i rischi della procreazione medicalmente assistita dottoranda: dr.ssa c. pozzobon tutor: prof. g....
TRANSCRIPT
I RISCHI DELLA PROCREAZIONE
MEDICALMENTE ASSISTITA
Dottoranda: Dr.ssa C. Pozzobon
Tutor: Prof. G. Ricci
Razionaleamplissima diffusione delle procedure di
PMA negli ultimi anni
10 % delle coppie si troverà ad affrontare un “problema” di infertilità
3,4% dei nati al “Burlo Garofolo” nasce da tecniche di PMA
Razionale
Complicanze a breve termine
Complicanze della somministrazione dei farmaci
Complicanze delle procedure chirurgiche
Trasmissione di malattie virali
Razionale Complicanze a medio termine
Complicanze della gestazione (aborto,
preeclampsia)
Problematiche neonatali (parto pretermine,
basso peso alla nascita, outcome perinatale
negativo, cromosomopatie, malformazioni)
Razionale
Complicanze a lungo termine
Effetti nel tempo delle terapie cui si
sottopongono le donne
Problematiche psicologiche
Problematiche sviluppo psico-fisico dei bambini,
sviluppo di sindromi rare o neoplasie
Obiettivi
I OBIETTIVO=
INDIVIDUARE FATTORI PREDITTIVI E FATTORI DI RISCHIO
II OBIETTIVO=
RILEVAMENTO E MONITORAGGIO
Materiali e Metodi
I OBIETTIVO=
RICERCA
II OBIETTIVO=
SCHEDE DI MONITORAGGIO
Materiali e Metodi
II OBIETTIVO=
SCHEDE DI MONITORAGGIO
I FASE: messa a punto
II FASE: periodo di prova
III FASE: campagna promozione raccolta dati
Risultati I obiettivo
In collaborazione con CRG AZ.VUB
In collaborazione con Genetica Medica del “Burlo Garofolo”
In collaborazione con IVI
Risultati I obiettivo
Risultati I obiettivoProgetto di ricerca in collaborazione con la S.C. Genetica Medica e la S.C. Neuropsichiatria Infantile del “Burlo Garofolo”
Ricerca e quantificazione di sequenze mitocondriali paterne in amniociti di pazienti sottoposte a trattamento di fertilizzazione con ICSI
valutare l’efficacia del meccanismo di selezione in questo stadio di sviluppo fetale
valutare il rischio di una possibile trasmissione paterna di anomalie a carico del mtDNA.
Lo scopo del nostro studio è quello di verificare la presenza di sequenze di mtDNA paterno e l’eventuale percentuale di eteroplasmia negli amniociti di pazienti sottoposte a trattamento
ICSI, con i seguenti obiettivi:
Metodi Estrazione mtDNA da leucociti sangue periferico dei genitori ed amplificazione regione polimorfica + estrazione mtDNA spermatozoi
Costruzione di oligonucleotidi allele specifici in grado di ampliare in maniera selettiva il mtDNA paterno o materno
Estrazione del mtDNA da amniociti seguita da una PCR allele specifica + ev. quantificazione del mtDNA paterno mediante real-time PCR allele-specifica.
Metodi
I FASE: messa a punto delle metodiche
II FASE: coordinazione gruppo
multidisciplinare per il reclutamento
III FASE: analisi dei dati
Risultati
reclutamento 26 famiglie
analisi dati di 10 famiglie
in nessun campione sono state rilevate sequenze
di mt-DNA
Discriminanti scelte per la PCR allele specifica:polimorfismo 215 A/G in padre Primer reverse padre:
5’- TATTATTATGTCCTACAAGCATTTTC -3’
Primer reverse madre: 5’- TATTATTATGTCCTACAAGCATTTTT -3’
Primer forward:
5’-ACCCTATGTCGCAGTATCTGT -3’
Lunghezza amplificato: 130 bp
Padre Madre
73 A/G 73 A/G
195 T/C 150 C/T
215 A/G 152 T/C
263 A/G 263 A/G
309 insC 309 insC
311 insC 311 insC
499 G/A 522-523 delCA
16093 T/C 16189 T/C
16356 T/C 16194 insC
16519 T/C 16270 C/T
Padre Madre
72 T/C 73 A/G
263 A/G 185 G/A
309 insC 188 A/G
etpl 309 insCC 228 G/A
311 insC 263 A/G
16169 C/T 295 C/T
