reactiile serologice2015

7/24/2019 Reactiile serologice2015

http://slidepdf.com/reader/full/reactiile-serologice2015 1/50

Structura Ig:Structura Ig:



REACŢIILE IMUNOLOGICEREACŢIILE IMUNOLOGICEREACŢIILE AG-ACREACŢIILE AG-AC



REACŢIILE ANTIGEN-ANTICORP (REACŢIILEREACŢIILE ANTIGEN-ANTICORP (REACŢIILESEROLOGICE)SEROLOGICE)

Reacţia Ag-Ac este determinată de interacţiuneaReacţia Ag-Ac este determinată de interacţiunea

speciică dintre epit!pii Antigenu"ui #i parat!piispeciică dintre epit!pii Antigenu"ui #i parat!pii Antic!rpi"!r$ Antic!rpi"!r$



Reacţii"e Ac-Ac %reacţii"e ser!"!gice& auReacţii"e Ac-Ac %reacţii"e ser!"!gice& aud!uă direcţii de ap"icare practică:d!uă direcţii de ap"icare practică:

I.I. SSeroidentificare:eroidentificare: identificarea unui identificarea unui Ag Agnecunoscut (tulpini microbiene izolatenecunoscut (tulpini microbiene izolatedin diferite prelevate) cu ajutorul Acdin diferite prelevate) cu ajutorul Ac

specifici cunoscuţi.specifici cunoscuţi. II.II. Serodiagnostic:Serodiagnostic: identificarea unui identificarea unui Ac Ac

necunoscut prin Ag omolog cunoscutnecunoscut prin Ag omolog cunoscut(conţinut în diagnosticuri).(conţinut în diagnosticuri).



IN'ERACŢIUNEA AN'IGEN-AN'ICOR(IN'ERACŢIUNEA AN'IGEN-AN'ICOR(I.I. Faza specificăFaza specifică: are "!c interacţiunea: are "!c interacţiunea

dintre Ag #i Ac speciic c!respun)ăt!r$dintre Ag #i Ac speciic c!respun)ăt!r$Este un en!men rapid* in+i)i,i"* c!munEste un en!men rapid* in+i)i,i"* c!munpentru t!ate reacţii"e Ag-Ac$ ecurge "apentru t!ate reacţii"e Ag-Ac$ ecurge "atemperatura de ./ C* 0n pre)enţa unuitemperatura de ./ C* 0n pre)enţa unuie"ectr!"it %s!"$ i)i!"!gică&$e"ectr!"it %s!"$ i)i!"!gică&$

II.II. Faza nespecifică,Faza nespecifică, +i)i,i"ă a uniunii Ag-Ac*+i)i,i"ă a uniunii Ag-Ac*se maniestă prin precipitare* ag"utinare*se maniestă prin precipitare* ag"utinare*

"i)ă* etc - en!mene determinate de"i)ă* etc - en!mene determinate deanumite c!ndiţii %+a"enţa Ac* dimensiuni"eanumite c!ndiţii %+a"enţa Ac* dimensiuni"e Ag* etc&$ Ag* etc&$



REACŢIA E AGLU'INAREREACŢIA E AGLU'INARE



Reactii de aglutinare activa (directa)Reactii de aglutinare activa (directa) Aspect calitativ Aspect calitativ

Reactia p!ate i eectuată pe "ama deReactia p!ate i eectuată pe "ama destic"ă sau 0n tu,uri$stic"ă sau 0n tu,uri$

ReactiaReactia

pepe a!aa!a



ReactiaReactia in t"#"ri in t"#"ri

Reactia p!)iti+a se maniesta prin !rmareaReactia p!)iti+a se maniesta prin !rmareaunui sediment cu aspect de um,re"aunui sediment cu aspect de um,re"ain+ersata "a undu" tu,uri"!r %peste 12-13in+ersata "a undu" tu,uri"!r %peste 12-13!re& #i c"ariicarea "ic4idu"ui$ Aprecierea!re& #i c"ariicarea "ic4idu"ui$ Aprecierea

intensitaţii reacţiei se eectuea)a dupaintensitaţii reacţiei se eectuea)a dupasistema de 3 p"usuri %5555&$sistema de 3 p"usuri %5555&$Ce"u"e"e neag"utinate se sedimentea)a "aCe"u"e"e neag"utinate se sedimentea)a "a

undu" tu,uri"!r su, !rma de ,ut!n sau ine"undu" tu,uri"!r su, !rma de ,ut!n sau ine"%reactie negati+a&$ Lectura se ace cu !c4iu"%reactie negati+a&$ Lectura se ace cu !c4iu""i,er sau !"!sind ag"utin!sc!pu"$"i,er sau !"!sind ag"utin!sc!pu"$



