がん治療のあゆみadvances in cancer treatment がん治療のあゆみ...
TRANSCRIPT
Advances in Cancer Treatmentがん治療のあゆみ2018/第38回一般研究助成
公益財団法人 がん集学的治療研究財団3838
� � �
��� � � � �
��������� ������������� ������������������������ �� �!"�#$��%&'(#$��)�*��+,*��-.�����/�%�0123��45�6��78�������%2�9:;<�=��>>�?���@�A%BC���DE�F�%2G(HIJ�A�C9(����K����� �=JFMC �?�-KL��
����("2�K����� ����AL>9MN%�-K%2OA%BCP(���Q��RST�RUL����F�VW�%2��!12X,A�CG(���V� ����L��������� ��V�YJ %�!Z�����[���%2"A�C"����9:;<����#\YJ�V� ����F�R]%�P<9;�AL�G:�^L_�P�G;: �
a �bc�V� �$defgLhi�!Z%Bj��k:l �%%2�&mno>�9n<'p����!12A",A%BC%(q)����a*�r+�E,s�tu���v���� �L�����,�� ��B�wx#$�-.�yz��B{� ��#$��%"u/0��1|}~����������2��"�34R��5@���6 ��E�� �0�A�2"A�C"7X8c%A%Bt���9�G;�v��:�P:�;b<$� ����=�L�Ca `>k;`�?YJh$@�Bn`�b<L�,�"��0��3��������@A� �L�C%(B�0CD���EF���G�H�I���L��J�K%B �LML�NO"j��PJ�2"A�C"�~�"���9:;<����#\YJR]%BtV� ����Fv� ¡�¢&£Q��¤iE=�¥L��L�¦§RSc�x¨"L�C@J��#���%2��©AL-K%2OB��ª«�TUV=�0��%2�¬���®=DB?
�F�!s����N%2"A�C¯©°�±¬��W�@�2"A����/0�� DB²�X�iYE³g´µ¶·�Z[�E,����F��P<9;��¸\]^_��*�¬���®Z[�F�%2¹`@�A%BCX�#�����EFu�a�²����% Phaseºª«��{9P�<<<b»��TUV=�¼@�
2X,����V½� DB²����L�c3¾¿c��2%2"� ACCENT¬���®=jFua�²������c3�¿À���ª« DB?��_%B"�dw2"A�C��ª«�TUV=�*"BEÁd¬���®L��eb>��@�LM�f/@�\Y%�µÃÄ´µ��g#h¾��i¾�Å�+�/0�*��Æ"E��jÇ�� ����L���3�¿c�EFu�\0���ÈE�Y�Æs�Y�"s���k)�lw�É��L�E"Y��5%2"A�C�|��:�G<�;�V� ���[Ê<Ë������Ìmf�$dÍnL¦opSOA%B$def�@\q�0¦�rÎ,A%B���s+,ÏÐt%�IA�CAB�¦ÑÒ�Î,A%B������� �guvwÓwÓ��Ôxy@\���sYJ�Õz�t%�IA�C��B ��{|��b<$�qÖ�¦{}"B×OA%BK�J~$�@\q��&�qÖ��p��#$@��V�dw�������ØI2!c�x¨"L�C©|�0#��Ù�¦Ú��¦Û��Î,A�+s�Ü�Ý%&XÞ"t%�IA�C
:�G9�GßG97
� � � � � �
�������
���� � � �
������������������
!"#$�%&'()*+,-$./0123456789:�;�1���<5�&=>?4)<�@A��B�)<CDE/FGHI>JK&L%4)<MN4OPQ�RSTU/L%4����VW�&RXYZ��%[B\A��B�]4RXYZKF&^ YZ4_`�YZ+ab.[U0YZcd�eDBf YZKgh�ij[�%i/���]4��kl�RSTK5m�&n1>oHpJ�qpIr��������st���B����+�u`b�#vwxy�zd�{|%&}~�YZ�{[��B��4���xR�F&������������&���������&���%i/���]4kl&�?4)<"#��� !��$�%�R����&��@A��B�
��������1����ij[����� ��$.1`¡���¢£+&>¤¥4¦§¨�%��kl�©ª�%[B\A����B&��y«�©ª��1¬�F2+£56789��®���:4���¯B°����%@±
U0ij[�������4²³�´µ1$$¡�&®`b4���+3489���¶·¸&¹�º»�%[1¡4$¼½�%i/���¦®F�¾¿ÀK�4K&acknowledgement�W�By«�Á{[B\±�$F&ÂÃ.ÄÅ�Æ|%i/���Ç¥�./��B+&����1�È4���&ÉrF¦Ê�iDK$0�Ë[����B�4ÌÍb
�[�����¼Î[B\A��BÏÐѪÒ4����¡&Ó±iÔ�������
������� �
��� ������������������������������� � �
���������������������� ����� ���� � � � �
� !"#$%&'()"*%+,'-./0.123 4 5 6�� ���������� ��
�789: DNA;<=>?*@ABC*DEFGH%I,'�� A J K�L�� ��������������������
�IDHMNOPQR, DNASTUVNWFXYZ[\]^%_ abc/0dFef
g h i j����� !������"�#$�%&'���()
�kWl*%mn'opqrpstuvwFUxXy z { | }����*+,-��"�./01��23�
�~���789: DNA;<=>�����p��t�F��%_ a���x������*%+,'���/0F��W�F��
� � �����45�����"�6#$�����78
���� ¡¢£�;¤,'¥�¦§¨©oª«¬w® �°s;±<²>³ µ*%+,'bc¶·¸/0Fef
¹ º » Y����������9:����
����������� ���������
�� ��
�� ��������� ��������������������������� !"LMR#$%&'('
)��*+,-./0��1�2�345�67��8 9�:;�����<=>�?�����@A��
/BC��D�EFG�/�H3����MLR#IEJKL"n=MN)O>PMLR#QEJKL"n=FEG)O��MELDRSTU
����1�������P5"��V�WXY��ZD�[�\�]5^_`����aL��b�@c�>PMLR
Odef�MLRO`g�h�KFJijdefMLJGj`k7��l�WXY��ZD�#n=KE)`�"�aL��b�@
c�>PMLROdef�MLRO`g�h�mLJEjdefnnJmj`ko"� LMR> [p��b�qrst�uv`k
7��l�� LMRO`>wx�d��[ CD3yCD68�9?����`k7��LMR>�*+,-./�z�st
`ko"@A���e2C�����{�|�� }~ ���!�st`k�
� � � �
FMMN��"�l`"���������>L�@c� iNj�a3���#$`ko%|�>�����k�>����#� `k3��������"FMMG��Mazzaferro�F)�eo&����WXY�����>"���������/����3�8 `k�3/���:���������"1����3~����`>�ab���$R�O��Z>'�`>�5"g��(���)����1�����/^��� ���&����{7����>1� QLcm�v PIVKA�IIQiNNmAUyml�D�¡Z���/���� 3�¢~��E)/&��"1�����/£¤������3`@(V�¥9*/�+�"b�D�/eo¦§�,¨��3�8 `k�3/&����Kaido�i)[1��FN�¡-�v1� ~ ©Lcc�v PIVKA�II©nNNmAUyml/�������� ��3�ª.��//«�"g���`>0¬®U�1¯D�/�Z��3�eo"$°���/2�3�8 `k3&����������"�±���²��[��ab�D�>c³�"l����e|�´µ/�Z���D��c³[34>`���¶·`ko"(���)"1������v¸����)�¹��������¶·`k���%��>�a��b�/º»�,¨`�[�`>��� ! Yangn)��eo"LMR#lymphocyte monocyte ratio"$%&'(')������¼�ab��½5�6st`k�3�&���"1�*+�5¾,-.�1���¿32����>|�ab�345�67��8 9�:;�����*+5¾-.�67�"g�8À3��a��b���6o����9�����3/ÁÂ���
�
�<=>FMMK�KÃ��ENFm�LÃl`�¢Ä~VůÆÇÈÉZÊ��@A��/BC���ËÌÍÎÏ%Ð�ÑÒ"��V���?���c³�9��3�7�EFG�/�H3������������ >"1� QLcm�v PIVKA�IIQiNNmAUyml�D�¡Z���/���� 3�¢~��i)3�"WXY��ZD�����[Ó1��%ÔÕ�Ö×S%Ø%Ð��Ù��%\�2���Ú:r� Z`>k�|�� 3���»��@A��D�>¢Ä~V��� Ûܵ��Ý;��
�¢Ä~V�Þ Å¯ÆÇÈÉZÊ
� _ | � � k ß � 1
� � � LMR��n=��
� LMR��n=� p�
��������� ������������������ ���������GV�SLV���MELD ScoreChild Pugh CHCV�Ab���AFP�ng�mL�PIVKA�II�mAU�mL� !"�cm� !#$�#�%&'(�)*+,
-.�/0123�45�-2
3-�/614/�2-�-57-��
8076�/47214274�0/�61/4�42�-37/��.2�4570��/8.�/1.622�004�3105/.�/76�61474�8�61066�32�/578��
-2�80124�--�3-
34�/614/�8.�-373��
867-�/3741-278�0-�/133�44�2373��4/�4.75��
048/�0183062�-./�2103450�/73�61276�04�61866�3-�3.75��
67/4673-672-678367489676096760675.676096760670.676/6708
:;<'�� !"�cm� !#$�#�=>?@AB:;<'(�)*+,
/70�6127.�4�61003�5-�2-78��-0�867-��
/7-�67/72�05�0183.�40�427.��-8�4676��
6760676/67/096760
�� � LMR���� LMR��� ����������
� � ��� �����Odds� p� Odds� p�
� �C46������HBs�Ag���HCV�Ab���Child CMELD score�C/6�AFP�C-66ng�mL�PIVKA II�C066mAU�mL� !"�C3cm� !#$�C8�DEF=>?@G NLR�H/72-�D LMR�9/72-�
07442/758.67..670/2672-/87245675/80765/0760207425675-8/733067422387.//
67/.676367..670/67-5676067.267.-675467/26750676.67-096760
07/506750/672.67---6732-37625072/.0758307564/7/2437222/74-0/7.88870/.
