nanoparticulas de oro

7/17/2019 Nanoparticulas de Oro

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Resumen

La aplicación tópica de agentes antioxidantes en heridas cutáneas hallamado mucho la atención. Las nanas partículas de oro (AuNPs),galato de epigalocatequina (!"!), # el ácido $%lipoico (ALA)demostraron tener e&ectos antioxidantes # podrían ser 'tiles en lacuración de heridas. e estudiaron sus e&ectos en la proli&eracióncelular s*+ # a"a # en ratón cicatri-ación de heridascutáneas. anto la me-cla de !"! ALA (A) # AuNPs !"! ALA (AuA) aumentó signi/cati0amente la proli&eración # migracións*+ # a"a. Aplicación tópica AuA aceleró la curación de heridasen la piel del ratón. La inmunotrans&erencia de te1ido de la herida

mostró un aumento signi/cati0o del &actor de crecimiento celularendotelial 0ascular # la angiopo#etina%2 expresión de la proteína, peroning'n cam3io de angiopo#etina%4 o "562 despu7s de 8días. 5espu7s del tratamiento AuA, "5*+ expresión de la proteínadisminu#ó # "u 9 :n superóxido dismutasa aumentósigni/cati0amente en el área de la herida. n conclusión, AuAaceleró signi/cati0amente ratón de heridas cutáneas de curación atra07s de e&ectos anti%in;amatorios # antioxidación. ste estudiopuede apo#ar &uturos estudios el uso de otros agentes antioxidantesen el tratamiento de heridas cutáneas.



<ntroducción

a pasado 3astante tiempo desde que el estudio de la cicatri-ación

de heridas atra1o la atención del p'3lico, so3re todo en un momentoen que la dermatología cosm7tica # cuidado de la 3elle-a son cada0e- más apreciados. =ala cicatri-ación de las heridas ha dado lugar acomplicaciones gra0es, incluso la muerte, en todo elmundo. 2 reacciones 3iológicas anormales a la lesión cutáneaposteriores a la en&ermedad, trauma # cirugía, ine0ita3lemente,puede dar lugar a complicaciones gra0es. 5e hecho, el proceso decicatri-ación de la herida es mu# comple1o e in0olucra a más de un&actor /siopatológico. 4 "omo sa3emos, las po3laciones de c7lulaspredominantes en la piel de mamí&eros son los /3ro3lastos #

queratinocitos. Aparte de esto, el mecanismo de transducción dese>ales celulares que domina la cicatri-ación de heridas es mu#comple1o # toda0ía no se entiende completamente. Recientemente seha encontrado que los antioxidantes tales como galato deepigalocatequina (!"!) pueden tener un papel importante en lacicatri-ación de heridas. 6Además, desde un punto de 0ista clínico, lara-ón principal de la aplicación tópica es popular es que puedereducir el e&ecto ad0erso de un medicamento de la el cuerpo humano# los órganos internos. n experimentos recientes, tanto enanimales ? # los seres humanos, @ la aplicación tópica de &actores de

crecimiento especí/cos ha demostrado ser mu# e/ca-.

Recientemente ha ha3ido un gran progreso en la aplicación de lananotecnología en la ciencia de los materiales la nanotecnologíatam3i7n ha sido ampliamente utili-ado en la tecnología3iológica. * 5e3ido a sus propiedades 'nicas, nanopartículas de oro(AuNPs) se pueden aplicar extensamente en la trans&erencia de genes# el transporte medicamento. 8 se han propuesto coloidales AuNPspara di0ersas aplicaciones 3iom7dicas de3ido a su super/cie 'nica,electrónico # propiedades ópticas. + n los 'ltimos a>os, comoresultado de la interacción nano%3io con lípidos de la piel, AuNPs handemostrado ser capa- de a3rir el estrato córneo # penetrar la 3arrerade la piel. B n consecuencia, la aplicación tópica de antioxidantes

1unto con nanogold para me1orar la a3sorción es el tema principal deeste estudio.

