aspergillus brasiliensis aparecem como colônias de cor azul clara com esporos pretos devido à presença de mistura cromogênica. Candida albicans apresenta colônias de cor verde e S. cerevisiae colônias incolores.

Organismos Inóculo Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 Inibido 0% -*Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 50-100 Abundante ≥50% Azul claro com esporos pretosCandida albicans ATCC 10231 50-100

50-100Abundante ≥50% Verde

Saccharomyces cerevisiae ATCC19615 Abundante ≥50% Incolor

3≥10

23

M1577 AGAR HICROME ENTEROBACTER SAKAZAKII





gar recomendado para isolamento e identificação de *Cronobacter sakazakii em amostras de alimentos, água, esgoto, urina e fezes.

Para Identificação de Enterobacter sakazakii

Ingredientes g/L

Hidrolisado enzimático de caseína 15.00Digesto papaico de farinha de soja 5.00Cloreto de sódio 5.00Desoxicolato de sódio 0.50Tiosulfato de sódio 1.00Mistura cromogênica 10.17Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.3 ± 0.2

Dissolva 51.67 gramas em 1000 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Resfrie a 45-50°C e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a rosa, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor púrpura, gel transparente a levemente opalescente.Reação: A solução aquosa a 5.16% (peso/volume) apresenta pH final de 7.3. ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Muytjens HL, Zanen HC, Sonderkamp HJ et al. J. Clin Microbiol 18:115-120, 1983.2. Isenberg (ed.), 1992. Clinical microbiology procedures handbook, vol.1. American Society for Microbiology, Washington, DC.


*Anteriormente denominado Enterobacter Sakasakii.

Espécies de Enterobacter são amplamente distribuídas na natureza ocorrendo em água fresca, solo, água de esgoto, plantas, vegetais, animais e fezes humanas. Espécies de Cronobacter sakazakii têm sido intimamente associadas com meningite neonatal e sepsis (1). O substrato cromogênico é especificamente clivado (2) pela enzima glicosidase presente em espécies de Enterobacter resultando na formação de colônias azul-esverdeadas. Outros organismos, os quais não clivam este substrato produzem colônias amarelas. A incorpo-ração de mistura cromogênica no meio produz uma cor azul intensa para as colônias de Cronobacter sakazakii enquanto a cor azul esverdeada para outras espécies de Enterobacter.O hidrolisado enzimático de caseína e o digesto papaico de farinha de soja fornecem os nutrientes de crescimento es-senciais junto com os compostos de carbono e nitrogenados. O cloreto de sódio ajuda a manter o equilíbrio osmótico do meio. O desoxicolato de sódio inibe a microbiota gram-positiva contaminante.

24

AGAR

HIC

RO

ME

ENTE

RO

BACT

ER S

AKAZ

AKII

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Bom a abundante ≥50% Amarela Enterobacter aerogenes ATCC 13048 50-100 Bom a abundante ≥50% Verde azuladoEnterococcus faecalis ATCC 29212

50-100Inibido 0% -

Cronobacgter sakasakii ATCC 12868 Bom a abundante ≥50% AzulKlebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100 Bom a abundante ≥50% Amarela (mucóide)

≥10 3

M1641AGAR HICROME ENTEROBACTER SAKAZAKII MODIFICADO

AGAR

HIC

RO

ME

ENTE

RO

BACT

ER S

AKAZ

AKII

MO

DIF

ICAD

O





O Agar HiCrome Enterobacter Sakazakii Modificado é recomendado para o isolamento e identificação de *Cronobacter sakazakii a partir de leite e produtos lácteos.

Para Identificação de Enterobacter sakazakii

Ingredientes g/L

Hidrolisado enzimático de caseína 7.00Extrato de levedura 3.00Cloreto de sódio 5.00Desoxicolato de sódio 0.60Substrato cromogênico 0.15Cristal violeta 0.002Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.0 ± 0.2

Dissolva 30.75 gramas em 1000 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Resfrie a 45-50°C e dispense em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a roseo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor púrpura, gel claro a levemente opalescente.Reação: A solução aquosa a 3.07% (peso/volume) apresenta pH final de 7.0 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Muytjens HL, Zanen HC, Sonderkamp HJ et al. J. Clin Microbiol 18:115-120, 1983.2. International Organization for Standardization Draft ISO/TS 22964, 2006 (E).

