7/21/2019 Journal of Medical Genetics Volume 32 Issue 9 1995 [Doi 10.1136%2Fjmg.32.9.759] Harris, A. -- Cell Biology- A La…

http://slidepdf.com/reader/full/journal-of-medical-genetics-volume-32-issue-9-1995-doi-1011362fjmg329759 1/2

B o o k r e v i e w s

BOOK

REVIEWS

I f

you w i s h t o

o r d e r or

r e q u i r e f u r t h e r

i n -

f o r n a t i o n

r e g a r d i n g

t h e t i t l e s

r e v i e w e d

h e r e

p l e a s e

w r i t e t o

or t e l e p h o n e

t h e

BMJ B o o k -

s h o p , PO

Box

2 9 5 ,

London

WC1H 9 J R .

T e l

0 1 7 1 3 8 3 6 2 4 4 .

F a x 0 1 7 1

3 8 3

6 6 6 2 . B o o k s

ar e

s u p p l i e d

post

f r e e i n

t h e

UK

a n d

f o r

BFPO

a d d r e s s e s . O v e r s e a s

customers

s h o u l d

a d d

15

f o r

postage

a n d p a c k i n g . P a y m e n t

c a n

b e

made b y c h e q u e

i n s t e r l i n g

d r a w n on

a UK b a n k

or

b y

c r e d i t c a r d

  M a s t e r c a r d ,

Visa

or

A m e r i c a n E x p r e s s ) s t a t i n g

c a r d num

b e r

e x p i r y d a t e a n d f u l l name

T h e p r i c e

a n d a v a i l a b i l i t y

ar e

o c c a si o na l l y s u bj e c t

t o

r e v i s i o n

b y

t h e P u b l i s h e r s .

C e l l

B i o l o g y : a

L a b o r a t o r y Handbook.

E d i t o r J

E

C e l i s .   P p 1 1 1 6 ;

£ 8 0 . 0 0 . ) S a n

D i e g o :

A c a d e m i c

P r e s s .

1 9 9 5 . ISBN

0 1 2 1 6 4 7 1 4 5 .

T h e r e

i s

no

d o u b t when

l o o k i n g

a t

t h i s h a n d -

book t h a t i t i s

i n s p i r e d b y

t h e

p o p u l a r

t h r e e

v o l u m e

tome

on

m o l e c u l a r

c l o n i n g

com

m o n l y r e f e r r e d t o

as t h e m o l e c u l a r

b i o l o g i s t s

b i b l e .

I

w a n t e d t h i s t o

b e

a

g o o d

book as

c e l l

b i o l o g y

o f t e n

appears

t o

b e

t h e poor

r e l a t i o n

o f m o l e c u l a r

b i o l o g y

a t l e a s t i n terms

o f t he

a v a i l a b i l i t y

o f

t e c h n i q u e s

b o o k s .

The

h a n d b o o k

i s

d i v i d e d i n t o t h r e e

v o l -

umes Volume

1

s t a r t s

w i t h

c h a p t e r s

on t i s s u e

c u l t u r e a n d

a s s o c i a t e d

t e c h n i q u e s

w i t h an

i n t r o d u c t i o n

on

g e n e r a l m e t h o d s , a n d

d e -

t e c t i o n o f c o n t a m i n a t i o n i n

c e l l

c u l t u r e s .

The

next

s e c t i o n

a d d r e s s e s

p r i m a r y c u l t u r e s

f r o m

e m b r y o n i c

t i s s u e

f o l l o w e d

b y

a

s u b s t a n t i a l

one

on s p e c i f i c c e l l c u l t u r e

t y p e s

i n c l u d i n g

k e r a t i n o c y t e s

h e p a t o c y t e s , type

I I

p u l m o n a r y

e p i t h e l i a l c e l l s

f i b r o b l a s t s CNS

s te m

c e l l s

e n d o t h e l i a l c e l l s

a n d

h a e m o p o e t i c

c e l l s

t o

name

b u t

a

f e w .