!"!, un compuesto que se encuentra ampliamente en el t7 0erde,es un antioxidante típico.Recientemente se ha descu3ierto que lacatequina tiene muchos e&ectos 3iom7dicos tales como antioxidantes# propiedades anticancerígenas. 2C !"! es un poli&enol que existe ena3undancia en t7s no &ermentados. Darios estudios epidemiológicoshan 0inculado el consumo de t7 con un menor riesgo deen&ermedades cardio0asculares. 22 in em3argo, el mecanismo de

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&acilitación del !"! de cicatri-ación de heridas complicacionescutáneas sigue siendo poco clara. Etro potente antioxidante es elácido $%lipoico (ALA), que se puede encontrar en los alimentos deorigen animal como la carne # el hígado. 24 ALA &ue descu3ierto en2B@2 como una mol7cula que a#uda en la trans&erencia de acil%grupo

# como una coen-ima en el ciclo de Fre3s. Además de eliminar elperóxido, ALA es un potente antioxidante lipo&ílico tanto in 0itro comoin 0i0o. 26 ALA puede interactuar con otros antioxidantes # &ortalecersus capacidades de antioxidación (por e1emplo, 0itaminas " #). "omo resultado, ALA ahora se utili-a como un suplementodiet7tico en el en0e1ecimiento, la dia3etes mellitus, # 0ascular # lasen&ermedades neurodegenerati0as. 2?=u# pocos intentos se hanhecho en la me-cla de !"! con ALA en los estudios de los procesosde cicatri-ación de heridas cutáneas. Gn estudio reciente demostróque una &ormulación liposomal AGNP me1orado la acti0idadantioxidante de la 0itamina " # la administración tópica en la piel. 2@

Las AuNPs com3inado con !"! # ungHento ALA (AuA) utili-ado enheridas cutáneas toda0ía no se conocen 3ien. ste estudio tiene comoo31eti0o determinar la &órmula tópico más e&ecti0o para curar heridas# desentra>ar su mecanismo m7dica. n el presente estudio nosproporcionan prue3as de que la aplicación tópica de una me-cla deAuNPs, !"!, # ALA acelera la cicatri-ación de heridas en ratonesmediante un mecanismo que puede implicar acciones anti%in;amatorias # antioxidación en el área de la herida. Además, hemospro3ado la hipótesis de que AuA acelera la cicatri-ación de heridas,aumentando la proli&eración # migración de las c7lulas epid7rmicas.











=7todosPreparación y caracterización de AuNPs

AuNPs proporcionados desde !old Nanoech (aipei, aiIán) seprepararon por un proceso de epitaxia de ha- molecular patentadacomo sigue. AuNPs &ueron producidos por la &a3ricación &ísica # nocontenían modi/cadores de super/cie o esta3ili-adores. n pocas

pala3ras, el material a granel oro &ue cortado o molido en el materialo31eti0o. ntonces el o31eti0o Au se 0apori-a a ni0el atómicomediante un m7todo el7ctricamente gasi/cado al 0acío. l 0apor secondensa en presencia de un gas inerte # luego aplicado para &ormarAuNPs. Los tama>os AGNP pueden ser mane1ados de manera e&ecti0aen &unción

del tiempo de e0aporación # la corriente el7ctrica utili-ada. Los AuNPsse recogieron en una trampa &ría # se centri&ugaron para o3tener elproducto /nal. La concentración inicial de estos AuNPs se determinómediante un espectrómetro de masas de plasma acoplado

inducti0amente (P%ciex LAN *2CC 5R" PerJin%lmer, Kaltham,=assachusetts). Los tama>os de las di0ersas AuNPs se o3ser0aronmediante un microscopio electrónico de transmisión EL =%24CC(oJio, apón) operado a 22C JD. La distri3ución del tama>o de laAuNPs &ue calculado por el so&tIare 3asado en más de 2CC partículasen las imágenes. l (GD%D<) a3sor3ancia ultra0ioleta%0isi3le de AuNPsde di0ersos tama>os se midió por espectroscopía GD%0is (itachi G%4CCC itachi, oJio, apón). La carga super/cial negati0a de AuNPs&ue determinada por el potencial -eta (:etasi-er Nano%:, =al0ern<nstruments, Korcestershire, Reino Gnido). La esta3ilidad de lasAuNPs en el medio de culti0o celular con suero se examinó pormicroscopía electrónica de transmisión.Los diámetros de los AuNPsutili-ados &ueron clasi/cados en 2%6 nm, 6%@ nm, # de 2@%6C nm.

