Muestra N°419 - Sospecha RaynaudInmunología clínica 2015

Pablo FagundezSoledad Valsangiacomo

Carolina PerroniRosina Giorgi

Florencia Bentancor

Fenómeno de Raynaud

SUPERPOSICIÓN CON OTRAS PATOLOGÍASRAYNAUD 1°

No está asociada a una enfermedad subyacente

RAYNAUD 2°Fenómeno secundario a otras enfermedades

Superposición con múltiples patologías

- Presencia de anticuerpos anti nucleares (ANA) - Capilaroscopia periungueal con anormalidades

- Personas mayores de 30 años- Presenta una prevalencia de 0,4%

SUPERPOSICIÓN CON OTRAS PATOLOGÍAS

Alteraciones sanguineas

Intoxicación por metales

Efectos secundarios de fármacos

Enfermedades del Sistema NerviosoReumatológicas Enfermedad arterial

oclusiva

Enfermedades del colageno

MÉTODOS419

IFI

LATEX

ELISA Anti-MPO

LINE BLOT - Núcleo-9-lineMarca ORGENTEC - ALEMANIA

Ac IgG anti MPO?

ANA-HEp2

Auto ac IgM anti IgG?

Ac anti nucleares IgG?

RESULTADOSIFI(ANAs)

Se utilizaron células Hep-2 las

cuales provienen de una línea

celular humana derivada de un

carcinoma laríngeo epitelial,

para fijar el porta objetos.

El patrón encontrado en la

muestra de suero 419 fue

centrómerico, en el cual se

logró visualizar los centrómeros

dentro de la célula.Figura 1. Detección de anticuerpos antinucleares. Patrón centromérico. Concentración 40x

IFI.HEp-2Se realizaron 3 diluciones: 1/80; 1/160; y una en 1/320;

Como es una técnica cuantitativa podemos calcular el titulo de los anticuerpos presentes.

Resultado: mayor a 1/320.

Figura 2. Anticuerpos antinucleares. Patrón centromérico. Concentración 100x

ELISA-ANTI-MPOLos pocillos de la placa de ELISA fueron recubiertos con myeloperoxidase (MPO) extra purificado.

El complejo colorimétrico formado, se midió en el espectrofotómetro y realizó una curva de calibración para luego interpolar nuestros resultados.

El resultado obtenido fue: 0/760 U/ml

LINE-BLOTAl finalizar la práctica se obtuvo un producto insoluble coloreado en la banda de antígeno señalada siendo este el antígeno CENP-B.

Al obtener en el resultado un color débil y al validar con el control limite el color obtenido, podemos interpretar al resultado como DUDOSO.

Figura 3. Resultado Line Blot

ENSAYO DE AGLUTINACIÓN EN LÁTEX

Al mezclar la muestra con el reactivo látex FR, se forma una aglutinación de las partículas de látex, si el suero del paciente es positivo.

El resultado fue una no aglutinación y por lo tanto un resultado negativo.

Figura 4. Ejemplo de resultado obtenido por latex.

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

IFI ANAs

Control +: patrón homogéneo

Control -: sin fluorescencia

muestra: patrón centromérico

esperable

título: �1/320

se valida

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

ELISA-MPO

resultado esperado

control + 37/50 U/ml 25-45 U/ml

control - 1.1/2.2 U/ml menor a 5 U/ml

muestra 0/760 U/ml mayor a 5?

se valida

Muestra: dudosaMPO: Marcador para Vasculitis

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

Line Blot

CO/EC/SC: + Validamos es test

se observó banda en CENP-B de intensidad menor o igual al COD

UDOSO Podría esperarse ver reactividad en la banda CENP-B y/o Scl-70

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

Aglutinación: solo se observó aglutinación en el C+ validamos test

Resultado esperado: +/- Asociado a Artritis Reumatoidea

CONCLUSIÓN

Desde el punto de vista del laboratorio clínico no podemos confirmar la sospecha del paciente. Será necesario repetir el ELISA y el Line blot, y acompañar dichos resultados del historial clínico del paciente para arribar a una confirmación.

• Clínica• Capiloroscopia• Estudio serológico

RAYNAUD

international recommendations for the assessment of autoantibodies to cellular antigens referred to al anti nuclear antibodies. Agmon-Levin, N. et al. 2015

• Esclerosis sistémica (SSc)• Raynaud´s

- para Anti-Scl-70

Line Blot• Clinica• Digitoscopia

Los auto-anticuerpos anti citosol de neutrófilos (ANCA), la mayoría de los casos están dirigidos a la enzima MPO.

Natural and disese associated anti-myeloperoxidasa (MPO) autoantibodies. Guilpain, P. et al. 2008

+ , en 70% vasculitis.

MPA (poliangitis microscópica)GPA (granulomatosis con poliangitis)

PR3 (proteinasa 3) + , asociado a GPA

Artritis Reumatoidea: busca ACPA (anticuerpos anti proteínas citrulinadas) y FR (factor rematoideo). FR -

Complicaciones de Raynaud

Cianosis local, puede derivar en gangrena del tejido y requerir amputación del miembro afectado.

Ocasionar infecciones en las úlceras dactilares, se recomienda higiene de la zona y uso tópico de antibióticos, pudiendo requerir internación del paciente

Tratamiento➢ Medidas generales: evitar exposición al frio, mantener temperatura

corporal en especial zonas afectadas. Si posee componente

emocional técnicas de relajación actividades anti estrés

➢ Vasodilatadores: antagonistas de calcio, prostaglandinas

➢ Terapia antiagregante/anticuagulante: aspirina (AAS) dipiraidamol.

➢ Terapia antioxidante: no se encontró evidencia de beneficio, no

tiene efectos adversos, se postula podría ser útil al inicio de la

enfermedad.

➢ Cirugía: simpactectomia, indicado en pacientes con Síndrome de

Raynaud grave, resistente a otras terapias