La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico.

La separación puede realizarse sobre la superficie hidratada de un soporte sólido (p. ej., electroforesis en papel o en acetato de celulosa), o bien a través de una matriz porosa (electroforesis en gel), o bien en disolución (electroforesis libre). Dependiendo de la técnica que se use, la separación obedece en distinta medida a la carga eléctrica de las moléculas y a su masa.

Prueba de fenotipificacion. La prueba de fenotipificacion determinan el

tipo y no la cantidad de AAT en la sangre.

Para realizar la fenotipificación, se coloca una pequeña cantidad de sangre o plasma en una fina capa de un gel especial. El truco de esta prueba está en que el gel contiene "amofilinas" o moléculas que modifican la acidez (pH) del gel cuando son expuestas a una corriente eléctrica . De esta forma, cuando la corriente pasa a través del gel, ocurre un cambio sutil en el pH de un extremo al otro del gel.

Cuando la muestra de sangre que contiene AAT es añadida al gel, la corriente eléctrica mueve cada molécula de AAT hacia una u otra dirección en el gel, dependiendo de la carga neta de la molécula.

Si las moléculas son de carga positiva se mueven en una dirección, carga negativa en otro dirección y si son negativas no se mueven.

Las moléculas se mueven hasta su punto isoeléctrico luego se le agrega un tinte que colorea las proteínas de la AAT y eso da la ubicación de la concentración de la misma.

El ultimo paso es la observación del gel.

Los azucares presentes en la AAT dificultan la interpretación de los resultados.

¿Por qué es importante la fenotipificacion?

La fenotipificación es una prueba completamente diferente a la que mide los niveles de AAT en su sangre. Esta prueba añade una medida adicional de certeza al diagnóstico de Alfa-1. Esta prueba es indispensable para identificar a los portadores de genes AAT deficientes quienes podrían presentar niveles normales de AAT

La prueba de Elisa es sencilla y confiable y permite detectar el VIH en la sangre de personas portadoras

El examen de ELISA es una de las pruebas más eficaces para detectar el virus del VIH.

Se realiza en las enzimas y su nombre viene del término inglés "Enzyme-linked immunosorbent assay", que quiere decir “ensayo inmonoenzimático ligado a enzimas".

Este estudio es muy rápido, efectivo y confiable y sus resultados son tratados con toda la confidencialidad que el paciente requiere.

También se puede detectar el virus por medio de otro análisis, llamado por “aglutinación” y se realiza también por medio de la toma de una muestra de sangre.

Otras pruebas de laboratorio para confirmar la presencia de anticuerpos del VIH, incluyen la inmunoelectrotransferencia o examen de Western Blot, la inmunofluorescencia y la radioinmnoprecipitación o RIPA.

La reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en inglés (Polymerase Chain Reaction), es una técnica de biología molecular descrita en 1986 por Kary Mullis, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original, o molde.

Esta técnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que, tras la amplificación, resulta mucho más fácil identificar con una muy alta probabilidad virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas (cadáveres) o hacer investigación científica sobre el ADN amplificado. Estos usos derivados de la amplificación han hecho que se convierta en una técnica muy extendida, con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo.

INMUNOPRECIPITACION

1. Se solubilizan proteínas celulares con detergentes

2. Se usa un anticuerpo especifico para precipitar una proteína,

3. Se lava y así se la separa de las otras sustancias.

4. Se libera el antígeno por cambio de pH que reduce la afinidad de la unión Ab-Ag.

Estudios de coinmunoprecipitación +western. Estudio de complejos moleculares.