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OgtAo-_ IIINISTEIUO DE SLUD iexclJ- ~+t)-prA-l~ INSTITUTO NACIONAL E SAIXrgt

1] CENTRO NACIONAL DE LABORATORIOS DE SALUD PUBLICA

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO PARA EL

DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO

Red Nacional de Laboratorios de Salud

lntildelMINISTERIODE SALUD

SERIE DE NORMAS TECNICAS ~o 24

Lima Dicicmhrc 1997

copy Ministerio de Salud INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Jr Caacutepac Yupanqui 1400 Jesuacutes Mariacutea Telf 471-3254 I Fax 471-7441

Lima Peruacute 1997

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO PARA EL DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO

COMITE DE REDACCION [)ro C(cilla MoroacuteI Cortijo lM Mariacutea R(w MWloz Zalllbrclllo Dra MyriwlI Yoacutesuda Espilloza

COMITE EDITOR DI Alfonso Zavaleta Martiacutenez- UIIgas Dr Ceacutesar Cabezas Suacutewiexclez [)iexcl Carlos Carriacutello Hundiacute [)r Jaime Chal1g Neyra

MINISTERIO DE SALUD ALTA DIRECCION Dr Marino Costa Bauer Ministro

Dr Alejandro Aguinaga Recuenco Viceministro

INSTITUTO NACIONAL DE SAWD Dr Carlos Carrillo Parodi Jefe

CENTRO NACIONAL DE LABORATORIOS DE SAWD PUBLICA Dr Ceacutesar Cabezas Saacutenchez Director General

PERFIL IgtE LOSAlITORES

Dra Cecilia Moraacutel Cortijo A4hll( Cirljallo EICiIacute(Ii11I (1 1101111 l lulOraout (finlo)

Jefi de la DjiexclisIacutelin di Irluogi( iexcl 011 (H1nl ( IIIi-iexcl Nucilllllll de I(Iiexclo(oliol

de Sallld Puacuteblica INS M 11

TA Mariacutea Elela MilfOZ ZWIbralIJ TeClloacutelogo MhJic( Jivisiril1 de Patoogiacuteli r flogiacutell Cliacutellic( (111110 NIImwl le 1lIholuoios de SlIllId Puacutehlim INS M INSA DO(Cllte fuacutecultad de l(cll(I(J~i MeacutediCO Unil(sid((I Nllci()wl Muyo de SlIn M(co

Dra 1l1yrilllll Yllsllda EspiJww Meacutedico Cimiw() ESI(CIacuteuumliS((f (11 Pologiacutea Cliacutellic( lef( de LahomtoIacuteo de Patologiacutea Cliacutenica DIacuteIIacuteSioacuten de Paologiacutea r Pwlogiacuteo CliacutelliUl Ccllfm Naciol1 de L(Jomtorio de Sallld Ptiacutehliu IN) M INSA

PERFlIJ DE LOS EDITORES

Dr Alfonso Zavlllela Jlartine- Farga~

ivleacutedico Cirujano Joco en Fallwcologiacutea Director General Cellro N(cional de COiltrol de Calidad INS tlfINSA Pr(~fesor Principal Seccioacuten FOllUlcologiacutea Departamel1to Acadeacutemico de Cicncias Fisioloacutegicas Focllltad de Ciencia r Filoof( Ul1iversidad FenWlll C(ewlo Heredi( Miemlmi lllstitllto de Medicina Tropic(l1 Alewndc Vclll HIlIllIJOI Uniiexclersidad Pellllla Cayetano Heredia

Dr Ceacutesar Cabezas Saacutellchez kleacutedico Cirujano Masa en ivlediciacutena Especialista en Enferllledades Infecciosas Tropicales Director General Centro NaclOl1al de I~abllrat()ri()s de Salud Pliacuteblica INS MINSA Profesor invitado de Medicina Tropical Universidad Nacional Maror de Sal1 Marcos Unilersidad Peruana larefano Heredia

Dr Carlos Carrillo Parodi Meacutedico Cirujano Doctor en ll4edicina Profesor Principal Departamcnto Acadeacutemico de Microbiologiacutea Focultad de Ciellcias r Filosofiacutea Universidad Peruano Cayewno Heredia Jefe Instituto Nacional de Sollld

Dr Jaime Chang Neyra Meacutedico Cirujano Masa (iScience in (OI1lIll11llilY Health in Jelelopillg Countries Director Ejecutivo de Certificacioacuten v Garantiacutea de la Calidad Celltro Nacional de COlltrol de Calidad Instituto Nacional de Salud llINSA InvestigadO Instituto de lHedicillo Tropical Alexander Von HlIlI1bolt Universidad Peruana Cayetallo Heredia

La edicioacuten de este Manual se efectuoacute en el marco del Convenio de Cooperacioacuten suscrito entre el Instituto Nacional de Salud y la Universidad Peruana Cayetano Heredia El Comiteacute Editor agradece al Dr Jorge Barnaby Rodriacuteguez por la revisioacuten y los comentarios efectuashydos a esta obra

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CAPITULO XII (Anexos) ltlt) Anexo l Fijadures 61

Anexo lt Solicitud ue Examen Histopatoloacutegico Xl

Anexo 2 Coloraciones Rulinarias oacute3 Anexo 3 Coloraciones Especiales 67 Anexo 4 Soluciones en lnmunohisloquiacutemica 79

PRESENTACION

[os meacutetodos histopatoloacutegicos continuacutean siendo herramientas i mportantcs para el diagnoacutestico de enlcrmcdades transmisihles y no transmisihles

Gracias al desarrollo de nuevas teacutecnicas sc ha incrementado la capacidad ue uetectar la presencia en las llluestras ue dilcrentes tejidos de agentes patoacutegenos ue antiacutegenos y anticuerpos y uc cambios en los tejidos y sus componentes Enshytre las iexcliacutereas en las que el avance ha sido maacutes signiricativo podemos mencionar como ejemplo a la inmunohistoquiacuternica

Para el mejor aprovechamiento de eslas herramientas diagnoacutesticas se reshyquiere de la obtenei6n y preparacioacuten adecuadas de las llluestras antes de su exashymen Por esto con el objeto de contribuir a mejorar la calidad del diagnoacutestico histopaloloacutegico en los laboratorios de los servicios de salud el Instituto Nacioshynal de Salud pone a disposici6n de la comunidad teacutecnico cientiacutefica nacional el Manual de Procedimientos de Laboratorio para el Diagnoacutestico Histopatoloacutegico que esperamos constituya una herramienta de consulta baacutesica en la Red Nacioshynal de Laboratorios de Salud

EL COMITE EDITOR

7

SECTOR SALUD

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

bull No J~)))J~

RESOLUCION JEFATURAL

Llmiexcliexcl 1 iexclle d199

CONSIDERANDO

Que el Instituto Nacional de Salud a traveacutes de su Centro Nacional de Laboratorios de Salud Puacuteblica ha formulado el manual normativo relativo eacutel los procedimientos de laboratorio para el diagnoacutesttco Hlstopatolo9CQ

Que en lal virtud resull~ necesario aprub~H y difundir dicha manual para su utilizacioacuten y observancia

De conformidad con 10 dispuesto en el Reglamento de OrganizaCioacuten y FunCiones dellNS aprobado por RM Ndeg 178-95-SAlDM y

Estando a lo acordado

SE RESUELVE

Artiacuteculo 1- Aprobar la publicaclon del documento -Manual de Procedimientos de Laboratorio para el Diagnostico Hlstopatoloacuteglco~ perteneciente a la Serie de Normas Teacutecnicas del Instituto Nacional de Salud

Articulo 2deg~ Disponer la Impresi6n y dlstnbucI6n del documento a que se refiere el numeral anterior

~ )cllIr~i-- Regiacutestrese- cmnunlqueseiexcl

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DR CARLOS CARRIllO PAROJI I ~ r F

IIIS111UlO rACIl)hAl U~ SAlUJ

9

CAPITULO I

INTRODUCCION

La teacutecnica rara el diagnuacutestico histopatoluacutegic(J comprcnuc la IreparaciltIacute11 de lo~ tejidos para su estudio microscoacutepico ~()ll1etieacutenuolos a una serie de rrocesos lijacilm deshidrataciH1 aclaramiento inclusiiexcliacuten corte y tillci(JIl

Ellllanual estaacute elahorado con una arroXilllICiiexcllll ~il11ple y praacutectica ue tal manera que su conteniuo sea faacutecilmente accesible al personal que lahora en Iahoratorios de Patologiacutea

El principal objetivo del manual es unifonniiexclar la metodologiacutea empicada en el procesamiento del tejido desde que la mueslra es enviada al Laboratorio de Patologiacutea hasta obtener el producto rinal en la mesa del pat6logo

Esperamos asimismo que sirva de una guiacutea base que rueda ser enriquecida en el liempo con nuevos aportes

El manual eslaacute dividido en las siguiellles secciones

Bioseguridad Fundamental en el mancjo y funcio1lamienlD de todo laboramiddot torio Sentildealaremos los principales ractorcs de riesgo ocupacional en eiexcllaboshyratorio ue Patologiacutea y c(Iacutemo contrarrestarlos de la mejor mancra

Procesamiento de la muestra desde su obtencioacuten hasta la tiacutencioacuten

Diagnoacutestico citoloacutegico seraacute abordado en forma hrcvc

Secciones especiales Coloraciones especiales e inmu1lohistoquiacutemica

11

CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD

Bjoslguridad es el conjunto de metlitlas prevel1lias miacutenimas para proteger la salutl y seguritlatl del personal que u-ahaja en el lahoratorio frente a direrentes riesgos hioloacutegicos

21 FACTORES DE RIESGO OCUPACIONAL

Estos se pueden agrupar en varias calegoriacuteas

211 Fiacutesicos

Mecaacutenicos Cuchillas de microacutetomo rotatorio criostato Teacutermicos Esturas mecheros Radiacioacuten Microscopio de luz ultravioleta

212 Quiacutemicos

Coloran les Estas sustancias por la naturaleza de su estructura son loacutexicas e irritantes para los ojos sistema respiratorio y piel algushynas de ellas pueden ser explosivas y otras son potencialmente canshyceriacutegenas Ejemplo Hematoxilina Acido piacutecrico etc Reactivos

a) Acidos Los accidentes maacutes frecuentes son las proyecciones de aacutecidos sobre las manos ojos y cara

b) Akalis En forma s(iexcllida o en solucioacuten Ejemplo Hidroacutexido de sodio

c) Solventes orgaacutenicos Xilol potencialmente canceriacutegeno Eler proshyduce depresioacuten del sistema nervioso

d) Gaseosos Formol (solucioacuten saturada dc gas formal dehiacutedo en agua aproximadmrente 40 de gas en peso) es irrilante para las fosas nasales y puede provocar dermatitis

213 Bioloacutegicos

- Paraacutesitos - Bacterias - Virus - Hongos

13

- IllsLdau)lle rldliexcliexcl de 11 IlhlIacutelncliacuten ~ DIacuteSCI10 inadecuado dd 1 ah()r~lllli()

Venlilaci(lll inadccuada

22 PROGRAiIA DE SEGURIDAD

La scguriJaJ es rUlldul1lllltalell el 1ll1Ilejo y rUllliol1amienl() de toJo lahoshyratorio El personal de lahoratorio elche e-tar consciente sohre lo ries()s presentes y conoCr cuacutem) hacerles rrente

221 Consideraciones ~cneralcs

Un amhienle confortahle ) selIro provee una sensaci(iacuten Jc seguridad y reJtlee la aprehcllsiuacuten rc~peCI() eacutel la manipulaci(iacuten de espeacutecimencs reactivos o equipos Todo el personal dehe estar consciente de los riesgos y saber como prevenirlos Para incrementar el conocimilcnto y la experiencia al respecto e~ necesario contar eon

al Malilla de Pmccdillliclltos o)(ratills donde consten todas las funciones del Lahoratorio procedimientos equipos y proJuctos quiacutemicos dcntro de cada lahoratorio

h) Mallftal de Seglllidad Dehe cuhrir requerimientos de slguridaJ CS[1cciacuteficos y dircctivas para cada unidad del lahoratOlo Es resshyponsahiliacutedad de la Jefatura del Departamento el manejo sin riesgo Jc un Laboratorio y elaboracioacuten Jc eacuteste manual

c) Elltrelwl1iellto CI Segllridad El tencr los dos manuales previ()~ no va a evitar los accidentes Inrormaciones quc sean actualizashydas relevantes dchen dc darse perioacutedicamente asimismo dchcn acompantildear la introduccioacuten de nuevos procedimientos quiacutemicos rcactivos o agcntes infecciosos

Se dehen programar (al menos anualmente) capacitaciones a los trashyhajadores en temas como resucitacioacuten cardiopulmonar y primeros auxilios