674.67.267.867-0670-67/66734673067/067046768670.6705676/
�� ��������� !"��#�$%����
IJKLAMN
� �
OPQRSTUVOWXYZ[I\]����JKY^G LMR_�H/72- n=0/4�`D LMR_�9/72- n=56�a/_QEb^��:;<'cd��efg^UhiYjkSINlImnop�n=044�QeqT^rst�CD3�`uvw�x�y�CD68�Yz{|}F<~�QT��S^LMR�`a��Y��SIN��QWX�OP��JKQebM����`STa LMRa�����QZ[IN�������Y�q^��<'��`ST Chi�square��^Kaplan�Meier�efg Log�rank��^CoxjK������Y�qIN
2 UVOWXQfM�ZOPQR�M����� ¡¢
�� � LMR���� LMR���� ��� T������������������
� �
� LMR������n=��� �� LMR������n=�� ��������������� !"#$%&'()*�MLR�+�MLR��#,MELD score��vs.��p����� -�.Child C/0��1�12 vs.1��2p����� %3.4567 AFP���8�ng9mL vs.�8:ng9mLp=���� pIVKAII�:�mAU9ml vs.���mAU9mlp����� -�.;<=>?"@ABC���vs.8p����� -DE���FG�3HI�-JKL�M'(NOP;<=>?"@AQRST�H+UVWXYZ/0#[�+FG\+]^ML'(N_(���� !�`,a+�MLR�+�MLR��#,����@AS���cm vs.���cmp=���� -Rb.@ABC���B vs.�Bp=���� -3.cdef[�+FG\+]^ML'(g""����UVWXYZ/0�����2 vs.8��2p����� %FG�3.4hI�-JKL�M'(�i� Njklmnopqr[+�MLR�����MLR�stuvu���12������2�p����� jklmqr[+tuvu�8��2�������2�p����� sT'(N_(UVWXYZ/0�n=�� �w'axyz��jklmnopqr[+�MLR�����MLR�stuvu:��2���88�:2�p����� jklmqr[+tuvu:���2���1:�82�p����� sT'(N{K�UVWXYZ/0�n=�� ����|l}~ !�`,a3��xy%&���qr[�`,a+���Odds# ���8:p=���1 MELD����Odds# 8����p=���� � LMR�Odds# 8�:��p����� -��� !�,a_(nopqr�`,a+���������"4F�Odds# 1����p=���8 ���� LMR�Odds# 8���:p=���� -��� !�,a��{u� LMR����� +��|l}~ !sT�I�-JKL�M'(N_(�MLR��n=�� ����MLR��n=�� ��Ha CD3��� CD68"�����atuvu@A����C����������C%� z��� LMR�s+¡¢��HaFG� CD3£���-¤M.�p���� CD68£��������%3.4h�p=���1 I�-JKL�M'(�i� N
¥jkl"¥¦op+��0�]^§op¨©+ª�n=� �«¬�n=� ®�n= ¥¯�n=8 °±�n=1 ���²³�n=� sT'(Nopl/0"m�����mqr[+tuvu1:�:2���11��2sT'(�i� Nop/0"´sgop¨%Zµ�¶·¸¹sT'(/0"mqr[+8��2�¶·º¹/0"mqr[+�2sT�"�#,FG�»¼sT'(�p�����i� Nopl"qr�`,a+op½ AFP�1��ng9mL�p=���� � LMR����� Zµ�op¾"¶·M,�p����� -¿"��� !�,a4_uaH(�À1 N
- Á Â Ã " T Ä 5 3
�� ������� ������������������������ !�"�
� � ����� p� � ������������ ��������������������� �AFP!"#$%&''ng(mlPIVKA!"#$%&''mAU(mlLMR ) *+,-./0"#123456�7"#08�"#9:;
-&+&-&+<=-+,4>+,*,+&-&+&'''**+<4*+*=4+,
=,+=&&+=-'+-&?+4*-'*?+=&4+==&+<&&+&=''
'+->'+<-'+>4'+=='+=?'+'4'+'4'+4*)'+'4'+>?'+'>)'+'4
#$ �%&����������'(�)*
� �
@ABC�DE.FGHIJ.12KLMN��OPQRSTUVOWXSY7Z[\]7^_�`aWb�cWb�deWXfTb�g�h�C^_RSTiVjkl.12CaWmnEklop�qop�GIJ[irstTuvw7xiyzE�`O{�fTiJVtW|}~�G"#�Jia�"#q��CUJ|rE��O�BSTiV4$�&$j���Y�GfV LMRaWb�7����G��J����[iriBBCGEi�fi���Yb�7��q���Jia��IJg�h�C�}WX7��G{fTa��G��RSTiJjb�O�_IJ���h�� ¡¢h��a£¤7¥¦q§¨IJ©[G|}b�7ª«q��JOW
X7¬Cb�G®¯IJu�°±a²b��G³UWRYGu�b�7²´µq¶µ�IJ©[OPQRSTiJ-$jBV·Gu�°±O@¸fTiJ¹ºa.F7"#G{�IJ©[»PQRSTiJ<$j¼½¾CaW£¤7u�°±gw �¿�ÀÁa�ÂÃ7ÄÁ[��G�ÅGÆ{fT�}W�ÂÃ7LMR7�ÇOF£¤7{Èq�ÉCUJ©[a��GÊËÌij�ÂÃGÍAIJαab�{gw �¿�ÀG �IJ©[CF7#k ª«Ï1G{ÐÑTiJ©[»�Y�[EÑTiJ,$jX7ÒhÓÔÕG{fTaWb�{gw �¿�ÀOb�Ö×[[»G PDL4qØfTÙÚÖ×GHfTÛ�G³iTiJ[irPQ»�J?$j
4 kl.12G|JªÜ.FGHIJÝKÞ�KLß
� � � �
���������� ������������ LMR�������� !"�������#$%&'()*+,�� -).,�/012�3LMR�45���6�7�����,�89:;9<=>?@�.AB/012�3
� �
CDMazzaferro V, Regalia E, Doci R, Andreola S, pulvirenti A, Bozzetti F, Montalto F, Ammatuna M,Morabito A, Gennari L : Liver transplantation for the treatment of small hepatocellular carcinomasin patients with cirrhosis. N Engl J Med 334EFGH�G�CGGFI
JDTaketomi A, Sanefuji K, Soejima Y, Yoshizumi T, Uhciyama H, Ikegami T, Harada N, Yamashita Y,Sugimachi K, Kayashima H, Iguchi T, Maehara Y : Impact of des�gamma�carboxy prothrombinand tumor size on the recurrence of hepatocellular carcinoma after living donor liver transplanta-tion. Transplantation 87EKHC�L�JMMGI
HDKaido T, Ogawa K, Mori A, Fujimoto Y, Ito T, Tomiyama K, Takada Y, Uemoto S : Usefulness ofthe Kyoto criteria as expanded selection criteria for liver transplantation for hepatocellular carci-noma. Surgery 154ECMKH�FM�JMCHI
NDYang T, Zhu J, Zhao L, Mai K, Ye J, Huang S, Zhao Y : Lymphocyte to monocyte ratio and neutro-phil to lymphocyte ratio are superior inflammation�based predictors of recurrence in patients withhepatocellular carcinoma after hepatic resection. J Surg Oncol 115ELCO�JO�JMCLI
KDYao W, He JC, Yang Y, Wang JM, Qian YW, Yang T, Ji L : The prognostic value of tumor-infiltrating lymphocytes in hepatocellular carcinoma : a systematic review and meta-analysis. SciRep 7ELKJK�JMCLI
FDSasaki A, Iwashita Y, Shibata K, Matsumoto T, Ohta M, Kitano S : prognostic value of preoperativeperipheral blood monocyte count in patients with hepatocellular carcinoma. Surgery 139ELKK�FN�JMMFI
LDNagai S, Abouljoud MS, Kazimi M, Brown KA, Moonka D, Yoshida A : peritransplant lymphopeniais a novel prognostic factor in recurrence of hepatocellular carcinoma after liver transplantation.Transplantation 97EFGN�LMC�JMCNI
ODKuang DM, Zhao Q, peng C, Xu J, Zhang Jp, Wu C, Zheng L : Activated monocytes in peritumoralstroma of hepatocellular carcinoma foster immune privilege and disease progression through pD-L1. J Exp Med 206ECHJL�HL�JMMGI
P Q : ; 2 R S 5
���� DNA����� ��������������
�� ����
�� ���������� ������������������������������� !"#
$%!&�����'�()*�+!,- ./ 0�����!1� ��234�5�6!��7�89:
;'�5�62<�!��7�8�=��>?@A4BC�circulating tumor DNA2��3�D!EF��G 9:34�
��� ctDNA�>?@A4H�������I� �J4��K� ctDNA�>?@A4H�L����>?/ M
N2$O4BC�I�$P��QR,����O4��� ctDNA./ !I��ST7�U��V�!�W
�I�0�XYZ�&�[\]\^"UL_J`aQ! bI�!�S����O4�
� � � �
�����!I��!�� cd4ef�%!"ghi��R3`'�������#jGk$�!l%Gm$ no�pP�=� circulating tumor DNAXMN�ctDNA^ &'`I�.qrst ��aQ����� 2 ��234�u4�ctDNA vwx[\]\23`'&3�V�!I�0��"UL�./ �y(�)z{$0�� |*�� 2 ��234�
���
+}���� ~;3�,-,Q IIIA�O4ef ��234���#jGk$�!.�5�23`��0$�w��w��V'�~;!/0�"U�H� ��3$�O4��}�� ~;34��H���5�6 ��34�5�6!��[q��������123���\�\�����\[ws��w�s�����"U��4 ��3�DNA 5?34��� 6¡g��7!�¢s£�7¤X¥8¦h§¥ ©ª«^ 9:�� Assay¬ in house ®3�DNA>% ¯°±�\s¢�r9:�²34³^ g^����v��\µ\¶9� DNA��R·�4¬:�8 ¸�34#¹�=;9�! DNA���º!%�4�8 <»34���5�62<�!mutation ctDNA2�¼3�D!EF�½+ 9:34����PCR¢�\��\s¢�r¢�\R¾�=>8�$�8X¿?�^!>? @¹�&�9�!)A �8!./ >? ��2��B7v\µ\À��ÁÂ� Ã&3���>8�$ ctDNA >?34§^��K�³����.Ä���= ;'�=Å&�[\]\Æ"Ç ctDNA S�34���0$
CÈ!�W>É ;'�I�!/0�ÊËÌÍ�EÎÏÐ34�ctDNA�"��(���!>?� DÑ��4J�MN!DÑÒ� Ó�34��^ctDNA!/02I�/02!< �^I��ST7� ��Ô�E9:�^I�H��Æ'`�EF�$¨��A !½+ >F3�I��¸�Ë�FQ� 3`�YZ�
&�[\]\�ctDNA!gtÕGÖ>F
�×HØI�Ù,Ú ��ºÛÜÝÞ,��ß\
6 =�JK DNA &'4�����(���!>?� ����
PreoperativectDNA���
PreoperativectDNA�+� p value
Number of patientsMale/FemaleAgeSmoking habit smoker/non�smokerTumor sizeSurgical curativity curative/non�curativeHistology Ad/Sq/othersPathological vessel invasion
present/absentPathological lymphatic invasion
present/absentAdjuvant chemotherapy
performed/not performed
�������
����������
���� �����������
�����
�����
����
�� ��
��������
��������������
���
���
���
�NSNSNS����NSNS
NS
NS
NS
�� �� ctDNA����� �����
Variables HR����CI� p value��
� � �������
������
���ref���������
!"#$%!&'(
)*+�mm������������
��,-./0123
45)*67879:;<
45 ctDNA�=>=>
��Ref.��������� ���������������
��Ref.��?������ ?��������������
��Ref.��?���������������������?�� �
��Ref.�������?� ����������������
��Ref.�����������?�
��Ref.������� �����
��Ref.��?����� ��?���
� ����
���� �
������?