Cultivo celular

Mi3ro3lastos de prepucio humano (s*+) # c7lulas de queratinocitoshumanos (a"a) se culti0aron en medio agle modi/cado de5ul3ecco ("am3rex io cience, KalJers0ille, =ar#land) que conteníasuero 3o0ino &etal al 4CO, 2CC mg 9 ml de penicilina, # 2CC mg 9 ml de

estreptomicina (p 8.*). Los culti0os se pasaron en alcan-ar +CO decon;uencia, utili-ando C,C@O de tripsina%5A (!i3co, <n0itrogen,"arls3ad, "ali&ornia), # el medio se cam3ió cada 4 días. Los



experimentos se reali-aron en el paso 6%@ para los ensa#os deproli&eración celular # la migración.

La cuantifcación de la prolieración celular

La proli&eración de s*+ culti0ados # c7lulas a"a se midióutili-ando un ensa#o colorim7trico. Las c7lulas &ueron incu3adas con0ehículo, 4,4 m= !"! (), + m= ALA (A), 4,4 m= !"! + m= ALA(A), AuNPs 2 ppm, o AuNPs !"! ALA (AuA) durante ?+

horas. A continuación, 2C ml de ácido 6% (?, @%dimetiltia-ol%4%il) %4,@%di&enil%4%tetra-olio (=) solución (R 5 #stems, =inneapolis,=innesota) se a>adieron a cada pocillo, # las c7lulas se se incu3arondurante otras ? horas a 68 Q ". 5espu7s las c7lulas se la0aron tres0eces con solución salina tamponada con &os&ato (p 8,?), el productode &orma-án insolu3le se disol0ió por incu3ación con 2CC ml dedetergente durante 4 horas. La a3sor3ancia de cada pocillo se midióen un lector de microplacas de ensa#o de inmunoa3sorción ligado aen-ima a @8C nm.

Ensayo de la cicatrización de heridas cero celular

s*+ culti0adas # c7lulas a"a se sem3raron en placas de *C mm #se culti0aron hasta con;uencia.5espu7s de 4? horas de pri0ación desuero, la monocapa de c7lulas se somete a continuación a un rasgu>oherida mecánica inducida usando una punta de pipeta est7ril, # lasc7lulas se trataron con 0ehículo, , A, A, AuNPs, o AuA durante ?+horas. Las c7lulas &ueron /1adas en una solución de para&ormaldehído

al ?O en tampón &os&ato salino # se ti>eron con cristal 0ioleta. Lasc7lulas en el área de lesión se 0isuali-aron 3a1o la óptica de contrastede &ase (2C o31eti0os), # se contó el n'mero de c7lulas que ha3íanmigrado a la -ona cero li3re de c7lulas inicialmente.

Heridas de grosor total y la medición de la herida

Ratones AL 9 c se o3tu0ieron a partir del "entro Animalxperimental de la Gni0ersidad Nacional de aiIán. odos los ratonesse mantu0ieron en una dieta de la3oratorio # agua ad li3itumestándar. odos los ratones &ueron utili-ados experimentalmentecuando + semanas de edad en el momento de la herida. Los ratones