Características da cultura após incubação a 44 ± 1°C por 18-24 horas.

* Anteriormente denominado Enterobacter sakasakii

Espécies de Enterobacter estão amplamente distribuídas na natureza ocorrendo em água, solo, esgoto, plantas, vegetais, leite e produtos lacticínios, fezes humanas e animais. *C. sakazakii tem sido associada com meningites neonatal e sepsis (1). Este meio é recomendado pelo comitê ISO para o isolamento e identificação de *C. sakazakii (2). O substrato cromogênico é clivado especificamente (3) por *C. sakazakii resultando em colônias azul-esverdeadas. Outros organismos, os quais não clivam este substrato, produzem colônias incolo-res à violeta claro.A incorporação de mistura cromogênica no meio cria uma cor azul intensa a verde azulada para as colônias de *C. sakazakii onde outras espécies de Enterobacter apresentam colônias incolores ou azul centralizadas.O hidrolisado enzimático de caseína e o extrato de levedura fornecem os nutrientes de crescimento essenciais junto com compostos carbônicos e de nitrogênio. O Cloreto de Sódio auxilia na manutenção do equilíbrio osmótico do meio. O Desoxicolato de sódio inibe a microbiota gram-positiva associada.

25

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEscherichia coli ATCC 25922 50-100 Bom a abundante ≥50% IncolorEnterobacter aerogenes ATCC 13048 50-100 Bom a abundante ≥50% Incolor com centro azulEnterococcus faecalis ATCC 29212

50-100Inibido 0% -

*Cronobacgter sakasakii ATCC 12868 Bom a abundante ≥50% Azul-esverdeadoStaphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -

≥10 3

≥10 3

M1573AGAR HICROME KLEBSIELLA SELETIVO BASE





Agar usado para isolamento e detecção de espécies de Klebsiella de água e outras fontes. Esse meio também pode ser usado no método de processo de filtração por membrana.

Para Identificação de Klebsiella

Ingredientes g/L

Peptona especial 12.00Extrato de levedura 7.00Cloreto de sódio 5.00Mistura de sais biliares 1.50Lauril Sulfato de Sódio (SLS) 0.10Mistura cromogênica 0.20Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.1 ± 0.2

Dissolva 20.4 gramas em 500 mL de água destilada. Ferva para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Resfrie a 50°C e adicione assepticamente o conteúdo reidratado de um frasco de Suplemento Seletivo Klebsiella (FD225). Mexa bem e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó creme a amarelo, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, gel transparente a levemente opalescente.Reação: A solução aquosa a 4.08% (peso/volume) apresenta pH final de 7.1 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Krieg, N.R., and J.G. Holt (ed.). 1984 Bergey’s Manual of systematic Bacteriology, vol. 1, p. 408 – 516. The Williams and Wilkins Co., Baltimore, Md.2. Wyngaarden J. B., Smith L. H., (Eds.), Cecil Text book of Medicine, 16th Ed. Pp 1430-1432, Philadelphia, W. B. Saunders, 1982.

Características da cultura com adição do Suplemento Seletivo Klebsiella (FD225) e incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

O Agar Base HiCrome Klebsiella Seletivo é recomendado para o isolamento e contagem de espécies de Klebsiella baseado na diferenciação cromogênica. As cepas de Klebsiella pneumoniae são amplamente distribuídas no meio ambiente e contribuem para os processos bioquímicos e geoquímicos (1). K. pneumoniae causa pneumonia grave freqüentemente fatal. Também mostrou ser a fonte de infecções do pulmão que geralmente ocorre em pacientes com condições debilitadas tal como alcoolismo, diabetes mellitus e doenças pulmonares obstrutivas crônicas (2). O substrato cromogênico incorporado ao meio é especificamente clivado pelas espécies de Klebsiella. Klebsiella pneumoniae, agente causador de pneumonia, forma colônias púrpuras-magenta facilitando a detecção dos organ-ismos. A maioria dos contaminantes gram-negativos fecais freqüentemente encontrados são inibidos neste meio usando um suplemento seletivo.A peptona especial e o extrato de levedura fornecem os nutri-entes essenciais requeridos para o crescimento dos organ-ismos. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio. A mistura de sais biliares e lauril sulfato de sódio inibem a maioria da microbiota contaminante. A adição de suplemento seletivo promove o aumento da seletividade do meio.