222 Consideraciones sobre el factor de riesgo quiacutemico

Los factorcs de riesgo quiacutemico pueJen Jisminuir teniendo en cuenta las siguientes medidas generales Je prevencioacuten

a) Uso de sentildeales de peligro y roacutetulos Todos los reactivos deben

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c[dr r(llllldll(l~ cntildetleacutellHl(l la 11rc~dLlll(iacutelk lt1 ILI1CI In cucnta bl ElnllllO de r(lpa lieacute l)rolcccl(lll (iexcluallll IllllnlolC IlIiexclLI1dik~ pro

tc~I(lICS laciak (l giexcliIa pmtlclOla y 1l1iexclIClrilLI c I lLlI1cjo de llllllllico lt pl(lcn hb rcupill1[e quc IOl1tilIlCI1 lIuiacuteshy

luicos peligroso el1 su sitio y mltlntellLT el ltIacuterca de trabajo organishylada y limpia Esto rcduciruuml lil~ dcrull1ls iexclllUdcllales y roturas Con sustancia peligrosas C0l110 el xillL cvitar el contacto dinxlo en ID posihle usar pinas para introducir 1ltIacutelllinltls en el xilol

d) Almacenaje de inflamahles Se relOll1ielll1u que los reactivos illshynamahles sean colocauos en 1osiacuteciacutellll riexclIacuteli Imente accesihle y lo maacutes cercano al piso

el Eliminacillll de quiacutemiclls EII115todll de eliminacioacuten (incineraciuacuten dilucioacuten eliminacioacuten por el sistema de drenaje autoclave) depenshyde dcllipo de quiacutemico y sus crecililJcillnes

223 Consideraciones sobre el factor de riesgo bioloacutegico

Todas las muestras son polel1lialmente lI1Jcccio-as y es prudente por tanto manejar estos materiales e11 forma tal que permita reducir razonahlemente la exposiciuacuten del personal a los patoacutegenos

a) Implementos de protecciliacuten - Todo el personal que manipula muestras fijadas dehe usar manshy

dil y guantes Usar guantes dobles proteclores faiales o gafas y mascarilla aquello que manipulan (l diacute~l~can (~peciacutel1lenes no fijados

h) Manejo de especiacutemenes Los espeacutecimenes dehen ser colocado en recipientes a prueba de denames o en bolsas plltIacuteslicas seguras Si el recipiente prishymario estaacute contaminado por fuera debe colllcarse en un eonteshylIedor ~ecundario seguro allles de transportarlo al laboratorio La hoja de solicitud de examen dehe mantenerse no contaminashyda si ocurriera debe ser dccarlada y reemplazada

Los tejidos dehen ser lijadogt lo mltIacutes pronto posihle Si se va ti

retener especiacutemenes no lIjados dehen ser colocados en bolsas pluacutestica dohles y guardarlo en el refrigerador y rotulados como malerial peligroso Los extendidos vaginales il11prolJta~ y extendidos de luidos corshyporales deben consilkrarsc ontamlllado~ hasla que sean fijashydos (lUIl alclhlll clllTicllIl () lIllI 1lIllCiacute1l de alcohol-eacutetcr) (l

ltU quc alt lCI11dlh IlliacutelllltUlh ln lel IUacutelllin1 - Lth Iluidh l(lrp(lldc~ lhltldos ltlrl preparar lllllldiu(ls (l hllll

ecll SO]] llnll1adalllellte peligrosos Micl1lraS se dceanlan o fralcionall gran ceacutellllidad de fluidos Sl debe lIar tlohk par de glllllles Illll1llilol1lS y l1[(llccl(J lacial Si el riesgo de dispcrshySillJl de gOla e tilo realiar el procedimicllto cn cahina dc Slshy

guridad hittlgieltl para contencr cualquier fluido uacuteispcrsado

c) [)escol1tami naci(iacuten

- La mesa de uabajo uacuteebe scr lavauacutea con uacuteetergenle enjuagar con agua limpiar con lela remojada cn lejiacutea al IOLk () I x u otro germiciuacutea y finalmente enjuagar con agua

- Lavar el i Ilslrulllcnlal con detergenle enjuagar con agua y uacutecsconlaminar C(lll lejiacutea al 106 II olro genniciuacutea Una exposishyci(JIl uacutee lO minulos es suficiente

- Toda la rofla e il1lfllemenlos uacuteescartahles conlaminados dehen colocarse en recipiente de seguridad para ser auloclavauacuteos anshyles de su eliminacioacuten Si es ropa toallas reusahles dehen coloshycarse en bolsas plaacuteslicas y enviarlas a la lavanderiacutea de la Instilushycioacuten

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CAPITULO III

OBTENCION DE LA MUESTRA

El e~tlldi() anatolllopaloliacuteIacutegico se lleva H caho ell 11l1lestra~ ohtenidas p)r hiopsia espcLIacutemenes quiruacutergicos o l~pcciacutemenes de necropsias (post morlemj

La hiopsia es un rraglllento de tejido que se extrae de UI1 ltIacuterea representativa de una lesioacuten y que nos hrinua informacioacuten histoloacutegica para el diagnoacutestico Puede ser ohtenida de cualquier oacutergano mediante diversos procedimiacutecntos muchos de ellos realizados uacutenicalllente por personll meacutedico especializado como endoscopiacuteas hroncoseopiacuteas legrados uterinos elc

La hiopsia de piel es la de I11ltIacuteS fuacutecil acceso pudiacuteenJo ser realillja por personal parmneacuteJico asimismo la toma de muestras post-mortem

31 BIOPSIA DE PIEL

311 Teacutecnica para la toma de muestra

Las teacutecnicas miacutes comLlnes para la (lhteneicin de muestras de piel son sacahocado (punch) hiopsia por excisiacute(iexcln y hiopsia por incisioacuten Lo primero es realizar una huena asepsia y anestesia cualquiera que sea la teacutecnica a emplear

En lo posihle de he seleccionarse un ltIacuterea sana y otra con la lesioacuten Una vez seleccionada la lesioacuten () el aacuterca a ser hiopsiada se realiza la asepsia con agua y jahoacuten eguiJo de un antiseacutepLIacuteco Se aisla la zona eon gasas esteacuteriles (campos) Se infiltra eon anesteacutesico

rnmediatamenle despueacutes de ohtenida la muestra debe ser colocada en un fijador para evitar que se seque () que se inicie el proceso de degraJacioacuten de I tejido (auloacutelisis l

312 Biopsia por sacabocado (punch)

El sacahocado es un instrumento que consta de un mango ei liacutendrIacuteco que tiene en uno Je sus extre11O ulla cuchilla Circular eon un diaacutemeshy

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Iro rijo - 111111lt11 ll _aGIlGldu clln Iih dedo IIllI iCl Illedi() y pll1ieacutelL prc

siollar lirlllelllllllc llIKIlJicularIllClllc a la cpiJlIl11is ) girar secllencialmcnll cn c mismo senlido y sentido cOlllrario a las mashyIlecillas oc rdol hata (lhtlllcr la prolundidad deeada Rcli rar el sacahocado Con ulla aguja hip()deacutennica se cngancha y tracciona hacia arriha la biopsia ciliacutendrica scccionuacutendola en su porcioacuten maacutes inferior con histuriacute o tijera Colocar la hiopsia ell el IIjador INMEDIATAMENTE

- Presionar la herida con gasa por 5 minutos para controlar el sangrado - Dejar la herida cuhierta con venda adhesiva () apoacutesitos

313 Biopsia por Excisioacuten

Es la reseccioacuten de toda la csiltIacuten para el estudio analomopatoloacutegico Estaacute indIacuteLada cuando la lesiltIacuten es bien delimitada y mide menos de I cm de diaacutemetro Ia incisioacuten quiruacutergica se realiza con hoja de histuriacute Debe incluir un margen de piel sana Se hace un corte perpendicular a la epidermis El eje mayor de la hiopsia dehe seguir el sentido de los pliegues cutaacuteneos Inmediatamente se coloca la hiopsia en lijado La sutura se realiza con seda o nylon 40 oacute 50

314 Biopsia por Incisioacuten

Es la reseccioacuten de una parte de la lesioacuten Se realiza cuando la lesioacuten es de gran tamantildeo Con una hoja de bisturiacute se realiza la incisioacuten en forma de cuntildea o fusiforme perpendicular a la epidermis Inmediatashymente se coloca la biopsia en el tijador La sutura se realiza con seda o nylon 40 Oacute 50

32 ESPECIMENES POST MORTEM

Es necesario que se obtenga lo maacutes pronto posihle despueacutes del fallecimienshyto pero si es inevitable el retraso el cadaacutever dehe ser colocado en refrigerashycioacuten (a 4deg C) Las muestrasposf mortem pueden dar informacioacuten al patoacutelogo hasta 12 horas despueacutes del fallecimiento pero cuanto menos tiempo transshycurra el diagnoacutestico scraacute maacutes confiahle

Como ilustracioacuten nos referiremos a la teacutecnica de la Incisioacuten para ohtencioacuten

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tIlt kjid IJlI~iacuteiC(l)IIII()I(II

Con UIl hltllrJ () ucll1IL ClITiClliL 1IIClI illltl~i~lll lhlicua dc apruxilllalLIshyIlllllle 7 elll paniLlldo de LI Illlla llldi1 llciiacuteClI Ir lkrccha lkhalo Jel nhortle costal y C(llllilluanJo lJalieacutel lhaJ( a la lkredla Lucgo pmrundishyIar la IllciacutesiltIacuten hasta clc(lnlrar el hiacuteado

A cOlllinuaciuacutell sujetar el hiacutegado l(lll pil1a~ y realiar UIl corte para obtcshy111 fragmcntos dc JxJCIn aproximldamcnlc

Para lijar los fragmenlos hay que iexcliexcldelgaIrlo y estos prekriblemente no dehen ser mayores de 5 111m de grosor

Coloear en fijador (formol al lViexcl) Si la Illuestra va eacutel ser procesaJu por teacutecnicas inlllullohistoquiacutemilas Jehe ulilidrse rormolneutro

)9

CAPITULO IV

FIJACION y ENVIO DE MUESTRAS

En cuanto se extirpa un tejido del organismo u ~e priva de su irrigacilIacuten eacuteste empieza a descomponerse lo ellal es una consecuencia de la ralta de oxiacutegeno y Illclahulitos csenciales de la aculllulaciuacuten de CO y otros productos delmetaboshylisll10 celular y de la accioacuten de diversas cnzimis falltoacutelisis) Para preservar d estado natural de los tejidos es indispensahle detener cuanto antes estos proccshysos de descomposicioacuten Para este propuacutesito dehe colocarsc el tejido en un volushymen adecuado de una solucioacuten fijadora lo muacutes pronto posible despueacutes de la extirpacioacuten

41 FIJACION

Es el proceso medianle el cual los elementos constitutivos de los tejidos son fijados en cuanto a su estado fiacutesico y parcialmente tambieacuten en su estado 4uiacutemieo de manera que puedan resistir el tratamiento sucesivo con varios reactivos sin distorsiuacuten importante de sus estructuras o descomposicioacuten En condiciones ideales un rijador dehe penetrar raacutepidamente al tejido su acshycioacuten debe ser inmediata y dehe causar una peacuterdida y alteracioacuten quiacutemica y fiacutesica miacutenima de las ceacutelulas y sus componentes

La mayoriacutea de lijadores producen cierto endurecimiento tisular facilitando asiacute el corte pero generalmente este erecto endurecedor es reforzado por la accioacuten de alcoholes que son empicados durante el proceso de deshidratashycioacuten (ver Capiacutetulo V) Los fijadores tamhieacuten aumentan por lo general la diferenciacioacuten oacuteptica de las estructuras tisulares y reducen el riesgo de infeccioacuten en las personas que manejan los tejidos

411 Principios Generales de Fijacioacuten de las llucstras

a) Cantidad de Fijador Debe ser aproximadamente 10 eacutel lO veces el volumen de la muesshytra asiacute por ejemplo

Muestra de 05 ( 05 cm 6 a JO mI

ll1cslra de 05 I cm 1() a li mi ~

21

h) Dchcll colocarc ell ruscos prdcrelltel11clllC dc pbiacutesticu dc huca lo suliclclltclllellll ancha para quc el tejido pucda ser cxtraiacutedo del Irasco sin difilLiltad Una Ve que el tejido estaacute riacutejado se endurece y si el Irasco es muy pequentildeo en relacioacuten al volumen dc la muesshytra surgen dificultades al intentar extraerlo del frasco

e) El rijador cmpleallo rutinariamcnte cn Patologiacutea es el forlllo al OCk cn soluciuacuten acuosa o en sol uei(lIl acuosa tamponada (formol neutro) (ver Anexo l pero ex isten otros que mencionarel11os para su conocimiento Fijodo de Zm( Es un rijador de sales mercuriales Tienden a mejorar la tinci(lI1 de nuacuteclcos y el tejido conjuntivo Preserva meshyjor los detalles para fotografiacuteas FUado de BOllil Es un Iljador derivado del aacutecido piacutecrico Es uno de los mejores lijadorcs para el estudio del glucoacutegeno y que pcneshytra niacutepidamcllle al tejillo

d) Tiempo de Fijacioacuten Variacutea seguacuten el fijador que se utilice y el tamashyntildeo de la muestra Con el lijador de uso comuacuten el formol al 1)(c

las biopsias pequentildeas pueuacuteen tomar 6 horas aproximadamentc cn fijarse Las muestras granuacutecs toman aproximadamente 24 horas Se pucden dejar en el liacutequido lijador por maacutes tiempo pero si los tejidos van a ser sometidos a procedimientos especiales como InmunohistoquIacutemiea requieren iuacuteealmentc un ticmpo de lijacioacuten maacuteximo de 24 horas (Ver Capiacutetulo X)