Aspect cantitativ Aspect cantitativ

Met!da di"utii"!r succesi+eMet!da di"utii"!r succesi+e Iniţia" se eectuea)ă di"uţii succesi+e a"eIniţia" se eectuea)ă di"uţii succesi+e a"eseru"ui %6782* 67622* 67122* etc& 0n care seseru"ui %6782* 67622* 67122* etc& 0n care seintr!duc u"teri!r cantităţi ega"e de Ag$intr!duc u"teri!r cantităţi ega"e de Ag$'erm!stat 9 1 !re* ap!i "a t camerei 6;-12'erm!stat 9 1 !re* ap!i "a t camerei 6;-12!re$!re$ApreciereaAprecierea: cea mai mare di"uţie a seru"ui: cea mai mare di"uţie a seru"ui

0n care se maniestă ag"utinare de ce" puţin 0n care se maniestă ag"utinare de ce" puţin. <5= %555& se numeste. <5= %555& se numeste titr" anticor$iortitr" anticor$iorag"tinan%i (titr" ser""i ag"tinant)ag"tinan%i (titr" ser""i ag"tinant)$$



Reacţiile de aglutinare pasivăReacţiile de aglutinare pasivă(indirectă)(indirectă)

Ag"utinarea pasi+ă c!nstă 0n i>area unui Ag"utinarea pasi+ă c!nstă 0n i>area unui Ag s!"u,i" %sau a" unui Ac& pe un sup!rt Ag s!"u,i" %sau a" unui Ac& pe un sup!rtc!rpuscu"ar inert* care nu inter+ine 0nc!rpuscu"ar inert* care nu inter+ine 0n

reac#ia Ag-Ac$ ?n ca"itate de sup!rt inertreac#ia Ag-Ac$ ?n ca"itate de sup!rt inertp!t ser+i 4ematii"e* particu"e de "ate>*p!t ser+i 4ematii"e* particu"e de "ate>*crista"e de c!"ester!"$ Suspensia decrista"e de c!"ester!"$ Suspensia departicu"e sensi,i"i)ate cu Ag sau Ac esteparticu"e sensi,i"i)ate cu Ag sau Ac este

pusă 0n c!ntact cu seru" imun %respecti+ cupusă 0n c!ntact cu seru" imun %respecti+ cu Ag&* ca #i 0n ca)u" ag"utinării directe$ Ag&* ca #i 0n ca)u" ag"utinării directe$ A+anta@e"e reacţii"!r indirecte: aci"itatea A+anta@e"e reacţii"!r indirecte: aci"itatea

"ecturii #i sensi,i"itatea 0na"tă$"ecturii #i sensi,i"itatea 0na"tă$



Reactia de hemaglutinare indirectaReactia de hemaglutinare indirecta %% pasivă pasivă& 9 RAI 7 RA(& 9 RAI 7 RA(



?n ?n reacţia de "ate>-ag"utinarereacţia de "ate>-ag"utinare Ac sau Ag Ac sau Agsunt i>aţi pe particu"e de "ate>$ Reacţia sesunt i>aţi pe particu"e de "ate>$ Reacţia seeectuea)ă pe "ama de stic"ă$eectuea)ă pe "ama de stic"ă$



Reacţia de C!-ag"utinare$Reacţia de C!-ag"utinare$

La ,a)a acestei reacţii se a"ăLa ,a)a acestei reacţii se a"ă

pr!prietatea unei ,acterii 9pr!prietatea unei ,acterii 9 StaphlococcusStaphlococcusaureusaureus %tu"pina%tu"pina !o"an!o"an& - ce are 0n& - ce are 0nc!mp!nenţa perete"ui ce"u"ar pr!teina A - săc!mp!nenţa perete"ui ce"u"ar pr!teina A - să

i>e)e Ig G prin intermediu" ragmentu"ui Bc$i>e)e Ig G prin intermediu" ragmentu"ui Bc$ Aste" se !rmea)ă diagn!sticuri cu Ac* cu Aste" se !rmea)ă diagn!sticuri cu Ac* cua@ut!ru" car!ra p!t i identiicare Aga@ut!ru" car!ra p!t i identiicare Ag

respecti+e necun!scute$ Reacţia serespecti+e necun!scute$ Reacţia seeectuea)ă pe "amă$eectuea)ă pe "amă$



