i.a. equina

Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010

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INTRODUCCIN

La Inseminacin Artificial es un mtodo de reproduccin utilizado en las diferentes especies animales, para fines mejoradores de carga gentica o de produccin, sin embargo en nuestro pas est ms difundida en el ganado vacuno, y en menor proporcin en el ganado caballar. Algunos establecimientos la practican facilitando el mejoramiento de sus planteles, ya que es sabido que se pueden utilizar semen de sementales de otras latitudes, y traducir esas caractersticas deseables a las pistas, el trabajo, o a la belleza de los ejemplare s. La Inseminacin por otra parte reduce el estrs sexual tanto de la yegua como del padrillo, ya que existen mtodos para la extraccin, conservacin y posterior uso del semen. Estas tcnicas a la vez permiten que animales de gran valor puedan dar una progenie ms extensa que por el mtodo de monta natural. A medida que vamos avanzando la Inseminacin en el Equino va ser ms difundida en nuestro medio.

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010Qu es la Inseminacin Artificial? Es un mtodo de reproduccin que consiste, en la recoleccin, dilucin, y deposicin del semen dentro del aparato reproductor de la hembra en celo. La inseminacin artificial se utiliza de forma rutinaria en algunas especies animales como en la vaca lechera o la productora de carne . Como tcnica reproductiva se desarrolla de forma comercial primero en vacuno de leche intensivo a mitad del siglo pasado y, a partir de esta espec ie, se ha ido extendiendo al resto. ltimamente se inseminan ms yeguas, aunque no se llegan a alcanzar los porcentajes de uso que se observan en las especies de abasto. Sin embargo, hoy en da esta tcnica reproductiva, que tiene una reconocida capacidad en la mejora zootcnica y en el control sanitario, es cada vez ms aceptada por los ganaderos y su empleo se est extendiendo en ms razas de caballos. En un principio, uno de los factores que ha influido, entre otros, en el rechazo a inseminar a las yeguas es la creencia de que es menos eficaz que la monta del caballo porque se tiene an la idea de que, cuanto ms cubra el caballo a la yegua, con ms seguridad se queda sta preada. Centrndonos en el esperma refrigerado esto es un error, ya que una de las ventajas inherentes de la tcnica es que permite que se pueda incrementar la fertilidad aunque slo se insemine una vez, porque cuando se insemina se utilizan dosis de esperma con el nmero adecuado de espermatozoides frtiles y la yegua se ha explorado previamente, por lo que se sabe que no tiene alteraciones y que est en el momento adecuado para ello, con mayor probabilidad de quedar preada.VENTAJAS:

1.- Aprovechamiento del macho. El mejor aprovechamiento del macho se refiere, por un lado a que sus genes son distribuidos en una mayor cantidad de cras, sin embargo ha de tenerse en cuenta tambin, que, dado que el semen se conserva en forma prcticamente indefinida, se puede obtener cras de ellos an cuando hayan muerto. Permite economizar el uso del padrillo en haras de gran porte, donde el semen es recogido del mismo establecimiento. 2.- Mejoramiento gentico. La inseminacin artificial no es por si misma una herramienta de mejora miento gentico, pero en virtud a que se obtienen grandes cantidades de descendientes de un mismo macho, es lgico que la seleccin de ellos ha de ser muy exigente (alto ndice de seleccin); Es as como slo unos pocos especmenes de una determinada raza u especie son progenitores de un alto porcentaje de los individuos de3

Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010las siguientes generaciones. La correcta determinacin de las caractersticas a seleccionar y de la seleccin misma de los reproductores empuja los diferenciales de seleccin en la direccin requerida por el mercado y los ganaderos.3.- Evita transmisin de enfermedades. Los machos que aportan el material seminal deben encontrarse libres de toda enfermedad, venrea o no, que pudiese transmitirse a travs del semen, asegurndose as que no existe riesgo de transmitir enfermedades desde el macho a las hembras en cuyos sistemas reproductivos se depositar el semen. Esta condicin sanitaria ha adquirido especial importancia desde que el semen se puede conservar por largos perodos, puesto que ello ha permitido el comercio internacional del material seminal. 4.- Aumenta la fertilidad. El uso correcto de la biotecnologa en los animales permite alcanzar tazas de prees equiparables a las de la cubierta natural en la mayora de las especies. En ot ras especies animales el semen fresco (sin congelar) mantiene las tazas de prees (fertilidad), pero esta se reduce al congelar el semen. Sin lugar a dudas que esta biotecnologa tambin se puede usar como una alternativa de obtener cras de un macho con problemas de fertilidad (incapacidad para cubrir, incapacidad para eyacular, semen de baja concentracin, etc .) 5.- Uso de sementales que estn en malas condiciones fsicas. Tanto fracturas, desgarros musculares, especialmente del tren posterior, pueden impedir que un macho realice normalmente el coito, siendo entonces la inseminacin artificial una alternativa para obtener cras de ellos Una adecuada coleccin de semen y su correcta manipulacin (en cuanto a concentracin) puede permitir la obtencin de des cendientes de esos animales. 6.- Velocidad de cubrimiento. Un macho bovino puede prear en mismo da a un mximo de 3 a 4 hembras, sin embargo, gracias a la sincronizacin de celos, es posible tener muchas ms vacas en celo (estro) en una misma fecha, gracias a la inseminacin artificial estos celos pueden aprovecharse, logrndose entre otras cosas, un periodo de cubiertas (encastes) ms corto y una mayor homogeneidad en las edades de las cras obtenidas, lo que permite una mejor comercializacin de los mis mos. 7.- Control absoluto del plantel. La inseminacin artificial da origen a registros de mayor calidad, los que permite n un mejor manejo de los planteles y una mejor evaluacin de los mismos.4

Produccin Equina Inseminacin Artificial 20108.- Apareamiento correctivo por tipo. Gracias a la gran cantidad de descendientes que deja cada macho, es posible evaluarlos desde el punto de vista productivo y de estructura de las cras (Tipo), as los ganaderos cuentan con informacin que le permite seleccionar los machos a usar y corregir (en las futuras generaciones) defectos de las madres como pueden ser la forma de las extremidades o de las grupas. 9.- Costos. La inseminacin artificial reduce los costos de prear las hembras, por un lado porque no requieren de sementales presentes en las fincas y por otro lado porque el material seminal, en la medida que la biotecnologa se masifica, ha alcanzado valores relativamente bajos.

Cules son sus ventajas en la Yegua? La Inseminacin Artificial es una tcnica reproductiva que consiste en depositar esperma en el aparato reproductor de la hembra en celo sin la intervencin del macho. Como se ha demostrado en otras especies animales, ayuda a mejorar la fertilidad, reduce el riesgo de trasmisin de enfermedades, facilita los programas de seleccin y mejora gentica y nos permite poder disponer de esperma de buena calidad en zonas alejadas de donde se localizan los donantes, con lo cual se reduce el riesgo de accidente en el transporte de animales. En la especie equina es adems un buen mtodo de control del estrs sexual, que no es tan deseado en el celo del potro y en yeguas vrgenes y, aunque tambin tiene desventajas y limitaciones, stas se reducen al mnimo si es practicada por personal cualificado y adiestrado. Por otro lado, es una tcnica que tiene una vertiente teraputica y est indicada en determinados casos de infertilidad; por ejemplo en algunas yeguas, fundamentalmente viejas y/o con deficiencias uterinas relativas o compensadas, en las que es contraproducente la cubricin ya que son incapaces de eliminar en un tiempo prudencial para la viabilidad del embrin la contaminacin post-coito que induce toda cubricin. En estos animales o en estos celos en concreto se recomienda la inseminacin, ya que se reduce la intensidad de la respuesta inflamatoria del tero postcubricin, incrementndose as las posibilidades de gestacin. La inseminacin artificial tiene diversas modalidades segn que el esperma que utilicemos sea refrigerado o congelado, y dentro de poco, aunque en estos momentos no es posible, se podr inseminar adems con esperma sexado (lquido o slido) que permitir decidir el sexo de la progenie.