42 ENVIO DE MUESTRAS

Todos los espeacutecimenes para examen histopaloloacutegieo deben ser remitidos con su ficha de enviacuteo de muestra correctamente IIcnaJa (ver Anexo 5) El recipiente conteniemlo la biopsia debe ser rotulado claramente con el nomshybre del paciente la naturaleza JeI espeacutecimen (hiacutegado pulmoacuten cte) El recipiente se tapa hermeacuteticamenle se sella con esparadrapo y se coloca en una caja de cartoacuten protegiendo el frasco para evitar roturas si es de vidrio rellenar con papeL espuma plaacutestica No necesita refrigeracioacuten Las muesshytras deben remitirse en frascos con lijador (ver 41 l

22

SOIl criacutelerio~ plld reLhltlllr lllld muestra pMa lmiddot~tuui(1 1I1aloIl10-patDtlginl - Recipiellte uel e~peacuteLimen in rotular - DIscrepancia enlre 1 Ilcha ue Illiacuteo JI muestra) Ll niacutelulo ckl ILcipicnte - InaueclIatla () inslIllciel1lc informacHiacuten en la ficha de enviacuteo de muestra - Inadecuado enIacuteo

Fig la Mlcrofolllgrarra de lejido hepaacutelico con severos cambios 3utolflicos por mala fijacioacuten lo que impide el diagnoacutestico 4OOX

Figlb MicrofolOgrafiacutea de tejido hepaacutetico con buena fijacioacuten Caso de Hepashytitis Viral aguda 400X

23

CAPITULO V

DESHIDRATACION ACLARAMIENTO E INshyCLUSION

51 MANEJO AlJTOMATlCO DE LOS TEJIDOS

En la actualidad el proceso ue deshidratacioacuten aclaramiento y la preparashycioacuten para la inclusioacuten de los tejidos se llevan a caho con alguno de los aparatos automaacuteticos de que se dispone en el mercado Se trata en general de un huso central giratorio que lleva en el extremo del hrazo horizontal una canastilla Un sistema de relojeriacutea eleacutectriacuteco hace girar una tarjeta circushylar con muescas en cuya circunferencia se uesliza un diente equilibrado por un resorte El nuacutemero de muescas o perforaciones es de acuerdo al esquema de tiempo deseado Cuando el diente cae dentro de una muesca echa a andar un motor que eleva el huso central el cual por efecto de un tomillo fijo gira automaacuteticamente y la canastilla haja en la solucioacuten

Un pequentildeo movimiento vertical repetido del hrazo lateral que eleva la cashynastilla agita continuamente eacutesta dentro de la solucioacuten Finalmente dos recipientes o vasos metaacutelicos contienen la parafina que se mantiene a una temperatura constante de aproximadamente 56deg C por efecto de termostashytos dentro de las paredes de los recipientes (Fig 2a)

Existen tamhieacuten en el mercado proccsadores automaacuteticos con reloj digital sistema qlft reemplaza la tarjeta circular con muescas descrita anteriormenshyLe (Fig 2h)

52 ~ESQUEMAS DE TIEMPO PARA LA DESHIDRATACION ACLAshyRAMIENTO E INCLUSION EN PARAFINA

El tejido (biopsia o pieza quiruacutergica) a ser procesado es descrito en sus caracteriacutesticas macroscoacutepicas por el meacutedico patoacutelogo luego de lo cual proshycede a tomar cortes representativos de la lesioacuten y lo introduce en caacutepsulas o canastillas metaacutelicas para que a continuacioacuten sea sometido al proceso de deshidratacioacuten aclaramiento e inclusioacuten

25

~ig 2a Procesador AulomaacutetIacuteco de tejidos Realiza los procedimientos de fijashycioacuten deshidratacioacuten aclaramiento e impregnacioacuten en parafina en forma auto matizada

Jig 2b Procesador aUlOlmiacutetico dc tejidos modelo digilal

lltldCll(1~ dar el i2uillllL ICl11llo Lit 11l Llilllllleacutel (le- 12 llora ~1l1(()I11iexcl(iashydo

Alcohol etiacutelico cOITicn(c Iina Alcohol etiacutelico corriente hora Alcohol etiacutelico corriente hora Alcohol etiacutelico ahsoluto hora Acohol etiacutelico ahsoluto hora Alcohol etiacutelico ahsoluto hora Xilol hora Xilol hora Xilol hora Parafina hora Paralina ) horas

Este procesamiento de (ejidos tamhieacuten sc puede rcaliacutenr el1 rorma manual Un esquema acortado que nos da resultados aceptahles en el meacutetodo mashynual es

Acohol etiacutelieu corriente 45 a 60 111 inutos A cohol etiacute ico corriente 45 eacutel 60 minutos Alcohol etiacutelico corriente 45 a 60 minutos Alcohol etiacutelico ahsoluto 45 a 60 millutps Alcohol etiacute ico ahsoluto 45 eacutel 60 mi 1111 tos Alcohol etiacutelico ahsoluto 45 eacutel 60 mi Ilulos Xilol 45 eacutel 60 mi nulos Xiacutelol 45 a 60 In inulos Pararina 45 el 60 minutos Parafina 45 a (iexclO minulos

En el tercer alcohol absoluto se puede interrumpiacuter el procedimiento y dejar los tejidos en eacutel hasta el diacutea siguicllll Lo resultados con el meacutetodo mashynualllo son tan 6ptilllPs C01110 L()11 el quiacute[)() lUtomaliacutezadu sohre lodo por la ralla delll1ovimiento vertical que agJta contl1UalllLlIte las sustancias quiacuteshymicas y los tejidos Pero realiacuteando seccione~ finas de los tejidos y proceshysando pocos tejidos por ve 1 (ejemplo 4 secciones de 2x I cm en un frasco con I no mL de alcohol) sl puede parcialmente suhsanar la falta de Ull

equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION

- Los tejidos contienell grandes cantidades lk agua que dehe ser eliminada

27

- La deshiurataliiacuten ~l iexclir~1 1IcIn uti liiexclalHJlI dclIholls de mellur lt1 Illa(lf c()llcetltraciuacutell Jo l~ aUlIleFlhle el iexcliexcliexclSO directo del tejido del r(l 1Il](l I al alcoJolco1eelltrado yd que pr()(lGI distursitiacuten del tejidtJ

Los alcohocs dehen el renovados dependiendo de la rrecuencia de liSO y de la cantidad de idus introducidos en ellos se descarta el primer recishypiente de acohul y el ~egund(l queda como primero en eltiacuteltimo se Lolushyca de nuevo akohol ahsolutu

- El volulllen dI aItoho I debecr aproximadamente I () veces el volul11en del tejido a de~hidratar

54 ACLARAMIENTO (Dcsalcoholizacioacuten)

Permite que el alcohol Je los kjidos sea reemplalado por un liacutequido que disuelva la pararina eon la cual el tejido va eacutel ser impregnado AdemiexclIacutes muchas de eacutestas sustalK ias tienen la propiedad de v(llver transparentes los tejidos Tamhieacuten se utilita para la desalcoholitaciuacuten de los cortes tefiacuteidus antes de montarlos en Baacutelsamo de CanadiexclIacute o Pennount 1I otro

El solvente de parafina miexclIacutes usado es el Xilol - El volumen miacutenimo debe ser 10 veces el volumen del tejido - Nunca debe dejarse los tejidos en Xilol maacutes de 3 horas si no es difiacutecil

hacer los cortc~ - Cuando la deshidrataci()11 no es completa el xiloltoma un aspecto lechoshy

so cuando se le antildeade el tejido Otros agentes aclarantes son Tolueno Cloroformo Aceite de cedro enshytre otros

55 INCLUSIOacuteN

Comprende la impregnacioacuten de [os tejidos con un medio que llene todas las cavidades naturales y que proporcione la consistencia tinne necesaria para hacer cortes bien delgados sin provocar distorsioacuten

La inclusioacuten cn paratina es la miexclIacutes usada y miexclIacutes simple - Un sustituto de la parafina es el Paraplast (combinacioacuten de parafina con

poliacutemeros pliexclIacutesticus)

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LI OIUlllll del 1llLt111 tk iacutelllllILlcIPII dh l1 t[riacutellllddlll~IlIC~)

cl Illltl(ll l[t1l cl [111Illl dcllclll

551 lloldcs pum Bloques

Son de vlrios tiacutejlPS

a) L lk inelusHiacuten (iexcl)IIsiste tll do prOcl ell forllla de L de mateshyrial pesado I ipo hronee l[ Ul tkClt11l Seacutel 11 sohre una hase Illetaacute IiCl plana

h) Moldes plaacutestico para inclusllIacuten ((jllsilc ell una hase de plaacutestico o de acero inoxidable dentro de cual se incluye la pieza tisular 11Iego se p(llle encima Ull m()lde de plaacutestico que se llena de parashyfina daacutemlok mayor sOj1orleacute al hl(lLJue

e) (cntro de Illclusi()J) Son unidades Jllultifullcionales usualmente elJuipadas eOIl dispensador de parlillla porta espeacutecimenes platishyllo ealiellte para orientar ellspeacuteeimen en la parafina derretida y platillo friacuteu para tranronnar la parafina en un hloque soacutelido desshypueacutes que el espeacutecimen ha sido orientado

552 Teacutecnica

- Se recomienda un punto de fui(1l1 paLl la pararina entre 54 y 58deg C

- Mantener la parafina liacutequida en el recipiente rinal de paralina del procesador automaacutetico el cllal se pas1 a la mesa de trahajo

- Sc coge una caacutepsula metuacutelica quc contielle el tejido procesado Se extrae el tejido de la caacutepsula y se coloca en el molde para hacer hloques llenos con pararina derretida La cara del tejido donde se quieren hacer I()s cortes se coloca hacia ahajo y los tejidos dehen orientarse cuidadosamente para que el plano de corte sea el deseashydo (ver 553 orientacioacuten delespeacutecil1len)

Una ve que I()~ tejidos han -ido incluidos asiacute yen cuanto la parashyfina se solidilicoacute en parte 10- molde se colocan en un recipiente con hielo por 30 minutos (l toda la noche lo cual reduce la tendenshycia de algunas parafinas a cristaliare y pcrmite oh tener bloques de con si stenci a firme y un irlt[me

- Retirar el molde quedando vi hloque ele tejido paralinizado listo para cortar

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553 Orkllluiliacutell del Espcdlll(1l

ElteacuteLllico debe IC ldr 1ll11l1lli(lsallllIlIL caJa lIllO de lo~ fraglllcllto Je tejido lIlaliar ti cslrllcluriexcl decidir niacutemo colocar cltejido l1l el hloque Es por lalllu nlClsarip lelllr 11Il eunucimicnlo huacutesic( dc la estructura listilar Illacrosulpica - lIlalOllliacutea se recomienda siclllpn la eOlllllllieali()l con cI pahllogo

a) Consideraciones generales Las secciones de lcjidl SOIl incluidas pcrleelamente planas para poder obtener llna seccioacuten complela (ver Figura 3 l

Fig 3 Los lejidos dehen ser incluidos perfeclamente planos para obtener una seccioacuten completa

La orientacioacuten dehe ser tal que la resistencia que el tejido ofrece a la cuchilla vaya desde la menor hacia la mayor cantidad conrorme el hloque es seccionado Esto produce secciones maacutes lisas (Ver Figura 4)

-=-~

----~_ ~~

Fig4 La orientacioacuten del tejido en el bloque debe ser lal que la resistencia que ofrece el lejido a la cuchilla vaya d~ la m~nor a la mayor cantidad de tejido

30

1lnllIUriexcl luhuliiexclrc ((lIIlO dcICIlh Imlllpds de hdl1pin

drlcriiexclb lkhcl1 incluir ck lillIlndll tille la lIchilla lorle a lIaeacute

del hllllCll LilllIlllilla ddw (lllill ]1lTJ1clllliutlanl1ellle al eje 111lt1shyVOl 1iL-lluho (Ilr litlIIiexcl ))

eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~

Fig 5 EstntetUnlS tubulares Deben sCr incluidas de lal rorma que la cuchilla atraviese la luz del [ejido