�� ���
�?�
���
�����
�� ��������������� !
� �
���@ IIIA'A!BC��DEFGHIJKLM��DNO��DPQRS4TUV=WX ctDNAE=>KLMctDNA=>YJ ctDNA�=>YXBCZ)*'[\E]^_`JO��O��O��aOb4cdeO�����O��,-./fg'32Ohij,klmn'32P3opEqrstuLvO)*+w ctDNA=>YX3oPxytuL�z�{|�M
v } d k ' ~ � � 7
�
�
�
�� ctDNA�����
�� ctDNA����n=��� ������ ctDNA���� ������������A�B������� ���!"#$% ctDNA ��&'( ����)��*+,�-.���/�����0�1234 56�789:;:�CEA SCC<= ��1>[email protected]�BCDE�B ctDNA1F�4 ��GH�IJ����"#KL"#�����MNOP�QR�-E����A�B���S� TUV1��BWX�Y.1Z.S� allele fraction�[\]^_` ���MNabc( QR�deA.fgB-E��A<bh ��1 ctDNA�����ij� ctDNA�kl�mIA.n�1op ��qr1���sIBtu�-.n�Bv&'��
8 w,xy DNA�z3�{|��}~|[����1FA.��
� �
�� ������� ����� ctDNA����� ����� ctDNA�����
�� ctDNA����������� ����������ctDNA������������������ !"#$%&��� ctDNA����������� ����������ctDNA�����'���()*������������� B"#$%������� ���+,�-.�/0�12(��345�6�p=7879$�� ctDNA���p:7877;$���</0������ C"#$%
� �
�=>������ ��>��?@�AB��97C���()D�����<E�FG�H���IJKLMNO5�PQRQSTUV���WX��YZ�[D% \]��CEASCC<^�_��5�PQRQ�[`�J�����a(�b�ctDNA���J�*D)��c�adefg�hi(�%���=�micro�jkl�mn( systemic disease�Ko��pq>��rN��st'u�-.� debulking�vw�x��<�Uc(p<D%b���� ctDNA���yp�J�c�����z�{a�<��J������|e�}��;8~���yp� ctDNA��������|)��������;7��7����$������������3���yp�~$%ctDNA����<������� �()* ��_����WX��cfz��!���<WX���t��$��$%3������f����������"���3�����#�������$���%��
tVp�%yV������WX�&D��� �¡'��%�<pqAB���QOL�¢£�¤<��Uc(p<D%¥¦(§¨©ª�«¬®¯°±��I²)c³´�µ¶�=�*+���·��,�()D�¸$%��f�����¹()��������UV(§¨©ª�«¬®¯°±�º)��<^�»�< �¼-c¦��½yp�;7$%�<¾¿ctDNA������=.o�/À�� �()*�Á������.o�²Â�0� ��Ãtq����������Ä � ��ÅÆ����%Ç���%
� � � �
\]������WX�Ä ��¢£��3����()È�cµÃÉ���%¦�»�<��ÊRl�ËÌQÍ��1(�=>�AB��� �ÎÏ�ÐZ��¢£�Ñ`yV�J12�µ|¦Ò2�ÓO�34�(�D��t)D�%
�
\]�Ô51D�Õ�ÔÖ×D�ÕD��ØÙ�� �\]ÚÛ�Ü6�zÝÞ(Sß&�%
� Ø � � � s ¶ 9
� �
��Goto T, Hirotsu Y, Mochizuki H, et al : Mutational analysis of multiple lung cancers : Discrimina-tion between primary and metastatic lung cancers by genomic profile. Oncotarget 8�������������
��Nakagomi T, Goto T, Hirotsu Y, et al : New therapeutic targets for pulmonary sarcomatoid carci-nomas based on their genomic and phylogenetic profiles. Oncotarget 9���� ��������
��Goto T, Hirotsu Y, Nakagomi T, et al : Detection of tumor�derived DNA dispersed in the airwayimproves the diagnostic accuracy of bronchoscopy for lung cancer. Oncotarget 8�����������
��Newman AM, Lovejoy AF, Klass DM, et al : Integrated digital error suppression for improved de-tection of circulating tumor DNA. Nat Biotechnol 34� �� �����
�Diehl F, Schmidt K, Choti MA, et al : Circulating mutant DNA to assess tumor dynamics. Nat Med14��� ������
��Chaudhuri AA, Chabon JJ, Lovejoy AF, et al : Early Detection of Molecular Residual Disease in Lo-calized Lung Cancer by circulating tumor DNA Profiling. Cancer Discov 7������������
�Dawson SJ, Tsui DW, Murtaza M, et al : Analysis of circulating tumor DNA to monitor metastaticbreast cancer. N Engl J Med 368�������������
��Tie J, Wang Y, Tomasetti C, et al : circulating tumor DNA analysis detects minimal residual dis-ease and predicts recurrence in patients with stage II colon cancer. Sci Transl Med 8����ra��������
��Antonia SJ, Villegas A, Daniel D, et al : Overall Survival with Durvalumab after Chemoradiother-apy in Stage III NSCLC. N Engl J Med 2018.
��Forde PM, Chaft JE, Pardoll DM : Neoadjuvant PD�1 Blockade in Resectable Lung Cancer. N EnglJ Med 379�e�������
10 ���� DNA������������� !"#$%&'(
IDH������� DNA��� �������������������
�� ���
�� ������ ������ IDH���� NAD+������������� !�"��# NAD+�$���%&'(���)*�+, ��� NAD+#-�.����� DNA/���#01�2( base excision re-
pair.�#3�45678�2( PARP#9:#�;��<� NAD+�-�=(>?@ABCDTMZE� NAD��FG
H#�����IJ+,K#L� IDH���M.�!�NO�P�Q���������R:��S+,� TUV�NO�W!H���X($YZ��[\!�Z��"]S+,^� NAD+��FGH#_`#$#+]#microparticle
�a%� � ?bV�NO�_`#$�X(\!�Z��)*�+,�S#L� IDH���M.�!�=(P�Q�����[c��#a%��d�+,
� � � �
e%:&f:!��2(M.�!�g'�(hi)���O[Ojk�2(,M.�!�=(c�lmAno���pq�c��*rs���lVtVuH�2(>?@ABCDTMZE#���vw#+xc���2(,TMZ�X( DNAylz5{|# O6}#~oVu�W+S=mismatch repair path-wayDMMRE#,-� DNA���./�"�0:�%�=(�1�����%�2%�2(,+�3 TMZ#1�#$�X� DNA# hypermutation�4�f:5u�./&(����6&�N� �#7�SW�+[ c��#����8�2(,�3#9�:[;QP����<�X��f:=M.�!���%:M.��!#%��� IDH�P�Q#����]����2(����& �����>=��C5���?�#7@����"]S�O(, ¡¢S��� IDH���M.�!#f:u�£¤(P�Q�¥¦�§¨©�)*��ª+DArita H, Tateishi K et al. Acta Neuropathol. 2013,Wakimoto H, Tateishi K et al. Clin Cancer Res. 2014E� �# IDH����«¬"���A& �1®¯°±²�u³��:�u�f:5u�£¤S´µ&(,�#���S IDH����+���+c��f:=�B¤´M.�!#CD[c���[(����E&(, ¡¢S� F¶�·��+¥¦C¸#k¢GHM.�!¹"�º��O� IDH���!�"��I�»�J¼��"�� NAD+���2(�� K#e½��� IDH����X� NAD+��#3�.�#¾¿�2( NAPRT��KÀ&(���)*�+,+�#eL�M��� NAD+��¾¿ NAMPT#���FGH� IDH���!�ÀÁ��]�C��2(�����+DTateishi K et al. Cancer Cell. 2015E,���[�S�NÂ#Ã��ÄO�+���ÅÆ: CZ:�^�Ç]+c��#���ÈP���{É�O(,NAD+��Q=(W#���ÊË#�� NAD+��.�����2(� R#�½��� NAD+-�.��ÌÍS(,�S�[ NAD+-�.���� DNA/��2�[ poly ADP�ribose polymeraseDPARPE#9:u[Î�ÌÍS(,ÊË# TMZ� O�ÏD���E#J[S´ylz5{|# N�� N�ÐDÑ��E}�W~oV|�TÒ=(��ÓS� PARP.�#9:�X�UÓ�/�&(Ô "�0:��Õ$�[O���VW��O(, ¡¢S��#/������� TMZ#$�X� PARPÖ×:� NAD
�ØXÙ�9�9�ÚÛ� �q &M.pq�ÜÝ
� Þ c � # 2 ß J 11
+��������� �IDH����������� TMZ� NAMPT������� �!�"#$�%&'(�)*+�,-.��/01�23�4567
� � � �
��in vitro ���IDH������� �� ���DNA89:;�< PARP�=�6 base excision repair>BER?@ single strand break repair�AB
CD double strand break��E� homologous recombination�TMZ� �FGHIJKL�MMRBM�N�7OP� IDH��������QRST��� TMZUV�,WRSXY#$�NAD+���PARPZYBM�*+�67[6 NAD+�\� PARP]^Y)�_C)�E�6`� PARP�����W6a!b����)*+�67��TMZ� NAMPT������������ !"�#$cdY IDH��������QRST�IDH�e�f�����QRST��W TMZ� NAMPT
������ �!�"#$� CellTiter�Gloghij� *+�67[6��� �RSc NAD+k��\� NADlNADmghijnho��W *+�67%�&' IDH�����()�*+,-./��#$� IDH����Ipqr�)_C)�E�s��tuvC�w��6xoyzj{|}~�� IDH���&��������QRST>MGG18�IDH1 �R132H?��W RSXY#$�NAD+�\�*+�67[6 NAPRT�����H��������!�"#$�N�)*+�670���� !"�MMR123MGMT 45678��9: �;*<�#$��#$� TMZ�Y���E�MMR�����@MGMT ���������FGHb�����
'(�)*+E�6`MGMT �FGHb��FGHbRS��W MSH6 ����H����!�"#$�*+�67=���� >?@AB�#$RSXY�g�o���]^Y) �o¡¢£�]^Y)*+�67FACS�western blotting¤�
¥¦E���r�g�o���� �o¡¢£����� RSXY#$��E�a!�§C(�)*+�67�in vivo ��TMZ� NAMPT���� ���¨¤� IDH����"\©��H��E�!�"#$��ªE�)�«�< NAMPT���¬�®r���#$�§C(�)*+�67
� � � �
��in vitro ����IDH������� �� ���IDH��������QRS��� TMZ�UV�6�.¯�°±]^Y�RSXY�~�E�.��
²_�676³�RS%´��#$<µ¶2·¸����.(< TMZ�¹º��>MMR]^Y� futilemismatch repair:;?� �r��»¼C(67½¾ TMZUV¿L ÀÁÂ÷c�RSc PARPZY�ÄÅ��r�ÆÇÈ©®N� poly ADP�ribose>PAR?�ÉÊ�È�'(6>Ë�?7«�< PARPZY��\� NAD+������.��²_�6>ËÌ?7.(C��Í< PARP���®N� olaparib� a!���6.�)C PARPZY]^Y®N�.��²_�67.�.�< TMZUVLÎÏ���� DNAFGHIJK��E�89:;�ÐÑ3BÒ¨Ó3�BÀ-�.��ÔÕE�Ö$®N×67
12 IDH����ØÙE DNA89:;�b�¥_�Ú�ÛÜ�IpqÝÞÒ¨¤�ß�
�� TMZ���� PAR��� �� TMZ�� ������� NAD+���
�� ��� IDH������� !"#�$%� NAMPT&'() TMZ*+�,�-�./0
�1 ��� IDH������� !"#�$%� NAMPT&'()TMZ2345*+6�7�� NAD+���
��TMZ� NAMPT������ �������������� IDH���� ��������MGG����MGG����BT����IDH������������ HT���� !"# TMZ$ NAMPT%&' ()*+$,-�"./0���1"#2TMZ03456�� NAMPT%&'$07!89:;<�,$:=>*+?@ABC,0DEF IDH�G;H�� ��������MGG����A��������I��FJKL/MNO+,$NL�PMQ$2 IDH�����1"#F TMZ$ NAMPT%&'07!89:RS�T�,$:UVW/+CX+NAD+F NAMPT%&'�TMZYZ$[\*�7!]�F^_�`aW/�,$:7b#=>*+?@�BC
����� IDH ��������� !"MGG���IDH�R�A�cd UACC��I�IDH���� ef*7!89 gh*+$,-�^a IDH��
����1"# NAMPT%&'0ij�:kX�,$�l�F TMZ$07!89:mn�JKL/�,$:>LN�MO+?@�BCl� UACC��I����o* shRNA !"# NAPRT� `a*+$,-^a IDH�����pq�r8$st*+DE:JKL/+,$NL���u�89F IDH���v� NAPRT�wD0`a:x)*#"�,$:>LN�MO+C,/�vy NAMPT%&'$TMZ07!z{F IDH���� ��1"#|�m!M}z{���,$:~�qL/+C
: � } z 0 � � � 13
�� ���� IDH��� ����� �����IDH��� ���IDH�R���H������ ��GFP�!"#$ NAMPT%&'()*+ TMZ��,-.!"#$/0123�45
�6 789 IDH�01�HT�:;:�<-=>?@ ��!A#$/0123�45
�������MMR�� MGMT����������������MGMT�����MGG��������HT�� ����������MMR��������MSH6 ��� !TMZ"#��$%��&' �()*+,������ TMZ- NAMPT./0,1�23�45 �-)6!�7*89:;<=>�*�)-=?@ �(),)-A TMZ"#BCDEFGHIJKL��8),1�23,;<=MNO*�8,��P�(��������� !�����Q#�RSTU- � VWXYZ[WK��\�]^_`=ab ���(c�deXWfg�
hi#���)-8?@ �(O+KVWXYZ[W./0����-)6��Q#;<K��=jk�)-l+��Q#A NAD+mnKoP�jk� ATPpjqrKst\�VWXYZ[WKo�8,-uv+*�(��in vivo ��TMZ-1�\�)-�!qwx NAMPT./0y2=zwxr�,y2;<-{|,}J~;<=�
+*�l IDH���!�j��������45 �(IDH���J~K� ��K NAD+���� �-)6!zwx NAMPT./0-�� TMZ-���wx, NAMPT./0�{���, NAD+qr=J~����jk���)-=?@ �(),wx������g IDH�J~K� �}J~;<=jk�l45 �-)6!NAMPT./0!TMZ��y2-�� �1�23�A���}J~;<=jk�)-=?@ ����(�� IDH��j�J~�A}J~;<A��+*�lP�(
� �
)*c�, ¡BC¢ ¡Ko£!NAMPT./0A IDH���FGHJK�\�¤���¥¦��
14 IDH���=B§\ DNA¨©ª«��,¬@-'®¯K°±²³´y23,µ_
��������� �����Tateishi K et al. Cancer Res. 2017������ IDH������������ !"#�$%&'(�)#*+,���-.��/�+,��01+ NAMPT234�56�78$�9� �:;<=$>?@��56�AB��C=DEF%&�GH�IJ�,���KLM�N?OPQRS�T���U!V#*4+,� TMZ NAMPT234�W&#*�N?@IDH���SX�T�$N?YZ�[SX��\]��^��_@NAMPT234�`a�$/bc�YZ�de56\]��f��������N?YZ+ 7gh6�i8)#j8��kl'(���mn<o�p�+,��01+qm��rs)#�GH+,��tu<=��v@wx�y�56�z`����{���|},���~���� IDH���OPQRS������������ �@NAMPT234��������{:�|},�����+MIT��bLM��8����&�microparticle�l��@����SX�����������[SX���v�=��Shankar GM et al. PNAS. 2018���=�N?wx����� IDH���OPQS�T��EF%&�7��������LM{����$8��
� �
IDH���OPQS�T� TMZ NAMPT234�W&#*�����������)#*+,��
� � � �
��Shankar GM, Kirtane AR, Tateishi K et al : �Genotype�targeted local therapy of glioma.� Proc NatlAcad Sci U S A 115�36�� ¡¡ �¢£@¤¥�¦§
¤�Tateishi K, Higuchi F, Miller JJ et al : �Alkylating chemotherapeutic temozolomide induces meta-bolic stress in IDH1 mutant cancers and potentiates NAD+ depletion�induced cytotoxicity.� CancerRes 77�15��£�¥¤�� @¤¥�¦§
¡�Tateishi K, Wakimoto H, Cahill DP : �IDH1 mutation and WHO 2016 diagnostic criteria for adultdiffuse gliomas : Advances in Surgical Strategy. � Neurosurgery 1 ; 64�CN_suppl_1���¡£� @¤¥�¦§
© ) # � , ª ^ 15
��������� �����������
�� ���
�� IL�6����� ������ JAK�STAT3����������������� !�� ������
Src�YAP��"�#��$%&'(����)�"�*� +,-./���012�3�012%&'45�67�
Src�YAP��� JAK�STAT3��891:;�<"=>'?�@"�A�� +BC$DEFGH'4I��
3�JK L APCMN'OP Src�YAP��� JAK�STAT3���891QR�@"�#� +Q=' Src�YAP�
�� JAK�STAT3��"STU��V'�J?�@�WU��'�X�Y$�3��Z�3�[��3\�]^"OP
_`A'�J�a�@�=>�!b +SrcSTU� JAKSTU�?�'c��d�����efg'h�QR P�
di�jkR P��I�+l m�,-./n`�opq�rs�tuv'jw)��x��vyQR�+
� � � �
Y$�3��Z�3!z012�3'O�{���|}���~��uv��R���Ad����A���x�������j�3��3%�����'1����jkR�l_`���A���+ ������ �� ���G�pSTU�� PD�1�PD�L1��������QR�I�����F��!z��!�!n`���I�c"���Y$�3���BP_`�!I@��*QR�I�+#967����3�&����$��' ���I�@�O�¡=R�4P�l¢�t679£Gp¤G� IL�6�Ya!<"` ��I�@�¡=R�I�¥�¦�+IL�6����� ������ JAK�STAT3���������������� Src�YAP��
"�#��$%&'(����@"�*� §�+����679$fg�Y$�3�891��I� IL�6�gp130���"$¨%\�&©A'891Qª� m�gp130«¬A89'©�679®¯(g�>=�#QR '©�"�I��$¨%\�&©A! gp130p��°± ²���³°�Villin�gp130 Tg�³°�"´µ� +Villin�gp130 Tg�³°)¶�����$�·�¸�!P�]^��I�*¹!$¨%\�]º�+,\��»¼�p\��-\��½¾"�m�$6¿À�$6Á�9"Â� +l)¶"ÃaÄ)?�¤²ÅÆ����gp130Ç.� JAK�STAT3���'ºÈ�Src�YAP�Notch�Iw����891��I�@"�#� +$6Á�9'4I�t�gp130Ç.�JAK�STAT3���'ºÈ�Src�YAP�Notch����(�!/a"` ��I�@"=>'��Src�YAP����679$fgcÉ����Ê��0g�$�t891��I�@"Ë�� +����#� IL�6�gp130�Src�YAP����Ì67Í�Ì%&Í"Î!Ï�Ð��� Ñ������ÒÈ=R�+%&"Ó�?��������3'4I�t891��I�@�¡=R�4P�)�����
3'4I�t891��IR���3��Id�1A'!�x�9���+2./���012�3�012%&'45�674OÔ Src�YAP��<"=>'���Ð�3d�1AÕd��"�#�����IÖ�Ad�"×Ø?�@"�A���./"jb +
�Ù3ÚÛY�Ü�� 4&5�Õ ��
16 012Ý'45�£Gp¤G����:�Þß
�� ������� � STAT3�Src����� YAP���
� �
��������� ��������������������������� �!"#$�%&'( Src�YAP)* � �!+,-./�01)*��234567�'�01�89:;<89=4>?@�A4B;C'���DE�FG������� Src�YAP)*�,-HIJKL<23�M5�NG������� Src�YAP)*�23�M5�4OP'(Q��R=C'S�T�UV �WXYZ[\���UV]����^_`4abScd4ef(Q
��������� Src�YAP ����������������^_`�WXYZ[\�gh����UV] TE�1�TE�5�TE�8�TE�11��gh����UV]
Panc�1CMiaPaCa�2�4abS�Src�YAP)*� JAK�STAT3)*�,-'Sb�74_i`jklmnh=�Sop'(Qq(����UV]�����UV]�rs�t@� SrcuvwC JAKuvw�xy4MTT assay�op'(Qz{;���|}UV]4~� well���h���'��UV����� SF �I�[�4�a'�UV�rs��4��op'(QSrcuvwC'S AZD0530 Selleck�C Dasatinib LC laboratories��JAKuvwC'S AZD1480 Selleck�4�a'(Q
��������� Src�YAP ��������X�[k�%�-����X4abS�Src�YAP)*�,- �X�[k�����F�����FN�N��
�N���� �j[L¡�`�4op'(Q�¢£� C¤�BL¥�^_ H`���X�[k Sigma�¤�ug¥kg4F� ¦C��§¨©ª«¬���'��-��4�'(Q§®'(¯k�X4ab�_i`jklmnh=C°±²³´µ¶=�S�Src�YAP)*� JAK�STAT3)*�,-4op'(Q
� �
��������� Src�YAP �����������������WXYZ[\��bS�Src�YAP)*C JAK�STAT3)*�·�,-���¸¹º»¼ APC
adenomatous polyposis coli��½¾�!+¿À�A�Á7f(��Q.6�gh����UV]�����UV]��bS�SrcC STAT3�,-C YAP�%Â4ÃÄ( ÅF�ÅN�Å��QPanc�1���� YAP�%Â� Src�ÆÇ;�Èf( Å��Qq(����UV]� SrcC STAT3�,-4 Srcuvw AZD�¤���!" Dasatinib�C JAKuvw AZDF�����É/Ê/¸¹@�CUVrs�¸¹./( Å��Q.6�É�¸¹xy� SrcuvwC JAKuvw�Ëa�!+rÌ'( Å��Qq(����UV]����uvwcd��bSÍ·Î�Ïy�Ð6/( Ť�Q
� � 8 9 � È Ñ Ò 17
�� ������� � STAT3�Src����
�� ������� � YAP���
�� ������� ����������
18 ��������� �����������
�� ������� �����������
�� ������ �!�"#$� STAT3%Src�&'() YAP�*+,-
�. ������ �!�"#$� YAP�*+,-
��������� Src�YAP ���������������� ������������������������ STAT3 Src�!