REACŢIA C!"SREACŢIA C!"S

Sunt p!si,i"e 1 te4nici* 0n uncţie deSunt p!si,i"e 1 te4nici* 0n uncţie depre"e+at:pre"e+at:

6$ directă6$ directă

1$ indirectă1$ indirectă



- #e$nica C%%&'s directă.#e$nica C%%&'s directă. La un n!u-născut seLa un n!u-născut secaută pre)enţa Ac materni anti-R4 i>aţi pe 4ematii*caută pre)enţa Ac materni anti-R4 i>aţi pe 4ematii*dacă mama este R4-$ La aceste 4ematii suspectedacă mama este R4-$ La aceste 4ematii suspecte

se adaugă un ser anti-Ig umană$se adaugă un ser anti-Ig umană$



- #e$nica C%%&'s indirectă.#e$nica C%%&'s indirectă. La ! emeieLa ! emeiegra+idă R4- Ac anti-R4 sunt pre)enţi 0n ser$gra+idă R4- Ac anti-R4 sunt pre)enţi 0n ser$

http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/7/7d/Coombs_test_schematic_fr.png



http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/7/7d/Coombs_test_schematic_fr.png



ReacReacţia de in4i,iţie a 4emag"utinăriiţia de in4i,iţie a 4emag"utinării



ReacReacţia de in4i,iţie a 4emads!r,ţieiţia de in4i,iţie a 4emads!r,ţiei



REAC'IILE E (RECI(I'AREREAC'IILE E (RECI(I'ARE

Imun!precipitarea se maniesta d!arImun!precipitarea se maniesta d!aratunci candatunci cand Ag solubil Ag solubil este amestecat cueste amestecat cu

Ac c!respun)at!r$ Ea p!ate i !,ser+ată Ac c!respun)at!r$ Ea p!ate i !,ser+ată

sau 0n mediu "ic4id* sau s!"id* iind sausau 0n mediu "ic4id* sau s!"id* iind sauca"itati+ă* sau cantitati+ă$ Acestea suntca"itati+ă* sau cantitati+ă$ Acestea suntreactii speciice dar putin sensi,i"e* cereactii speciice dar putin sensi,i"e* ce

necesita cantitati imp!rtante de antic!rpi$necesita cantitati imp!rtante de antic!rpi$



C%ndiţiile de f%r&are a reţelei de precipitareC%ndiţiile de f%r&are a reţelei de precipitare

Ac sa ie ce" putin ,i+a"ent %Ac c!mp"eti& Ac sa ie ce" putin ,i+a"ent %Ac c!mp"eti& (recipitarea ma>ima c!respunde cu )!na de(recipitarea ma>ima c!respunde cu )!na deec4i+a"enţă* unde Ac si Ag sunt in rap!rt !ptima"ec4i+a"enţă* unde Ac si Ag sunt in rap!rt !ptima"de c!ncentraţie* ce permite precipitarea tutur!rde c!ncentraţie* ce permite precipitarea tutur!rm!"ecu"e"!r de Ac cu Ag c!respun)at!r$ ?n e>cesm!"ecu"e"!r de Ac cu Ag c!respun)at!r$ ?n e>cesde Ag sau de Ac precipitatu" nu se !rmea)ă$de Ag sau de Ac precipitatu" nu se !rmea)ă$

tilizaretilizare 0n medicina "ega"a %determinarea 0n medicina "ega"a %determinareaapartenenţei de specie a dierit!r pr!teine:apartenenţei de specie a dierit!r pr!teine:snge* spermă* etc&* 0n igiena a"imentarăsnge* spermă* etc&* 0n igiena a"imentară

%depistarea a"siicării a"imente"!r&* 0n%depistarea a"siicării a"imente"!r&* 0ndiagn!sticu" ma"adii"!r inecti!ase* etc$diagn!sticu" ma"adii"!r inecti!ase* etc$