Superficie epitelial Tejidos Ciacutelll superficie epitelial comu picl inshytestino y vesiacutecula dehen colocarse de modo que el plano de secshyciuacuten atravicl todas las capas del tejido La superlicie epitelial debe ir arriba del hloque de lal modo que se corte al final asiacute se minimiza la compresioacuten rasgaduras y cortes en las capas suhcushytaacuteneas (ver Figura 6)

~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-

l_~-JJ1rLJ Fig6 Superlicies epite~lialcsEI plano de ecciuacuten debe atravesar [odas las cashypas del tejido

31

bullbull bull ---

MuacutellqiexclL L~llClIII1llll I iexclchll illpLllsl l~td1 1ldo con L11lcio

CII[I c11()- SI CUIO11I lIllO clllillld del ([ro hil) 1llI)or jl(ihiJl shy

dad quc Li lLjiI( illllllor ditllri()lll 11 sUlwrlm (1 li~ur1 7)

o

I~~----

Fig 7 Muacuteltiple eipeacutecillllI1CS ClltlLlr lacio a lacio y con cicrto l~spacio cntre ellos

Estructuras qUIacutesticas Los quistes disecados tiencn forma de meshydia luna El quistc dche ser incluido con la superficic de cortc haciacutea ahajo de tal forma que la cuchilla corte a traveacutes de todas las capas dc la pared quiacutestica (vcr figura 8)

sectP c-3l l ~~ J Fig S Estructuras (juiacutesticas Dehe incluirse con la superficie de corte hacia ahaiacuteo de lal forma que la cuchilla corte a traveacutes de todas las capas de la pared qUIacuteslica

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CAPITULO VI

CORTE DE LOS TEJIDOS

oacutel ClJCHILLAS DE MICROTOMOS

La selccci(Iacuten Je la cuchilla Jc microacutelomo (tk accro inoxidahle diamante vidrio () cuchilla Jescarlahk) dl1Kmk dc la I-lrullura del espeacutecimen a ser seccionado yel medio usado para la illLlllSiuacuteIl

Cuchillas de acero inoxidable Pariexcl corlar parafina La longilud Je las cuchillas variacutea Jc 110111111 a 250 mll1

- Descartahlcs Excelentes para corte en paralllla Existen Jisponihles cn diversos lanwiiacuteos y grosores El porl~1 cuchillas llcscanahles uehe manleshynerse limpiacuteo y hien luhricado para que la llIchilla esteacute segura

- Diamante () vidrio Para espeacutecimellc inc111iuos en resinas pues tienen fi los maacutes gruesos

62 AFILADO DE LAS CUCHILLAS

Puede hacerse a mano () a maacutequina de acuerdo a proeeuimicntos inlernashycionales recomendauos

621 A mano

Se hace utiliando una uc eacutestas Jos formas

- Con pieum Je afilar Es una picura lutural () superficie uura para alilar un cuchillo u otro intrulllcnlo cllrtantc Utilizan aceite como luhrieantc

- Con placa oc viurio Se usa cun polvo ahra~i o

622 Afiladores automaacuteticos

33

(13 IICROTOlln-

ltJ31 TilloS de minuacutelolllos

- Rotatorlu Flllliiacutes lI~ad( donde l1 hloqlH l 11 lUlVC LIluchilla se uhica cltm c1lil halia lIIih1 (Fig l)iexcl

- De ksliamicllto La llIchitla cs lil que se IllUCVe cs particularshymcnte lItil cuanuu sc lCCiOnHIl gralldcgt hloques (cjemplu corte de pulmtln cnlcnl)

632 Grosor del corte

- El grosor iuacutecal es Ul d 4 micras Esto rcUuce la superposicioacuten uc nuumlclco~

633 Orientacioacuten del hloque

Dehe ser correctamente uhicauo en el micr6tomo para obtener preshyparaciones de la superrkie entera libre de liacuteneas pliegues o distorshysioacuten celular

Fig9 Microacutetomo Rotatorio En este modelo el bloque de tejidos es el que se mueve y la cuchilla estaacute fija

()J SelTiuacuten del hloqul

Anll iexclk igtllmiddotiUllilr ll hloque ldllliniexclrll y estahlcccr C61110 dehe lI

co]oLado en el sllJeladm dc hloqll del l1linuacutet()lllo Una e que el hloquc esui ~lguro ellel qljctad( iniciar clulrtl grul~() avalllando repctidamcnte el hloque miexcllIl11alll1entl ubtenicndo cortcs dctcncrsc cuando la superficie del bloque elltera c~ cgtpucsla Fniriar la cuchishylla y el hloque brevelllente con un cuho de hielo

Luego se procede a hacer cOl1es finos suclsivos que forman una cinshyta de tejido rara lo cual la mtln ija dehe p()ner~e a velocidad lenta Colocar cl corte iino e11 la superricie del haliacuteo de notaeiuacuten

635 Flotacioacuten

El hailo dc rotaciuacuten debe ser calentado a pocos grados hajo el punlo de rusi6n de la paraliacutena El uso de agua desLilada en el hantildeo ayuda a di III i nar burhujas (pucde usarse agua de cantildeo) (er 637)

La cinta de tejido es puesta gradualmente en el hantildeo de notacioacuten para eliminar arrugas y aire atrapado Los corles son luego puestos en laacuteshyminas limpias ya rotuladas con el euacutedigo del tejido Son secadas vershyticalmente en el secador de laacuteminas a temperatura de 37 a 40 C de un diacutea para otro o a 58degC en estura por 20 a 30 minutos

636 Adhesivos para tejidos

El adhesivo maacutes usado es la gelatina Tamhieacuten se utiliza alhuacutemina bovina Se coloca una capa de alhuacutemina sohre la laacutemina en que se recoge el tejido del bantildeo de flotacioacuten

637 Preparacioacuten de agua de cantildeo para el bantildeo de notacioacuten

Aeido clorhiacutedrico al IeJ 200 mL Agua de eantildeo 40000 mL

Agregar lentamente aacutecido al agua Llevar la solucioacuten a ebullicioacuten Enfriar y agregar al bantildeo de notacioacuten conlorme se necesite El hervishydo remueve el CO del agua reduciendo la formacioacuten de burbujas de aire El aacuteeido clorhiacutedrico al Iqiexcl previene la precipitacioacuten de sales minerales que ocurre luego que el CO

2 ha hervido

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(lA DIFICITIAUES EN L IULlZClON DE LOS COIHES

6A1 I)ilicultades IUl provienen de mala lijaduacuten

Bloques hlanul que al cortarse pueden quehrarse por rijaciacute61l iacutellshycompklL

- Bloques duros que pueden hacer vibrar la cuchilla produciendo en el corte liacutel1las paralelas al Ilo de la cuchilla (l dando cortes alternativamente gruesos y linos Esto por fijacioacuten prolongada en tljadores como Zenkcr () Bouin

642 Dificultades que pmvienen de defectuosa deshidnltaciuacuten aclarashymiento o inclusi-in

- Si el tejido ha ido insullcientcmcntc deshidratado el aclarador sc vuelve lechoso El aclaramiento y la impregnacioacuten con parafina no puede completarse resultando un bloque blando Si esto ocurre se puede remediar volviendo a tratar el tejido con alcohol absoluto

- El aclaramiento insullciente hace que el tejido aparezca opaco o nebuloso haciendo muy diliacutecil el corte Si el tejido ya ha sido inshycluido en bloques estos deben ser regresados al bantildeo de parafina hasta que se fundan completamente y pueda regresarse al aclarador para continuar el proceso

- La impregnacioacuten insuficiente puede producir un hloque huacutemedo que tiende a desmoronarse La impregnacioacuten prolongada endurece demasiado el tejido y lo encoge maacutes

643 Dificultades que provienen del tejido

- Para tejidos grasos es mejor hacer cortes maacutes delgados con el bistushyriacute (2 mm)

- Hay ciertos tejidos que suelen endurecerse mucho como el eervix Se obtienen mejores resultados si se reemplaza los agentes deshidratantes y aclaradores por letrahidrofurano

644 Dificultades que provienen de la cuchilla

- Si la cuchilla no se tija bien al microacutetomo puede saltar especialshymente al cortar tejidos duros

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- Si la euehilliexcl ~l lalka JCl1la ilLtl ( LISP 111Iacute dc lo que se ctlrta y puede ser iacutemplslhk ohtener 111 ctlrle

Se producen cortes de grosor irregular pUl mal ajuste del sujetador del bloque

Una cllchi lIa roma 110 puede producir bUellOS corLes Las dentaciones () pequentildeas melladuras en el lilo de la cuchilla rayan o raspan los cortes en la direccioacuten del Illovimientll Si la cuchilla no estaacute bien ari lada puede ser di riacuteci I obtener cintas de [ejido Un borde romo produce dis[orioacuten y compresiiacuteiacuten del corle y aumenta cualquier tenshydencia a formacioacuten de pliegues

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CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON

La linciuacuten de los cortes hislohiacutegIacutecos Ill~r1l1ill estudi11 y cOllocer las caractcshyIiacutestieas liacuteiGIS lk los tejidos y la l-eh~Iacutelllll lltre Id c01ulas que locollstIacutemiddot luyen

Slclcclliacutea generalmClIle ualldo Illel las lk HISIiexcllflCU quiacutemicas denomIacutenashydas eolormtls Los C(ll(lrdllk lIlilIacuteauos Sl 111ledclllliexclsilicar como aacutecido luumlsic()s () neutros L()s LOlllpOIlLllte s de iexcllIS lltjido lJlIL -e liliacutecn iexclaacuteeilmente l()1 colorantes haacuteslloS c knolllinan hasiacutelilos I(lihcn el nomhrc de ltlciduacutefilo aquellos que se ullen a l)hrtnles alidos H aiacutel1Iacute de toluidina y el ltlul de Illetilcno sun cjemplos d- lolorantes hjsicos asiacute como la hcmatoxilina Los componentes maacutes illlportanlls dI los tejidos que naeeioshyIlall con los colorantes hiacuteSICl son las ll11llcoprolcinas y los glllcosalllilloglicanos aacutecidos dchido los grupos iacutecidos ionizahlcs quc COIlshy

liencn Colorantes iacutecidos tak conw el Orallgc e la Eosinil y la Fucsina ~kid1 tillen principalmente los ClJlllj10llcllles haacuteICO de las proteiacutenas cIacute toplasll1aacutet icas

711Tindoacuten con Hematoxilina y Eosina (tI-El

Exislcn lius procldiacutemicnl(lS de HCIllmiddottoxililliexcl que s(ln los maacutes usados

a) Meacutetodo de Barris

Es un meacutetodo rcgrc~ivo pucs ljiexcliacutec Odas las CSlnlllura- (miacutecleo citoplasshyma lejido concctivo ete) y es sctuido PII una (kcoloracioacuten controlada y azukalllicnlO para llegar al ltIacute1timo reultado de tincioacuten nuclear

PnlCcdimientl)

Xilol minutos (2 hallos) - Alcohol ahsoluto minutos

J(l

Akohol COITilllll 1IIIIHlIlt I 1111 i

AiexcllIlt deacute lmiddotiexcl(lll

Helllal(lxilin1 ~ 1lI111111(l~

- AgultI de caiacuteill Alcohol ltlcido I iexcli I (l 2lUlld()~

Agua amoniacal lO ~egllllll() - Agua de cantildeo

Eo~ina 2 ll1inul()~

Alcohol corrienle 5 minullt I~ (d(l haooJ - Alcuhol absoluto 5 l1lilllltlh

- Xilol5 minulos (2 hantildeosiacute

Montaje

Resullados Nuacutecleo azul

Citoplasma rosado-rojo

Otras estructuras lisulares rosado-rojo

b) Meacutelodo de Mayer

Es un meacutetodo progresivo que tintildee soacutelo el nuacutecleo La coloracioacuten prosigue hasla lograr la intensidad Jeseada de coloracioacuten Un mejoramiento del

color azul se logra lavando las laacuteminas en agua de cantildeo

Procedimiento Xilol5 minutos (2 bantildeos)

- Alcohol absolulo 5 minutos

Alcohol corrienle 5 minutos (2 bantildeos)

- Agua de cantildeo - Hematoxilina 15 minulos

- Agua de cantildeo 15 minutos

Agua destilada - Alcohol corriente 2 minutos

- Eosina 2 minutos

Alcohol corriente 2 minulos (2 bantildeos)

- Alcohol absoluto 2 minutos

- Xilol 2 minutos (2 bantildeos)

- Montaje

411

R(slI d(ls NlIacutec ko iexcllIul Citoplasllla rosado-nlj(l Otms tejidos rosadomiddot rojo

