Universidade Federal da BahiaInstituto de Ciências da Saúde

Classificação dos Animais de

Laboratório quanto ao Status

Sanitário

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Introdução

• Confiabilidade dos resultados de uma pesquisa...

Uniformidade do grupo animal

Menor variabilidade individual e dos resultados

Menos indivíduos para alcançar a exatidão científica

2

GenéticaSanitária

Status sanitário

• Relação dos animais com o seu ambiente

• Organismos associados aos animais

• Organismos presentes dentro dos limites do ambiente físico e barreiras sanitárias

• Barreiras sanitárias eficientes -menores as chances de contaminação dos animais

• Microbiota / Microbioma

Classificação em três grupos

1. Animais Convencionais2. Animais Gnotobióticos3. Animais Livres de Germes

Patogênicos Específicos (SpecificPathogen Free – SPF)

Comportamento altera o microbioma• Alterações da aquisição e manutenção da microbiota

(Ezenwa et al, 2012)

• Alterações no acasalamento, alimentação e níveis de ansiedade

Microbioma altera o comportamento

Vias de comunicação entre

microbiota e cérebro

• Cortisol

• Citocinas

• Triptofano

• Ácidos graxos de cadeia curta

(Cryan & Dinan, 2012)

Regulação da síntese de corticosteronapelo intestino

• Glicocorticóides

• Sistema imune inato (TLR)

• Regulação de genes associados ao ritmo circadiano

• Alterações circadianas e comportamentais

Relação microbiota-saúde-doença

(Cryan & Dinan, 2012)

Transferência de microbiota

• Adoção do padrão ponderal do animal doador no animal receptor

ANIMAIS GNOTOBIÓTICOS• GNOTOBIÓTICO – palavra de origem grega (gnoto = conhecer + biota = vida)

• DEFINIÇÃO: são animais que possuem microbiota associada definida ou conhecida (ausente ou indetectável)

• Classificados em germfree (GF) ou Flora Definida (FD).

• Devem ser criados em ambientes dotados de barreiras sanitárias absolutas

• Produção - manutenção em equipamentos isoladores

• Diferentes materiais - aço inox, plástico rígido, acrílico, fibra de vidro

• Trexler e Reynolds (1957) - isolador flexível e transparente, que facilita a manipulação

Isoladores

GERMFREE (GF)

• DEFINIÇÃO: são animais totalmente livres de microbiota, isto é, isentos de quaisquer parasitas internos e externos, bactérias, fungos, protozoários, algas, richetsia e vírus

• Axênicos - animais livres de vida associada

• Espécies GF - ratos, camundongos, cobaias, coelhos, galinhas, porcos, peixes, macacos, carneiros e cães

• OBTENÇÃO: método primário é a intervenção cirúrgica

• Histerectomia estéril do útero gravídico 24 h pré-parto

• Barreira placentária + controle das matrizes

• Ama-de-leite ou amamentação manual

FLORA DEFINIDA (FD)• DEFINIÇÃO: são animais GF que foram intencionalmente contaminados

com microrganismos ou parasitos específicos

• Continuamente monitorados para constatar a presença dos organismos selecionados e a ausência de outros

• Monoxênico - contaminado com apenas um tipo de microbiota

• Dixênico - dois tipos de microbiota

• Polixênico - vários microbiota

• OBTENÇÃO: o primeiro passo para a obtenção de animais de FD é obter-se animais GF

• Método – transferência para outro isolador, alimentação saturada com microorganismos específicos, amamentação, contato com a cama

• Confirmação por teste laboratorial

Animais livres de patógenos específicos (SPF)

• Specific Pathogen Free – SPF

• DEFINIÇÃO: são animais livres de microrganismos e parasitos específicos, porém não necessariamente livres de outros não-específicos

• Heteroxênicos - não apresentam microbiota capaz de lhes determinar doenças (albergam somente microorganismos não-patogênicos)

• OBTENÇÃO: animais SPF são obtidos e mantidos livres de contaminantes específicos

• Condições opostas dos animais FD, intencionalmente expostos a contaminantes específicos

Ambientes protegidos por barreiras sanitárias rigorosasNão necessitam ser estéreis (isoladores)!

ANIMAIS CONVENCIONAIS• DEFINIÇÃO: são animais que possuem microbiota indefinida por serem

mantidos em ambiente desprovido de barreiras sanitárias rigorosas

• Criação - princípios básicos de higiene

• Limpeza e desinfecção do ambiente e material utilizado

• Troca de uniforme (avental) para o trabalho com os animais

• Aqueles que não são germfree, Flora Definida ou SPF, são arbitrariamente chamados de Convencionais

• Animais que não são espontaneamente infectados por alguns microorganismos patogênicos

• Animais infectados com todos os microorganismos

• Procedência dos animais

• Últimos 30 anos