*RECI*I#AREA I+ !EI -ICI*RECI*I#AREA I+ !EI -ICIReactia de $reci$itare inearaReactia de $reci$itare ineara

Avantajul metodei Avantajul metodei 9 rapiditatea 9 rapiditatea #i simp"icitatea$#i simp"icitatea$

#tilizarea practica#tilizarea practica: identiicarea: identiicareapete"!r de sange* depistarea a"siicari"!r pete"!r de sange* depistarea a"siicari"!r pr!duse"!r a"imentare* depistareapr!duse"!r a"imentare* depistarea

antigenu"ui p!"i)a4aridic a" agentu"uiantigenu"ui p!"i)a4aridic a" agentu"uiantra>u"ui 0n !m!genat de !rgane %reacţiaantra>u"ui 0n !m!genat de !rgane %reacţia Asc!"i&$ Asc!"i&$



*RECI*I#AREA /+ !EI S-I (/+*RECI*I#AREA /+ !EI S-I (/+0E-)0E-)

?n aceste reacţii Ag #i Ac diu)ea)ă ?n aceste reacţii Ag #i Ac diu)ea)ăunu" spre a"tu" prin ge"!)ă #i 0n )!na deunu" spre a"tu" prin ge"!)ă #i 0n )!na de

c!ncentraţie !ptimă a acest!r d!uăc!ncentraţie !ptimă a acest!r d!uăreacti+e se pr!duce precipitarea su,reacti+e se pr!duce precipitarea su,!rmă de "inii a",e-cenu#ii$ acă e>istă!rmă de "inii a",e-cenu#ii$ acă e>istămai mu"te sisteme Ag-Ac* se +!r !rma "iniimai mu"te sisteme Ag-Ac* se +!r !rma "inii

de precipitare distincte$de precipitare distincte$



I&un%difuzie du'lăI&un%difuzie du'lă(te$nicile uc$terl%n1 2i Ele3)(te$nicile uc$terl%n1 2i Ele3)

Se ac!peră cu ge"!)ă ! p"acă de stic"ă sau se t!arnă ge"!)aSe ac!peră cu ge"!)ă ! p"acă de stic"ă sau se t!arnă ge"!)a 0n cutia (etri$ 0n cutia (etri$ ?n te4nica Ouc4ter"!nD Ag #i Ac diu)ea)ă din g!deuri"e ?n te4nica Ouc4ter"!nD Ag #i Ac diu)ea)ă din g!deuri"e

situate "a ! distanţă de 68 mm unu" de a"tu"$situate "a ! distanţă de 68 mm unu" de a"tu"$

?n te4nica E"e ce"e 1 reacti+e diu)ea)ă din ,en)i"e de ?n te4nica E"e ce"e 1 reacti+e diu)ea)ă din ,en)i"e de4rtie p"asate pe supraaţa ge"!)ei$4rtie p"asate pe supraaţa ge"!)ei$

M!"ecu"e"e diu)ea)ă 0n ge" 0n uncţie de greutatea "!r #iM!"ecu"e"e diu)ea)ă 0n ge" 0n uncţie de greutatea "!r #i!rmea)ă!rmea)ă linii de precipitarelinii de precipitare pentru iecare sistem Ag-Ac cepentru iecare sistem Ag-Ac cec!respund 0n )!na "!r de ec4i+a"enţă$ acă d!uă Ag suntc!respund 0n )!na "!r de ec4i+a"enţă$ acă d!uă Ag sunt

identice* "inii"e "!r se unesc* dacă sunt dierite 9 seidentice* "inii"e "!r se unesc* dacă sunt dierite 9 seintersectea)ă$intersectea)ă$ &tii'area&tii'area 9 determinarea t!>ine"!r 9 determinarea t!>ine"!r%t!>igene)a&* antit!>ine"!r* Ag pr!teice%t!>igene)a&* antit!>ine"!r* Ag pr!teice



REACŢII E CI#-I45 I!+5REACŢII E CI#-I45 I!+5 %cu participarea%cu participareac!mp"ementu"ui&c!mp"ementu"ui&

Reacţia de 'acteri%liză (R"-)Reacţia de 'acteri%liză (R"-)- Ag 9 suspensie de ,acterii +ii %+i,ri!ni*- Ag 9 suspensie de ,acterii +ii %+i,ri!ni*

