Lymphocytes T

Prof. R.DJIDJIK

Laboratoire d’ Immunologie – Faculté de Médecine d’Alger

Laboratoire Central de Biologie Médicale – CHU Béni-Messous- Alger

Email : ourtlane@yahoo.fr

INTRODUCTION

Le système immunitaire est un ensemble d’organe, de cellules et de molécules capable d’interagir en réseau dans le but de protéger l’organisme contre toutes agressions extérieures ou « intérieure » ; il met en jeu deux stratégies :

* Immunité innée (réaction inflammatoire)

- Première ligne de défense contre les micro-organismes. - Immunité conservée entre les espèces.- Doit distinguer entre le SOI et le NON-SOI.- Dépourvue de mémoire immunologique.- Importance majeure dans la stimulation de l’immunité

acquise.

 

* Immunité acquise = spécifique = antigène dépendante :  - Nécessite du temps.

- Spécifique de l’agent causal.- Pourvue de mémoire immunologique.- Coopération cellulaire.

Cellules immunocompétentes

Lymphocyte

Neutrophils Eosinophil

BasophilMonocyte

- from http://medstat.med.utah.edu/WebPath/HEMEHTML/HEME100.html

B- Origine des lymphocytes T :

Au cours de la vie fœtale, ils ont pour origine le foie fœtal puis la Moelle osseuse.

Organe triangulaire bilobéLobules séparés par trabécule

Zone corticale (macrophages, cellules épithéliales et mésenchymateuses) Région sous-capsulaire Cortex superficiel Cortex profond

Région cortico-médullaire (macrophages, cellules dendritiques interdigitées IDC)

Zone médullaire (macrophages, cellules épithéliales, IDC)

Organisation cellulaire du thymus :

Stades de différenciation et maturation des lymphocytes TLymphopoïèse T 

Elle a lieu dans le thymus en dehors de toutes stimulation antigénique elle est irréversible et se caractérise par des étapes de sélection.

Stade 1 : PROTHYMOCYTE = double négatif : CD4- CD8- (CD3-) (CD34+, CD44+, CD117+, tdt+, CD1+)

- Contact avec le stromas thymique- Prolifération active - Expression de nouveaux marqueurs : CD2, CD7,

Stade2 : THYMOCYTE double positif : CD4+ CD8+ (TCR/CD3)+

- Réarrangement des gènes codant pour les chaînes du TCR : 90 a 99% TCRαβ

1 a 10% sont TCRγδ

- Sélection Stade 3 : THYMOCYTE simple positif :

- Perte de l’expression du CD4+ ou CD8+- Augmentation de l’expression du TCR/CD3

CD4+SP

CD8+SP

DPTNprolifération

TCR

sélectionpositive et négative

CD4+CD8+

CD3-CD4-CD8-

prolifération

C- SELECTION INTRATHYMIQUE DES Ly T:

La reconnaissance de l’antigène s’effectue par le biais du TCR , sachant que le réarrangement des gènes du TCR se font d’une façon aléatoire , une série de sélection des lymphocytes T est obligatoire pour éviter toutes réponses du TCR contre les molécules du soi .

100%

5%

a lieu dans la partie corticale , elle consiste a confronter les lymphocytes T au molécule du CMH I et II portées par les cellules épithéliales corticales liaison en même temps de CD4+ CMH II et CD8+ CMH I

03 possibilités :

1.Clones auto réactifs forts : forte liaison du TCR avec le CMH mort par apoptose.

2. Clones non réactifs : pas de reconnaissance des mol du soi  mort par apoptose

3. Clones auto réactifs faible=intermédiaire : liaison faible et réversible lymphocytes T sélectionnés

En parallèle:liaison CD4+ avec CMH II inh de l’expression de CD8+liaison CD8+ avec CMH I inh de l’expression de CD4+

Après cette sélection, seulement 5% des thymocytes sont conservés et migrent vers la médullaire.

1. Sélection positive 

Elle a lieu au niveau de la JCM , Consiste a confronter les lymphocytes T au peptides du soi porté par les mol CMH I ou CMH II des cellules dendritiques et des macrophages Aboutie a :

2. Sélection négative

1. Reconnaissance forte du peptide activation du Thymocytes mort (clone auto réactifs)

2. Pas de reconnaissance du peptide pas d’activation du Thymocyte sélection du T (hétéro réactifs)

Ces étapes de sélection (éducation thymique) établissent la tolérance des T vis avis des structures autologues , et permet la génération d’un répertoire T capable de reconnaître le soi et le tolérer et de rejeter le non soi .Les thymocytes conservés vont quittés le thymus et

rejoignent les OLP.

SÉLECTION DU RÉPERTOIRE

En résumé

lors du développement des lymphocytes T dans le thymus

mort des lymphocytes T ayant un TCR incapable d’interagir avec l les molécules de classe I ou II du CMH

survie des lymphocytes T exprimant un TCR capable d’interagir avec les molécules de classe I ou II du CMH du soi

élimination des lymphocytes T exprimant un TCR auto-réactif

4. Marqueurs Pan- T

CD45RA : exprimé par les T dits naïfs

CD5 : exprimé tôt entre dans la transduction du signal

CD62L , ICAM-1: molécules d’adhésion.