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010Sincronizacin de celo en la yegua. Por lo general las yeguas se les aparea o insemina artificialmente despus que el estro ha sido detectada mediante un retajo y que se ha evaluado el desarrollo folicular mediante la palpacin rectal de los ovarios o bien por ecografa. La sincronizacin del estro y la ovulacin permitir la inseminacin de las yeguas en momentos predetermi nados sin la necesidad de detectar estro o palpar los ovarios. Existen dos tratamientos que influyen eficazmente en la actividad ovrica de la yegua: 1. Induccin de la lutelisis con la prostaglandina F2 (PGF2 ). 2. Induccin de la ovulacin durante la fase folicular mediante una inyeccin de HCG. La yegua es ms sensible, en base al peso corporal, a los efectos luteolticos de la administracin sistmica (I/M, S/C) de PGF2 . Tal administracin es tan eficaz para causar la lutelisis en yeguas intacta s como histerectomizadas, lo que indica que el principal sitio de accin de esta hormona no se encuentra a nivel del tero. La PGF2 y sus anlogos se han utilizados para controlar el ciclo estral de la yegua. El tratamiento provoca el cese rpido de l a secrecin del cuerpo lteo como lo indica la disminucin rpida de los niveles plasmticos de progesterona. La infusin de 10 mg PGF2 en los das 7 a 9 despus de la ovulacin en relacin al fin del estro es normal. El tiempo para regresar al estro de despus de la lutelisis no depende de la cantidad de prostaglandina. Se puede inducir lutelisis tempranamente a los 5das despus de una ovulacin natural. En la yegua la PGF2 y sus anlogos sintticos son luteolticos y provocan aborto, por eso hay que tener cuidado en su uso. La administracin I/M es tan eficaz como la S/C y se requiere una dosis sistmica efectiva mnima de 1,25 mg de PGF2 para inducir lutelisis. Dosis y Efectos Secundarios La dosis de la prostaglandina natural es de 5 mg, mientras que de una sinttica como el cloprostenol es de 150 mg dosis total. En un estudio que se llevo a cabo con la prostaglandina sinttica antes mencionada para la sincronizacin de estros y reduccin de los efectos colaterales utilizando la mitad de la dosis total (0.75 mg), se encontr un efecto luteoltico en el 95% de las yeguas tratadas, lo que significa que la mayora de las hembras entraron en celo dentro de los 5 das siguientes a la aplicacin de la hormona. En cuanto a los efectos colaterales, se encontr que el efecto ms significativo fue el incremento en la motilidad intestinal, que ocasiono una diarrea temporal en el 64% de los animales, problema que desapareci dentro de las dos horas siguientes.6

Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010MANEJO EN LA INSEMINACIN Cuando se emplea la inseminacin artificial es necesario contar con especialistas en reproduccin equina que determinen si la yegua es apta para ser inseminada y, si lo fuera, debern determinar el momento ptimo, coordinando la inseminacin con la peticin del esperma al centro correspondiente o elaborando la dosis de esperma refrigerado (figura 3).Figura 3. Recogida de esperma en vagina artificial.

Si se emplea esperma congelado no es necesaria esta ltima fase, ya que las dosis slo se descongelan en el momento de su utilizacin (figura 4).Figura 4. Envase de nitrgeno lquido para transporte de esperma.

En cualquier caso, la yegua debe ser sometida a un examen reproductivo previo con el fin de valorar la integridad anatmica y funcional de su aparato reproductor y descartar aqullas que presenten alteraciones que reduzcan la fertilidad. En los programas de IA se deber ser ms estricto en este sentido, para as obtener todos los beneficios que conlleva la tcnica. As, se deben descartar las hembras con anomalas congnitas o adquiridas, como las que presenten alteraciones del tero (fibrosis o infecciones, por ejemplo) (figura 5).

Figura 5. Aspecto endoscpico de una fibrosis uterina (izquierda) y endoscpico y ecogrfico de una piometra (centro y derecha).

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El manejo reproductivo de la yegua que va a ser inseminada es diferente al de hembras de otras especies, entre otras razones, porque tiene unas caractersticas propias en su actividad ovrica y sexual que determinan un celo muy largo, con mxima fertilidad al final del mismo. En concreto, la exploracin rectal mediante ecografa de sus ovarios y tero, repetida durante el tiempo del celo, es necesaria para determinar el momento ms indicado de la IA, valorando el aspecto del folculo preovulatorio, midiendo su tamao y forma, grosor de sus paredes y ecogenicidad del sedimento del lquido folicular (figura 6, izquierda y centro).

Figura 6. Aspecto ecogrfico del folculo pre-ovulatorio de la yegua: a 24 horas de la ovulacin (izquierda), ovulando (centro) y con 24 horas pos-ovulacin (derecha).

