株式会社ペプタイド ドアでは、LAL法と*Pep-Abser Pre-treatment for LALを組み合わせたエンドトキシン測定受託サービスを行っています。 ＊ペプタイド ドア社で開発したエンドトキシン結合ペプチドLi5-025を利用したエンドトキシン吸着回収関連製品です。

ペプタイド ドアの測定、ここが特徴！

1溶液中の測定 2低濃度の測定 3既存法と比較

-0.02

0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

0.12

0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12

Applied LPS concentration (EU/mL)

Mea

sure

d LP

S co

ncen

tratio

n (E

U/m

L)

Control Li5-025 (ATIII)Li5-025 (H2O) Li5-025 (PBS)Poly(ɛ-lysine)

お問い合わせは下記まで

販売店

〒113-0033 東京都文京区本郷2丁目9番7号 http://www.funakoshi.co.jp/ e-mail: info@funakoshi.co.jp

■受託・特注品業務担当

FAX: 03-5684-6539 Tel.03-5684-1645 e-mail: jutaku@funakoshi.co.jp

これまで測定が困難であった溶液中のエンドトキシンを高精度・高感度で測定。

低濃度（測定感度以下）のエンドトキシンを、濃縮して測定。

既存のLAL法のみでの測定と比較が可能。お手元の試料中のエンドトキシン測定は正確ですか？

主な測定メニュー

＊詳しくは下記までお問い合わせ下さい。

・ 検体中のエンドトキシンを測定します。

・ 検体中のエンドトキシンの測定において、　 既存のLAL法のみの場合と比較します。

・ お手元の試料に対し、エンドトキシンの　 添加回収試験を行います。

・ 添加回収試験において、既存のLAL法の　 みの場合と比較します。

■受託・特注品業務担当e-mail: jutaku@funakoshi.co.jp

ペプタイド ドアの新規エンドトキシン結合ペプチド「Li5-025」は、以下の特徴を持っています。 Li5-025

Lipid A多くのエンドトキシンの共通構造であるLipid Aを認識し、あらゆるエンドトキシンに強い親和性。

KD=10-9

多くのエンドトキシンに、解離定数KD=10-9以下で強く結合します。

Binding Specificityエンドトキシン結合特異性が高く、タンパク、糖及び脂質等への非特異的吸着が殆んどありません。

○(50%)

○(89%)

LPSV. choleraeInaba 596B

○(ND)

○(ND)

LPSE. coli

K12 D31m4

×△○(97%)△(0%)△(11%)○(50%)○(ND)PolymyxinB

×△○(96%)○(42%)○(84%)○(95%)○(ND)Li5-025

Phosphatydyl-cholin

LipoteichoicAcid

LPSB. pertussis

O111 B4

LPSK.pneumoni

LPSP. aerugi

Serotype 10

LPSE. coli

O111 B4

Lipid AE. coli

○(50%)

○(89%)

LPSV. choleraeInaba 596B

○(ND)

○(ND)

LPSE. coli

K12 D31m4

×△○(97%)△(0%)△(11%)○(50%)○(ND)PolymyxinB

×△○(96%)○(42%)○(84%)○(95%)○(ND)Li5-025

Phosphatydyl-cholin

LipoteichoicAcid

LPSB. pertussis

O111 B4

LPSK.pneumoni

LPSP. aerugi

Serotype 10

LPSE. coli

O111 B4

Lipid AE. coli

Biacore 2000 を用いて測定された結合力を○△×で表記しました。また、バッチ法でのエンドトキシン除去率をカッコ内に記載しました。ポリミキシンBと比較し、Li5-025は様々なエンドトキシンに高い親和性を持つことが分かります。一方でリポタイコ酸やフォスファチジルコリンへの結合は殆んど見られず、特異性が高いことが示唆されます。