"ept!spire$$$&"ept!spire$$$&- Ac 9 seru" imun sau seru" ,!"na+u"ui- Ac 9 seru" imun sau seru" ,!"na+u"ui

- C!mp"ement- C!mp"ement



R"-R"- in itroin itro- Se eectuea)ă di"uţia succesi+ă a seru"uiSe eectuea)ă di"uţia succesi+ă a seru"ui-

Se ada!gă suspensie micr!,iană +ieSe ada!gă suspensie micr!,iană +ie- Se ada!gă c!mp"ementSe ada!gă c!mp"ement%mart!r: Ag5ser i)i!"!gic5C&%mart!r: Ag5ser i)i!"!gic5C&- Incu,are 1 4 "a ./CIncu,are 1 4 "a ./C- Re0nsămnţare pe cutii cu ge"!)ă cte 2*6 m" dinRe0nsămnţare pe cutii cu ge"!)ă cte 2*6 m" din

iecare di"uţie %134 9 ./ C&iecare di"uţie %134 9 ./ C&- $ectura$ectura 9 se c!mpară nr c!"!nii"!r crescute din 9 se c!mpară nr c!"!nii"!r crescute din

mart!r #i pr!,e"e studiatemart!r #i pr!,e"e studiate- %itrul %itrul 9 cea mai mare di"uţie a seru"ui 0n care au !st 9 cea mai mare di"uţie a seru"ui 0n care au !st"i)ate ce" puţin 82F din ce"u"e"i)ate ce" puţin 82F din ce"u"e



R"-R"- in ioin io- Amestecu" dintre Ag #i Ac se in!cu"ea)ă intra- Amestecu" dintre Ag #i Ac se in!cu"ea)ă intra-

perit!nea" "a anima"e de "a,!rat!r %e>$: #!areciperit!nea" "a anima"e de "a,!rat!r %e>$: #!arecia",i&a",i&- (este iecare 62 min* timp de ! !ră* se e>trage(este iecare 62 min* timp de ! !ră* se e>trage

"ic4idu" perit!nea"* se pregăte#te un preparat nati+"ic4idu" perit!nea"* se pregăte#te un preparat nati+

#i se e>aminea)ă pe !nd negru sau cu c!ntrast de#i se e>aminea)ă pe !nd negru sau cu c!ntrast dea)ă$a)ă$

- Re)u"tat p!)iti+ 9 număru" ,acterii"!r scade treptatRe)u"tat p!)iti+ 9 număru" ,acterii"!r scade treptatpnă "a dispariţie$pnă "a dispariţie$

#tilizarea R&$#tilizarea R&$ 9 diagn!sticu" 4!"erei %RL&* 9 diagn!sticu" 4!"erei %RL&*"ept!spir!)e"!r %RALL&"ept!spir!)e"!r %RALL&



REACŢIA E FI6ARE A C!*-E!E+#-IREACŢIA E FI6ARE A C!*-E!E+#-I(RFC)(RFC)

Este ! reacţie c!mp"e>ă* c!nstituită din 1 sistemeEste ! reacţie c!mp"e>ă* c!nstituită din 1 sisteme Ag-Ac #i cu participarea C$ Ag-Ac #i cu participarea C$ ?n RBC participă Ig capa,i"e să i>e)e C 9 IgM #i ?n RBC participă Ig capa,i"e să i>e)e C 9 IgM #i

IgG$IgG$

RBC se uti"i)ea)ă 0n diagn!sticu" +ir!)e"!r*RBC se uti"i)ea)ă 0n diagn!sticu" +ir!)e"!r*inecţii"!r ,acteriene* etcinecţii"!r ,acteriene* etc '!ate c!mp!nente"e RBC sunt uti"i)ate 0n ace"a#i'!ate c!mp!nente"e RBC sunt uti"i)ate 0n ace"a#i

+!"um iind titrate 0n prea"a,i" pentru aprecierea+!"um iind titrate 0n prea"a,i" pentru aprecierea

d!)e"!r de "ucru$d!)e"!r de "ucru$ Reacţia este 0ns!ţită de mart!ri ai tutur!rReacţia este 0ns!ţită de mart!ri ai tutur!r

c!mp!nenţi"!r c!mp!nenţi"!r



Reacţia se eectuea)ă 0n 1 etape uti"i)ndReacţia se eectuea)ă 0n 1 etape uti"i)nd1 sisteme$1 sisteme$