"#$����� YAP�%&'()*+,-�./0123456�789:;<���������� YAP�%&'(=!"#)>?@A#BCD23456�78E:;
F G H I � J K L 19
� �
IL�6��������� �� JAK�STAT3����������������������� �� Src�YAP�� !"��#�$%&'(���) *+��,-.�/��)01�����23����4��56789:�$%��56�;<=0�>�/?�.@)�AB�CD���EF:�4 EF:$%&GH�IJ�Src�YAP�� JAK�STAT3��
�KLFMN 56 O1/&P�Q RS �CD T?�.UV#W�XYZ[&G>��4\]^2_ APC�`a&bc Src�YAP�� JAK�STAT3���KLF=0�Q !"��.=1&de�9�4fgh7ij�4fgh&G>�k����KLF��>�.Src�YAP�� JAK�STAT3���l�����������c�mnop��q 4rKLF=0�G1V��47st$%u&vwKLF�xy=0�Q�)0U��CD/1z/?�>�,-{-.@��|��4&GH�b>}�~S ���Src��� JAK�����u����l��bck�4}�&�����>/ ��� ���.����9�4fgh7ij�4fgh���� Src��� JAK�����u����l��&���bc��S&�� \]P�) ����.U��L�I��$%�������������Z�x!�I���&G>�k����Z���&
b� Src�YAP��7 JAK�STAT3���KLF �|�)01�����23���#�$%���1V�9�$%&����>� ¡L�¢£=0�.¤¥�¦�bc�Src�YAP���§¨�©��EF:�47$%&'(�56 ����Gc�EF
:�4���>}�~S �� ¡L�¢£=0�.
� � � �
Src��� JAK����P�&ª«�}�¬ ��8�®&¯�=0�c�}��T°0�c��>�.@��|�AB���¦��de±�²³´kµ¶&T·) � ¡ ��10�.Src�YAP�� JAK�STAT3���F¸�¹º»L&k¼���>�) �½10�Gc�¾n�F¸�¹&¿���Src��� JAK��� �u&��P�}�¹��4�}�&bc��� ¡L���.ÀCD ÁÂ��Ã=?�ÄÅÆǹÈ�4ɸS}�CDÆÇ�¼Ê��˧&ÌwGÍ�¥ÎU
P.
� �
Ï-Taniguchi K, Karin M : IL�6 and related cytokines as the critical lynchpins between inflammationand cancer. Semin Immunol ; 2 6Ð1-ÑÒ{�Ó{�ÔÕÏ{Ö
Ô-Taniguchi K, Karin M : NF�×B, inflammation, immunity and cancer : coming of age. Nat Rev Immu-nol ; 18Ð5-Ñ,ÕØ�Ô{�ÔÕÏÙÖ
,-Taniguchi K, Wu LW, Grivennikov SI, et al : A gp130 �Src�YAP module links inflammation to epi-thelial regeneration. Nature 5 ; 519Ð7541-ÑÒÓ�ÚÔ�ÔÕÏÒÖ
{-Taniguchi K, Moroishi T, de Jong PR, et al : YAP�IL�6ST autoregulatory loop activated on APCloss controls colonic tumorigenesis. Proc Natl Acad Sci U S A 14 ; 114Ð7-ÑÏÚ{,�Ù�ÔÕÏÓÖ
20 EF:Û&GH�ÜZeÝZ������M¡Þß
������� DNA�� ������������������ !"#� $%&'�()*
+,-./�0123�45� ���
�� ��������� ������������������������ �!"�#���$��
����% &'()����������*��� DNA+cell�free DNA, cfDNA,� KRAS ��-�.�/012 PCR����3���456()��� 7��8�(9:�;��<=>?�7�$�@A�BCDCE��
�F��G�H�IJ@�K$��H�LM�8�� KRAS �.�$��N�OP�9�Q �RS�%*� cfDNA� KRAS �.3�)457�()TS���G�H�7�U)�K$��HSV��3�����$�WX���YZ��T (9[�\])^!_�]�F�"`abcDd �e#�f��T �gh�ij�8��klmn
opq�rs���j��(9�%
� � � �
��tu�v$%w&n[�x'�yzC0���gh����$���{�(g�%���$�� )x' TNM|-�}~�)��� ).�[����*+, ����-.�/���Q (������������ �!"(����;�(9[���������8�� ��������;�(9�%�����#����_����_��� �����)�� ��F�n!����0��1���)2�3#�(��%���_^!��� ��{v�0��(9� Gemcitabine+nab�paclitaxel�4mno FOLFIRIN-
IOX�4���$���������5(;6l��,�,�7��8)Q#��0������������ ������ ���!���0�9:����%VJ�;�����<Z��5� ¡¢£¤Cd¥�1C(����$�T¦��=§�"`¨©�ª4_«��(9������$���¬�����1>����0�����4+®¯�4�®¯?°±�4�,�F��m��2�²��}³)�j�´µ@�.�����´������V¶(9�% &'�:A)�;·�m¸�������� ��k¯A���¹¡ºBCDC&'�B»�¼�7
�457�()TS½C��G�H7��m¸�*¾¹¡ºBCDC���$�3#����Q (9�%��7��m��)�;ED.�¿#���-.À(9� KRAS �.a�2�ÁÂdBCDC ����T �N��Ã,Ä,���7�_�]�3BCDC �����$�f��T �;�(9[��������m¸�k¯A��Å���$�f��)3#�(��%¹¡ºBCDC����}~Æ��G�H7��mno�G�H�IJ�ÇjLM�8�� ������È��¼� �!k¯A���ÉE®_ÊF®����Ë�QU(C� ��Æ����]P6Å�Ì�¡Íy2C �[!�Q ��Î��%
�
�Ï�w8��Ð�#�Ï�Ñ8ÄÐU(�Ò�GHI¯)ÓÔÕÖ·+×ØJ�Ö·,(ÊÙU)����:
�GHI¯I¯ÓÚ¯Û&'· Ü®ÝÖ·¯�K
� Þ � � � 9 ß ¿ 21
Variables n ���Sex Male
Female��������������
Location HeadBody and tail
������������ �
cStage�JPS 7th� IIIIIIIV
�����
����������������������
Resectability�JPS 7th�RBR�PVBR�AUR�LAUR�M
������
������� �� ����������������
Treatment Upfront surgeryChemotherapy�surgeryChemotherapyChemoradiotherapy�surgery
�������
������������������� ����
�� ����
������������������������� !"��#��$%&'��(�)*+,-./������012$%3���45(6789:;:�<=5(>?@���A�B!B!CD!E>?F�GHIJKLM�NO+PQRSTU�VW��X=3��YZ[&'��������\]�-./��^_���(�LM �����������>?2���ab���������cd��e �fg_h�ib��
� �
�j-JK�-�^_k+lm"nop�qr���+-�s���t�+u�vSwx�y���z��{��|+-��}wk��+g+vS��~qr�+����mLp� circulating cell free DNAextraction kit�QIAGEN����� cfDNA2���ib��cfDNA|���Sp����%��&'��(��p�+����| LINE�1����"��� PCR���i�+��/�S�( humangenomic DNA�G��+Progema��������������h�'� DNA�����:�� KRAS 9�����:�������Bio�rad����� KRAS ¡¢2 codon��£��2¤¥¦�§��5(¨�����©ª«� PCR�QX�+Bio�rad����������Quantasoft�.�.�Bio�rad������¬2.®�;¯���+°¨±����²³´�µk+ ¶·+�§·2¨�����¸'¹'�������º�JKh�'�1»!¼+½¾$%+¿"9:;:+À=#ÁÂ�=aÃ2$ÄÅ%�$�Æ&
p����+KRAS �§¨�����24'¬��](Ç�È���$Ä)É|��_KÊ�Ë*�+�²³]�,�+TUl-¬�,cË*�²³]+TUl-�R�+TUÌÍ�BR�+TU.-�UR���,���&��Ë*�²³]+BR��|/0�BR�PV�+Î0Ï2ÐÑ�BR�A�+UR��|ÒÓÔi�UR�LA�+qÕÖ×�K�UR�M��¸'¹'Ø�,���
� �
��21»!¼|Ù¬���+Ú¬���S+���2½¾�=�²³´��O($Ä)É|¸'¹' StageÛ£II£III£IVÜ�£��£�£��S�b��f1�+TUl-¬�,����| RY���+BRY��+URY��S�b��2���
22 ���Ý678�Þ:�J(��ß!"��2d��
�� ������� ��������������
�� �� ������ cfDNA�� KRAS �����
�! �� ������ cfDNA�� KRAS ��"#$�
�������� cfDNA� ������������������� !"#$�Stage%���&'#()*mL+��� cfDNA�,-./01234ng0+��StageIV�5264ng$�789:;<�+=�>?����������@:ABCD�;<0+=�EF*G>
H��I�JK PCR0LMN� KRAS OPQRSTUKVW�@:A�� !X�>RYZ,[6�-\�0RSTUK] ^N�_�`,*\a0+=�>bc�URYZ,*1�-6�0RSTUK] ^N�_�`,54a$+=�>d��XAe !X�$fg�UR�LA��013a�UR�M��0,5ha0+��ijkl�$mnop�0qrCsW�_�`0+=�EF[G>URYZ� KRAS RSTUK_�6��tu�vw�RSTUKVW,-./042ha0+=�>bc�RYZ� KRAS RSTUK_�\��RSTUKVW,xy[2*a�*24a�421a�42\a0+��zz{@|]}�EFhG>RYZ�&'# KRAS RS_���~d��[��">\�-[�,����d��]_�ECY1G0+��*�,(�-�������0+# DUPAN�2]*5�444IU�mL$S��/��XA:�E�[G>
] � � � � + � � 23
No. Age CEA(ng//mL)
CA19�9(IU//mL)
DUPAN�2(IU//mL)
Location cT Size(mm)
cN cM CY Stage(JPS7th)
cfDNA Qty(ng//2mL plasma)
KRAS MAF(%)
� ���� ��� ��� ����� Ph � � � Class II IIA ����� ���
� ��� ��� ���� �� Pb �� � � � Class V IA ����� ��
� �� � ��� ��� Pb � � � Class V IIA ��� ���
�� ��� �� ��� � Ph �� � � � Class II IA ���� ���
�� �� cfDNA� KRAS ���� ������������
� �
�������������� !"#$%&'()*+#,-./012�34���56789:;<5=>�?@AB#4CD&6EF cfDNA# KRAS GHIJK&LMNOP��QRNDIJK;7S6TUVWX��YRJZ[.#\];^_`>�?a>=#4CO=6bc.de�EF cfDNA# KRAS GH&fgJ#!"�$%��hijklml.nop�YRJ;^_`>�;6q/D&r���79:�$%��a.&stDuv�?�O�n;=6r��DuvwxEF cfDNA# KRASGHIJN;yz�6{>=#|N& CY1NX}~klmlH�7�N�^�w�o6�����&fg�� !"#yz;��>�|NDuv�?��!";�������.��`>w8� CY1��.fgJ#EMJ!"#hijklml.nop� cfDNAF# KRAS GH�\]J;^_`>�a.&���S6��&�o��ND#��;��Du�?