測定後は以下のような報告書をご提出します。*この報告書は検体中エンドトキシン測定のものです。

サンプルの送付方法、エンドトキシン除去に関するお問い合わせ等、その他御不明な点がございましたら、下記までご相談下さい。

Tel.03-5684-1645

御報告書

No．2009-LX-X-0001

平成 21年 9月 XX日

Sample No. Sample Name 共存物質 Buffer の組成 pH

例 BSA溶液 BSA（タンパク） PBS (0.15M NaCl, 0.05M NaH2PO, 0.05M Na2HPO4) 7.0

１２３４５

今回ご依頼の測定項目は『1検体測定』でした

ので、下記とおり行ないました。

サンプル中のLPS濃度が未知なので、先ず初めに希釈系列を作成し、測定できる範囲を予め確認

した。

１： サンプルの10倍希釈系列を作成した。

２： Sample (100µl) をPep-Abser (PD)に添加し、室温・30minで反応させた。

３： Sampleを回収し、gelをWashing Bufferで(X回)洗浄後、蒸留水で1回洗浄した。

４： well に50µlの蒸留水を添加し、等量のLAL試薬を加え、37℃・30min 反応させた。

５： 反応停止剤を加え、ジアゾ化試薬にてアゾ色素に変換し、吸光度値（A545-A630）を測定し

た。

例）

御中

この度は、格別の御高配を賜り厚く御礼

申し上げます。

御社より、承りました LPS測定の結果を

御報告させて頂きます。

株式会社ペプタイド ドア

〒370-0854

群馬県高崎市下之城町936-14

高崎市産業創造館 204号

Tel.027-346-6702 Fax.027-346-6709

≪測定1≫

≪結果1≫

Report SampleSample No.

No A545-630 希釈倍率 合否 A545-630 希釈倍率 合否 A545-630 希釈倍率 合否 A545-630 希釈倍率 合否 A545-630 希釈倍率 合否1 0.102 1000 × 0.081 1000 × 0.084 1000 × 0.080 1000 × 0.427 1000 ○2 1.090 100 ○ 0.094 100 × 0.086 100 × 0.084 100 × 2.466 100 ×3 2.488 10 × 0.102 10 × 0.312 10 × 0.101 10 × 2.481 10 ×4 2.541 1 × 0.880 1 ○ 1.523 1 ○ 0.632 1 ○ 2.521 1 ×

1 2 3 4 5

今回の試験結果から、濃度算出に使用可能なサンプルの希釈倍率を決定した。

測定１の試験結果から、測定に使用することの出来る希釈倍率のサンプルをそれぞれ用い、Pep-Abserと併用し、サンプル中のLPS濃度を実際に測定した。 １： サンプルの10倍希釈系列を作成した。２： Sample (100µl) をPep-Abser (PD)に添加し、室温・30 min で反応させた。３： Sampleを回収し、gelをWashing Bufferで (X回) 洗浄後、蒸留水で1回洗浄した。４： well に50µlの蒸留水を添加し、等量のLAL試薬を加え、37℃・30 min 反応させた。５： 反応停止剤を加え、ジアゾ化試薬にてアゾ色素に変換し、吸光度値（A545-A630）を測定した。

検量線を元に、濃度を算出した。

Sample No.

n数 A545-A630 希釈倍率 EU/ml A545-A630 希釈倍率 EU/ml A545-A630 希釈倍率 EU/ml A545-A630 希釈倍率 EU/ml A545-A630 希釈倍率 EU/ml1 1.120 100 8.969 0.893 1 0.071 1.546 1 0.125 0.684 1 0.053 0.440 1000 32.9772 1.098 100 8.786 0.874 1 0.069 1.487 1 0.120 0.641 1 0.050 0.412 1000 30.6413 1.045 100 8.344 0.841 1 0.066 1.422 1 0.115 0.598 1 0.046 0.384 1000 28.3068.699 0.069 0.120 0.050 30.641

1 2 3 4 5

今回の結果からそれぞれのSampleに混在するLPSの濃度は次の通りであった。 No.1：8.699、 No.2：0.069、 No.3：0.120、 No.4：0.050、 No.5：30.641 EU/ml。 以上をもって、御報告とさせて頂きます。また、何かご不明な点、ご質問等がございましたら、お手数ではございますが、松本までご連絡頂ければと思います。

品証 担当

≪結果2≫

≪測定2≫