26

AGAR

HIC

RO

ME

KLEB

SIEL

LA S

ELET

IVO

BAS

E

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaEnterobacter aerogenes ATCC 13048 Inibido 0% -Escherichia coli ATCC 25922 Inibido 0% -Klebsiella pneumoniae ATCC13883 50-100 Abundante ≥50% Púrpura-magenta (mucóide)Serratia marcescens ATCC 8100 Inibido 0% -Shigella flexneri ATCC 12022 Inibido 0% -≥10 3

≥10 3

≥10 3

≥10 3

M1540AGAR DIFERENCIAL L. MONO BASE

AGAR

DIF

EREN

CIAL

L. M

ON

O B

ASE





Agar recomendado pelo Comitê ISO para isolamento seletivo e diferencial de Listeria monocytogenes.

Para Identificação de Listeria monocytogenes

Ingredientes g/L

Hidrolisada enzimático de caseína 6.00Extrato de Levedura 10.00Peptona de Carne 18.00Fosfato dissódico, anidro 2.50Glicerofosfato de Magnésio 1.00Substrato Cromogênico 0.05Piruvato de Sódio 2.00Sulfato de Magnésio 0.50Glicose 2.00Cloreto de Sódio 5.00Cloreto de Lítio 10.00Agar 15.00pH Final (a 25°C): 7.2 ± 0.2

Dissolva 36 gramas em 460mL de água destilada. Ferva até dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão a (121°C) por 15 minutos. Resfrie a 45-50°C. Adicione assepticamente o conteúdo de um frasco de Suplemento Enriquecimento L. mono I (FD214) e o conteúdo reidratado e estéril de Suplemento Seletivo L. mono I (FD212), Suplemento Seletivo L. mono II (FD213). Misture bem e distribua em placas de Petri estéreis.Cuidado: O cloreto de lítio é perigoso. Evite o contato com o corpo e inala-ção dos vapores. Em contato com a pele, lave com água em abundância imediatamente.

Aparência do pó: Cor creme a amarelo, homogêneo e livre circu-lante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, gel levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 7.2% (peso/volume) apresenta pH final de 7.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Draft Amendment ISO 11290-2: 1996/DAM 1.2. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.3. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceed-ings p. 6, A.D.R.I.A. Quimper, France, 16-18 June 1997.

Características da cultura após adição de Suplemento Seletivo L. mono (FD212), Seletivo Suplemento L.mono II (FD213) E L. mopno Suplemento de Enriquecimento L. mono I (FD214) e incubação a 35-37°C por 24-48 horas

O Agar Base Diferencial L. Mono está baseado na formula-ção de Ottoviani e Agosti (2, 3) para o isolamento seletivo e diferencial de Listeria monocytogenes de alimentos e rações de animais o qual é adotado pelo Comitê ISO (1).A peptona de carne, e hidrolisado enzimático de caseína, ex-trato de levedura e piruvato de sódio fornecem os nutrientes de crescimento essenciais e substâncias nitrogenadas. A glicose é o carboidrato fermentável. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. Os fosfatos tamponam o meio. O cloreto de lítio e os suplementos seletivos (FD212 e FD213) inibem a microflora contaminante e permitem o crescimento das espé-cies de Listeria. As espécies de Listeria hidrolisam o substrato cromogênico o qual produz colônias de cor azul esverdeadas. A diferenciação de Listeria monocytogenes de outras espécies de Listeria está baseada na atividade da fosfolipase C (PIPLC) fosfatidilinositol específica. A enzima fosfolipase C hidrolisa o substrato purificado (FD214) adicionado ao meio resultando em um halo opaco ao redor das colônias de Listeria monocy-togenes.