&ueron anestesiados utili-ando 4 a 4,@O 0apori-a iso;urano inhalado,# la piel dorsal &ue limpiado con 3etadine. n condiciones est7riles la-ona dorsal esta3a totalmente depilado, # una sola herida lineal porescisión de grosor completo (2 cm) &ue creado en cada lado de laparte trasera superior de cada ratón utili-ando unas ti1eras a/ladas #

un 3isturí. La herida del lado i-quierdo sir0ió como control, # la heridadel lado derecho se trató con 0ehículo, 2 mg 9 g !"! (), 6C mg 9 gde ALA (A), 2 mg 9 g !"! 6C mg 9 g de ALA ( A), C,C8 mg 9 gAuNPs, o AuA pomada se aplica directamente al sitio de la heridauna 0e- al día en una &orma ciega. odos los ungHentos se hicieroncon 4,@ ml de glicerol (igma%Aldrich, t Louis, =issouri), 2 ml "reagelemulsionante (Primera Suímica, aipei, aiIán) # ?@,@ ml de agua3idestilada. Para determinar la e/cacia de curación di&erenteungHento mediada, el tama>o de la herida residual se mide desde elárea de la herida sin cerrar despu7s de 6, @ # 8 días de tratamientotópico utili-ando so&tIare de cálculo de 5ino digital (A=6C26 5ino%Lite Premier An=o lectrónica, aipei, aiIán) . Los ratones de cadagrupo &ueron sacri/cados en los días 2, 6, @, # 8 despu7s de la herida,# muestras de te1ido de la piel de la -ona de la herida &ueronextirpados en pro&undidad # atra0esada de todos los ratones paraanálisis 3ioquímicos o tinción histológica. Las in0estigacionesse a1ustan a la T!uía para el "uidado # Gso de Animales deLa3oratorioT, pu3licado por los <nstitutos Nacionales de alud # el"omit7 de "uidado Animal del <nstituto de "iencias =7dicas de laMrontera, Gni0ersidad de Mu%en (AB*@+).

El análisis de transerencia estern

otal de muestras de proteína se me-claron con tampón de muestra,

se hir0ieron durante 2C minutos, separadas por 2CO de sodio dodecil

sul&ato de electro&oresis en gel de poliacrilamida%3a1o condiciones de

desnaturali-ación, # a electrotrans&erencia en mem3ranas de

nitrocelulosa (Amersham Pharmacia iotech 9 ! ealth "are,

ucJinghamshire, Reino Gnido). Las mem3ranas de nitrocelulosa se3loquearon en tampón de 3loqueo, se incu3aron con anticuerpos de

ratón a "5*+, a Ang%2, Ang%4 para, a D!M, a "562 (anta "ru-

iotechnolog#, anta "ru-, "ali&ornia), # la superóxido dismutasa

(E5) ( A3cam, "am3ridge, =assachusetts), se la0ó, # se incu3aron

con peroxidasa de rá3ano con1ugada con anticuerpo secundario.Las

se>ales se 0isuali-aron por detección quimioluminiscente

intensi/cado.

El análisis estad!stico



Los datos se expresaron como media U =. 5e tudent t %test &ue

utili-ado para comparar las 0aria3les param7tricas entre los dos

grupos, # se utili-ó el análisis de 0arian-a con un dise>o de repetición%

medición de los cam3ios de rum3o tiempo. La signi/cación estadística

se e0aluó por uJe#%Framer prue3a de comparaciones m'ltiples

(!raphPad o&tIare, an 5iego, "ali&ornia). A P 0alor in&erior a C,C@

&ue considerado estadísticamente signi/cati0o.

Resultados

A # AuA me-cla se incrementó de queratinocitos # /3ro3lastos

proli&eración

"7lulas a"a culti0adas o c7lulas s*+ se trataron con 0ehículo,!"!, ALA, A, AuNPs, o AuA durante ?+ horas. La incu3ación conA o AuA aumentó signi/cati0amente el n'mero de c7lulas a"a(Migura 2 , A ) # c7lulas s*+ ( Migura 2 , B ). La incu3ación con !"!,ALA, o AuNPs solo tam3i7n aumentó la proli&eración celular pero no aun grado estadísticamente signi/cati0o. Las tasas de proli&eración deam3os tipos de c7lulas en el grupo AuA &ueron signi/cati0amente

ma#ores que los del grupo de A. n la línea celular s*+,encontramos que el n'mero de c7lulas del grupo A aumentósigni/cati0amente tan pronto como 24 horas # continuó aumentandohasta ?+ horas despu7s se sem3raron c7lulas (datos nopresentados). Los di&erentes tama>os de AuNPs no cam3iaronsigni/cati0amente el e&ecto de la proli&eración de c7lulas del grupoAuA en cualquier línea celular ( Migura 2 , C ). stos resultadossugieren que la me-cla de A # AuA aumentó la tasa de proli&eracióncelular en el sistema de culti0o in 0itro.