� � � �
��YR������EF cfDNA# KRAS GHIJN&!"� ¡#¢i£¤¥¦.�w§¨©Dª�YRJ;^_`>�?�O�n;=6«�N#��Duo6cfDNAF# KRAS ¬®GH¯2#°±�²=O����5�&6�³|N# ¡�´��\��TUµ¶·m¸�¹8���;��.º»6��x|N#'¼��½�¾�¿À�w8S´2Du�?Á��6a#Â��Ão�w6ABÄ��Å8�;Æ'()*+ABÇÈ#\ÉÊË�ÌSÍÎ�Ï�
ÐÑ��?
�
�ÒUeno H, Ikeda M, Ueno M, et al : Phase I/II study of nab�paclitaxel plus gemcitabine for chemo-therapy�naïve Japanese patients with metastatic pancreatic cancer. Cancer Chemother Pharmacol77Ó����6�����
�ÒOkusaka T, Ikeda M, Fukutomi A, et al : Phase II study of FOLFIRINOX for chemotherapy�naïveJapanese patients with metastatic pancreatic cancer. Cancer Sci 105Ó�����6�����
ÒTakai E, Totoki Y, Nakamura H, et al : Clinical utility of circulating tumor DNA for molecular as-sessment in pancreatic cancer. Sci Rep 5Ó����6����
�ÒAko S, Nouso K, Kinugasa H, et al : Utility of serum DNA as a marker for KRAS mutations inpancreatic cancer tissue. Pancreatology 17Ó�����6�����
Ph, pancreatic head ; Pb, pancreatic body ; CY peritoneal lavage cytology ; MAF, mutant allele frequency
24 £ÔÕÖhij×Øl�����'()*+#Ù¨©
��������� ������������������� !"
#$%&'� ()*+,-./01�� ���
�� �� CD44����CD44v� � ���
�� ������ ������������������������� !"#$%&'(�����)*�
+,-���.�/01(���2345��6���78�49:�;<4=>�/���78�4?(@A��
������BC�D0EFGHIJKLM$N�OPQRS ROST�����UVHI4W�X�YZ1E�.�/[
\]^6�8_`ab����cd�e0E�.�fghijklm_no4�ROS4W�Lpq��X�r���
fghijklm_no����s�4t�B�� �����HI48u JK�$.�vw�F�xy8u JK
4�zL{|F/}~��BCfghijklm_no���UVHIL�d��F���s�4������� ��
� ����0EF/���a`iL.Fv���(1,��zJK4�����4��L���.�/
� � � �
������ ������������������������� !"#$%&'(�����)*�+,-���.��T/��� � ������������6���"����Q�����JCOG ¡¢T��£�¤¥¦6(./01(���2345��6���78�49:�;<4=>C§¨������4©ª�«4��JKL�¬��®¯a°�°4±²��³0E�.�/���78�4?(@A��������BC�D0EFGHIJKLM$ ROS��UVHI�BC
W�0E��´�YZ1E�.�µT�T/�UVHI6 CD444_¶o·QCD44vT�¸ª���.�/CD44v6.¹$4_¶o·�º»0E�.�¼TQ½�T/«4_¶o·4W�¾¿Ào�µ��¼LÁÂCD44v6u HI�Ã�4Äibo·goiÅ°Æ°QRS xCTTLDz�0È�x�HIÉÄibo4ÊCËÌL�Í0È�8O�ÎÏ�ÐjÆb¯o4�2LÑÒ��x��BC ROSLW���HIÓ ROSL%¹Ô��.���Õ�x4 ROSW�ÄiÖ��BC�UVHI6 ROS�B�GHIJK�¸.78�L���YZ1E�.��TQ½µT/
�×ØÙ�ÚÛÜÝÚÛ ÉÞ
� U � � 4 ß Ì 25
�� ����� ROS�� ������������
��������� ������������������� !�ROS"#$%&'()�*+,-./01�!23��456768���������� 9 xCT":;.%&0�1�< ROS"#$=�>?.@A0�56768BC"���������� "�*+,-!DE���F�GH�I�=JK H�� LMN�0OP�QR'ST UV��4WX'Y0����������� Z[\]"^_`ab<9�CD44vcdef"gh!ij��k6�lmefnX'Y0�=�o� �pqrstuF�"���������� v�wx"^_`ab<9yz{|}~"����.j�4�68�B���������!��ef.����4���������� .v�0�1�'(��*+,-"z�!�����8Q��9��X'S������������ .v��4������w"��.E��0�8
�����
���r�� ¡B¢!�ef£"�¤t¥ 12�14.¦§ CD44v¨�© CD44v1�36�ª����������� «�����'Y0�¬d�"®¯�6CD44v1�3°�ªS(±²�ª�r�� ¡B¢!�ef£"³´¨FACS�RT�qPCR656���������� Z[\]'(� CD44v1�3°�ªS(±²�ªef£"�*+,-¨MTT assay, FACS6
µ6���������� «�����v�'(� CD44v1�3°�ªS(±²�ªef£"�*+,-¨colony assay6
5�CRISPR Cas9=�>?'(� CD44v12�14¶G·¸�r¨�© CD44vKO6�r�� ¡B¢!�ef£"¹º�������'Y0�¬d»¼�6CD44vKOef£¨¤t¥ �µ"½¾6"¹º¨CRISPR Cas¿=�>?656CD44vKOef£"zÀ;¨MTT assay, colony assay6µ6CD44vKOef£"�����'(��*+,-¨colony assay6
µ�RNA=Á·¤ �.�T4 CD44vKOef£"ÂÃ�ÄÅÆ�ªÇÈPathwayÇȨRNA=Á·¤ �6
É�����wÊ"��!�ËÌ#" CD44v�ª¼Í����wÊ"��!�ËÌ#" CD44v�ª�ÎÏÐ��"®¯¨RNA=Á·¤ �6
26 ���������� .v��4���X'Y0�������w"��
�� ������� �������������������� !�"#$%&SSZ'������� � Cont'control
� �
��������� ���� CD44v1�3�������������� !"#$"%&'()*+��,-�.CD44v1�3/����01 TE12TE1123����01 TE4456078RT�qPCR2FACS.9:.�����������;<=>%?@2/���8TE12TE11.A3���8TE4.%BC
01DE��F�GH078MTT assay2dayI2pJK�KL.9M�DENOPQA2Live�or Dye4RS7 FACSTU%?@�����������=>%?@V��F�WX4YZ[\]7M�\^_��PQ`A[aWbNOPQ`c(M��defg79
I.�����������hKKuM�!"#$"�iR%?@ TE18CD44v1�3/���.2TE483���.SjgkiR%?(��DENOPQ�Wl4YZ78colony assay�Day�h2mI.9M�:n���%&'(WlPQA2������������!"#$"ogpg�NOPQ�qFrs`c(M�\^2iR%?(tuPQ�defg79
:�CRISPR Cas9v�wx%?( CD44v�KO������� ����yz�2!"#$"%&'()*+{|�.CRISPR Cas9v�wx%?( CD44v�KO�TE1}?~o�������4yz078mh.9:.CD44v�KO�TE1�A������%BC02��Wb��3�4YZ78MTT assay : dayI2
colony assay : day�h�pJK�KL.9I.!"#$"%?@ CD44v�KO�A������%BC02DE��F�3�4YZ78colony
assay : day�h�mh.9I�RNAv�����4RS7 CD44v�KO������������TU
CD44v�KO�TE1�`A PI3K�Akt signaling pathway� Ras signaling pathway[���,-4YZ78mL.9
h�!"#������� ���� CD44v��|�!"#��8|����CDDP LFU.%��+4d07��A CD44v1� CD44v2����/�`c]78m�.9
� � � � c � � 27
�� CD44v�KO������� �����������
�� CD44v�KO������ signaling pathway
28 ��������� ������������������ !"#
�� ������� ������� CD44v��
� �
��������� ���������������������� !"#$%�&'()'*+�,�-�����./0123�4,�5�6789:*;,-�0;<��=>�?��CRISPR�Cas9@�AB��� CD44vCDEF�G23*��=HIJK�-�LJ�MN���������� !"#$%8 xCTOP��� ROS8Q�RST?U=?���V236789:*WX,�Y7�Z[=>-�?8Y7����&'()'�\�]^*;,01_23*`��,�a�b�8c6^0de��=>�?�-801_23*`���=a�K�./018fZ?ghi8j^5��c6^*;,-�0kl���>L=�5FUZm01n���&'()'89:670MN�����0+����o^9:0pqJr�stuv����� !"#$%Kwx�0yZiTz{|�J�}Jr�-�T?~�D��$@��%�����c�����>�T����8 in vitro 8HIJK����� !"#$%+����&'()'85�67K���m\iZT[=-�T?��?Z�c6^8\����8��*����i��0r�>��K�������8�z8��*��k�Jr�>��./������*��= in vivo J8 ¡67*¢£,�>¤����� !"#$%0 xCT8OP*¥�� ROS8Q�*RS,�-�*¢£,�>������ !"#$%��:�� ROS8Q�*RS,����*��,�>¦��§I���8¨©ª«J./01&'¬a��«����� !"#$%+�8c6^�®,�¯°±%�*²³���´=�>
� � � �
µ���¶8·¸¹º»¼½¾»¼&'(¿8�ÀÁÂÃÄ�ÅÆ����8ÇWÈÉ�L�=ÊËÌÍÎÏ01к�a���ÌÍ8®ÑÒ¨�Ó��ÔÕ�Ö×L,>
�
�vTachimori Y, Ozawa S, Numasaki H, et al : Comprehensive Registry of Esophageal Cancer in Ja-pan, 2009. Esophagus 13Ø��Ù��Ú�¤Ù�Û�
¤vIshimoto T, Nagano O, Yae T, et al : CD44 variant regulates redox status in cancer cells by stabi-lizing the xCT subunit of system xcÜ�vand thereby promotes tumor growth. Cancer Cell 19Ø�ÝÚ�ÞÙÙ�¤Ù���
0 1 a � 8 r ß f 29