Though

t h e r e

ar e

un

d o u b t e d l y many

e x c e l l e n t c o n t r i b u t i o n s

i n

t h i s

s e c t i o n

t h e r e

appears

t o b e

q u i t e

an

amoun t

o f v a r i a t i o n

i n

t h e

d e p t h

o f

coverage

p r o v i d e d b y

e a c h a u t h o r .

H o w e v e r ,

t h e gen-

e r a l l a y o u t w o r k s w e l l

w i t h

 n i n t r o d u c t i o n

t o t h e

o r i g i n

o f t h e

c e l l s

d e t a i l e d

m e t h o d s

o f

i s o l a t i o n a n d c u l t u r e f o l l o w e d

b y

a s e c t i o n on

p i t f a l l s

o f t h a t p a r t i c u l a r

c e l l

c u l t u r e system.

A l l s e c t i o n s h a v e u s e f u l

t o x i c i t y

i n f o r m a t i o n

on

t h e

p a r t i c u l a r

c h e m i c a l s

b e i n g

u s e d . Th e

next

t o p i c a d d r e s s e s

c e l l

s e p a r a t i o n

t e c h -

n i q u e s , p a r t i c u l a r

f l o w

cytometry a n d

i m -

m u n o m a g n e t i c b e a d m e t h o d s .

A

s u b s e q u e n t

s m a l l

s e c t i o n

on model systems t o s t u d y

d i f f e r e n t i a t i o n

a n d

d i f f e r e n t

l i n e a g e s spe-

c i f i c a l l y

n e u r o n a l a n d

e p i t h e l i a l c e l l s

h a s

very

l i t t l e

b a c k g r o u n d

i n f o r m a t i o n

a n d

one

very

much

g e t s

t h e

i m p r e s s i o n

t h a t

i t

i s m e r e l y

s k i m m i n g

t h e

s u r f a c e o f a very

i m p o r t a n t

area.

I m m o r t a l i s a t i o n o f c e l l s i s

c o v e r e d

n e x t ;

h o w e v e r ,

t h e r e

ar e

m a j o r

o m i s s i o n s as

t h e

c h a p t e r s

o n l y

a d d r e s s

t r a n s g e n i c s u s i n g

S V 4 0 ,

a n d

SV40T a n t i g e n

as

a

t r a n s f o r m i n g

a g e n t .

T h e r e i s

no

m e n t i o n o f

E p s t e i n

B a r r v i r u s

r e t r o v i r u s e s oncogenes

e t c .

There i s q u i t e

a

u s e f u l

s e r i e s o f

c h a p t e r s

on

c e l l

c y c l e a n a l y s i s

u s i n g

f l o w

cytometry

or

c e n t r i f u g a t i o n

a n d

d i s c u s s i o n

o f c e l l

s y n c h r o n i s a t i o n

m e t h o d s .

T h i s

i s f o l l o w e d

b y i m p o r t a n t

i n f o r m a t i o n

on

c y t o t o x i c i t y

a s s a y s .

The

l a s t s e c t i o n o f t h i s

v o l u m e

a d d r e s s e s se ne sce nce t h e

means

t o

c a u s e

i t

a n d t h e

m o r p h o l o g i c a l

c r i t e r i a

on

w h i c h c e l l s

ar e

s a i d t o

b e

s e n e s c e n t . H o w e v e r ,

t h i s

i s

a

very

s t r a n g e

m ix tu r e o f

t o p i c s

t h a t

seem t o

h a v e

b e e n

t a g g e d

on as an

a f t e r -

t h o u g h t .

At

t h i s

p o i n t

t h i s

volume seems t o

l o s e d i r e c t i o n ; t h e r e i s

a s e c t i o n on e l e c -

t r o p h y s i o l o g y

  p a t c h

c l a m p i n g )

t h e n

on

t h r e e

d i m e n s i o n a l h i s t i o c u l t u r e s

a n d i t b e c o m e s

r e a l l y

d i f f i c u l t t o se e

t h e

f r a m e w o r k

o f

or-

g a n i s a t i o n .

The

next s e c t i o n

o f

t h e v o l u m e

a d dr e ss e s o th e r

c e l l

t y p e s ,

i n o t h e r

w o r d s

non-mammalian

ones.