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A # AuA aumentó la migración de las c7lulas a"a # s*+

La incu3ación con A o AuA aumentó signi/cati0amente la migraciónde las c7lulas a"a ( Migura 4 , A) # c7lulas s*+ ( Migura 4 , B ). ln'mero de c7lulas migradas inducidos por AuA &ueronsigni/cati0amente ma#ores que los inducidos por A. Ni !"! ni ALAaumentaron la migración celular. La incu3ación con la me-cla deAuA (de 6 a @ AuNPs nm) aumentó signi/cati0amente la migraciónde am3os tipos de c7lulas a un ni0el superior a la o3ser0ada para

cualquier otro grupo ( Migura 4 ,C

). Gtili-amos AuNPs @ nm para elestudio adicional de animales. stos datos sugieren que A #tratamiento AuA no sólo aumentaron signi/cati0amente dequeratinocitos # /3ro3lastos de la proli&eración celular, sino quetam3i7n aumentaron la migración celular in 0itro en sistemas deculti0o celular.

Figura 1.

EA y AuEA aumentar la proliferación de las células HaCaT y Hs68. Células HaCaT cultivadas o células Hs68 se trataron con

ve!culo "control#$ E%C% "E#$ A&A "A#$ E%C% ' A&A "EA#$ Au()s$ o Au()s ' E%C% ' Ala "AuEA# durante *8 oras. +espués

de EA y AuEA de incu,ación$ los n-meros de células HaCaT (A) Hs68 y (B) células aumentaron significativamente. (C) AuEA

con diferentes tamaos de Au()s no cam,ió significativamente la proliferación celular en las células HaCaT y Hs68. &as

,arras negras indican el estudio células HaCaT. &as ,arras ,lancas indican el estudio células Hs68. &os valores se o,tuvieron

a partir de seis e/perimentos independientes. V P 0$1 en comparación con el control









&ecto de AuA en el cierre de heridas

Para in0estigar el proceso de cicatri-ación en 0i0o, dos heridas deespesor completo lineales &ueron creadas en el dorso de los ratonestratados con 0ehículo (control), AuNPs, A, o AuA. La aplicacióntópica de A # AuA aumentó signi/cati0amente la tasa decicatri-ación de la herida so3re la de 0ehículo ( Migura 6 , A).Lacicatri-ación de heridas en el grupo AuA esta3a casi completo por 8días despu7s de la lesión, mientras que las heridas de los ratones decontrol a'n no se ha3ían curado completamente. Am3os anchuras #longitudes de heridas en ratones tratados con AuA se redu1osigni/cati0amente en el día 8 despu7s de la lesión en comparacióncon los ratones control ( Migura 6 , B). No se o3ser0aron e&ectosad0ersos del tratamiento tópico en el peso corporal, salud general, oel comportamiento de los ratones. n las secciones histológicas de

&a Figura 2.

EA y AuEA me3orar la motilidad de las células HaCaT y Hs68. &as monocapas de células cultivadas o células HaCaT Hs68

fueron eridos mec4nicamente con una punta de pipeta de 2 ml estéril después del tratamiento con ve!culo "control#$

E%C% "E#$ A&A "A#$ E%C% ' A&A "EA#$ Au()s$ o Au()s ' E%C% ' A&A "AuEA#. 5m4genes del 4rea de la erida fueron

aduiridos *8 oras después de la erida cero$ y el n-mero de células por campo ue a,!an migrado a la 7ona de la erida

li,re de células se determinó para cada cultivo. Células HaCaT cultivadas (A) y Hs68 (B) células incu,adas con EA y AuEA

migraron en n-meros significativos en el 4rea de la erida " n 6#. (C) AuEA con de 9 a : nm Au()s migraron en n-meros

m4s altos ue otros tamaos de Au()s en am,os tipos de células. &as ,arras negras indican el estudio células HaCaT. &as

,arras ,lancas indican el estudio células Hs68 " n 6#. V







muestras de piel del grupo AuA, in/ltración de neutró/los # lain;amación se limitaron al sitio de herir en el día 8 ( Migura ? ).