72 MONTAJE

El raso final en la preparaciuacuten de una luacutemina Ceacutegt cuhrir la rorciuacuten que contienc el tejido con una laminilla Esto hace a la lamina permanente y permite el examen microscuacutepico Para rijar la laminilla se pueden usar meshydiacuteos de 3 tipos

a) Resinas naturales Baacutelsamo de Canadaacute Fue el estlIacutendar en el pasado pero toma mucho tiempo en secar

h) Resinas sinteacuteticas Actualmente las maacutes usadas Entre ellas tenemos el Permounl Cytoseal ctc

c) Medios acuosos Se usa cuando los colorantes o estructuras son destruishydas o alteradas por deshidratacioacuten o aclaramiento Entre eacutestos tenemos gelatina de glicerina y medio de montaje de alcohol polivinil

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CAPITULO VIII

DIAGNOSTICO CITOLOGICO

La citolofiacutea cxroliativa consiste en cstudiar el fruti dc ceacutelulas descamadas (exroliadas) prineipaltnenLc de zonas Clll10 ccniacutex uterino vagina hronquios

tamhieacuten se aplica a las ceacutelulas de orina LCR y fluidogt cor[1oralcs (peritoncaL pleural pericaacuterdico) Tamhieacuten son liexcliexcliles los rroti~ de material ohtenido por punshyciuacuten y aspiraciltIacuten de cieltos tumores (mama hiacutegado cte

81 FIJACION DEL FROTIS

El mejor fijador es el alcohol-eacuteter voluacutemencs iguales de alcohol etiacutelico corriente y eacuteter) Otros prefieren lIsar alcohol etiacutelico corriente solamente

Se coloca el fijador en un frasco Coplin

- Existen otros lijadores en spray (Cytospray Spraycite)

Como regla general los frolis no ~e deben dejar secar pues se altera la morrologiacutea de las ceacutelulas (degeneran) En cuanto esteacuten listos y mientras esteacuten huacutemedos todaviacutea se ponen en el fijador por 15 minutos

82 lDENTlFICACION DEL FROTIS

Una vez fijado el frotis debe rotularse la laacutemina con el nombre del paciente la naturaleza del frotis y fecha Para ello son ideales las laacuteminas con un extremo despulido en donde se puede escribir con laacutepiz ordinario Si no se cuenta eon ellas adosar con un dip un papel a la laacutemina con estos datos

83 ENVIO DE LAMINAS CON FROTlS

Existen en el mercado fijadores de recubrimiento hajo la forma de

aerosoles Cytosprayreg Spray-cytereg Cyto-tixreg Contienen como fijador alcoholo alcohol-eler mas una pequentildea proporcioacuten de polietileno o propilengl icol como recubridor

Se pueden rijar en un recipiIlIC en la ~igllienle s(11ucioacuten por 30 minutos

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1()O vOIUacutenlllllS de alcollcuumllIacutelo al iexcl51 1(J() VolllIlles de dllcliacutelico y I a 5 voluacutemenes de rmlilclllliloL Allle~ de 1 linciiacuten los rroliacutes dchell pasarse por 2 hantildeos ue alcollOl-eler por 1 a 2 minu[os cada VCI para quilar la cuhierta proleclora de acol](ll uperior rolimerilUuo que pouriacutea conlaminar la hemeacutellox IIi IlL

- Otro meacutelouo de prcparaciuacuten para el enviacuteo ue Illucslras de frolis consisle en fijar el frotis tralar con alcohol ahsoluto y xiloL y montar la laacutemina y dejar secar El lahoratorio que recihe la muestra quila el cubreohjetos remojando la preparaciuacuten en xi 101 toda la noche

84 OBTENCION DE MUESTRAS Y PREPARACION DE FROTIS

841 Ginecoloacutegicas

a) Cervieovaginal Con una espaacutetula se raspa Iigeramenle las paredes laterales del tercio superior de la vagina y el ectoceacutervix con cepillo citoloacutegico el endoceacutervix Extender uniformemente y en frotis delgado sobre la laacutemina Fijar inmediatamente No usar formol

b) Endomctrial Existen dos meacutetodos maacutes usados Aspirado Cepillado endometrial

842 Broncopulmonares

a) Esputo Colectar el espeacutecimen en un recipiente de boca ancha con tapa Los espeacutecimenes se colectan en 3 diacuteas consecutivos preferibleshymente temprano en la mantildeana Instruir al paciente en aclarar primero la garganta y descartar la saliva o secrecioacuten postnasal Luego pedirle que inspire profundashymente y tosa La saliva no sirve para diagnoacutestico Evitar colectar muestra durante o inmediatamente post ingesta La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio o ser refrigerada Si el especiacutemen va a demorar en llegar al laboratorio es preferible

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prcplIlI y el1idr l(lS fnltl liJad(l~ Se Iusca ue prcferelleeia el 1l1allritI lspcchoso COll1( IlstllS sanguinolentos y fragmentos tisularcs Fijar illlllediatamcnte con akohol etiacutelico corriente () con CytosprayQiJ (lljauor de rccuhri III iexclcnlo) J cnviar

h) Muestras obtenidas por hroncllscopIacuteas

Se prepara el fruti s directamente de la superficie de las zonas sosshypechosas y se fijan inmediatamente en alcohol etiacutelico corriente Los lavados y cepillados hronquiales dehcn ser colectados en tushyhos y centrifugados luego preparar los frotIacutes eon los sedimentos sohre un pOftaohjetos tratado con alhuacuteminu Fijar en alcohol etiacutelico corriente inmediatamente

843 Liacutequidos corporales (Derrames) Pleural peritoneal pericaacuterdico sinovial

Es indispensahlc estudiar pronto estos liacutequidos pues las ceacutelulas que contienen degeneran raacutepidamente

Colectar la muestra en un recipiente con tapa y llevar inmediatashymente al laboratorio No es necesario agregar fijador

Si el volumen de la muestra es considerahle dejar sedimentar en el refrigerador por 30 a 60 minutos Sacar y desechar el liacutequido con excepcioacuten de los uacuteltimos 100 a 200 mL que se centrifugan se preparan frotis con los sedimentos en laacuteminas tratadas con albuacuteshymina y se lijan inmediatamente

Si el espeacutecimen va a demorar en llegar al laboratorio es preferible enviar el frotis fijado Centrifugar la muestra y hacer el extendido con el sedimento Fijar inmediatamente en alcohol etiacutelico

844 Exceso de sangre

Se puede destruir los gloacutebulos rojos anlcs de la fijacioacuten antildeadiendo aacutecido aceacutetico concentrado a razoacuten de 2 a 5 mL por 100 mL de muestra

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H5 Tinduacuten iexclId froti~

a) 11j1eacutelni 11lallll l la teacute IllLiexcl In llllpkiexclldiexcl Igtiexcltriexcliexcl la prq)ara~IIlll ic 1Cltlctill (Lr Illl ~ l

Pn lced Illllen[o

Fijador acohol eacutelel l Alcohol corrlcnte I minuto (2 haiacuteiacute(l~ l

Agua de cantildeo Hematoxilina Harriiexcl minutos

Agua de cantildeo Agua amoniacal m egundos

Agua de cantildell Alcohol corriente 1 minuto (2 bantildeo 1

OG6l a 4 minutos

Alcohol comente IllIinllto (2 hantildeos) EA~(l 2 a 4 minutos Alcohol corriente l minuto (2 hantilde()~)

Alcuhol ahsoluto I ll1inu[n (2 hantildeos)

Xilol 1 minuto (2 hariacuteos) Montaje

h) Hematoxilina-Eosina Siguiendo los mismos pasos que para la tincioacuten de tejidos Da resultados satisfactorios para el diagllliacutestico de caacutencer

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CAPITULO IX

COLORACIONES ESPECIALES

91 PARA MICROORGANISIIOS

Las teacutecnicas de coloraciones especiales que demuestran organismos inkcshyciosos en cortes de parafina son dc gran utilidad diagnoacutestica para el patoacutelogo

911 B~lcterias

La mayoriacutea de hacterias son isihlcs en H-E usando el lente de inshymersioacuten

al Bacterias Gram (-) y Gram (+)

Los colorantes utilizados en la teacutecnica de Gram son siempre coloshyrantes haacutesicos que se lijan por un extremo de sus moleacuteculas a las proteiacutenas y por el otro extremo al yodo formaacutendose asiacute un comshyplejo yodo-colorante-proteiacutena En el caso de elementos y microorganismos Grum positivos eacuteste complejo no se disuelve en alcohol

Los pasos huumlsicos involucrados en la mayoriacutea de tinciones Gram son ITincioacuten primaria (Cristal Violeta) Lavar 2Yodo Fija el colorante primario en los organismos Gram (+)

Lavar 3 Decolorar con acetona Los geacutermenes Gram (+) van a retener

su color Lavar 4 Tincioacuten de contraste(Fucsina haacutesica) Lavar 5 Diferenciar con solucioacuten de Gallego Los geacutermenes Gram (-)

van a retener su color Lavar 6 Diferenciar con solucioacuten de aacutec-ido piacutecrico - acetona 7 Usar solucioacuten acctonaxilol y xilol para deshidratar y aclarar

h) Bacterias alcohol uumlcido rc~istentes Se incluyen las Microhactcrias y Nocardiacutea asteroides Se emplea la coloracioacuten de Ziehl-Ncclsen

47

AlgulLh hallnl ~I l( Ji]) cI11 ni (111111 11I)(nUIISI 11 remiddot lalivalllll1ll Lidlull iL Ivlill Ilro dlplll~ de quc lijan un uiexcl() ranle l l(llLn le con I11lLTVClllliacuten del calo re~iacuteslen a la lkcloramiddot eiuacuten 11m uumleido 1sIa Clracllrl~liacuteCI Sl dehe a la pre~ll1lia de Iiexclpldo en la eilruclUl a del m ieromlanilllo

Un prplcdillliacuteelllo general para eacutesta coloracioacuten es el sigllilIllL 1 Postlrior a la (kspalaliniaciuacuten lLiiacuteir CDIl Fucsina Lavar 2 Decolorar Los 0liexcllanis1llos alcohol aacutecido rcsiacutestentes IlHlIltieshy

Ilen su colpr rojo y el hadgrllllld es claro

3 Tillciuacuten contraste COIl ltIul de Illetilcno Nota Si es muy oscuro elcontraslc los organismos no scrltIacuten visihles Una tillcioacuten muy suaL no dellloslrarltIacute adecuadamente 1m compol1ente- lisulares

4 Deshidratar aclarar y montar

912 Hongos

Se utilizan las eoloraciolles de Grocollnitrato de plata metenallllIHI que colorea la pared de lo hongos de negro y de Peryodic Acid SchilT (PAS) que la colorea rojo a puacuterpura

La coloracioacuten de Groco[[ es una tnodificacioacuten del meacutetodo de COlnori con nitrato de plala-metenamina Se di krencia en que Grocoll incuha por una hora los corles cn plata-111etenamina a 60deg C Los grupos aldehiacutedo quedan expuestos por oxidacioacuten con aacutecido croacutemIacutec1 y pueshyden reducir la tnclcnamina-nilrato de plata en soluci6n alcalina La pared del hongo es argiruriacutelica tomando la coloracioacuten negruzca con eacutesta reaccIacutelIacuten

En la coloracioacuten de PAS el ltIacutecido pcryoacutedico (HIO) oxida los dtuacutecashyres que poseen los grupos hidroxilo Iihres apareciendo una roacutermula de tipo dialdehiacutedo Esta foacutermula dehido a la oxidacioacuten de la glucosa por el HIO produce una intensa reaccioacuten con el reactivo de SchilT y lo mismo ()curre con otros azuacutecares como galactosa manosa enlre otros Como regla general la intensidad de la reacci6n es proporcioshy

nal al contenido de eacutestos azuacutecares en la sustancia estudiada

Las caacutepsulas de I(ls hongns contienen mucopolisacaacuteridos neutros que son posilivos al PAS

48

9IJ Paniacutesitos

Los par~iacuteil()S ll1aliricos pUlden cr visto lon (iill11sa )I(IIIIIOCrlis (IIIuil se puede apreciar con Cirocoll

Otros platelmintos - Illl11~iacutet()des pueden crse n)J1 H-E Giel11sa

PASo

92 PARA TEJIDO CONECTIVO

El tejido conectivo estaacute constituido por ceacutelulas rihras extracelulares

inmersas en una sustancia de fonu(l

Ceacutelulas Fihrohlastos adipoeitos mastocltos ellO

Fihras Colaacutegeno claslina rCliculina Colaacutegeno es la fihra predominante yes faacutecilmentc dell10strahlc con coloshyracioacuten H-E La coloracioacuten Trinoacutemica de Masson es uacutetil en diferenciar el colaacutegeno del muacutesculo y otros elementos

- Reticulina es una fihra argiroliacuteliea que se tintildee con solucioacuten de plata

93 PA RA CARBOHIDRATOS

La teacutecnica maacutes usada para la denmstraciuacuten de carhohidralos es el PAS (Peryodic aciacuted Schift)