I etapăI etapă 9 9 Sistemul de bazăSistemul de bază este c!nstituiteste c!nstituitdindin Ag6 Ag6 %diagn!sticuri sau Ag%diagn!sticuri sau Agnecun!scute&*necun!scute&* Ac6 % Ac6 %seru" ,!"na+u"ui sauseru" ,!"na+u"ui sau

seru" imun& #iseru" imun& #i c!mp"ementc!mp"ement 0n d!)a de 0n d!)a de"ucru$ Amestecu" este incu,at 64 "a ./ C"ucru$ Amestecu" este incu,at 64 "a ./ Csau menţinut 6H-6; !re "a 3 C$ acă Acsau menţinut 6H-6; !re "a 3 C$ acă Acse c!m,ină cu Ag !m!"!g +a a+ea "!c #ise c!m,ină cu Ag !m!"!g +a a+ea "!c #i

i>area C %eect in+i)i,i"&$i>area C %eect in+i)i,i"&$



II etapăII etapă 9 "a sistemu" de ,a)ă se ada!gă 9 "a sistemu" de ,a)ă se ada!gă sistemulsistemulindicator (hemolitic)'indicator (hemolitic)' c!nstituit din 4ematii dec!nstituit din 4ematii de

,er,ec,er,ec %Ag1&%Ag1& c!m,inate cu Ac speciicic!m,inate cu Ac speciici %Ac1&$%Ac1&$ (este 64 incu,are "a ./ C reacţia este(este 64 incu,are "a ./ C reacţia esteterminată$terminată$

valuarea rezultatelor valuarea rezultatelor 9 dacă c!mp"ementu" a !st 9 dacă c!mp"ementu" a !st

i>at de primu" sistem Ag-Aci>at de primu" sistem Ag-Ac 4em!"i)a nu se4em!"i)a nu se!,ser+ă %re)u"tat p!)iti+&$!,ser+ă %re)u"tat p!)iti+&$ acă Ag6 nuacă Ag6 nuc!respunde cu Ac6* c!mp"ementu" rămnec!respunde cu Ac6* c!mp"ementu" rămnedisp!ni,i" pentru i>are pe sistemu" indicat!rdisp!ni,i" pentru i>are pe sistemu" indicat!r

Ag1-Ac1* pr!+!cnd Ag1-Ac1* pr!+!cnd 4em!"i)a %re)u"tat negati+&4em!"i)a %re)u"tat negati+&



C!mp"ement Bi>ati!nC!mp"ement Bi>ati!n

Ag

Patient’s

serum

Ag No Ag

Ag



#e$nici ser%l%gice cu utilizarea Ac#e$nici ser%l%gice cu utilizarea Ac&arcaţi&arcaţi

?n une"e ca)uri este imp!si,i" de a ?n une"e ca)uri este imp!si,i" de adetecta ! reacţie Ag-Ac: unii Ac nudetecta ! reacţie Ag-Ac: unii Ac nuprecipitea)ă* a"ţii nici nu precipitea)ă* nici nuprecipitea)ă* a"ţii nici nu precipitea)ă* nici nuag"utinea)ă* e>istă c!mp"e>e Ag-Ac care nuag"utinea)ă* e>istă c!mp"e>e Ag-Ac care nui>ea)ă C$ ?n aceste ca)uri p!t i uti"i)aţi Aci>ea)ă C$ ?n aceste ca)uri p!t i uti"i)aţi Acmarcaţi pentru a +i)ua"i)a Ag respecti+$marcaţi pentru a +i)ua"i)a Ag respecti+$C!n@ugarea Ac cu marcanţi nu aectea)ăC!n@ugarea Ac cu marcanţi nu aectea)ă

pr!prietăţi"e "!r imun!"!gice$pr!prietăţi"e "!r imun!"!gice$ Aceste reacţii se m!ntea)ă pe sup!rt Aceste reacţii se m!ntea)ă pe sup!rts!"id %"amă* p"ăci din p"astic&s!"id %"amă* p"ăci din p"astic&



arcanţii utilizaţi uzual*arcanţii utilizaţi uzual*- B"u!r!cr!miB"u!r!cr!mi %r!damina* "u!resceina&* care%r!damina* "u!resceina&* care

emit respecti+ ! "umină r!#u-!ran@ sau +erde-emit respecti+ ! "umină r!#u-!ran@ sau +erde-ga",enă "a tratarea "!r cu ra)e U %ga",enă "a tratarea "!r cu ra)e U %ReacţiaReacţiade Imun!-B"u!rescenţăde Imun!-B"u!rescenţă&&