T h e r e

ar e

c h a p t e r s

on

D r o s o p h i l a

c e l l

c u l t u r e

n e m a t o d e

a n d

pro-

tozoan

c u l t u r e a n d

t h e n an e x t r a o r d i n a r i l y

l on g c ha p te r 4 0 p a g e s )

c o m p a r e d

t o t h e

o t h e r s

on

D i c t y o s t e l i u m

w i t h

a

very

d e t a i l e d

i n

d e p t h p r e s e n t a t i o n

o f t h e m o l e c u l a r b i o -

l o g i c a l

t o o l s u s e d t o s t u d y t h i s system.

I n

c o n t r a s t

P h y s a r u m

i s

c o v e r e d i n t h r e e

p a g e s

a n d

p l a n t

c e l l s c u l t u r e

i n

t w o

c h a p t e r s

t o t -

a l l i n g

1 2

pages.

A t t h i s p o i n t one b e g i n s

t o

w o n d e r

a t

t h e e d i t o r i a l p o l i c y

f o r

t h e s e

v o l u m e s . T h e r e i s no d o u b t t h a t t h e r e

ar e

many

e x c e l l e n t

c o n t r i b u t i o n s f r o m a u t h o r s

a t t h e

f o r e f r o n t s o f t h e i r

f i e l d s ;

h o w e v e r ,

i t

ap p ears

t h a t t h e

b r i e f g i v e n

t o

e a c h o f

them

may h a v e b e e n

i n t e r p r e t e d s o m e w h a t d i f f e r -

e n t l y

i n

t h a t t he c h a p te r s

h a v e

very

d i f f e r e n t

f o r m a t s a n d l e v e l

o f i n

d e p t h i n v e s t i g a t i o n .

P a r t 2 o f v o l u m e

1

d e a l s w i t h c u l t u r e

o f

v i r u s e s p r o p a g a t i o n

o f S V 4 0 ,

p o l y o m a ,

a d -

e n o v i r u s

v e c t o r s , p a p i l l o m a

v i r u s

i n s t r a t i f i e d

e p i t h e l i a

a n d

m u r i n e l e u k a e m i a

v i r u s .

I n a

se nse

t h e a d e n o v i r u s vector

c h a p t e r

i s some

w h a t ou t

o f

p l a c e

i n t h a t i t

i s

t h e

o n l y

one

w i t h

an

e x t e n d e d m o l e c u l a r

a n a l y s i s

s e c t i o n .

The f i n a l part

o f v o l u m e 1

d e a l s

w i t h t h e

i s o l a t i o n o f

s p e c i f i c o r g a n e l l e s f r o m

d i f f e r e n t

s p e c i e s :

g o l g i

s t a c k s

c l a t h r i n c o a t e d

v e s i c l e s

RER

f r o m y e a s t , m i to c h o n d ri a , p e r o x i so m e s,

s e c r e t o r y g r a n u l e s ,

a n d s y n a p t i c v e s i c l e s

f r o m

a mammalian

b r a i n . T h i s

p a r t

o f t h e book

i s

very i n f o r m a t i v e a n d g i v e s

p l e n t y o f

i d e a s

t o

tr y

f o r

a n y

p a r t i c u l a r system

u n d e r

a n a l y s i s .

T h e r e ar e t w o c h a p t e r s t h a t

a p p e a r

somewhat

ou t

o f

p l a c e

h e r e i n t h a t

t h e y j u m p

f r o m

o r g a n e l l e

t o

p r o t e i n

i s o l a t i o n .

S u b s e q u e n t

c h a p t e r s

a d d r e s s

t h e

i s o l a t i o n o f

centromeres

y e a s t

s p i n d l e

p o l e s

n u c l e i a n d n u c l e a r mem

b r a n e a s s o c i a t e d

p r o t e i n s .

T h e s e

are f o l l o w e d

b y

c h a p t e r s

on

i s o l a t i o n

o f

c y t o p l a s t s

n u c l e a r

m a t r i x ,

s n R N P s ,

hnRNPs r i b o s o m e s a n d r i -

b o s o m a l

p r o t e i n s

proteasomes

a n d n u c l e a r

e x t r a c t s . The

f i n a l

t wo c h a p t e r s

s e e m i n g l y

t a g g e d

on t h e e n d ar e a

method o f

m a k i n g

DNA

a n d one

f o r

m a k i n g

RNA.