16298 T/C 462 C/T
16069 C/T
16126 T/C
16325 T/C
Discriminanti scelte per la PCR allele specifica:polimorfismo 72 T/C in padrepolimorfismo 73 A/G in madre
Primer reverse padre: 5’- GCAATGCTATCGCGTGCATG -3’Primer reverse madre: 5’- GCAATGCTATCGCGTGCACA -3’
Primer forward: 5’- GAAATCAATATCCCGCACAAGAGTG-3’
Lunghezza amplificato: 248 bp
Famiglia 11 Famiglia 14
Risultati I obiettivo
Prevenzione farmacologica OHSS con chinagolina
RCT multicentrico
7 centri Instituto Valenciano de Infertilidad
200 pz - 18 mesi
Inizio ottobre 2006
Risultati I obiettivo
Prevenzione farmacologica OHSS con chinagolina
marzo 2007 132 pz randomizzati
Allungamento del reclutamento a 24 mesi
Risultati II obiettivo
I LIVELLO=
Interno al SSD PMA Burlo Garofolo
II LIVELLO=
In collaborazione con ISS
Risultati II obiettivo
Elaborazione e distribuzione di 2
SCHEDE per il MONITORAGGIO delle
GRAVIDANZE da tecniche PMA
2006
100 GRAV
97 SCHEDE
VANISHING TWINS
SCHEDA PER IL FOLLOW-UP
DI GRAVIDANZA DA
PROCREAZIONE MEDICALMENTE
ASSISTITA
PROPOSTA, DISCUSSA E
PROMOSSA
A LIVELLO REGIONALE
Risultati II obiettivo
Collaborazione col l’ISS
per l’elaborazione di un
REGISTRO NAZIONALE
FINALITA’ DEL REGISTRO
censire i centri del territorio nazionale
rendere omogenei i requisiti tecnici-organizzativi
raccogliere dati efficacia ed esiti delle tecniche
censire embrioni prodotti e criopreservati banca dati per analisi epidemiologiche
e confronti con altri Paesi
Risultati II obiettivo
STRUTTURA DEL REGISTRO
RACCOLTA PER DATI AGGREGATI
risponde ad esigenze più immediate
RACCOLTA PER RECORDS INDIVIDUALI
permette di ottenere informazioni più complesse
Risultati II obiettivo
Cartella medica elettronica
RACCOLTA PER RECORDS AGGREGATI
I criterio
accreditamento dei centri presso le regioni
invio degli elenchi dei centri accreditati dalle regioni all’ISS
consegna ai centri degli accessi al sito
registrazione dei centri al registro nazionale
inserimento periodico dei dati dell’attività da parte dei centri
RACCOLTA PER
RECORDS INDIVIDUALI
II criterio
Cartella medica elettronica
BANCA DATICENTRI
BANCA DATIPAZIENTI
BANCA DATICICLI
BANCA DATIEMBRIONI
BANCA DATINATI
BANCA DATIGRAVIDANZE
377 CENTRI
37293 CICLI
29380 OPU
25000 ET
REGISTRO NAZIONALE 2005
REGISTRO NAZIONALE 2005
I II
III
0102030405060708090
100
RISPOSTA CENTRI GRAV PERSE ALFOLLOW-UP
PR/ET 96 CENTRI 2003-2005
2424,5
2525,5
2626,5
2727,5
2828,5
29
2003 2005
FIV
ICSI
TOT
PERDITA IPOTETICA GRAV 2003-2005
↓ 331,6
gravidanze
in meno
RISULTATI BURLO 2006
313 cicli225 pz79 grav
24%
76%
FIVET
ICSI
CLASSI DI ETA’
10
28,7
36
24,6
0,70
5
10
15
20
25
30
35
40
<29 30-34 35-39 40-44 >45
%
RISULTATI BURLO 2006
289 OPU
2390 OVOCITI PRELEVATI
749 OVOCITI INSEMINATI
277 ET
RISULTATI BURLO 2003 vs 2006
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
2003 2006
OVOCITIPRELEVATI
OVOCITIINSEMINATI
COMPLICANZE
1 sanguinamento
1 OHSS severa
0 infezioni
0 morti materne
ESITI NEGATIVI
13
25,6
4,3
0
4,31,4
0
5
10
15
20
25
30
ABORTI ITRIM
ABORTI IITRIM
GEU
2003
2006
%
ESITI NEGATIVI
25,6
01,4
0
5
10
15
20
25
30
ABORTI ITRIM
ABORTI IITRIM
GEU
2006
%
PARTI
79
72,2
18,524
1,9 3,7
0
10
20
30
40
50
60
70
80
SINGOLI GEMELLARI TRIGEMELLARI
2003
2006
%
PARTI
44,4
55,6
0
10
20
30
40
50
60
VAGINALI CESAREO
%
NATI LBW
33,8
16,6
58,3
25
0
10
20
30
40
50
60
TOT SINGOLI GEMELLARI TRIGEMINI
%
NATI PRETERMINE
35,2
28
48
24
05
10152025
30354045
50
TOT SINGOLI GEMELLARI TRIGEMINI
%
RISULTATI BURLO 2005
71 NATI VIVI
2,82% MALFORMAZIONI