-

En)imeEn)ime

%!sata)a a"ca"ină* per!>ida)a&*%!sata)a a"ca"ină* per!>ida)a&*

capa,i"e să m!diice cu"!area unui su,stratcapa,i"e să m!diice cu"!area unui su,strat%%Reacţia Imun!-en)imaticăReacţia Imun!-en)imatică&&

- Radi!-i)!t!piRadi!-i)!t!pi %%618618 sau sau ..&* care emit&* care emit

respecti+ ra)e gamma #i ,eta %respecti+ ra)e gamma #i ,eta % Ana"i)a Ana"i)aRadi!-ImunăRadi!-Imună&&



Reacţia de i&un%flu%rescenţă (RIF, reacţiaReacţia de i&un%flu%rescenţă (RIF, reacţiaC+S)C+S)



Reacţia I&un%7Enzi&atică (RIE, E-ISAReacţia I&un%7Enzi&atică (RIE, E-ISA --nzmenzme$in+ed ,mmunosorbent Assas).$in+ed ,mmunosorbent Assas).

RIE directă (&et%da sand8ic$).RIE directă (&et%da sand8ic$). #tilizată doar în#tilizată doar însero-identificarea Ag.sero-identificarea Ag. ?n g!deuri"e din p"aca de ?n g!deuri"e din p"aca dep!"istiren 0n care sunt i>aţip!"istiren 0n care sunt i>aţi Ac cun!scuţi Ac cun!scuţi se t!arnăse t!arnăs!"uţia des!"uţia de Ag necun!scut Ag necun!scut$ Se incu,ea)ă 64$ upă !$ Se incu,ea)ă 64$ upă !spă"are minuţi!asă a g!deuri"!r se ada!găspă"are minuţi!asă a g!deuri"!r se ada!gă Ac marcaţi Ac marcaţi

cu en)imecu en)ime* care se i>ea)ă pe epit!pii "i,eri ai Ag* care se i>ea)ă pe epit!pii "i,eri ai Agp!"i+a"ent$ upă incu,are de .2 min-64 se spa"ă iară#ip!"i+a"ent$ upă incu,are de .2 min-64 se spa"ă iară#ig!deuri"e$ (re)enţa c!mp"e>u"uig!deuri"e$ (re)enţa c!mp"e>u"ui Ac-Ag-Ac-marcat Ac-Ag-Ac-marcat sesedepistea)ă cu a@ut!ru"depistea)ă cu a@ut!ru" su,stratu"ui cr!m!gensu,stratu"ui cr!m!gen

%su,stanţă iniţia" inc!"!ră* dar care se c!"!rea)ă su,%su,stanţă iniţia" inc!"!ră* dar care se c!"!rea)ă su,acţiunea en)imei* e>$ apa !>igenata siacţiunea en)imei* e>$ apa !>igenata si!rt4!eni"endiamina&$!rt4!eni"endiamina&$



RIE indirectă.RIE indirectă. #tilizată în serodiagnostic #tilizată în serodiagnostic $$ Ag Agcun!scutcun!scut este i>at "a undu" g!deuri"!r$este i>at "a undu" g!deuri"!r$ Ac %seru" Ac %seru"testat&testat& se 0ntr!duce 0n g!deu* după 64 se spa"ăse 0ntr!duce 0n g!deu* după 64 se spa"ăt!tu" #i se ada!găt!tu" #i se ada!gă "igandu" marcat cu en)imă"igandu" marcat cu en)imă %anti-Ig sau pr!teina A cup"ate cu en)imă&$ Acest%anti-Ig sau pr!teina A cup"ate cu en)imă&$ Acest"igand se i>ea)ă pe Ac testaţi$ Se ada!gă ap!i"igand se i>ea)ă pe Ac testaţi$ Se ada!gă ap!isu,stratu" cr!m!gensu,stratu" cr!m!gen$ Cantitatea de Ac se$ Cantitatea de Ac semăs!ară după densitatea !ptică a "ic4idu"ui dinmăs!ară după densitatea !ptică a "ic4idu"ui ding!deuri$g!deuri$



http://3.bp.blogspot.com/_G_C20R1rjUI/SYcQus-r-RI/AAAAAAAAACs/rii3A_JWZuQ/s1600-h/ELISA1.jpg