Cuando se emplea esperma congelado, se es an ms estricto en la seleccin y manejo de la yegua, llegando a someterla a exploraciones ecogrficas seriadas cada seis horas, ya que en un 75% de las yeguas se puede predecir la ovulacin 24 horas antes de que ocurra, segn el aspecto ecogrfico del folculo pre-ovulatorio.

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010TCNICA DE LA INSEMINACIN Aunque no se requieren grandes inversiones para inseminar correctamente, se necesitan instalaciones adecuadas que varan en funcin de si se recoge esperma para elaborar la dosis, para lo que se necesitar una zona o sala de recogida de esperma, un laboratorio bsico (fijo o mvil) que permita la valoracin del esperma y elaboracin de dosis para inseminar, y un potro de inmovilizacin necesario para explorar ecogrficamente e inseminar a la yegua. Tambin son necesarios material y equipos especficos como los catteres de inseminacin de un solo uso para depositar el esperma en el tero de la yegua. Tradicionalmente, al inseminar se deja la dosis de esperma en el cuerpo del tero, atravesando para ello el crvix con el catter de inseminacin. Sin embargo, actualmente, la tendencia generalizada es realizar la inseminacin en su variante intrauterina profunda, porque permite incrementar los porcentajes de fertilidad y reducir la concentracin de espermatozoides de la dosis. Esta variante de inseminacin est ms indicada cuando se emplea esperma congelado (con menos capacidad fecundante, figura 7, derecha). En este caso se pueden emplear catteres largos semirigidos de pequeo volumen (figura 7, izquierda) o se puede usar un endoscopio flexible adaptado que permite regar la papila tubrica con la dosis.

Figura 7. Catteres de inseminacin equina de diferente tamao para pequeo y gran volumen (izquierda). Lugar de depsito de la dosis en el cuerpo del tero (centro) o en la porcin distal del cuerno uterino (derecha).

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010Evidentemente, la inseminacin con el endoscopio es ms exacta pero tambin ms cara, y por eso se utiliza en ms ocasiones el catter para inseminacin con pequeo volumen, que se lleva, va vaginal, hasta la parte distal del cuerno uterino correspondiente al ovario que tiene el folculo preovulatorio, ayudados de una mano introducida en el recto (mtodo rectovaginal). MOMENTO DE LA INSEMINACIN El momento para realizar la inseminacin artificial depender del tipo de esperma. Con refrigerado se realiza normalmente por exploracin rectal ecogrfica del aparato reproductor para identificar en un ovario la presencia de un folculo pre-ovulatorio (FP), de tal manera que si est en celo y/o tiene un FP se insemina por primera vez y se repite a las 24 horas hasta que termine el celo o se observe la ovocitacin ( figura 6, derecha). El porcentaje medio de fertilidad obtenido es del 60% o mayor. Sin embargo, cuando se quiere inseminar con esperma congelado conviene que la dosis se deposite en el tero entre las 6-8 horas anteriores a la ovocitacin o las 6 posteriores. Para poder predecir el momento de la misma es imprescindible el examen ecogrfico seriado del ovario activo. La fertilidad del congelado vara mucho entre donantes (20- 100%) y est influido por la hembra y la tcnica de inseminacin. RECOLECCIN, EVALUACIN Y CONSERVACIN DE SEMEN EQUINO La diferencia ms interesante entre el servicio natural y la inseminacin artificial radica en el nmero de veces que el padrillo eyacula por da. Bajo servicio natural el eyaculado de un padrillo no puede subdividirse en varias dosis inseminantes, por eso es frecuente que un padrillo muy popular sirva a 2 3 yeguas por da, los 7 das de la semana durante el pico de la estacin reproductiva. De esta manera el manejo de las yeguas presenta caractersticas crticas: la ovulacin debe ser lo ms cercana posible al servicio. Esto ayuda a prevenir el sobre -uso del padrillo. ltimamente, la inseminacin artificial se ha transformado en una clave importante de los programas de reproduccin equina, ya que cada vez ms registros de raza permiten su implementaci n. El proceso de recoleccin se semen constituye una parte vital de los programas de inseminacin artificial. Una vez obtenido, el semen debe ser inmediatamente inseminado o preser vado; cualquier exposicin a un10

Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010ambiente hostil puede ocasionar efecto s deletreos sobre la capacidad fertilizante de los espermatozoides. De esto se desprende lo extremadamente importante que es la manipulacin cuidadosa del semen eyaculado. RECOLECCION DE SEMEN EQUINO.Seleccin de la vagina artificial. El procedimiento de recoleccin de semen se puede realizar fcilmente utilizando una vagina artificial (V.A.). La correcta seleccin de la V.A. es fundamental tanto en el proceso de recoleccin como de evaluacin de semen. En el momento de elegir una, debe n tenerse en cuenta no slo las conveniencias en cuanto a sus caractersticas y costos sino tambin la preferencia del padrillo. El modelo Missouri se encuentra ampliamente difundido por ser muy accesible econmicamente, es liviana, fcil de manejar y rel ativamente fcil de limpiar. Se compone de una doble camisa de ltex permanentemente sellada que funciona como cmara de agua. Una carcasa de cuero envuelve dicha camisa para facilitar su manipulacin. Est equipada con una vlvula que permite colocar agua sola, aire solo o la combinacin de los dos para reducir su peso. El mantenimiento de la temperatura adecuada durante la recoleccin no es tan eficaz como en otros modelos de V.A. Lo importante es que en este modelo de VA los espermatozoides no estn en c ontacto con la superficie caliente de la camisa de ltex. El modelo Nishikawa, japons, consta de un tubo metlico rgido de aluminio y una simple camisa de ltex entre los cuales queda conformada la cmara de agua. Este modelo es de fcil manejo y limpie za aunque ligeramente ms pesada que la anterior. La camisa debe ajustarse bien en ambos extremos mediante bandas de goma fuertes para evitar filtraciones de agua con la consecuente contaminacin de la muestra. Los modelos de V.A. antes citados son comnmente llamados cerrados debido a que con ellos se obtiene una muestra de semen que contiene tanto la fraccin espermtica como la fraccin de plasma seminal, es decir, el eyaculado completo. Con el objetivo de aumentar la concentracin espermtica recolectando slo los primeros pulsos del eyaculado, en Polonia desarrollaron un modelo de V.A. abierta (modelo Krakow), en donde el glande se exterioriza en el extremo posterior y puede recolectarse slo la fraccin del eyaculado rica en espe rmatozoides. As se obtiene del 75-80% de los espermatozoides presentes en una muestra con cerca del

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 201050% del volumen total. La recoleccin de semen con este mtodo reduce la contaminacin de la muestra con orina y/o bacterias.Mantenimiento y limpieza de la V.A.

Todos los elementos de la vagina usados deben ser enjuagados con agua corriente templada, empleando un detergente neutro, para uso de laboratorio, que no deje residuos qumicos que pueden resultar txicos y espermicidas. Luego del lavado para remover los restos de suciedad y de lubricante, se deben enjuagar con agua destilada por lo menos tres veces y sumergir en alcohol etlico 70 por el trmino de dos horas. Para el secado se recomienda colgar las camisas en un gabinete cerrado para evitar que en ellas se deposite polvo. Pueden esterilizarse mediante xido de etileno teniendo la precaucin de ventilarlas por un perodo no inferior a 48 -72 horas antes de volver a usarlas.Preparacin de la V.A.

El agua con que se completa la cmara de agua debe tener una temperatura de 50-54C, de manera que la temperatura interna sea de 42 45 C. Es sumamente importante que la temperatura sea medida mediante un termmetro y nunca sea estimada; si la temperatur a es inferior a la citada no habr suficiente estmulo para la eyaculacin y si es superior se podr quemar al padrillo con los consecuentes trastornos en su conducta sexual. La cantidad de agua a colocar debe acomodarse al tamao del pene de manera tal que la presin sea uniforme a lo largo de toda la V.A. y no dificulte la penetracin y ereccin completa del pene. Si la presin es excesiva no permitir la correcta intromisin del pene con lo cual el semen tomar contacto con las paredes de la V.A. a al tas temperaturas y se alterar la calidad de la muestra. La superficie interna de la camisa debe lubricarse con algn elemento no espermicida, tal como gel estril, la vaselina slida daa la camisa de ltex. El eyaculado debe protegerse de la luz y mant enerse a temperatura corporal hasta ser transportado al laboratorio. La filtracin del eyaculado pos -recoleccin es esencial para separar la porcin de gel de la porcin rica en espermatozoides; esto puede hacerse mediante un trozo de gasa o aspirando el gel con jeringa. Algunos modelos de V.A. traen botellas recolectoras con filtros incorporados que permiten realizar la operacin de filtrado al mismo tiempo que la recoleccin.