27

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colônia Atividade do PIPLCCandida albicans ATCC 10231 Inibido 0% -Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inibido 0% -Escherichia coli 25922

50-10050-10050-10050-10050-10050-100

Inibido 0% -

Azul esverdeadoAzul esverdeadoAzul esverdeadoAzul esverdeado

-

Listeria innocua ATCC 33090 AbundanteAbundanteAbundanteAbundanteAbundanteAbundante

≥50%≥50%≥50%≥50%≥50%≥50%

Azul esverdeadoListeria grayi ATCC 19120Listeria ivanovii ATCC 19119Listeria monocytogenes ATCC 19112Listeria seeligeri ATCC 35967Listeria welshimeri ATCC 43549Pseudomonas auruginosa ATCC 27853 Inibido -

Azul esverdeado

NegativaNegativaNegativa

PositivaPositivaNegativaNegativa

-

NegativaNegativa

≥10 3

≥10 3

≥10 3

≥10 3

M1417 AGAR HICROME LISTERIA BASE MODIFICADO





Agar seletivo e diferencial recomendado para identificação rápida e direta identificação de espécies de Listeria spp.

Para Identificação de espécies de Listeria

Ingredientes g/L

Peptona especial 23.00Cloreto de sódio 5.00Extrato de levedura 1.00Extrato de carne 5.00Cloreto de lítio 5.00Ramnose 10.00Vermelho de fenol 0.12Mistura cromogênica 5.13Agar 13.00

pH Final (a 25°C): 7.3 ± 0.2

Dissolva 33.62 gramas em 500mL de água destilada.Aqueça até a agitação até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão a (121°C) por 15 minutos. Resfrie a 50°C. Adicione assepticamente o conteúdo reidratado de 1 frasco de Suplemento Seletivo HiCrome Listeria (FD181). Mexa bem e distribua em placas de Petri estéreis. Cuidado: Cloreto de lítio é perigoso. Evite contato corporal e inala-ção dos vapores. Se ocorrer contato com pele, lave imediatamente com grande quantidade de água.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a rosa, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.3%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor vermelha, gel trans-parente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 6.72% (peso/volume) apresenta pH final de 7.3 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Notermans S.H. and Dufrenne J., 1991, Applied and Environmental Microbiology, 57(09):2666-70.2. Mengaud J., Braun-Breton C. and Cossart P., 1991, Molecular Microbiology, 5(2):367-372.

Características da cultura após a adição do Suplemento Seletivo HiCrome Listeria (FD181), incubação a 35-37°C por 24-48 horas.

O Agar Base HiCrome Listeria Modificado é uma modificação de um meio primeiramente desenvolvido por Notermans et al (1) e Mengaud et al (2) para a detecção de Listeria spp em alimentos. O Agar Base HiCrome Listeria Modificado permite somente o crescimento de espécies de Listeria e fornece uma identificação direta e específica de L. monocytogenes dentro de 24-48 horas após pré-enriquecimento. Este meio está baseado na detecção cromogênica específica da atividade de β-glucosidase e também na fermentação da ramnose. Espécies de Listeria hidrolisam o substrato cromogênico purificado no meio produzindo colônias de cor azul. Uma vez que a atividade de β-glucosidase é específica para espécies de Listeria, outros organismos não podem utilizar o substrato cromogênico, portanto produzem colônias brancas. A diferenciação entre as espécies de Listeria está baseada na fermentação da ramanose. As colônias de L. monocytogenes e L. innocua são azuis com um halo amarelo (Ramnose positiva), enquanto que as colônias de L. ivanovii aparecem azuis sem o halo amarelo (Ramnose - negativa). A peptona, o extrato de levedura e o extrato de carne fornecem as substâncias nitrogenadas, vitaminas do complexo B e outros nutrientes essenciais. A Ramnose é o carboidrato fermentável com e o vermelho fenol é o indicador. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. O cloreto de lítio adicionado e o Suplemento Seletivo HiCrome Listeria (FD181) inibe o crescimento da maioria das bactérias gram-positivas, bactérias gram-negativas, leveduras e bolores.