La

relación entre AuA # la

angiog7nesis

=ediante la producción de micro0asos que proporcionan nutrientes #oxígeno a las c7lulas de crecimiento d7rmicos, la angiog7nesis puede

1ugar un papel crítico en la cicatri-ación de heridas. 2* D!M ( Migura@ , A ) # Ang%2 ( Migura @ , B ) en los te1idos de la herida de los ratonestratados con AuA aumentado signi/cati0amente en el día 8 despu7s

de la lesión. in em3argo, en el día 6 # @ Ang%2 expresión de laproteína no se ha3ía aumentado signi/cati0amente. Ang%4 deexpresión no mostró cam3ios signi/cati0os despu7s de 8 días ( Migura@ , C). Además, "562 expresión de la proteína se incrementó en 8días te1ido de la herida, pero no alcan-ó signi/cación estadísticadespu7s de la lesión de heridas en ratones tratados con AuA ( Migura* , A).

Figura *.Figura 9.





















&a Figura :.

E/presión de genes y efectos del tratamiento AuEA en 4rea de la erida relacionados con la angiogénesis. El an4lisis de

transferencia ;estern de te3ido cut4neo 4rea de la erida en diferentes puntos de tiempo después del tratamiento

AuEA.E/presión de la prote!na <E%F (A) se incrementó significativamente desde el d!a : asta el d!a = después de la lesión

" n 6#. (B)angiopoyetina>1 "Ang>1# e/presión de la prote!na fue significativa en el d!a = " n 6#. (C) Angiopoyetina >2 "Ang>2#

e/presión no cam,ió significativamente después de la creación de eridas cut4neas " n 6#. &as ,arras ,lancas indican el

tratamiento con ve!culo. &as ,arras negras indican el tratamiento AuEA. V P 0$1 en comparación con el ve!culo



Los e&ectos de AuA en la in;amación de la herida # "u 9 :n

superóxido dismutasa (E52)

Para examinar las posi3les &unciones de tratamiento AuA en lain;amación de la herida, la expresión de "5*+ se usó como unmarcador de la in/ltración de monocitos. "5*+ expresión de laproteína se redu1o signi/cati0amente despu7s del tratamiento AuAdesde el día 6 hasta el día 8 despu7s de la lesión ( Migura * , B ). Laexpresión de E52, sin em3argo, aumentó signi/cati0amentedespu7s de AuA tratamiento (Migura * , C ). stos resultadosindicaron que AuA no sólo reduce la in;amación alrededor del áreade la herida, sino tam3i7n inhi3ió el estr7s oxidati0o despu7s de lalesión cutánea.

&a Figura 6.

C+91$ C+68$ y ?@+1 e/presión en te3ido de la erida de ratones tratados con AuEA. &os ratones se trataron con ve!culo o

AuEA para el n-mero indicado de d!as después de la lesión. uestras de la erida se retiró después y se sometieron a an4lisis

de inmunotransferencia. (A) la prote!na C+91 no difirió significativamente entre el ve!culo y el tratamiento AuEA después de la

lesión " n 6#. (B) la prote!na C+68 disminuyó significativamente después del tratamiento AuEA desde el d!a 9 asta el d!a =

después de la lesión " n 6#. (C) 5nmunotransferencias mostraron un aumento significativo del nivel de ?@+1 en el te3ido de la

piel desde el d!a 9 asta el d!a = después de la lesión " n 6#. &as ,arras ,lancas indican el tratamiento con ve!culo. &as

,arras negras indican el tratamiento AuEA. V P 0$1 en comparación con el ve!culo.