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010Recoleccin del semen

Para la recoleccin de semen equino puede utilizarse como scubo una yegua en celo natural o una yegua ovariectomizada mantenida con altos niveles de estrgenos exgenos (1-2 mg ciprionato de estradiol, ECP, va intramuscular semanalmente). Tambin pueden utilizarse scubos artificiales, para los cuales el padrillo debe estar entrenado. Estos dos ltimos mtodos permiten disponer de un scubo an en la temporada anovulatoria. Previo a la recoleccin, el pene del padrillo debe ser examinado para detectar posibles lesiones. Para lograr la exteriorizacin del pene, se presenta la yegua al padrillo de modo que ni ella, ni el macho ni el personal corran peligro y puedan realizarse las maniobras apropiadamente. Una vez que se exterioriz el pene, el operador lo t oma con una mano, lo desva y con la otra comienza la limpieza con agua tibia (a 37 C) y algodn sin agregado de jabn ni desinfectantes ya que los mismos remueven la flora bacteriana normal y permite el crecimiento de microorganismos patgenos, por ejemplo Pseudomona aeruginosa. Muchas veces es deseable realizar un anlisis bacteriolgico previo a la recoleccin de semen para descartar una infeccin del tracto genital del macho. La toma de muestras para cultivo debe hacerse antes del lavado del pene. Se toman cuatro muestras: a) de la superficie del pene; b) de la fosa del glande; c) de la uretra pre recoleccin y d) de la uretra pos recoleccin. Los hisopos deben remitirse al laboratorio en medio de transporte, por ejemplo Stuart. Generalmente la ye gua usada para la recoleccin tiene una buena sujecin consistente en trabones, bozal y mordaza, para evitar que el padrillo sea lastimado. Las patadas durante la recoleccin de semen, adems de producir una respuesta sexual negativa, pueden causar traumatismo de pene, prepucio o testculo. La cola de la hembra debe ser prolijamente cubierta con una venda o guante largo ya que los pelos pueden enredarse y causar lesiones del pene durante el procedimiento. Debe evitarse en la medida de lo posible que el padrillo acte agresivamente durante la monta; para esto puede manejrselo con una cadena agregada al bozal. Todos los padrillos son diferentes y todos los padrilleros son diferentes. La habilidad del personal para manejar al padrillo de manera que se logre una respuesta sexual favorable con un mnimo de dificultades es un arte. Esta es la clave de muchos problemas de comportamiento sexual en padrillos.

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010El operador encargado de recolectar el semen debe colocarse generalmente del lado izquierdo junto con el pe rsonal que maneja al padrillo. Debe estar muy atento a las reacciones tanto de la hembra como del macho. Slo cuando el macho logra la ereccin, se le permite montar a la yegua o scubo. El operador desva el pene y presenta la V.A. al padrillo para que mediante el reflejo de bsqueda, logre l mismo la intromisin. Es conveniente proporcionarle una posicin confortable para lograr una mxima estimulacin. Con la mano izquierda se sostiene la V.A. apoyndola contra la hembra y la mano derecha se coloca en ventral del pene con el objeto de palpar las pulsaciones asociadas con la eyaculacin. La palpacin de estas pulsaciones junto con el flameo de la cola durante la eyaculacin y la presencia de restos de semen o gel en el orificio uretral una vez terminada la recoleccin, y prdida de la ereccin evidencian que la eyaculacin se ha llevado a cabo. Inmediatamente despus de retirada la V.A. debe colocarse sta en posicin vertical y permitir la salida de agua a travs de la vlvula para dejar que el semen que haya quedado en porciones altas de la vagina drene hacia la bolsita o botella recolectora. EVALUACION DEL SEMEN Una vez obtenido el eyaculado debe ser transportado lo antes posible al laboratorio protegindolo de la luz solar, y el shock por fro. Todos los elementos utilizados para la evaluacin deben estar pre calentados a 37 C.Observacin y filtrado. El primer paso es el filtrado de la muestra para eliminar posibles detritus y la porcin gelatinosa. Se observa el color, densidad y volumen de la porcin libre de gel y el volumen de la porcin gelatinosa. El volumen por s mismo no posee correlacin positiva con la fertilidad, pero se utiliza para calcular el nmero total de espermatozoides. El examen del color permite observar la presencia de sangre, orina o material purulento en el eyaculado. Concentracin espermtica. El clculo del nmero total de espermatozoides es importante ya que ste es uno de los parmetros ms usados para estimar la fertilidad de un padrillo aunque est sujeto a mltip les factores de variacin, como por ejemplo: estacin del ao, frecuencia de servicios, edad, tamao testicular, etc.14

Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010El nmero total de espermatozoides se obtiene por la multiplicacin de la concentracin espermtica por el volumen de la porcin libre de gel del semen. La concentracin puede calcularse mediante un espectrofotmetro o por hemocitometra utilizando una cm ara hemocitomtrica.

Retcula del espectrofotmetro de Neubauer.

Movilidad espermtica.

La movilidad espermtica refleja la viabilidad de un eyaculado. Por lo general se realiza la estimacin visual de la movilidad colocando una gota de semen puro entre porta y cubre objetos y observando sobre platina trmica a 37 C con microscopio ptico. Aunque la estimacin es bastante subjetiva, el personal experimentado puede realizar un anlisis muy aceptable de la movilidad progresiva. Es interesante c omparar y registrar el porcentaje de movilidad progresiva de la muestra sin diluir y luego del agregado de diluyente. La supervivencia del eyaculado puede evaluarse manteniendo el mismo a una temperatura entre 20 -25 C con y sin agregado de diluyente y observar como vara la movilidad progresiva en funcin del tiempo. Tambin puede almacenarse una alcuota de semen diluido a una temperatura entre 4 -5 C; generalmente el agregado de diluyente puede preservar la muestra entre 24 -.48 horas (semen refrigerado).

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Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010Morfologa espermtica.

Para la evaluacin de la morfologa espermtica se realizan extendidos sobre un porta objetos y se dejan secar al aire. Existen distintas tinciones para realizar sobre estos extendidos: Casarett, Wrights, May Grunwald-Giemsa, hematoxilina-eosina, nigrosina, Diff-Quick, etc. Permiten visualizar no slo clulas espermticas sino tambin clulas germinales inmaduras y somticas. Las anormalidades espermticas pueden clasificarse segn el origen de cada una de ellas en: a) primarias: originadas durante el proceso de espermatognesis, es decir son de origen testicular; b) secundarias: originadas en cualquier sitio del sistema de tbulos que transportan los espermatozoides; c) terciarias: originadas por manipulacin incorrecta del sem en luego de la recoleccin. El nmero total de espermatozoides morfolgicamente normales en un eyaculado puede proporcionar ms informacin y correlacin respecto de la fertilidad de un padrillo que el porcentaje o el nmero absoluto de espermatozoides morfolgicamente anormales. PRESERVACION DE SEMEN. El uso de diluyentes (extender) est ampliamente difundido ya que permite la preservacin de la muestra varias horas antes de la inseminacin sin afectar significativamente su capacidad fertilizante. Es im portante tener en cuenta que el xito del mtodo depende de la calidad inicial de la muestra. Los diluyentes pueden agregarse al eyaculado libre de gel, previamente templado a 37 C. Los componentes del diluyente proveen al semen substratos metabolizables, pH y presin osmtica adecuada, compuestos que lo protegen contra el shock fro y antibitico s que reducen la proliferacin bacteriana (penicilina G 1000 -1500 UI/ml; estreptomicina 1000-1500 g/ml, gentamicina 100 -1000 g/ml, polimixina B 200-1000 UI/ml, ticarcilina 100-1000 g/ml o amicacina 100-1000 g/ml). A continuacin daremos las frmulas de dos de los diluyentes ms utilizados.

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Dil e te e Ke e I Leche descremada.......................................2,4 g Gl cosa..............................................................................4,9 g Penicilina G cristalina........................................................150000 UI Estreptomicina cristalina....................................................150000 g Agua destilada c.s.p...........................................................100 ml Diluyente de Kenney II Leche descremada.........................................2,4 g Glucosa................................................................................4,9 g Sul ato de Gentamicina.......................................................100 mg 8,4 % NaHCO ....................................................................2 ml Agua destilada ....................................................................92 ml Para evitar el deterioro rpido de la viabilidad espermtica, es conveniente una vez diluida la muestra mantenerla a temperatura (20-22 C hasta el momento de la inseminaci n. El diluyente debe proveer un pH compatible con el semen, entre 6.6 y 7.4 preferentemente ligeramente cido (6.6-6.8).