��Diehn M, Cho RW, Clarke MF : Therapeutic implications of the cancer stem cell hypothesis. SeminRadiat Oncol 19���������
�Chen C, Zhao S, KaRNAd A, et al : The biology and role of CD44 in cancer progression : therapeu-tic implications. J Hematol Oncol 11�� ����
��Diehn M, Cho RW, Lobo NA, et al : Association of reactive oxygen species levels and radioresis-tance in cancer stem cells. Nature 458��������
��Sleire L, Skeie BS, Netland IA, et al : Drug repurposing : sulfasalazine sensitizes gliomas to gammaknife radiosurgery by blocking cystine uptake through system Xc�, leading to glutathione deple-tion. Oncogene 34�����������
��Shitara K, Doi T, Nagano O, et al : Dose�escalation study for the targeting of CD44v+ cancer stemcells by sulfasalazine in patients with advanced gastric cancer�EPOC1205�. Gastric cancer 20�� �������
��Otsubo K, Nosaki K, Imamura CK, et al : Phase I study of salazosulfapyridine in combination withcisplatin and pemetrexed for advanced non-small-cell lung cancer. Cancer Sci 108��� �������
��Rebecca WO, Richard MA : Combined chemotherapy and radiotherapy�without surgery�com-pared with radiotherapy alone in localized carcinoma of the esophagus. Cochrane Database Syst Rev.CD002092���
30 ��������������� �!"#$%&'()*+,-./01
���������
� ������������� ������
� � ���� � ��
� � ���� � ���
����� ��������� !"#
$��% ��&
� '(�)*+,�-.��/01�2�3�4�5�06789:8��;9���0<�
�=>?@�AB=CDE������=������FG�0FH��EIJKLK�MN,OPQO�
�����RS0CD-ROM0DVD-ROMT=UVW� X�SY��0.�Z[0*\O�����/0
]^=C_`����
� ���a���b��c��0d�0]���e����f����
� g��h�g����0i�jk&� CGSk&�m0cm0mm0cml0ml0l0dl0kg0g0mg9m
G������
� ���nop�/�cE��q��LIrG0��s�t��uvIwx�OyVz,{|V)V�
8KS/=��������
� '(�'}G���~�S�R�����0�9m��~��vIY�=������������
� �%����=$���SY����L����������$���=���u��������
�%�DE������=�]������
$��%0������R���0���/�����et al�G������
3��%��f��� Index Medicus�f=�������
���wx�$��u��������0���0�g0�g����u
kF��wx�$��u��������0D�����0�0�0�F��0�F 0����
u
� �¡¢�£0¤¥ ¦0§¨ �0��©ª�«d !¬ªG«d ! 7��l���®���0��¬
l"�°#0±²³´0µ¶ ·�¸¹$ª�º»¼½!¬Q¾¿À¸Á8¸¹$ªÃ�%
& Ä�0Ål�0��Æ�l 0ªG«d !Ç0ÈÉ0�l¬
�Umezawa H, Aoyagi T, Suda H, et al : Bestatin, an inhibitor of aminopepitidase B, pro-
duced by Actinomycetes. J. Antibiotics 29 :Ê®0�Êˬ
�Ì�0���Í=����R`0�CÎ`=��ÏÐ�
� �����®��Í=®�ÑÒ®�!® Ó®ÔÕ®CÎ`=®�%®�®��Ö�®��×='
(�Ø �������C�Ù�=���=ÚI×�=�u��������
� Û'�����9�u���Rv�
¬ ÜÜ�¬ ÜÜ� ÜÜa
� '(=��Ý���0��0���0�Þ0Zß�0'(�g0��@g���������
���������� ��
���� ������� � �� � ������ ��� ����
����� ��� � ! �� �" �#$%&'()*+,�
-. /�0"� ! �� 12 345�6789:�
;< =>�?� !� ���� @ABCDEF� ! ��
GH �I�?J�KL9:� M N>OPQ� ! ��
� RS#�� ! �� TS �I�U� ! ��
V� %W��� ! �� X YZ�[� ! ��
D" \?J� ! �� ]^ 3��� _`a9����
���b ������� � �� ^c CI?J� ! ��
b���6de���� ! �� 72 fghi� ! ��
jk lm�[n�fo9)*+,� p" qers� ! ��
t" u678� ! �� vM gw���� ! ��
xQ yI�?� ! �� sz {|�� }~��! ����
. �|$%!�� � ����|���� ! ��
� ����� _`a9���� �" ���?J�KL9:�
e� �I@%!�� �
���� �" ���� ! �� �� S������ ! ��
����c ���k� ! �� �� ����!�� �
�� ��k�!�� � @S ���?� ! ��
� Y���� _`a9���� ¡�¢Q� ! ��
M£ /���� ! �� �c �I5�9:�'()*+,�
.� �w�[� ! �� ¤" ¥¦ � ! ��
e§ ¨�S�©� ! �� ª« 3¬!�� �
k e®I�� }~��! ����
��� �M �°�� ! �� j�G±I�?J�KL9:�
¯��²" ³e�k� ! �� � ´µQ� �¶·¸¹! ����
jº »D¼½� �¾! ¿� ÀÁ qÂ�� ! ��
;à �Ä5�'()*+,���� @ŠƦ � ! ��
�" C���� ! �� ÇH �È�ÉÈÊ �Ë)*+,�
� ÌÍ5�9:�'()*+,� ÎM �$Ï� ! ��
¤k Ðhi� ! �� Ñ� Ò|�?� !� ����
k" �>678� ! ��
���Ó Ôk ÕI����� ! �� �c Ö��[� ! �×ØÈ��ÙÚ�
Ó��jÛ >ÜÝ2!�� � j� �ÒÞß!�� �
���� ��������� ��� ��������������
������ ����� !"#$%"� ��� &' ���()������
�* +�,-�.��� /� �01��2345��678�
2 9:�;<������ 2� =>�?@������
A� BC��D��EFG"678� �H �I�JKL��� ��678�
MN OF�PQR�ST"#� UV WX��"#��� ���
Y� Z[�\M�.���
���] ^ _[�QR������ � �`�� !������
�]��a� b��PQ������ � cd�e6feg���� ���
h iX�PQ���.�678� �* jk�()��Fl�U��678�
m��b��n�op������ q� r��s��.���
t- �u�PQR�ST"#� vw ��;<������
x> `��y1������ �� uI�PQ��z�EFG678�
�� {��|}�.��� }� ~����������
�� �`�n�op������ �F����PQ���.���g�"� ���
\a �d��D�������e67��� �� ���&�������
���� �� ���A������F������ �� �d�a�������
�����* ����������� �� B����L�� ���
� u¡�y1��¢£.�67� ��� ¤A ¥���D��EFG"678�
?@ ¦§�/¨������ t� ©X�ª«L�� ���
�A ¬��ª«L�� ��� �� ���P���®¯"678�
°� ±�PQR�ST"#� ² b³�01��2345��678�
�* �u��D��EFG"678� �a +��D´�µ["� ���
M� ¶·��D������ ¸� ���¹�������
�º ���������»e67��� Y� �¼�/¨������
���� ½� ¾X�¿À1�������Á 67���  !"�PQ���.�678�
����Ã� ÄF�QR´��.��� Åa Æo��D´�µ["� ���
Ç� È#�n�op������ ÉA ʳ�ËÌ�.���
�Í i��°«�.��� Î� ÏI�01��2345��678�
ÐÑ�$À�QR������ �� 6§�½�������
Å Ò��������� ÓA �I�PQ������
ÔÕ �¡�()��Fl�U��678� NÍ Ö¡�,-�.���
y× +��%��F678� Ø× ��PQR�ST"#�
ÙÚ �`�\M�.��� : �Û�A������F������
���� Ãx Ü��PQ������ ÝÍ &�q�������
����Å- ¦`�s��.��� Þ× ß��D´�µ["� ���
���� �� ����� �������� �� ����������
������ !�"#$%������&'������ () *���+������
,) �-�.�/������ 01 2��� �����
3' 45�6�� ����78� 91 5�:;�<��=>�������
� ?@�AB%������� C� D�EF������
GH I�JKL�MN78� 1O PQ�C�<���
R�S.��:;�<��=>������� T� UV�JW������
���X YZ [4��� ����� \O �]�^_������
��X��`� a��b)�<��� c1 d-�JK�<e<�����fg78�
(h i�EF������ j k*�KL�����fg78�
l m-��+��nop7���� q� rs�tuv������
Fw .4�xyF������ �G �D�z{��|����
}~ D���K������ GF ��"#$������
zw� ����<��� �H �I�����o���������
�o �'�J������� � ���6�78��� �����
1O �]��<��� �� S����������
�l ?V�6�(y���������
���� �� ������o��������� �1 �-��� ��������
�����() ����������� (� �-��F������ ������
(¡ ¢£�C�<��� 01 �¤�¥¤����
H�� �JK�<��� ¦� §���&�<���
¨I P©�ª«������ � ��¬������
�G �4�JKL�MN78� £Z .®�JK������
1¯ �����<��fg� ���� °± ²³��+´�µ¶7�����
·F ��¸O������ ¬¹ º��"#$������
¬ �»�KL´��<��� �� @ �"#$%�������
���¼ ½¾ ?¿�:;��� ����� �À ���6�� ����GÁ78�
��¼��Â� �4�ÃÄ������ ÅT ���Ʊ������
¦H Ç@�W����78� Èq É����� �����
O ����+��nop7���fg78� Ê� ��W�*�����fg¤��ËÌ�
ÍÎ ���KL������ Ï1 Ðo��&�<���
�Ñ V��3¾��� ���� ÌÒ �2�JKL�MN78�
Ó� a�z{������ }Z ?��+´�µ¶7�����
� ���JK�<e<������ �H ��J�������
¬Ö ×Ø�3¾������ �Ù ���"#$�����7ÚÛ���ËÌ�
���Ü Ý� �Þ�ßF���<��� �� ����¬������
���� �� ������ ����� �� �������������
������� ��������� !"� #$ %�&'(&')*�
+, -��./0����� 12 3�4.������
56 78��9:�������&');<� => ?��@�A�����
B, C��D.������ EF G��D./HI!"�
J, KL�MNAOPQ�RS')*� T> UV�D.��W�������
�, � �&'(&X���Q�RS� �Y Z��[0\]!Q�RS�
�Y ^_�./������ � `��D���a���')*�
b, c8��de�����!fgh');<�
���i jk lm�&'(&X���Q�RS� $, n�oOPQ�RSTp!"�
��i��q> rs�./������ Y, tu�vw��xy�h��')*�
z{ -V�D������� |} ~b�����������
#� ����9:������ �� ���������
�� �������OP')*� ,T �V���������
�� ����de�������!"� �, ������������
�� :\��de������ c� �u�����������
�� �V���AOPQ�RS� �� �L�&'(&')*�
�� ���������� b, ��D./HI!"�
��� Y� ¡��de6������¢��')*� £� ¤¥�4.��x�¦�')Q�RS�
�� ��§�¨©d�oª�!"� §� «�4.������
¬, �®�6������ ,� _�����������
,T ¯L�°����±�²³��')*� T> ´�µ�����¶·¸¹����
ºF »��[0\]!Q�RS� �, ¼�./����"��')��
½ r������OP')*� ¾! 3¿�À���������
Á "�D.�����')*� � #�vw����"Ã$�')��
�% ÄL�vw��xy�h��')*�
���Š&F ��./����')�� Ǡ���[0\]!Q�RS�
��Å��½D UÈ�É'(������ � �L�����������
#� Ê)�À�����ËÌ��')�*� ÍF r��ÎÏÐ+!"�
§� �Ñ�D���a���')*� ÒÓ Ô�1������
�� ,V�&'(&X���Q�RS� = ��-�D.�����')*�
Õ.Ö��×ØÂAOPQ�RS� c> /°�oOPQ�RSTp!"�
�Ù �V����������� �� Ú0�§Û��������
�1 \]�°������� b> ���É'(��x2��')*�
���Ü Ï3 µ«�oOPQ�RS')*� ×/ ÝV��������
��Ü��ÞE a��ß�AOPQ�RS')*� ,T GL�vw������
���� �� ������ ����� �� �����������
�������� ����� !"#$%� �& ' �()*()+,�
�- ��.�������/)+0� 12 �.3�������/)+0�
���4 52 67�� !"#$%�89�� :� �6���;�<=9"#$%�
��4��>� �?��0��� @A BC�D��0������
E FG���H������� �� IJ��9�KL !"#$%�
� MN�.3������ O ��PQ������
R� ST�.3�0U0��VWXY)+,� Z [\�]W�0���
^_ `��ab� !"#$%� cd �P�e�fghij,��)+,�
k- l�m�no������ pq S�rs�0������
�t �u�()*(v���"#$%�
���� -w �\��������� �w )x�.y������
������z {�|����}�~���)+,� ��d���|�������
�w �m�no��������0�)+,� �� �N�3�������)+,�
>2 'W�D��0��� &� ���y�������
�& S���������� �& ���.3�0U0��VWXY)+,�
�� ���3������� �& �7����� !)+,�
�� ����������� � ¡¢�£��0���
¤� ��KL�� ¥�¦��)+,�
§¨ -w S���������� ©� [��ª«������
�§ ���� �u��¬�9�� ® ���.3�0U0���U�¯°)+0�
�! ±��m�no������ 5² �"�]W�0���³��"#$%�
@A 6����� !)+,� &� ´N�3�������
�� µW�KL������ ¶� ·u�()*()+,�
#� ��.���$��)+,� 1k ��¸¹��%º��/�
2» ¼G�|����}�~���)+,� �� I����������
�& bG�.3�0���
§ � ½2 ¾�()*()+,� . ���m�no������
�§���&� ¿À�KL������ 5' \�ÁÂ�� !"#$%�
(ÃÄÅ|�@��0��� >Ä ÆÇ�.3�����)È9��
&� IÉ�.3���0�)+,�  Ê*�y�������
Ë ÉÌ�>b���89�� �� Í��+,������
�� 6�����Î -9)+,� 1Ï J`�KL����ÐÑÒÓ����
kÔ ÕÖ�.3×Ø�0��ÙÚ"#$%� 2� 6Û�D��0���
ÜÝ Þ�� !"#$%)+,�
§ § ½& M��y������� ßA Õ�£��0���
���� �� ������ ��� ��������������
������ ����� ���� �� ���� !�"#���
�� �$%��&'()*� +, -.��/0�� ���
�1 -2��34�56�789:�
���; <� =>��?�� ��� ��@AB�CD�� E �F�
��;��G, H=�� �� ��� IJ KL�M� ����
N� O>�P��� ��� QP R�ST ��� ���
UV WX��34�56�789:� �Y Z[�\(]\()*�
�^ ���/0�� ���
���_ `a bc�def����� N� gh�def����� i�jk()��
��_��lm WX�\(]\n���789:� �P O��op�����
,q hW� !�� ��� qf r��/0�� ���
st �u�vwx&'789:� y z{�P|x�q}���
~ -��op������ �()*� P� ����&'789:q}���
���� �t �����5� �789:� �� ������� ���
������� ���� �� ������� �� 2��$%������
�� �[�$%�� ������� �V 2���� ����
�t�����s��� ������� �� ����3��������
� ������� ��� M� AX��3��������
��� �� ¡���3������ Y< WB��w�� ���
�� ��¢, �£�¤¥q}¦�§¨789:� �� 2���34�56�789:�
�� O�©�x� ���� ªc ?«�� !�"#���
�, �u��34��¬�jk �789:� ®¯ °�G+ �789:�
±² ���³´ ���� µY -6�� �789:�
���¶ ·� ���¸�� ��]i������� <� l=��34�56�789:�
��¶��¹�Vº�\(]����� »�¼� �� �� �������
½¾ =¿�� !�"#��� ÀÁ !X�def�� ��]i�������
� K��$%�� ������� Ã� Äs���&'789:q}���
���Å ÆÁ Ç2�op������ Èt É���s��� ���
��Å��ÀÁ !X�def������ ®f Ê��\(]�����
ËÌ �Í���&'789:���� Î" �c�$% ����
Ǹ Ï��$%������ Ð# �L����� ���
���Ñ ÒÓÔÕÖ�op����� �� ×Ø�CD������
��Ñ���, Ù/�ÚÛ������ q~ ->��3 �789:�
�t� �� ������ � ��/0��$���
�, ��� !�"#��� m, .��3������
���� � ����� � �� �������� �
������ ��������� � � ����� �
! �"��#$���� � %& '(�)�*+ � ��
,- *�� � $. ��/0 � ��
���� 1. 2� � 345�� 67 89�)�*+ � ��
�����: ;��<= � 345�� ,! �>�?�@ AB��CDEF�
�G > ���H�@CDEF� I& JK�LM @ �
I& *'�NO -P�QR�� 45S� TU VW��� @ �
$X Y(��� � ��
���� Z� [��\]�� � ^_ �`�ab�� � ��
�����c_ d�ef45g� @ � h, J(�i��� �
�� >j�kl�efCDEFmn@ � op [q���H�@CDEF�
!r �s��t��efCDEF� �u vw����xJLy��CDEF45S�
z� {��)�*+ @ � |} 2s�~� �����
���� U} �(�ol ��45�� � 29��� @ �
������� �J������ � 45�� �� ��)�*+ � ��
�� �q� � 345�� �& ������ � ��
OM ���~��� ��� 45S� �| ������CDEF�m?efCDEF�
�� �������� @ � �p ���H�@CDEF�
���¡ �X ���H�@CDEF� c¢ £��)�*+ � ��
��¡��c_ d�ef45g� @ � �- *��¤¥¦ � ��
op §��� ¨ � 45S� !© ª«�ol � �!¬@ �
& ®��¯°�� � 45�� m± `���� � 45��
²! ³´��� � �!¬@ � L!��"��t��µ¶·@ �
��� �$ `#��� � �� ¹� $�)�*+ � ��
�� ���U %&�º_�� � »� ��¼½ � ��
o¾ '�ef45g� @ � ©, �¿�Àr��ÀrefCDEF�
_& Á�� � �!¬@ � ( )Â�Ã� Ä*� 45��
ÅO Æ�� � 345��
���Ç Èh$'É��� � 345�� cÊ ËÌ��� �� 45S!¬@ �
��Ç��hÍ 'Î��� � Ï|�Ð"���H�@CDEF�
Ñ. ÒÎ� � 345�� , +´��� !¬@ �
±& '�,&+xÓÄ � ÔÕ Ö�ef45g� @ �
���× Ø& ,(�?ÙefCDEF� Ú 'Ð�~� �-+x ��45��
��×��Û& Â"���� � �!¬@ � �Ü .Ý������� �
=Þ ß(�Ã� Ä*� 45��
������� �� ���������� ������������ �� � � �
��� �������� !"��#$��% & ' (
)*+,-./012)3++456789��:;<<=� >?@A>BCD�;��;:
EFGH�IJKL<�M�:�=;=�N�
��O PQR��
ST�UV�WX�Y+/ZX[\]^_`abcd+efYg�2hijk`al`m7Yno/_�p^qrst4u,[vw_xyz)h{|}z�~����2f�67�^_�r�����[�rj0�+8