H o w e v e r ,

i t

w o u l d

h a v e

s e e m e d much more

a p p r o p r i a t e

t o

i n c l u d e s e v e r a l d i f f e r e n t m e t h o d s

s o re-

s e a r c h e r s

c o u l d c h o o s e t h e

most

a p p r o p r i a t e

one

f o r

t h e

system

t h e y were a n a l y s i n g .

A

m a j o r

c r i t i c i s m o f t h i s

s e r i e s

i s

t h a t

t h e r e

i s

no

s p e c i f i c

v o l u m e

i n d e x

a n d one

h a s

t o

w a i t

u n t i l

t h e

e n d o f

volume

3

t o h a v e

an y

i n d e x

a t

a l l

Volume 2

p r o v i d e s

t e c h n i c a l

b a c k u p

f o r

g e n e r a l

c e l l

b i o l o g i c a l e x p e r i m e n t s .

The f i r s t

s e c t io n d e a l s

w i t h

m i c r o s c o p y : p h a s e

c o n t r a s t ,

N o m a r s k i ,

d a r k

f i e l d

a n d

i n t e r f e r e n c e

m i c r o -

scopy.

T h e r e

t h e n

f o l l o w s e ct io n s on f l u o r -

escen ce

m i c r o s c o p y

a n d

c o n f o c a l

m i c r o s c o p y

w i t h a

g o o d

s e c t i o n

on

t h e t h e o r y a n d

d i f f e r -

e nce s

i n r e s o l u t i o n

o f

c o n f o c a l r e l a t i v e t o

c o n v e n ti o n a l f l u or e sc e n ce m i c r o s c o p y . A f t e r

t h i s

p o i n t

t h e r e

i s

a g a i n

some

apparent l o s s

o f d i r e c t i o n

i n t h e

o r g a n i s a t i o n

o f

t h i s

volume

w i t h

c h a p t e r s on

v i d e o

e n h a n c e d

m i c r o s c o p y

b e i n g

f o l l o w e d

b y

a n o t h e r

s e c t i o n on

c o n f o c a l

m i c r o s c o p y

i n

l i v i n g

versus

f i x e d c e l l s . The

next

m a j o r

t o p i c

i s t h a t o f e l e c t r o n m i c r o s c o p y

w i t h

m e t h o d s

f o r

f i x i n g s a m p l e s ,

e m b e d d i n g ,

s t a i n i n g

a n d t h e n

more

s p e c i a l i s e d

ap -

p l i c a t i o n s

s u c h as s h a d o w i n g ,

f r e e z e f r a c t u r e

an d

f r e e z e

e t c h i n g

u l t r a - t h i n immuno-

e l e c t r o n

m i c r o s c o p y

a n d

s c a n n i n g

EM. T h e r e

t h e n f o l l o w

m a j o r

s e c t i o n s

on

m i c r o d i s s e c t i o n

t e c h n i q u e s ,

m i c r o m a n i p u l a t i o n

o f c h r o -

mosomes

u s i n g

l a s e r

m i c r o s u r g e r y ,

f o r ex -

a m p l e ,

i n

m i c r o c l o n i n g . On e h a s

t o

w o n d e r

how

many

o f t h e s e t e c h n i q u e s c o u l d

b e

a c q u i r e d

f r o m r e a d i n g a c h a p t e r i n

a

b o o k

s u c h a s

t h i s

a n d h ow ma ny

o f t h e m

w o u l d

a c t u a l l y

b e d e p e n d e n t

on

  h a n d s o n t e a c h -

i n g .

T h e r e

i s

a n a d e q u a t e

h i s t o c h e m i s t r y s e c -

t i o n

a n d

p r e s e n t a t i o n

o f

t h e u s e

o f

s p e c i f i c

s t a i n s f o r t h e

d e t e c t i o n o f

p a r t i c u l a r

e n z y m e s .