Para detalles sohre las teacutecnicas de la coloraciones mencionadas (ver anexo

3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA

La creciente popularidad y demanda por la idcnilicaciuacuten inmullohistoquiacutemica de sustancias especiacutericas han ahiert(l una llueva era en la hislopalologiacutea La Inll1l1l1ohistoqllimica es el uso de anticuerpos ~clcccionados precisamente para iden iacute licar (marcar) antiacutegenos especiacuteficos Son ex remadall1enc sensihles y pueshydell lleleclar cantidades muy pequentildea~ de una ~lIstancia

HU ANTIGENOS y ANTICUERPOS

Antiacutegeno es la moleacutecula que cuando se introduce en el cuerpo estimula una respuesta inmune (producci6n de anticuerpos) En Inmunohistoquiacutemica el antiacutegeno es la sustancia que estamos tratando de demostrar

Anticuerpo es una proteiacutena seacuterica (inmulloglobulina) que se produce en respuesta a sustancias especiacuteficas (antiacutegenos) Su propoacutesito es contraatashycar o neutralizar el efecto del antiacutegeno Se produce la unioacuten del antiacutegeno y anticuerpo en combinacioacuten con una enzima que precipita un cromoacutegeno facilitando la visualizacioacuten de la reaccioacuten inmune

102 METODOS

1021 Directo Un marcador visual nuorescente (l enzimaacutetico es quiacutemicamente unido al anticuerpo primario El anticuerpo primario es el anticuerpo que estaacute dirishygido contra el antiacutegeno que queremos demostrar

JO22 Indirecto El mmcador visual se unc a un anticuerpo secundario El tejido es primero expuesto al anticuerpo primario y lucgo al anticuerpo secundario el cual es dirigido contra cl anticuerpo primario y sc uniraacute con eacuteste

J023 Peroxidasa-antiperoxidasa (PAP) Utiliza un anticuerpo primario anticucrpo secundario y un antianticuerpo unido a una cnzima pcroxidasa (Complejo PAP) El anticuerpo secundario es producido en cspecics dilcrcllles del complejo primario y PAP Y el anshyticucrpo primario y el complejo PAI son producidos de la misma especie

51

1024 COlllplljohidina-Biotiacutena 1 IH iexcl

ltiliacutelil un llltiUIlrjlU IlrIllliexclrill lllliculTlU ~LUllldllI() que lmiddot~tUuml qluacutenlllmiddotlttshy

menteacute unido a 11 ilalll1lld BiUIIlllt UIl cUllljllejn deacute la glico(1mlci na AviLlina unida a BI()tilla y pnoxldasa fhidineacutel tlCI1 la hahilidad L1e unirse no inlnllnoloacutegiclI11enle eacutel -+ Ill()lcllda~ de 13iolina lo que determina la n celente sensibilidad de eacutete IllLtJO

HU REACCIONES DEL SUSTRATO

Las enIacutelIlas S011 calaliacutezldiexclres ljUeacute actuacutean sohn un sustrato para acelerar su conversioacuten a UIl produClo La pcroxidasa usada en inlnllnohisloquIacutemica reacciona con pcniacutexido dc hidmgeno en presencia de elcctniacuten donante para Iormar una moleacutecula coloreada La enill1a no se deplcla y puede conlinuar eataliando la rlltlcciiexcliacuten Immundo muchas moleacuteculas coloreashydas

Peroxidasa + HO + Dunildor electroacuten = Moleacutecllla+HO + Peroxidasa coloreada

Ejemplos de uonauore- de electrones son 33 Diaminobeneiuina -33 Diamino hencidina tetrahiurocloruro (DAB) produce un color marniacuten en el producto final y es monlado con meuio resinoso ue montaje -3 Amino 9 elicarhazol (AEC) produce UIl color rojo en el proUllcto final y uehe ser montado con medio acuoso

104 REACTlVIDAD INESPECIliICA

Existen dos fuentes de reactividad inespeciacutelica

- Anticuerpos primarios o secundarios Pueden unirse a elementos tisulares al lamente cargados como tejido conectivo resultando en una reaccioacuten y tincioacuten positiva en sitios distintos al que colltiene el antiacutegeno primario Estos sitios pueuen llenarse previamente a la lindoacuten con proteiacutenas ue sueros no inmunes previniendo la lIniuacuten del anticuerpo secunuario al tejiuo

- Activiuad ue peroxidasa enu(iacutegena La mayoriacutea ue tejidos contienen peroxidasa quc acluacutea de la misma forma que el reactivo de pewxidasa

52

quc l IIIe iexcld llltl~lIlt) 1~Ll iexclIdildld tlllcrlllllllllc e localiiexcliexcliexcl cn jrca l(lIlcllilIHI1 al1dl~ Illiacutelllcnh lk Iula llltuiIlLIS Esto pucdc inhihirc tratando 10 klid()s con 10 1 (11 oluci)1l de Illetanol (10 mI

IU) tI 30 + l)O ll1L IllClltIllol Iululo) por )1 llliacutelllltO previacutel) a la ( i IlC i() 11

IOS FIJACION

El lijador de eccciuacuten es lorJllol Ileutro al 1(JI frcsco (pH 70-76) El tejido dehe ser eX[llllsto al rijador ()Iu el telllpo necesario para ohtener huena prcservaciuacuten y morfologiacutea Eltielllpo iacutedeal de Iljaci(iacuten es menos de 24 horas La sohrclijaciuacuten puede cauar Iormaciuacuten de uniones aldehiacutedo el1 exceso que enmascaran IlIs sitio de uniliacuten Llntigeacutenica y previenell la lllli()1l del anticuerpo primario al antigello Algunos meacutetouos usauos para liberar estos sitios de ulliuacuten son la uigestiliacuten con enzimas proteoliacutetieas (tripsina () pepsina) () sumergiacuter la IUacutelllina COIl eltejiuo en huller citrato y llevar al horno microondas para hcniuo

106 PROCESAMIENTO

Los procedimientos rutinario~ en parafina se adecuacutean a la inmUllohistquIacutemica NO se uehe permitir temperaturas mayores de 60degC pues el exceso de calor pueue uestruir los alltiacutegen(l~ y la morfologiacutea celushylar

JU7 ADHESIVO PARA CORTES

Dehido a los numerosos pasos y constante manipuleo los cortes frecuenshytemente se uesprenden ue la laacutemina Existen para ello adhesivos comershyciales uisponihles Hay que pretratar las laacuteminas con pegamentos como Silane A-174 como sigue

- Colocar la laacutemina llueva IlO maua en Ull soporte ue tineiuacuten - Agitar las laacuteminas en agua jahonosa tibia por algunos minutos - Lavar touo resiuuo ue jahuacuten de las laacuteminas con un chorro de agua de

cantildeo y luego con agua destilada Enjuagar en alcohol etiacutelico ahsoluto y secar al aire Sumergir la porcioacuten de laacutemina a u-dren solucioacuten acuosa resca ue Silane Secar el pegamento de la parte posterIacuteur de la laacutemina con tela limpia

- Secar al aire las laacuteminas y guardarlas ln cajas hasta su uso

5~

108 CORTE (MICROTOlO

Se conan tejido en parlliacutend d -1-5 lllilTa~ lk lspeOI) se p()nen a Ilotdr CIl hailo de agua destilada a 42( Rccoger ClTiacuteOIllS CDIl laacuteminas Imtmtad~h y selar h()ril()nt~dmlntl a 1]( toda la nodlc () puelkn secarsl a (iexcl()Oe por lO minutos COIl cuidado lle l(l SOhIllakntar las Iiacuteminas

109 CONTROLES

Deben procesare tamhieacuten controles jlositi vos (+) y Ilcgativos (-) con cada grupo de liacuteminas durante e proceo uacutee tincilIacutell

Control (-) Suero 11( inmunc normal en lugar de anticuerpo primario

Conlrol (+) Liexclminas que se sahe contienen el antiacutegeno en prueha y que han dauacuteo resultado pllsilivo en el pasado

- La siguiente tahla muestra la~ liminas a ser tentildeiuacuteas solucioacuten eacutel usar y resultados esperado para una prueha vilida

LAMINA SOLliCION RESULTADO

Tejido pacientc Anticuerpo primario )

Tejido pacientc Suero normal NEGATIVO

Positivo conocido Anticuerpo primario POSITIVO

Positivo conocido Suero normal NEGATIVO

1OJO PROCEDIMIENTO Meacutetodo Complejo Avidina-Biotina

Deparafinizar e hiJratar hasU agua destilada Bloquear actividaJ de peroldaa endoacutegena con HO-metanol al Jeacuteic por 30 minutos

- Lavar x 2 en agua desti lada minuto caja vel - Colocar en solucioacuten salina de huffer fosfato (PBS) por 2 minutos - Colocar suero normal de la misma especie en el cual el anlicuerpo

biotinilado es producido por 30 minutos Escurrir pero no enjuagar laacuteshyminas Agregar solucit)J1 de anticuerpo primario por I hora (o incuhaci(JIl toda la noche)

54

I aar ln IBS 11(lr Illiacutelltllil

- fiexclICiexclar plllLiln lk eacuteUlllllIlriexclO hloliacuteni idd(l SlllIIldano pOI 45 milllllos

Lavl con PBS por= lllilHllns

C(lplar la s(llllCiliacuten ABe LIiJin hiolill cOlllpll 1por 45 minutos - Layar con PBS [101 5minulus - Agregar el DAB (soluciiexcllIl sustratOj por lO minutos

Lavar con agua uestilada

Colorear con hcmaloxilina Mayer por= minuto - Lavar en agua de cailo [))r lO mi nulos - Dcshiuralar y aclarar Montar con meuio resinoso

Para preparacioacuten de soluciolles ver Anexo 4

55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA

LmchM (1972) Meacutetodos de Lahoratorio 2da Edicioacuten Nueva Editorial Interamericana SA 1522 puacutegs

NaacutellIira c Guilleacutel1 A Pnlncios R GI(o MGIara H (1995) Mashynual de procedimientos de Lahoratorio para la ohtenciuacuten y enviacuteo de muesshytras (1) (Zavalcta A CaheLas CChavel JEds) Ministerio de Salud Insshytituto Nacional de Salud Centro Nacional de Lahoratorios de Salud puacutehlica Red Nacional de Lahoratorios de Salud puacutehlica Serie de Normas Teacutecnicas N15 Lima Arl Lautrec 98 paacutegs

1 LaJomtoy MetIUds ill HistotecIIulogy (1992) Washington De Armed Forces [nslilute 01 Pathology Washington Oe 274 paacutegs

4 BaunS Alpert LDi Salvo A Faviro M et al( 19(0) Protection of Lahoratory workcrs from Infcctious Discase Transmilted hy hlood hody Iluids and tissuc NCCLS 19 (1) 16 - lO

5 Boume J (1983) Handhook or InlTIunopcroxidasc Staining Methods Santa Barhara Dako Corporation 41 paacutegs

6 Or[aflizaciiacutel MUl1dial de la Sallld (1994) Manual de Bioseguridad en el Lahoratorio 2da Ed Ginehra Organizacioacuten Mundi~1 de la Salud 149 paacutegs

7 Guilleacuten A Bellraacutel M Quispe N Val verde A Zavaeta A (1997) Mashynual de Normas de Bioseguridad (Zavaleta A Cahezas CCarrillo CChang JEds) 2lt1 EUMinisteriacuteo de Salud Instituto Nacional de Salud Centro Nacional de Lahoratorios de Salud Puacutehlica Red Nacional de Laborashytorios de Salud puacutehliacuteca Serie de Normas teacutecnicas Ndeg 18 Lima Art Lautrec 61 paacutegs

57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10

Formak1ehido al 37( 100 Agua 900

mL mL

2 Formol Tamponado

Formaldchido al 37 raquo bullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbullbull 1000 Agua destilada 9000 Fosfato de sodio monobaacutesico (NaHPO) 40 Fosfato de sodio dihaacutesico (Na

2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2

COLORACIONES RUTINARIAS

l Hcmatoxilina dc Ilaycr

11 Reactivos

Alumhre de Amonio () Potasio 500 g Agua uestilada 10000 mL Cristales de hematoxilina 10 g Yodato de Sodio 02 g Acido ciacutetrico 10 g Hidrato uc cloral 500 g

12 Procedimiento

- Disolver la Hematoxilina en agua uestilada agitando fuertemente - Agregar yodato ue sodio para mauurar la solucioacuten

Agregar alumbre de amonio o potasio y agitar hasta disolucioacuten comshypleta Antildeadir tamhieacuten aacutecido cIacutelrico en ese momento

- Antildeadir hidrato de cloral como preservantc

13 Tiempo de conservacioacuten de la solucioacuten a 6 meses

2 Hematoxilina de Harris

21 Reactivos

Hematoxilina 50 g Alcohol eLiacutelico absoluto 500 mL Alumbre de potasio o amonio 1000 g Agua destilada 10000 mL Oxido mercuacuterico (rojo) 25 g Acido aceacutetico glacial 400 mL