28

AGAR

HIC

RO

ME

LIST

ERIA

BAS

E M

OD

IFIC

ADO

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaListeria monocytogenes ATCC 19118 50-100 Abundante ≥ 50% Verde azuladoListeria ivanovii ATCC 19119 50-100 Abundante ≥ 50% Verde azuladoListeria innocua ATCC 33090 50-100 Abundante ≥ 50% Verde azuladoE. coli ATCC 25922 Inibido 0% -B. subtilis ATCC 6633 Inibido 0% -P. aeruginosa ATCC 27853 Inibido 0% -C. albicans ATCC 10231 Inibido 0% -

Fermentação da RamnosePositiva (halo amarelo)

NegativaPositiva (halo amarelo)

----

3≥103≥10

3≥103≥10

M1354AGAR M-CP BASE

AGAR

M-C

P BA

SE





O Agar M-CP Base com suplemento seletivo é recomendado pela Diretiva 98/83 /EC do Conselho da União Européia para isolamento e contagem de Clostridium perfringens de amostras de água utilizando o método de filtração por membrana.

Para Identificação de Clostridium perfringens

Ingredientes g/L

Triptose 30.00Extrato de levedura 20.00Sacarose 5.00L-Cisteína (hidrocloridrato) 1.00Sulfato de magnésio, 7H2O 0.10Púrpura de Bromocresol 0.04Cloreto férrico, 6H2O 0.09Indoxil-β-D-glucosídeo 0.06Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.6 ± 0.2

Dissolva 35.6 gramas do pó desidratado em 485 mL de água destilada. Aqueça até a fervura para obter completa dissolução. Esterilizar autoclavando a 1atm de pressão (121°C) por 15 minutos. Esfrie até 50°C. Adicione assepticamente o conteúdo reidratado de um frasco do suplemento seletivo M-CP I (FD153) e um frasco do suplemento seletivo M-CP II (FD154) ou o conteúdo reidratado de 1 frasco de Suplemento Seletivo M-CP II, Modificado (FD154A). Misture bem e distribua em placas de Petri.

Aparência do pó: Cor amarela clara a verde clara, homogêneo e pó livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor púrpura, gel trans-parente a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 7.12% (peso/volume) apresenta pH final de 7.6 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Czeczulin J. R., Hamon P.C., Mcclane B. A., 1993, Infec. Immun., 61: 3429-3439.2. Armon R. and Payment P., (1988), Can. J. Microbiol., 34:78-79.3. Directive of the Council of the European Union 98/83/EC.4. Sartory D. P., Field M. Curbishley S. M., Pritchard A. M.., 1998, Lett. Appl. Microbiol., 27:323-327.

Características da cultura observadas após incubação a 44°C por 24-48 horas com adição de 1 frasco do suplemento seletivo M-CP (FD153) e 1 frasco do suplemento seletivo M-CP II (FD154) ou o conteúdo reidratado de 1 frasco do suplemento seletivo M-CP II, modificado (FD154A), sob condições anaeróbicas.

*colônias tornam-se rosa envelhecido a rosa avermelhadas sob exposição do vapor de amônio por 30 segundos.

Clostridium spp é umas das principais causas de intoxicação alimentar/ doenças gastrintestinais. Eles são bactérias gram-positivas, formadoras de esporos que ocorrem naturalmente no solo (1). A familia compreende Clos-tridium botulinum, que produz uma das toxinas mais potentes existentes; Clostridium tetani, agente causador do tétano e Clostridium perfringens são comumente encontrados em infecções de feridas e casos de diarréia. O uso de toxinas para causar danos ao hospedeiro é um método empregado por muitos patógenos bacterianos. O principal fator da virulência de C. perfringens é a enterotoxina CPE, secretada no intestino do hospedeiro e contribui para a intoxicação alimentar e outras doenças gastrintestinais (1). Vários meios sólidos têm sido desenvolvidos para a quantificação de C. perfringens. A seletividade do meio ocorre pela incorporação de um ou mais antibióticos que inibem certos anaeróbios ou anaeróbios facultativos.O Agar M-CP Base é preparado conforme a fórmula de Armon e Payment (2). Também é recomendado pela Diretiva 98/83/EC do Conselho da União Européia (3) para isolamento e contagem de C. perfringens de amostras de água usando técnica de filtro de membrana.A triptose e o extrato de levedura fornecem compostos nitrogenados, enquanto que a sacarose é o carboidrato fermentável. O corante Púrpura de bromocresol serve como um indicador de pH, o indoxil-β-D-glucorosideo é um substrato cromogênico para β-D-glucuronidase ou celobiose e difosfato de fenolftaleína para a detecção de fosfatase ácida. A adição de D-cicloserina e polimixina B (FD153) torna o meio inibitório para microbiota não clos-tridial, de modo que, permite a análise das células vegetativas e esporos de Clostridium. Seletividade adicional é obtida pela incubação sob condições de anaerobiose. Colônias amarelas (celobiose negativa) tornam-se rosa envelhecida a rosa avermelhadas após exposição de vapor de amônio por 30 segundos são considerados presuntivos de C. perfringens. Algumas vezes a diferenciação da coloração no Agar Base M-CP é difícil, assim colônias típicas (amarelas tornando-se rosa) como também colônias atípicas (verde ou aquelas que permaneceram amarelas sob exposição de vapor de amônio) são escolhidas para confirmação. A identificação presuntiva de C. perfrin-gens pode ser feita pela redução de sulfito, reacão de gram-positiva, bacilos esporulados, motilidade negativa, redução de nitrato, liquefação da gelatina, fermentação da lactose e outros testes bioquímicos (4).