"iscusión

Alteración de la cicatri-ación de heridas sigue siendo un importantepro3lema de salud en los pacientes de alto riesgo con dia3etes,

supresión de la &unción inmune, o la 0e1e-. Por el desarrollo de lananotecnología, muchos nue0os nanomateriales con propiedades'nicas, tales como magnetismo, la electrónica # la &otónica estánsiendo cada 0e- más explotados. studios anteriores mostraron queAuNPs podrían aplicarse terap7uticamente para suministro de&ármacos o gen intra0ascular # percutánea. n este estudio hemosencontrado que la aplicación tópica de la me-cla de AuNPs, !"!, #ALA (AuA) era mucho más e/ca- que el !"! o ALA solo lapromoción de la proli&eración # la migración de los /3ro3lastosd7rmicos o queratinocitos. La aplicación tópica de AuA tam3i7n se

aceleró de manera e&ecti0a la curación de heridas # aumenta larestauración de las estructuras normales de te1ido d7rmico #epid7rmico en las áreas de heridas de ratón. stos resultados apo#anel papel potencial de AuNPs como un compuesto ad#u0ante en eltratamiento de heridas cutáneas.

l e&ecto de !"! # ALA en la curación de heridas cutáneas sedemostró en estudios anteriores. !"! induce la di&erenciación demio/3ro3lastos # crecimiento de te1ido con1unti0o de la expresióng7nica de los &actores # reduce la expresión del gen de colágeno de

tipo < en ratón heridas cutáneas. La aplicación tópica de poli&enolesdel t7 0erde aumentó signi/cati0amente la curación de las heridasda>o &otoquímico en la piel del ratón inducida por psoraleno #radiación ultra0ioleta A .ALA suplementación en com3inación con laterapia de oxígeno hiper3árico doInregulated las citoquinasin;amatorias en las heridas que no sanan de su1etos humanos. nratas con dia3etes inducida por estrepto-otocina, pretratamientointraperitoneal con 2CC mg de ácido 9 Jg lipoico (LA) me1oró lacicatri-ación de heridas por a3rasión posteriormente inducidos. 5eacuerdo con estos halla-gos, una com3inación de !"! # ALAtam3i7n mostró e&ectos 3ene/ciosos so3re la curación de heridas delratón en nuestros estudios. Gn estudio reciente demostró que la co%administración con AuNPs permite la entrega percutánea de &ármacosde proteínas. ugerimos que el ALA como antioxidante tam3i7naumenta la acti0idad antioxidante de !"!. Además, AuNPs puedeaumentar la a3sorción me-cla especí/ca tra07s de la piel mediante laapertura de la capa córnea de &orma transitoria. n consecuencia,AuA resultó en la herida 3ene/ciosos e&ectos en tanto in 0itro comoen estudios in 0i0o de curación.

La relación mecanicista entre la angiog7nesis # la curación de laherida ha sido el centro de muchas in0estigaciones. Literatura clínicareciente mostró que la administración de 3e0aci-uma3 a&ecta a la



curación de la herida de la pared torácica. sto sugiere de nue0o quela angiog7nesis tiene un papel importante en los procesos decicatri-ación de heridas. in em3argo, los e&ectos antiangiog7nicos de!"! # ALA se muestran en los estudios anteriores. studiosanteriores tam3i7n demostraron la &unción antiangiog7nica de !"!