Th e n e x t

s e c t i o n

o f

v o l u m e 2 i s p o s s i b l y

t h e

o n e t h a t i s

l e a s t

u s e f u l p a r t i c u l a r l y g i v e n

t h e

a v a i l a b i l i t y

o f

t h e

e x c e l l e n t

l a b o r a t o r y

m a n u a l

o n a n t i b o d i e s b y

H a r l o w a n d L a n e . Th e

a n t i -

b o d y

s e c t i o n

i n t h i s v o l u m e a d d r e s s e s

how t o

g e n e r a t e r a b b i t

p o l y c l o n a l s

a n d mouse mono-

c l o n a l s among

o t h e r

t e c h n i q u e s .

Then

m e t h o d s

f o r p u r i f y i n g

I g G s

a n d

f l u o r e s c e n t

t a g g i n g

o f

a n t i b o d i e s

d e te r mi n a ti o n o f

t h e i r

s p e c i f i c i t y

b y

w e s t e r n

b l o t t i n g

a n d i m -

m u n o p r e c i p i t a t i o n , ECL

E L I S A ,

a n d

m e t h o d s

f o r e s t a b l i s h i n g e p i t o p e s p e c i f i c i t y .

T h i s

i s

f o l l o w e d

b y a

c h a p t e r

o n immuno-

c y t o c h e m i s t r y

a n d

v i t a l s t a i n i n g .

Th e

n e x t

m a j o r s e c t i o n

o f

t h i s

v o l u m e i s

d e v o t e d t o

i n t r a c e l l u l a r

m e a s u r e m e n t s ;

h o w e v e r ,

i t i s n o t

a t

a l l

c l e a r why t h e

t o p i c s

h a v e b e e n c h o s e n

a n d

why

o n l y

t h e s e w e r e c o n si d e re d w o r t h y

o f

i n c l u s i o n . Th e

f i n a l s e c t i o n

i s

on

c y t o g e n e t i c s

a n d

i n

s i t u

h y b r i d i s a t i o n .

T h o u g h

i t

may

b e

t e c h n i c a l l y a d e q u a t e

i t

i s

h i s t o r i c a l l y

i n -

a c c u r a t e ,

t r

a r e

c h a p t e r s

on

c e l l h y b r i d s

m i c r o c e l l s c h r o m o s o m e p a i n t i n g

F I S H ,

RNA

a n d

DNA

i n

s i t u

h y b r i d i s a t i o n .

A g a i n

t h e

l a c k o f a n i n d ex

i n

t h i s

v o l u m e i s a

g r e a t

o m i s s i o n .

V o l u m e 3

s t a r t s

w i t h a s e c t i o n

o n

t r a n s f e r

o f

m i c r o m o l e c u l e s c o v e r i n g

t e c h n i q u e s o f

m i -

c r o i n j e c t i o n

o f

DNA a n d RNA i n t o s o m a t i c

c e l l s

a n d

o o c y t e s , e l e c t r o p o r a t i o n

S e n d a i

v i r u s m e d i a t e d g e n e

t r a n s f e r

a n d

f i n a l l y

l i p o s o m e s .

The

n e x t

s e c ti o n d e a l s w i t h

c l o n i n g o f em -

b r y o s t r a n s g e n i c s

a n d

g e n e

t a r g e t i n g

a n d

h o m o l o g o u s

r e c o m b i n a t i o n

i n

ES

c e l l s . E s -

s e n t i a l l y

i t i s n o t p o s s i b l e

t o d o t h i s

e f f e c t i v e l y

i n o n e

c h a p t e r

f o r

e a c h

t o p i c

a n d

t h e

i n c l u s i o n

o f t h i s

s e c t i o n i s q u e s t i o n a b l e .

C e l l

f r e e

e x -

t r a c t s p e r m e a b i l i s e d

c e l l s y s t e m s ,

a n d

e x -

p r e s s i o n

s y s t e m s

f o r m

t h e

t o p i c s

t o b e

a d d r e s s e d i n

t h e

n e x t s e c t i o n . T h i s

i n c l u d e s

b a c u l o v i r u s

a n d

v a c c i n i a v i r u s e x p r e s s i o n s y s -

t e m s .