29

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colôniaBacillus subtilis ATCC 6633 Inibido 0% -Clostridium perfringens ATCC 12924 Bom ≥40% -Salmonella Typhi ATCC 6539 50-100

50-100

50-10050-100

Inibido 0% *AmarelaStaphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -

M1651AGAR HICROME BACILLUS





O Agar HiCrome Bacillus é um meio diferencial recomendado para rápida identificação de espécies de Bacillus de culturas mista pelo método cromogênico.

Para Identificação de espécies de Bacillus.

Ingredientes g/L

Digesto Péptico de Tecido Animal 10.00Extrato de Carne 1.00D-Manitol 10.00Cloreto de Sódio 10.00Mistura Cromogênica 3.20Vermelho Fenol 0.025Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.1 ± 0.2

Dissolva 49.22 gramas em 1000mL de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Resfrie a 50°C e se desejar adicione assepticamente 1 frasco de Suplemento Seletivo Polimixina B (FD003) reidratado. Misture bem e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó amarelo claro a rosa, homogêneo e pó livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com um gel de agar 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: vermelha, claro a leve-mente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 4.92% (peso/volume) apresenta pH final de 7.1 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8ºC. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Murray P.R., Baron J. H., Pfaller M.A., Jorgensen J.H., and Yolken R.H., (Eds), 2003, Manual of Clinical Microbiology, 8th Ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. / 2. Mossel D.A.A., Koopman M. J. and Jongerium E., 1976, Appl. Microbiol., 15:650. / 3. Mortimer P.R. and McCann G., 1974, Lancet, 1043. / 4. Bouza E., Grant S., Jordan C., et al, 1979, Arch Ophthamol., 97:488. / 5. Wohlgemuth K., Kirkbride, C.A., Bicknell, E.J. and Ellis, R.P., 1972 Am. Vet. Met, Ass. 61:1691.


A maioria das espécies de Bacillus aparentemente tem pequeno ou nenhum potencial patogênico e raramente estão associados com doenças em humanos ou animais. A principal exceção é o Bacillus anthracis, o agente do anthrax, e o Bacillus cereus, mas um número de outras espécies, particularmente os pertencentes ao grupo Bacillus subtilis, implicados em intoxicação alimentar e outras infecções em humanos e animais (1). B. cereus causa intoxicação alimentar devido ao consumo de arroz contaminado (3, 4, 5), e outros alimentos amilaceos como batata, massa e queijo também tem sido implicados, infecções oculares e uma ampla linhagem de outras condições clínicas como a formação de abcessos (pus), meningites, septicemia e infecções de feridas. O Agar Hicrome Bacillus é baseado na formulação do ágar MYP formulado por Mossel et al. (2) sendo usado para contagem de Bacillus cereus e Bacillus thuringiensis quando presente em grande numero em determinados alimentos.O meio contém digesto péptico de tecidos animais e extratos de carne, que fornecem os compostos nitrogenados. O manitol é a fonte de carboidratos fermentáveis, fermentação esta que pode ser detectada pelo vermelho fenol. Organismos fermentadores de manitol como B. megateruim formam colônias de coloração amarela.A mistura cromogênica presente no meio é clivada pela enzima β-glucosidase encontrada em B. cereus, resultando na forma-ção de colônias azuis. B. thuringiensis também crescem como colônias azuis-esverdeadas neste meio já que B, cereus e B. thuringiensis são bioquimicamente idênticas. Se for necessário realizar o isolamento seletivo de B. cereus e B. thuringiensis, adicione assepticamente polimixina-B (FD003).