22 Procedimiento

- Disolver el alumhre de potasio o dl1lonio en agua destilada calen tanshy

63

do ilfilltllllh l Sl Ikd iI (lIC

- Alladir oltlciacute(lIl (IL I kllleacutelliacutelilld ll1 iexclk(lHll iexclfsolll(() Ikar riacuteI1iacutedashy

mente lhllllici(lll Cuanu(lclll11leceacute a hn ir Sl aea uelluqcl J se iexcl~rcga tiacutex iuolllcrlliacuterieo mcclar por rolacilIL

- Si se obtiene UIl colur plIacuterpura intellso Lt s()luciuacuten esti suficientcll1cnshyte madura Si no iexclmllongar la chullici()Il por I a 3 l1linutus IllUumlS ucsshypueacutes de iexcl-iexclallir cllIacuteid() mercuacuterico Una Veacute frIacuteeiexcl la solucillll antildeadir aacutecido aceacutetico glacial y filtrar antes del uso

3 Eosina

31 EosinLl stod

Eosina L soluhle en agua lO Agua ueslilada lOOO m1

32 Eosina-Floxi na

Brinda el mayor rango de contraste rosado a rojo hrillante El citoplasshyma se tintildee de rosado y el eoluumlgeno y muacutesculo se tintildeen de rojo orillante

321 Comhinar

Eosina stod 1000 mI Solucioacuten Floxina (1 g en lOO mL) 100 mI Alcohol eacuteliacutelco 95 liacute( 7800 mI Aeido aceacutetico glacial 40 mL

322 La solucioacuten dura aproximadamente I semana

4 Tincioacuten de Papanicolaou

41 Hematoxilina de Harris La solucioacuten diluida se camoia cada I a 3 semashynas seguacuten el nuacutemero de preparaciones estudiadas

59

n10lt1 r Ol1 1[1 (lleuoqJ1D

1[1 n[1UlIl)tS ISOn)iexcl 1I9DI1OS iexcliexcl ZO OlllsillllllOJSOJ O[1IlV

iexcltU (r~v (Juacute~6 loqOlll) U)

)iiexcl~~O) UUIS()) )[1 o1U J IILllnLUV iexcllIl (rOl (~6 [oqmll 1Il

uacute~()l ~llnllls8 )[1 i o[1wd [lll (r~V ( r)~6 100Im[1 lIJ bv 10)

O]lIlI[lIPlIll) dS omp )[11)

11tI ~ Hromiddot middot Oll)Siilllll0jsoJ 0plV IIU O()()O()j ( y)~(iexcl 100Imiexclt ti) 1 1-V)~()

P lHlI11l10S) ~) OpnfUImiddotIllIV

ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones

a) 5l0liIacute1Iacute1I - Eoil 1I1I1 1

- Colocar scmillas de vidrio csteacuterile~ en ho(clla de 1f)()()mL aacutemhar

- Agregar bull Eosina Azur II bull Glicerina Calcntar a 56C por 2 horas Mezdar y enfriar Agregar bull Alcohol metiacutelico ahsolut(l bull Acetona

13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL

h) Soluciuacuten Mor-Grllllmld

May-Grunwald 015 Alcohol metiacutelico ahsoluto 29000 Acctona 29000

mL mL mL

c) Sot((iaacutell Giells( stock

- COlllhinar la~ dos soluciones preVIas ( 1 1 vovoliexcl

d) So((i(iacutell de (ljiUO aceacutetica (pH 47

Acido aceacutetico glacial Agua destilada

1 1000

gota mL

e) Soluciacuteaacutell tmhqjo Giem

Solucioacuten Gielllsa stock 10 mL Solucioacuten de agua aceacutetica 50 mL

67

I 1 Procedimiento

- DesparalllliacuteiexcliexclJ ( hidralar hd~ta agua - lliiir con soluciuacutell gielllsa Irc~c~iexcl por I IHlra

- Deshidratar Cll 1 camhios dc alcohol ahsoluto - Pasar por 3 camhio UC xi 101

Montar con medio re~ilH)s()

11 Resultados

Cito[Jlasma rusauo Nuacutecleo aul Gloacutehulos rojus rojo Bacterias ~lIlIl

2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones

a) Soluciaacuten Zich-Ncclscll elriJO-FIIesil(

Cristales de renol 25 iexclnL Alcohol etiacutelico absoluto 50 iexclnL Fucsina baacutesica 05 g Agua destilada 500 iexclnL Filtrar antes de usar

b) SolucioacutelI omIlO aacutecida I Ir

Acido clorhiacuteurieo 10 mL Alcohol etiacutelico corriente (70) 990 mL

e) Soluciaacuten k1I1 de Merilclu stock

Azul de metilcno 14 g Alcohol etiacutelico 95 ik 1000 mL

d) Solucioacuten Aul de Metiacutelcllo de trabajo

Azul de metiacute lenn stock I () mL Agua corriente 90 111L

68

1 ) roccdillliclI(o

lksparaliacutenilar l hidratar a aiultI A~re~ar s()luei(c)11 de iacuteiehl ~kclell (iexcliexclrhol FucsilLI a la laacutemina y eeacutelshylentar con el mechero hasta ljuc ~()luli(lIl en la lamina hUlllee Repetir por 1 veces Enfriar Iavar con agua

- Decolorar con solucioacuten acohol uacuteciJo II hasta que las secciones esshyteacuten de color rosado paacutelido

- Lavar con agua rOl xminutos Contrastar con allll de metilcnu (soluciacute(iacuten de trahajo) Las secciones dehen verse azul paacutelido Lavar U)I1 agua de cantildeo

- Deshidratar y aclarm Montar con medio rcsinoso

23 Resultados

Bacilos alcohol kido resistentes rojo brillante Gloacutehulos rojos naranja amari 110 Otros elementos tisulares azul

3 Gram

3 I Soluciones

a) Solucioacuten cristal violeta Joc

(JCristal Violeta 10 b

Agua destilada 000 mL

b) SolucioacutelI Fucsilla haacutesica J

(TFucsina haacutesica 10 b


e) SolucioacutelI yodo de Gram

yodo 10 g Yoduro de Potasio 20 g Agua destilada 3()()0 mL

69

FOrllHlI 20 Acido aceacutetico glacll LO Agua destilada IO()O

Aeido piacutecrico 10 g Acetona I()OO III L

nSouciacuteUacuteI lc(fIl(-Xiacuteli

Partes iguales de acetona y xiacute lo

32 Procedimiento

Desparaliniar e hidratar hasta agua Colocar en cristal Violeta I k por 1 minuto

- Lavar con agua de cantildeo - Colocar en solucioacuten yodo de Gram por Iminuto - Lavar con agua de cantildeo - Decolorar en acetona hasta quc el background sea claro - Lavar con agua de cantildeo

Colocar en solucioacuten de Fucsina huumlsica Il( por 5 minutos - Lavar con agua de cantildeo

Colocar cn solucioacuten de dilerenciacioacuten Gallego por 2 cambios mIshynuto cada uno

- Lavar Transferir a plato de tincioacuten

- Tratar con acetona por 30 segundos - Colocar en solucioacuten de Acido piacutecrico-acetona por 2 a 3 minutos - Colocar en solucioacuten acetona-xilol por 2 veces - Aclarar en xilol por 2 veces Montar

33 Resultados

Bacterias Gram (+) azu 1 Bacterias Gram (-) rojo Background amarillo

70

-t Plata ihkmllllin de (-ocott

41 OllcOIIlS

a) iexcleiacutedo cruacutemico f(1iexcl

Aciacutedo cniacutemiacuteco 4lt) g Agua desti lada ](JOO mL

h) NitraO de plata 5((

Nitrato de plata 50 g Agua destilada 1000 mL

c) TiacuteoSII(taacuteto de sodio

Tiosulfalo de sodio 50 g Agua destilada 1000 mL

d) MetelClmiacuteno 3

McLenamina 30 g Agua destilada 1000 mL

e) Borax 5

Borax 50 g Agua destilada 1000 mL

n Solucioacuten stock Nitrato Plaf(J-Ir1etell(l11illa

Nitrato de Plata 5 50 mL Metenamina 3 1000 mL

g) Solucioacuten de tralwjo Nitrato plata-metcllamina

Solucioacuten stock Nitrato de Plata-Metenamina 250 mL Borax 5(Jciexcl 20 mL Agua destilada 250 mL Preparar fresco previo al LISO No usar si estaacute turhio

71

h) Uisllljilo rc)odi

l3isulril() SOlII() I( Agua uesliblu J( j() () IllL

i) Clorl1ro de Oro (Jl

SoluciltIacuten Cloruro ltk Oro I iexcl 100 mL Agua uestilaua l)OO mL

j) Verde CU( (J2 Slock

Ven1c claro SF 02 Agua destilaua 1000 mL Acido aceacutetico glacill 02 mL

k) Verde claro sOlIduacuten de tmtuacuteo

Verde clnro stock 10 mL Agua destilada 50 mL

42 Procedimiento

Desparalinizar e hiJratar eacutel agua Colocar en aacutecido noacutemico 4(fc por I hora

- Lavar con agua Je cantildeo - Colocar en solucioacuten hisullito de sodio por l minuto - Lavar con agua tic cantildeo 5 a 1() minutos Luego 3 a 4 veces por agua

destilada Colocar en solucioacuten tic trahajo Nitrato Plata-Metenamina en horno a 60deg por 60 minutos

Lavar por 6 cn agua destilada - Colocar en solucioacuten cloruro de oro por 2 a S minutos Lavar en agua

destilada - Colocar en so]uciltIacuten tiosulfato sodio por 2 a 5 minutos Lavar en agua

de cantildeo Contrastar con solucioacuten de iexclrahajo de verde claro por 30 a 4S segunshydos

- Deshidratar y aclarar Montar

72

-t Resultados

Hongm Biell marcados en negro Mucina gris negro Micelio e hililS gris rosado Background Vcrde

5 Acido Peryoacutedico Schiff (PAS)

51 Soluciones

a) Solllcioacuten Acitlo perwJdico

Acido peryoacutedico 05 g Agua destilada 1000 mL

h) Solucioacuten Acido clurhiacutedrico I N

Acido clorhiacutedrico PA 37 835 mL Aguadestilada 9165 mL

c) Reactivo de Coleman SchUf

Fucsina haacutesica 10 g Agua destilada a 60degC 2000 mL

- Llevar a ebu Ilicioacuten - Enfriar y agregar

Acido clorhiacutedrico 1 N 100 mL - Dejar 24 horas y agregar

Carboacuten activado 05 g

Agitar por I minuto filtrar hasta que la solucioacuten sea incolora Guarshydar en refrigeradora

52 Procedimiento

- Desparafinizar e hidratar hasta agua - Agregar Solucioacuten Acido peryoacutedico por 5 minutos Lavar con agua

destilada

73

- Colocar el rladio (L COiL11I1I1 SlllilT por li Illilllllos

- Lavar CIl agu1 oc l1I10 lihia pOI I() lllil1l1l(h

- C()lllra~lar COIl Hllllallililla lVLlnr por 15 llllllutos () Harris por ( minutos

Lavar cn aglld oc lariacuteo por i minutos

Dcshioralar aclarar 1olllIL

53 Resultados

Glicoacutegcno lllucilla algunas membranas basales rojo a puacuterpura Hongos rojo a puacuterpura Nuclco Azul

6 Tricroacutemica de Masson

61 SOlllciolle~

a) Solucioacuten de trabajo Helll(l(oxilillo feacuterrica (-(ige rf)

Solucioacuten A stoc Hematoxilina 10 g Alcohol etiacutelico Y5 1k 1000 mL Solucioacutel B stoc Cloruro feacuterrico 29()i 40 g Agua destilada 950 mL Acido clorhiacutedrico concentrado 1000 mL Es reusable por 2 semanas

b) Solucioacuten Biebrich Escarlafa-Fucsifla Acida

Biebrich escarlata 1 acuosa 900 mL Fucsina aacutecida 1 acuosa 100 mL Acido aceacutetico glacial J O mL

e) Solucioacuten Fosfomoliacutebdico-Acido fosfoflIacuteflgStiCO

Acido fosfomoliacutebdico 50 g Acido fosfotuacutengstico 50 n

b


74

ti i Souciriacuten lIn IIlIiillI

AIUI anilina 25 g AciJo aceacutetico glacial 20 I11L Agua destilada 1000 mL

el SOlIcuacuteiacutell Acido ([ceacutetico (c

Acido aceacutetico glacial 10 mL Agua destilada 990 mL

62 Procedimiento

- Desparafinizar e hidratar a agua desli lada Tentildeir con solucioacuten Hematoxilina feacuterrica por I() minutos Lavar en agua de cantildeo por 10 minutos Enjuagar en agua destilada

- Tentildeir con solucioacuten fucsina aacutecida-Biebrich escarlata por 15 minulOs - Guardar la solucioacuten Enjuagar en agua destilada

Diferenciar con solucioacuten Acido fosfol1oliacutebdico-fosfotuacutengstico por 15 minutos Contrastar eon solucioacuten azul anilina por 5 a 10 minutos o solucioacuten verde claro por 1 minuto Guardar la solucioacuten Enjuagar en agua desshytilada Si se usa azul ani lina diferenciar con agua aceacutetica 1 por 3 a 5 minushytos