- #e$nica i&un%'l%t (8estern 'l%t)#e$nica i&un%'l%t (8estern 'l%t) permite permiteidentificarea Ag dintr-un amestec identificarea Ag dintr-un amestec $$I etapăI etapă 9 e"ectr!!re)a 0n ge" a pr!,ei de Ag 9 e"ectr!!re)a 0n ge" a pr!,ei de AgII etapăII etapă 9 transeru" e"ectric a" Ag pe mem,rana 9 transeru" e"ectric a" Ag pe mem,ranade nitr!ce"u"!)ăde nitr!ce"u"!)ăIII etapăIII etapă 9 pe mem,rană sunt ap"icaţi succesi+ 9 pe mem,rană sunt ap"icaţi succesi+

Ac diri@aţi c!ntra Ag* ap!i c!n@ugatu" marcat cu Ac diri@aţi c!ntra Ag* ap!i c!n@ugatu" marcat cuen)imă* care permite depistarea Ac i>aţi$ upăen)imă* care permite depistarea Ac i>aţi$ upă! spă"are se ada!gă su,stratu" cr!m!gen$! spă"are se ada!gă su,stratu" cr!m!gen$Biecare c!mp"e> Ag-Ac !rmea)ă )!ne c!"!rateBiecare c!mp"e> Ag-Ac !rmea)ă )!ne c!"!rate

distincte$distincte$ #tilizare#tilizare: depistarea Ac anti-I*: depistarea Ac anti-I*caracteri)area Ac m!n!c"!na"i$$$caracteri)area Ac m!n!c"!na"i$$$



Analiza radi%i&ună (ARI)Analiza radi%i&ună (ARI)(rincipiu" este identic cu ce" a" RIE(rincipiu" este identic cu ce" a" RIE

Ag Ag se i>ea)ă "a undu" g!deuri"!r dinse i>ea)ă "a undu" g!deuri"!r dinp"aca de p"astic$ Se ada!găp"aca de p"astic$ Se ada!gă Ac testaţi Ac testaţi care se +!r c!m,ina cu Ag !m!"!g$ upăcare se +!r c!m,ina cu Ag !m!"!g$ upă

spă"area g!deuri"!r* se adaugă unspă"area g!deuri"!r* se adaugă un "igand"igandradi!marcatradi!marcat %anti-Ig&$ upă e"iminarea%anti-Ig&$ upă e"iminareae>cesu"ui de i)!t!pi prin spă"are* see>cesu"ui de i)!t!pi prin spă"are* semăs!ară radi!-acti+itatea: ea estemăs!ară radi!-acti+itatea: ea estepr!p!rţi!na"ă cu c!ncentraţia Ac d!)aţi$pr!p!rţi!na"ă cu c!ncentraţia Ac d!)aţi$



Reacţia de neutralizare (R+)Reacţia de neutralizare (R+) !rmarea!rmareac!mp"e>e"!r Ag-Ac duce "a neutra"i)areac!mp"e>e"!r Ag-Ac duce "a neutra"i)areaeectu"ui ,i!"!gic a" Ag %neutra"i)areaeectu"ui ,i!"!gic a" Ag %neutra"i)areat!>ine"!r* en)ime"!r* +irusuri"!r&$t!>ine"!r* en)ime"!r* +irusuri"!r&$

Reacţia de i&%'ilizareReacţia de i&%'ilizare Unii antic!rpi anti-,acterieni p!tUnii antic!rpi anti-,acterieni p!t

pr!+!ca im!,i"i)area ,acterii"!r m!,i"epr!+!ca im!,i"i)area ,acterii"!r m!,i"e

%+i,ri!ni* spir!c4ete&%+i,ri!ni* spir!c4ete&

reactiile serologice2015

Documents