30

AGAR

HIC

RO

ME

BACI

LLU

S

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento(s/ suplemento FD003)

Recuperação(s/ suplemento FD003)

Cor da colônia

Bacillus subtilis ATCC 6633 50-100 Moderado 20-30% Verde amarelada a verdeBacillus cereus ATCC 10876 50-100 Bom a abundante ≥50% Azul clara, grande, plana

e com centro azulBacillus thuringiensis ATCC 10792 50-100

50-100

Bom a abundante ≥50% Azul claro, grande e plana ecom margens irregulares

Bacillus megaterium ATCC 14581 Bom a abundante ≥50% Amarela, mucóideBacillus coagulans ATCC 7050 50-100 Bom a abundante ≥50% Rosa, pequena e elevadaBacillus pumilis ATCC 14884 50-100 Bom a abundante ≥50% Verde-clara a verdeStaphylococcus aureus ATCC 25923 50-100 Abundante ≥50% AmarelaEnterococcus faecalis ATCC 29212 50-100 Abundante ≥50%

Crescimento(c/ suplemento FD003)

Recuperação(c/ suplemento FD003)

Inibido 0%Bom a abundante ≥50%

Bom-abundante ≥50%Inibido 0%Inibido 0%Pobre 10-20%Inibido 0%Inibido 0% Amarela

M1469AGAR HIFLUORO PSEUDOMONAS BASE

AGAR

HIF

LUO

RO

PSE

UD

OM

ON

AS B

ASE





Agar recomendado para isolamento seletivo de Pseudomonas aeruginosa a partir de espécimes clínicos e não clínicos pelo método fluorogênico.

Para Identificação Fluorogênica de Pseudomonas

Ingredientes g/L

Digesto pancreático de gelatina 18.00Cloreto de magnésio 1.40Sulfato de potássio 10.00Cetrimida 0.30Mistura Fluorigênica 2.05Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 7.2 ± 0.2

Dissolva 46.75 gramas em 1000mL de água destilada contendo 10mL de glicerol. Ferva para dissolver o meio completamente. Esterilize autoclavando a 1atm de pressão a (121°C) por 15 minutos. Misture bem e distribua em placas de Petri estéreis.

Aparência do pó: Pó de cor creme a amarela, homogêneo e pó livre circulante. Solidificação: Firme, comparável com Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor âmbar claro, gel opalescente com ligeira precipitação em placas de Petri.Reação: A reação da solução aquosa de 4.67% apresenta pH final de 7.2 ± 0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. King, Ward and Raney, 1954. J. Lab. Clin. Méd., 44:301.

Características da cultura após incubação a 35-37ºC por 24-48 horas.

Pseudomonas aeruginosa (também conhecida como Pseudo-monas pyocyanea) é um bacilo gram-negativo aeróbio.Como outras Pseudomonas, P. aeruginosa secreta uma varie-dade de pigmentos, incluindo a piocianina (azul-esverdeada), a fluoresceína (verde-amarelada e fluorescente) e a piorubina (vermelho castanho). King et al. desenvolveram o Agar Pseu-domonas P (Meio King A) para aumentar a produção pio-cianina e piorubina e Agar Pseudomonas F (Meio King B) para o aumento da produção de fluoresceína (1). O Agar HiFluoro Pseudomonas Base foi elaborado baseado na fórmula descrita por King et al. (1), exceto pela mistura fluorogênica. Este é um usado como meio seletivo para o isolamento de P. aeruginosa de amostras de pus, escarro e drenos etc.A cetrimida (brometo de cetiltrimetilamônio) foi incorporada para inibir bactérias que não sejam Pseudomonas aeruginosa. Este atua como um composto quaternário de amônio, deter-gente catiônico, o qual causa liberação de nitrogênio e fósforo das outras células bacterianas que não sejam Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa quebra o composto fluorogênico liberando o fluorógeno, o qual produz uma fluo-rescência visível sobre luz UV de comprimento de onda longo.