- Si se usa verde claro diferenciar con solucioacuten de aacutecido fosfotuacutengstico 5 por 15 minutos Deshidratar y aclarar Montar

63 Resultados

Nuacutecleo negro Muacutesculo citoplasma queratina rojo CoIaacutegeno azulo verde

7 Coloracioacuten de Van Gieson para fibras colaacutegenas

71 Soluciones

a) Hematoxilil1a Feacuterrica de Weigert (Ver 61)

75

ltlIlilld iexclIc d~t (( ~~hS

OllllI)n kll()~d I i ~ ~ nI SOlllell)n dlI(O1 dtllldd k JLido PllII) (e I [ji()

72 Procedimic1to

- rklaralllur hidrIt11 lilld1I con aua dC~liladiexclL - Colorear el ~()Iull 111 de IhIlliexcliexcl[odiultI tI Veicnh por lO l11illlltl)

Lavar CUIl 1~lIa k [1I(la Conlral()Ilear (11 (gttlcjl de Vm (ie) pOI I el Illillll[U

- DcshidraLtl adil 11 ~1()1a1 ell PlTl1liacutellllll () haballlo Aiacuteiacuteadir J tl(iexcl de solueilitl acuh]iexcla[lllradIllll iexclkili piacutenico para eltldiexcl501ll1 deacute xilolllsad ()IlHl IcLlradmiddotiexcl

- MOlllar el ilol iexclh iexclIdiclil)

Esto 1111cl1lricltl cl ollllo c iexcltd LJUC Iiexclb Lcioncs sc dccol)r(liexcl

73 Resultados

Coluacutegclw 101(

Iluacutescu1o eIIdio CtlilllliCltI 1 lt11111111

Nuacutecleo azulll Illgrp

8 Coloracioacuten de (omori pma rdkulina

X I oucioCc

a) )OUCIacutelJII 1 1111I tIOII cu

Para 10 mi uc SdUcHHl le nitralo de plala al IOc y 2( a 25 rnI u una oluL 1 lJl aUlhil JI Itidnxido de potasio al ](Vi1 afiacuteaJir agultl

amolllltd al 2fiexcl ti 2Wi1 gtula ~l gota hdsla que el prccipilauu rcsul [ante uL~dparClc 111) Jiiexclclllud al agilar la solucioacutelL Llevar la snlu eioacuten COIl lgua deIJlada iexclLlsla dt) veces su volumen Usar vidrio limshypio dL iacuteudo

76

h) S(II(iacuteiexcliexcl d iexcl(TII(IllIiIUfli de iexclno

Soluciuacuten lk peacuterllwngltlnato deacute Iotasiacute( Os t-shy Agua destilada I (lOO mL

~I 5olllciUacutef de Mctunsuliexclio de Pomio

Mctahisullito de Potasio 20 b Agua destilada lOO) mL

d) OiexclttOacuteOacuteIl de suf(iexcl() de (IllOlo feacuterrico

Sulfato de amonio feacuterrico 20 g Agua destilada 1000 mL

e) SOUciOacuteIl de formol

Solucioacuten de forrnaldchido 200 mL Agua destilada XOO mL

1) Solucioacutel de Cloruro de Oro

Solucioacuten stock de Cloruro de Oro 200 mL Agua destilada 800 mL

g) Solucioacuten de lioslljito de sodio

Tiosultito de sodio 20 g Agua destilada 1000 mL

X2 Procedimiento

Desparatinar e hidratar hasta agua corriente Oxidar en solucioacuten acuosa de permanganato de potasio al 05 por I minuto Lavar en agua corriente por 2 minulos Diferenciar con solucioacuten acuosa de melahisulfiacuteto de potasio por I mishynuto Lavar en agua corriente por 2 minulps

77

- SCllsihiacuteliar ell OIUCH)11 de sulato de allllllllll kic(l al 2 p(r un

minut(l

Lavarell agua corricnte por2 minutos seguiuo con2 camhios dc agua

destilada por 30 segullum caua vc

Impregnar en la soluciuacutell de plata por UIl minuto

- Enjuagar en agua destilada por 20 segundos

- Reducir por 3 minutos en formol al 2Wh Lavar en agua corriente por 3 minutos

- Tonilicar en solucioacuten de cloruro de oro al 02 por lO minutos

- Usar vaso de Copliacuten

Enjuagar en agua destilada

- Reducir la tonificacioacuten en una solucioacuten de metabisulfiacuteto de Potasio al 2 por l minuto

Fijar en solucioacuten de liosulfalo de sodio al 2Cr por I minuto

- Lavar en agua corriente por 2 minutos - Deshidratar y montar en Permount

83 Resultados

Fibras reticulares negro

78

ANEXO 4

SOLUCIONES EN INMUNOHISTOQUIMICA

l Peroacutexido de Hidroacute~eno 3 tn Metanol

Solucioacuten peniacutexido hidr()gcno 3()(~ 30 mL Metanol absoluto 970 mL Preparar solucioacuten diariamente

2 Buffer PUS ltFosfato Buffer Salino) pH 73 bull 74

fosfato de pota-iu dibaacutesico en cristales 850 g Cloruro de Sodio 720 g Fosfato de Sodio monohaacutesico 132 g Agua destilada 100000 mL

3 Diaminobencidina (DAB)

3 3 Diaminobencidina 0 I g PBS 2000 mL Pcniacutexido de Hidroacutegeno 30 02 mL

79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID

INSTlTllTO NClONL BE SLl1gt Rluuml RHISTRO 1gt1lt (ATOLOGI

CENTRO NClON1 nI L1I0RTORIOS IlE SAIl 11l11I11L1(

(iexclPiexclC YlIpallqui 1+00 - J~ll r-Luiacutei

SOLltTflJl) DE EXAMEN lIISIATOLoGICO

-----~ _---_ _-~-_

l III ENIlfIeAtII ltj

NOMBRE EDAD SEXO M O F O PROCEDENCIA

Malral

niupsiacutea AUlopia Piela uumluiniacutergita O Frotis O (nJicar oacuterganos o localizaci6n de 1 lesioacuten del frois

Cmtro di Alrncioacuten

Hospital CellllO de Salud

Ambulatorio [)OIBldlio

Departamento ProvinLia Caseriacuteo

11middot RESUMEN DE HISTORIA CLlNtCA

I -Siacutentoma Principal

~-nempo de Evolucloacutell

l-Comienzo de enfefllleuacutead Insidioso Rrusco

4-Signos y srntomas de la enfermedad

5-Examcncs de Laboratorio y Rayos X

6middotf)ingnoacutestiacuteco Cliacutenico

Nomlnr Firma

81

Esla publ ieaci(Iacute1l se leacutermino de imprimir en Diciembre de 1997 en los

Tulleres Graacutelicos de Art iexclltlUlreC SRLlda Av Paseo uacutee la Iepuacuteblica 731 Ijiexclm 13

TclFax 42J-761 Oacute

copy Ministerio de Salud INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Jr Caacutepac Yupanqui 1400 Jesuacutes Mariacutea Telf 471-3254 I Fax 471-7441

Lima Peruacute 1997





















Liexcl IJIliOlIiIl]

1 OIiexcllUcIV)


OIfUI(V)




(lt shy I~lllU IJ

11 (YIIUltlV)

ttmiddot - ID)

L (TJ[lJJcIV~)


A OIfUIJV)


1OHUJ(I V)


lIT OIfUJ(IV)


11 OT1HdV)

1I lI~lIDI1P()l)lIl

IOliacuteUltlV)


~JIaNI




PRESENTACION




EL COMITE EDITOR

7

SECTOR SALUD


bull No J~)))J~



CONSIDERANDO





SE RESUELVE




-~

~~)~-j ~TU~



9

CAPITULO I

INTRODUCCION










11

CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD




211 Fiacutesicos


212 Quiacutemicos






213 Bioloacutegicos


13














14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81
























Liexcl IJIliOlIiIl]

1 OIiexcllUcIV)


OIfUI(V)




(lt shy I~lllU IJ

11 (YIIUltlV)

ttmiddot - ID)

L (TJ[lJJcIV~)


A OIfUIJV)


1OHUJ(I V)


lIT OIfUJ(IV)


11 OT1HdV)

1I lI~lIDI1P()l)lIl

IOliacuteUltlV)


~JIaNI




PRESENTACION




EL COMITE EDITOR

7

SECTOR SALUD


bull No J~)))J~



CONSIDERANDO





SE RESUELVE




-~

~~)~-j ~TU~



9

CAPITULO I

INTRODUCCION










11

CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD




211 Fiacutesicos


212 Quiacutemicos






213 Bioloacutegicos


13














14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

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1laquo) J I

__------~



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~~-


31

bullbull bull ---




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I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81







PRESENTACION




EL COMITE EDITOR

7

SECTOR SALUD


bull No J~)))J~



CONSIDERANDO





SE RESUELVE




-~

~~)~-j ~TU~



9

CAPITULO I

INTRODUCCION










11

CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD




211 Fiacutesicos


212 Quiacutemicos






213 Bioloacutegicos


13














14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

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31

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32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




SECTOR SALUD


bull No J~)))J~



CONSIDERANDO





SE RESUELVE




-~

~~)~-j ~TU~



9

CAPITULO I

INTRODUCCION










11

CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD




211 Fiacutesicos


212 Quiacutemicos






213 Bioloacutegicos


13














14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

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32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO I

INTRODUCCION










11

CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD




211 Fiacutesicos


212 Quiacutemicos






213 Bioloacutegicos


13














14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



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~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO 11

BIOSEGURIDAD




211 Fiacutesicos


212 Quiacutemicos






213 Bioloacutegicos


13














14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81

















14




















16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81























16

CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO III





31 BIOPSIA DE PIEL







17











18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81














18






)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81









)9

CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO IV



41 FIJACION







21







22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81










22




23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81







23

CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO V








25








equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81











equipo automatizadu

53 DESHIDRATACION


27









55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81












55 INCLUSIOacuteN




28








552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81











552 Teacutecnica






29






-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81









-=-~

----~_ ~~


30




eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81







eacutel 0- )--7E~ 7 ---~~-_~

--~ (S) ~--

1laquo) J I

__------~



~--Y -- ----==r ~~~-rl---J

~~-


31

bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




bullbull bull ---




o

I~~----




32

CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO VI









621 A mano





33

(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




(13 IICROTOlln-













635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81








635 Flotacioacuten








2 ha hervido

35














36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81

















36




37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81







37

CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO VII

TINCION y MONTAJE

71 TlNClON








PnlCcdimientl)


J(l






Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81









Eo~ina 2 ll1inul()~



Montaje













- Eosina 2 minutos




- Montaje

411


72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81





72 MONTAJE





41

CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO VIII















43









44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81












44











45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81














45



Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81






Pn lced Illllen[o





OG6l a 4 minutos





46

CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO IX




911 B~lcterias









47






912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81









912 Hongos






48

9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




9IJ Paniacutesitos



PASo










3)

41)

CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO X

INMUNOHISTOgUIMICA





102 METODOS




51












52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81















52



IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81






IOS FIJACION


106 PROCESAMIENTO







5~



109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81






109 CONTROLES














54








55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81











55

CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




CAPITULO XI

BIBLIOGRAFIA








57

(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




(SOX~NV)

IIX OIn~IdV3

ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




ANEXO 1

FIJADORES

1 Formol al 10


mL mL

2 Formol Tamponado


2HPO) 65

mL mL

g g

6]

ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




ANEXO 2



11 Reactivos


12 Procedimiento






21 Reactivos


22 Procedimiento


63





3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81








3 Eosina

31 EosinLl stod


32 Eosina-Floxi na


321 Comhinar





59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




59









ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




ANEXO 3


l (iemsa

l I Soluciones




13 iexcljOJ)

70O 1700

g mL

I11L IllL



mL mL mL





1 1000

gota mL



67

I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




I 1 Procedimiento




11 Resultados


2 Ziehl-Neelsen

21 Soluciones









68

1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




1 ) roccdillliclI(o





23 Resultados


3 Gram

3 I Soluciones









69





32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81








32 Procedimiento







33 Resultados


70


41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81





41 OllcOIIlS









e) Borax 5






71









42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81












42 Procedimiento








72

-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




-t Resultados



51 Soluciones











52 Procedimiento


destilada

73






53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81









53 Resultados



61 SOlllciolle~







b


74





62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81








62 Procedimiento





63 Resultados



71 Soluciones


75



72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81






72 Procedimic1to






73 Resultados

Coluacutegclw 101(




X I oucioCc




76













X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81
















X2 Procedimiento


77


minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81





minut(l












83 Resultados


78

ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




ANEXO 4








79

ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




ANEXO 5

IINlsnJUO DE SLID





-----~ _---_ _-~-_



Malral













Nomlnr Firma

81




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