Récepteurs des cytokines:IL-1 RIL-2 R

CD16 (Fcγ RIII) : récepteur aux IgG

CD35=CR1=C3b R

Récepteurs des mitogènes : PHA et concavaline A

CD2 : récepteur des GRM (ligand LFA3)

LT au repos

CD7 

2. CD4

3. CD8

Chaîne polypeptidique de 59 Kd organisée en 04 domaine Ig-like dans la partie extra membranaire. Partie trans. membranaire, la partie intracytoplasmique comporte le site d’interaction avec les PTK

Hétérodimers α β organisé en 01 domaine Ig-like avec dans la partie intracytoplasmique un site d’interaction avec les PTK

1. TCR :Marqueur le plus spécifique, il est présent

sous forme de complexe TCR/CD3

TCR : GENES ET STRUCTURE

STRUCTURE DU TCR

Module de reconnaissance 

Module de transduction du

signal

LE LYMPHOCYTE T

70% des lymphocytes sanguins : 1100 à 1700/µL (adulte)

CD3 : marqueur pant-T utilisé en cytométrie de flux pour numérer les LyT

Chaque LyT porte un TCR unique TCR : 95% association covalente par un pont disulfure de 2 chaînes α et β

<5% association covalente par un pont disulfure de 2 chaînes γ et δ

Cellule support de l’immunité à médiation cellulaire.

Rôle fondamental dans la réponse immunitaire, exercé à 2 niveaux: lors de la reconnaissance de la majorité des Ag exogènes dits

thymodépendants lors de la phase effectrice

R.I. cellulaire vis-à-vis d’agents bactériens ou viraux rejet de greffes rejet de tumeurs réactions d’hypersensibilité retardées

Reconnaissance que de fragments d’Ag

LE LYMPHOCYTECellule support de la réponse adaptative

LE LYMPHOCYTE T (suite)

Le TCR ne reconnaît que des fragments d’Ag préalablement dégradés par des CPA capables de les réexprimer à leur surface associés aux molécules « présentoirs » : CMH

Le TCR est comparable à un Fab d’Ig, associé à un complexe multimoléculaire CD3

Mécanismes de recombinaison génétique à l’origine du répertoire T.

Trois principales différences entre BCR et TCR: Capacité de valence : monovalence du TCR, bivalence du BCR Co-récepteurs du TCR

o CD8 pour la reconnaissance des Ag présentés par molécules du CMH classe Io CD4 pour la reconnaissance des Ag présentés par molécules du CMH classe II

Deux sous-populations de LyT : lymphocytes T CD4+ et T CD8+

Selon le profil de cytokines sécrétées, la sous-population T CD4+ se partage en Th1 et Th2

Le TCR ne peut lier que des peptides d’une dizaine d’acides aminés

Le TCR n’existe pas sous forme sécrétée

Les épitopes T sont séquentiels et peuvent être enfouis dans la molécule native

(les épitopes B sont conformationnels exprimés à la surface de la molécule d’Ag)

Hétérodimers α β (02 chaîne polypeptidiques) - Chaque chaîne polypeptidique a un PM 40 a 50 Kda- Chaque chaîne a trois parties 

Les chaînes polypeptidiques constituants le TCR sont codées par un ensemble de segments géniques qui sont localisés sur différents chromosomes et qui sont séparés sur un même chromosome par des centaines de kilo bases . Ces segments sont devisés en 04 groupes : C V J et D

Gène du TCR

    Locus ChromosomesNombres de segments géniques

V D J C

Chaîne α 14 70 60 1

Chaîne β 7 50 2 13 2

Chaîne δ 14 5 3 3 1

Chaîne γ 7 12 5 2

Nombre de spécificités TCR αβ : 10 13 à 10 15

ACTIVATION DES LYMPHOCYTES T

1. Activation des LT CD4+

LT CD4+

CPA

LT CD8+

Cellule cible

2. Activation des LT CD8+

LT activé

3. Marqueurs d’activation des LT

CD25 : récepteur de la chaîne α du récepteur de IL-2

Molécules du CMH classe II

CD40 L: récepteur du CD40 impliqué dans la synthèse et le switch des Ig CD152=CTLA4 qui a pour ligand

CD80 et CD86 but de moduler la réaction d’activation.

CD70 récepteur de la transferrine.

CD49 récepteur pour la laminine collagène.

DIFFERENCIATION DES LYMPHOCYTES T 

EXPLORATION DE L’IMMUNITE CELLULAIRE T

Étude quantitative(nombre de Lymphocytes

circulants)

Étude qualitative

(tests fonctionnels)

Lymphoctes = 20-30% (1500 – 4000/ml) des leucocytes du sang

Lymphopénie : < 1500/ ml

Lyphocytose : >5000/ ml

Pool corporel : 1012 (adulte)

Quelques valeurs à retenir !

Quantification des lymphocytes circulants

Utilisation des anticorps monoclonaux fluorescents