H o w e v e r , i t i s g e n e r a l l y

a n i l l a s s o r t e d

c o l l e c t i o n o f

c h a p t e r s .

Th e

f i n a l

3 0 0

p a g e s

o f

v o l u m e 3

i s

o n a n a l y s i s

o f

p r o t e i n s

c o v e r i n g

d e te r mi n a ti on , p r e p a r a ti o n

o f

t a g g e d p r o -

t e i n s

c e l l

s u r f a c e

l a b e l l i n g

a n d t h e n a

m a j o r

s e c t i o n

on

p r o t e i n

e l e c t r o p h o r e s i s c o v e r i n g

a l l

t y p e s

a n d

d i m en s io n s: o n e

a n d

t w o

d i -

m e n s i o n a l

i s o l a t i o n o f p r o t e i n s o v e r l a y a s -

s a y s

s t a i n i n g m e t h o d s ,

m o d i f i c a t i o n

o f

c e l l u l a r p r o t e i n s

a n d

z y m o g r a p h y .

Th e f i n a l

s e c t i o n

a d d r e ss es t h e

u s e

o f

l e c t i n s

m i -

c r o s e q u e n c i n g ,

m a s s s p e c t o m e t r y ,

a n d a m i n o

a c i d

a n a l y s i s .

Th e r e ma i n d e r o f t h i s

v o l u m e

i s

t a k e n

u p

b y

a

l i s t o f

s u p p l i e r s

a n d

t h e l o n g

a w a i t e d

i n d e x .

I n

c o n c l u s i o n

t h o u g h

t h i s

s e r i e s o f v o l u m e s

d o e s

make some

u s e f u l

c o n t r i b u t i o n s a s

a

w h o l e

i t s

o r g a n i s a t i o n

i s n o t

v e ry e as y t o

f o l l o w

a n d

o n e

w o n d e r s

w h e t h e r i t w o u l d

h a v e

b e e n more e f f e c t i v e i f

i t

h a d c h o s e n t o

c o n c e n t r a t e on t h e c e l l

b i o l o g y e n d

o f t h e

s p e c t r u m

r a t h e r

t h a n

a t t e m p t i n g

t o i n c l u d e

a l l r e l a t e d

t e c h n i q u e s .

A f i n a l m a t t e r t h a t

s h o u l d b e a d d r e s s e d

b y

t h e

p u b l i s h e r s

i s t h a t

i n o r d e r t o

b e

an

e f f e c t i v e

l a b o r a t o r y m a n u a l ,

v o l u m e s s u c h

a s

t h i s h a v e t o b e r o b u s t .

T h e

p a p e r

i n

t h i s

s e r i e s o f

v o l u m e s i s

e x c e p t i o n a l l y

t h i n a n d i s

l i k e l y

t o h a v e

a

v e r y

s h or t h a l f

l i f e

i n

t h e n o r m a l w e a r a n d t e a r

o f

a

l a b o r a t o r y .

ANN HARRIS

7 5 9

group.bmj.comon April 21, 2015 - Published by http://jmg.bmj.com/ Downloaded from 

7/21/2019 Journal of Medical Genetics Volume 32 Issue 9 1995 [Doi 10.1136%2Fjmg.32.9.759] Harris, A. -- Cell Biology- A La…

http://slidepdf.com/reader/full/journal-of-medical-genetics-volume-32-issue-9-1995-doi-1011362fjmg329759 2/2

Cell Biology: a Laboratory Handbook

Ann Harris

doi: 10.1136/jmg.32.9.7591995 32: 759J Med Genet

http://jmg.bmj.com/content/32/9/759.citationUpdated information and services can be found at:

These include: 

serviceEmail alerting

box at the top right corner of the online article.Receive free email alerts when new articles cite this article. Sign up in the

Notes

http://group.bmj.com/group/rights-licensing/permissionsTo request permissions go to:

http://journals.bmj.com/cgi/reprintformTo order reprints go to:

http://group.bmj.com/subscribe/To subscribe to BMJ go to:

group.bmj.comon April 21, 2015 - Published by http://jmg.bmj.com/ Downloaded from