hplc ppt

High Performance Liquid Chromatography

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi


- High Performance Liquid Chromatography (HPLC) merupakan suatu teknik kromatografi dengan fasa gerak cairan dan fasa diam cairan atau padat.

- Ciri teknik ini adalah penggunaan tekanan tinggi untuk mengirim fase gerak ke dalam kolom. Dengan memberikan tekanan tinggi, laju dan efisiensi pemisahan dapat ditingkatkan dengan besar metode kromatografi cair yang digunakan untuk menganalisa zat-zat organik yang biasanya mempunyai sifat sukar menguap dan tidak stabil terhadap panas (thermolabil)

Prinsip kerja HPLCPemisahan suatu senyawa kimia dari suatu campuran atau senyawa lainnya berdasarkan perbedaan sifat fisiknya.Memisahkan setiap komponen dalam sample untuk selanjutnya diidentifikasi (kualitatif) dan dihitung berapa konsentrasi dari masing-masing komponen tersebut (kuantitatif).


Kelebihan metode HPLC jika dibandingkan dengan metode lainnya:• Mampu memisahkan molekul-molekul dari suatu campuran • Mudah dalam pengoperasian instrumentasinya • Kecepatan analisis dan kepekaan yang tinggi • Dapat dihindari terjadinya dekomposisi/kerusakan bahan yang

dianalisis • Resolusi yang baik • Dapat digunakan bermacam-macam detektor • Kolom dapat digunakan kembali • Mudah melakukan "sample recovery"


Aplikasi HPLC

1) HPLC dengan prinsip kromatografi banyak digunakan pada industri farmasi dan pestisida.2) Zat- zat dengan kepolaran berbeda yaitu antara sedikit polar sampai polar dapat dipisahkandengan HPLC berdasarkan partisi cair-cair.3) Asam-asam nukleat dapat dipisahkan dengan kolom penukar ion yang dikombinasikan dengan kolom butiran berlapis zat berpori.4) Morfin, heroin dan semacamnya telah dapat dipisahkan dengan rezinZipax-SAX.5) Dapat memisahkan vitamin-vitamin yang larut dalam air.6) Digunakan untuk menentukan berat molekul polimer dan masalah-masalah biokimia.


Komponen-komponen HPLC


Aplikasi HPLC

Aplikasi dari metode ini digunakan untuk uji anti-angiogenik menggunakan HPLC untuk mengetahui tingkat kemurnian dari isolasi dan identifikasi eurycomanone akar pasak bumi (Eurycoma longifolia, Jack) oleh Salamah et al, (2009)


eurycomanone

200 g serbuk akar pasak bumi

Dimaserasi dng metanol 500 mL, 24 jam, 5 kali

disaring

dievaporasi

Ekstrak metanol

VLC

F1 F2 F3 F4 F5


F2

Isolat A Isolat B

KLT

VLC

Data Kromatogram

HPLC


Gambar Hasil elusi HPLC:I. Isolat A, tR= 7,067 II.Pembanding eurycomanone, tR= 7,108 fase diam silika, fase gerak kloroform : metanol = 4:6 dan kecepatan alir 0,5 mL/menit.


TERIMA KASIH ATAS PERHATIANNYA

hplc ppt

Documents