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Con el objeto de preservar la muestra por un perodo de tiempo mayor, alrededor de 24-48 horas, se puede refrigerar el semen diluido, manteni ndolo a 5 C, mediante una curva de enfriamiento que consiste en la disminuci n de la temperatura de la muestra a razn de 0.3 C por minuto. La muestra diluida debe tener una concentracin de 50 millones de espermatozoides por mililitro. Este proceso reduce la actividad metablica, retardando los cambios que llevan al envejecimiento de los espermatozoides (ageing). El semen as refrigerado no necesita ser pre calentado antes de la inseminacin.17

Produccin Equina Inseminacin Artificial 2010El transporte de semen refrigerado se ha simplificado significativamente gracias al desarrollo de un container comnmente llamado Equitainer (Hamilton-Thorn Researchs, Danvers M.A.). Este termo ha sido diseado para realizar una curva lenta de disminucin de la temperatura que logra 4 5 C en 20-24 horas con una duracin mxima de 48 horas. Los pasos a seguir para refrigerar una muestra de semen son los siguientes: a. Recoleccin del eyaculado. b. Filtracin para eliminar la porcin gelatinosa. c. Evaluacin macroscpica del eyaculado (Volumen) d. Evaluacin microscpica del eyaculado (en especial de la movilidad progresiva). e. Recuento en cmara. f. Dilucin del semen con el diluyente. g. Evaluacin microscpica de la movilidad pos dilucin. h. Envasado y refrigeracin.Clculo de la dilucin: para que la concentracin final de espermatozoides en el semen sea de 50 millones por mililitro, se debe calcular primero el factor de dilucin. Este se calcula dividiendo la concentracin espermtica (en millones/ml) por 50 millones/ml.

La preservacin de semen mediante refrigeracin esta siendo cada vez ms usada debido a que puede implementarse un programa de inseminacin artificial an cuando el padrillo se encuentra a distancia considerable de las hembras a inseminar. Es importante tener en cuenta qu e la inseminacin se realiza a la misma temperatura del Equitainer, no se debe pre- calentar la muestra. Con el objeto de determinar qu cantidad de semen diluido habr que depositar en el tero de la hembra, debemos recordar que una dosis inseminante segura es de alrededor de 1000 espermatozoides con movilidad progresiva (dosis inseminante standard: 500 espermatozoides con movilidad progresiva).

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ConclusinLa Inseminacin Artificial en la Yegua es menos difundida que la del ganado vacuno, existen particularidades en este mtodo, que la diferencia de la tcnica en bovinos, fundamentalmente en la conservacin y fertilidad del semen. En el quino los espermatozoides son ms sensibles al congelado y descongelado, la proporcin de espermatozoides vivos es menor en el eyaculado, entre otras diferencias. Tambin cabe mencionar que se puede utilizar la sincronizacin de celo, asi evitando el stress sexual de la yegua. En lneas generales el manejo del semen equino tiene muchas similitudes con el manejo de ste en otras especies. En Europa la utilizacin de este mtodo, es cada vez ms amplia, ya sea para mejorar los patrones reciales segn la utilizacin, como tambin para que un padrillo de buenas condiciones deje mas descendencia, y con buenos resultados. La desventaja en nuestro medio se centra en la falta de especializacin en la reproduccin equina.

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Bibliografay Revista ALBEITAR I.A. - Publicacin para Veterinarios y Tcnicos del Sector de Animales de Produccin N 119 ctubre 2008/ www.albeitar.asisvet.com y Reproduccin e Inseminacin Artificial de los animales domsticos, E.S.E. Hafez.

y ERG MIX, www.ergomix.com/ Agricultura y Ganadera online. y WIKIPEDIA, Articulo www.wikipedia.com.

Inseminacin

Artificial.

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NDICEIntroduccin. 2

Que es la Inseminacin Artificial? Ventajas

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Sincronizacin del celo en la Yegua.

6

Manejo en la Inseminacin 7

Tecnica de la inseminacin 9

Recoleccin del semen Equino..

11

Evaluacin del Semen. 14

Preservacin del semen 16

Conclusin. 19

Bibliografa.. 20

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i.a. equina

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