en muchas líneas celulares de cáncer. !"! inhi3e la expresión deD!M, Ang%2, Ang%4 # proteínas en c7lulas de carcinoma de próstatahumano.l uso tópico de !"! disminu#ó la inducción de D!M # laexpresión del &actor induci3le por hipoxia 2$ en la piel humana.in#ección intraperitoneal de *C mg 9 Jg R % () %. ALA reduce Ang%4 #D!M expresión en la retina dia37tica de rata. n ciertos estudios, lasdosis no tóxicas de LA no mostraron inhi3ición del crecimiento en lasc7lulas endoteliales tumorales o stos resultados contro0ertidospueden indicar que las dosis de !"! # ALA determinar los e&ectosantiangiog7nicos. Los e&ectos antiangiog7nicos de AuNPs tam3i7n semuestran en 0arios estudios. AuNPs 3loqueado auto&os&orilacióninducida por D!M de los receptores de D!M%4. La in#ecciónintra0ítrea de AuNPs inhi3ió signi/cati0amente la neo0asculari-aciónretinal en un modelo de ratón de retinopatía del prematuro. AuNPstam3i7n inhi3ió la proli&eración de las c7lulas endoteliales retinianastratadas con D!M mediante el 3loqueo de las 0ías de se>ali-aciónrc. sos estudios indican que las dosis de estos compuestos5eterminar los e&ectos de la angiog7nesis o antiangiog7nesis. nnuestro estudio la com3inación de !"!, ALA, # AuNPs enconcentraciones especí/cas no aumentó signi/cati0amente laangiog7nesis en el ni0el molecular en el área de la herida cutánea delratón.

l estr7s oxidati0o se ha demostrado ser per1udicial para m'ltiplesprocesos celulares en la cicatri-ación de heridas.

Los e&ectos anti%in;amatorios # antioxidación de !"! # ALA sedemostraron en los estudios anteriores. Los datos pre0ios handemostrado e&ectos protectores de !"! # un antioxidante naturalclásico ALA contra el estr7s oxidati0o # el en0e1ecimiento.!"! se hademostrado que tiene e&ectos antiin;amatorios potentes. Laadministración oral de 2.4CC mg de LA a pacientes con esclerosism'ltiple resultó en anti% signi/cati0a e&ectos in;amatorios mediantela acti0ación del mono&os&ato de adenosina 9 proteína quinasa Acíclico cascada de se>ali-ación. "ompuestos de oro tam3i7n hanreci3ido mucha atención como un agente anti%in;amatorio de3ido asu capacidad para inhi3ir la expresión de NM%Jappa # reaccionesin;amatorias posteriores. "ompuestos de oro son e/caces en templeespecies reacti0as de oxígeno en una &orma dependiente de la

dosis. AuNPs catali-adas oxidación de NA5 a NA5, me1oran laacti0idad antioxidante de la 0itamina , disminución de especiesreacti0as de oxígeno inducidas en una línea celular de hepatoma, # la&ormación de osteoclastos inhi3e inducida por el acti0ador del



receptor de ligando NM%Jappa en los macró&agos deri0ados dem7dula ósea. n nuestro estudio, la disminución de la expresión de"5*+ # el aumento de la expresión de E52 alrededor del área de laherida sugieren que los e&ectos anti%in;amatorios # antioxidantes deAuA pueden tener un papel en la cicatri-ación de heridas cutáneas

de ratón.

n conclusión, hemos demostrado claramente que AuA aumentós*+ # a"a proli&eración de c7lulas # la migración. Por otra parte,nuestro estudio proporciona in&ormación so3re la acción molecular deAuA en un modelo de cicatri-ación de heridas cutáneas ratón. steestudio mostró que AuNPs com3inado con !"! # ALA aceleransigni/cati0amente la curación de heridas cutáneas en ratones. LasAuNPs carga negati0a acumulada en los órganos más AuNPs cargapositi0a despu7s de la administración oral en un modelo de rata. enecesitan más estudios so3re AuNPs carga positi0a para con/rmar lose&ectos de la administración percutánea. in em3argo, nuestrosresultados proporcionan una 3ase para el desarrollo &uturo de lame-cla AuNPs con otros agentes antioxidantes en el tratamientotópico de las heridas cutánea



i3liogra&ía

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pp. =98>=*6

H. im$ T. aIa7oe$ +; Han$ . atsumara$ ?. ?u7uDi$ ?. Tsutsumi$ ?H Hyon

Enhanced cicatrización de la herida por una esponja de colágeno incorporado

galato de epigalocatequina-en ratones dia!ticos

?. Cigurupati$ T< Arumugam$ T% Hi3o$ + &atia$ ?. ameel$ ugal$ et al

"articipación de se#alización $otch en la cicatrización de heridas, )&o? @ne$ 2

"2=#$ p. E116=

nanoparticulas de oro

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