33

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Fluoresceína (sob UV)Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 50-100 Bom a abundante ≥50% PositivaStenotrophomas maltophila ATCC 13637 Inibido 0% -Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inibido 0% -Escherichia coli ATCC 25922 Inibido 0% -

≥10 3

≥10 3

≥10 3

M1465AGAR HICOLIFORME RÁPIDO





Agar utilizado para identificação de Escherichia coli e coliformes totais, que utilizam a combinação cromogênica e fluorogênica como substrato em amostras de água.

Para Identificação e Diferenciação Fluorogênica de E. coli e Coliformes.

Ingredientes g/L

Peptona especial 5.00Cloreto de Sódio 5.00Sorbitol 1.00Fosfato dipotássico 2.70Fosfato ácido de potássio 2.00Lauril sulfato de sódio 0.10Substrato cromogênico 0.08Substrato fluorogênico 0.05IPTG (1-Isopropil-D- 1- tiogalactopiranosideo) 0.10Agar 15.00

pH Final (a 25°C): 6.8 ± 0.2

Dissolva 31.03 gramas do meio em 1000mL de água destilada. Aqueça para dissolver o meio completamente. Esterilizar autoclavando a 1atm de pressão a (121°C) por 15 minutos. Dispense como desejar.

Aparência do pó: Pó creme a bege, homogêneo e livre circulante. Solidificação: Gel firme comparável a um Agar gel 1.5%.Cor e Transparência do meio preparado: Cor amarela clara, gel claro a levemente opalescente em placas de Petri.Reação: A solução aquosa a 3.1% (peso/volume) apresenta pH final de 6.8+0.2 a 25°C.Condições de Armazenamento: Armazenar o pó resfriado entre 2 e 8°C. Utilize antes de expirar a data de validade.

Referências Bibliográficas:1. Hahn G. And Wittrock E., (1991), Acta Microbiologica Hungarica 38 (3-4): 265-2712. Manafi. M. and Kneifel W., (1989), Zbl. Hygiene and Umweltemedizin 189:225-2343. Manafi M., (1990), Forum Stadte-Hygiene 41:181-184.4. Manafi M., (1991), Ernahrung / Nutrition, 15, Nr. 10.5. Manafi M. and Kneifel W., (1991), Acta Microbiologica Hungarica 33(3-4):293-304.6. Manafi M., Kneifel B. and Bascon S., (1991), Microbiol. Rev., 55:335-348.


O Meio HiColiformes Rápido é a modificação do caldo LMX descrito por Manafi e Kneifel (2). Este meio é usado para a detecção simultânea de coliformes totais e Escherichia coli em amostras de água com base nos substratos cromogênicos e fluorogênicos (1-6).A peptona especial é rica em triptofano e fornece nutrientes essenciais para o crescimento e permite a detecção simultânea da produção indol. O sorbitol fornece uma fonte de carbono. Os sais de fosfato proporcionam o tamponamento para crescimento rápido de coliformes. O lauril sulfato de sódio torna o meio seletivo inibindo a microflora contaminante, especialmente organismos gram-positivos. O Substrato fluorogênico é clivado pela enzima β-D-glicuronidase, o qual é especificamente encontrada em Escherichia coli. A reação é indicada por uma fluorescência azul sob luz UV. A presença de coliformes totais é indicada por um coloração das colônias de azul-esverdeada devido a clivagem do substrato cromogênico. O IPTG amplifica a síntese da enzima e aumenta atividade da β-D-galactosidase. Para confirmar a presença de E. coli, adicione 2-3 gotas de reagente Kovac sob a colônia suspeita. A mudança da coloração da colônia para vermelho confirma a presença de E. coli.

34

AGAR

HIC

OLI

FOR

ME

RÁP

IDO

Organismos Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Fluorescência (sob UV)

Enterobacter aerogenes ATCC 13048 50-10050-10050-10050-100

Abundante ≥50% NegativaEscherichia coli ATCC 25922 Abundante ≥50% PositivaKlebsiella pneumoniae ATCC 13883 Abundante ≥50% NegativaSalmonella Typhimurium ATCC 14028 Abundante ≥50%

IndolNegativoPositivoNegativoNegativoNegativa

Cor da colôniaAzul-verdeAzul-verdeAzul-verdeAmarela

hicrome - himedia

Science